Валидация методик папаверина гидрохлорида в таблетках

Размещено на http://www.allbest.ru/

Пятигорский филиал ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный

медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Кафедра фармацевтической химии

Курсовая работа по теме:

«Валидация методик папаверина гидрохлорида в таблетках»

Исполнитель : студентка очного отделения

5 курса 26 группы

Коробка Анастасия Сергеевна

Руководитель:

Ст. преподаватель: Саморядова Анна Борисовна

г. Пятигорск 2013



Содержание

1. Реферативная часть

1.1 Цели и задачи исследования

1.2 Физико-химические свойства папаверина гидрохлорида

1.3 Получение папаверина гидрохлорида

1.4 Реакции на подлинность папаверина гидрохлорида

1.5 Количественное определение папаверина гидрохлорида

1.6 Применение, хранение таблеток папаверина гидрохлорида

2. Валидационная оценка методик качественного и количественного определения папаверина гидрохлорида

2.1 Валидационная оценка методик качественного и количественного определения папаверина гидрохлорида по показателю специфичность

2.2 Валидационная оценка методик качественного и количественного определения папаверина гидрохлорида по показателю линейность

2.3 Валидационная оценка методик качественного и количественного определения папаверина гидрохлорида по показателю прецинзионность

2.4 Валидационная оценка методик качественного и количественного определения папаверина гидрохлорида по показателю правильность

Вывод

Список литературы



1. Реферативная часть

1.1 Цели и задачи исследования

Целью исследования является изучение методов анализа папаверина гидрохлорида в таблетках, валидационная оценка методик качественного и количественного анализа папаверина гидрохлорида в таблетках.

Для осуществления поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

Обосновать выбор методик анализа лекарственного средства

Использовать валидационные характеристики для оценки используемых методов анализа

Доказать валидность методик идентификации и количественного определения лекарственного средства.

Для того чтобы аналитическая методика заняла достойное место в системе обеспечения качества, соответствовала своему назначению, то есть гарантировала достоверные и точные результаты анализа, предусмотрена процедура валидации аналитических методик. Необходимость валидации всех аналитических методик не вызывает сомнений -- это один из элементов валидации всего процесса производства лекарств. Кроме этого, с практической точки зрения, валидация аналитических методик дает ряд существенных полезных эффектов.

Во-первых, при проведении валидации в процессе разработки новых методик можно своевременно выявить их недостатки и на ранних стадиях существенно улучшить методику. Во-вторых, при грамотно и качественно выполненной работе появляется уверенность и в методике, и в качестве анализируемого препарата. В третьих, в процессе валидации обязательно принимают практическое участие различные аналитические лаборатории. Практика валидационных экспериментов дает понимание сути методики и осознание необходимости строгого соблюдения ее параметров. В результате, при последующей эксплуатации валидированной методики значительно снижается вероятность ошибок.

Для валидационных исследований нужно использовать достаточно изученные стандартные материалы с документированной чистотой. Необходимая степень чистоты зависит от предназначенной цели.

В соответствии с имеющимся документом и ради четкости в данном документе различные валидационные характеристики рассматриваются в разных разделах. Композиция этих разделов отражает процесс, благодаря которому аналитическую методику можно разработать и оценить.

На практике можно сконструировать экспериментальную работу таким образом, чтобы соответствующие валидационные характеристики можно было бы рассматривать одновременно, получая полное, всестороннее понимание возможностей аналитической методики, например: специфичность, линейность, диапазон применения, правильность и точность.

В данной курсовой работе рассмотрены и изучены аналитические методики анализа папаверина гидрохлорида таблеток по 0.2 спектрофотометрическим и алкалиметрическим методоми по следующим показателям: линейность, правильность, прецизионность.

1.2 Физико-химические свойства папаверина гидрохлорида

PAPAVERINI HYDROCHLORIDUM

1-[(3,4-Диметоксифенил)метил]-6,7-диметоксиизохинолин

Папаверина гидрохлорид -- белый кристаллический порошок без запаха, слегка горьковатого вкуса. Медленно растворим в воде (1:40), мало -- в этаноле, растворим в хлороформе, практически нерастворим в эфире.[1]

1.3 Получение папаверина гидрохлорида

В настоящее время папаверина гидрохлорид получают исключительно синтетическим путем. Папаверин синтезируют, исходя из 1,2-диметоксибензола,который сначала хлорметилируют, а затем превращают в арилацетонитрил(замещением атома хлора на циангруппу).[8]

При гидролизе арилацетонитрила получают арилуксусную кислоту, а при гидрировании - арилэтиламин.

При нагревании арилэтиламина и арилуксусной кислоты образуется амид, циклизация которого под действием хлороксида фосфора приводит к образованию дигидропапаверина:

Осуществляя каталитическое дегидрирование дигидропапаверина, получают папаверин:

1.4 Реакции на подлинность папаверина гидрохлорида

1. Реакция на Сl-

CI- + AgNO3 > AgCIv(белый) + NO3-

2. С конц. HNO3 в фарфоровой чашке - желтое окрашивание, переходящее в оранжевое при нагревании.

3. С конц. H2SO4 при нагревании - фиолетовое окрашивание.

4. Определяют t° пл. основания папаверина (145°-147°С) после осаждения ацетатом натрия.

5. С раствором молибдата аммония в конц. H2SO4 ( реактив Фреде)- зеленое окрашивание.

6. При его обработке уксусним ангедридом и конц. H2SO4 после нагревания на водяной бане появляется желтое окрашивание с зеленой флуоресценцией.

7. С KmnO4 в кислой среде дает флуоресценцию голубым светом.

8. Бромная вода выделяет из раствора желтый осадок бромпапаверина гидробромида (C20H20O4NBr•HBr).

9. Спиртовой раствор йода - темно-красные кристаллы гидроиодида дииодпапаверина (C20H19O4N•I2•HI).

10. При взаимодействии с пикриновой кислотой - желтый осадок (пикрат).

11. Осадки образуются с реактивами Драгендорфа и Майера.

12. С реактивом Марки - сначала образуется красное окрашивание, затем желтое и ярко-оранжевое. Под действием бромной воды и аммиака появляется фиолетовый осадок, который в спирте дает фиолетово-красное окрашивание.

При этом образуется сульфат метиленбиспапаверина, который затем окисляется:[8]

+ HCOH + H2SO4(к) >

v + 2HCI

метиленбиспапаверина сульфат



1.5 Количественное определение папаверина гидрохлорида

Количественное определение папаверина гидрохлорида проводится в среде уксусного ангидрида и муравьиной кислоты, титрант 0,1 М раствор кислоты хлорной. Метод неводного титрования в смеси муравьиной кислоты и уксусного ангидрида (индикатор кристаллический фиолетовый).

Метод нейтрализации в спиртовой среде (индикатор ФФ).

Аргентометрическим методом по CI- .

Экстракционно-фотометрическое определение (основано на изменении светопоглощения комплексного соединения с изотиоцианатом аммония и хлоридом железа (III).

Спектрофотометрический метод (УФ-спектр в области 270-350 нм раствора папаверина гидрохлорида имеет два максимума в 0.01 М растворе HCI кислоты (285 и 309 нм), а в области 230-270 нм-один максимум при 251 нм (в том же растворителе) и в этаноле-четыре максимума поглощения (238, 280, 315, 325 нм).

Экстракционно-титриметрическое определение с использованием в качестве титранта лаурилсульфат натрия.[8]

1.6 Применение, хранение таблеток папаверина гидрохлорида

Папаверина гидрохлорид - комбинированный антигипертензивный и спазмолитический препарат с анальгезирующим действием. Активное вещество папаверин оказывает антигипертензивное, анальгезирующее и противосудорожное действие. Применение папаверина гидрохлорида способствует снижению тонуса гладких мышц внутренних органов мочевыделительной, дыхательной, половой системы и сосудов, расширению артерий и увеличению кровотока.

Папаверина гидрохлорид выпускают в нескольких лекарственных формах:

-Раствор для инъекций, в ампулах по 2 мл, содержащих 20 мг активного вещества;

-Суппозитории ректальные, содержащие 20 мг активного вещества;

-Таблетки по 0,2 папаверина гидрохлорида.

Хранение: относится к спазмолитическим препаратам рецептурного отпуска. Срок хранения таблеток - 5 лет, раствора для инъекций - 24 месяца.[2]

Вывод

Проведя анализ папаверина гидрохлорида, указанными методами, по их результатам можно сделать вывод, о том, что данное вещество соответствует требованиям, предъявляемым к нему.



2. Валидационная оценка методик качественного и количественного определения папаверина гидрохлорида

2.1 Валидационная оценка методик качественного и количественного определения папаверина гидрохлорида в таблетках по показателю «Специфичность»

Под специфичностью методики следует понимать способность достоверно определять анализируемое соединение в присутствии других компонентов образца - лекарственных веществ, вспомогательных веществ и посторонних примесей (включая потенциально возможные).

Приготовили 3 модельные смеси:

модельная смесь (содержит наполнитель до 0,1 + папаверина гидрохлорид 0,01)

модельная смесь (содержит только папаверина гидрохлорид 0,01)

модельная смесь (содержит только наполнитель 0,1 )

Подлинность

Реакция с концентрированной серной кислотой

Методика: К каждой из приготовленной модельной смеси добавили от 1 до 3 капель концентрированной серной кислоты. Наблюдали характерное окрашивание в 1-ой и 2-ой модельной смеси - оранжево-красное окрашивание; в 3-ей модельной смеси характерного окрашивания не наблюдали. папаверин гидрохлорид валидационный таблетка

Вывод: реакция специфична для папаверина гидрохлорида.

Количественное определение

Методика: К модельной смеси папаверина гидрохлорида добавляли 5 мл, нейтролизованного по фенолфталеину, спирта этилового95% и титровали 0,1 М раствором гидроксида натрия до розового окрашивания. 1 мл 0,1 М раствора гидроксида натрия соответствует 37,59 папаверина гидрохлорида.

Вывод: В ходе выполнения лабораторной работы выяснили ,что алкалиметрия является специфическим методом количественного определения для папаверина гидрохлорида.

2.2 Валидационная оценка методик качественного и количественного определения папаверина гидрохлорида по показателю «Линейность»

Линейность методики - это наличие прямой пропорциональной зависимости аналитического сигнала от концентрации или количества определяемого вещества в анализируемой пробе.

Линейность выражается уравнением у = ax + b. Это уравнение называют линейной регрессией. Параметр b градуировочной функции характеризует отрезок, отсекаемый на оси ординат и соответствующий значению холостого опыта, а коэффициент a характеризует наклон градуировочной кривой и является отражением чувствительности методики.

Методика: В мерную колбу вместимостью 100 мл вносили 0,05 г СО папаверина гидрохлорида растворяли в 50 мл 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной и доводили тем же растворителем до метки (раствор А).

В мерные колбы вместимостью 100 мл последовательно вносили 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; 5,0 мл раствора А и доводили до метки тем же растворителем. Получали растворы с концентрацией 0,0005%, 0,001%, 0,0015%, 0,002%; 0,0025%.Измеряли оптическую плотность каждого раствора при длине волны 309 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Данные заносят в таблицу №1. Раствор сравнения - 0,1 М раствор кислоты хлористоводородной.

Основной характеристикой линейности является коэффициент корреляции -- мера взаимосвязи измеренных явлений. Коэффициент корреляции (обозначается «r») рассчитывается по специальной формуле:



(1)

Для аналитических целей можно использовать только ту методику, для которой зависимость функции от аргумента коррелируется с коэффициентом r, который должен быть ?0,99.

Для аналитических целей можно использовать только ту методику, для которой зависимость функции от аргумента коррелируется с коэффициентом R, который должен быть от 0,99 до 1,01.

Таблица1 - Результаты измерения оптической плотности

Объем раствора А, мл	1,0	2,0	3,0	4,0	5,0
Концентрация полученного раствора в %	0,005	0,0010	0,0015	0,0020	0,0025
Оптическая плотность	0,124	0,206	0,316	0,410	0,531

Строили градуировочный график зависимости оптической плотности от концентрации. Расчет коэффициентов градуировочного графика проводят по формулам (2); (3) и данным таблицы № 1:

(2) (3)

Рисунок 1 - Градуировочный график зависимости оптической плотности от концентрации папаверина

Как следует из представленного графика, все экспериментальные точки находятся вблизи линии тренда (прямой линии). По полученным данным рассчитывали коэффициенты уравнения линейности и коэффициент корреляции.

У= 0,216х - 0,0172

r=0,991

Вывод: Для данной выборки значение коэффициента корреляции составило 0,991. Это позволяет утверждать о наличии достаточно жесткой линейной зависимости оптической плотности от концентрации.

2.3 Валидационная оценка методик качественного и количественного пределения папаверина гидрохлорида по показателю «Прецизионность»

Приготовили раствор А2 модельной смеси.

Растворы Б1, Б2, Б3 . В три мерные колбы вместимостью 50 мл вносили по 2,0 мл раствора А2 и доводили до метки 0,1 М раствором кислоты хлористоводородной.

Растворы Б4, Б5, Б6 . В три мерные колбы вместимостью 50 мл вносили по 2,5 мл раствора Б2 и доводили до метки 0,1 М раствором кислоты хлористоводородной.

Растворы Б7, Б8, Б9 . В три мерные колбы вместимостью 50 мл вносили по 5,0 мл раствора Б2 и доводили до метки 0,1 М раствором кислоты хлористоводородной.

Измерили оптическую плотность каждого из 9 приготовленных растворов на спектрофотометре при длине волны 309 нм в кювете с толщиной слоя 1 см .Параллельно измеряли оптическую плотность раствора СО папаверина гидрохлорида.

Расчет содержания папаверина гидрохлорида в граммах в 1 таблетке проводили по формуле:

(4) ,

где: Ах - оптическая плотность исследуемого раствора;

Ао - оптическая плотность раствора СО папаверина гидрохлорида;

ах - масса навески исследуемого образца модельной смеси;

0,00002 - содержание папаверина гидрохлорида в г в 1 мл раствора СО;

Р - средняя масса 1 таблетки, г;

Va - объем аликвоты раствора Б, взятый для разведения, мл.

Результаты заносят в таблицу № 2 и рассчитывают стандартное (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).[7]

Таблица 2 - Результаты установления прецизионности методики определения папаверина гидрохлорида

№	Взято папаверина г/100 мл	Объем Титранта мл	Найдено папаверина, %		(?x-x)І	Метрологич еские характер истики
1	0,041	19,9	100,8	-0,02	0	SD=0,4599 RSD=0,45
2	0,041	19,8	99,4	0,76	0,58
3	0,041	20	100,6	-0,28	0,08
4	0,006	26,5	99,6	0,36	0,13
5	0,006	26,6	99,9	0,06	0
6	0,006	26,8	100,1	-0,74	0,55
7	0,075	33,3	100,14	-0,18	0,03
8	0,075	33,2	99,84	0,12	0,01
9	0,075	33,3	100,1	-0,14	0,02
У			?Х =99,93		1,7

Вывод: Из данных таблицы следует, что величина относительного стандартного отклонения методики титриметрического определения папаверина составила 0,45%, что является удовлетворительным для данного метода.

2.4 Валидационная оценка методик качественного и количественного определения папаверина гидрохлорида по показателю «Правильность»

Приготовили три раствора модельной смеси. Данные таблицы №3 .

Таблица 3 - Нормы для приготовления модельных смесей

Модельная смесь	№ 1	№ 2	№ 3
Папаверина гидрохлорида, г	0,03	0,04	0,05
Наполнителей (натрия хлорида), г	0,30	0,29	0,28
Общая масса модельной смеси	0,33	0,33	0,33
Раствора кислоты хлористоводородной 0,1 М, мл	100	100	100

Методика: в ступке растирали указанное количество наполнителей, затем добавляли необходимое количество папаверина гидрохлорида, тщательно перемешивали.

Раствор А1. Точную навеску (0,3300 г) модельно смеси № 1 помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяли 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной и доводил этим растворителем до метки.

Раствор А2. Точную навеску модельной смеси № 2 (0,3300 г) помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяли в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной и доводили этим растворителем до метки.

Раствор А3. Точную навеску модельной смеси № 3 (0,3300 г) помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяли в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной и доводили этим растворителем до метки.

Растворы Б1, Б2, Б3 . В три мерные колбы вместимостью 50 мл вносили по 2,5 мл раствора А1 и доводили до метки 0,1 М раствором кислоты хлористоводородной.

Растворы В4, Б5, Б6 . В три мерные колбы вместимостью 50 мл вносили по 2,5 мл раствора А2 и доводили до метки 0,1 М раствором кислоты хлористоводородной.

Растворы Б7, Б8, Б9 . В три мерные колбы вместимостью 50 мл вносили по 2,5 мл раствора А3 и доводили до метки 0,1 М раствором кислоты хлористоводородной.

Измеряли оптическую плотность каждого из 9 приготовленных растворов на спектрофотометре при длине волны 309 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Параллельно измеряли оптическую плотность раствора СО папаверина гидрохлорида.

Приготовление раствора СО папаверина гидрохлорида.

Около 0,05 г (точная навеска) папаверина гидрохлорида растворяли в мерной колбе вместимостью 100 мл в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной и доводили этим растворителем до метки (раствор А).2 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводили до метки тем же растворителем (раствор Б),1 мл раствора Б содержит 0,00002 г папаверина гидрохлорида.

Расчет содержания папаверина гидрохлорида в процентах (открываемость R) проводят по формуле:

(5) ,

где: Ах - оптическая плотность исследуемого раствора;

Ао - оптическая плотность раствора СО папаверина гидрохлорида;

ах - масса навески исследуемого образца модельной смеси, г;

0,00002 - содержание папаверина гидрохлорида в г в 1 мл раствора СО, г;

Р - средняя масса 1 таблетки, г (0,33 г);

С - теоретическое содержание папаверина гидрохлорида в модельной смеси (0,03; 0,04; 0,05 г).[7]

Результаты занесли в таблицу №3 и рассчитали стандартное (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).



(6) (7)

Таблица 4 - Результаты установления правильности методики с использованием открываемости

№	Взято папаверина, г/100 мл	Объем титранта, мл	Найдено папаверина, %	х-100	(х-100)І	Метрологические характеристики
1	0,028	18,8	99,97	-0,02	0	SD=0,54 RSD=0,54019
2	0,028	18,9	99,5	-0,9	0,73
3	0,028	19	100,19	0,29	0,1
4	0,06	27,6	99,6	-0,5	0,18
5	0,06	27,7	99,7	-0,4	0,03
6	0,06	27,9	100,7	0,2	0,49
7	0,075	35,6	100,14	0,17	0,05
8	0,075	35,5	99,87	-0,15	0,03
9	0,075	35,7	100,5	0,2	0,03
У			? R=99,95		1,64

Таблица 5 - Оценка правильности в зависимости от концентрации активного компонента в анализируемом образце

Содержание аналита в образце, %	Открываемость,%
100	98 - 102
?10	98 - 102
?1	97 - 105
?0,1	95 - 105
0,01	90 - 109
0,0001	80 - 110
0,0001	80 - 110
0,00001	60 - 113
0,000001	40 - 121

Вывод: По значению откраваемости ( R=99,95 ), можно сделать заключение о соответствии папаверина гидрохлорида по данному валидационному показателю.



Вывод

Доказана валидность методик идентификации по показателю «Специфичность», так как методики качественного и количественного анализа ингредиентов лекарственного средства являются специфичними для папаверина гидрохлорида. По показателю «Линейность» для данной выборки значение коэффициента корреляции составило 0,991. Это позволяет утверждать о наличии достаточно жесткой линейной зависимости оптической плотности от концентрации. «Правильность» по значению открываемости (R=99,95 ), можно сделать заключение о соответствии папаверина гидрохлорида по данному показателю. Следующий валидационный показатель «Прецизионность», величина относительного стандартного отклонения методики титриметрического определения папаверина составила 0,45%, что является удовлетворительным для данного метода. Следовательно данные методики по этим показателям валидны.



Список литературы

1. Беликов, В.Г. Синтетические природные лекарственные средства: крат.справ. /В.Г. Беликов.- М.: Высш. шк., 2007.

2. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: в 2 т./М.Д. Машковский.- 14-е изд., перераб. и доп.- М.: Новая волна, 2008. - В 2 т.

3. Государственная Фармакопея СССР.- 11-е издание. Вып. 1. М., 2009.

4. ОФС 42-0113-09 «Валидация аналитических методик».

5. Компанцева Е.В., Лихота Т.Т. Руководство к производственной практике по внутриаптечному контролю качества лекарственных средств.

6. Руководство для предприятий фармацевтической промышленности / методические рекомендации. М.: Издательство «Спорт и Культура - 2000», 2007.

7. Методическое пособие для студентов 5 курса (9 семестр) С.3.Б. 9-«Фармацевтическая химия».,2013.

8. Фармацевтическая химия. Под редакцией РАМН, профессора А.П. Арзамасцева. Издание третье исправленное. М.: Издательство группы «ГЭОТАР-Медиа».,2006.

9. Методы анализа лекарств/ Максютина Н.П., Каган Ф.Е., Кириченко Л.А., Митченко Ф.А.-К.: Здоровья, 1984.

Размещено на Allbest.ru

...