Аминокислотный состав растения Linosyris villosa

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Аминокислотный состав растения Linosyris villosa

Каирбекова Н.Е., Назарова В.Д.,

Сощенко Л.В., Бектемисова А.У.

(СКГУ им. М.Козыбаева, г.Петропавловск)

Фармакологическое действие многих видов лекарственных растений связано с наличием в них различных биологически активных веществ [1-6]. Грудница мохнатая, произрастающая в Северо-Казахстанской области, тоже относится к лекарственной флоре. В растении содержатся аминокислоты, углеводы, флавоноиды, фенолокислоты, минеральные и дубильные вещества [3,5]. Аминокислоты находят широкое применение в медицине. Некоторые из них оказывают специфический терапевтический эффект. Аминокислоты необходимы для нормального функционирования центральной нервной системы, используются при лечении катаракты и заболеваний желудочно-кишечного тракта [1-3, 6].

Аминокислоты, поступающие в организм человека и животных с пищей, главным образом в виде пищевого белка, занимают центральное место в азотистом обмене и обеспечивают в организме синтез его собственных белков и нуклеиновых кислот, ферментов, многих коферментов, гормонов и других биологически важных веществ; в растениях из аминокислот образуются алкалоиды [3]. Некоторые аминокислоты не могут синтезироваться в животном организме, и для поддержания жизни эти аминокислоты должны обязательно поступать в организм с пищей. Такие аминокислоты называют незаменимыми. Незаменимые аминокислоты для человека: триптофан, фенилаланин, лизин, треонин, валин, лейцин, метионин, изолейцин. Остальные аминокислоты относят к заменимым, но некоторые из них заменимы лишь условно. Так, тирозин образуется в организме только из фенилаланина и при поступлении последнего в недостаточном количестве может оказаться незаменимым. Подобно этому цистин и цистеин могут образовываться из метионина, но будут необходимыми при недостатке этой аминокислоты [2, 3, 5, 6].

Аргинин синтезируется в организме, но скорость его синтеза может оказаться недостаточной при повышенной потребности (особенно при активном росте молодого организма) [2]. Ведущее значение обмена аминокислот для нормальной жизне-деятельности организма определило использование некоторых из них с лечебной целью в качестве лекарственных препаратов [6]. Различные наборы аминокислот и гидролизаты белков, обогащенные отдельными аминокислотами, применяются для парентерального питания при операциях, заболеваниях кишечника и нарушения всасывания [1-3]. Некоторые аминокислоты оказывают специфический терапевтический эффект при различных расстройствах. Так, метионин применяется для лечения и предупреждения заболеваний и токсических поражений печени: цирроза печени, поражении печени мышьяковистыми препаратами, хлороформом, бензолом, четыреххлористым углеродом, при сахарном диабете, хроническом алкоголизме, ожирении печени [1].

Глутаминовая кислота дает хороший эффект при некоторых заболеваниях нервной системы: олигофрении, психозов, реактивных состояний, неврозов, эпилепсии. Она также является глюкогенной аминокислотой. Ее введение ликвидирует гипогликемическое состояние, вызванное инсулином [1]. Гистидин иногда применяют для лечения больных гепатитами, язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки, так как он несколько повышает секреторную и моторную функцию желудочно-кишечного тракта. У больных атеросклерозом гистидин улучшает показатели липидного обмена [1, 6]. Цистеин участвует в обмене веществ хрусталика глаза, и появление катаракты связано с нарушением содержания в хрусталике этой аминокислоты. Поэтому предложено применять цистеин для задержания развития катаракты и просветления хрусталика при начальных формах катаракты [1, 6]. Аминокислоты применяют также в качестве добавок к пищевым продуктам. Практически наиболее важны добавки лизина, триптофана, метионина к пищевым продукта, неполноценным по содержанию этих аминокислот. Добавка глутаминовой кислоты и ее солей ряду продуктов придает им приятный мясной вкус, что часто используется в кулинарии [1-3, 5, 6].

Целью данной работы являлось качественное и количественное определение свободных аминокислот в груднице мохнатой. Качественное определении аминокислот проводили методом одномерной бумажной хроматографии в сравнении с метчиками восемнадцати аминокислот и двух амидов [2]. В результате многократного хроматографирования установили, что в груднице мохнатой в свободном виде и в большем количестве содержатся аминокислоты: серин, треонин, гистидин, пролин и амид аспарагиновой кислоты (аспарагин) [2, 4]. Количественное содержание аминокислот определяли фотоколориметрическим и объемным методами [2, 4].

Объектом исследования являлась грудница мохнатая (Linosyris villosa), собранная в стадии цветения. Экстракцию аминокислот из грудницы мохнатой вели разными растворителями. Для этого в четыре колбы помещали по 1 г воздушно-сухого сырья и экстрагировали 1) дистиллированной водой, 2) уксусной кислотой, 3) ацетоном, подкисленным концентрированной соляной кислотой (37: 3) и 4) 70%-ным этиловым спиртом в течение одного часа [7].

Затем вытяжки фильтровали и упаривали досуха на водяной бане. Присутствие аминокислот в вытяжках обнаруживали качественной реакцией с нингидрином, при этом наблюдали следующие окраски: 1) коричневую, 2) сиренево-красную, 3) грязно-желтую, 4) желтую. На основании развивающихся окрасок предполагаем, что в экстрактах присутствуют аминокислоты [8].

Качественный состав аминокислот в экстрактах изучили методом одномерной бумажной хроматографии в системе растворителей БУВ в соотношении (4: 1: 5) в присутствии метчиков восемнадцати аминокислот и двух амидов. Данные хроматографии сведены в таблицу 1.

грудница мохнатая аминокислота

Таблица 1. Значение Rf аминокислот

Повторное хроматографирование с установленными метчиками провели в системе растворителей БУВ (15: 3: 7). Значения Rf пятен приведены в таблице 2.

Таблица 2. Значение Rf аминокислот

На основании проведенного исследования считаем, что в груднице мохнатой в свободном состоянии содержатся четыре аминокислоты: серин, треонин, гистидин, пролин и амид аспарагиновой кислоты - аспарагин [8].

Количественное определение аминокислот в груднице мохнатой осуществили объемным и фотоколориметрическим методами [4, 9]. Водную, ацетоновую, уксусную и спиртовую вытяжки, взятые в количестве 5 мл каждая, титровали 0,01 н раствором гидроксида натрия в присутствии индикатора фенолфталеина. Опыты проводили дважды на сходимость результатов. Данные приведены в таблице 3.

Таблица 3. Результаты титрования

Количественное содержание аминокислот рассчитывали по формуле:

С% = Э_к

Свободные аминокислоты в груднице мохнатой составляют 0,075% от массы абсолютно сухого сырья.

Количественное определение аминокислот фотоколориметрическим методом проводили по калибровочной кривой, построенной по стандартному раствору аминокислоты серина. В качестве реагента использовали 1%-ый раствор нингидрина [4]. Провели параллельно два опыта. Плотность окраски растворов замеряли на ФЭК - 56. Содержание аминокислот рассчитывали по формуле:

С% =

Данные фотоколориметрического метода совпали с результатами объемного метода, полученные при анализе спиртового и водного экстрактов (в случае ацетонового и уксусного экстрактов получены завышенные результаты).

Таким образом, содержание свободных аминокислот в груднице мохнатой составляет 0,075%.

Литература

1. Тараховский Ю.С. Ким Ю.А., Абдрасилов Б.С., Музафаров Е.Н. Флавоноиды: биохимия, биофизика, медицина. Пущино: «Synchrobook», 2013. - 310 с.

2. Корулькин Д.Ю., Абилов Ж.А, Музычкина Р.А., Толстиков Г.А. Природные флавоноиды. Новосибирск: «ГЕО», 2007. - 232 с.

3. Музычкина Р.А., Корулькин Д.Ю., Абилов Ж.А. Основы химии природных соединений. Алматы: «?аза? университеті», 2010. - 564 с.

4. Племенков В.В. Введение в химию природных соединений. - Казань: 2001. - 378 с.

5. Тюкавкина Н.А. Органическая химия. Кн. 2 М: «Дрофа», 2008. - 592 с.

6. Поляков В.В., Адекенов С.М. Биологически активные соединения рода Populus L. и препараты на их основе. Алматы. 1999. - 158 с.

7. Бурашева Г.Ш., Рахимов К.Д., Абилов Ж.А. Биологически активный комплекс - алхидин и его фармакологическая активность. Алматы. 2001. - 168 с.

8. Поляков В.В., Назарова В.Д., Органические реагенты в аналитической химии. // Республиканский семинар - совещание по аналитической химии. Алма-Ата. 1995. с. 93.

9. Чиркин А.А. Практикум по биохимии. Минск ООО. «Новое знание». 2002. с.55.

Размещено на Allbest.ru