Вивчення водорозчинного полісахаридного комплексу кошиків соняшника однорічногоВивчення водорозчинного полісахаридного комплексу кошиків соняшника однорічного

Размещено на http://www.allbest.ru/

Вивчення водорозчинного полісахаридного комплексу кошиків соняшника однорічного

Т.М. Гонтова

Полісахариди є складовою частиною тканин живих організмів. У життєдіяльності рослин полісахариди виконують резервну функцію (крохмаль, інулін), структурну функцію (целюлоза, геміцелюлоза, пектин), беруть участь в біохімічних процесах і є похідними речовинами вторинного синтезу (моно-, олігосахариди) [2]. Медичні препарати з полісахаридів виявляють проносну, ранозагоювальну, противиразкову, відхаркувальну дію (Мукалтин, Плантаглюцид, Ламинарид). Також є дані про імуномоделюючі, протизапальні і протипухлинні властивості полісахаридів [8; 9]. Ця група сполук, в порівнянні з синтетичними полімерами, має переваги, оскільки вона є нетоксичною і повністю виводиться з організму.

За літературними даними вивчалися полісахариди листків да коріння соняшника однорічного в порівнянні з полісахаридами листків та бульб соняшника бульбистого [5]. Відомостей про вивчання полісахаридних комплексів з кошиків соняшника однорічного нами не знайдено. Раніше нами був вивчено хімічний склад кошиків соняшника однорічного [1; 6], тому в рамках комплексного фармакогностичного дослідження було необхідно виділити та вивчити водорозчинний полісахаридний комплекс (ВРПС) цього виду сировини.

Метою роботи було виділення і вивчення ВРПС з кошиків соняшника однорічного.

Методи та методики дослідження. Кошики соняшника однорічного заготовляли в період масового цвітіння рослин (2015р.) на науково-дослідних ділянках Харківської області. Вивчення вільних вуглеводів проводили у водних та спирто-водних витягах з кошиків соняшника однорічного за допомогою загальновідомих якісних реакцій та методом паперової хроматографії [4]. Отримання ВРПС проводили за загальновідомою методикою [3]. Для чого повітряно-суху сировину подрібнювали до розміру часток 2-3 мм, очищували від ліпофільних домішок вичерпною екстракцією хлороформом у апараті Сокслета. Точну наважку знежиреної сировини тричі екстрагували гарячою водою на киплячій водяній бані, зі зворотним холодильником, при співвідношенні сировини і екстрагента 1:20, 1:10, 1:10 протягом 1, 0,5, 0,5 годин відповідно, періодично перемішуючи. Екстракти об`єднували, фільтрували та упарювали до 1/3 об'єму. Полісахариди осаджували п'ятикратним об`ємом 96% спирту етилового. Для визначення вмісту полісахаридів застосовували гравіметричний метод. Паралельно проводили по п'ять визначень.

Встановлення моносахаридного складу ВРПС проводили після гідролізу сірчаною кислотою протягом 0,5, 1, 1,5, 2 та 2,5 годин [7]. Моносахариди визначали в гідролізатах методом висхідної хроматографії на папері Filtrak в системі розчинників н-бутанол - уксусна кислота - вода (4:1:2). Хроматограми обробляли анілінфталатним реактивом і нагрівали в сушильній шафі при температурі 100-105 °С протягом 5 хвилин. Альдогексози проявлялися у вигляді коричневих плям, альдопентози - червоно-бурих.

Для кількісного визначення нейтральних моносахаридів точну наважку ВРПС гідролізували кислотою хлористоводневою розведеною при 100 - 105 єC протягом 0,5, 1, 1,5, 2 та 2,5 годин. Кількісне визначення моносахаридів проводили спектрофотометричним методом на основі реакції цукрів з пікриновой кислотою.

Амінокислоти у ВРПС вивчали з використанням амінокислотного аналізатора «Т339 Microtechna-Praha». Детекцію проводили з використанням розчину нінгідріна при довжині хвилі 570 нм. Ідентифікацію кислот проводили з використанням стандартних розчинів амінокислот («Sigma Chemical Company», stock N AA-S-18). Кількісний аналіз кожної амінокислоти проводили шляхом порівняння площ піків амінокислот проби зі стандартними зразками амінокислот і обчислювали за формулою:

,

де С - концентрація амінокислоти у зразку;

C1- концентрація стандартного зразку амінокислоти;

S - площа піка амінокислоти у зразку;

S1- площа піка стандартного зразку амінокислоти.

При статистичній обробці результатів використовували довірчу ймовірність 0,95% і критерій Стьюдента, оскільки результати моделюються нормальним розподілом і незначною дисперсією.

Результати. За допомогою якісних реакцій з реактивом Фелінга, б-нафтолом та концентрованою сульфатною кислотою, реакцій на визначення моносахаридів у водних та спирто-водних витягах були виявлені полісахариди та вільні моносахариди.

ВРПС кошиків соняшника однорічного - порошок коричневого кольору, розчинний у воді з утворенням опалесцюючих розчинів, нерозчинний в органічних розчинниках. Вихід ВРПС склав не менш 2,6 %. ВРПС дав позитивні реакції з розчином нінгідрину на наявність вільних амінокислот, з біуретовим реактивом на білок та реактивом Фелінга на відновлюючі цукри.

При вивченні моносахаридного складу ВРПС після гідролізу ідентифіковано глюкозу, фруктозу, рамнозу, ксілозу, арабінозу. За величиною плям та інтенсивністю кольору встановлено, що домінуючим моносахаридом є рамноза.

З метою визначення оптимального часу розщеплення глікозидних зв'язків молекул полісахариду, була досліджена кінетика гідролізу ВРПС кошиків соняшника однорічного (Рис. 1). Встановлено, що при нагріванні з розведеною хлористоводневою кислотою при 100 °С відбувається максимальне розщеплення глікозидних зв'язків в полісахаридних молекулах протягом першого часу.

Рис. 1. Кінетика гідролізу ВРПС кошиків соняшника однорічного

При проведенні вивчення вмісту амінокислот у ВРПС кошиків було ідентифіковано 17 амінокислот, з яких 9 незамінних (Таблиця 1).

Вміст амінокислот у ВРПС кошиків соняшника однорічного.

Таблиця 1.

соняшник кошик полісахарид амінокислота

Загальний вміст амінокислот склав 9,59 мг/100мг. З них незамінних амінокислот 48 % (4,61 мг/100 мг) та замінних 52% (4,98 мг/100 мг). З незамінних амінокислот у більшій кількості містилися аргінін (1,13 мг/100мг), валін (0,99 мг/100 мг) та лізин (0,67 мг/100 мг). Серед замінних амінокислот лідирували гліцин (1,27 мг/100 мг), аланін (0,96 мг/100 мг) та серин (0,79 мг/100 мг).

Висновки

У результаті проведених досліджень встановлено, що вміст ВРПС кошиків соняшника однорічного склав 2,6 %, основні моносахариди - рамноза, глюкоза, фруктоза, ксілоза, арабіноза. Час гідролізу ВРПС - 1 година. У ВРПС ідентифіковано 17 амінокислот, з яких у більшій кількості містилися гліцин, аргінін, валін, аланін, серин та лізин.

Література

1. Гонтова Т. М. Порівняльний аналіз компонентного складу ефірної олії кошиків та листків соняшника однорічного / Т. М. Гонтова, О. С. Мала, О. О. Соколова // Збір. наук. праць співробіт. НМАПО ім. П. Л. Шупика. - 2015. - Вип. 24, (5). - С. 72-77.

2. Ковальов В.М. Фармакогнозія з основами біохімії рослин / В.М. Ковальов, О.І. Павлій, Т.І. Ісакова // Харків.: Прапор, 2000. -704с.

3. Кочетков Н. К. Химия биологически активных природных соединений / Н. К. Кочетков. - М., 1970. - 631 с.

4. Кузнєцова В. Ю. Вивчення полісахаридного та елементного складу вичавок винограду культурного / В. Ю. Кузнєцова, В. С. Кисличенко // Фармац. журн. - 2005. - №3. - С. 95-97.

5. Максютіна Н.П. Дослідження полісахаридів соняшника бульбистого та соняшника однорічного / Н.П. Максютіна, О.І. Ємельянова, Ю.А. Цимбаліста. // Фітотерапія. Часопис. - 2013. - №2. - С. 64-66.

6. Соколова О.О. Вивчення динаміки накопичення елементів у кошиках соняшника однорічного / О.О. Соколова // Зб. наук. праць «Проблеми екологічної та медичної генетики і клінічної імунології" Київ-Луганск, - 2014. - №2 (122). - С. 178-184.

7. Степаненко Б.Н. Химия и биохимия углеводов: Полисахариды / Б. Н. Степаненко. - М. , 1978. - 256 с.

8. Турищев С.Н. Современная фитотерапия. - М., 2007. - 448с.

9. Tasneem Bashir. Chemistry, Pharmacology and Ethnomedicinal Uses of Helianthus annuus (Sanflower): A Review / Tasneem Bashir, Zia-Ur-Rehman Mashwani, Kulsoom Zahara, Shakeela Haider, Shaista Tabassum, Mudrikah // Pure and Applied Biology. - 2015. - Vol. 4. - Issue 2. - P. 226-235.

За допомогою якісних реакцій у кошиках соняшнику однорічного були виявлені полісахариди і вільні моносахариди. Було виділено водорозчинний комплекс кошиків соняшника однорічного. Вихід його склав 2,6 %. Було вивчено моносахаридний склад ВРПС. Основні моносахариди - рамноза, глюкоза, фруктоза, ксілоза, арабіноза. Час гідролізу ВРПС - 1 година. При аналізі амінокислотного складу ВРПС ідентіфіковано 17 амінокіслот, з якіх у більшій кількості містилися гліцин, аргінін, валін, аланін, серин та лізин

Ключові слова: соняшник однорічний, кошики, полісахариди, моносахариди, амінокислоти.

С помощью качественных реакций в корзинках подсолнечника однолетнего были выявлены полисахариды и свободные моносахариды. Был выделен водорастворимый комплекс корзинок подсолнечника однолетнего. Выход его составил 2,6 %. Был изучен моносахаридный состав ВРПС. Основные моносахариды - рамноза, глюкоза, фруктоза, ксилоза, арабиноза. Час гидролизу ВРПС - 1 година. При анализе аминокислотного состава ВРПС ідентифіковано 17 амінокислот, з яких у більшій кількості містилися гліцин, аргінін, валін, аланін, серин та лізин.

Ключевые слова: подсолнечник однолетний, корзинки, полисахариды, моносахариды, аминокислоты.

With the help of qualitative reactions in the anthodiums of sunflower, polysaccharides and free monosaccharides were detected. A water-soluble complex of sunflower anthodiums of the annual was isolated. The yield was 2.6 %. The monosaccharide composition was studied. The main monosaccharides are rhamnose, glucose, fructose, xylose, arabinose. Hour hydrolysis - 1 year. When analyzing the amino acid composition, 17 aminic acids are labeled, which are glistening in glisten, argin, valin, alinin, serine ta lizin.

Key words: annual sunflower, anthodiums, polysaccharides, monosaccharides, aminoacids.

Размещено на Allbest.ru