Исследование методов получения концентратов белков ржи

Описание методик экстракции, осаждения, а также анализа концентратов белков ржи. Характеристика физико-химических особенностей зерна, которые установлены в ходе экспериментальных работ. Влияние концентрации щелочи на степень извлечения белка из ржи.

Рубрика Химия
Вид статья
Язык русский
Дата добавления 02.12.2018
Размер файла 79,1 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Полная исследовательская публикация ____________________________________ Скворцов Е.В. и Фомина В.А.

Размещено на http://www.allbest.ru/

38 _________________ http://chem.kstu.ru _____________ ©-- Chemistry and Computational Simulation. Butlerov Communications. 2004. Vol.5. No.1. 36.

Полная исследовательская публикация _____________ Тематический раздел: Химия возобновляемых растительных ресурсов.

Регистрационный код публикации: nc2 Подраздел: Химия природных соединений.

36 _____ Ул. К. Маркса, 68. 420015 Казань. Татарстан. Россия. _______ ©-- Химия и компьютерное моделирование. Бутлеровские сообщения. 2004. Т.5. №1.

УДК 577.1.047.1.

Татарский научно-исследовательский институт сельского хозяйства

ИССЛЕДОВАНИЕ МЕТОДОВ ПОЛУЧЕНИЯ КОНЦЕНТРАТОВ БЕЛКОВ РЖИ

Скворцов Евгений Владимирович

Фомина Вероника Альфредовна

В последние годы происходит увеличение валовых сборов ржи в РФ. В целом по России в 2001 и 2002 г.г. получен высокий урожай ржи - 6.65 и 7.10 млн. тонн соответственно, что на треть больше, чем в 1996-2000 г.г. Увеличение валового сбора ржи в указанные годы произошло за счет увеличения урожайности. Это самые высокие показатели за последние годы. В 2002 году произошло заметное снижение цен на зерновые, средняя цена реализации составила 78% от цены 2001 г. 1. Республика Татарстан географически расположена в зоне благоприятной для выращивания ржи. Татарстан занимает одно из ведущих мест в России по ее валовому производству. В настоящее время отработаны технологии сева и уборки ржи, подобраны агротехнические мероприятия, гарантирующие получение высоких урожаев.

Рожь богата крахмалом, а также содержит достаточно крупную, в сравнении с пшеницей фракцию пентозанов 2. В связи с высоким содержанием пентозанов, вызывающих повышение вязкости содержимого пищеварительного тракта животных рожь не может применяться в кормах в качестве основы пищевых рационов, она применяется только в качестве добавок. Нормирование добавок ржи в корма производится в соответствии с ГОСТ 3-5 (табл. 1).

Табл. 1. Норма ввода ржи в комбикорма (%).

Молодняк КРС* до 12 месяцев

КРС на откорме

Свиньи

хряки

Свиноматки

Свиньи на откорме

Куры до

17 недель

Куры взрослые

0-10

0-20

0-10

0-15

0-20

0-5

0-7

Белок ржи существенно более сбалансирован по аминокислотному составу в сравнении с пшеницей и другими злаковыми. Белок ржи отличается большим содержанием лизина и триптофана, являющимися лимитирующими в белках пшеницы (табл. 2).

Табл. 2. Содержание незаменимых аминокислот в зерне важнейших злаковых культур в граммах на 100 г белка [6].

Аминокислота

Пшеница

Рожь

Кукуруза

Ячмень

Лизин

2.6

3.8

2.5

3.2

Метионин

1.7

1.7

2.1

1.7

Триптофан

1.3

1.6

0.6

1.2

Валин

4.6

5.3

4.4

5.4

Лейцин

6.9

7.5

11.2

7.2

Изолейцин

3.4

3.5

2.7

3.5

Треонин

2.6

3.2

3.2

2.9

Фенилаланин

4.3

5.2

4.1

5.1

Табл. 3. Соотношение белковых фракций в нормальном зерне ржи, в %АСВ [7].

Зерно

Солерастворимые

Спирторастворимые

Щелочерастворимые

Остаток

Рожь

3.8-5.0

2.2-4.1

1.6-3.3

2.1-2.4

Благодаря большому обьему производства ржи в нашей стране и хорошей сбалансированности ее белка по незаменимым аминокислотам, а также невозможностью ее использования в качестве полнорационного корма, можно ставить вопрос о целесообразности использования концентратов белка ржи животноводстве и при приготовлении пищевых продуктов, как это широко практикуется с белком сои в США. Характерной особенностью белкового комплекса ржи является большое содержание водо- и солерастворимых фракций белков и низкое содержание спирторастворимых фракций (табл. 3). Поэтому белок ржи имеет высокие коэффициенты переваримости.

Нами проведены исследования направленные на изучение возможности получения концентратов ржаного белка, выяснение биохимических свойств фракций ржаного белка.

Результаты и дискуссия

Результаты исследования влияния концентрации щелочи на степень извлечения белка из ржи приведены в виде графиков на рис. 1.

Рис. 1. Зависимость степени извлечения белка ржи от концентрации экстрагента.

Рис. 2. Зависимость рН экстракта от концентрации NaOH.

Степень растворения ржаного белка в большей степени зависит от того какой показатель рН имеет раствор после экстракции. Значение рН экстракта меняется в зависимости от исходной концентрации NaOH (рис. 2).

Проведенные исследования показали, что увеличение концентрации NaOH c 0.01М до 0.1М в экстрагенте приводит к увеличению растворения белка всего на 1.2%. Исходя из этого в технологическом плане предпочтительнее использование экстрагента более низкой концентрации NaOH, так как это вызывает снижение расхода щелочи на единицу экстрагированного белка (рис. 3)

Проведены исследования осаждения экстрагированного белка в изоэлектрической точке, подкислением экстракта. При корректировке рН экстракта в кислую сторону растворенный белок теряет агрегативную устойчивость, что вызывает его осаждение. Причем минимум растворимости большинства белков приходится на диапазон рН 4.5-4.7. Одна часть белка осаждается, другая остается в растворе.

Рис. 3. Зависимость количества извлекаемого белка единицей NaOH от концентрации экстрагента.

Зависимость количества осаждаемого из раствора белка от рН выражается в виде кривой осаждения (рис. 4).

Сопоставляя данные рис. 1 и 3 видно, что путем осаждения в изоэлектрической точке рН 4.5 можно в сухом виде получить белок с выходом 3.3% от веса исходного сырья ржи. Однако реальный выход при гидромодуле 1:10 составляет около 2.5%, т.к. часть экстракта при отделении супернатанта после центрифугирования остается в осадке.

Применение Са2+ увеличивало осаждение белка, реальный выход белка достигал 3%. При применении Са2+ в качестве осадителя, корректировку рН нельзя осуществлять серной кислотой, т.к. это вызывает осаждение из раствора вместе с белком Са2+ в виде сульфата, а также нивелирования его осаждающего действия.

При исследовании процесса тепловой денатурации белка было установлено, нагревание экстракта белка до 100o С при рН 4.5 и ниже приводит к гидролизу белка с уменьшением его осаждаемости. При нагревании раствора ржаного белка при рН 2 осаждение белка в изоэлектрической точке прекращается, что говорит о глубоком гидролизе растворенного белка. Это свидетельствует о легкой гидролизуемости ржаных белков, что несомненно положительно влияет на переваримость ржаных белковых концентратов, но затрудняет их получение. Установлено, что повышение температуры раствора в изоэлектрической точке не увеличивает степень осаждения белка, а также не увеличивает осаждаемость белка при применении в качестве осадителя Са2+.

Результаты исследования влияния концентрации ацетона в растворе на степень осаждения белка приведены на рис. 5. Как видно из результатов при использовании ацетона также не удается увеличить степень осаждения белка из раствора. Максимальная степень осаждения достигалась при содержании в растворе около 66% ацетона, она составила 50%. При дальнейшем увеличении содержания ацетона степень, осаждения белка начинает уменьшаться, что видимо вызвано растворимостью части белков в концентрированных растворах ацетона.

Рис. 4. Кривая осаждения белка ржи из раствора.

Рис. 5. Кривая осаждения белка ацетоном.

В результате проведения трехступенчатого процесса экстракции удалось существенно увеличить степень извлечения белков ржи (табл. 4,5).

Табл. 4. Ступенчатая экстракция белков ржи, гидромодуль 1:10.

Ступень экстракции

Концентрация фракции, г/л

Обьем фракции,

% исх. экстрагента

Извлечение белка,

% сырья

1

6.33

80

5.06

2

4.40

80

3.52

3

2.11

80

1.69

Сумма

10.27

Табл. 5. Ступенчатая экстракция белков ржи, гидромодуль 1:5.

Ступень экстракции

Концентрация фракции

Обьем фракции,

% исх. экстрагента

Извлечение белка,

% сырья

1

7.74

70

2.71

2

7.58

70

2.65

3

7.20

70

2.52

Сумма

7.88

Снижение гидромодуля экстракции интересно в плане снижения расхода реагентов, необходимых для растворения и осаждения белка. Однако уменьшение гидромодуля, как видно из результатов исследования при трехступенчатом процессе экстракции заметно снижает извлечение и как следствие выход концентрата белка.

Как отмечено выше, не удается добиться достаточно полного осаждения из раствора экстрагированного белка. Степень осаждения белка из раствора в изоэлектрической точке составляет около 50%. Обьединяя данные по осаждению белка в изоэлектрической точке рН 4.5 (рис. 3) и результаты ступенчатых экстракций (табл. 3, 4) получаем зависимость выхода белкового концентрата от гидромодуля трехступенчатой экстракции (рис. 5).

В зависимости от режимов сушки белка удавалось получить сухие белковые концентраты разных цветовых оттенков. Установлено, что при сушке белковой суспензии без предварительной нейтрализации концентраты белка приобретают темно-коричневый оттенок, приближающийся к черному при увеличении кислотности исходной суспензии. При сушке нейтрализованной суспензии при температурах выше 100o С концентрат приобретает коричневый цвет. При сушке нейтрализованой суспензии при 40-50o С концентрат получается серого цвета и его можно досушить при температуре 110o С без изменения цвета.

Рис. 5. Влияние гидромодуля трехступенчатой экстракции на выход белкового концентрата.

Экспериментальная часть

В качестве исследуемого сырья использовалась рожь, содержащая 10.8-11.9% АСВ белка. Анализ зерна на содержание белка проводился на ИК-спектрометре «Infratec 1275 Analyser», производства FOSS Tecator (Швеция).

Для проведения процесса экстракции белка цельное зерно ржи дробилось до прохода 80% через сито 1 мм. Экстракция проводилась раствором NaOH при перемешивании в течении часа при температуре 20o С. При такой экстракции в раствор переходят белковые фракции глютелинов и альбуминов ржи, а также большая часть фракции глобулинов и часть фракции проламинов. Кроме белка в раствор переходят растворимые низкомолекулярные сахара ржи и высокомолекулярные пентозаны ржи. Отделение раствора от сырья проводили центрифугированием 4500 об/мин. 20 минут. Выделение белка осуществляли путем осаждения из экстракта подкислением раствора. После начала коагуляции экстракт выдерживали в течении 15 минут для образования коллоидных агрегатов затем, раствор центрифугировали при 4500 об./мин 20 минут. Осажденный белок нейтрализовывали NaOH и высушивали вначале при 40-45o С, затем досушивали при 110o С.

Для анализа степени экстракции белка применяли метод биуретовой реакции измерения концентрации белка в растворе 8. Для проведения спектрометрического анализа нами использовался спектрометр «Lambda 35 UV\VIS Perkin Elmner Instruments».

Проведены исследования влияния концентрации NaOH на степень перехода в раствор белка ржи. Процесс изучался при гидромодуле 1:10 в диапазоне концентраций 0.01-0.1М NaOH.Необходимо отметить, что параллельно с белком при щелочной экстракции ржи в раствор также переходят пентозаны ржи, около 7% сырья, растворимые низкомолекулярные фракции декстринов и моносахаров.

Для увеличения степени осаждения белка из раствора нами исследованы препараты, содержащие Са2+. Ион Са2+ обладает способностью связываться с двумя молекулами белка и таким образом агрегировать в растворе некоторые белки, вызывая образование осаждающихся коллоидов. Для этого в экстракт белка добавляли СаСl2 до 3.7 г/л в изоэлектрической точке рН 4.5.

С целью вызвать увеличение осаждаемости растворенного белка была проведена попытка его термической денатурации в изоэлектрической точке. Для этого раствор белка с добавками Са2+ и без добавок нагревали до кипения и выдерживали в течении 15 минут. При исследовании процесса тепловой денатурации белка было установлено, нагревание экстракта белка до 100o С при рН 4.5 и ниже приводит к гидролизу белка с уменьшением его осаждаемости. экстракция концентрат белок рожь

Растворимые в водной среде белки могут осаждаться органическими слабополярными раствоителями. Для изучения этого применительно к белкам ржи нами проведено изучение осаждения растворенного ржаного белка ацетоном. Максимальная степень осаждения достигалась при содержании в растворе около 66% ацетона она составила 50%.

При экстракции белка из дробленной ржи наблюдаются большие потери белка в связи с тем что большая часть белка растворена в экстракте остающемся во влажном сырье. Для предотвращения этого нами проведены исследования ступенчатой экстракции белка. Вторая ступень заключался в том, что после первой экстракции и отделения экстракта белка к влажному сырью добавлялся свежий раствор экстрагента первоначальной концентрации щелочи обьемом, равным количеству удаленного экстракта. Аналогично проводилась третья ступень экстракции. Экстракция белка проводилась раствором 0.01M NaOH.

Для получения товарного концентрата белка после осаждения и отделения от раствора он должен быть высушен, что обеспечит возможность его длительного хранения. Нами проведено исследование влияния условий сушки на цвет получаемого продукта.

Выводы

В ходе проведеных исследований показано, что около 65% белков, содержащихся в ржи могут быть извлечены одноступенчатой экстракцией низкими концентрациями щелочи, при трехступенчатой экстракции удается растворить до 90% белка. Для осаждения растворенного белка применялось подкисление до изоэлектрической точки, а также соли кальция и ацетон. Применением этих осадителей удалось достичь осаждения 50% растворенного белка. Исходя из полученных результатов сделан вывод, что при производстве белковых концентратов ржи можно рассчитывать на выход около 5% сырья. Низкая степень осаждения экстрагированного белка является основной причиной, ограничивающей его выход. Для решения этой технологической проблемы необходим поиск еще более эффективных осадителей.

Литература

1 О состоянии сельского хозяйства Российской Федерации в 1998-2002 г.г. АПК: экономика, управление. 2003. C.10. 11с.

2 Околелова Т.М., Кулаков А.В., Молоскин С.А., Грачев Д.М. Корма и ферменты. ВНИТИП. Сергиев Пассаж. 2001. С.9-45. 111c.

3 ГОСТ 9268-90 Комбикорма-концентраты для крупного рогатого скота.

4 ГОСТ Р 51550-2000 Комбикорма-концентраты для свиней.

5 ГОСТ 18221-99 Комбикорма полнорационные для сельскохозяйственной птицы.

[6] Кретович В.Л. Биохимия зерна и хлеба. М.: Наука. 1991. С.8-12. 136с.

[7] Приезжева Л.Г., Голенков В.Ф., Панкратьева И.А. Взаимосвязь биохимических и технологических свойств зерна озимой ржи. Труды всесоюзной научно-технической конференции. М.: Министерство заготовок СССР. 1971. С.92. 154с.

8 Ермаков А.И., Арасимович В.В., Смирнова-Иконникова М.И., Ярош Н.П., Луковникова Г.А. Методы биохимического исследования растений. Л.: Колос. 1972. С.143. 456c.

Резюме

В работе представлены результаты исследования получения белковых концентратов ржи. Приведено описание методик экстракции, осаждения, а также анализа исследуемых продуктов. Описаны физико-химические особенности белка ржи, которые установлены в ходе экспериментальных работ.

Ключевые слова: рожь, белковые концентраты, экстракция, осаждение.

Размещено на Allbest.ru

...

Подобные документы

  • Роль в живой природе. Состав и свойства белков. Классификация белков. Определение строения белков. Определение наличия белка. Идентификация белков и полипептидов. Синтез пептидов. Искусственное получение белка. Аминокислоты.

    реферат [16,2 K], добавлен 01.12.2006

  • Характеристика белков как высокомолекулярных соединений, их структура и образование, физико–химические свойства. Ферменты переваривания белков в пищеварительном тракте. Всасывание продуктов распада белков и использование аминокислот в тканях организма.

    реферат [66,2 K], добавлен 22.06.2010

  • Электрохимические методы анализа веществ. Общие физико-химические свойства аминокислот и белков, их функции в клетках живых организмов. Использование методов полярографии и амперометрии в исследовании кинетики химических процессов в аминокислотах.

    курсовая работа [2,5 M], добавлен 18.07.2014

  • Строение и свойства белков. Различия в строении аминокислот. Пространственная организация белковой молекулы. Типы связей между аминокислотами в молекуле белка. Основные факторы, вызывающие денатурацию белков. Методы определения первичной структуры белка.

    реферат [354,6 K], добавлен 15.05.2010

  • Оценка сложившегося административно-территориального устройства России. Исследование белков. Классификация белков. Состав и строение. Химические и физические свойства. Химический синтез белков. Значение белков.

    реферат [537,6 K], добавлен 13.04.2003

  • Исследования свойств белков для изучения их химического состава и строения. Аминокислота - основная структурная единица белка. Белковые резервы. Этапы синтеза белка. Регуляция биосинтеза аминокислот. Переваривание белков. Патология белкового обмена.

    реферат [21,7 K], добавлен 17.01.2009

  • Общая характеристика, классификация, строение и синтез белков. Гидролиз белков с разбавленными кислотами, цветные реакции на белки. Значение белков в приготовлении пищи и пищевых продуктов. Потребность и усвояемость организма человека в белке.

    курсовая работа [29,7 K], добавлен 27.10.2010

  • Общие пути обмена аминокислот. Значение и функции белков в организме. Нормы белка и его биологическая ценность. Источники и пути использования аминокислот. Азотистый баланс. Панкреатический сок. Переваривание сложных белков. Понятие трансаминирования.

    презентация [6,6 M], добавлен 05.10.2011

  • Понятие и основатели химии белка. Состав, уровень организации, структура белка. Денатурация, биуретовая реакция, гидролиз белков. Полноценные и неполноценные белки. Белки, жиры и углеводы - основа питания, их необходимое количество для человека.

    презентация [7,4 M], добавлен 26.01.2011

  • Основные химические элементы, входящие в состав белков. Белки - полимеры, мономерами которых являются аминокислоты. Строение аминокислот, уровни организации белковых молекул. Структуры белка, основные свойства белков. Денатурация белка и ее виды.

    презентация [1,7 M], добавлен 15.01.2011

  • Общий анализ взаимодействия поверхностно-активных веществ (ПАВ) с полимерами. Особенности дифильности белков. Относительная вязкость растворов желатина в зависимости от концентрации добавленного додецилсульфата натрия. Роль взаимодействий белков с ПАВ.

    реферат [709,8 K], добавлен 17.09.2009

  • Физико-химические свойства аминокислот. Получение аминокислот в ходе гидролиза белков или как результат химических реакций. Ряд веществ, способных выполнять некоторые биологические функции аминокислот. Способность аминокислоты к поликонденсации.

    презентация [454,9 K], добавлен 22.05.2012

  • Понятие и назначение химических методов анализа проб, порядок их проведения и оценка эффективности. Классификация и разновидности данных методов, типы проводимых химических реакций. Прогнозирование и расчет физико-химических свойств разных материалов.

    лекция [20,3 K], добавлен 08.05.2010

  • Строение и общие свойства аминокислот, их классификация и химические реакции. Строение белковой молекулы. Физико-химические свойства белков. Выделение белков и установление их однородности. Химическая характеристика нуклеиновых кислот. Структура РНК.

    курс лекций [156,3 K], добавлен 24.12.2010

  • Пути внедрения ферментативных методов синтеза в химическое производство. Способ определения содержания аминокислот триптофана и цистеина в составе белков. Специфика строения и состава структурных белков биологической мембраны. Характеристика видов РНК.

    контрольная работа [522,0 K], добавлен 18.05.2011

  • Изучение особенностей процесса извлечения родия и очистки его от неблагородных и благородных примесей. Обобщение химических, физических свойств, а также биологической и физиологической роли родия. Методы извлечения родия из отработанных катализаторов.

    контрольная работа [111,6 K], добавлен 11.10.2010

  • Основные способы разложения танталитовых и колумбитовых концентратов 60-70 % плавиковой кислотой при нагревании. Разложение лопаритовых концентратов методом хлорирования и сернокислотным способом. Получение компактных металлических тантала и ниобия.

    курсовая работа [25,1 K], добавлен 07.03.2015

  • Определение белков и их составных частей – аминокислот. Структура и функции белков в организме. Роль в обеспечении воспроизводства основных структурных элементов органов и тканей, а также образовании таких веществ, как, например, ферментов и гормонов.

    курсовая работа [735,6 K], добавлен 16.12.2014

  • Аминокислоты, входящие в состав пептидов и белков. Моноаминодикарбоновые кислоты и их амиды. Энантиомерия аминокислот, образование солей. Мезомерия и строение пептидной связи. Методы выделения и анализа белков. Электрофорез в полиакриламидном геле.

    презентация [351,2 K], добавлен 16.12.2013

  • Белки как высокомолекулярные природные соединения, состоящие из остатков аминокислот, которые соединены пептидной связью. Качественный состав белков, их структура и функции. Процессы гидролиза (кислотно-основного, ферментативного) и денатурация белков.

    презентация [212,1 K], добавлен 11.02.2015

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.