К фитохимическому исследованию лекарственного сбора

Размещено на http://www.allbest.ru/

К фитохимическому исследованию лекарственного сбора

Корнопольцева Татьяна Владимировна,

Петров Евгений Васильевич,

Ботоева Елена Аполлоновна

Аннотация

К фитохимическому исследованию лекарственного сбора

Корнопольцева¹*⁺ Татьяна Владимировна, Петров¹ Евгений Васильевич, Ботоева² Елена Аполлоновна

¹ Лаборатория медико-биологических исследований. Института общей и экспериментальной биологии СО РАН. Ул. Сахъяновой, 6. г. Улан-Удэ. Россия. Тел.: (9021) 64-55-81. E-mail: tv-kornopol@mail.ru.

² Кафедра акушерства и гинекологии с курсом педиатрии. Бурятский государственный университет. Ул. Смолина, 24а. г. Улан-Удэ. Россия.

*Ведущий направление; ⁺Поддерживающий переписку.

Методом ремацерации из корневищ лапчатки белой Potentilla alba L., корневищ шлемника байкальского Scutellaria baicalensis Georgi, корней и корневищ родиолы Rhodiola rosea L. получен полиэкстракт сухой. Методом ВЭЖХ в полученном экстракте сухом установлено наличие галловой кислоты, процианидина В₁, розавина, розина, байкалина, розиридина, норвогонозида, вогонозида, байкалеина, вогонина. Для полиэкстракта разработана методика количественного определения флавоноидов в пересчете на байкалин. Содержание флавоноидов в экстракте в пересчете на байкалин составило 5.312 %.

Ключевые слова: полиэкстракт, биологически активные вещества.

Abstract

To phytochemical research of new remedy

Tatiana V. Kornopoltseva,¹*⁺ Еvgeny V. Petrov¹ and Elena A. Botoeva²

¹ Laboratory of Biomedical Research. Institute of General and Experimental Biology. Sakhyanovoy St., 6. Ulan-Ude, Russia. Phone: +7 (9021) 64-55-81. E-mail: tv-kornopol@mail.ru;

² Department of Obstetrics and Gynecology with the Course of Pediatrics. Buryat State University. Smolin St., 24a. Ulan-Ude. Russia.

*Supervising author; ⁺Corresponding author.

Dry extract was obtained from the rhizomes of Potentilla alba L., rhizomes of Scutellaria baicalensis Georgi and roots of Rhodiola rosea L. by the remaceration method. The presence of gallic acid, procyanidin B1, rosavin, rosin, baicalin, rosiridin, norwogonoside, wogonoside, baicalein, wogonin was established by HPLC method in the extract. The technique of quantitative determination of flavonoids sum calculated on baicalin was developed for the extract. The sum content of flavonoids in the extraсt was 5.312 %.

Keywords: extract, biological active substances.

In the Russian version of this article, the Reference Object Identifier - ROI: jbc-01/16-45-2-140.

Введение

Фармакологическая коррекция гипотиреоидного состояния организма основана преимущественно на восполнении дефицита йода и тиреоидных гормонов. Несмотря на имеющийся арсенал лекарственных средств с тиреотропным действием, необходимость в эффективных и безопасных средствах сохраняется. Используемые препараты не всегда отличаются достаточной клинической эффективностью и при длительном применении могут вызывать побочные эффекты. В связи с этим оправдан значительный интерес к поиску новых средств, способных предупреждать и корригировать гипофункцию щитовидной железы.

Лекарственные растения являются наиболее перспективным источником биологически активных веществ тиреотропного действия. Одним из растений, применяемых в народной медицине для лечения и профилактики заболеваний щитовидной железы, является лапчатка белая (Potentilla alba L., семейство розоцветные - Rosaceae). Установлено, что извлечения из P. alba L. могут применяться при коррекции гипофункции и гиперфункции щитовидной железы [1, 3]. Наряду с этим, учитывая зависимость клинических проявлений гипотиреоза от уровня тиреоидных гормонов в крови и развития вторичного иммунодефицита, целесообразными представляются вопросы коррекции патологических проявлений гипотиреоза средствами, обладающими иммуномодулирующим действием (Rhodiola rosea L. сем. Rosaceae), и ноотропным (Scutellaria baicalensis Georgi, сем. Lamiaceae). Полученный экстракт характеризуется как средство, корректирующее нарушения функций щитовидной железы [5].

Цель работы - определение основных биологически активных веществ и разработка методики стандартизации для комплексного экстракта, полученного из корней лапчатки белой, корней и корневищ родиолы розовой и корней шлемника байкальского.

Экспериментальная часть

Растительный материал - корни и корневища родиолы розовой, соответствующие ФС 422163-83 и корни шлемника байкальского, соответствующие ФС 42453-91 собраны на опытном стационаре "Горячинск", Бурятия в 2013 году; корни лапчатки белой приобретены в ООО "Старослав", Бердск в 2014. Методом ремацерации с учетом оптимальных параметров экстракции получен комплексный экстракт, состоящий из экстрактов сухих лапчатки сухого, шлемника байкальского и родиолы розовой в соотношении 2:1:1. Оптимизацию процесса экстракции проводили с учетом выхода суммы флавоноидов, в пересчете на байкалин [4].

Определение потери в массе при высушивании проводили на дериватографе Netzsch STA 449 C (Германия). Спектры поглощения регистрировали на спектрофотометре Agilent-8453Е (США) в кварцевых кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм.

Количественное содержание маркерных компонентов определяли методом ВЭЖХ. Исследования проводили на микроколоночном жидкостном хроматографе Милихром А-02 (Эконова, Россия), снабженным автосемплером, УФ-детектором и колонкой с обращено-фазовым сорбентом ProntoSIL-120-5-C18 AQ (2 Ч 75 мм, (5 мкм; Metrohm AG, Швейцария). Подвижная фаза: элюент А - 0.2 М LiClO₄ в 0.006 M HClO₄, элюент В - ацетонитрил; режим элюирования - градиентный; программа градиента (%B): 0-20 мин 5-10 %; скорость подвижной фазы 200 мкл/мин; температура колонки 35 °С; длина волны детектора 270 нм. В работе использовались стандартные образцы галловой кислоты; процианидина В 1; розавина; розина; байкалина; розиридина; вогонозида; байкалеина; вогонина производства Extrasynthese (Франция). Идентификацию соединений осуществляли на основании данных о хроматографической подвижности, метода добавок, УФ- и МС-характеристиках отдельных соединений [6, 7].

Математическую обработку данных осуществляли с помощью программы Microsoft Excel 2003. После проверки распределения на нормальность, статистическую значимость различий сравниваемых величин определяли с использованием t-критерия Стьюдента [2].

Результаты и их обсуждение

Экстракт представляет собой мелкодисперсный порошок красно-коричневого цвета с приятным запахом и горьковатым вяжущим вкусом, с содержанием влаги не более 5 %. Гигроскопичен, комкуется, хорошо растворим в воде и 50 % спирте этиловом. Потеря в массе при высушивании варьирует от 3.04 до 4.93 % и не превышает 5 %. Методом дифференциальной сканирующей калориметрии установлено, что основное удаление влаги начинается при температуре 50 °С, а при 150 °С происходит разложение экстракта. Методом ВЭЖХ в экстракте сухом установлено наличие 10 маркерных компонентов, сырьевым источником которых является P. alba (галловая кислота, процианидин В₁), R. rosea (розавин, розин, розиридин) и S. baicalensis (байкалин, байкалеин, норвогонозид, вогонозид, вогонин) (рисунок).

Рис. 1. Хроматограмма (ВЭЖХ) спиртового раствора экстракта. Цифрами обозначено положение соединений: 1 - галловая кислота, 2 - процианидин В 1, 3 - розавин, 4 - розин, 5 - байкалин, 6 - розиридин, 7 - норвогонозид, 8 - вогонозид, 9 - байкалеин, 10 - вогонин

Табл. 1. Количественное содержание биологически активных веществ в экстракте

Доминирующими соединениями экстракта являются флавоноиды, суммарное содержание которых составило 88.01 мг/г от массы сухого экстракта (8.80 %). На долю фенилпроноидов и других классов соединений приходится 31.20 мг/г (3.12 %) и 15.0 мг/г (1.50 %), соответственно.

Согласно данным спектрофотометрического исследования экстракта "Тиреотон" было установлено, что максимум спектра поглощения спиртового раствора близок к таковому ГСО байкалина, снятого в аналогичных условиях.

Количественная оценка проводилась по выходу флавоноидов, в пересчете на байкалин. Метрологические характеристики представлены в табл. 2.

Табл. 2. Метрологические характеристики методики количественного определения флавоноидов в экстракте

Примечание: x - средняя выборка, SІ - дисперсия, S_x - стандартное отклонение, Р - доверительная вероятность, t(p,f) - критерий Стьюдента, Дx - полуширина доверительного интервала величины, E - относительная ошибка отдельного определения. экстракт щитовидная лапчатка родиола

Определено, что суммарное содержание флавоноидов, в пересчете на байкалин в экстракте при доверительной вероятности 95 % составило 5.312 %. Ошибка единичного определения не превышает 5 %, результаты эксперимента можно считать удовлетворительными.

Выводы

Получен полиэкстракт сухой из корневищ лапчатки белой Potentilla alba L., корневищ шлемника байкальского Scutellaria baicalensis Georgi и корней и корневищ родиолы Rhodiola rosea L. Доминирующими соединениями экстракта являются флавоноиды, суммарное содержание которых составило 8.80 % от массы сухого экстракта, на долю фенилпроноидов и других классов соединений приходится 3.12 % и 1.50 %, соответственно, разработана методика количественного определения флавоноидов в пересчете на байкалин, которая может быть использована для стандартизации данного объекта.

Литература

[1] Архипова Э.В. Влияние экстракта Potentilla alba L. и комплексного средства "Тиреотон" на течение экспериментального гипотериоза. Автореф. дисс… канд. мед. наук. Улан-Удэ. 2012. 18 с.

[2] Государственная фармакопея СССР. XI изд., часть 2, Москва. 1990. С. 364-365.

[3] Захария А.В. Исследование лапчатки белой, как перспективного средства для лечения заболеваний щитовидной железы: Автореф. дисс… канд. биол. наук. Львов. 1997. 24 с.

[4] Оленников Д.Н. Разработка технологии получения экстракта подорожника большого сухого. Химия растительного сырья. 2006. №1. С. 49-54.

[5] Приходько Е.И. Лечение больных тиреотоксикозом травой пестрач белый. Врачебное дело. 1976. №6. С. 66-71.

[6] D.N. Olennikov, N.I. Kashchenko, N.K. Chirikova. A Novel HPLC-Assisted Method for Investigation of the Fe2+-Chelating Activity of Flavonoids and Plant Extracts. 2014. Molecules. 19. P.18296-18316.

[7] D.N. Olennikov, N.I. Kashchenko, N.K. Chirikova, S.S. Kuz'mina. Phenolic Profile of Potentilla anserina L. (Rosaceae) Herb of Siberian Origin and Development of a Rapid Method for Simultaneous Determination of Major Phenolics in P. anserina Pharmaceutical Products by Microcolumn RP-HPLC-UV. 2015. Molecules. 20. P.224-248.

Размещено на Allbest.ru