Применение метода тонкослойной хроматографии в анализе биологически активных веществ
Изучение эффективности различных систем растворителей для разделения биокомплексов. Идентификация метронидазола и металлов входящих в состав комплексов после их разделения методом тонкослойной хроматографии. Катализаторы биохимических процессов.
| Рубрика | Химия |
| Вид | статья |
| Язык | русский |
| Дата добавления | 01.02.2019 |
| Размер файла | 19,9 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
ФГБОУ ВО «Курский государственный медицинский университет»
Применение метода тонкослойной хроматографии в анализе биологически активных веществ
Пискарева Т.Н.
Секерина И.Ю.
Микроэлементами называют элементы, присутствующие в организме человека в очень малых следовых количествах. Это в первую очередь 15 эссенциальных (жизненно необходимых - Fe, J, Cu, Zn, Co, Cr, Mo, Ni, V, Se, Mn, As, F, Si, Li, а также условно-эссенциальные B, Br. Элементы Cd, Pb, Al, Rb являются серьезными кандидатами на эссенциальность. В учении о микроэлементах особенно отчетливо видна справедливость слов Парацельса о том, что “нет токсичных веществ, а есть токсичные дозы”. Они являются важнейшими катализаторами различных биохимических процессов, обмена веществ, играют значительную роль в адаптации организма в норме и патологии. Многие микроэлементы в сочетании с противовоспалительными средствами могут не только усиливать их действие, но и проявлять свойства нового лекарственного препарата, созданного путем синтеза этих веществ. Поэтому разработка новых методов анализа биокомплексов, содержащих в своем составе микроэлементы, является одной из актуальных проблем химического анализа.
Высокая чувствительность, относительная простота аппаратурного обеспечения, быстрота выполнения опытов по разделению с помощью метода хроматографии в тонком слое сорбента обеспечили широкое применение этого метода для разделения, идентификации лекарственных препаратов и их смесей. Анализ методик, приведенных в обзоре литературы, свидетельствует о том, что до настоящего времени нет единого мнения в отношении выбора систем растворителей для обнаружения данных лекарственных препаратов, а тем более их биокомплексов с металлами. В связи с этим мы задались целью разработать метод хроматографии в тонком слое сорбента, пригодный для их идентификации.
Для обнаружения метронидазола, диоксидина в комплексах с металлами после их разделения методом тонкослойной хроматографии, мы применили разработанные ранее реакции. Хроматографическую пластинку после хроматографирования последовательно обрабатывали реактивами для обнаружения метронидазола или диоксидина, а затем реактивами на катионы металлов. Результаты исследований представлены в таблицах 1 и 2.
Таблица 1. Идентификация метронидазола и металлов входящих в состав комплексов после их разделения методом ТСХ
|
РЕАКТИВ |
ЭФФЕКТ РЕАКЦИИ |
РЕАКТИВ |
ЭФФЕКТ РЕАКЦИИ (окраска) |
|||
|
метронидазол |
Cu2+ |
Zn2+ |
Ag+ |
|||
|
НCL+NaNO2+в-нафтол +NaOH |
Розовое окрашивание |
K4[Fe(CN)6] |
Красно-коричн. |
|||
|
Дитизон |
желтая |
красная |
красная |
|||
|
Реактив Драгендорфа |
Оранжевое окрашивание |
K4[Fe(CN)6] |
Красно-коричн. |
|||
|
Дитизон |
желтая |
красная |
красная |
|||
|
Соль Мора |
Светло-коричневое окрашивание |
K4[Fe(CN)6] |
Красно-коричн. |
|||
|
Дитизон |
желтая |
красная |
красная |
Таблица 2. Идентификация диоксидина и металлов входящих в состав комплексов после их разделения методом ТСХ
|
Реактив |
Эффект реакции |
Реактив |
Эффект реакции (окраска) |
||
|
диоксидин |
Cu2+ |
Ni2+ |
|||
|
Кислотный хром темно- синий |
Фиолетовое окрашивание |
K4[Fe(CN)6] |
Красно-коричневая |
||
|
Диметилглиоксим (аммиачная среда) |
красная |
||||
|
УФ облучение прил= 254 нм |
Флуоресценция |
- |
- |
- |
Мы изучили эффективность различных систем растворителей для разделения биокомплексов на пластинках «Силуфол». Для анализа использовали биокомплексы метронидазола с ионами меди, цинка, серебра и биокомплексы диоксидина с ионами меди и никеля. В качестве стандартных веществ - метчиков чистые субстанции метронидазола, раствор 1% диоксидина( ампульный) , а также соли металлов: CuSO4, ZnCl2, АgNO3, NiSO4. Системы растворителей используемы для разделения биокомплексов, представлены в таблице 3.
Таблица 3. Системы растворителей, используемые для разделения биокомплексов метронидазола и диоксидина с ионами меди, цинка, серебра и никеля
|
№ п/п |
Система растворителей |
Соотношение компонентов |
|
|
1. |
Хлороформ: Диоксан: Ацетон:Аммиак |
45:47,5:5:2,5 |
|
|
2. |
Пропанол: Хлороформ |
4:6 |
|
|
3. |
Диоксан |
- |
|
|
4. |
Метанол:хлороформ |
4:8 |
|
|
5. |
Хлороформ: Пропанол |
4:6 |
|
|
6. |
Хлороформ: Гептан:Этанол |
50:45:15 |
|
|
7. |
Тетрахлорметан: Ацетон |
8:2 |
|
|
8. |
Толуол: Диоксан: Пропанол |
4:4:2 |
|
|
9. |
Тетрахлорметан: Этанол |
7:8 |
|
|
10. |
Диэтиловый эфир:Ацетон |
8:8 |
|
|
11. |
Тетрахлорметан:Метанол: Аммиак |
9:1:0,1 |
|
|
12. |
Диоксан: Ацетон |
4:8 |
|
|
13. |
Хлороформ:Диметилформамид |
8:2 |
|
|
14. |
Тетрахлорметан: Диоксан: Ацетон |
1:1:1 |
|
|
15. |
Метанол: Пропанол |
4:7 |
|
|
16. |
Диметилформамид |
- |
|
|
17. |
Хлороформ: Диэтиловый эфир: Гептан |
5:4:3 |
|
|
18. |
Толуол: Тетрахлорметан |
4:9 |
|
|
19. |
Диэтиловый эфир |
- |
|
|
20. |
Хлороформ: Пропанол |
4:1 |
В результате проведенных исследований мы выбрали систему растворителей №1 (хлороформ: диоксан: ацетон: аммиак (45:47,5:5:2,5)) для разделения биокомплексов метронидазола. Для биокомплексов диоксидина подходящей системой растворителей является система №13 (диметилформамид: хлороформ (2:8)). Для идентификации биокомплексов использовали величины абсолютной хроматографической подвижности, значения которых представлены в таблицах 4 и 5.
Таблица 4. Величины Rf комплекса метронидазола с ионами металлов
|
Система растворителей |
Величина rf |
||||
|
Комплекса с Cu2+ |
свидетелей |
||||
|
Хлороформ: Диоксан: Ацетон: Аммиак (45:47,5:5:2,5) |
Метронидазол |
Ион Cu2+ |
Метронидазол |
CuSO4 |
|
|
0,43 |
0,25 |
0,43 |
0,25 |
||
|
Комплекса с Zn2+ |
свидетелей |
||||
|
Метронидазол |
Ион Zn2+ |
Метронидазол |
ZnCl2 |
||
|
0.43 |
0.30 |
0.43 |
0.30 |
||
|
Комплекса с Ag+ |
свидетелей |
||||
|
0,43 |
0,45 |
0,43 |
0,45 |
Таблица 5. Величины Rf комплекса диоксидина с ионами металлов
|
Система растворителей |
Величина rf |
||||
|
Комплекса с Cu2+ |
свидетелей |
||||
|
Диметил-формамид: Хлороформ 2:8 |
Диоксидин |
Ион Cu2+ |
Диоксидин |
CuSO4 |
|
|
0,46 |
0,27 |
0,46 |
0,27 |
||
|
Комплекса с NI2+ |
свидетелей |
||||
|
Диоксидин |
Ион NI2+ |
Диоксидин |
NiSO4 |
||
|
0.46 |
0.38 |
0.46 |
0.38 |
Разработанный метод позволяет разделить и идентифицировать синтезированные нами биокомплексы метронидазола и диоксидина с ионами металлов.
Библиографический список
тонкослойный хроматография катализатор биохимический
1. Изучение противомикробной активности полимерных форм, содержащих комплексные соединения меди и железа / Самофалов А.С. [и др.] // Современные проблемы науки и образования. - 2013. - № 1. - С. 352.
2. Патент на изобретение RUS 2386952. Способ количественного определения ионов меди / А.В. Заикин, М.В. Рымарова, Л.П. Лазурина // Опубл. 20.04.10, Бюл. № 11. - 5 с.
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Использование тонкослойной хроматографии в качественном анализе. Выбор проявляющего растворителя (подвижной фазы). Нанесение раствора образца на пластинку. Двумерная хроматография на бумаге. Приготовление подвижной фазы, нанесение вещества и проявление.
курсовая работа [1,1 M], добавлен 01.12.2015Сущность метода хроматографии, история его разработки и виды. Сферы применения хроматографии, приборы или установки для хроматографического разделения и анализа смесей веществ. Схема газового хроматографа, его основные системы и принцип действия.
реферат [130,2 K], добавлен 25.09.2010Общая характеристика процесса хроматографии. Физико-химические основы тонкослойной хроматографии, классификация методов анализа. Варианты хроматографии по фазовым состояниям. Контроль качества пищевых продуктов посредством метода ТСХ, оборудование.
курсовая работа [371,8 K], добавлен 27.12.2009Влияние на организм человека спайса. Изучение физиологических и психологических эффектов, вызываемых употреблением синтетических катинонов. Анализ растительных смесей. Исследование наркотических средств методом тонкослойной хроматографии и спектроскопии.
реферат [21,0 K], добавлен 05.12.2015Проблема выбора типа разделительной системы, подбор условий использования системы для анализа смеси веществ. Подвижные фазы для ВЭЖХ, ТСХ. Система хранения растворителей. Новый стандарт растворителей для ВЭЖХ, растворители для препаративной хроматографии.
курсовая работа [981,6 K], добавлен 12.01.2010Сущность высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) как метода анализа и разделения сложных примесей. Сорбенты, координационно-насыщенные хелаты; закономерности влияния строения лиганда на поведение хелатов в условиях обращенофазной хроматографии.
реферат [109,8 K], добавлен 11.10.2011Основные направления взаимодействия тетрацианоэтилена с карбонильными соединениями. Алифатические и жирноароматические кетоны и тионы в реакциях. Контроль полноты протекания реакций и чистоты синтезированных соединений методом тонкослойной хроматографии.
дипломная работа [1004,9 K], добавлен 07.02.2013Хроматографическая система - метод разделения и анализа смесей веществ. Механизм разделения веществ по двум признакам. Сорбционные и гельфильтрационные (гельпроникающие) методы. Адсорбционная, распределительная, осадочная и ситовая хроматография.
реферат [207,8 K], добавлен 24.01.2009Строение фосфолипидов, их функциональная роль в клетке. Построение градуировочного графика для определения фосфатидилхолина методом тонкослойной хроматографии. Расчет изотерм сорбции. Влияние кислотности среды на пространственную ориентацию молекул.
дипломная работа [1,3 M], добавлен 13.07.2015Методы качественного анализа веществ. Магнитная сепарация железа и серы и синтез сульфида железа. Флотация, фильтрование и выпаривание смесей. Использование хроматографии как метода разделения и очистки веществ. Физические и химические методы анализа.
реферат [48,3 K], добавлен 15.02.2016Специфика метода жидкостно-жидкостной хроматографии - физико-химического метода разделения и анализа смесей газов, паров, жидкостей или растворенных веществ сорбционными методами в динамических условиях. Распределительная хроматография на бумаге.
курсовая работа [601,2 K], добавлен 13.03.2011Влияние природы газа-носителя и его параметров на качество разделения веществ. Основные требования к газу-носителю. Газовая хроматография с применением паров. Природа неподвижной жидкости. Полярные и неполярные соединения. Образование водородной связи.
реферат [18,5 K], добавлен 10.02.2010Основные требования к растворителям. Элюирующая сила растворителя и элюотропные ряды. Элюотропные серии для адсорбционной хроматографии на силикагеле. Вопрос о чистоте растворителя, адсорбционная очистка методом классической колоночной хроматографии.
реферат [41,5 K], добавлен 12.01.2010Физико-химический метод разделения компонентов сложных смесей газов, паров, жидкостей и растворенных веществ, основанный на использовании сорбционных процессов в динамических условиях. Хроматографический метод. Виды хроматографии. Параметры хроматограммы.
реферат [21,6 K], добавлен 15.02.2009Химическое строение карденолидов. Сила кардиотонического эффекта. Наличие гликозидной связи и лактонного кольца. Разделение гликозидов методами тонкослойной, колоночной и бумажной хроматографии. Качественные реакции на присутствие бутенолидного кольца.
реферат [329,8 K], добавлен 23.08.2013Анализ методов разделения веществ как совокупности характерных для них химических и физических процессов и способов их осуществления: экстракция, мембранный, внутрифазный. Соосаждение — метод концентрирования следовых количеств различных элементов.
курсовая работа [31,8 K], добавлен 16.10.2011Явления, происходящие при хроматографии. Два подхода к объяснению - теория теоретических тарелок и кинетическая теория. Газовая, жидкостная, бумажная хроматография. Ионообменный метод. Случаи применения ионообменной хроматографии. Гельхроматографирование.
реферат [69,4 K], добавлен 24.01.2009Основы метода обращенной газовой хроматографии. Газовая хроматография - универсальный метод качественного и количественного анализа сложных смесей и способ получения отдельных компонентов в чистом виде. Применение обращенной газовой хроматографии.
курсовая работа [28,9 K], добавлен 09.01.2010Комплектные приборы с высокой степенью автоматизации для жидкостной хроматографии. Принципиальная схема жидкостного хроматографа. Современные насосы для жидкостной хроматографии. Устройства для формирования градиента. Инжекторы для ввода пробы, детекторы.
контрольная работа [210,5 K], добавлен 12.01.2010Основные методы разделения и выделения веществ при биохимических исследованиях. Количественное определение белка в сыворотке крови. Химическая природа нуклеопротеидов. Применение единиц СИ для выражения результатов клинико-биохимических исследований.
учебное пособие [4,2 M], добавлен 11.03.2013
