Некоторые вопросы органического электроанализа в биомедицине: от работ Я. Гейровского до микрочипов

Обзор _______________________________________________________________ Будников Г.К. и Евтюгин Г.А.

Размещено на http://www.allbest.ru/

8 ________________ http://butlerov.com/ ________________ ©--Butlerov Communications. 2011. Vol.25. No.8. P.1-8.

Тематический раздел: Физико-химические исследования. Обзор

Подраздел: Аналитическая химия. Регистрационный код публикации: 11-25-8-1

г. Казань. Республика Татарстан. Россия. __________ ©--Бутлеровские сообщения. 2011. Т.25. №8. __________ 1

Некоторые вопросы органического электроанализа в биомедицине: от работ Я. Гейровского до микрочипов

Будников Герман Константинович

Информацию о составе сложных объектов, в которых присутствуют органические компоненты (нейтральные молекулы или соединения, имеющие ионизированные группы), получают с помощью различных методов химического анализа. Среди них широкое распространение получили электрохимические методы, или ЭМА. В настоящее время их объединили понятием электроанализ. Два первых слова заголовка являются, таким образом, ключевыми и отражают область науки аналитическая химия.

История ЭМА прослеживается с середины ХIХ века и с ней можно ознакомиться, например, по ряду книг [1-4], обзоров [5, 6] и статей [7], опубликованных в отечественной литературе. Исторические аспекты ЭМА рассмотрены и в зарубежной литературе, например [8]. Однако она страдает своей неполнотой. В ней крайне редко приводятся ссылки на работы советских и российских электроаналитиков, хорошо известных зарубежным специалистам.

Известно, что каждый метод, входящий в группу ЭМА, имеет свои аналитические и операционные характеристики. История ЭМА - это постоянный поиск путей повышения чувствительности и разрешающей способности определения аналита, в данном случае органического компонента.

Открытие полярографии Я. Гейровским в 1922 г. означало появление новой области ЭМА, в которой основным инструментом становится полярограф, позволяющий регис-трировать поляризационные кривые ртутного капельного электрода (полярограммы на р.к.э.) в испытуемых растворах.

Первое время объектами исследования служили неорганические соединения, так что развитие теории метода было связано с интерпретацией их полярографического поведения. Публикация по полярографии нитробензола [6] вызвала интерес к поведению органических деполяризаторов на р.к.э., а отсюда и к разработке способов их анализа.

Использование стационарного твердого электрода означало переход к вольтам-перометрии, в первую очередь анодной, что для органического анализа оказалось достаточно перспективным.

Почти полвека исследований потребовалось, чтобы показать, что в качестве материала для поляризуемого микроэлектрода в вольтамперометрии можно использовать не только ртуть, но и благородные металлы, в том числе и модифицированные их оксидами, различные углеродистые материалы, пасты и композиты на их основе, и многочисленные другие, так называемые химически модифицированные электроды.

Размеры самих электродов уменьшились в десятки и даже сотни раз, а для достижения воспроизводимости их характеристик стали применять компьютерные технологии обработки сигнала, а также унифицированные способы изготовления, например, трафаретную печать. Если учесть еще исследования по аппаратурной тематике, то есть по совершенствованию приборов (полярографов и вольтамперографов), обеспечивающих надежную регистрацию полезного сигнала по отношению к шуму (помехе) на принципах микроэлектроники, то итоговый объем информации по ЭМА будет выглядеть внушительным.

Современный вольтамперограф мало напоминает набор реостатов и батарей Гейровского. Как правило, это небольшой блок, а иногда и плата, вставляемая в компьютер. Миниатюризация коснулась не только собственно аппаратуры и самих электродов, но и электрохимических ячеек. Это связано с тем, что многие электроды стали использоваться в качестве преобразователя сигнала в интегрированных устройствах, таких как проточные тонкослойные ячейки, лаборатория на чипе или микрофлюидные ячейки.

Миниатюризация подобных систем позволила добиться выдающихся успехов как в области снижения определяемых концентраций аналитов, так и объема потребляемой пробы. Тем самым созданы предпосылки для очередного качественного скачка и перехода к имплантируемым устройствам, сочетающим функции врача-диагноста и лечебного средства. При этом определяемые количества вполне могут спуститься на уровень пико- и фемто-граммов.

Таковы краткие вехи истории развития вольтамперометрии за последние 90 лет. Можно отметить, что периодически эволюцию методов вольтамперометрии концептуально обсуждали на конференциях по ЭМА [9]. Далее, в последнее почти 30-летие вектор ее развития все в большей мере склонялся в сторону определения органических соединений в различных матрицах.

Это генетически связано с проблемами собственно органического анализа, а также актуальными задачами биомедицины и экологии. При этом анализ объектов окружающей среды на содержание тяжелых металлов с применением инверсионной вольтамперометрии остается вполне востребованным, если судить по частоте применения этого метода исоответствующим аттестованным методикам и публикациям в научной печати. В стереотипе обоснования необходимости и выбора электрохимического метода для решения задачи определения следов токсикантов, звучавших рефренов почти в каждой статье, справедливо отмечали способность вольтамперометрии обеспечить определение огромного числа как неорганических, так и органических экологически опасных веществ.

Среди других упоминаемых достоинств можно отметить высокую чувствительность и селективность, быстроту отклика на изменение состава анализируемого объекта, легкость автоматизации и возможность дистанционного управления.

Что важно для экономики анализа, вольтамперометрия не требует дорогостоящего аналитического оборудования и может применяться в стационарных лабораторных и производственных условиях, а также в отрыве от лабораторной базы, как говорят, в поле. Сравнивая возможности при решении различных задач три электроаналитических метода: вольтамперометрию, кулонометрию и потенциометрию, авторы чаще всего останавливают свой выбор на вольтамперометрии как наиболее чувствительном и избирательном методе анализа.

Еще на заре развития полярографии объекты биологии, медицины и фармации привлекали внимание исследователей. В 30-х годах прошлого века чешский исследователь Р. Брдичка обнаружил каталитические волны выделения водорода в аммонийно-аммиачных буферных растворах, содержащих белковые компоненты и соли кобальта. Впоследствии этот метод был применен в медицине как серологическая реакция Брдички для диагностики рака, а затем и других заболеваний. В исследовании этого типа волн большой вклад внесли советские полярографисты ([10], см. в книге по ссылке [6]).

По существу, амперометрический отклик на белковый компонент в условиях полярографии явился первым примером работы по использованию обобщенного показателя в диагностических целях.

Отметим, что развитию биомедицинской и фармацевтической тематики в полярографии способствовал тот факт, что ведущие специалисты этой области исследований в стране создания полярографии в своем базовом образовании имели «фармацевтический компонент».

В последнюю четверть прошлого века интерес в этой области полярографии и вольтамперометрии постепенно переместился на органический анализ, прежде всего объектов окружающей среды, а затем и биомедицины. Конференции по ЭМА в нашей стране, которые упоминались выше, а также и за рубежом отражали эту тенденцию [7, 9]. Заметному развитию этой области анализа способствовали исследования в смежной области физической и органических химии. Речь идет об электрохимии органических соединений (ЭХОС), во второй половине 20-ого века выделившейся в самостоятельное и очень интересное направление науки [11], (cм. также книгу [6]).

Генетическая связь электроаналитической химии и электрохимии органических соединений особенно ярко проявляется в исследованиях особенностей протекания сложных реакций в условиях полярографии и вольтамперометрии. Во второй половине прошлого века конференции по ЭХОС собирали не меньшее число участников, чем конференции по ЭМА.

Без преувеличения можно сказать, что ЭХОС «генерировала» полезные идеи для органической вольтамперометрии как метода анализа, что способствовало его развитию. В рамках самого органического анализа с применением ЭМА среди биологически активных соединений заметный интерес получили сначала так называемые нейротрансмиттеры - вещества, участвующие в передаче нервного импульса, а затем антиоксиданты как объекты нейрохимии и биоаналитической химии.

Исследование антиоксидантов начинается с соединений, легко окисляющихся в условиях анодной вольтамперометрии. Данный метод имеет определенные технические преимущества перед полярографией, поскольку не требует предварительного удаления кислорода воздуха [12].

Первыми стали определять вещества, используемые в составе проявителей для фотографии. От проявляющих веществ затем перешли к биогенным аминам, а затем и к самим антиоксидантам [13].

Среди неравновесных методов анализа достаточно информативной оказалась гальваностатическая кулонометрия, особенно когда речь зашла об интегральной, то есть совокупной оценке антиоксидантной емкости (или активности, АОА) [14]. К слову сказать, терминология здесь не вполне устоялась. Отметим только, что под этими терминами имеется в виду общее количество окислителя, потребное на реакцию с суммой антиоксидантов в пробе.

Кулонометрический способ позволил проводить клинический контроль состояния пациента по антиоксиднатной емкости крови, измеряемой в процессе гемодиализа. Полагают [14, 15], что использование ЭМА в оценке оксидантов и совокупного антиоксидантного баланса организма максимально полно отвечает природе окислительно-восстановительных реакций, лежащих в основе развития окислительного стресса. Поэтому применение ЭМА здесь не только оправдано, но и правомерно с точки зрения химизма процесса.

Общий, хотя и не вполне полный взгляд на обсуждаемую проблему можно получить из Интернета, введя в поисковую систему ключевые слова заголовка обзора. В 49600 стр. для ЭМА 1320 стр. относятся к органическому электроанализу.

Это, конечно, перебор. Существует область методов анализа, в которой используются принципы биомиметики, то есть подражание процессам, протекающим в живых организмах. В аналитических устройствах этого типа отклик формируется на стадии биохимического распознавания субстрата (аналита). Достижения в этой междисциплинарной области знания отражены во многих работах, в частности, в [16, 17]. В последних публикациях внимание уделено биосенсорам, основанным на электрохимических преобразователях сигнала.

По частоте применения именно они занимают видное место. В нашей стране интенсивные исследования в области биосенсоров проводятся в ряде лабораторий [15-17]. Принципы биосенсорики и применение этого вида сенсоров для решения различных задач нашли отражение в ряде обзоров и монографий.

Исторически первым биосенсором был датчик для определения глюкозы, разработанный американскими учеными на основе амперометрического датчика на кислород. Он состоял из платинового электрода, покрытого газопроницаемой мембраной.

Молекулы кислорода, проходя через мембрану, восстанавливались на электроде. Регистрируемый при этом катодный ток был пропорционален парциальному давлению растворенного кислорода, то есть его концентрации в растворе. В глюкозном электроде, как сначала назвали первый биосенсор, поверх газопроницаемой мембраной закрепляли еще две диализные мембраны, между которыми находился небольшой объем фермента глюкозо-оксидазы.

Фермент катализировал реакцию окисления глюкозы кислородом, в результате его концентрация снижалась. Относительное снижение тока кислородного датчика было пропорционально концентрации глюкозы. До появления биосенсоров концентрацию глюкозы измеряли с помощью поляриметров. Это был очень громоздкий и неудобный способ, плохо применимый в анализе биологически жидкостей.

Появление глюкозных биосенсоров произвело революционный эффект: в течение буквально десяти-пятнадцати лет появилось множество коммерчески успешных проектов, а начиная с 1987 года, открылось массовое производство приборов, предназначенных для использования в быту. О масштабах производства можно судить о том, что стоимость кампании MediSense, специализировавшейся на производстве таких диагностических приборов, при ее покупке концерном Abbott составило немногим менее одного миллиарда долларов США.

После глюкозных сенсоров в течение 15-20 лет наблюдалось взрывное увеличение числа работ, посвященных вольтамперометрическим биосенсорам.

Сначала происходило экстенсивное расширение числа определяемых соединений и соответствующих им ферментов, включаемых в состав биосенсоров. Безусловно, превали-ровала медицинская тематика. Появились сенсоры на молочную кислоту, биогенные амины, липиды, этанол, аминокислоты. Далеко не все из них оказались востребованы промышленностью, но был получен большой опыт по конструированию биосенсоров, особенно в части организации электрохимического отклика. И здесь необходимо отметить электрохимическую часть исследования, во многом определявшую конечный успех исследований.

Появились химически модифицированные электроды, содержавшие в своем составе оксиды и органические комплексы переменно-валентных металлов, специально созданные для определения биологически активных субстратов, необходимых для биосенсоров. Речь идет об определении кофакторов, участвующих в переносе электрона, - NADH, FADH2, белков-цитохромов, а также пероксида водорода, продукта биохимического окисления многих биологически активных соединений. Биосенсорика дала мощный импульс таких исследования, результатом чего, например, стало устойчивое появление специализированных статей, посвященных биосенсорам, в классических научных электрохимических журналах.

Вторым важным импульсом развитию биосенсорики послужил интерес общества к экологическим проблемам, четко обозначившийся в 1980-х года. [18]. В этот период был приобретен богатый опыт создания различных биосенсоров для определения пестицидов и других загрязнителей как объектов среды обитания, как правило, органического характера. В книге [19] можно познакомиться с тем, как эта тематика развивалась в Казанском университете, практически впервые в нашей стране.

Важным фактором, определившим прогресс в этой области, стала конверсия. Иссле-дования военных химиков, связанные с определением боевых отравляющих веществ, позволили достаточно быстро решить вопросы биохимического определения пестицидов, что привело к появлению ряда коммерчески доступных биосенсорных устройств - анализаторов, предназначенных для оценки степени загрязнения объектов окружающей среды (поверхностные воды, почвы) и продуктов питания. В последние годы такие исследования стимулируются также необходимостью противодействовать угрозам терроризма. Памятно массовое отравление людей в Токийском метрополитене, вызванное кустарно синтезированным зарином, использованным сектой "Аум Сенрике".

Тенденции развития электрохимической составляющей ферментных сенсоров продол-жаются и по сей день, многие из предложенных модификаторов - сложные, многоярусные конструкции, сочетающие уже не только электрохимические стадии, но и регулируемую адсорбцию и направленные перенос реагентов внутри пленки. В качестве примера можно привести различные сочетания электрополимеризованных материалов, углеродных нанотрубок, наночастиц металлов. Такие ухищрения направлены и на повышение чувствительности определения за счет увеличения удельной плотности распределения актив-ных центров, и на дальнейшее повышение избирательности электродной реакции. Казанский университет имеет большой задел в подобного рода исследованиях.

Разрабатываемые здесь биосенсоры используют все современные достижения электро-аналитической химии. Среди последних результатов можно отметить использование металлоцианатных комплексов в сочетании с полимерными мембранами и наночастицами металлов и их оксидов для повышения чувствительности определения биогенных аминов и серосодержащих аминокислот и тиолов. Такие преобразователи сигнала востребованы в составе ферментных сенсоров на основе аминооксидаз, и гидролитических ферментов. Разрабатываются полимерные покрытия на основе молекулярных отпечатков для сорбционного концентрирования аналитов.

Используются гибридные медиаторы электронного переноса на основе углеродных нанотрубок и комплексов металлов. Интересно отметить, что дизайн таких модифицирующих слоев учитывает не только электрохимический компонент, то есть способность облегчить реакцию окисления или восстановления определяемого соединения, но и возможную совместимость с биологическими компонентами. Для этого рассматриваются возможности совмещения нанесения компонентов одновременно с иммобилизацией белка, а также способы, использующие элементы самосборки и автоагрегации, позволяющие получать поверхностные элементы регулярного строения. Последнее обстоятельство позволяет также добиться воспроизводимости сигнала биосенсора и упростить технологию модификации преобразователя сигнала.

Ферментные сенсоры - не единственные представители биосенсоров, использующие вольтамперометрические принципы регистрации сигнала.

Можно привести в качестве примера ДНК-сенсоры для медицинской диагностики. Например, предложено с их помощью определять белки, взаимодействующие с ДНК [20]. Для этого использованы золотые и стеклоуглеродные электроды, модифицированные электропо-лимеризованными материалами, в частности, полимерами на основе анилина и фенотиазиновых красителей. Они выполняли роль матрицы для иммобилизации элементов биораспознавания либо выполняли функцию гетерогенных медиаторов электронного переноса, участвуя в формировании аналитического сигнала. Таким образом можно определять аутоиммунные антитела - биомаркеры заболеваний, связанных с нарушениями иммунного статуса человека. [20].

Другой пример электрохимических биосенсоров - аптасенсоры. В качестве биоак-тивного компонента аптасенсоры включают синтетические олигонуклеотиды - аптамеры. Их получают путем комбинаторной химии, сочетая синтез олигонуклеотидов произвольного строения с их последующим разделением путем аффинной хроматографии на производных аналита.

В данном случае в качестве определяемого вещества выступал тромбин. Он имеет два центра связывания, участвующих в свертывании крови, один из них - фибриноген-специ-фичный участок - способен также образовывать комплексы с аптамером. Для изучения реакции переноса электрона модифицированном электроде использовали метод измерения электрохимического импеданса, позволяющий определять степень разделения заряда в поверхностном слое и легкость переноса электрона между электродом и специально добавляемым в раствор индикаторным ионом - феррицианидом.

Установлено существенное улучшение характеристик связывания тромбина, достига-емое за счет иммобилизации аптамеров поверх электрополимеризованных покрытий и углеродных нанотрубок по сравнению с аналогичными измерениями на гладких электродах или при использовании традиционного авидин-биотинового связывания. Показана возможность использования сходных принципов измерения сигнала для определения прионов.

Интересно, что подходы к созданию гибридных покрытий с участием биологических компонентов, полимеров и медиаторов электронного переноса оказались вполне подхо-дящими и для некоторых других способов регистрации сигнала.

Помимо упоминавшихся импедиметрических и потенциометрических биосенсоров, были разработаны биосенсоры на основе пьезокварцевых резонаторов. Достигнуты пределы обнаружения тромбина менее 1 наномоль/л.

В биосенсорах или биосенсорных устройствах другого типа используются иммунохи-мические взаимодействия (раздел 2 в [20]). В них происходит регистрация образования комплекса антиген-антитело. Такая реакция - часть иммунной системы живого организма, обычно отличается очень высокой специфичностью, что и предопределяет ее аналитическое значение.

Разработано большое число иммуносенсоров различного типа и назначения. Они позволяют проводить определение сложных органических субстанций, например, бактерии-альных антигенов и антител против патогенных и условно патогенных микроорганизмов [16], фитопатогенных грибов, а также проводить мониторинг остаточных количеств лекарственных соединений в биологических жидкостях, объектах окружающей среды и пищевых продуктах. В этих биосенсорных устройствах преобразователями сигнала являются печатные графитовые и металлизированные электроды. При этом на одном носителе может располагаться несколько - 4 и более - электродов с общим электродом сравнения и противоэлектродом.

Взаимодействие антиген-антитело регистрируют по характерным изменениям электро-химиических характеристик сенсора, а также с помощью меток - ферментов или электрохимически активных меток, внедренных в соответствующий реагент. В качестве биометки (и, соответственно, биокаталитической реакции) возможно использование различных ферментов. Наиболее часто используют щелочную фосфатазу, реже - пероксидазу, а также некоторые другие ферменты. Оказалось, что в этом плане очень подходящим ферментом является холинэстераза.

Одним из ее преимуществ является то, что электрохимические реакции с ее участием достаточно хорошо изучены, холинэстераза относится к числу доступных и относительно недорогих ферментов.

Как и в случае аптасенсоров, характеристики электрохимических иммуносенсоров хорошо согласуются с параметрами определения иммунореагентов на основе других принципов регистрации сигнала.

Так, для определения маркеров, связанных с онкологическими, сердечнососудистыми, аутоиммунными или аллергическими заболеваниями, с инфекциями применяют пьезоквар-цевые иммуносенсоры. Возможности устройств этого типа для ранней клинической диагностики подробно рассмотрены в главе [16] упомянутой книги [20]. Интерес представляет и поляризационный флуоресцентный иммуноанализ на содержание органических низкомолекулярных активных в биологическом отношении компонентов (см., например, главу 11 в [20]).

Разработаны также новые способы регистрации взаимодействий, связанных с микро-организмами. Обычно для этого используют так называемые респираторные тесты, в которых тем или иным способом фиксируют потребление кислорода анаэробными организмами. Это универсальные системы детектирования, равно пригодные для определения отдельных соединений и бактерицидных свойств объекта контроля. Как правило, подобные системы используют в микробиологической промышленности при контроле производства пенициллина, крахмала, целлобиозы, этанола и ряда других низкомолекулярных соединений.

Нами совместно с кафедрой биохимии предложено использовать в качестве микро-биологической составляющей системы клетки, модифицированные наноразмерными частицами. В зависимости от их природы они позволяют либо повысить чувствительность регистрации процессов дыхания, либо оценивать жизнеспособность клеток в неблагоприятных условиях, например, при действии на них антибактериальных препаратов или экстремальных температур. Подобные системы можно рассматривать как подобие тестов токсичности, в которых устанавливают соотношение живых и мертвых клеток культур тканей или сообществ микроорганизмов как ответ на химическое воздействие токсиканта. Подобные эксперименты распространены в токсикологии как простой способ установления потенции-альной токсичности нового химического препарата. Другой подход - модификация одноклеточных водорослей магнитными наночастицами.

Они используются для простой и быстрой иммобилизации частиц на электроде. Для этого достаточно под него подложить магнит. Активность водорослей определяют по количеству выделяющегося при фотосинтезе кислорода или по скорости переноса электрона в дыхательной цепи в присутствии синтетического акцептора электронов, обычно ферри-цианид-иона. Назначение подобной тест-системы то же - определение жизнеспособности клеток, гербицидного действия препаратов и загрязнения водной среды промышленными отходами или альгицидами.

Одно из современных направлений в аналитическом приборостроении - это миниа-тюризация анализа. Реализовано два направления - матричные системы (собственно чип) и микрофлюидные системы, включающие чип как составную часть наряду с микроканалами, реакторами, смесителями, насосами, фильтрами.

Эти устройства, размещенные на одном носителе и имеющие общую систему управления и обработки данных, называют "лабораториями на чипе" (Lab-on-a-Chip). Огромное количество публикаций последних лет посвящено разработке и применению микрочиповых систем для химического и биохимического анализа. Их главное достоинство состоит в автоматизации основных стадий анализа, включая стадии пробоотбора, пробопод-готовки, разделения и концентрирования, введения и смешивания реагентов с определяемым веществом и собственно анализа.

Интеграция микрочипового устройства с проточно-инжекционными системами и капиллярным зонным электрофорезом обеспечивает непрерывность его работы. Изготовление компонентов микрофлюидных систем имеет много общего с технологиями микроэлектроники за тем исключением, что все основные структурные элементы чаще всего исполняют в полимерных материалах.

Конечно, классическая вольтамперометрия претерпевает очень большие изменения при переходе к микрофлюидным системам и к нетрадиционным условия массопереноса. Меняются не только форма вольтамперных кривых, но и характер влияния многих параметров, таких как скорость потока и скорость сканирования потенциала. Существенно возрастает проблема шума и его программного или аппаратного подавления. Все эти вопросы нуждаются в последующем развитии и адекватном описании.

Говоря о ближайших перспективах развития методов вольтамперометрического анализа, нельзя не упомянуть о химически модифицированных электродах [21]. Мы уже говорили о них, когда речь шла о развитии биосенсоров. Сейчас в мире наблюдается просто бум в области электрокаталитических систем, что связано с уникальными возможностями расширения динамического диапазоне определяемых концентраций, а также селективности отклика.

Модифицированные сенсоры используют в качестве электрохимических детекторов в проточных методах анализа (ВЭЖХ и ПИА) [22], в качестве имплантируемых электродов в электрофизиологических и биомедицинских исследованиях, как преобразователи сигнала медиаторных биосенсоров. Сейчас в рамках развития электрокатализа повышенный интерес вызывают наноструктурированные материалы, такие как нанодисперсии благородных металлов или их комплексов, наноуглеродные материалы, включая недавно открытый графен. Здесь можно ожидать проявления новых свойств, связанных и с изменением удельной поверхности электрода, и с проявлением различных наноэффектов, например, отказом от эквипотенциальности поверхности рабочего электрода.

Другое важное направление - развитие средств электрохимических измерений в неводных средах, включая такие экстремальные условия, как дизельное топливо или сверхкритические жидкости.

Здесь требуются свои особые подходы в создании специализированных ячеек и в соответствующей модификации электродов. Например, использование ионных жидкостей и высокотемпературных электролитов позволило существенно раздвинуть температурные ин-тервалы функционирования электрохимических сенсоров, применение золь-гель технологий и пластиковых электропроводящих материалов - смягчило требования к растворителям и агрессивным компонентам среды.

Обобщая сказанное, можно сказать: за несколько десятилетий пройден большой путь от первых экспериментов по регистрации каталитических волн водорода на ртутном электроде до одноразовых электродов-сенсоров, изготовленных с применением продуктов нано-технологий. Несмотря на скепсис в отношении электрохимических методов анализа, иногда проявляемый на совещаниях и конференциях, число статей соответствующей тематике растет по экспоненте и не имеет тенденции к сокращению такого роста. Мы вправе ожидать новых прорывных исследований в области электроанализа. электрод полярография электроаналитический органический

Литература

[1] Лопатин Б.А. Теоретические основы электрохимических методов анализа. М.: Высшая школа. 1975. 295с.

[2] Галюс З.В. Теоретические основы электрохимического анализа. М.: Мир. 1974. 277с.

[3] Плембек Дж. Электрохимические методы анализа. Основы теории и применение. М.: Мир. 1985. 285с.

[4] Будников Г.К., Улахович Н.А., Медянцева Э.П. Основы электроаналитической химии. Казань: Изд-во КГУ. 1986. 288с.

[5] Будников Г.К. Успехи химии. 1964. Т.33. №11. С.1371.

[6] Страдынь Я.П. Полярография. Проблемы и перспективы. Рига: Изд-во «Зинатне». 1977. С.7.

[7] Золотов Ю.А. Журн. аналит. химии. 1994. Т.49. №9. С.901.

[8] K.-H. Lubert, K. Kalcher. Electroanalysis. 2010. Vol.22. No,17-18. C.1937.

[9] Будников Г.К., Широкова В.И. Журн. аналит. химии. 2009. Т.64. №12. С.1309.

[10] Торопова В.Ф., Будников Г.К., Медянцева Э.П. Полярография. Проблемы и перспективы. Рига: Изд-во «Зинатне». 1977. С.216.

[11] Каргин Ю.М., Будников Г.К. Очерки истории электрохимии органических соединений в Казани. Казань: Изд-во КГУ. 2006. 154с.

[12] Гороховский В.М. Бутлеровские сообщения. 2005. Т.6. №1. С.81.

[13] Будников Г.К., Зиятдинова Г.К. Журн. аналит. химии. 200 . Т.64. №12. С.1309.

[14] Зиятдинова Г.К., Будников Г.К. Проблемы аналитической химии. Химический анализ в медицинской диагностике. М.: Наука. 2010. Т.11. С.66.

[15] Брайнина Х.З., Герасимова Е.Л., Казаков Я.Е., Ходос М.Я. Проблемы аналитической химии. Химический анализ в медицинской диагностике. М.: Наука. 2010. Т.11. С.132.

[16] Медянцева Э.П., Будников Г.К. В кн. Проблемы аналитической химии. Биохимические методы анализа. М.: Наука. 2010. Т.12. С.243.

[17] Карякина Е.Е., Карякин А.А. В кн. Проблемы аналитической химии. Биохимические методы анализа. М.: Наука. 2010. Т.12. С.93.

[18] Евтюгин Г.А, Будников Г.К., Никольская Е.Б. Успехи химии. 1999. Т.68. С.1142.

[19] Будников Г.К. Аналитическая химия в Казанском университете. Фрагменты истории. Казань: Изд-во Казанского университета. 2003. 238с.

[20] Дзантиев Б.Б. Проблемы аналитической химии. Биохимические методы анализа. М.: Наука. 2010. Т.12. С.391.

[21] Будников Г.К., Г.А.Евтюгин Г.А., Майстренко В.Н. Модифицированные электроды для вольтамперометрии в химии, биологии и медицине. М.: БИНОМ. 2010. 416с.

[22] Шайдарова Л.Г., Будников Г.К. Журн. аналит. химии. 2009. Т.64. №12. С.1309.

Размещено на Allbest.ru