Влияние некоторых новых координационных соединений меди на показатели гемограммы у крыс

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Влияние некоторых новых координационных соединений меди на показатели гемограммы у крыс

Швец И.

Аннотация

Проанализировали влияние ряда новых координационных соединений меди, производных аллилтиосемикарбазoнов - CMG-41, TIA-123, TIA-160 и производных фенилтиосемикарбазoнов - CMT-67, CMC-34, CMJ-33 на показатели гемограммы периферической крови у крыс при парентеральном введении в подострых опытах. Aнализ преобладающего вектора действия показал, что производные аллилтиосемикарбазoнов - CMG-41, TIA-123, TIA-160 оказывают умеренное стимулирующее влияние, а производные фенилтиосемикарбазoнов - CMT-67, CMC-34, CMJ-33, оказывают слабо выраженное депрессирующее влияние на исследуемые параметры гомеостаза, причем наибольший вектор депрессирующего влияния (66% от показателя контроля) оказал препарат CMT-67. Однако, эти изменения были статистически не достоверными. Установлено стимулирующее влияние препарата TIA-160 на показатель тромбокрита - индекс PCT (р<0,05).

Результаты этого исследования показывают, что координационные соединения меди (аллилтиосемикарбазиновые производные - CMG-41, TIA-123, TIA-160) и фенилтиосемикарбазиновые производные - CMT-67, CMC-34, CMJ-33) на все изученные параметры лейкоцитов, эритроцитов, тромбоцитов (WBC, RBC, HCT, MCV, PLT, MPV, P-LCR, PCT) не оказывали повреждающего действия, что вселяет надежду на положительный эффект при более глубоком исследовании влияния этих препаратов на иммунологическую реактивность, воспалительные реакции и другие биохимические процессы, происходящие в организме.

Ключевые слова: координационные соединения меди, гемограмма, параметры лейкоцитов, эритроцитов, тромбоцитов.

The authors have analyzed the effect of several new coordination compounds of copper, derivatives of allylthiosemicarbazones - CMG-41, TIA-123, TIA-160 and derivatives of phenylthiosemicarbazones - CMT-67, CMC-34, CMJ-33 on the hemogram of peripheral blood in rats when administered parenterally in subacute experiments. Analysis of the predominant action vector showed that the derivatives of allylthiosemicarbazones - CMG-41, TIA-123, TIA-160 have a moderate stimulating effect, and the derivatives of phenylthiosemicarbazones - CMT-67, CMC-34, CMJ-33, have a weakly expressed depressive effect on the studied parameters of homeostasis, with the highest vector of depressing impact (66% of the control index) had CMT-67. However, these changes were not statistically significant. The stimulating effect of TIA-160 on the thrombocritus index - PCT index (p <0.05) was established.

The results of this study show that coordination copper compounds (allylthiosemicarbazine derivatives - CMG-41, TIA-123, TIA-160 and phenylthiosemicarbazine derivatives - CMT-67, CMC-34, CMJ-33) for all the studied parameters of leukocytes, erythrocytes, platelets (WBC, RBC, HCT, MCV, PLT, MPV, P-LCR, PCT) did not have a damaging effect, which gives hope for a positive effect with a more in-depth study of the effect of these drugs on immunological reactivity, inflammatory reactions and other biochemical processes occurring in the body.

Keywords: copper coordination compounds, hemogram, leukocyte, erythrocyte, platelet parameters.

Актуальность исследования

Поиск новых, безвредных средств профилактики и лечения различных заболеваний, в частности онкологических заболеваний, представляет всегда особый интерес. Длительное лечение, особенно при хронических состояниях, может сопровождаться риском развития различных осложнений со стороны органов кроветворения - гемопоэза. В последние несколько лет особый интерес представляет изучение металлоорганических координационных соединений, синтезированных на кафедре неорганической химии Молдавского Государственного Университета РМ, в связи с их противоопухолевыми, антимикробными, иммуномодулирующими и антиоксидантными свойствами. В исследованиях последних лет выявлены тесные функциональные взаимосвязи между системой иммунитета и гемограммы практически во всех физиологических и патологических процессах. Сегодня не вызывают сомнения факты, подтверждающие роль эритроцитов и тромбоцитов в воспалительных реакциях, а нейтрофилы принимают участие в свертывании крови и фибринолизе. Как реакция стресса, так и воспаление сопровождаются содружественной реакцией всех систем биологической защиты человека - системы иммунитета, гемостаза, комплемента, фагоцитоз и других. Поэтому причиной разнообразия течения воспалительных реакций является то или иное соотношение активности факторов систем биологической защиты.

Установлено, что зрелые эритроциты и тромбоциты несут на себе рецепторы, которые позволяют им, скорее всего неспецифически, сорбировать, концентрировать и модифицировать различные биологические активные вещества (бактерии, антигены, митогены, медиаторы, гормоны и т.п.) и, представляя их лимфоцитам и макрофагам, оказывать воздействие на лимфопролиферацию, фагоцитоз, доиммунные реакции, то есть на иммунный ответ в целом, что подтверждает важную роль этих клеток в регуляции иммуногенеза [2], [1].

Воспалительные реакции играют ключевую роль на разных стадиях опухолевого процесса - в канцерогенезе, прогрессировании и метастазировании, а также в устойчивости к лечению, а тромбоциты, кроме влияния на гемостаз - модулируют воспалительные реакции и иммунный ответ, усиливая фагоцитарные реакции и обладают бактерицидной активностью.

Вместе с тем влияние новых металлоорганических координационных соединений на здоровый организм, в том числе на показатели периферической крови не было изучено.

Цель исследования

изучение влияние ряда новых отечественных координационных соединений меди на показатели гемограммы периферической крови у крыс при парентеральном введении в подострых опытах.

Материалы и методы

В эксперименте было использовано 60 половозрелых крыс самцов линии Wistar с массой тела 130-230 г.

Исследование было одобрено Комитетом по этике исследований ГУМФ «Николае Тестемицану» (положительное заключение № 43 от 18.06.2015). фенилтиосемикарбазoн гемограмма аллилтиосемикарбазoн

Животные содержались в стандартных условиях вивария и были разделены на следующие группы:

· контрольная группа - 6 практически здоровых животных;

· опытная группа включала 54 животных, которым вводились 9 биологически активных препаратов.

Препараты классифицировались по следующим группам:

· производные аллилтиосемикарбазoнов - CMG-41, TIA-123, TIA-160;

· производные фенилтиосемикарбазoнов - CMT-67, CMC-34, CMJ-33.

Исследуемые вещества растворялись в физиологическом растворе в необходимом объёме и вводились животным ежедневно внутримышечно в течение 30 дней. Дозировка препаратов составила 1,0 mg вещества на 1 kg массы тела животного.

На 31 день эксперимента животные были умерщвлены согласно этическим нормам и требованиям к работе с лабораторными животными. Материал для исследования - периферическая кровь была собрана в пробирки, которые содержали в качестве антикоагулянта раствор 6% K₄-EDTA с pH 7,4. Гемограмма была исследована с помощью гемоанализатора PCE-210, фирма ERMA, Япония.

Полученные количественные данные оценивались методами описательной статистики: подсчитывались средние значения и стандартные отклонения. Межгрупповые различия анализировали непараметрическими методами с использованием критерия Манн-Уитни, а также критерия Стьюдента. Различия определяли при уровне значимости 0,05.

Результаты и обсуждения исследования

Для начала мы проанализировали вектор действия изучаемых препаратов:

· стимулирующее влияние - увеличение показателя до 120% от показателя контроля;

· депрессирующее влияние - уменьшение показателя до 80% от показателя контроля;

· без влияния - показатель в пределах от 80 до 120%% от показателя контроля.

Таким образом (таблица 1), препараты производных аллилтиосемикарбазoнов - CMG-41, TIA-123, TIA-160 в 33,3% случаях оказывали влияние с вектором в сторону стимуляции, не отмечено ни одного случая вектора действия в сторону депрессии и, в 66,7% случаев исследуемые препараты не влияли на изучаемые показатели.

Производные фенилтиосемикарбазoнов - CMT-67, CMC-34, CMJ-33, наоборот, в 4,2% случаев имели вектор влияния в сторону депрессии, в 95,8% случаев исследуемые препараты не влияли на изучаемые показатели, и ни в одном случае не отмечено вектора влияния в сторону стимуляции.

Таблица 1 - Вектор действия исследуемых препаратов

Это позволяет нам сделать предварительный вывод, что производные аллилтиосемикарбазoнов - CMG-41, TIA-123, TIA-160 оказывают умеренное стимулирующее влияние на исследуемые параметры гемограммы, а производные фенилтиосемикарбазoнов - CMT-67, CMC-34, CMJ-33, оказывают слабо выраженное депрессирующее влияние на исследуемые параметры гемограммы.

Таблица 2 - Влияние координационных соединений меди (аллилтиосемикарбазиновых производных) на показатели гемограммы у крыс

Примечание:* - достоверная разница по сравнению с показателями контроля p<0,05

Результаты эксперимента (таблица 2) показали, что все три координационные соединения меди (аллилтиосемикарбазиновые производные - CMG-41, TIA-123, TIA-160) на содержание лейкоцитов (WBC) действовали стимулирующим образом. Влияние (таблица 2) координационных соединений меди (фенилтиосемикарбазиновых производных - CMT-67, CMC-34, CMJ-33) изменялось и в сторону увеличения (CMC-34) и в сторону снижения (CMT-67; CMJ-33). Наибольшее стимулирующее влияние (124% от показателя контроля) оказал препарат CMG-41 и наибольшее депрессирующее влияние (66% от показателя контроля) оказал препарат CMT-67. Однако, все эти изменения были статистически недостоверными.

Координационные (таблица 2) соединения меди (аллилтиосемикарбазиновые производные - CMG-41, TIA-123) на содержание эритроцитов (RBC) действовали стимулирующим образом, а препарат (TIA-160) - депрессирующим образом. Влияние (таблица 3) всех трех координационных соединений меди (фенилтиосемикарбазиновые производные - CMT-67, CMC-34, CMJ-33) изменялось и в сторону увеличения. Наибольшее стимулирующее влияние (120% от показателя контроля) оказал препараты CMG-41 и TIA-123, наибольшее депрессирующее влияние (97% от показателя контроля) оказал препарат TIA-160. Статистическая достоверность изменения параметров не обнаруживалась.

Таблица 3 - Влияние координационных соединений меди (фенилтиосемикарбазиновых производных) на показатели гемограммы у крыс

Под термином гематокрит (HCT) подразумевается показатель, который определяет отношение суммарного объёма всех форменных элементов (эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов) к общему объёму крови. Все изученные препараты как аллилтиосемикарбазиновые производные меди - CMG-41, TIA-123, так и фенилтиосемикарбазиновые производные - CMT-67, CMC-34, CMJ-33 (таблица 3) действовали на показатели гематокрита стимулирующим образом. Наиболее сильное действие оказал препарат CMC-34 (118% от показателя контроля), а самое слабое действие - препарат CMJ-33 (103% от показателя контроля), без статистической достоверности изменений показателей.

Испытываемые препараты обеих групп практически не влияют на такой показатель как MCV- средний объём эритроцита, который варьирует в пределах нормы. Наиболее сильное действие оказал препарат TIA-160 (109% от показателя контроля), а самое слабое действие - препарат TIA-123 (97% от показателя контроля), но эти изменения не достигали степени достоверности.

Проведенные исследования показали, что все три координационные соединения меди (аллилтиосемикарбазиновые производные - CMG-41, TIA-123, TIA-160) на содержание тромбоцитов (PLT) действовали стимулирующим образом. Влияние (таблица 2-3) координационных соединений меди (фенилтиосемикарбазиновых производных - CMT-67, CMC-34, CMJ-33) изменялось и в сторону снижения (CMC-34) и в сторону повышения (CMT-67; CMJ-33). Наибольшее стимулирующее влияние (129% от показателя контроля) оказал препарат TIA-160 и наибольшее депрессирующее влияние (91% от показателя контроля) оказал препарат CMC-34. Однако, все эти изменения были статистически не достоверными.

Индекс MPV (средний объем тромбоцитов), который характеризует зрелость кровяных пластинок (таблица 2-3), сильно не отклонялся от аналогичного показателя у здоровых (в пределах 3-2% как в сторону увеличения, так и в сторону уменьшения).

Индекс P-LCR (доля увеличенных тромбоцитов по отношению к клеткам нормального размера, в %) также сильно не отклонялся от аналогичного показателя у здоровых (в пределах 21% как в сторону увеличения, и 3% в сторону уменьшения), без статистической достоверности изменений показателей.

Индекс PCT (тромбокрит, доля объёма цельной крови, занимаемую тромбоцитами в %) по данным проведенного эксперимента (таблица 2) показал, что все три координационных соединения меди (аллилтиосемикарбазиновые производные - CMG-41, TIA-123, TIA-160) на PCT действовали стимулирующим образом. Здесь следует отметить, что стимулирующее влияние препарата TIA-160 было достоверно значимым (р<0,05). Влияние (таблица 3) координационных соединений меди (фенилтиосемикарбазиновых производных - CMT-67, CMC-34, CMJ-33) изменялось и в сторону снижения (CMC-34) и в сторону повышения (CMT-67; CMJ-33). Наибольшее стимулирующее влияние (133% от показателя контроля) оказал препарат TIA-160 и наибольшее депрессирующее влияние (94 от показателя контроля) оказал препарат CMC-34. Однако, все эти изменения изучаемых параметров были статистически не достоверными.

Заключение

Поскольку между показателями иммунитета и гомеостазом существуют тесные функциональные взаимосвязи, мы проанализировали влияние производных аллилтиосемикарбазoнов - CMG-41, TIA-123, TIA-160 и производных фенилтиосемикарбазoнов - CMT-67, CMC-34, CMJ-33 на показатели (лейкоциты, эритроциты, тромбоциты) гемограммы периферической крови у крыс при парентеральном введении в подострых опытах. В основном мы остановились на показателях, характеризующих количество, объем, форму эритроцитов и тромбоцитов, как цельных клеток, которые могли бы функционировать и взаимодействовать с остальными клетками организма (как иммунными, так и не иммунными). Экспресс анализ преобладающего вектора действия показал, что производные аллилтиосемикарбазoнов - CMG-41, TIA-123, TIA-160 оказывают умеренное стимулирующее влияние на исследуемые параметры гомеостаза, а производные фенилтиосемикарбазoнов - CMT-67, CMC-34, CMJ-33, оказывают слабо выраженное депрессирующее влияние на исследуемые параметры гемограммы.

Более подробный анализ каждого изучаемого показателя показал, что координационные соединения меди (аллилтиосемикарбазиновые производные - CMG-41, TIA-123, TIA-160) оказывали влияние только на один показатель - индекс PCT (тромбокрит), причем препарат TIA-160 оказал стимулирующее влияние (р<0,05). Координационные соединения меди (фенилтиосемикарбазиновые производные - CMT-67, CMC-34, CMJ-33) на показатели гемограммы у крыс наибольший вектор депрессирующего влияния (66% от показателя контроля) оказал препарат CMT-67. Однако, эти изменения были статистически не достоверными.

Следовательно, координационные соединения меди (аллилтиосемикарбазиновые производные - CMG-41, TIA-123, TIA-160 и фенилтиосемикарбазиновые производные - CMT-67, CMC-34, CMJ-33 ) на все изученные параметры лейкоцитов, эритроцитов, тромбоцитов (WBC, RBC, HCT, MCV, PLT, MPV, P-LCR, PCT) не оказывали повреждающего действия. Это вселяет надежду на положительный эффект при более глубоком исследовании влияния этих препаратов на иммунологическую реактивность, воспалительные реакции и другие биохимические процессы, происходящие в организме.

Список литературы

1. Кирдей Е.Г. Роль эритроцитов в регуляции и реализации иммунного ответа. Сибирский медицинский журнал / Кирдей Е.Г., Дмитриева Л.A.. 1995, том 3-4, стр. 5-8

2. Оборин В. А. Бактериофиксирующая активность эритроцитов в отношении вакцинных штаммов возбудителей чумы, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза и обоснование ее роли в патогенезе данных заболевании. Дисс., д.м.н. Оборин В. А. 2011, 261 с. URL:http://www.dissercat.com/content/bakteriofiksiruyushchaya-aktivnost-eritrotsitov-v-otnoshenii-vaktsinnykh-shtammov-vozbuditel

3. Обухова О.А. Профилактика тромбозов в онкогинекологии. Онкогинекология / Обухова О.А., Кашия Ш.Р., Курмуков И.А. 2013;2:64-72.

4. Свиридова С.П. Роль тромбоцитов в воспалении и иммунитете. Исследования и практика в медицине / Свиридова С.П., Сомонова О.В., Кашия Ш.Р. т др. 2018, т.5, №3, с. 40-52

5. Туев А.В. Бронхиальная астма (иммунитет, гемостаз, лечение) . Туев А.В., Мишланов В.Ю. Пермь, 2000. 261 с.

6. Hurley S.M. Platelet-dependent neutrophil function is dysregulated by M protein from Streptococcus pyogenes / Hurley SM, Kahn F, Nordenfelt P. and others. Infect Immun. 2015 Sep;83(9):3515-25.

7. Jenne C.N. Platelets: bridging hemostasis, in?ammation, and immunity / Jenne CN, Urrutia R, Kubes P. Int J Lab Hematol. 2013 Jun;35(3):254-61.

8. Karin M. Nuclear factor-kappa B in cancer development and progression / Karin M.. Nature. 2006 May 25;441(7092):431-6.

9. Kerrigan S.W. Platelet-bacterial interactions / Kerrigan SW, Cox D. Cell Mol Life Sci. 2010 Feb;67(4):513-23.

10. Tang Y.Q. Antimicrobial peptides from human platelets / Tang YQ, Yeaman MR, Selsted ME.. Infect Immun. 2002 Dec;70(12):6524-33.

Размещено на Allbest.ru