Биохимическое исследование биоактивной добавки "Grail"

Размещено на http://www.allbest.ru/

БИОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ БИОАКТИВНОЙ ДОБАВКИ “GRAIL”

Abstract: Work on the study of biochemical characteristics of bio-active additives "Grail". Methods for the determination of phenolic compounds, mineral substances and antioxidant activity of a substance have been developed. It is established that the phenolic complex consists of 9 separate flavonoids It is established that the phenolic complex consists of 9 separate flavonoids (gallic, vanillic, jasmin, caffeeinic, cumaric, sinapic acids, catechin and epicatechin), the content of which is 900 mg/l; The mineral composition consists of 18 micro- and macro elements, including so-called "essential" (К, Са, Сг, Мп, Cu, Fe, Co) and "protective" (Se, Zn, I) substances. Theantioxidantactivityofthedrugis765 mg/l.

Keywords: Bioactive additive; Phenolic compounds; Mineral composition; Antioxidant activity;

Научные исследования, результаты которых изложены в настоящих материалах, посвящены биологической апробации биоактивной добавки (далее БД) - многокомпонентного экстракта целебных и ароматических трав [1-5].

Разработка БД была продиктована идеей создать композицию из ценнейших лекарственных трав народной медицины для широкого применения в качестве натурального целебного лечебно-профилактического препарата с общеукрепляющими и адаптогенными свойствами.

Следует отметить, что изыскание биологически активных соединений синтетического и природного происхождения, способствующих поддержанию устойчивости организма в неблагоприятных условиях внешней среды, является одним из постоянных приоритетов медицины.

Проблема создания эффективных биоактивных добавок, тем не менее, далеко не проста. Хотя накопленный опыт в этой области показывает, что свойством повышать неспецифическую резистентность организма и жизненный тонус обладают многие вещества и продукты, многокомпонентного состава, средства выбора для массового потребления до сих пор не созданы.

Как в народной, так и научной медицине хорошо известно о выраженной биологической активности экстрактоврастений семейства аралиевых (женьшень, золотой корень, аралия маньчжурская и др.), являющиеся основой многих фитопрепаратов и лекарственных средств - адаптогенов, нейростимуляторов, иммуномодуляторов, оказывающих разностороннее целебное действия [6].

Такие натуральные экстракты могут широко использоваться не только в виде биоактивных добавок, но и для приготовления безалкогольных напитков, пищевых добавок с целебными свойствами к кондитерским изделиям, хлебопродуктам, концентратам и т.д.

БД, приведенная в данной работе, натуральный продукт с целебными свойствами, можно применять как по специальным медицинским показаниям, так и без них в качестве общеукрепляющего средства.

Для определения фенольных соединений 5 мл БД помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 40 мл 40 % спирта, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 10 мл полученного раствора помещают в коническую колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 750 мл воды, перемешивают и титруют 0,01 М раствором калия перманганата до перехода окраски от синей через сине-зеленую к желтой (индикатор - индигокармин).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,01 М раствора калия перманганата соответствует 0,000582 г окисляемых веществ в пересчете на чайный танин [7-10].

Для определения флавоноидов 100 мл БД помещают в фарфоровою чашку и упаривают на кипящей водяной бане до объема приблизительно 50 мл.

Охлаждают до комнатной температуры, при помощи 10 мл воды количественно переносят в коническую колбу с притертой пробкой вместимостью 250 мл, добавляют 2 г натрия хлорида, 20 мл спирта n- бутилового и экстрагируют в течение 10 мин, перемешивая мягкими вращательными движениями. Разделяют слои с помощью делительной воронки вместимостью 200 мл. Бутанольный (верхний) слой отделяют и фильтруют через бумажный фильтр, содержащий 1 г натрия сернокислого безводного, предварительно смоченный спиртом н-бутиловым.

Экстракцию проводят еще дважды спиртом н-бутиловым порциями по 20 мл.

Бутанольный слой при последней экстракции отделяют декантацией, а затем оставшуюся массу центрифугируют и декантируют верхний слой.

Бутанольные экстракты фильтруют через тот же фильтр и собирают в одну и ту же колбу вместимостью 250 мл, фильтр промывают 5 мл спирта н- бутилового. Экстракты упаривают на кипящей водяной бане под вакуумом при остаточном давлении 12-16 кПа до остаточного объема примерно 0,5 мл.

Остаток растворяют в 10 мл 70 % спирта и количественно переносят с помощью 10 мл 70 % спирта в мерную колбу вместимостью 25 мл, объем раствора доводят 70 % спиртом до метки и перемешиваю (раствор А).

1 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, прибавляют 2 мл 2 % раствора алюминия хлорида, выдерживают 5 мин при комнатной температуре, доводят объем раствора 70 % спиртом до метки и перемешивают.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 412 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения раствор, полученный помещением 2 мл раствора А в мерную колбу вместимостью 10 мл и доведением до метки 70 % спиртом.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора, содержащего 1 мл раствора СО-рутина, который обрабатывают аналогично раствору А.

Содержание суммы флавоноидов в 1мл препарата, в мг, в пересчете на рутин, вычисляют по формуле:

D * m0 * 1-25 * 10 Di * m0 * 100.10.100 * 2 D0 * 800

Где: D - оптическая плотность испытуемого раствора;

D - оптическая плотность раствора СО-рутина;

т0 - масса навески СО-рутина, в миллиграммах.

Микроэлементарный состав БД осуществляли на рентгенно - флуоресцентном спектрометре «Elvax» (США) [11].

АнтиоксидантнуюактивностьопределялипометодуБ'КЛРвНоттингемско м биохимическом университете (Великобритания) с применением тролоксового метода (HPLC) [12].

В табл.1 приводятся результатыколичественные содержания отдельных флавоноидов в БД.

Таблица 1 - Отдельные фенольные вещества БД

Таблица 2 - Мине зальные вещества БД

Из табл.1 следует, что насыщенность продукта данными веществами довольно значительная, что может быть основой его высокой антиокисительной способности.

Результаты концентрации отдельных микроэлементов в БД приведены в табл.2.

Анализируя данные табл.2. можно заключить, что БД насыщен всеми необходимыми для человеческого организма микроэлементами, особенно защитными (Se, Zn, I) и эссенциальными (жизненно важными) - К, Са, Сг, Мп, Си, Fe, Co и т.д., что делает его весьма перспективным средством в нормализации жизненных процессов организма, лечения и профилактики разных видов заболеваний, повышения естественного иммунитета против различных артефакторов внешней среды.

При изучении АОА установлено, что антиоксидантный потенциал БД составляет 765 мг/мл, ввиду чего ее можно отнести к категории мощных антиоксидантов природного происхождения.

Список литературы

1. Мелкадзе Р.Г. Патент Грузии P 6516. Биоактивнаядобавка "Grail". 2016, Б.И.№7

2. Melkadze R. Adaptive properties of bioactive additive "Grail" International Journal of Advanced Multidisciplinary Research, 2(3):2015, pp.53-59

3. Melkadze R. Bioactive additive “Grail'-effective adaptogen."The Modern Scientific Herald" Volume 3, Number 2, 2016,pp.42-57

4. Мелкадзе Р. Бальзам «Грааль» Palmarium Academic Publishing, Саарбрукен,.2012, 134 с.

5. Мелкадзе Р.Г., Кинцурашвили К.М. Адаптогенные свойства бальзама «Грааль»Вестник АН Грузии, Серия «А», Тбилиси,2009, №3-4, Т.35 С.215- 226.

6. Адаптация и адаптогены. Сборник 2 -го симпозиума «Процессы адаптации и биологически активные вещества», ДВНЦ АН СССР, Владивосток, 1977, 141 с.

7. Государственная фармакопея XI, часть1. M.: 1989, 234 с.

8. Государственная фармакопея XI, часть 2. M.: 1989, 322 с.

9. Bond, T. J. Lewis J. R. Davis, A.Davis A. P. Analysis and Purification of Catechins and Their Transformation Products. In: Methods in Polyphenol analysis (edited by C. Santos-Buelga and G. Williamson). UK: Athenaum Press, 2003, pp.229-266.

10. Daniel P. Bonetz M. et al.A new RP-HPLC method for analysis of polyphenols, anthocyanins, and Indole-3Acetic Acid in Wine. Am. J. Enol. Vitic. 2008, 59:1, pp. 106-109.

11. Benzie Iris F.F and Strain, J. J. The ferric reducing ability of plasma (FRAP) as a measure of “Antioxidant Power'. The FRAP assay. J. Analytical Biochemistry,1996 V. 239, pp. 70-76.

Размещено на Allbest.ru