Изъятие следов крови производится разными методами в зависимости от объекта-носителя и свойств самого следа.

Глава 3. Возможности экспертного исследования следов крови

Судебно-медицинские исследования крови имеют особое значение для раскрытия и расследования тяжких преступлений против личности. Поэтому такого рода исследованиям в судебной медицине уделяется повышенное внимание начиная с середины ХХ в.

При обнаружении на месте происшествия следов, образованных веществом, похожим на кровь, перед следствием встает ряд вопросов, ответы на которые позволяют в той или иной степени установить обстоятельства происшествия.

Основной вопрос, который интересует следствие: чья конкретно кровь в следах, изъятых с места происшествия? Кровь на месте происшествия может происходить от жертвы (жертв), преступника (преступников) или лица, не имеющего прямого отношения к событию преступления. Иногда при решении этого вопроса важно бывает исключить возможность происхождения крови от конкретного человека. Например, если устанавливается, что кровь, обнаруженная на месте происшествия, не является кровью жертвы убийства, то тогда весьма вероятно, что это кровь преступника. Это ценный объект в плане идентификации личности.

При исследовании крови могут быть решены и другие важные для следствия вопросы. Например, при выявлении хромосомных нарушений могут быть сделаны предположительные выводы об особенностях человека, чья кровь была обнаружена. Могут быть установлены особенности состава крови и иные ее отличительные характеристики, по которым возможно судить о наличии заболеваний и т.п.

3.1 Виды экспертиз, назначаемых по следам крови, и основные вопросы, подлежащие разрешению

Известно, что в своей совокупности следы крови позволяют восстановить картину значительной части преступного события. По следам крови проводятся различные исследования. Рассмотрим некоторые из них.

Цитологическое исследование способствует решению вопроса о том, кому - мужчине или женщине - может принадлежать кровь, категорически исключая человека с иным генетическим полом. Кроме того, с помощью цитологических методов можно установить региональное происхождение крови, в частности ее менструальную принадлежность, органо-тканевую характеристику. В случае необходимости возможно дифференцировать кровь новорожденного ребенка от крови взрослого человека, определить кровь беременной женщины. Появились методики, позволяющие устанавливать групповую принадлежность крови человека в смешанных следах с кровью различных животных.

Перед судебно-биологической экспертизой могут быть поставлены следующие вопросы:

1) имеется ли кровь на представленном для исследования объекте;

2) принадлежит ли кровь человеку или животному;

3) какова групповая принадлежность крови по различным биологическим системам (АВ0, MNS и др.);

4) каковая половая принадлежность крови;

5) принадлежит кровь взрослому человеку или новорожденному;

6) из какой области тела происходит;

7) какова давность образования кровяного пятна;

8) каково количество излившейся крови, образовавшей данное пятно;

9) не принадлежит ли кровь беременной женщине или роженице;

10) не образовано ли пятно менструальной кровью;

11) образовано исследуемое пятно кровью живого лица или трупа;

12) кому из проходящих по делу лиц может принадлежать кровь.

Рассмотрим судебно-медицинские возможности решения указанных выше и ряда других вопросов.

Определение наличия крови. Как правило, определение наличия крови на объекте исследования предшествует всем остальным видам ее исследования. Самый простой метод установления крови - это обнаружение форменных элементов крови - эритроцитов - путем микроскопии. Однако этот метод может дать положительный результат далеко не всегда, т.к. часто эритроциты не сохраняются целыми в следах крови.

Наиболее часто для указанной цели используется спектроскопический метод. Он основан на свойстве гемоглобина и его производных поглощать световые волны определенной длины. Исследование спектров поглощения дает гарантированно однозначный вариант ответа на вопрос о наличии крови в исследуемом веществе. При значительных воздействиях на кровь, например, при ее обугливании, используют эмиссионный спектральный анализ, в результате которого выявляют или не выявляют комплекс неорганических составляющих крови. На основании этого делают вывод о ее наличии. Для определения наличия крови могут быть использованы и другие методы, например, различные модификации хроматографии.

Определение видовой принадлежности крови. Все виды высших животных имеют кровь, похожую по внешнему виду на кровь человека. Поэтому при обнаружении крови на месте происшествия или на одежде человека необходимо точно установить, что она произошла от человека. В крови находятся белки, специфические для каждого из видов животных, даже если эти виды очень близки друг к другу, - антигены. Если к раствору, в котором находятся антигены, добавить так называемую преципитирующую сыворотку (в ней находятся антитела), то между антителами и антигенами, относящимися к одному виду, произойдет реакция, в результате которой выпадет осадок - преципитат. Такую реакцию называют реакцией преципитации. Трудности в проведении этой реакции возникают, когда белки исследуемого объекта подверглись какому-либо разрушающему воздействию. В таких случаях применяют более чувствительные модификации этой методики и иные современные методы исследования. Например, разработан и успешно применяется метод иммунофлюоресценции: при положительном результате реакции образуется флюорохром, который дает свечение в ультрафиолетовых лучах.

Строение эритроцитов крови животных отличается от строения эритроцитов человека, поэтому для дифференциации видовой принадлежности крови может быть использован метод микроскопии следов крови. Кроме того, для установления отличий крови человека от крови животных по неорганическому составу может быть использован эмиссионно-спектральный анализ. Указанными методами кровь животного одного вида может быть дифференцирована от крови животного другого вида.

Определение половой принадлежности крови. Возможности определения половой принадлежности крови обусловлены различиями в строении половых хромосом у мужчин и женщин. Как известно, у женщин имеются две Х-хромосомы (XX), а у мужчин Х и Y-хромосомы (XY). В судебной медицине разработаны методики для окрашивания клеток на предмет выявления в них Х и Y-хромосом. Если окрасить клетки красителями, реагирующими с Х-хроматином, то последующей микроскопией таких препаратов удается установить наличие светящихся глыбок Х-хроматина, что свидетельствует о женском поле крови. При использовании другого специального красителя в ядрах клеток крови наблюдаются светящиеся участки, которые называются Y-хроматином, их обнаружение свидетельствует о мужском поле крови[27].

У большинства людей имеется по две половых хромосомы: XX у женщин и XY у мужчин. Встречаются и так называемые аномалии половых хромосом, в частности количественные. В таких случаях у отдельных индивидуумов имеется не две, а три, и даже более половые хромосомы. Обнаружение такого факта может помочь в раскрытии и расследовании преступления, т.к. эта особенность - явление редкое.

При микроскопическом исследовании препаратов крови в ядрах лейкоцитов женщин обнаруживаются небольшие хроматиновые островки, которые выступают из ядра в виде выростов. Таким образом, анализ строения ядер лейкоцитов позволяет определить половую принадлежность исследуемой крови. Это еще один метод, используемый судебными медиками для половой дифференциации крови.

В последнее время в связи с развитием методов молекулярной биологии разработана и используется на практике методика выявления Х- и Y-специфичных участков молекул ДНК. Она позволяет дифференцировать мужские и женские молекулы ДНК и, соответственно, установить половую принадлежность как изолированных пятен мужской и женской крови, так и объектов исследования, находящихся в смешанном состоянии.

Дифференцирование крови плода и взрослого человека. Кровь плода и ребенка в возрасте до одного года отличается от крови людей более старшего возраста. Различия обусловлены строением некоторых белков. Дифференцировать белки, присущие взрослому человеку, от характерных для плода и новорожденного, возможно методами электрофореза.

В крови взрослых людей и детей некоторые ферменты проявляют различия в активности. Это может быть установлено с помощью биохимических методов, однако последние ввиду сложности не нашли пока еще широкого применения в повседневной экспертной практике.

Возможности определения части тела, из которой произошло кровотечение. Клетки различных органов и тканей устроены по-разному. И более того, клетки одного типа тканей, но из разных органов могут иметь значительные отличия в строении. Например, клетки слизистой оболочки носа отличаются от клеток слизистой оболочки мочеиспускательного канала. В следах крови могут быть обнаружены примеси содержимого тех органов, из которых истекала кровь, например, при кровотечении из прямой кишки могут быть обнаружены примеси кала, при кровотечении из матки - примеси слизи, характерной для этого органа. На этих двух положениях основана методика установления части тела, из которой произошло кровотечение. Учеными разрабатываются и другие методики этого плана, например, на основе изучения ферментативной активности.

Определение давности образования пятен крови. Гемоглобин крови, находящийся в следах, со временем претерпевает изменения, иными словами, стареет. В частности, он в несколько этапов превращается из оксигемоглобина в гематопорфирин. Каждая из форм гемоглобина имеет собственный спектр поглощения, на основе изучения этих спектров устанавливается этап превращения гемоглобина, а, следовательно, и примерная давность образования следа крови.

Конечно, внешние условия сохранения следов крови, исходное состояние самой крови и след несущая поверхность оказывают влияние на процесс изменения гемоглобина. В связи с этим установление давности образования пятна возможно лишь ориентировочно.

С целью установления давности следов крови используются методики, основанные на определении активности ферментов крови. Активность некоторых ферментов иногда проявляется на протяжении 80-100 дней. Однако эти методики, как и большинство других биохимических методов, сложны в исполнении и зависимы от многих факторов, что снижает возможность их использования.

Установление по пятнам крови количества жидкой крови, которой они образованы. При установлении обстоятельств совершения преступления в некоторых случаях необходимо по пятнам крови определить, каким количеством крови, излившейся из тела человека, эти пятна образованы. Известно, что 1000 мл жидкой крови содержит примерно 211 г сухого остатка. Посчитав количество сухой крови в пятнах, можно определить количество жидкой. Эти расчеты не могут быть достаточно точными, т.к. степень высыхания крови в каждом конкретном случае разная, да и подсчитать ее вес можно лишь ориентировочно.

Определение беременности по следам крови. После 8-10-го дня беременности в крови женщин появляется гормон, который достаточно хорошо сохраняется в пятнах крови. По его наличию и устанавливают факт беременности женщины. Кроме того, в крови женщин примерно через месяц после возникновения беременности появляется специфический фермент - окситоциназа. Он содержится там до родов и исчезает из крови в течение месяца после них. Этот фермент хорошо выявляется в пятнах сухой крови даже спустя 2-3 месяца после их образования. На основании его обнаружения можно установить факт происхождения крови от беременной женщины или от женщины, которая недавно родила.

Определение происхождения крови от живого человека или трупа. В результате причинения человеку повреждений возникает кровотечение из ран. Разницы между кровью живого человека и человека, который умер несколько минут назад, нет. Поэтому сказать, что одно пятно образовалось, пока человек был еще жив, а другое, когда он уже умер, невозможно. Только по прошествии 1-2 часов после смерти кровь трупа претерпевает изменения и приобретает характеристики, свойственные крови мертвого человека. В частности, считается, что из тканей в кровь попадают ферменты, которые в ней при жизни не встречаются. Эти ферменты могут быть обнаружены в следах крови, по ним можно судить о том, что исследуемая кровь истекала из трупа человека, смерть которого наступила более 1-2 часов назад. Однако такая методика редко применяется на практике. Возможно, это обусловлено тем, что случаи, когда необходимо дифференцировать происхождение крови от живого или мертвого человека, крайне редко встречаются в практической деятельности.

Установление или исключение происхождения крови от конкретного человека. Решение данного вопроса - один из важнейших моментов процесса раскрытия и расследования преступления, особенно если это кровь жертвы на лице, подозреваемом в совершении преступления, или наоборот, кровь подозреваемого на жертве или месте преступления.

Для решения этой задачи в настоящее время в большинстве случаев судебные медики проводят определение групповой принадлежности крови по различным ее системам.

В крови человека в разных ее составляющих находятся антигены, полученные каждым человеком по наследству от родителей. Различающиеся антигены одного типа называют изоантигенами - это как бы варианты строения одного и того же объекта. Антигены одного типа, но несколько отличающиеся по свойствам, составляют систему. В общей сложности в настоящее время науке известно несколько десятков систем. Внутри системы существует деление на группы по факту наличия или отсутствия того или иного изоантигена. В разных системах выделяют разное количество групп. Например, по системе АВ0 людей принято делить на четыре основных группы: первая, вторая, третья и четвертая группа крови. По другим системам людей можно разделить на другое количество групп, например по системе MNSs - на девять групп.

Отдельно взятый человек по каждой из имеющихся систем обязательно относится к какой-либо группе. Например, по АВ0 - ко второй группе, по MNSs - к пятой, по системе Le - к третьей и т.п.

Принято считать, что подавляющее количество групп разных систем проявляются у людей совершенно независимо друг от друга. Иными словами, если у человека по системе АВ0 вторая группа, то по другим системам у него может быть любая группа. С учетом этого положения увеличение числа исследованных систем уменьшает частоту встречаемости набора групп крови.

Исследовав кровь, например, по десяти системам, можно получить свыше 300 тысяч комбинаций, таким образом, одна конкретная комбинация групп может встретиться у одного из 300 тысяч человек. Естественно, приведенные цифры условны и для разных сочетаний систем и групп будут отличаться, однако они наглядно демонстрируют, как с увеличением количества исследуемых систем антигенов возрастает возможность дифференциации происхождения биологических объектов (в первую очередь крови) от разных индивидуумов.

Установив группу, специалист сравнивает ее с группой крови потерпевшего и подозреваемого. При несовпадении групп эксперт делает вывод, что кровь произошла не от данного конкретного лица. При совпадении группы делается вывод, что кровь могла произойти от конкретного человека.

Если эксперт не может быть уверен, что объект исследования образован кровью только одного лица, то сделать конкретный вывод об исключении или неисключении происхождения пятна крови от конкретного лица он не может. Например, при обнаружении в пятне крови антигена В при неисключении смешивания крови, эксперт сделает вывод, что пятно могло быть образовано или кровью третьей группы, или кровью третьей группы в сочетании с кровью первой группы.

На основании такого результата в качестве источника крови в данном пятне будут исключены лица со второй и четвертой группой и не исключены лица с первой и третьей.

Исходную информацию для решения вопроса о возможном смешивании крови в исследуемом пятне эксперт берет из протокола осмотра места происшествия, а также из других источников.

Кроме указанных систем в эритроцитах, могут быть определены в практических целях система Льюис (Le), система Келл-Челлано (К), система Лютеран (Lu), система Даффи (Fy), система Кидд (lk). Приведенный перечень эритроцитарных систем на этом не ограничивается - в него вошли только наиболее изученные в судебно-медицинском плане системы антигенов.

Исследование сывороточных систем. В плазме (сыворотке) крови человека содержится большое количество белков и липопротеидов. Кроме прочих различий, они отличаются друг от друга по антигенным свойствам. Системы плазмы крови так же, как и эритроцитарные, передаются по наследству и не связаны между собой. Их используют в судебно-медицинской практике с теми же целями, что и эритроцитарные. Наиболее изучены и распространены на практике следующие из них:

1. Система гаптоглобина (Нр). Гаптоглобин особый белок плазмы крови, относящийся к глобулинам. Выделяются три группы крови по гаптоглобину: Нр1-1 (частота встречаемости - 15 %); Нр1-2 (частота встречаемости - 50 %); Нр2-2 (частота встречаемости - 35 %). Разновидности гаптоглобина имеют разный молекулярный вес, поэтому могут быть обнаружены методом электрофореза в геле. На результат выявления гаптоглобинов влияют разные факторы, но наибольшее негативное воздействие оказывает характер следонесущей поверхности. Получение результатов осложняется, если кровь находится на впитывающей поверхности.

2. Системы иммуноглобулинов. В систему Gm входят 23 варианта антигенов. Они обусловливают возможность разделения крови по этой системе на большое количество групп. Антигены этой системы хорошо сохраняются в пятнах крови. Использование системы Кт дает хорошие результаты в исключении отцовства.

Исследование изоферментных систем. В организме человека (в крови и других тканях) функционируют многочисленные ферменты. Они так же, как и описанные выше биологические компоненты тканей, проявляют антигенные свойства, передаваемые по наследству. В судебно-медицинской практике нашли применение несколько ферментных систем: система фосфоглюкомутазы (ФГМ), система эритроцитарной кислой фосфатазы (КФЭ), система эстеразы, система аденилаткиназы (АК), система фосфоглюконатдегидрогеназы (ФГД) и др.

Разделение ферментных систем на группы производится с помощью различных модификаций электрофореза, основанного на том, что разные по весу молекулы или их части неодинаково передвигаются в геле под действием электрического тока.

Деление на группы по ферментным системам используется в судебной медицине для работы с жидкой кровью, дифференциации пятен крови и других биологических объектов.

В правоохранительной деятельности необходимость сравнительного исследования жидкой крови возникает значительно реже, чем необходимость сравнения сухой крови с сухой или сухой с жидкой. Большая часть таких случаев связана с установлением отцовства и материнства, т.е. факта происхождения ребенка от конкретных женщины и мужчины. С этой целью используют законы наследования свойств эритроцитарных, сывороточных, изоферментных и лейкоцитарных систем. Основное правило, на котором базируется метод установления отцовства и материнства, гласит, что в крови ребенка могут быть антигены только с теми свойствами, что есть у его родителей.

При исследовании указанных систем категорическим может быть только исключающий вывод об отцовстве (материнстве). Положительный же вывод может быть только вероятностным, как бы не была мала вероятность ошибки. Иными словами, при совпадении свойств крови ребенка, матери и предполагаемого отца назвать мужчину отцом со 100 % гарантией невозможно.

Для такого судебно-медицинского исследования берут кровь у ребенка, матери и предполагаемого отца. Их кровь исследуют параллельно на предмет установления групп по различным системам, а затем, используя таблицы, в которые занесены закономерности наследования групп крови по системам, исключают или не исключают отцовство предполагаемого отца. Рассмотрим вышесказанное на примере групп крови по системе АВ0.

Допустим, у ребенка установлена первая группа, антигены А и В отсутствуют, а у матери вторая группа, в ее крови имеется антиген А. При таком варианте исключается, что отцом может быть мужчины с четвертой группой АВ, но не исключается отцовство мужчин с первой, второй и третьей группой. Если у ребенка установлена третья группа (антиген В) и у матери третья группа, то отцовство не исключается для мужчины с любой группой крови. И так далее для различных сочетаний групп.

Такого рода экспертизы и исследования на предмет установления отцовства и материнства в настоящее время еще проводятся. Они дают быстрый и конкретный результат по исключению отцовства. Однако, как уже говорилось, такие исследования не обеспечивают категорический положительный вывод об отцовстве и материнстве. В настоящее время для решения этой задачи все шире и шире применяется метод генотипоскопии. Закономерности наследования строения молекулы ДНК дают основания для гарантированного категорического положительного или отрицательного вывода по этому вопросу.

Возвращаясь к видам экспертиз по следам крови, следует отметить, что возможности экспертного исследования биологических объектов, происходящих от человека, резко возросли после появления такого метода, как генотипоскопия.

В отличие от других методов судебно-медицинского исследования, осуществляющих только групповую, а не индивидуальную идентификацию, генотипоскопия позволяет сделать категорический вывод о принадлежности данного биологического материала конкретному лицу. Метод основан на исследовании содержащейся во всех клетках человеческого организма дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) - носителя генетической информации. Следует также отметить, что объектами генотипоскопического исследования помимо крови могут служить сперма, слюна и волосы с сохранившейся луковицей.

Кровь пригодна для генетического исследования как в жидком виде, так и в пятнах (только не в замытых). Жидкая кровь исследуется только в несвернувшемся виде (без сгустка), поэтому при ее изъятии судебный эксперт должен добавить к ней вещества, препятствующие свертыванию (например, цитрат натрия).

Зависимость успешного проведения генотипического исследования от давности образования следов крови определяется прежде всего условиями их пребывания до момента изъятия: не подвергались ли они процессам гниения, воздействию высоких температур, агрессивных веществ, влаги. По мере увеличения срока давности образования следов вероятность выделения из них ДНК и ее тестирование уменьшается даже при хранении в благоприятных условиях. В качестве образца для сравнительного исследования во всех случаях берется кровь идентифицируемого лица.

Итак, при назначении генетической экспертизы могут быть поставлены следующие вопросы:

1. Пригоден ли представленный биологический материал для производства генетической идентификации?

2. Если пригоден, то принадлежит ли он данному конкретному лицу?

3. Если пригоден, то являются ли части расчлененного трупа частями одного человека?

4. Если пригоден, то является ли деформированный (обгорелый) труп трупом определенного лица?

Молекулярно-генетическое исследование биологических объектов целесообразно проводить только после традиционного биологического исследования, поскольку в ряде случаев уже при определении антигенных профилей некоторые вопросы могут быть решены в категорической форме (например, в случае исключения происхождения биологических следов от лиц, чьи образцы были представлены для сравнительного исследования).

Экспертное исследование ДНК, как правило, проводят в виде дополнительной экспертизы после выполнения биологических исследований в тех случаях, когда следствием результаты последней были расценены как недостаточно информативные. Вопросы, разрешаемые судебной молекулярно-генетической экспертизой:

1. Имеется ли кровь в исследуемом объекте?

2. Принадлежит ли кровь человеку или животному?

3. Могли ли следы крови произойти от конкретного человека?

4. Принадлежит ли кровь мужчине или женщине?

ДНК-исследования основаны на анализе генетического материала, содержащегося в объектах биологического происхождения. Наиболее чувствительной методикой ДНК-исследований, позволяющей анализировать наследственный аппарат на уровне даже одной клетки, является локальная амплификация (увеличение количества копий) относительно коротких фрагментов ДНК, фланкированных специфическими нуклеотидными последовательностями, которые выступают как участки отжига для праймеров - олигонуклеотидов, инициирующих полимеразно-цепную реакцию (ПЦР). В качестве маркера в этом случае выступает весь фрагмент ДНК с фланкирующими участками. Идентификация личности основана либо на вариабельности длины маркерного фрагмента (например, популярные VNTR-локусы - variable number of tandem repeats), либо на вариабельности первичной нуклеотидной последовательности (например, активно внедряемые сейчас в практику экспертных лабораторий ФБР исследования первичных последовательностей специфических фрагментов митохондриальной ДНК - mtDNA). Разработка тест-систем для экспертной идентификации в этом случае сводится к поиску маркерных полиморфных локусов и подбору фланкирующих участков для отжига праймеров. Эксперт, занимающийся идентификацией личности, использует готовые тест-системы. Как правило, для идентификации личности с высокой степенью вероятности недостаточно использовать для анализа только один полиморфный локус, в связи с чем используется не менее 5 таких локусов (для предыдущего примера, соответственно, 5 VNTR-локусов, а в криминалистической практике США - 13 STR-локусов - short tandem repeats). В системе баз данных Интерпола используются 7 локусов (признаков) ДНК, в Европейской базе данных, основанной на рекомендациях Европейской сети научно-криминалистических учреждений (ENFSI), - 10, а в криминалистических лабораториях МВД России - около 20 полиморфных локусов.

ДНК-исследования проводятся в двух основных вариантах: 1) попарное сравнение образцов ДНК с места преступления и проверяемого круга лиц; 2) сравнение образцов ДНК с места преступления с результатами ДНК-исследований, заранее проведенных и оформленных в виде базы данных (БД) наподобие баз данных отпечатков пальцев.

Трасологическое экспертное исследование формы следов крови может осуществляться как на месте происшествия, так и в лабораторных условиях - по фотоснимкам. В любом случае обязательно учитываются данные судебно-медицинского исследования трупа или освидетельствования живого лица. Поэтому в распоряжение эксперта-трасолога должна быть представлена соответствующая судебно-медицинская документация.

Ряд вопросов, выносимых на разрешение комплексной судебно-медицинской и судебно-трасологической экспертиз, связан с установлением механизма образования следов крови:

1) С какой высоты падали капли крови? В горизонтальном или вертикальном положении находился определенный объект или предмет, на который капала кровь?

2) Передвигался ли человек в момент или после причинения повреждения?

3) Каково было направление травмирующей силы?

4) В каком положении находился человек в момент нанесения ему повреждений?

Вывод по результатам экспертизы формулируется в заключении эксперта.

Заключение