Теоретическое обоснование и практическая реализация технологий гидролизатов молочных белков и специализированных продуктов с их использованием
Биотехнологические, физико-химические закономерности получения ферментативного гидролиза молочных белков с различным фракционным составом. Разработка нормативной технологии специализированных продуктов. Принципиальная технологическая схема получения ФГМБ.
Рубрика | Производство и технологии |
Вид | автореферат |
Язык | русский |
Дата добавления | 15.02.2018 |
Размер файла | 101,6 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
Теоретическое обоснование и практическая реализация технологий гидролизатов молочных белков и специализированных продуктов с их использованием
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность работы. Рациональное питание способствует сохранению здоровья, профилактике заболеваний, а также создает условия для повышения способности организма противостоять неблагоприятным воздействиям окружающей среды и переносить физические и психоэмоциональные нагрузки. На приоритетную значимость питания указывает постановление Правительства РФ №917 от 10.08.98 «О Концепции государственной политики в области здорового питания населения Российской Федерации», рассчитанной на период до 2010 г.
Особое место в современной нутрициологии занимает проблема пищевой недостаточности при критических состояниях. Агрессивные воздействия любой этиологии (травмы, ранения, кровопотери, ожоги, хирургические вмешательства), а также патологические проявления (онкологические, инфекционные заболевания, воспалительные процессы в печени и поджелудочной железе) развивают неспецифические реакции гиперметаболизма и гиперкатаболизма. Это приводит к нарушениям обмена белков, углеводов, липидов, усиленному расходу углеводно-липидных компонентов и распаду тканевых белков. При этом основной чертой всей совокупности изменений обмена веществ является сочетание резкого повышения потребностей организма в белково-энергетических субстратах со снижением толерантности к белку пищи. Специфические требования также предъявляются к белковой составляющей рациона больных наследственными заболеваниями аминокислотного обмена, пищевой аллергией, в том числе, детей первого года жизни.
В соответствии с вышеизложенным и с учетом опыта зарубежных стран, существует доказанная необходимость промышленного производства продуктов специализированного питания, назначаемых больным в критических состояниях или при нарушении функции пищеварения. Как правило, в их состав входят гидролизаты белков с различной глубиной гидролиза, которые оказываются зачастую единственным средством лечебного воздействия, обеспечивающим жизнедеятельность и полноценное развитие больных детей и взрослых с различной патологией.
Ввиду актуальности вопроса создания специализированных продуктов (СП) с заданными свойствами в последние годы отмечается значительное усиление интереса исследователей к процессам их получения. В нашей стране в 70-80-х гг. прошлого столетия были созданы и внедрены в клиническую практику отечественные пищевые смеси, использование которых положительно повлияло на результаты лечения многих категорий больных и тяжело пострадавших.
Вклад в освоение технологии продуктов для специализированного питания, в т.ч. на основе молочных белков, внесли В.Г. Высоцкий, Г.Б. Гаврилов, И.А. Евдокимов, П.Ф. Крашенинин, К.С. Ладодо, Н.Н. Липатов, Н.Н. Липатов (мл.), М.Ф. Нестерин, А.А. Покровский, Т.С. Попова, И.А. Рогов, Ю.Я. Свириденко, Н.А.Тихомирова, Э.С.Токаев, В.А.Тутельян, В.Д. Харитонов, А.Г. Храмцов, А.П. Чагаровский, А.М. Шалыгина, В.А. Шатерников, другие отечественные и зарубежные ученые.
Однако, в начале 90-х гг. в Российской Федерации выпуск СП прекратился, и в течение последующих 10 лет на рынке были представлены только зарубежные продукты.
В этой связи направление по созданию ферментативных гидролизатов молочных белков (ФГМБ) и СП на их основе следует признать принципиально новым, позволяющим решить важные социальные проблемы, а также расширить знания в области лечебного питания, что указывает на актуальность выполненных исследований.
Цель и задачи исследований. Целью диссертационной работы является теоретическое обоснование, исследование биотехнологических и физико-химических закономерностей получения ФГМБ, а также разработка технологий СП с их использованием.
Для достижения поставленной цели определены следующие задачи:
- оптимизировать условия ферментативного гидролиза (ФГ) молочных белков с различным фракционным составом в зависимости от технологических факторов;
- оценить изменение качественного и количественного состава пептидных фракций, их молекулярно-массового распределения (ММР), остаточной антигенности (АГ) и содержания свободных аминокислот в процессе гидролиза;
- изучить влияние мембранной очистки и фракционирования ФГМБ на показатели их качества;
- разработать принципы расчета процессов мембранного фракционирования ФГМБ;
- исследовать закономерности удаления фенилаланина из ФГМБ с использованием метода адсорбционной хроматографии (АХр);
- обосновать принципиальную технологическую схему получения ФГМБ и разработать частные технологии получения ФГМБ с направленно регулируемыми составом и свойствами;
- разработать блочно-модульные схемы и технологии ФГМБ и СП с их использованием;
- использовать полученные результаты и установленные закономерности гидролиза, мембранной очистки и фракционирования, АХр ФГМБ для разработки нормативной документации и освоения промышленного производства СП на их основе.
Научная новизна работы:
- исследованы особенности ФГ молочных белков в зависимости от их фракционного состава, происхождения ферментных препаратов, их концентрации, температуры, активной кислотности, применения рН-статирования и других факторов;
- показано, что решающая роль в формировании качественного и количественного состава пептидных фракций ФГМБ принадлежит природе используемого ферментного препарата, фермент-субстратному соотношению и условиям гидролиза;
- изучено изменение характеристик ФГМБ (ММР, содержания свободных аминокислот, остаточной АГ и др.) в процессе очистки ультрафильтрацией (УФ) и фракционирования нанофильтрацией (НФ). В результате достигнуто снижение АГ гидролизатов молочных белков, достаточное для их использования в лечебных и лечебно-профилактических СП. Получены гидролизаты концентрата сывороточных белков (КСБ) с улучшенными характеристиками в сравнении с существующими аналогами;
- разработаны принципы и методики расчета мембранной обработки для получения ФГМБ с заданным составом и свойствами с учетом основных технологических факторов;
- исследованы закономерности и оптимизированы условия процесса селективной сорбции фенилаланина из различных видов ФГМБ с использованием АХр, получены ФГМБ с содержанием фенилаланина, сопоставимым с аналогичной характеристикой смесей кристаллических l-аминокислот;
- предложена функциональная классификация ФГМБ и СП;
- исследованы пищевая, биологическая и энергетическая ценность ФГМБ и СП, полученных на их основе, а также их клиническая эффективность.
Практическая значимость и реализация результатов работы в промышленности. Созданы оригинальные технологии, новизна технических решений которых подтверждена авторскими свидетельствами, патентами и положительными решениями на выдачу патентов №№1358890, 1369710, 1446705, 1457192, 1522462, 1608866, 1614169, 1622967, 1658433, 1663800, 1827771, 1839085, 2017427, 2019971, 2054264, 2262240, 2290822, 2290823, 2290824, 2005114358/13, 2005114361/13, 2005114365/13, 2006122680/13). Предложена принципиальная технологическая схема и разработаны частные технологии ФГМБ с использованием различных процессов во взаимосвязи. Обоснована блочно-модульная схема получения ФГМБ и широкой гаммы СП на их основе. Указанные разработки внедрены в производство (ТУ 9229-127-17023360-03, ТУ 9229-133-17023360-04, ТУ 9229-149-17023360-03, ТУ 9229-151-17023360-04, ТУ 9229-152-17023360-04, ТУ 9197-163-17023360-05, ТУ 9229-176-17023360-07).
Апробация работы. Основные результаты работы доложены и получили одобрение на симпозиумах, конгрессах, конференциях, семинарах и совещаниях различного уровня (Киев, 1987; Москва, 1987, 1988, 1990, 1995; Ереван, 1987; София, 1988; Углич, 1988; Вологда, 1988; Минск, 1989; Одесса, 1990; Могилев, 1990; Монреаль, 1990; Краснодар, 1993; Тюмень, 1995; Гродно, 1995; Истра, 1997; Санкт-Петербург, 2006).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано более ста печатных работ, в том числе две монографии, статьи в журналах, рекомендованных ВАК для публикации основных материалов диссертаций, научных трудах институтов, материалах Международного молочного конгресса, симпозиумов, конференций, а также описаниях авторских свидетельств, патентов и заявок на выдачу патентов РФ.
Структура и объем работы. Диссертация состоит из 9 глав, в том числе введения, аналитического обзора, методической части, результатов собственных исследований и их анализа, выводов, списка использованных источников литературы и приложений. Основной текст работы изложен на 310 страницах машинописного текста, содержит 75 таблиц, 32 рисунка, 388 литературных источников и приложения, отражающие масштабы реализации работы.
Основные положения, выносимые на защиту:
- физико-химические и биотехнологические закономерности получения ФГМБ, предназначенных для использования в СП лечебной и лечебно-профилактической направленности;
- результаты изменений качественных и количественных характеристик ФГМБ (степени гидролиза, ММР белковых фракций, АГ и содержания свободных аминокислот) в процессе гидролиза и различных мембранных обработок;
- требования к исходным ФГМБ и параметры технологического процесса АХр, обеспечивающие освобождение ФГМБ от фенилаланина до уровня, соответствующего современным подходам к диетотерапии больных фенилкетонурией(ФКУ);
- концепция создания ФГМБ с направленно регулируемыми составом и свойствами;
- блочно-модульная схема и технологии получения ФГМБ и СП на их основе.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Введение. Обоснована актуальность, научная новизна и практическая значимость диссертационной работы.
Глава 1. Научные и практические предпосылки разработки современных технологий ФГМБ (аналитический обзор). Рассмотрен вопрос о роли белка в питании здорового и больного человека. Эти данные в дальнейшем использованы при разработке функциональной классификации ФГМБ и СП на их основе. Сформулированы медико-биологические требования к белковым компонентам СП и определены основные параметры, определяющие их качество, включая биологическую ценность, содержание отдельных аминокислот, ММР пептидных фракций, остаточную АГ, осмолярность. Представлены данные, свидетельствующие о преимуществах использования пептидных фракций ФГМБ в качестве белковых компонентов различных СП. Рассмотрены общие вопросы получения ферментативных гидролизатов пищевых белков с позиции активности и специфичности применяемых ферментных препаратов, режимов и кратности обработки. Проанализированы данные мировой патентной литературы об основных технологических подходах к получению ФГМБ, методах их мембранной очистки и фракционирования, селективной сорбции фенилаланина, технологии СП на основе ФГМБ и аминокислотных смесей.
Глава 2. Обоснование направлений собственных исследований, их цель и задачи. В главе показано, что в области технологии СП на основе ФГМБ имеется ряд важных нерешенных задач. Недостаточно разработаны подходы к получению ФГМБ на основе сывороточных белков, как наиболее перспективного ввиду его высокой биологической ценности. Необходимо также разработать технологии гидролиза, позволяющие получать ФГМБ как с глубокой, так и со средней степенью гидролиза. Для ФГМБ с глубокой степенью гидролиза критически важным является снижение АГ до уровня не выше 1.10-5 от исходного белка, что практически недостижимо при использовании существующих технологических подходов. Для гидролизатов со средней степенью гидролиза, помимо показателя АГ, необходимо достижение невысокой осмолярности и удовлетворительных вкусовых свойств. Это может быть осуществлено за счет снижения содержания в ФГМБ свободных аминокислот и увеличения доли фракции «средних пептидов».
Особенностью ФГМБ, предназначенных для получения удовлетворяющих современным требованиям продуктов для питания больных ФКУ, является средняя молекулярная масса пептидов, которая должна быть как можно меньшей, чтобы обеспечить высокоэффективную сорбцию фенилаланина. В литературе в настоящее время не освещены технологии получения таких гидролизатов на основе сывороточных белков, а также оптимальные методы селективной сорбции фенилаланина из различных ФГМБ. Поэтому разработка универсальной схемы и частных технологий ФГМБ, а также обобщенной схемы блочно-модульного типа для получения СП является одной из важнейших задач современных технологий.
В заключение главы сформулирована цель и задачи исследований.
Глава 3. Структура исследований, организация эксперимента, объекты и основные методы исследований. Теоретические и экспериментальные исследования выполнены в 1986-2007 гг. в соответствии с поставленными задачами в ГНУ Всероссийском НИИ детского питании Россельхозакадемии (г. Истра), а также в научно-исследовательском центре ОАО «Нутринвестхолдинг». Общая схема исследований представлена на рис. 1. Весь цикл исследований состоял из нескольких логически взаимосвязанных этапов.
Первый этап работы связан с обобщением материалов отечественных и зарубежных специалистов по теме исследований. На основании анализа информации обоснована необходимость создания СП на основе ФГМБ, сформулирована цель и задачи собственных исследований.
Второй этап посвящен экспериментальному изучению закономерностей получения ФГМБ. Исследовали процесс накопления пептидов различной молекулярной массы в составе ФГМБ в ходе ФГ систем с различным соотношением казеинов и сывороточных белков под действием ферментных препаратов в зависимости от ряда технологических факторов, включая фермент-субстратное соотношение, продолжительность гидролиза, режимы температурной обработки, наличие рН-статирования. В получаемых ФГМБ оценивали изменение ММР, содержание свободных аминокислот, остаточной АГ.
На основании данных об остаточной протеолитической активности в гидролизатах определяли параметры инактивации фермента.
В дальнейших исследованиях изучали особенности очистки и фракционирования ФГМБ, анализировали изменение свойств гидролизатов в процессе мембранной обработки (в т.ч. кратной) с использованием ультрафильтрации (УФ), селективной ультрафильтрации (СУФ), НФ и обратного осмоса (ОО), разрабатывали принципы расчета процессов мембранного фракционирования ФГМБ. В качестве основных контролируемых при получении ФГМБ величин выбраны характеристики мембранных процессов, ММР, остаточная АГ, расчётная биологическая ценность.
Таблица Теоретическое обоснование и практическая реализация технологий гидролизатов молочных белков и специализированных продуктов с их использованием
I. Теоретические исследования |
||||||
Обобщение и анализ результатов отечественных и зарубежных исследований |
- аналитический обзор - обоснование направлений собственных исследований - цель и задачи работы |
|||||
II. Экспериментальные исследования |
||||||
Оптимизация процессов ФГ молочных белков (КМБ и КСБ) |
- параметры процесса - кинетика ФГ - ММР - АГ - аминокислотный состав - режимы инактивации фермента |
|||||
Изучение характеристик ФГМБ в процессе мембранной обработки |
- селективность мембран - параметры процесса - кратность обработки - состав и свойства гидролизатов - принципы расчета |
|||||
Исследование закономерностей удаления фенилаланина из ФГМБ с использованием АХр |
- ММР - содержание фенилаланина - закономерности фракционирования - параметры АХр |
|||||
Разработка параметров технологий ФГМБ |
- ФГ, УФ, СУФ, ОО, АХр - параметры сгущения и сушки - частные технологии ФГМБ - состав и свойства образцов |
|||||
Разработка блочно-модульной схемы получения ФГМБ и СП на их основе |
- технологические блоки - принципиальная блочно-модульная технологическая схема - классификация ФГМБ и СП |
|||||
III. Практическая реализация результатов исследований |
||||||
Организация производства |
Техническая документация |
Социальная значимость |
Рис. 1. Схема проведения исследований
Исследовали закономерности селективной сорбции фенилаланина из ФГМБ, прошедших мембранную очистку и фракционирование. Оптимизировали процесс АХр.
Обобщенный материал экспериментальных исследований послужил основанием для разработки технологических процессов различных видов ФГМБ и СП на их основе.
Следующая часть исследований связана с разработкой классификаций ФГМБ и продуктов на их основе, обоснованием принципиальной технологической схемы с указанием технологических процессов и контролируемых величин, а также блочно-модульной схемы получения ФГМБ и СП.
Третий, заключительный этап работы, связан с практической реализацией результатов исследований. В соответствии с медико-биологическими требованиями осуществляли адаптацию разработанных технологий к промышленным условиям, разрабатывали техническую документацию, внедряли результаты исследований в промышленности с проведением клинических апробаций новых СП, оформляли патентную документацию.
На разных этапах работы объектами исследований являлись: молоко коровье, предназначенное для производства продуктов детского питания; концентрат молочного белка (КМБ) и КСБ с массовой долей белка не менее 80%, в т.ч. получаемые по импорту и разрешенные органами Госсанэпиднадзора Минздрава России для использования в производстве продуктов детского питания; коммерческие ферментные препараты «Флавоэнзим» из Asp. оrhyzae («Novozyme», Дания) и «Панкреатин» из поджелудочной железы крупного рогатого скота (отечественного или импортного производства); сорбент ХАД-16 («Laboratoire Channy», Франция) для АХр, лабораторные, пилотные и промышленные образцы продукции.
При выполнении работы использовали общепринятые, стандартные и оригинальные методы исследования.
Физико-химические и микробиологические показатели сырья, вспомогательных материалов и готовых продуктов, контроль параметров технологического процесса осуществляли в соответствии с действующей нормативной базой: МУК 4.2.577 «Методы микробиологического контроля продуктов детского, лечебного питания и их компонентов»; СанПиН 2.3.4.551 «Производство молока и молочных продуктов»; СанПиН 2.3.2.1078 «Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов»; «Инструкция по технохимическому контролю производства сухих молочных продуктов детского питания», утверждённая 30.12.92; «Санитарно-технологические требования к производству продуктов детского и лечебного питания на молочной основе», утверждённые 16.09.80; «Инструкция по технохимическому контролю для предприятий, вырабатывающих молочные продукты для детей различных возрастных групп», утверждённая 25.12.1980.
При оптимизации процессов получения ФГМБ в лабораторных масштабах гидролиз проводили без предварительной термической обработки субстратов в водяном или суховоздушном термостате с перемешиванием, при температуре 37-50єС. Контроль рН осуществляли с использованием лабораторных рН-метров. рН-статирование осуществляли добавлением 1,0 М раствора гидроокиси натрия или 1,0 М соляной кислоты. По окончании процесса ферментный препарат в составе гидролизата инактивировали нагреванием при 90-95 оС в течение 5-10 мин. Ультрафильтрацию полученных гидролизатов проводили на лабораторной установке «МИНИТАН» («Millipore»,США) с использованием мембран с диаметром пор 10 и 5 кД. НФ проводили на установке производства «ВЛАДИСАРТ» (Россия), через мембрану с размером пор около 0,5 кД при рН 6,0-6,5. Полученные гидролизаты лиофильно высушивали на лабораторной сублимационной сушке.
В основу получения гидролизатов молочных белков со сниженным содержанием фенилаланина положен метод АХр с использованием в качестве неподвижной твердой фазы смолы ХАД-16, представляющей собой пористые гранулы химически модифицированного полистирола. В лабораторных масштабах на хроматографическую колонку (2,5?40 см) с ХАД-16, уравновешенную дистиллированной водой, через перистальтический насос наносили водный раствор ФГМБ с массовой долей сухих веществ от 20 до 45% в объёме от 10 до 25 мл. После этого проводили элюирование дистиллированной водой со скоростью 2,0 мл/мин в течение 100 минут, отбирая хроматографические фракции на коллектор. Колонку далее регенерировали последовательным пропусканием 600 мл 0,2 М гидроокиси натрия, 500 мл 0,1 М соляной кислоты и 1000 мл дистиллированной воды. В отобранных фракциях измеряли оптическую плотность при 280 нм на спектрофотометре и определяли содержание сухих веществ рефрактометрическим методом, а также проводили анализ ММР методом эксклюзионной хроматографии. После этого фракции лиофильно высушивали. В высушенных фракциях определяли содержание фенилаланина методом ВЭЖХ на обращенной фазе.
В процессе перехода к пилотным условиям производства была применена полупромышленная хроматографическая колонка с неподвижной фазой ХАД-16 размером 44Ч100 см). В качестве основного критерия подобия при переходе к пилотной установке нами было принято время элюирования полного объема колонки, которое составило 100 минут.
При исследовании характеристик ФГМБ и их фракций, полученных методами мембранной фильтрации и препаративной АХр в лабораторных и полупромышленных масштабах, использовали следующие методы.
ММР пептидов оценивали методом эксклюзионной хроматографии. Были использованы две хроматографические колонки с характеристиками пористости, наиболее подходящими для получаемых ФГМБ. В качестве аналитической колонки применяли колонку высокого давления TSK GEL G2000 SWLX (HP, США), 0,8Ч30см. В качестве элюента использовали 0,05 М калий фосфорнокислый однозамещенный с 0,15 М хлористым натрием и 0,01% азидом натрия или 0,2 М хлористый натрий с добавлением 0,01% азида натрия. Скорость элюирования составляла 0,2 мл/мин, в качестве проточного детектора использовали спектрофотометрический детектор на длину волны 280 нм.
Использовали также колонку среднего давления с неподвижной фазой «Супероза-12» («Фармация», Швеция) 1,6?50 см. Скорость элюирования составляла 2,0 мл/мин (при использовании тех же элюентов, что и для предыдущей колонки). В качестве детектора использовали проточный ультрафиолетовый детектор с длиной волны 280 нм, которая является наиболее специфической для белков и пептидов. Обе колонки откалиброваны по стандартному набору водорастворимых глобулярных белков производства фирмы «СЕРВА» (Германия) в диапазоне молекулярных масс (и, соответственно, времен удерживания) от свободного до полного объема.
Массовую долю общего азота в препаратах определяли на анализаторе 1130-AUTO-Kjeltek-3, содержание аминного азота определяли колориметрическим методом с реагентом 2,4,6-тринитробензолсульфокислотой по методике Воробьева с соавторами. Фракционирование азотистых веществ, а также изучение их состава и свойств проводили по известным методикам; массовую долю аминокислот - после гидролиза белков в 6 Н НСl на автоматическом аминокислотном анализаторе «ААА-400». Аминокислотный скор рассчитывали с использованием шкалы ФАО для идеального белка.
Массовую долю фенилаланина определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на колонке «Nucleosil 300-5 C18» 5 мкм, 2504,6 мм. Использовали в изократическом режиме жидкостной хроматограф «MERCK HITACHI» (Япония) с ультрафиолетовым детектором UV L-7400 и длиной волны 220 нм.
Определение протеолитической активности проводили спектрофотометрическим методом с использованием в качестве субстрата гемоглобина по Фармакопейной статье ФСП 42 0308-1449-01.
Остаточную АГ в ФГМБ определяли по методу торможения непрямого твердофазного иммуноферментного теста на полистироле. В основу метода положена конкуренция антигена, растворенного в объеме образца и такого же антигена, иммобилизованного на твёрдой фазе (полистироле) за связывание с ограниченным количеством специфических антител, растворённых в объёме образца. Путем построения графика в координатах десятичный логарифм разведения (ось абсцисс) - ингибирование реакции в % (ось ординат) рассчитывали методом линейной интерполяции концентрацию 50% ингибирования (ID50) для исследуемого (ФГМБ) и стандартного (белок молока, белок молочной сыворотки) образцов. На основании этих данных определяли остаточную АГ исследуемого образца в долях от АГ стандартного образца и кратность снижения антигенных свойств в ходе обработки.
Результаты экспериментов обрабатывали общепринятыми статистическими методами на ЭВМ с использованием пакетов программ EXCEL 2003 и SPSS 9.0 и 11.5 для Windows.
Глава 4. Оптимизация процессов ФГ молочных белков (КМБ и КСБ). Разработка технологии гидролизатов с заданным составом и свойствами сводится, главным образом, к получению препаратов с необходимой степенью гидролиза, которая в свою очередь, зависит от многих факторов. В качестве субстрата использовали системы, содержащие концентрат молочного белка (КМБ) с соотношением «казеин - сывороточные белки» (К/С), равным 80/20 (нативное соотношение казеинов и сывороточных белков, присущее молоку), и концентрат белка молочной сыворотки (КСБ), характеризуемый указанным соотношением равным 3/97 (соотношение, определяемое присутствием, в основном, сывороточных белков со следовыми количествами казеинов). В результате анализа литературных источников и поисковых исследований в лабораторных условиях с целью получения ФГМБ со средней и глубокой степенью гидролиза выбраны ферментные препараты «Панкреатин» и «Флавоэнзим», соответственно. В первой серии экспериментов изучены ММР ФГМБ, свидетельствующие о накоплении в них различных пептидов и аминокислот в условиях обработки высокоактивным промышленным ферментным препаратом «Панкреатин». В табл. 1 представлены результаты гидролиза КМБ «Панкреатином» в зависимости от продолжительности обработки. Обработку проводили ферментом в количестве 2% по массе сухих веществ, температуре 50+1оС и оптимальном для данного ферментного препарата значении рН 7,4-7,6, которое поддерживали путём рН-статирования.
Таблица 1 ММР гидролизатов КМБ при гидролизе «Панкреатином» через 2, 4 и 6 часов проведения реакции
№ |
Диапазон молекулярных масс, кД |
Относительное распределение, % при продолжительности гидролиза, ч |
|||
2 |
4 |
6 |
|||
1 |
Более 166 |
2,2 |
3,6 |
3,5 |
|
2 |
166-28,2 |
3,2 |
1,3 |
2,2 |
|
3 |
28,2-11,0 |
3,9 |
2,9 |
1,7 |
|
4 |
11,0-4,0 |
21,1 |
19,1 |
19,1 |
|
5 |
4,0-1,4 |
24,1 |
20,5 |
21,6 |
|
6 |
Менее 1,4 |
45,5 |
52,6 |
51,9 |
Как следует из представленных данных, ММР пептидов в продукте реакции практически не изменяется после 4 часов гидролиза, т.е. процесс по существу останавливается. Причина этого состоит, по-видимому, в быстрой инактивации ферментов, входящих в состав «Панкреатина», как вследствие процесса автолиза, так и ингибирования короткими пептидами - продуктами реакции. В дальнейших экспериментах использовали продолжительность обработки белковых субстратов «Панкреатином», равную 3 часам.
Таблица 2 ММР гидролизатов КСБ при гидролизе «Панкреатином» через 3 часа реакции в зависимости от наличия тепловой инактивации ферментного препарата
№ |
Диапазон молекулярных масс, кД |
Относительное распределение, % |
||
без инактивации |
с тепловой инактивацией |
|||
1 |
Более 166 |
6,5 |
4,4 |
|
2 |
166-28,2 |
3,6 |
1,2 |
|
3 |
28,2-11,0 |
3,6 |
3,0 |
|
4 |
11,0-4,0 |
19,2 |
21,9 |
|
5 |
4,0-1,4 |
14,2 |
15,4 |
|
6 |
Менее 1,4 |
52,9 |
54,1 |
Как следует из данных табл. 2, пептидный профиль панкреатинового гидролизата КСБ весьма сходен с таковым для КМБ. Тепловая инактивация фермента по окончании процесса ФГ практически не влияет на распределение молекулярных масс, что свидетельствует об отсутствии в значительных масштабах процессов агрегации и сшивки пептидов, которые могли бы неблагоприятно повлиять на биологическую ценность получаемого ФГМБ
Результаты оптимизации процесса протеолиза по показателю фермент-субстратного соотношения показали, что увеличение концентрации «Панкреатина» выше 1,5% по массе сухих веществ практически не сказывается на глубине гидролиза (табл. 3). В этой связи концентрация «Панкреатина» 1,5-2,0% по сухим веществам является оптимальной при ФГ белков коровьего молока.
Таблица 3ММР гидролизатов КСБ в зависимости от фермент/субстратного соотношения
№ |
Диапазон молекулярных масс, кД |
Относительное распределение, % при фермент/субстратного соотношении, % |
|||
0,5 |
1,5 |
3,0 |
|||
1 |
Более 166 |
9,9 |
4,5 |
1,9 |
|
2 |
166-28,2 |
12,3 |
3,8 |
2,4 |
|
3 |
28,2-11,0 |
22,7 |
4,6 |
3,3 |
|
4 |
11,0-4,0 |
22,9 |
27,1 |
29,4 |
|
5 |
4,0-1,4 |
8,8 |
20,1 |
20,5 |
|
6 |
Менее 1,4 |
23,4 |
39,9 |
42,5 |
Проведение протеолиза белков молока панкреатином вблизи его рН-оптимума (рН 7,4-7,6) требует постоянного рН-статирования раствором щелочи вследствие закисления реакционной смеси высвобождаемыми карбоксильными группами пептидов и аминокислот. При этом в составе гидролизата накапливаются ионы натрия или калия, вносимые с раствором щелочи, что неблагоприятным образом сказывается на его пищевой ценности и органолептических свойствах. В связи с этим, изучена возможность проведения ферментолиза «Панкреатином» без рН-статирования (табл. 4).
Таблица 4ММР гидролизатов КСБ при гидролизе «Панкреатином», полученные через 4 и 6 часов проведения реакции без подведения рН
№ |
Диапазон молекулярных масс, кД |
Относительное распределение, % при продолжительности гидролиза, ч |
||
4 |
6 |
|||
1 |
Более 166 |
13,2 |
11,0 |
|
2 |
166-28,2 |
2,6 |
1,9 |
|
3 |
28,2-11,0 |
5,7 |
5,6 |
|
4 |
11,0-4,0 |
25,0 |
22,2 |
|
5 |
4,0-1,4 |
12,5 |
14,5 |
|
6 |
Менее 1,4 |
41,0 |
44,8 |
Представленные результаты (для субстрата КСБ), свидетельствуют о меньшей глубине гидролиза белка в этих условиях, если судить по выходу пептидов в диапазоне 1,4-4,0 и менее 1,4 кД (в сравнении с табл. 2).
Таким образом, гидролиз «Панкреатином» без рН-статирования может использоваться в тех случаях, когда глубокий гидролиз белка не требуется.
Оптимизация процесса получения ФГМБ под действием панкреатина по показателю температуры позволила установить, что наилучшие результаты достигаются при 50+1оС. При более высоких температурах происходит быстрая инактивация фермента, а при пониженных (37+1оС) резко снижается атакуемость ряда индивидуальных белков в составе КСБ (таких, как -лактоглобулин), и они выявляются на хроматограммах гидролизатов в виде пиков с не измененной молекулярной массой.
При подборе условий гидролиза КСБ и КМБ ферментным препаратом «Флавоэнзим» принимали во внимание, что этот комплекс протеаз, продуцентом которых является низший гриб Asp.orhizae, обладает рН оптимумом активности вблизи рН 6,0, то есть для проведения процесса не требуется рН-статирование с применением щелочи. Кроме того, ферменты, входящие в состав «Флавоэнзима», обладают более высокой, в сравнении с «Панкреатином» устойчивостью к автолизу и термической инактивации. Следствием этого является возможность проведения процесса в течение значительно большего (в сравнении с «Панкреатином») времени, чем достигается существенное увеличение степени расщепления белкового субстрата. Как следует из данных табл. 5, степень гидролиза, достигаемая при 20 часах гидролиза КСБ, оказывается выше, чем при 6 часах обработки. При этом более 70% белкового материала переходит во фракцию в диапазоне молекулярных масс менее 1,4 кД, т.е. представляет собой свободные аминокислоты и олигопептиды.
Таблица 5Молекулярно-массовое распределение гидролизатов КСБ «Лакпродан 80» Флавоэнзимом» в количестве 5% по массе сухих веществ через 6 и 20 часов гидролиза
№ |
Диапазон молекулярных масс, кД |
Относительное распределение, % при продолжительности гидролиза, ч |
||
6 |
20 |
|||
1 |
Более 166 |
3,6 |
3,1 |
|
2 |
166-28,2 |
2,2 |
1,4 |
|
3 |
28,2-11,0 |
5,1 |
1,9 |
|
4 |
11,0-4,0 |
22,7 |
9,4 |
|
5 |
4,0- 1,4 |
15,8 |
13,7 |
|
6 |
Менее 1,4 |
50,6 |
70,5 |
Значение рН реакционной смеси, изначально равное 6,6 (что соответствует собственному значению рН белковых субстратов при их восстановлении водой) снижается на 0,5 единицы в течение первого часа гидролиза и далее не меняется в пределах точности измерения на протяжении всего процесса. В результате отсутствия рН-статирования в гидролизате не накапливаются катионы натрия или калия, что облегчает его использование в составе СП, требования к минеральному составу которых являются весьма жесткими, а также делает более эффективным хроматографическое фракционирование гидролизата.
Оптимизация параметра фермент-субстратного соотношения при гидролизе КСБ и КМБ «Флавоэнзимом» показала, что глубина гидролиза растёт вплоть до 5% фермента по массе сухих веществ реакционной смеси (табл. 6). Дальнейшее увеличение вносимого «Флавоэнзима» нецелесообразно, т.к. приводит к избыточному накоплению потенциально аллергенных материалов ферментного препарата в гидролизате, а также к удорожанию процесса.
Таблица 6 Зависимость ММР гидролизатов КМБ при гидролизе «Флавоэнзимом» от фермент/субстратного соотношения, продолжительность гидролиза 20 часов, температура 50+1єС
№ |
Диапазон молекулярных масс, кД |
Относительное распределение, % при фермент/субстратном соотношении |
|||
0,5% |
2,0% |
5,0% |
|||
1 |
Более 158 |
12,0 |
6,8 |
9,7 |
|
2 |
158-79,4 |
1,5 |
0,7 |
0,7 |
|
3 |
79,4-28,2 |
11,2 |
5,4 |
1,3 |
|
4 |
28,2-11,2 |
8,1 |
3,3 |
1,7 |
|
5 |
11,2-4,5 |
10,4 |
18,0 |
6,0 |
|
6 |
4,5-1,4 |
16,6 |
18,3 |
12,7 |
|
7 |
Менее 1,4 |
40,2 |
47,5 |
67,9 |
Отдельно изучена возможность использования двухстадийных схем протеолиза с последовательной обработкой «Панкреатином» и «Флавоэнзимом» или в обратной последовательности без промежуточной инактивации фермента. Результаты (данные не показаны) свидетельствуют о том, что такая обработка позволяет повысить на 10-20% содержание в ФГМБ продуктов глубокого гидролиза белка (молекулярной массой менее 1,4 кД) и одновременно снизить количество высокомолекулярных белковых фракций. Тем не менее, их полная элиминация при этом всё равно не достигается.
В исследуемых препаратах ФГМБ в процессе ФГ «Панкреатином» определяли содержание свободных аминокислот. Результаты исследований приведены в табл. 7.
Как показал анализ представленных экспериментальных данных, накопление свободных аминокислот происходило пропорционально продолжительности ФГ. Выявлено, что белки в составе КСБ требуют большего времени для ФГ, что связано, вероятно, с меньшей атакуемостью ферментами ряда глобулярных сывороточных белков (-лактоглобулин, сывороточный альбумин) в сравнении с казеинами, доминирующими в составе КМБ. Вместе с тем, способность пептидов - продуктов гидролиза казеина ингибировать ферментативную реакцию приводит к тому, что процесс протеолиза сывороточных белков оказывается, судя по накоплению аминокислот, более растянутым во времени.
В процессе лабораторных исследований на основании анализа остаточной протеолитической активности ферментов установлены оптимальные режимы инактивации: температура 93±2оС с выдержкой 5±0,2 мин.
Таблица 7 Накопление свободных аминокислот в процессе ФГ молочных белков при температуре 50+1оС, рН 7,5+0,1
Аминокислоты, мкмоль/л |
Белковые субстраты |
||||||||
КМБ |
КСБ |
||||||||
продолжительность ФГ, ч |
|||||||||
0,5 |
1,5 |
3,0 |
5,0 |
0,5 |
1,5 |
3,0 |
5,0 |
||
Триптофан |
917 |
1000 |
2100 |
2169 |
350 |
400 |
605 |
1750 |
|
Фенилаланин |
1442 |
2017 |
4033 |
4096 |
244 |
689 |
1333 |
2689 |
|
Лейцин |
1847 |
1947 |
3447 |
5516 |
1200 |
1856 |
2218 |
3622 |
|
Изолейцин |
692 |
731 |
1077 |
1201 |
686 |
971 |
1743 |
2657 |
|
Треонин |
- |
433 |
556 |
603 |
- |
500 |
1200 |
1575 |
|
Метионин |
436 |
564 |
1107 |
1176 |
311 |
667 |
800 |
1489 |
|
Лизин |
950 |
1168 |
2515 |
2615 |
920 |
1218 |
2619 |
3220 |
|
Валин |
500 |
730 |
1181 |
1270 |
1233 |
1600 |
2367 |
3567 |
|
Гистидин |
- |
17 |
69 |
75 |
- |
- |
- |
- |
|
Аргинин |
- |
17 |
69 |
75 |
- |
- |
- |
||
Аланин |
256 |
319 |
531 |
608 |
967 |
1133 |
1233 |
2267 |
|
Серин |
- |
209 |
280 |
316 |
- |
216 |
350 |
418 |
|
Глутаминовая кислота |
1250 |
2333 |
2600 |
2671 |
429 |
857 |
1025 |
1243 |
|
Глицин |
69 |
100 |
115 |
173 |
19 |
114 |
200 |
343 |
|
Тирозин |
688 |
1121 |
2421 |
2516 |
600 |
980 |
1890 |
3192 |
Таким образом, исследование в лабораторных масштабах процессов получения ФГМБ в результате гидролиза концентратов молочного белка с разным соотношением казеин/сывороточные белки промышленными ферментными препаратами позволило определить оптимальные условия проведения процесса. В случае использования «Панкреатина» оптимальным является концентрация фермента 2% по массе, температура 50±1оС, продолжительность реакции 3 часа, рН оптимум 7,5 (с рН-статированием щелочью или без него). Применение «Флавоэнзима» наиболее эффективно при содержании фермента 5% по массе сухих веществ, температуре 50±1оС, продолжительности реакции до 20 часов, рН оптимуме 6,0 (без рН-статирования). Подобранные условия действия ферментных препаратов использованы далее при получении ФГМБ в промышленных масштабах.
Итогом исследований в данном разделе явилась оптимизация технологических режимов ФГ для получения ФГМБ на основе КМБ и КСБ со средней и высокой степенью гидролиза. Основные параметры этих процессов и критически важные характеристики получающихся ФГМБ приведены в табл. 8.
Анализ критически важных характеристик ФГМБ, получающихся при действии «Панкреатина» и «Флавоэнзима» на молочные белки, показал, что они близки для КСБ и КМБ. Однако, с учётом существенно большей биологи ческой ценности КСБ в сравнении с КМБ, а также того обстоятельства, что ФГМБ на основе концентратов сывороточных белков имеют в целом гораздо менее выраженную горечь в сравнении с гидролизатами КМБ и казеина.
Таблица 8Технологические характеристики процесса ФГ
Параметры процесса и характеристики ФГМБ |
КСБ+ «Панкреатин» |
КМБ+ «Панкреатин» |
КСБ+ «Флавоэнзим» |
КМБ+ «Флавоэнзим» |
|
Массовая доля сухих веществ в растворе, % |
5 |
5 |
3 |
3 |
|
Количество фермента от массы субстрата, % |
2 |
2 |
5 |
5 |
|
Температура процесса оС |
50±1 |
||||
рН процесса |
7,4-7,6* |
7,4-7,6* |
5,8-6,0 |
5,8-6,0 |
|
Продолжительность процесса, ч |
3 |
3 |
20 |
20 |
|
Температура инактивации фермента, оС |
93±2 |
||||
Продолжительность инактивации, мин |
5+0,2 |
||||
Мср,** кД |
4,5 |
3,1 |
1,8 |
1,4 |
|
АГ |
510-3 |
110-3 |
1,510-3 |
510-4 |
Примечание. *Возможно использование рН-статирования раствором щелочи. **Мср- средняя молекулярная масса пептидов
В этой связи выбор КСБ в качестве основного объекта дальнейших исследований представляется предпочтительным.
Глава 5. Изучение характеристик ФГМБ в процессе мембранной обработки. Как было показано в предыдущем разделе, в результате ФГ белков коровьего молока (как КМБ, так и КСБ) не удаётся получить ФГМБ, полностью свободные от остаточных количеств нерасщепленного или частично расщепленного белка (в диапазоне молекулярных масс 10 кД и более), количество которого в отдельных случаях может достигать нескольких процентов при расчете по величине оптической плотности при длине волны 280 нм (см. табл. 1-6).
С учётом жёстких требований, предъявляемых к содержанию остаточных количеств нерасщепленных антигенов молока в составе гипоаллергенных СП для питания детей (особенно, страдающих аллергическими заболеваниями), использование полученных ФГМБ непосредственно в составе указанных продуктов не представляется возможным. Высокой степени элиминации из продукта макромолекулярных белковых структур можно достичь с использованием методов мембранной обработки гидролизатов.
Основными достоинствами мембранных методов обработки является их высокая селективность по высокомолекулярным фракции (ВМФ) с молекулярной массой более 10 кД и возможность длительного многократного использования мембран при высокой производительности процесса. При этом наряду с остаточными количествами нерасщепленного белкового субстрата из продукта удаляются следовые количества жира, бактерии, а также макромолекулярные компоненты используемого ферментного препарата.
В табл. 9-10 приведены результаты оценки ММР пептидов в ферментативных гидролизатах, полученных из образца КСБ после мембранных обработок. Использовали УФ-мембрану с размером пор 10 кД и последующую нанофильтрацию. Исходный гидролизат получен при обработке 2% «Панкреатином» в течение 3 часов и 5% «Флавоэнзимом» в течение 22 часов, соответственно.
Таблица 9 ММР пептидов ФГМБ, полученных из образца КСБ, при гидролизе «Панкреатином» после мембранной обработки
Диапазон молекулярных масс, кД |
Относительное распределение пептидов по молекулярным массам, % |
||||
исходный гидролизат |
УФ |
УФ+НФ, ВМФ |
УФ+НФ, НМФ* |
||
Более 166,0 |
6,5 |
0 |
0 |
0 |
|
166,0-28,2 |
3,6 |
0 |
0 |
0 |
|
28,2-11,0 |
3,6 |
2,2 |
3,7 |
0 |
|
11,0-4,0 |
19,2 |
16,3 |
28,0 |
0 |
|
4,0-1,4 |
14,2 |
19,5 |
27,3 |
9,9 |
|
Менее 1,4 |
52,9 |
65,0 |
41,0 |
90,1 |
Примечание. * НМФ - низкомолекулярная фракция
Анализ полученных результатов показал, что ультрафильтрационная обработка (в тангенциальном потоке при использованием мембран с пропускной способностью по молекулярной массе 10 кД) удаляет из реакционной смеси высокомолекулярные структуры размерами более 11 кД.
Последующее НФ-фракционирование приводит к практически полному удалению из образца пептидов с молекулярными массами более 1,4 кД.
Таблица 10 ММР пептидов ФГМБ, полученных из образца КСБ, при гидролизе «Флавоэнзимом» после мембранной обработки
Диапазон молекулярных масс, кД |
Относительное распределение пептидов по молекулярным массам, % |
||||
исходный гидролизат |
УФ |
УФ+НФ, ВМФ |
УФ+НФ, НМФ |
||
Более 166,0 |
3,2 |
0 |
0 |
0 |
|
166,0-28,2 |
1,0 |
0 |
0 |
0 |
|
28,2-11,0 |
0,5 |
0,3 |
0,5 |
0 |
|
11,0-4,0 |
10,0 |
8,5 |
17,8 |
0 |
|
4,0-1,4 |
17,4 |
15,9 |
25,5 |
8,6 |
|
Менее 1,4 |
67,9 |
75,3 |
56,2 |
91,4 |
Как следует из полученных данных, в составе пептидного фильтрата при НФ более 92% материала представлено свободными аминокислотами и олигопептидами; отсутствуют пептиды, превосходящие по массе 4 кД. При этом нанофильтрационный ретентат (остаток) обогащается «средними» пептидами в диапазоне молекулярных масс 1,4-4,5 кД. Особенностью этой фракции является то, что она обладает удовлетворительными органолептическими свойствами (практически отсутствует горечь) и достаточно низкой осмолярностью. Тем самым, она имеет хорошие перспективы использования в составе продуктов для энтерального питания и гипоаллергенных продуктов профилактической направленности, где важным показателем качества является вкус, позволяющий больным применять продукты не только через зонд, но и в виде напитка.
НМФ, получаемая в результате НФ, обладает, как будет показано ниже, чрезвычайно низкой остаточной АГ и может поэтому использоваться в качестве белкового компонента СП для больных, страдающих тяжелыми и средней тяжести формами аллергических заболеваний. Как будет показано в главе 6, она также перспективна для получения ферментативных гидролизатов, модифицированных по аминокислотному составу.
В табл. 11 приведены результаты определения остаточной АГ ФГМБ, полученных из образца КСБ путем гидролиза «Флавоэнзимом» и последовательных мембранных обработок.
Таблица 11 Остаточная АГ гидролизата КСБ «Флавоэнзимом» и его фильтрационных фракций
№ |
Образец |
АГ |
||
Гидролиз «Панкреатином» |
Гидролиз «Флавоэнзимом» |
|||
1 |
КСБ |
0,382 |
||
2 |
ФГМБ |
510-3 |
210-4 |
|
3 |
Фильтрат ФГМБ через УФ мембрану 10 кД |
610-5 |
610-6 |
|
4 |
ВМФ ФГМБ после НФ УФ-фильтрата |
710-5 |
710-6 |
|
5 |
НМФ ФГМБ после НФ УФ-фильтрата |
210-5 |
210-6 |
Из приведенных результатов можно заключить, что использование мембранных обработок позволяет снизить АГ более чем в 100 000 раз. Такое значение остаточной АГ позволяет использовать подобные гидролизаты в качестве белкового компонента в лечебных продуктах питания для детей, страдающих непереносимостью пищевых белков.
Отдельно был рассмотрен вопрос о влиянии повторных УФ-обработок на АГ ФГМБ. В табл. 12 приведены результаты таких исследований, выполненных на УФ- и СУФ-мембранах с пропускной способностью мембран 10 и 5 кД, соответственно.
Полученные результаты позволили установить, что эффективного снижения АГ ФГМБ можно добиться при двух повторных циклах УФ и СУФ; дальнейшие циклы обработки не дают эффекта. Для гипоаллергенных продуктов на основе гидролизатов КСБ предпочтительным является процесс СУФ, так как он позволяет получать гидролизаты с гарантированно сниженной до требуемого уровня АГ.
Таблица 12 Влияние кратности УФ и СУФ на АГ гидролизата КСБ «Флавоэнзимом»
№ |
Число УФ (циклов) |
АГ |
||
УФ 10 кД |
СУФ 5 кД |
|||
1 |
Исходный ФГМБ |
1.10-3 |
1.10-3 |
|
2 |
1 цикл |
5.10-5 |
2.10-5 |
|
3 |
2 ... |
Подобные документы
Пути повышения пищевой и биологической ценности кисломолочных продуктов. Роль молочнокислых бактерий в производстве кисломолочных продуктов. Добавки, повышающие пищевую и биологическую ценность молочных продуктов. Свойства облепихи и ее использование.
дипломная работа [94,7 K], добавлен 04.06.2009Значение сепарирования молока в биотехнологии производства молочных продуктов. Методы сепарирования, их преимущества и недостатки. Характеристика оборудования и технологий. Учет продукции, оценка качественных показателей и составление жирового баланса.
контрольная работа [394,7 K], добавлен 09.12.2014Разработка бизнес-плана как этап на пути привлечения кредитов или инвестиций. Определение основных потоков платежей при реализации бизнес-плана в ОАО "Яранский комбинат молочных продуктов", источников финансирования, его эффективности для производства.
курсовая работа [103,3 K], добавлен 25.02.2009Понятие о молоке: физиологические свойства, основные компоненты; водорастворимые витамины. Значение молочных продуктов в жизни человека. Технология обработки молока: охлаждение, пастеризация, гомогенизация, стерилизация; производство кефира, простокваши.
контрольная работа [28,7 K], добавлен 19.06.2013Пищевая ценность сухих молочных продуктов. Технология приготовления, качество сырья, соблюдение условий хранения, использование надежной тары - главное условие производства. Методы оценки качества сухих молочных продуктов, отбор проб и проведение анализа.
реферат [22,5 K], добавлен 05.04.2009Физико-химические особенности процесса получения оксида хрома, предназначенного для полировальных паст и для малярных целей. Основные реакции восстановления, протекание гидролиза хромитов натрия. Специфика хроматно-серного метода получения Сг2О3.
доклад [14,7 K], добавлен 25.02.2014Физико-химические особенности наполнителей. Влияние распределения наполнителя в матрице на физико-механические параметры. Адсорбционные свойства и прочности связи наполнителей. Технология получения электроизоляционных резинотехнических материалов.
научная работа [134,6 K], добавлен 14.03.2011Общие сведения о гидратах оксида алюминия. Физико-химические особенности получения оксида алюминия по методу Байера. Применение нанокристаллического бемита и условия для получения тугоплавких соединений. Рассмотрение технологии технической керамики.
дипломная работа [6,1 M], добавлен 24.01.2013Обоснование производственной мощности и разработка проекта по реконструкции комбината по выпуску молочных сгущенных консервов. Описание технологии и расчет функциональных схем производства. Расчет оборудования и автоматизация технологического процесса.
дипломная работа [230,2 K], добавлен 11.01.2012Применение мембранных процессов для фракционирования и концентрирования молочных продуктов. Схема переработки молока с использованием микро- и нанофильтрации. Регулирование концентрации белка. Электродиализ как способ деминерализации молочного сырья.
курсовая работа [1,1 M], добавлен 01.04.2014Аппаратурно-технологическая схема, общая компоновка оборудования. Краткий расчет продуктов, варочного котла, темперирующей машины, расчет защитного заземления. Эксплуатация конкретной единицы оборудования. Технологический процесс восстановления детали.
дипломная работа [618,7 K], добавлен 29.09.2010Рассмотрение механизма получения биоэтанола из растительного сырья. Изучение трансформации целлюлозы в растворимые формы простых углеводов, определение оптимальных условий для протекания процесса. Исследование состава субстрата после гидролиза.
презентация [279,1 K], добавлен 19.02.2014Компоновка помещений производственного корпуса молочного завода. Технико-химический и микробиологический контроль производства молочных продуктов. Разработка технологической схемы производства продуктов заданного ассортимента. Подбор оборудования.
дипломная работа [454,5 K], добавлен 18.11.2014Показатели микробиологической безопасности молочных продуктов. Контроль качества молока и кисломолочных продуктов. Метод определения количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов, дрожжей, плесневых грибов, бифидобактерий.
дипломная работа [143,4 K], добавлен 11.10.2015Основные направления использования окиси этилена, оптимизация условий его получения. Физико-химические основы процесса. Материальный баланс установки получения оксида этилена. Расчет конструктивных размеров аппаратов, выбор материалов для изготовления.
отчет по практике [1,2 M], добавлен 07.06.2014Физико-химические показатели коньячных виноматериалов. Технические требования к коньячному спирту и процессуально-технологическая схема его производства. Баланс продуктов при перегонке коньячного виноматериала и нормативные коэффициенты пересчета.
курсовая работа [33,0 K], добавлен 25.07.2010Обзор способов получения пропиленгликоля. Физико-химические характеристики сырья, вспомогательных материалов, основных и побочных продуктов. Описание технологической схемы. Расчет реакционного узла. Проверка правильности расчетов по программе PROEKT.
курсовая работа [50,8 K], добавлен 06.11.2012Сырьё для получения полипропилена и его полимеризация. Физико-химические и термодинамические основы процесса получения полипропилена. Металлоценовые катализаторы. Характеристика производимой продукции, используемого сырья и вспомогательных материалов.
курсовая работа [189,8 K], добавлен 19.05.2014Процесс селективной очистки масляных дистиллятов. Комбинирование процессов очистки. Фракция > 490 С величаевской нефти, очистка селективным методом. Характеристика продуктов процесса и их применение. Физико-химические основы процесса. Выбор растворителя.
курсовая работа [1,1 M], добавлен 26.02.2009Способы получения алюминиево-кремниевых сплавов. Процесс углетермического восстановления оксидов кремния и алюминия. Механизм и кинетика процесса восстановления алюмосиликатных шихт в диапазоне составов силикоалюминия с использованием восстановителя.
автореферат [439,3 K], добавлен 16.06.2009