Фотофизика фотоактивных трикарбоцианиновых красителей

Размещено на http://www.allbest.ru

Размещено на http://www.allbest.ru

Введение

Полиметиновые красители (ПК) широко применяются в устройствах квантовой электроники, в оптических дисках записи информации, в качестве биосенсоров различного назначения. В последнее время в литературе рассматриваются возможности их применения в качестве фотосенсибилизаторов для фотохимиотерапии и оптической диагностики локализации опухолей. При фотохимиотерапии в организм вводится фотосенсибилизатор, который накапливается в опухолевых тканях, а затем проводится локальное фотовоздействие излучением подходящей длины волны. В основе этого метода лежат фотохимические реакции, эффективность которых определяется фотосенсибилизатором и зависит от параметров светового потока и иных условий фотовоздействия. В связи с ростом резистентности микроорганизмов к антибиотикам, фототерапия становится перспективным методом для лечения и бактериальных инфекций.

Трикарбоцианиновые красители, относящиеся к классу полиметиновых красителей, имеют полосы поглощения расположенные в ближнем ИК-диапазоне. Некоторые красители обладают способностью избирательно накапливаться в раковых клетках и проявляют выраженные фототоксические свойства, что делает их перспективными фотосенсибилизаторами для фотохимиотерапии новообразований. Наличие у ПК интенсивного поглощения в области “окна прозрачности” биотканей позволяет получать информацию не только с поверхности, но и из глубины тканей. Применение соединений этого класса в медико-биологических аспектах предполагает проведение анализа их флуоресцентных свойств в биологических системах. В связи с этим важно определить условия, которые обеспечат возможность корректной регистрации характеристик фотолюминесценции красителей в тканях in vivo.

Актуальным является изучение вопросов фотофизики биоактивных соединений, имеющих интенсивное поглощение в спектральной области прозрачности биологических тканей, которые к моменту постановки диссертационной работы оставались малоизученными. Несомненный интерес представляет изучение спектрально-люминесцентных свойств трикарбоцианиновых красителей в культуре опухолевых клеток, в модельных биологических средах и в тканях животных in vivo. Исследования по выявлению взаимосвязи между спектральными характеристиками локализованных в опухолевых клетках красителей, флуоресцирующих в ближнем ИК- диапазоне, с эффективностью повреждения опухолевых тканей в процессе фотохимиотерапии позволяют выработать на этой основе рекомендации по оптимизации условий их практического применения.

Исследования механизма фотоактивности катионных трикарбоцианиновых красителей, который не укладывается в рамки схемы повреждения опухолевых клеток вследствие образования синглетного кислорода, представляют интерес не только с практической точки зрения, но и в плане построения общей картины протекания фотопроцессов в сложных органических молекулах.

Связь работы с крупными научными программами (проектами) и темами.

Основные результаты диссертационной работы получены при выполнении заданий Государственных программ научных исследований в области естественных наук:

«Разработать флуоресцентные инфракрасные спецметки, аппаратные средства их обнаружения и идентификации на документах и ценных бумагах» ГНТП «Защита документов» Задания З-5 (№ гос. регистрации 20065022, 2006 - 2007 г.г.).

«Разработка фотосенсибилизаторов на основе трикарбоцианиновых красителей, оптимизация их свойств и методик применения для лазерно-оптической диагностики и терапии онкологических заболеваний» ГКПНИ «Фотоника» (№ гос. регистрации 2007452, 2006 - 2010 г.г.).

«Фотоиндуцированные лазерным излучением процессы в модифицированных полиметиновых красителях связанных с макромолекулами» ГКПНИ «Кристаллические и молекулярные структуры» (№ гос. регистрации 2007455, 2006 - 2010 г.г.).

«Разработка методов исследования и диагностики систем с низкоразмерным структурированием на основе спектроскопии комбинационного рассеяния и люминесценции» ГКПНИ "Наноматериалы и нанотехнологии" (№ гос. регистрации 20063892, 2006 - 2010 г.г.).

«Развитие физических основ и разработка эффективных лимитеров лазерного излучения на основе новых полиметиновых красителей» ГКПНИ «Фотоника» (№ гос. регистрации 2007453, 2006 - 2010 г.г.).

«Разработка способа синтеза сенсибилизатора нового поколения для фотохимиотерапии новообразований с активацией светом ближнего ИК- диапазона, исследование его физико-химических и медико-биологических свойств» (№ гос. регистрации: 20103307, 2010 - 2011 г.г.).

Тема диссертационной работы «Фотофизика фотоактивных трикарбоцианиновых красителей» отвечает современным тенденциям развития науки и соответствует перечню приоритетных направлений фундаментальных и прикладных научных исследований Республики Беларусь (п.п.3.5; 3.12; 4.1; 4.4).

Цель и задачи исследования.

Целью настоящей работы являлось установление закономерностей протекания фотофизических и фотохимических процессов в симметричных трикарбоцианиновых красителях, влияния на них физико-химических параметров среды и возбуждающего излучения, выработка на этой основе рекомендаций по оптимизации условий применения ПК в качестве фотосенсибилизаторов для диагностики и лечения рака и фотодинамической антибактериальной терапии.

Для достижения поставленной в диссертационной работе цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Выяснить оптимальные условия, которые обеспечивают возможность корректной регистрации характеристик фотолюминесценции соединений в тканях in vivo с помощью спектрометра со световодом.

2. Изучить спектрально- флуоресцентные характеристики трикарбоцианинового красителя в опухолевых и мышечных тканях in vivo.

3. Выявить корреляции между спектральными характеристиками локализованного в опухолевых клетках, флуоресцирующего в ближнем ИК-диапазоне, красителя с эффективностью повреждения опухолевых тканей в процессе фотохимиотерапии.

4. Изучить влияние энергии фотона на эффективность фотохимиотерапии с трикарбоцианиновыми красителями.

5. Изучить механизм фотоактивности трикарбоцианиновых красителей в гипоксийных условиях.

Объект и предмет исследования.

В качестве объектов исследования выбраны уже известные и новые трикарбоцианиновые красители, которые синтезированы в лаборатории спектроскопии НИИПФП им. А.Н. Севченко БГУ. Предметом исследования являлись фотофизические и фотохимические процессы, спектрально-флуоресцентные характеристики трикарбоцианиновых красителей в растворах, биологических структурах и живом организме, а также фототоксичность новых красителей.

Положения, выносимые на защиту.

1. Различия в форме и положении максимума спектра флуоресценции трикарбоцианинового красителя при регистрации in vivo в опухолевых и нормальных тканях обусловлены: (а) понижением полярности окружения молекул при перераспределении фотосенсибилизатора из крови в ткани, (б) отличием спектров пропускания тканей вследствие изменения концентраций различных форм гемоглобина.

2. Фотохимиотерапевтическое повреждение опухолевых тканей возрастает в 3 раза при изменении длины волны фотовоздействия в диапазоне от 668 до 780 нм, сопровождается увеличением полуширины и коротковолновым смещением в спектрах флуоресценции трикарбоцианинов in vivo, и обусловлено различием в пропускании тканей и ростом локальной концентрации кислорода.

3. Необходимыми условиями корректной регистрации флуоресценции фотосенсибилизаторов для области 710-900 нм в биотканях in vivo являются: (а) для снижения уровня фоновой флуоресценции - использование в качестве источников возбуждения лазеров с длиной волны генерации более 670-680 нм; (б) для обеспечения пропорциональности сигнала флуоресценции фотосенсибилизатора его концентрации - контроль глубины проникновения света в ткань и изменений формы спектров со временем после введения фотосенсибилизатора.

4. Причиной изменения фотофизических и фотохимических характеристик трикарбоцианинового красителя в малополярных растворителях при введении тетрабутиламмоний бромида является увеличение доли тесных контактных пар и образование свободных радикалов в результате сверхбыстрого ( 150 фс) переноса электрона между катионом и анионом молекул.

Личный вклад соискателя.

Основные результаты, приведенные в диссертационной работе, получены автором самостоятельно. Все основные результаты, определяющие научную и практическую значимость работы, проведение исследований, статистическая обработка данных и их интерпретация получены и проработаны автором или при его непосредственном участии. Все приведенные с участием автора в диссертации публикации подготовлены либо лично автором, либо по его инициативе и непосредственном участии. Постановка задач, определение целей исследования и интерпретация экспериментальных результатов проводилась совместно с научным руководителем Самцовым М.П. В обсуждении результатов принимали участие соискатель, научный руководитель, а также доктор физико-математических наук Воропай Е.С. и кандидаты физико-математических наук Каплевский К.Н. и Мельников Д.С.

Луговский А.П. и Луговский А.А. осуществляли синтез исследованных соединений. Александрова Е.Н., Ермакова Т.С., Истомин Ю.П., Чалов В.Н. участвовали в обсуждении методики проведения отдельных экспериментов in vitro и in vivo. Буганов О.В., Тихомиров С.А., Широканов А.Д. принимали участие в планировании эксперимента по изучению нестационарных спектров индотрикарбоцианиновых красителей с фемтосекундным разрешением. Демид Д.И., Петров П.Т. принимали участие в обсуждении методов синтеза и очистки соединений. Радько А.Е., Тарасов Д.С., Шевченко К.А. принимали участие в разработке отдельных узлов спектрометрической аппаратуры.

Апробация результатов диссертации.

Основные результаты работы докладывались автором лично и обсуждались на следующих конференциях:

1. Международных научных конференциях «Волны -2006, -2007, -2008» (Москва - 2006, 2007, 2008).

2. 3 Международной конференции по молекулярной спектроскопии (Самарканд, 2006).

3. V Международной конференции молодых ученых и специалистов «Оптика-2007» (Санкт- Петербург, 2007).

4. XIV - XIX Республиканской научной конференции аспирантов, магистрантов и студентов (Гродно 2006 - 2011).

5. VIII и VIV Съездах белорусского общества фотобиологов и биофизиков (Минск - 2008, 2010).

6. VII и VIII Международных конференциях «Лазерная физика и оптические технологии» (Минск, 2008, 2010).

7. II и III Конгрессе физиков Беларуси (Минск - 2008, 2011).

8. 4-th International conference on materials science and condensed matter physics (Chisinau, 2008).

9. International Conference «Optical Techniques and Nano-Tools for Material and Life Sciences» (Minsk, 2010).

10. VIII Международной конференции «Лазерная физика и оптические технологии» (Минск, 2010).

11. 2 - 4 Международной научно- технической конференции «ПРИБОРОСТРОЕНИЕ» (Минск -2009, -2010, -2011).

12. XXIV Съезде по спектроскопии (Троицк - 2010).

13. VIII Международной научно-технической конференции "Квантовая электроника" (Минск, 2010).

14. Международной научно-практической конференции «Белорусские лекарства» (Минск, 2010).

15. Международной научно-практической конференции «Прикладные проблемы оптики, информатики, радиофизики и физики конденсированного состояния» (Минск, 2011).

Опубликованность результатов диссертации.

Результаты диссертации опубликованы в 41 научной работе, из них: 7 статей в реферируемых научных журналах (общим объёмом 3,35 авторского листа), 17 статей в сборниках научных трудов и материалов научных конференций, 17 тезисов докладов на научных конференциях. На основе результатов диссертации получен 1 патент и опубликована 1 заявка на патент.

1. Литературный обзор

Приведен обзор работ по исследованию спектрально-люминесцентных и фотохимических свойств ПК в растворах, а также при их взаимодействии с биологическими структурами и непосредственно в живом организме (in vivo). Проведен анализ литературных данных по использованию оптических фантомов эквивалентных биологической ткани при оптической медицинской диагностики и терапии. На основании анализа проблем и достижений, описанных в данной главе, сформулирована цель работы и основные задачи исследования.

2. Методический раздел

В этой главе приведены структурные формулы исследованных соединений с условными обозначениями ПК1 - ПК13, дано описание экспериментальных методов и аппаратуры для проведения спектрально-люминесцентных исследований трикарбоцианиновых красителей в растворах и биологических структурах, а также методики работы с микробиологическими структурами.

Описаны основные параметры разработанной управляемой газоразрядной импульсной лампы наносекундной длительности для использования в качестве источника возбуждения вторичных свечений в аппаратуре по исследованию быстропротекающих процессов в оптической спектроскопии, биологии, медицине. Разработанное устройство входит в состав спектрометрического комплекса для спектрально-кинетических измерений в наносекундном временном диапазоне и предназначено для измерения временных параметров флуоресценции.

3. Выяснение оптимальных условий, которые обеспечивают возможность корректной регистрации характеристик фотолюминесценции соединений в тканях in vivo

Показано, что для уменьшения влияния собственного свечения биотканей при регистрации флуоресценции в спектральном диапазоне 710-900 нм in vivo следует использовать для возбуждения излучение лазерных источников с длиной волны более 676 нм.

Для определения размеров области, с которой регистрируется флуоресценция красителя в конкретных экспериментальных условиях, проведен анализ влияния толщины образцов тканей на величину сигнала флуоресценции. Экспериментально установлено, что флуоресценция регистрируется от молекул красителя находящихся не только в коже и непосредственно прилегающих к ней слоях опухолевой ткани, но и на значительной глубине (~ 2 см)

На основании теории переноса излучения построена математическая модель для расчета интенсивности флуоресценции красителя, находящегося в биологической ткани.

Суммарная интенсивность флуоресценции на поверхности ткани в направлении световода рассчитывалась по формуле (1):

(1)

где - интегральная интенсивность света на глубине z, определялась из диффузионного уравнения теории переноса, - коэффициент поглощения фотосенсибилизатора, - квантовый выход флуоресценции фотосенсибилизатора.

Доля света флуоресценции, которая достигает поверхности ткани от молекул красителя на глубине z, определялась по формуле (2):

(2)

где , - коэффициент эффективного ослабления, - коэффициент рассеяния ткани, - коэффициент поглощения ткани, g - параметр анизотропии, А - параметр, зависящий от коэффициента преломления ткани и окружающей среды.

Сравнение теоретической функции F(0,z) с экспериментальной зависимостью величины сигнала флуоресценции от толщины образца позволило численными методами рассчитать параметры среды, при которых практически наблюдается их совпадение (рисунок 1).

Рисунок 1 - Зависимость рассчитанная (сплошная линия) и экспериментальная (точки) сигнала флуоресценции ПК от толщины опухолевой ткани

Показано, что путем увеличения площади поверхности, с которой регистрируется излучение, и ослабления механической нагрузки разброс интенсивности в спектрах флуоресценции фотосенсибилизатора примерно на порядок уменьшается при съеме информации in vivo.

Приведены результаты исследований по разработке модели имитирующих мер, обеспечивающих возможность их использования в качестве элемента контроля стабильности оптических параметров спектрометра, использующегося для определения интенсивности флуоресценции ПК в биологической ткани. Установлено, что имитирующие меры на основе целлюлозы и ПК могут достаточно долго сохранять неизменными флуоресцентные свойства, обеспечивают возможность регистрации концентрации фотосенсибилизатора в тканях in vivo и контроль стабильности параметров спектрометра. Установлено, что для обеспечения пропорциональности сигнала флуоресценции фотосенсибилизатора его концентрации in vivo необходимо контролировать глубину проникновения света и форму спектров флуоресценции при введении нескольких концентраций фотосенсибилизатора.

4. Изучение фотофизических свойств и фотоактивности трикарбоцианиновых красителей в биологических структурах

В результате исследований спектров флуоресценции ПК in vivo фотосенсибилизатора установлено, что форма и положение спектров красителей в опухолевых и здоровых тканях с течением времени после внутривенного введения изменяются (рисунок 2).

Происходит увеличение полуширины и длинноволновое смещение спектра флуоресценции ПК в опухоли и в бедре. Наблюдаемые изменения спектров развиваются в течение 40 - 100 минут после введения препарата, при этом интенсивность флуоресценции красителя в тканях уменьшается в несколько раз и примерно на порядок уменьшается концентрация красителя в крови животных.

Рисунок 2 - Зависимость полуширины (1, 2) и положения максимума (3, 4) спектра флуоресценции от времени после введения фотосенсибилизатора (1, 3) в опухолевой ткани SM-1, (2, 4) в бедре in vivo

Проведено сравнение спектральных свойств ПК в ряде сред для определения природы окружения молекул красителя в опухолевых тканях in vivo. Определено, что молекулы красителя in vivo, как и в клетках Hela, локализованы в среде с низкой диэлектрической проницаемостью, что характерно для соединений этого класса при образовании комплексов с белками или при встраивании в малополярные области липидного бислоя клеточных мембран. На основании полученных данных сделано заключение о том, что в течение первого часа после введения фотосенсибилизатор преимущественно локализован в крови, а затем перераспределяется по тканям. Показано, что отличия в спектрах флуоресценции зарегистрированные в здоровой и опухолевой тканях, связаны с повышенным содержанием дезоксигемоглобина в опухоли. Отмечено, что на основании анализа спектров флуоресценции полиметиновых красителей можно делать качественную оценку уровня оксигенации тканей.

Приведены результаты исследований по выявлению взаимосвязи между спектральными характеристиками локализованных в опухолевых клетках, флуоресцирующих в ближнем ИК-диапазоне красителей, с эффективностью повреждения опухолевых тканей в процессе фотохимиотерапии. Проведены исследования спектрально-люминесцентных свойств полиметинового красителя в тканях in vivo в процессе проведения сеанса фотохимиотерапии (энергетическая экспозиционная доза 280 Дж/см2) и в течение двух часов после его завершения. На основании данных по фармакокинетике in vivo для каждого штамма опухоли выбрано оптимальное время для начала фотовоздействия. Выявлено, что по окончании фотовоздействия в облученном участке опухоли наблюдается падение интенсивности флуоресценции, увеличение полуширины спектра красителя и коротковолновое смещение максимума полосы. В течение двух часов после фотовоздействия сигнал и форма спектра флуоресценции в облучённом участке опухоли в большинстве случаев оставались неизменными.

Проведен анализ соответствия степени повреждения опухолевых тканей и наблюдаемых в результате фотовоздействия спектральных изменений. Установлено, что некрозу опухолей глубиной до 2 см сопутствует коротковолновое смещение спектра флуоресценции ПК и увеличение его полуширины, после завершения фотовоздействия интенсивность флуоресценции в образцах не восстанавливается до исходного уровня.

Некроз опухолевой ткани при фотовоздействии с плотностью мощности 200 мВт/см2 наблюдался во всех случаях, при 300 мВт/см2 некрозы наблюдались для образцов, в которых после окончания фотовоздействия сигнал и форма спектра флуоресценции в облучённом участке опухоли оставались неизменными, а при 600 мВт/см2 некроз тканей уменьшался до глубины 5 мм.

Продемонстрировано, что основной причиной деформации спектра флуоресценции в процессе сеанса фотохимиотерапии является изменение соотношения различных форм гемоглобина (увеличение доли метгемоглобина) в крови.

Проведено сравнение эффективности фотохимиотерапии при использовании источников света с разной длиной волны излучения (668, 740 и 780 нм). Сравнение эффективности фотоповреждения опухолевых клеток проводилось при одинаковых концентрациях сенсибилизатора в опухолевой ткани и клетках в процессе проведения измерений, одинаковых скоростях расхода кислорода и красителя в процессе фотовоздействия для каждой из использованных длин волн излучения. Для этого были выполнены условия, обеспечивающие поглощение фотосенсибилизатором в биологических структурах одинакового количества квантов света в единицу времени (рисунок 3).

Рисунок 3 - Спектр поглощения (1) и флуоресценции (2, 3) фотосенсибилизатора в клетках HeLa (1, 3), in vivo с учётом влияния поглощения биоткани (2)

Установлено, что фотоцитотоксичность трикарбоцианинового красителя в культуре раковых клеток HeLa не зависит от длины волны воздействующего излучения при обеспечении поглощения фотосенсибилизатором одинакового числа квантов света в единицу времени. В экспериментах на животных in vivo

средняя глубина повреждения перевиваемых опухолей штаммов РС-1 и Са М-1 крыс при поддержании одинакового числа поглощенных фотосенсибилизатором квантов света в единицу времени в единице объема опухолей растёт с увеличением длины волны возбуждающего света (668 нм, 740 нм, 780 нм). Отличия в глубине повреждения опухоли для источников с различными длинами волн (668 нм, 740 нм, 780 нм) определяются как различием в пропускании тканей, так и различной эффективностью фотодиссоциации гемоглобина.

Выявлена высокая антистафилококковая и противогрибковая активность ряда симметричных трикарбоцианиновых красителей, прослеживается корреляция между строением исследованных соединений и их антимикробной активностью. Установлено, что наиболее фототоксичным соединением по отношению к клеткам S. enterica является краситель с противоионом Br-. При этом квантовый выход образования синглетного кислорода для красителя с противоионом Br- составляет 4,8 %, а для красителя с анионами I- и BF4- 6,1 % и 7,9 % соответственно. Сопоставление фотоактивности исследованных соединений и значений выхода генерации ими синглетного кислорода демонстрирует несоответствие между этими параметрами. Это указывает на то, что механизм фотобактерицидной активности трикарбоцианиновых красителей в целом определяется не только взаимодействием с синглетным кислородом. Установлено сохранение эффективности фотоинактивации бактериальных клеток с исследованными фотосенсибилизаторами при фотовоздействии источниками света с л=740 нм и л=780 нм.

5. Исследование фотофизических и фотохимических свойств трикарбоцианиновых красителей в полярных и малополярных растворителях

Показано, что для красителей в полярных растворителях катион и анион красителя находятся на удалении и не взаимодействуют, то есть соединения находятся в виде свободных ионов. В малополярных дихлорбензоле и хлороформе исследованные соединения находятся в виде контактных ионных пар, а в диоксане присутствует равновесная смесь ионных форм (свободных ионов и контактных ионных пар).

Обнаружены качественные различия в регистрируемых спектрах поглощения из возбужденных электронных состояний красителя для мало- и высоко- полярных растворителей. Показано, что наблюдаемые различия обусловлены сверхбыстрым переносом заряда в контактных ионных парах, вследствие которого происходит образование свободных радикалов.

Показано, что введение в малополярные растворы ПК соли тетрабутиламмоний бромида (ТБАБ) приводит к значительным изменениям фотофизических и фотохимических характеристик красителя, которые обусловлены проявлением увеличения доли тесных контактных ионных пар (таблица 1).

Таблица 1 - Фотофизические свойства красителя ПК1(Br) в растворах

Растворитель	л, нм	Дл, нм	л, нм	Дл, нм	ф, нс	цf	Ф	B, %
дихлорбензол	768	54	795	45	1.6	0.36	1.2·10-6	0.68
Дихлорбензол (10-2М ТБАБ)	763	67	791	59	1.5	0.32	4,3·10-6	1.03
этанол	742	53	773	48	1.4	0.28	4.7·10-7	0,1
этанол (10-2М ТБАБ)	742	53	773	48	1.4	0.28	4.7·10-7	0,1

Примечание - л- длина волны максимума флуоресценции; Дл - полуширина спектра флуоресценции; л- длина волны максимума поглощения; Дл - полуширина спектра поглощения; - время жизни молекул в первом возбужденном синглетном состоянии, зарегистрировано в максимуме спектра флуоресценции; f- квантовый выход флуоресценции; Ф - квантовый выход фотодеструкции; В - квантовый выход генерации синглетного кислорода.

В нормированном на возбуждение (пересчитанном на одинаковое количество возбуждаемых центров) спектре наведенного поглощения ПК1 при введении ТБАБ вклад дополнительной полосы с макс = 736 нм в спектр нестационарного поглощения увеличивается (рисунок 4), что свидетельствует о росте числа радикалов.

Рисунок 4 - Спектры нестационарного поглощения ПК1(Br-) в ДХБ (3) и при введении 10-2М тетрабутиламмоний бромида (4). Стационарные спектры поглощения (1) и флуоресценции (2)

Исследованы закономерности фотодеструкции красителей в освобожденных от кислорода растворах, проведено сравнение значений квантового выхода фотодеструкции ПК с разными противоионами в воздухонасыщенных и обезгаженных растворах и изучено влияние на этот параметр увеличения в растворе доли тесных контактных пар (таблица 2). В воздухонасыщенных спиртовых растворах фотодеструкция красителей с разными противоионами протекает с одинаковым квантовым выходом, значение которого не зависит от наличия соли. В обескислороженных спиртовых растворах квантовый выход фотодеструкции красителей уменьшается более чем на порядок, имеет одинаковые значения для ПК1 с разными противоионами и не изменяется при введении ТБАБ. В малополярном ДХБ удаление кислорода также приводит к уменьшению квантового выхода фотодеструкции красителей более чем на порядок и, в отличие от воздухонасыщенных растворов, не зависит от противоиона.

Таблица 2 - Квантовый выход фотодеструкции ПК1 (ClO4-, Br-, I-) в дихлорбензоле и этаноле в воздухонасыщенных и обескислороженных растворах при фотовоздействии излучением 740 нм

Противоион	ClO4-	I-	Br-
Растворитель	ДХБ	этанол	ДХБ	этанол	ДХБ	ДХБ+10-2М ТБАБ	этанол	этанол+10-2М ТБАБ
3O2	1,6·10-6	1,3·10-6	3,2·10-6	1,4·10-6	1,2·10-6	4,3·10-6	1,2·10-6	1,2·10-6
Без 3О2	7,9·10-8	7,2·10-8	8,9·10-8	7,4·10-8	8,0·10-8	2,8·10-7	7,0·10-8	6,0·10-8

Следует учесть, что квантовый выход генерации синглетного кислорода для ПК1(I-) - 9 %, для ПК1(ClO4-) - 0,45% и ПК1(Br-) - 0.68 %. В связи с этим, одинаковые значения квантового выхода фотодеструкции в обескислороженных растворах для красителей с разными противоионами свидетельствуют о том, что в этих условиях механизм фотодеструкции ПК не связан с выходом молекул в триплетное состояние. Наблюдаемое увеличение квантового выхода фотодеструкции ПК1(Br-) в ДХБ при введении ТБАБ, а также рост при этом числа образовавшихся радикалов, позволяет сделать заключение об определяющей роли образования радикалов в фотодеструкции ПК1 в обескислороженных растворах.

Заключение

Основные научные результаты диссертации.

1. Установлено, что для уменьшения влияния собственного свечения биотканей при регистрации флуоресценции в спектральном диапазоне 710-900 нм in vivo следует использовать для возбуждения излучение лазерных источников с длиной волны более 676 нм. Показано, что для обеспечения пропорциональности сигнала флуоресценции фотосенсибилизатора его концентрации in vivo необходимо контролировать глубину проникновения света и форму спектров флуоресценции на протяжении всего времени наблюдения при введении нескольких концентраций фотосенсибилизатора. Показано, что путем увеличения площади поверхности регистрации излучения in vivo и ослабления механической нагрузки разброс интенсивности в спектрах флуоресценции фотосенсибилизатора уменьшается примерно на порядок. Установлено, что имитирующие меры на основе ПК в целлюлозе могут достаточно долго сохранять неизменными флуоресцентные свойства, обеспечивают контроль стабильности параметров спектрометра и возможность регистрации концентрации фотосенсибилизатора в тканях in vivo [5, 23, 33, 38, 40].

2. Установлено, что форма и положение максимума спектра флуоресценции индотрикарбоцианинового красителя в опухолевых и нормальных тканях in vivo изменяются с течением времени после его внутривенного введения. На основании анализа спектральных свойств красителя in vivo и в плазме крови, кинетики их изменения от времени после введения показано, что у молекулы красителя в живом организме меняется окружение по мере перераспределения фотосенсибилизатора из крови в ткани. Установлено, что в тканях in vivo молекулы красителя локализованы в области с низкой диэлектрической проницаемостью среды. Показано, что изменение соотношения концентраций различных форм гемоглобина в крови оказывает влияние на положение и форму спектра флуоресценции красителя в тканях in vivo [1, 5, 6, 8, 10, 15, 17, 18, 20, 26, 27, 31, 39, 41].

3. Установлено, что при фотовоздействии на краситель в опухолевых тканях происходят изменения положения и полуширины спектров флуоресценции красителя, а в культуре клеток HeLa его спектральные характеристики постоянны. На основании анализа влияния перекрытия спектров поглощения эндогенных биомолекул со спектрами флуоресценции красителя и сравнения экспериментальных данных с результатами численного моделирования сделано заключение, что наблюдаемые деформации спектров флуоресценции ПК in vivo обусловлены изменением соотношения в опухолевой ткани различных форм гемоглобина. Показано, что спектральные характеристики ПК, флуоресцирующего в ближнем ИК- диапазоне, коррелируют с глубиной полученного при фотовоздействии некроза опухолевых тканей. Установлено, что для всех штаммов (S-45, SM-1 и W-256) некроз опухолевых тканей глубиной до 2 см образуется, при этом наблюдается увеличение полуширины и коротковолновое смещение спектра флуоресценции ПК, а также не восстанавливается интенсивность его флуоресценции [6, 7, 19, 20-22, 24, 32, 34-37].

4. Установлено, что при фотовоздействии на трикарбоцианиновые красители в клетках HeLa квантами света разной энергии при обеспечении условия поглощения фотосенсибилизатором одинакового количества фотонов в единицу времени повреждение клеток происходит с одинаковой эффективностью. В экспериментах на животных in vivo для двух штаммов опухолей при изменении длины волны фотовоздействия в диапазоне от 668 до 780 нм и поддержании одинакового числа поглощенных квантов света в единицу времени в единице объема опухолей глубина их повреждения возрастает в 3 раза. Наблюдаемые изменения связаны как с различием в пропускании тканей in vivo при увеличении длины волны светового излучения, так и с ростом локальной концентрации кислорода. Установлено, что фотобактерицидная активность трикарбоцианиновых красителей не обусловлена взаимодействием с синглетным кислородом [2, 11-14, 28-30].

5. Показано, что введение в малополярные растворы трикарбоцианинового красителя тетрабутиламмоний бромида приводит к значительным изменениям фотофизических и фотохимических характеристик красителя, которые обусловлены проявлением увеличения доли тесных контактных ионных пар. Показано, что механизм фотодеструкции трикарбоцианинового красителя в обескислороженных растворах не связан с выходом молекул в триплетное состояние. Увеличение квантового выхода фотодеструкции трикарбоцианинового красителя в малополярном растворителе при введении тетрабутиламмоний бромида, а также рост при этом числа образовавшихся радикалов свидетельствует об определяющей роли образования радикалов в фотодеструкции красителя в обескислороженных растворах [3, 4, 16, 9, 25].

Рекомендации по практическому использованию результатов

Полученные экспериментальные данные важны для понимания механизмов фотоактивности индотрикарбоцианиновых красителей в опухолевых клетках и могут служить основой для оптимизации структуры молекул ПК при их использовании в качестве сенсибилизаторов для фотодинамической терапии онкологических заболеваний.

Значительное повышение эффективности ФДТ с использованием трикарбоцианиновых сенсибилизаторов при увеличении длины волны фотооблучения до 780 нм не обусловлено особенностями их строения и может быть использовано для любых фотосенсибилизаторов этого спектрального диапазона. Показано, что путем использования спектральных характеристик на разных стадиях фотовоздействия можно оптимизировать протокол сеанса фотохимиотерапии и повышать его эффективность.

Полученные данные по фотобактерицидной активности ПК свидетельствуют о целесообразности и перспективности поиска среди этой группы соединений новых высокоактивных химиотерапевтических средств, которые найдут применение при лечении инфекционных болезней стафилококковой и грибковой этиологии. Полученные результаты исследований могут найти применение при создании новых питательных дифференциально-диагностических сред.

Разработанная управляемая газоразрядная импульсная лампа наносекундной длительности может быть использована в качестве источника возбуждения вторичных свечений в аппаратуре по исследованию быстропротекающих процессов в оптической спектроскопии, биологии, медицине.

Результаты исследования фотофизических свойств трикарбоцианиновых красителей в растворах и в целлюлозе использованы при разработке и серийном производстве флуоресцентных инфракрасных меток для повышения степени защиты ценных бумаг и документов.

Литература

трикарбоцианиновый краситель фотолюминесценция спектрометр

1. Фотодинамическая лазерная терапия и диагностика областей локализации на основе новых типов фотосенсибилизаторов / Е.С. Воропай, М.П. Самцов, К.Н. Каплевский, Д.Г. Мельников, Л.С. Ляшенко // Известия РАН. Серия физическая. - 2007. - Т. 71, № 1. - С. 145-149.

2. Влияние энергии фотона на эффективность фотохимиотерапии / М.П. Самцов, Е.С. Воропай, К.Н. Каплевский, Д.Г. Мельников, Ю.П. Истомин, Л.С. Ляшенко // Журнал Прикладной Спектроскопии. - 2009. - Т. 76, № 4. - С. 576-582.

3. Быстропротекающие фотопроцессы в симметричном индотрикарбоцианиновом красителе HITC в растворах / М.П. Самцов, С.А. Тихомиров, О.В. Буганов, К.Н. Каплевский, Д.Г. Мельников, Л.С. Ляшенко // Журнал Прикладной Спектроскопии. - 2009. - Т. 76, № 6. - С. 830-838.

4. Фотообесцвечивание полиметиновых красителей в малополярных растворителях / Е.С. Воропай, М.П. Самцов, К.Н. Каплевский, Д.Г. Мельников, Л.С. Ляшенко, А.А. Луговский // Известия Гомельского государственного университета имени Ф.Скорины. - 2009. - Т. 56, №5. - С. 134-136.

5. Спектрально-люминесцентные свойства индотрикарбоцианинового красителя в биотканях / М.П. Самцов, Е.С. Воропай, Д.Г. Мельников, Л.С. Ляшенко, А.А. Луговский, Ю.П. Истомин // Журнал Прикладной Спектроскопии. - 2010. - Т. 77, № 3. - С. 437-443.

6. Ляшенко, Л.С. Влияние гемоглобина на флуоресценцию полиметиновых красителей in vivo / Л.С. Ляшенко // Вестн. Бел. Гос. ун-та. Сер.1. - 2011. - №1. - С. 10-13.

7. Флуоресценция фотосенсибилизатора на основе индотрикарбоционинового красителя при фотохимиотерапии / М. П. Самцов, Е.С. Воропай, Л.С. Ляшенко, Д.Г. Мельников, К.Н. Каплевский, А.П. Луговский // Журнал Прикладной Спектроскопии. - 2011. - Т. 78, №1. - С. 121-127.

8. Мельников, Д.Г. Особенности флуоресценции трикарбоцианинового красителя в тканях in vivo / Д.Г. Мельников, Л.С. Ляшенко // Физика конденсированного состояния: тезисы докладов XIV Республиканской научной конференции аспирантов, магистрантов и студентов, Гродно, 26-28 апреля 2006 г. / редкол.: Е.А. Ровба [и др.]. - Гродно, 2006. - С. 233-235.

9. Мельников, Д.Г. Состояние ионного равновесия индотрикарбоцианинового красителя HITC в растворах / Д.Г. Мельников, Л.С. Ляшенко // Физика конденсированного состояния: тезисы докладов XV Республиканской конф. аспирантов, магистрантов и студентов, Гродно, 25-27 апреля 2007 г.: в 2 ч. / редкол.: Е.А. Ровба [и др.]. - Гродно, 2007. - Ч. 2. - С. 10-13.

10. Влияние компонент крови на флуоресценцию полиметинового красителя in vivo / Е.С. Воропай, М.П. Самцов, К.Н. Каплевский, Д.Г. Мельников, Л.С. Ляшенко // XI Всеросс. науч. школа-семинар «Волны - 2007»: труды школы семинара, Москва, Россия, 21-26 мая 2007 г. / МГУ; редкол.: А.П. Сухоруков [и др.]. - Москва, 2007. - С. 19-21.

11. Влияние оптических свойств биоткани на эффективность фотохимиотерапии / Е.С. Воропай, М.П. Самцов, К.Н. Каплевский, Д.Г. Мельников, Л.С. Ляшенко // XI Всеросс. науч. школа-семинар «Волны - 2008»: труды школы семинара, Москва, Россия, 26-31 мая 2008 г. / МГУ; редкол.: А.П. Сухоруков [и др.]. - Москва, 2008. - С. 26-28.

12. Фотосенсибилизаторы и фотоактивируемые антимикробные препараты для медицинских применений / Е.С. Воропай, М.П. Самцов, К.Н. Каплевский, Д.Г. Мельников, Л.С. Ляшенко // Лазерная физика и оптические технологии: VII Международная научная конференция: сб. научн. тр. конф., Минск, 17-19 июня 2008 г.: в 3 томах / НАН Беларуси, Институт физики имени Б.И. Степанова Национальная академия наук Беларуси, Белорусский республиканский фонд фундаментальных исследований, Российский фонд фундаментальных исследований, Белорусское физическое общество; под ред. Н.С. Казак [и др.]. - Минск, 2008. - Т. 2. - С. 318-321.

13. Фотодинамическая антимикробная активность индотрикарбоцианиновых красителей / Л.С. Ляшенко, М.П. Самцов, Т.С. Ермакова, Е.С. Воропай, Д.Г. Мельников, А.П. Луговский // Молекулярные, мембранные и клеточные основы функционирования биосистем: Междунар. науч. конф.: сб. ст., Минск, 25-27 июня 2008 г.: в 2 ч. / Восьмой съезд Белорус. обществ. об-ния фотобиологов и биофизиков; под ред. С.Н. Черенкевич [ и др.]. - Минск: Изд. центр БГУ, 2008. - Ч. 2. - С. 98-100.

14. Влияние длины волны излучения на эффективность фотохимиотерапии рака с фотосенсибилизатором ТИКС / Д.Г. Мельников, М.П. Самцов, Е.Н. Александрова, Ю.П. Истомин, Е.С. Воропай, Л.С. Ляшенко // Молекулярные, мембранные и клеточные основы функционирования биосистем: Междунар. науч. конф.: сб. ст., Минск, 25-27 июня 2008 г.: в 2 ч. / Восьмой съезд Белорус. обществ. об-ния фотобиологов и биофизиков; под ред. С.Н. Черенкевич [и др.]. - Минск: Изд. центр БГУ, 2008. - Ч. 2. - С. 107-109.

15. Люминесценция симметричных индотрикарбоцианиновых красителей при связывании с полимерами / К.Н. Каплевский, Д.Г. Мельников, А.П. Луговский, Л.С. Ляшенко, М.П. Самцов, Е.С. Воропай // Лазерная и оптико-электронная техника: межвуз. cб. науч. ст. / Бел. гос. ун-т ; редкол.: И.С. Манак [и др.]. - Минск, 2008. - В.11 - С. 154-162.

16. Механизм образования радикалов индотрикарбоцианиновым фотосенсибилизатором / М.П. Самцов, С.А. Тихомиров, Л.С.Ляшенко, Д.Г. Мельников, О.В. Буганов, А.Д. Широканов, Е.С. Воропай // Молекулярные, мембранные и клеточные основы функционирования биосистем: Междунар. науч. конф.: сб. ст., Минск, 23-25 июня 2010 г.: в 2 ч. / Девятый съезд Белорус. обществ. об-ния фотобиологов и биофизиков; под ред. С.Н. Черенкевич [и др.]. - Минск: Изд. центр БГУ, 2010. - Ч. 2. - С.243-245.

17. Спектральные свойства индотрикарбоцианинового красителя в биотканях / М.П. Самцов, Е.С. Воропай, Д.Г. Мельников, Л.С.Ляшенко, А.А. Луговский, Ю.П.Истомин // Молодежная школа по оптике и спектроскопии: труды XXIV-го Съезда по спектроскопии, Москва, Троицк, 28 февраля - 5 марта 2010 г.: в 2 т. - Москва, 2010. - Т. 2. - С. 380-381.

18. Флуоресценция индотрикарбоцианинового фотосенсибилизатора в биотканях / Л.С. Ляшенко, А.А. Луговский, Д.Г. Мельников, М.П. Самцов, Е.С. Воропай, Ю.П. Истомин // Молекулярные, мембранные и клеточные основы функционирования биосистем: Междунар. науч. конф.: сб. ст., Минск, 23-25 июня 2010 г.: в 2 ч. / Девятый съезд Белорус. обществ. об-ния фотобиологов и биофизиков; под ред. С.Н. Черенкевич [и др.]. - Минск: Изд. центр БГУ, 2010. - Ч. 2. - С. 246-248.

19. Влияние фотовоздействия на флуоресценцию ик- фотосенсибилизатора in vivo / К.Н. Каплевский, Д.Г. Мельников, Л.С. Ляшенко, М.П. Самцов, Е.С. Воропай, В.Н. Чалов // Молекулярные, мембранные и клеточные основы функционирования биосистем: Междунар. науч. конф.: сб. ст., Минск, 23-25 июня 2010 г.: в 2 ч. / Девятый съезд Белорус. обществ. об-ния фотобиологов и биофизиков; под ред. С.Н. Черенкевич [и др.]. - Минск: Изд. центр БГУ, 2010. - Ч. 2. - С. 213-215.

20. Фотоника молекул трикарбоцианинового красителя HITC в растворах / М.П. Самцов, С.А. Тихомиров, Л.С. Ляшенко, О.В. Буганов, Д.Г. Мельников, Е.С. Воропай // VIII Международная научная конференция «Лазерная физика и оптические технологии»: сборник науч. трудов конф., Минск, 27-30 сентября 2010 г.: в 2 т. / НАН Беларуси, Мин-во обр. РБ, Инс. физики им. Б.И. Степанова НАН Беларуси, ГрГУ, Бел. респуб. фонд фундам. иссл, Бел. физич. о-во, Науч.-тех. ассоциация “Оптика и лазеры”; под ред.: В.А. Орловича [и др.]. - Минск, 2010. - Т.1. - С. 89-92.

21. Трикарбоцианиновые красители - фотосенсибилизаторы для лазерно- оптической диагностики и фототерапии / Е.С. Воропай, А.П. Луговский, М.П. Самцов, К.Н. Каплевский, Л.С. Ляшенко // VIII Международная научная конференция «Лазерная физика и оптические технологии»: сборник науч. трудов конф., Минск, 27-30 сентября 2010 г.: в 2 т. / НАН Беларуси, Мин-во обр. РБ, Инс. физики им. Б.И. Степанова НАН Беларуси, ГрГУ, Бел. респуб. фонд фундам. иссл, Бел. физич. о-во, Науч.-тех. ассоциация “Оптика и лазеры”; под ред.: В.А. Орловича [и др.]. - Минск, 2010. - Т.1. - С. 231-234.

22. Индотрикарбоцианин с модифицированной структурой в качестве фотосенсибилизатора для фотодинамической терапии злокачественных опухолей / М.П. Самцов, П.Т. Петров, А.П. Луговский, Е.С. Воропай, А.А. Луговский, Л.С. Ляшенко, Д.И. Демид, Д.С. Тарасов, Ю.П. Истомин // Белорусские лекарства: материалы международной научно-практической конференции, Минск, 2-3 ноября 2010 г. / НАН РБ. - Минск, 2010. - C. 181-183.

23. Особенности регистрации флуоресценции полиметиновых красителей в биотканях / М.П. Самцов, Л.С. Ляшенко, Д.С. Тарасов, К.Н. Каплевский, А.Е. Радько // Прикладные проблемы оптики, информатики, радиофизики и физики конденсированного состояния: материалы международной научно-практической конференции посвященной 40-летию НИИПФП им. А.Н. Севченко БГУ, Минск, 28 февраля 2011 г. / НИИПФП им. А.Н. Севченко БГУ; под ред. В.И. Попечиц [и др.]. - Минск, 2011. - C. 63-64.

24. Фотосенсибилизаторы нового поколения для фотодинамической лазерной терапии и оптической диагностики онкологических заболеваний / М.П. Самцов, Е.С. Воропай, А.П. Луговский, А.А. Луговский, К.Н. Каплевский, Л.С. Ляшенко // Прикладные проблемы оптики, информатики, радиофизики и физики конденсированного состояния: материалы международной научно-практической конференции посвященной 40-летию НИИПФП им. А.Н. Севченко БГУ, Минск, 28 февраля 2011 г. / НИИПФП им. А.Н. Севченко БГУ; под ред. В.И. Попечиц [и др.]. - Минск, 2011. - C. 65-66.

25. Ляшенко, Л.С. Особенности фотодеструкции полиметиновых красителей в биологических структурах при облучении лазером в условиях гипоксии / Л.С. Ляшенко, К.Н. Каплевский // X Республиканская научная конференция студентов и аспирантов высших учебных заведений РБ (НИРС-2005): сборник статей науч. конф., Минск, 14-16 февраля, 2005 г.: в 3 ч./ БГУ; редкол.: С.К. Рахманов [и др.]. - Минск, 2005. - Ч.2. - C. 235.

26. Люминесцентная диагностика локализации злокачественных новообразований / Е.С. Воропай, М.П. Самцов, К.Н. Каплевский, Д.Г. Мельников, Л.С. Ляшенко // III Международная конференция по молекулярной спектроскопии: тезисы докладов Международной конференции, Самарканд, Узбекистан, 29-31 мая 2006 г. / Самаркандский гос. ун-т. - Самарканд, 2006. - С. 144-145.

27. Фотодинамическая лазерная терапия на основе индотрикарбоцианиновых типов фотосенсибилизаторов / Е.С. Воропай, М.П. Самцов, К.Н. Каплевский, Л.С. Ляшенко, Д.М. Мельников // IV Международный оптический конгресс «Оптика - XXI век»: труды международной молодежной школы “Оптика-2006”, Санкт-Петербург, Россия, 16-20 октября 2006 г. / СПбГУ ИТМО; редкол.: Ю.Л. Колесников [и др.]. - Санкт-Петербург, 2006. - C. 2-4.

28. Ляшенко, Л.С. Антибактериальное действие индотрикарбоцианиновых красителей / Л.С. Ляшенко, Д.Г. Мельников // Физика конденсированного состояния: тезисы докладов XVI Республиканской конф. аспирантов, магистрантов и студентов, Гродно, 23-25 апреля 2008 г.: в 2 ч. / редкол.: Е. А. Ровба [и др.]. - Гродно, 2008. - Ч.1. - С. 211- 213.

29. Мельников, Д.Г. Фотохимиотерапевтические свойства трикарбоцианинового красителя с источниками света разной длины волны / Д.Г. Мельников, Л.С. Ляшенко // Физика конденсированного состояния: тезисы докладов XVI Республиканской конф. аспирантов, магистрантов и студентов, Гродно, 23-25 апреля 2008 г.: в 2 ч. / редкол.: Е.А. Ровба [и др.]. - Гродно, 2008. - Ч.1. - С. 220- 221.

30. Influence of photons energy the efficiency of photochemotherapy with thicarbocyanine dye / E.S. Voropay, M.P. Samtsov, K.N. Kapleusky, D.G. Melnikov, L.S. Liashenko // 4th International conference on materials science and condensed matter physics (MSCMP 2008), Chisinau, Moldova, 23-26 september 2008. - Chisinau, 2008. - P. 82.

31. Спектрально - люминесцентные свойства полиметинового красителя при связывании с целлюлозой / Д.Г. Мельников, М.П. Самцов, Е.С. Воропай, А.А. Луговский, Л.С. Ляшенко // II конгресс физиков Беларуси: сборник науч. трудов, Минск, 3-5 ноября 2008 г. / НАН Беларуси, Мин-во образ., Институт физики им. Б.И. Степанова, ОО «Белорусское физическое общество», Бел. респуб. фонд фундам. иссл.; редкол.: С.Я. Килин [и др.]. - Минск, 2008. - C. 16.

32. Тарасов, Д.С. Флуоресцентный анализ динамики накопления трикарбоцианиновых красителей в раковых клетках / Д.С. Тарасов, Л.С. Ляшенко // Физика конденсированного состояния: тезисы докладов XVII Республиканской конф. аспирантов, магистрантов и студентов, Гродно, 16-17 апреля 2009 г./ редкол.: Е. А. Ровба [и др.]. - Гродно, 2009. - С. 116-117.

33. Мониторинг содержания фотосенсибилизатора в крови с помощью флуоресцентных инфракрасных изображений / Л.С. Ляшенко, Е.С. Воропай, К.Н. Каплевский, М.П. Самцов, В.Н. Чалов // Приборостроение-2010: материалы 3-й международной научно-технической конференции, Минск, 10-12 ноября 2010 г. / БНТУ. - Минск, 2010. - C. 250-252.

34. Особенности фотофизических свойств растворимого в воде индотрикарбоцианинового красителя / Д.С. Тарасов, Л.С. Ляшенко, А.А. Луговский, А.П. Луговский, М.П. Самцов, Е.С. Воропай // Квантовая электроника: материалы VIII Международной научно-технической конференции, Минск, 22-25 ноября 2010 г. / Акад. упр. при Президенте Респ. Беларусь; под ред. И.С. Манака. - Минск, 2010. - C. 70.

35. Модифицированные трикарбоцианиновые красители потенциальные фотосенсибилизаторы для лазерной диагностики и фототерапии / Л.С. Ляшенко, А.П. Луговский, А.А. Луговский, К.Н. Каплевский, Д.С. Тарасов, Е.С. Воропай, М.П. Самцов, Ю.П. Истомин // Квантовая электроника: материалы VIII Международной научно-технической конференции, Минск, 22-25 ноября 2010 г. / Акад. упр. при Президенте Респ. Беларусь; под ред. И.С. Манака. - Минск, 2010. - C. 200.

36. Ляшенко, Л.С. Особенности флуоресценции индотрикарбоцианинового красителя in vivo / Л.С. Ляшенко, Д.С. Тарасов // Физика конденсированного состояния: тезисы докладов XVIII Респ. науч. конф. аспирантов, магистрантов и студентов, Гродно, 21-23 апреля 2010 г./ редкол.: Е.А. Ровба [и др.]. - Гродно, 2010. - C. 167-168.

37. Optical diagnostics of the tumor tissue damage efficiency as a result of photochemotherapy / M.P. Samtsov, E.S. Voropay, L.S. Liashenka, K.N. Kapleusky, D.G. Melnikau // International Conference «Optical Techniques and Nano-Tools for Material and Life Sciences» (OTN4MLS-2010), Minsk, Belarus, 15-19 June 2010. - Minsk, 2010. - P. 53.

38. Тарасов, Д.С. Неинвазивная регистрация фотосенсибилизатора в крови с помощью лазероиндуцированных инфракрасных изображений / Д.С. Тарасов, Л.С. Ляшенко // Физика конденсированного состояния: тезисы докладов XIX Республиканской науч. конф. аспирантов, магистрантов и студентов, Гродно, 19-20 апреля 2011 г./ редкол.: Е.А. Ровба [и др.]. - Гродно, 2011. - C. 216-218.

39. Фотофизические свойства новых трикарбоцианиновых красителей с полиэтиленгликолем / Д.С. Тарасов, Л.С. Ляшенко, А.А. Луговский, М.П. Самцов, Е.С. Воропай // III Конгресс физиков Беларуси: cборник тезисов, Минск, 25-27 сентября 2011. / НАН Беларуси, Мин-во образ., Институт физики им. Б.И. Степанова, ОО «Белорусское физическое общество», Бел. респуб. фонд фундам. иссл.; редкол.: С.Я. Килин [и др.]. - Минск, 2011. - C. 26.

40. Специфика регистрации флуоресценции фотосенсибилизаторов для ближнего ик- диапазона в биообъектах / Л.С Ляшенко, Д.С. Тарасов, М.П. Самцов, К.Н. Каплевский, Е.С. Воропай // III Конгресс физиков Беларуси: cборник тезисов, Минск, 25-27 сентября 2011. / НАН Беларуси, Мин-во образ., Институт физики им. Б.И. Степанова, ОО «Белорусское физическое общество», Бел. респуб. фонд фундам. иссл.; редкол.: С.Я. Килин [и др.]. - Минск, 2011. - C. 83.

41. Тарасов, Д.С. Фотофизические свойства трикарбоцианиновых красителей с направленной доставкой в злокачественные опухоли / Д.С. Тарасов, Л.С. Ляшенко // Республиканской научной конференции студентов и аспирантов вузов РБ (НИРС-2011): сборник тезисов докладов, Минск, 18 октября 2011. / БГУ ; редкол.: С.В. Абламейко [и др.]. - Минск : Издат. центр БГУ, 2011. - C. 17.

42. Устройство для создания импульсов света наносекундной длительности: пат. 2808 Респ. Беларусь, H 01J 61/02, 61/80 / Е.С. Воропай, М.П. Самцов, А.Е. Радько, К.А. Шевченко, Л.С. Ляшенко; заявитель Белорусский государственный университет. - № u 20050846; заявл. 28.12.2005; опубл. 30.06.2006 // Официальный бюл. / Нац. центр интеллектуал. собственности. - 2006. - № 3. - С. 222.

43. Средство, подавляющее стафилококковую и противогрибковую активность: заявка на патент Респ. Беларусь, C 07D 209/00, A 61K 31/33 / М.П. Самцов, Т.С. Ермакова, А.П. Луговский, Д.Г. Мельников, А.А. Луговский, Л.С. Ляшенко, Е.С. Воропай, Л.П. Титов; заявитель Гос. учр. "Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии", Белорусский государственный университет. - № а 20091891; заявл. 29.12.2009; опубл. 08.30.2011 // Официальный бюл. / Нац. центр интеллектуал. собственности. - 2011. - №4. - С. 22.

Размещено на Allbest.ru

...