Разделение смеси красителей и определение Rf методом тонкослойной хроматографии

Разделение и идентифицирование смеси окрашенных веществ методом тонкослойной хроматографии на закрепленном слое сорбента, оценка разделения, расчет Rf. Распределение разделяемых веществ между сорбирующим слоем и протекающими через него элюентами.

Рубрика Производство и технологии
Вид лабораторная работа
Язык русский
Дата добавления 14.04.2022
Размер файла 501,3 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Лабораторная работа

«Разделение смеси красителей и определение Rf методом тонкослойной хроматографии»

Дубинина Амина

Цель работы: разделить и идентифицировать смесь окрашенных веществ методом тонкослойной хроматографии на закрепленном слое сорбента, оценить разделение, рассчитать Rf.

Теоретическая часть

Тонкослойная хроматография -- хроматографический метод, в котором в качестве неподвижной фазы используется тонкий слой адсорбента. Метод основан на различном распределении разделяемых веществ между сорбирующим слоем и протекающим через него элюентом, вследствие чего расстояние, на которое эти вещества смещаются по слою за одно и то же время, различается. В методе ТСХ неподвижная твердая фаза (силикагель, оксид алюминия, порошок целлюлозы) тонким слоем наносится на стеклянную, пластмассовую или металлическую пластинку. В качестве подвижной фазы используют различные растворители или их смеси, органические и неорганические кислоты. Выбор растворителя зависит от природы сорбента и свойств анализируемых соединений.

Сущность метода: анализируемая смесь содержит два красителя, которые в процессе хроматографирования перемещаются с разными скоростями. В результате этого через некоторое время они оказываются на разном удалении от старта. Измеряя расстояние, пройденное компонентами анализируемой смеси, и расстояние, пройденное фронтом растворителя, рассчитывают Rf. Для качественной идентификации веществ наиболее надежным способом является «метод свидетелей»: на стартовую площадку рядом с пробой наносят индивидуальные соединения, соответствующие предполагаемым компонентам смеси. Совпадение Rf компонента пробы и свидетеля является убедительным основанием для отождествления веществ.

окрашенный тонкослойная хроматография сорбент

Ход работы

1.Нанесение образца. Пластину для тонкослойной хроматографии Sorbfil разделите на несколько полосок (5-6 шт) шириной 2-3 см и на расстоянии 1,0-1,5 см от нижнего края осторожным прикосновением, чтобы не нарушить слой адсорбента, нанесите анализируемую пробу. Диаметр пятна не должен превышать 5- 6 мм. Расстояние между пятнами проб (различные цветные маркеры) должно быть не менее 0,5 см. Отметьте линию старта и подсушите пластинку.

2. Подбор оптимального состава элюента.

Неподвижной фазой, нанесенной на хроматографическую пластинку Sorbfil является силикагель - условно «полярный» адсорбент. Ознакомившись с элюотропным рядом элюентов для силикагеля (справочные данные), останавливаемся на двух - наименее и наиболее полярных для данной неподвижной фазы растворителях. Для достижения лучшего разделения анализируемая смесь должна быть хорошо растворима в элюенте, а, так как в качестве пробы используются маркеры на спиртовой основе, к выбранному элюенту необходимо добавлять несколько капель этанола.

Подбор элюента начните с наименее полярного растворителя - толуола. Пластинку с нанесенными на нее пробами поместите в хроматографическую камеру (химический стакан с крышкой) с толуолом (2-3 см3), добавьте несколько капель этанола и герметично закройте. При этом край пластинки опустите в растворитель (не более чем на 5 мм) так, чтобы линия старта не была погружена в растворитель. После того как растворитель пройдет 2/3 длины пластинки, аккуратно выньте ее и отметьте карандашом фронт растворителя, затем подсушите на воздухе.Повторите эксперимент, поместив в хроматографическую камеру на этот раз наиболее полярный растворитель - хлороформ и другую пластинку с нанесенными пробами, соответственно. Визуально оцените и объясните разделение анализируемых проб в двух различных по полярности растворителях.Повторите эксперимент еще несколько раз, каждый раз используя новую пластинку с нанесенными пробами, поместив ее в хроматографическую камеру с растворителями: толуол - хлороформ в различных соотношениях (начните с соотношения 50:50, затем 25:75 и наоборот). Не забывайте, каждый раз добавлять в хроматографическую камеру несколько капель этанола. Визуально оцените разделение анализируемых проб и выберете оптимальный состав элюента.

3. Хроматографирование пробы со «свидетелем»

На хроматографическую пластину шириной 2-3 см и на расстоянии 1,0-1,5 см от нижнего края нанесите анализируемую пробу, рядом нанести пробу индивидуальных красителей (чистых компонентов) - «свидетели». Отметите линию старта и подсушите пластинку. Пластинку поместите в хроматографическую камеру с подобранным в пункте 2 элюентом, добавьте несколько капель этанола, и герметично закройте стакан. При этом край пластинки опустите в растворитель (не более чем на 5 мм) так, чтобы линия старта не была погружена в растворитель. После того как растворитель пройдет 2/3 длины пластинки, аккуратно выньте ее и отметите карандашом фронт растворителя, затем подсушите на воздухе.

4. Идентификация компонентов. Пластинку рассмотреть, обращая внимание на окраску и форму хроматографических зон. Рассчитать Rf компонентов пробы и свидетелей. Определить качественный состав анализируемой смеси.

Вывод

Разделена и идентифицирована смесь окрашенных веществ методом тонкослойной хроматографии на закрепленном слое сорбента при соотношении компонентов толуол-хлороформ 75/25, состав анализируемого образца состоит из красного зеленого и черного цвета, рассчитано Rf.

Размещено на Allbest.ru

...

Подобные документы

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.