Бактерицидная активность нейтрофилов при "SIRS-І", "SIRS-ПІ" и сепсисе у ожоговых больных

Раскрытие специфики ранней диагностики и своевременного лечения сепсиса как актуальной проблемы современной медицины. Развитие системного воспалительного ответа и показатели лейкоцитарной формулы доноров и больных ожогового отделения при SIRS и сепсисе.

Рубрика Медицина
Вид статья
Язык русский
Дата добавления 05.07.2013
Размер файла 86,9 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

7

БАКТЕРИЦИДНАЯ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ ПРИ «SIRS-І», «SIRS-ПІ» И СЕПСИСЕ У ОЖОГОВЫХ БОЛЬНЫХ

Ю.Ю. Филиппова

Несмотря на многочисленные исследования, ранняя диагностика и своевременное лечение сепсиса являются одним из наиболее актуальных проблем современной медицины. В настоящее время общепризнано, что в основе сепсиса лежит развитие системного воспалительного ответа (Systemic inflammatory response syndrome -- SIRS). SIRS представляет собой неспецифический ответ организма на любое повреждающее воздействие: травму, ожог? хирургическое вмешательство и, в том числе, инфекцию.

При SIRS, под влиянием гуморальных факторов экзогенной и эндогенной природы, происходит активация основных фагоцитирующих клеток (нейтрофилов и моноцитов). Активированные клетки начинают вырабатывать различного рода медиаторы, которые запускают каскад реакций, приводящих к повреждению эндотелия, увеличению сосудистой проницаемости и развитию «шокового органа», а в перспективе -- сепсиса.

Количественные и качественные реакции со стороны клеток периферической крови, особенно нейтрофилов, как «пионеров» воспаления при различных повреждениях, наиболее полно отражают развитие системной воспалительной реакции и следующего за ней септического состояния,

В связи с вышесказанным целью нашего исследования являлось изучение бактерицидной активности нейтрофилов при «SIRS-І», «SIRS-ЇЇІ» и сепсисе у ожоговых больных.

Материалы и методы исследования. Под динамическим наблюдением находилось 27 пациентов отделения ожоговой реанимации ГКБ № 6 г. Челябинска. Средний возраст больных 37±4 года, из них 85 % составили мужчины и 15 % -- женщины. Диагноз «SIRS» и сепсиса ставился на основе положений Чикагской согласительной конференции (1992 г.).

По степени тяжести состояния больные были разделены на три группы. В первую вошли пациенты, находящиеся в остром периоде ожоговой болезни (3--5-е сутки после ожога) -- «SIRS-І». Во вторую группу вошли больные в периоде септикотоксемии (10-- 15-е сутки после ожога) -- «SIRS-ПІ». В третью группу вошли пациенты с сепсисом. В качестве контроля была взята кровь 7 здоровых доноров.

Во всех исследуемых группах был проведен подсчет общего количества лейкоцитов и показателей лейкоцитарной формулы. Фагоцитарную активность нейтрофилов изучали, используя метод С. Д. Дугласа и П. Г. Куи.

Нейтрофилы выделяли из гепаринизированной периферической крови с использованием двойного градиента.

В качестве объекта фагоцитоза применяли Е. coli ATCC штамм 25922, однодневную культуру, разведенную до концентрации 1x107 КОЕ/мл по McFarland.

Суспензию нейтрофилов с Е. coli культивировали с добавлением аутосыворотки 2 ч при 37 °С -- общая выживаемость Е. coli (общий бактерицидный потенциал нейтрофилов). Кроме этого, с помощью этапа добавления антибиотиков определяли внутриклеточную выживаемость Е. coli (внутриклеточный киллинг нейтрофилов). Начальную концентрацию Е, coli и ее концентрацию после инкубации подсчитывали путем посева определенного объема клеточной суспензии на среду Эндо методом разведений. Для контроля аналогичным способом оценивалась концентрация Е. coli без нейтрофилов до и после инкубации.

Для достоверной оценки результатов все полученные значения были пересчитаны на начальную концентрацию Е. coli 6x106 КОЕ/мл. Также был введен коэффициент убывания Е. coli. отношение начальной концентрации Е. coli к ее концентрации через 2 ч без влияния на микроорганизмы каких-либо стимулов.

В результате исследования перед нами возник вопрос: одинаково ли нейтрофилы при «SIRS-Ш» фагоцитируют грамположительиые и грамотрицательные бактерии? Поэтому у 7 больных с «SIRS-Ш» дополнительно были проведены аналогичные эксперименты с использованием в качестве объекта фагоцитоза St. aureus ATCC штамм 25923.

Анализ результатов проводили на персональном компьютере с использованием пакета программ «Statistica».

Результаты и обсуждение. Проведенное исследование позволило выявить характерные особенности изменений показателей лейкоцитарной формулы и бактерицидной активности нейтрофилов при «SIRS-І», «SIRS-Ш» и сепсисе у ожоговых больных. Полученные результаты представлены в таблице.

Показатели лейкоцитарной формулы доноров и больных ожогового отделения при «SIRS-І», «SIRS-Ш» и сепсисе

Статистический

показатель

Лей.

*109

Пал. нф *109

Сегм. нф х109

лф

*109

MO

*109

Доноры

М±ш

6,721 ± 0,469

0,163 ± 0,027

3,493 ±0,252

2,554 ±0,313

0,381 ±0,061

п

7

7

7

7

7

«SIRS-І»

М±т

` 13,003 ± 1,432*

2,008 ± 0,238*

8,201 ± 1,054*

1,838 ±0,234

0,746 ±0,129

п

15

15

15

15

15

Pl

<0,05

<0,05

<0,05

«SIRS-Ш»

М±т

18,258 ± 1,355*

2Д93±

0,264*

12,235 ± 1,099*

2,471 ± 0,202

1,132 ± 0,102*

п

¦ 22

21

21

21

21

Pl

<0,05

<0,05

<0,05

<0,05

р2

<0,05

<0,05

<0,05

<0,05

Сепсис

М±т

11,30 ± 2,729*

1,926 ± 0,417*

7,560 ± 2,097*

1,302 ± 0,234*

0,406 ± 0,098

п

5

5

5

5

5

Pl

<0,05

<0,05

<0,05

* различия достоверны (р<0,05);

pi -- различия между контролем и опытом;

р2 -- различия между «SIRS-І» и «SIRS-ПІ».

При «SIRS-І» наблюдалось достоверное увеличение общего количества лейкоцитов по сравнению с группой доноров, что было связано в основном с ростом количества нейтрофильных лейкоцитов и появлением большого количества незрелых форм. На 10--15-е сутки после ожога (при «SIRS-Ш») лейкоцитоз достигал максимального значения. Различия были достоверны не только по сравнению с группой контроля, но и с группой больных с «SIRS-І». Кроме нейтрофилоцитоза, наблюдалось также достоверное увеличение абсолютного количества моноцитов. Таким образом, из представленных данных видно, что у больных ожогового отделения при «SIRS-І» и «SIRS-Ш» происходит активация лейкопоэза и мобилизация нейтро- фильного звена противоинфекционной защиты. При сравнении данных показателей между группами больных (сепсис -- «SIRS-І», «SIRS-НІ», доноры) выявлены следующие закономерности: по сравнению с донорами, в группе больных с сепсисом сохранялся лейкоцитоз и повышенное количество палочко- : ядерных нейтрофилов. Однако общее количество лейкоцитов при сепсисе по сравнению с «SIRS-І» и «SIRS-Ш» имело тенденцию к снижению. При эхом абсолютное значение лимфоцитов было снижено в среднем в 2 раза по сравнению со всеми исследуемыми периодами* Эффекторная функция нейтрофилов оценивалась по способности этих клеток фагоцитировать Е. coli. На рис. 1 показано общее количество бактерий, выживших после взаимодействия с нейтрофилами периферической крови in vitro (общий бактерицидный потенциал нейтрофилов) и внутриклеточная выживаемость Е. coli (активность внутриклеточного киллинга нейтрофилов).

Нф. Е. CoIU Среднее

Рис. 1. Общая выдкиваемость Е. coli при взаимодействии с нейтрофилами (*103 КОЕ/мл)

Рис. 2. Внутриклеточная выоюиваемость Е. coli при взаимодействии с нейтрофилами (у-103 КОЕ/мл)

Общее количество выживших бактерий Е. coli при «SIRS-І» и «SIRS-Ш» имело тенденцию к снижению по сравнению с группой здоровых доноров, что свидетельствовало о повышении общего бактерицидного потенциала нейтрофилов. Количество бактерий, выживших внутри нейтрофилов после фагоцитоза, также имело тенденцию к уменьшению. В связи с небольшой выборкой эти различия не являлись достоверными.

При сепсисе было отмечено резкое возрастание как общей, так и внутриклеточной выживаемости Е. coli по сравнению со всеми исследуемыми периодами, что является показателем сниженного общего бактерицидного потенциала и низкой активности внутри- клточного киллинга нейтрофилов.

Как было сказано выше, дополнительно нами оценивалась бактерицидная активность нейтрофилов больных с «SIRS-ІІІ» по отношению к разным видам бактерий: Е. coli и St. aureus.Бактерицидное действие нейтрофилов по отношению к Е. coli было достоверно выше аналогичного показателя в отношении St. aureus (общее количество вижиитпиу бактерий: 7,46x105 КОЕ/мл к 4,31x106 КОЕ/мл соответственно). Исходя из полученных данных можно предположить, что St aureus способен инициировать факторы, ингибирующие фагоцитоз этих бактерий нейтрофилами. Аналогичные данные в отношении St. aureus были получены в исследовании R. Feezor (2003 г.).

Выводы.

1. При «SIRS-І» и «SIRS-Ш» у ожоговых больных происходит активация лейкопоэза, что связано в основном с ростом числа нейтрофильных лейкоцитов и появлением большого количества незрелых форм. Общий бактерицидный потенциал и внутриклеточная киллинговая активность нейтрофилов в отношении живых бактерий Е. coli при «SIRS-І» и «SIRS-Ш» практически не отличается от таковой в группе доноров,

2. Для сепсиса характерно снижение показателей лейкопоэза, особенно лимфопоэза по сравнению с «SIRS-І» и «SIRS-Ш», и истощение микробицидных свойств нейтрофилов, о чем свидетельствует выраженное снижение общего бактерицидного потенциала и активности внутриклеточного киллинга нейтрофилов.

3. Бактерицидное действие нейтрофилов при «SIRS-Ш» по отношению к грамполо- жительным и грамотрицательным микроорганизмам имеет достоверные отличия: общая выживаемость Е. coli при взаимодействии с нейтрофилами достоверно ниже таковой по сравнению со St. aureus.

сепсис воспалительный отчет лейкоцитарная формула

Список литературы

1. Белобородова, Н. В. Иммунологические аспекты послеоперационного сепсиса / Н. В. Белобородова, Е. Н. Бачинская // Анестезиология и реаниматология. 2000. № 1. С. 59-66.

2. Дуглас, С. Д. Исследование фагоцитоза в клинической практике / С. Д. Дуглас, П. Г. Куи; пер. с англ. М, 1983. 112 с.

3. Останин, А. А. Хирургический сепсис. Иммунологические маркеры системной воспалительной реакции / А. А. Останин, О. Ю. Леплина // Вести, хирургии им. И. И. Грекова. 2002. Т. I, Ks 3. С. 101-107.

4. Feezor, R. X Molecular characterization of the acute inflammatory response to infections with Gram-negative versus Gram-positive bacteria / R. X Feezor, C. Oberholzer // Infection and Immunity 2003. Oct. P. 5803-5813.

Размещено на Allbest.ru

...

Подобные документы

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.