Изучение действия природных шунгитов на ферментные тест-системы in vitro
Исследование биологической активности минералов шунгита с использованием молекулярных тест-систем in vitro. Ферменты антиоксидантной защиты человека, животных, высших растений и аэробных бактерий. Угнетение углеводного обмена в условиях in vitro.
| Рубрика | Медицина |
| Вид | доклад |
| Язык | русский |
| Дата добавления | 22.07.2013 |
| Размер файла | 12,5 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
Изучение действия природных шунгитов на ферментные тест-системы in vitro
Васильева О.Ю.,
Прокопов А.А.,
Берлянд А.С.,
Дубинская В.А.
Исследование биологической активности минералов шунгита (черного и серого) проводили с использованием молекулярных тест-систем in vitro [1-5], в которых в качестве тест-объектов использовали ферменты системы антиоксидантной защиты: супероксиддисмутазу (СОД), каталазу (КАТ), глутатионпероксидазу (ГП), глутатионредуктазу (ГР), а также один из регуляторных ферментов углеводного обмена пируваткиназу (ПК).
Ферменты антиоксидантной защиты: СОД, ГП, КАТ и ГР присутствуют во всех клетках аэробных организмов и служат защитой от пероксидативных процессов не только у человека и животных, но и у высших растений и аэробных бактерий [6] и могут служить мишенью для лекарственных средств [7].
На исследование были предоставлены два минерала: шунгит черный и шунгит серый, измельченные до однородных частиц. Тестирование проводили, используя водные и водно-спиртовые (на 20% этиловом спирте) настои обоих минералов, а также растворы, содержащие взвесь минералов. В работе использовали коммерческие препараты ферментов СОД, ГР, ГП, КАТ, ПК.
Концентрация ферментов в инкубационной пробе составляла 0,3-0,5 мкг/мл. Исследуемые вещества добавляли в концентрациях 0,1-1000 мкг на 1 мл инкубационной пробы. Скорость ферментативных реакций определяли спектроскопически, используя двухлучевой спектрофотометр Shimadzu MPS-2000. Исследования проводили при комнатной температуре. Скорость ГР, ГП и ПК реакций определяли методами, описанными в монографии [8], модифицированными и адаптированными для условий in vitro. Инкубационная проба содержала 0,05 М Трис-буфер и 0,005 М ЭДТА-Na, pH = 8.
Активность каталазы определяли по убыли субстрата (H2O2), которую измеряли в виде комплекса с молибдатом аммония по поглощению при 410 нм [9].
Скорость СОД-реакции определяли в присутствии тетразолия нитросинего и феназинметасульфата по приросту поглощения при 549 нм [10].
Скорость ферментативных реакций измеряли без добавления изучаемого вещества (контроль) и после добавления изучаемого вещества (опыт).
Результаты, полученные в ходе исследования, показали, что вытяжки из водных и водно-спиртовых растворов черного и серого шунгита в широком диапазоне концентраций не оказывают влияния на скорость каталазной реакции. Можно отметить лишь снижение активности фермента при воздействии водного настоя шунгита черного при концентрации, равной 100 мкг на 1 мл инкубационной пробы. При концентрации шунгитов в пробе, равной 1 мкг на мл, происходит незначительная активация каталазы, что может свидетельствовать об антиоксидантном действии извлечений из минералов [5].
И черный и серый шунгиты вызывают активацию СОД. При этом наблюдается выраженная зависимость скорости реакции от концентрации введенного в пробу минерала: имеется максимум, соответствующий оптимальной концентрации минерала, а увеличение или уменьшение концентрации приводит к снижению эффекта. Наиболее активным в отношении СОД является шунгит черный.
Исследования ГП-системы показало, что оба минерала значительно активируют фермент. Скорость ферментативной реакции при концентрации минералов 250 мкг/мл возрастает, по сравнению с контролем, до 504,7% для черного шунгита и 414,1% для серого шунгита.
В отличие от СОД и ГП-реакций, ГР активируется только черным шунгитом, а ПК-реакция ингибируется всеми изученными концентрациями черного и серого шунгита.
Использование ферментативных тест-систем in vitro при изучении влияния шунгитов черного и серого показало, что они обладают несколькими видами биологической активности. В частности, активация ферментов антиоксидантной защиты коррелирует с наличием антиоксидантного действия. Шунгит черный оказывает более выраженное активирующее действие на ферменты СОД, КАТ, ГП и ГР. Одновременно с антиоксидантной активностью шунгиты предположительно обладают антибактериальными свойствами, о чем свидетельствует угнетение углеводного обмена и КАТ-реакций в условиях in vitro.
шунгит vitro фермент антиоксидантный
Список литературы
1. Быков В.А., Минеева М.Ф., Дубинская В.А., Стрелкова Л.Б., Колхир В.К., Ребров Л.Б. // Биомедицинские технологии 1997, В. 7, С. 5-13.
2. Быков В.А., Минеева М.Ф., Дубинская В.А., Александрова И.В., Ребров Л.Б. // Третий Международный съезд "Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения", С.-П.-Пушкин, 29 июня - 1июля 1999, С. 107-110.
3. Патент №2181890, приоритет от 06.06.2001 - Способ выявления веществ, обладающих адаптогенными свойствами in vitro _ Быков В.А., Минеева М.Ф., Дубинская В.А., Ребров Л.Б., Колхир В.К.
4. Патент №2181891, приоритет от 06.06.2001 _ Способ выявления веществ, обладающих противомикробными и противовирусными свойствами in vitro - Быков В.А., Минеева М.Ф., Дубинская В.А., Ребров Л.Б., Колхир В.К.
5. Патент №2181892, приоритет от 06.06.2001 _ Способ выявления веществ, обладающих антиоксидантными свойствами in vitro - Быков В.А., Минеева М.Ф., Дубинская В.А., Ребров Л.Б., Колхир В.К.
6. Hiroe Nagaxawa, Chokoh Genka, Minako Fujishima // Patological aspects of active oxygens/free radicals // Japanese J. of Physiol., 1996, V.46, №1, P. 15-32.
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Сравнительное исследование влияния низкомолекулярной фракции кордовой крови и фармакологического препарата актовегина на показатели фагоцитарной активности нейтрофилов трансфузионной лейкоцитарной массы и кислород-зависимых бактерицидных механизмов.
дипломная работа [131,5 K], добавлен 17.08.2011Краткая характеристика особенностей лабораторной и клинической радиометрии, радиографии, сканирования. Главные методы, основанные на принципе изотопного разведения. Исследование функции щитовидной железы с помощью трийодтиронина и тироксина in vitro.
презентация [284,8 K], добавлен 25.05.2015Ингибирующие ферменты микробов как фактор патогенности. Особенности инфекционных болезней. Ферменты "защиты и агрессии" бактерий. Организация, механизм действия токсической молекулы. Определение вирулентности микроорганизмов. Активаторы иммунного ответа.
курсовая работа [581,9 K], добавлен 28.12.2014Серологические реакции как реакции между антигенами и антителами in vitro. Классификация серологических реакций в зависимости от характера и физического состояния антигена. Реакция преципитации в геле по Оухтерлони. Мктод иммуноферментного анализа.
презентация [2,3 M], добавлен 03.06.2015Общее понятие об эмбриональных стволовых клетках. Выделение и культура in vitro. Индуцированные плюрипотентные стволовые клетки. Сущность понятия "калибровка". Важные факторы транскрипции. Особенности стимулирования стволовых клеток в дифференцированные.
контрольная работа [1,3 M], добавлен 02.12.2013Особливості NO-синтазного та аргіназного шляхів метаболізму L-аргініну у лімфоцитах та ендотеліоцитах при їх сумісній інкубації in vitro, в нормі та за умов хронічної гіперімунокомплексемії та вивчення впливу й можливість корекції цих процесів корвітином.
автореферат [191,7 K], добавлен 29.03.2009Послеоперационная спаечная болезнь органов брюшной полости. Морфологические и манипуляционные свойства новых образцов полимерных пленчатых имплантатов для использования их при операциях на органах брюшной полости. Результаты эксперимента "in vitro".
курсовая работа [2,7 M], добавлен 14.01.2014История защиты животных от жестокости на уровне государства. Положения декларации по проведению биомедицинских исследований с их использованием. Изучение поведения и разума животных. Отношение человека к живому как показатель его уровня нравственности.
презентация [1,0 M], добавлен 28.04.2016Свойств материалов при протезировании, определяющих адгезию микробов, в частности, представителей микрофлоры полости рта. Адгезия условно-патогенных микроорганизмов полости рта разных таксономичных групп к различным видам базисных материалов in vitro.
автореферат [161,5 K], добавлен 16.04.2009Радіонуклідний метод діагностики. Емісійна комп’ютерна томографія. Однофотона емісійна КТ. Позитронна емісійна томографія (ПЕТ). Радіоімунні (in vitro) методи діагностики. Метод магнітно-резонасной томографії. Протипоказання і потенційні небезпеки МРТ.
реферат [39,4 K], добавлен 27.02.2011Ознакомление с клетками крови, которые в основном представлены эритроцитами и лейкоцитами. Определение и анализ особенностей обмена веществ эритроцитов. Изучение системы антиоксидантной защиты организма. Рассмотрение схематического изображения почки.
презентация [3,3 M], добавлен 09.04.2018Необходимость проведения раннего выявления опасных массовых инфекций на госпитальном этапе в начальном периоде болезни. Основные виды заразных недугов человека, растений и животных. Изучение динамики заболеваемости в Республике Хакасия за 2005-2010 гг.
курсовая работа [102,5 K], добавлен 09.07.2011Основные понятия и особенности аэробных возможностей человека при занятии физкультурой. Сущность абсолютных и относительных показателей максимального потребления кислорода, их уровни и системы. Показатели резервов физической работоспособности по МПК.
курсовая работа [27,4 K], добавлен 30.11.2008Причины, затрудняющие диагностику и лечение урогенитальных инфекций. Исследование частоты выявления возбудителей инфекций у женщин, передаваемых половым путем методом полимеразной цепной реакции с применением диагностических тест- систем "Ампли Сенс".
дипломная работа [20,2 K], добавлен 20.07.2013Типы молекулярных мишеней для действия лекарственных средств. Влияние оптической изомерии на биологическую активность нестероидных противовоспалительных препаратов. Геометрическая изомерия. Влияние геометрической изомерии на их фармакологическое действие.
курсовая работа [1,5 M], добавлен 20.11.2013Фармакология как медико-биологическая наука о лекарственных веществах и их воздействиях на организм. Изучение средств, влияющих на процесс обмена веществ: витаминные ферментные и гормональные препараты, соли щелочных металлов, производные мышьяка.
курсовая работа [45,5 K], добавлен 27.12.2012Поджелудочная железа и ее роль в обмене веществ. Механизмы нарушения функциональной деятельности поджелудочной железы при панкреатите. Определение билирубина в сыворотке крови у больных панкреатитом. Показатели активности альфа-амилазы в сыворотке крови.
дипломная работа [72,7 K], добавлен 20.02.2016Гельминтозы - болезни человека, животных и растений, вызываемые паразитическими червями (гельминтами), резко отличающимися по своей биологии от других живых возбудителей: вирусов, бактерий, простейших. Фазы развития клинических проявлений, лечение.
презентация [4,5 M], добавлен 24.05.2015Описание камней и минералов, этимология их названий и особенности использования в медицине древности. Участие минералов в процессах жизнедеятельности, обмена веществ, кроветворения, формирования иммунитета. Энергия камня (талисманы, амулеты, обереги).
презентация [640,5 K], добавлен 09.12.2012Молекулярно-биохимические основы терапевтического действия пептидных препаратов. Механизм действия нейропротекторов. Молекулярный механизм действия актовегина, нимодипина. Ферментные и неферментные антиоксиданты. Общие принципы действия ноотропов.
курсовая работа [500,3 K], добавлен 23.11.2010
