Особенности экспрессии бета-эндорфина в нейсосекреторных клетках аркуатного ядра гипоталамуса потомства самок крыс с хронической алкогольной интоксикацией в различные сроки постнатального онтогенеза

Изучение структурного становления мелкоклеточного ядра гипоталамуса у потомства крыс. Методика определения экспрессии бета-эндорфина в гистологических срезах иммуногистохимическим методом с применением специфических антител и системы мечения ImmumarkTM.

Рубрика Медицина
Вид статья
Язык русский
Дата добавления 01.08.2013
Размер файла 230,5 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

ОСОБЕННОСТИ ЭКСПРЕССИИ в-ЭНДОРФИНА В НЕЙРОСЕКРЕТОРНЫХ КЛЕТКАХ АРКУАТНОГО ЯДРА ГИПОТАЛАМУСА ПОТОМСТВА САМОК КРЫС С ХРОНИЧЕСКОЙ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИЕЙ В РАЗЛИЧНЫЕ СРОКИ ПОСТНАТАЛЬНОГО ОНТОГЕНЕЗА

Кузнецова А.Б. Брюхин Г.В.

Эндорфины являются эндогенными пептидами, широко обнаруживаемыми в мозге млекопитающих (П.Д. Шабанов). Наибольшее число клеток, продуцирующих эндорфины, расположено в гипоталамусе. Аксоны этих нейронов распределяются внутри гипоталамуса или направляются к перегородке и ядрам миндалины. Некоторые аксоны направляются в ствол мозга, к структурам голубого пятна и ядрам шва. Методом " меченых антител" был определен их количественный и качественный состав. Исходя из концепции K.Blum и M.Trachtenberg (1998), эндогенная опиоидная система лежит в основе нейрохимических механизмов влечения к алкоголю. Этанол, подобно опиоидам, изменяет концентрации эндорфинов в мозге. Вместе с тем, вопросы влияния алкогольной интоксикации на реактивность и резистентность потомства изучены недостаточно полно.

В связи с этим, целью настоящего исследования явилось изучение особенностей экспрессии в-эндорфина в нейросекреторных клетках аркуатного ядра гипоталамуса потомства самок крыс с экспериментальной хронической алкогольной интоксикацией в различные сроки постнатального периода.

Материал и методы исследования. Исследование проводилось на белых лабораторных крысах Vistar. Для достижения поставленной цели у половозрелых крыс самок до (первая опытная группа) и во время (2 опытная группа) беременности моделировалась хроническая алкогольная интоксикация. Объектом исследования служило потомство экспериментальных животных на 1-й, 15-й, 30-й, 45-й и 60-й дни постнатальной жизни. Проводилось изучение структурного становления мелкоклеточного ядра гипоталамуса (аркуатного) у потомства самок крыс в условиях эксперимента. Оценке было подвергнуто 40 подопытных крысят и 40 контрольных. Крыс забивали путем декапитации, извлекали головной мозг и выделяли гипоталамус. Использовалась методика определения экспрессии в-эндорфина в гистологических срезах иммуногистохимическим методом с применением специфических антител и системы мечения ImmumarkTM (ICN). Специфические антитела к в-эндорфину наносились непосредственно на срез ткани. После инкубации при комнатной температуре на срез наносились вторые антитела, связанные с биотином. Через 20 минут инкубации ставили гистохимическую реакцию на щелочную фосфатазу. Основным контролем являлась обработка гистологических срезов по полной приведенной выше методике с исключением первых или вторых антител. Количественную оценку уровня экспрессии в-эндорфина проводили с помощью компьютерной программы анализа изображений «ДиаМорф Cito_W» (Россия) и выражали в условных единицах оптической плотности.

Нами установлено, что у интактных животных исследуемый показатель, постепенно увеличиваясь, достигает максимума на 30-й день жизни, затем к 45-му дню уменьшается почти в два раза и немного возрастает к 60-му дню постнатальной жизни.

Следует заметить, что в опытной группе животных, у которых создавалась хроническая алкогольная интоксикация до беременности, в клетках аркуатного ядра выявлена похожая закономерность, но на 30-й и 45-й день уровень экспрессии -эндорфина значительно превысил этот показатель у интактных животных. На 60-е сутки постнатального развития у животных данной группы, в отличие от интактных животных, наблюдалось резкое снижение экспрессии -эндорфина до уровня более низкого, чем в контроле.

Для потомства животных, у которых хроническая алкогольная интоксикация создавалась во время беременности, характерен постепенный рост показателя до 45-го дня постнатального онтогенеза и, затем, незначительное снижение. Обращает на себя внимание то, что с периода новорожденности по 30-й день уровень экспрессии -эндорфина у животных этой группы ниже по сравнению с контрольной группой, но продолжает нарастать к 45-му дню и превышает контрольный уровень, и лишь незначительно снижается к 60-му дню, продолжая преобладать, по сравнению с прочими исследуемыми группами.

Размещено на http://www.allbest.ru/

Рис 2. Особенности экспрессии в-эндорфина в нейросекреторных клетках аркуатного ядра гипоталамуса у потомства самок крыс с хронической алкогольной интоксикацией.

-результаты статистически достоверны по сравнению с контролем (p0,05).

гипоталамус эндорфин иммуногистохимический антитело

Таким образом, можно сделать заключение, что у потомства самок крыс с хронической алкогольной интоксикацией развивается нарушение становления рецепторного аппарата в нейросекреторных клетках аркуатного ядра гипоталамуса.

Литература

1. Ашмарин И.П., Каразеев Е.П. Нейропептиды // Нейрохимия / Под ред. И.П. Ашмарина, П.В. Стукалова. - М.: Ин-т биомед. Химии РАМН, 1996. - С. 298-435

2. Фридман Л.С., Флеминг Н.Ф., Робертс Д.Г., Хайман С.Е. Наркология. - М. - СПб.: Бином-Невский диалект, 1998. - 318 с.

3. Шабанов П.Д., Ноздрачев А.Д., Лебедев А.А., Лебедев В.В. Нейрохимическая организация подкрепляющих систем мозга // Рос. физиол. журн. им. И.М. - Сеченова. - 2000. - Т. 86, № 8. - С. 953-945

4. Blum K., Trachtenberg M.C. Alcoholism: Scintific basis of a neuropsychogenic disease // Int. J. Addict. - 1988a. - Vol. 23, No. 8. - P. 179-193.

Размещено на Allbest.ru

...

Подобные документы

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.