Размещено на http://www.allbest.ru/

ВЫЯВЛЕНИЕ ЗАБОЛЕВАНИЙ УРОГЕНИТАЛЬНОГО ТРАКТА В УСЛОВИЯХ КРУПНОГО ДИАГНОСТИЧЕСКОГО ЦЕНТРА

Зоерман В.М., Федачук И.О.

В последние десятилетия лабораторная диагностика ИППП, в частности, бактериальных инфекций - сифилиса, гонореи, хламидиоза, а также вирусных заболеваний, - вышла на качественно более высокий уровень. Это связано с совершенствованием диагностических технологий: разработкой молекулярно-биологических методов, иммуноферментного анализа, созданием автоматизированных систем верификации микроорганизмов, индикацией их минимального количества в патологическом материале. Однако широкому скринингу возбудителей ряда урогенитальных инфекций посвящено небольшое количество работ [1].

Цель настоящего исследования - определить частоту выявления различных возбудителей мочеполового тракта в условиях специализированного диагностического центра.

Материалы и методы

За период 2005-2006 (по 31.08.06) обследовано 37 842 пациента, в том числе с различной патологией урогенитального тракта. Из них 18 394 человек методом полимеразной цепной реакции (ПЦР), 10 617 и 8 831 - методом прямой иммунофлюоресценции (ПИФ) и иммуноферментного анализа (ИФА) соответственно.

Материалом для исследования служили соскобы из уретры, цервикального канала, сыворотка крови.

Выявление генома возбудителей проводили с помощью ПЦР. Клинический материал забирали специальными зондами. Образцы помещали в транспортную среду и хранили при температуре - 20⁰С. Подготовку клинических проб и реакцию амплификации проводили согласно методикам ПЦР-тест-систем "АмплиСенс-100-FRT Сhlamydia trachomatis", "АмплиСенсMycoplasma hominis-FRT (RG)", "АмплиСенс - Ureaplasma urealiticum - FRT (RG)" и т.д. - предназначенных для амплификации участка ДНК данных возбудителей и детекции результатов путем измерения флюоресцентного сигнала с помощью термоциклирующей системы "ROTOR-GENE", предназначенной для проведения ПЦР в режиме реального времени (real time) и используемой для амплификации ДНК и гибридизации.

Детекцию антигенов возбудителей осуществляли в ПИФ с соответствующими моноклональными антителами ("ХламиСлайд", "УреаСлайд" г. Москва и т.д.). Определение JgМ, JgА, JgG в сыворотке крови проводили с помощью иммуноферментного анализа на тест-системах "ИмДи JgM к Chlamydia trachomatis", "МБС JgA и JgG к Chlamydia trachomatis", г. Новосибирск. Положительными результатами согласно инструкций считали выявление JgA и JgG в титре 1: 10.

Результаты исследования и их обсуждения

За период 2005-2006 гг. в диагностическом центре проведено 31 689 исследований методом ПЦР. Как следует из представленных данных (таблица 1), чаще всего выявляли ДНК: U. urealiticum - 52,5 %, G. vaginalis-43,5 %, HPV-36,4 %, M. hominis - 22,9 %. Геном C. trachomatis обнаруживали у 9,1 % обследованных.

Высокая чувствительность и специфичность метода ПЦР позволяет использовать его в качестве основного для обнаружения возбудителей урогенитальной инфекции и в ассоциациях. По данным ПЦР-лаборатории нашего центра в структуре выявленных возбудителей 77,8 % приходится на моно-, 22,2 % смешанную инфекцию. При этом в 50,9 % случаев выявляются два возбудителя, в 36,8 % - три, а в 12,3 % - четыре микроорганизма.

Таблица 1. Частота выявления возбудителей УГИ в ПЦР у лиц репродуктивного возраста 2005-2006 гг. (по 31.08.06.)

Структура смешанной инфекции при выявлении двух возбудителей такова:

I U. urealiticum + HPV - 26, 7 %

II U. urealiticum + C. trachomatis - 18, 9 %

III U. urealiticum + М. Genitalium - 14,8 %

IV U. urealiticum +M. hominis - 11,2 %

V U. urealiticum + G. vaginalis - 7,1 %

VI C. trachomatis + H PV - 6,7 %

Остальные случаи ассоциаций двух микробных агентов были единичными.

При выявлении трех микроорганизмов наиболее часто встречаются:

I U. urealiticum + C. trachomatis + H PV - 16, 5 %

II U. urealiticum + C. trachomatis + М. genitalium - 13, 5 %

III U. urealiticum +M. hominis + H PV - 13, 5 %

При комбинации четырех возбудителей больший процент приходился на сочетание U. urealiticum + C. trachomatis + М. genitalium + G. vaginalis - 33, 3 %.

Полученные результаты исследований показали эффективность применения ПЦР в диагностике урогенитальной патологии.

Результаты детекции антигенов возбудителей представлены в таблице2. Всего проведено 22 766 исследований. Чаще, в отличие от ПЦР, обнаруживали антигены HSV 1-2 типов - 13,3%, затем G. vaginalis-11,1% (как в ПЦР), N. gonorrhoeae - 7,2%, U. urealiticum - 6,2%, M. hominis - 6,1%, T. vaginalis 3,6%, C. trachomatis-3,0%, CMV-2,1 %.

Что касается смешанных инфекций, то чаще выявлялись сочетания:

I U. urealiticum +M. hominis - 34, 6 %

II U. urealiticum + C. trachomatis - 21, 8 %

III C. trachomatis +M. hominis - 14, 1 %

Остальные комбинации встречались реже.

Сравнительный анализ информативности методов ПЦР и ПИФ показал следующее. Как и можно было ожидать, как правило, ПЦР была более чувствительна, чем ПИФ. Так значительный процент находок приходится на уреплазменную (в 8,5 раза больше чем с ПИФ), микоплазменную (в 3,7 раза), хламидийную (в 3 раза), ЦМВ - инфекцию (в 3,7 раза), а также гарднереллез (в 3,9 раза). В то же время HSV 1-2 типов, T. vaginalis, N. gonorrhoeae выявляли в большем проценте случаев именно в ПИФ.

Таблица 2. Частота выявления возбудителей УГИ методом ПИФ у лиц Репродуктивного возраста 2005-2006 гг.

Таблица 3. Результаты лабораторной диагностики урогенитального хламидиоза различными методами в 2005-2006 гг.

Практическое отсутствие стандартных подходов к лабораторной диагностике урогенитального хламидиоза повышает актуальность комплексных исследований. Ряд исследователей на основании сравнения отдельных методов диагностики хламидиоза предлагают возможные варианты тактики применения лабораторных тестов - сочетая ПИФ и ПЦР. [2,3] Применение ИФА в комплексе с ПЦР дает возможность предположить наличие персистирующей инфекции: ПЦР (-), ИФА (+). В тоже время подобный результат может свидетельствовать о перенесенной ранее инфекции [4]. Поэтому, на примере хламидийной инфекции, мы решили рассмотреть диагностическую значимость каждого из представленных методов.

Всего за период 2005-2006 гг. в диагностическом центре выполнено 25 203 различных исследований на хламидии. В таблице 3 приведены данные по трем методам диагностики: ПЦР, ПИФ, ИФА. В ПЦР обследовано 9 697 пациентов из них 882 (9,1%) дали положительный результат. Методом ПИФ обследовано 6 063 человек, обратившихся в центр. Положительные результаты получены у 184 пациента (3%). Исследования на IgА и IgG к C. trachomatis методом ИФА за 2005-2006 гг. проведены у 2 103 пациентов (17,8% положительных проб), 7340 (38,6 % положительных результатов) соответственно. Сравнение в динамике свидетельствует об увеличении числа положительных находок антител обоих классов.

Особенно интересно увеличение числа больных с иммуноглобулинами класса А. Этот факт может свидетельствовать об увеличении числа свежих случаев урогенитального хламидиоза.

Выводы:

возбудитель геном урогенитальный диагностический

В результате обследования методом ПЦР 31 689 лиц, обратившихся в диагностический центр, у 21,2% был выявлен геном возбудителей урогенитальных инфекций.

При подозрении на ассоциированную урогенитальную инфекцию целесообразно проведение скрининг-обследования, расширенного по спектру возбудителей.

Необходимо создание единых клинико-лабораторных алгоритмов обследования больных с воспалительными заболеваниями урогенитального тракта.

Литература

1. Анчупане И.С. Смешанные хламидийные инфекции и их иммунокоррекция/И. С Анчупане, А.П. Милтишыш // Вестник дерматологии и венерологии. - 2000. - №1. - С.28-29.

2. Дмитриев Г.А. Урогенитальная хламидийная инфекция. Подходы к диагностике и терапии/Г. АДмитриев // Инфекции, передающиеся половым путем. - 2002. - № 2. - С.21-24.

3. Киселев В.И. Полимеразная цепная реакция в качестве критерия излеченности урогенитальногохламидиоза/В. И Киселев, М.Ф. Латыпова // Вестник дерматологии и венерологии. - 2001. - № 4. - С.4-5.

4. Кисина В.И. Воспалительные заболевания органов малого таза у женщин и связь их с ИППП/В.И. Кисина, Е.Ю. Канищева // Вестник дерматологии и венерологии. - 2002. - № 3. - С.25-29.

Размещено на Allbest.ru