Использование липополисахарида для определения функциональной активности макрофагов и лаброцитов в культурах перитонеальных клеток
Разработка методов совместного культивирования макрофагов и лаброцитов (клеток соединительной ткани). Оценка степени функциональной активности культуры перитонеальных клеток, обогащенных лаброцитами. Инкубация перитонеальных клеток с липополисахаридом.
| Рубрика | Медицина |
| Вид | статья |
| Язык | русский |
| Дата добавления | 03.08.2013 |
| Размер файла | 8,0 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
Размещено на http://www.allbest.ru/
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЛИПОПОЛИСАХАРИДА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ МАКРОФАГОВ И ЛАБРОЦИТОВ В КУЛЬТУРАХ ПЕРИТОНЕАЛЬНЫХ КЛЕТОК
Ильин Д.А.
Активное применение в разных областях биологии и медицины находят клеточные культуры, поскольку они являются удобным инструментом для решения многих общебиологических проблем, имеющих важное практическое значение [1; 2]. Одной из таких задач следует считать разработку методов культивирования тучных клеток и создание смешанных культур, обогащенных лаброцитами [2]. В первую очередь это касается культур иммунокомпетентных клеток и клеток соединительной ткани.
Известно, что при совместном культивировании тучных клеток и макрофагов стимуляция тучных клеток вызывает активизацию фагоцитарной функции макрофагов в несколько десятков раз по сравнению с таковым в отсутствие тучных клеток [6]. Лаброциты опосредованно участвуют в обмене соединительнотканного матрикса [4], а их медиаторы оказывают влияние на развитие соединительной ткани [5]. Было показано, что после воздействия липополисахарида в качестве разрешающего стимула иммунокомпетентные клетки переходят в состояние повышенной активности [3].
Поскольку многие функции макрофагов и лаброцитов изучены недостаточно [2; 7; 8], то создание методов их культивирования и получения смешанных культур, обогащенных тучными клетками необходимо признать целесообразным.
Исходя из вышеизложенного, основной целью серии наших исследований была разработка методов совместного культивирования макрофагов и лаброцитов (а в последующем и клеток соединительной ткани), а также оценки функциональной активности культуры перитонеальных фагоцитов. Начальные задачи исследования включали: определение функциональной активности макрофагов при инкубировании культур перитонеальных клеток с липополисахаридом (являющимся веществом, активирующим клеточную культуру), а также его влияние на активность процесса дегрануляции лаброцитов.
Изучали изменение морфофункционального состояния макрофагов и лаброцитов в культурах перитонеальных клеток, выделенных из брюшной полости мышей линии CBA. Концентрация посадки составляла 1000 тыс. перитонеальных клеток на флакон. Клетки инкубировали в термостате при температуре 37 С в растворе Игла с гидролизатом лактальбумина, добавлением L-глутамина и сыворотки крупного рогатого скота. Липополисахарид (пирогенал) вносили в культуры клеток после предварительного инкубирования в течение 24 часов, из расчета 2,5 мкг на флакон.
Подсчитывали численность макрофагов в 10 полях зрения. Аналогичным образом оценивали количество лаброцитов, определяли процент дегранулирующих и не дегранулирующих клеток. Результаты оценивали на 24, 48 и 72 часов инкубации. Контролем служили интактные культуры клеток. Все последующие изменения описаны относительно контроля.
В группе культур, инкубируемых с липополисахаридом на 48 часов экспозиции, наблюдали, что содержание макрофагов составляло 47,4 % от контрольного значения (в интактных культурах). Через 72 часа экспозиции их количество резко уменьшалось, и составляло только 8, 8 %. Численность тучных клеток на 48 часов наблюдения не отличалась от таковой в контрольных культурах, и снижалась в 2,8 раза по сравнению с их содержанием в интактных культурах перитонеальных клеток.
В контрольных культурах большая часть тучных клеток не подвергалась процессу дегрануляции. Инкубация перитонеальных клеток с липополисахаридом способствовала дегрануляции лаброцитов. На 48 часов экспозиции этот показатель был в 1,9 раза больше чем в контрольных культурах.
Таким образом, инкубация клеток с липополисахаридом способствовала откреплению функционально активных макрофагов от подложки (переходивших в культуральную среду) и дегрануляции лаброцитов. На наш взгляд оставшиеся на подложке тучные клетки могут быть использованы для создания культур перитонеальных клеток, обогащенных лаброцитами. Подсчет количества прикрепленных макрофагов дает возможность косвенно оценить степень функциональной активности культуры.
Отмеченные изменения по нашему мнению целесообразно учитывать при разработке методов совместного культивирования макрофагов и лаброцитов, а также для косвенной оценки функциональной активности культуры перитонеальных фагоцитов, что будет способствовать созданию эффективных подходов, полезных при решении ряда теоретических и практических задач, имеющих прикладное значение.
Список литературы
липополисахарид клетка макрофаг лаброцит
1. Ильин Д.А., Архипов С.А. Модель взаимодействия гетерогенных клеточных культур // Компенсаторно-приспособительные процессы: Всероссийская конференция. Новосибирск, 2004. - С.32 - 33
2. Ильин Д.А., Архипов С.А Сравнительная оценка функциональной и интегративной активности макрофагов и лаброцитов в генотипически различных культурах перитонеальных клеток // VII всероссийская конференция по патологии клетки. Москва, 2005. - С. 56 - 57.
3. Цырендоржиев Д.Д, Щербаков В.И., Маянский Д.Н. Активированные макрофаги и гранулематозное воспаление печени // Бюллетень сибирского отделения РАМН. 1992. № 4. С. 104-106.
4. Coussens L.M., Raymond W.W., Bergers G., Laig-Webster M., Behrendtsen O., Werb Z., Caughey G.H., Hanahan D.. Inflammatory mast cells up-regulate angiogenesis during squamous epithelial carcinogenesis. // Genes Dev. - 1999. - Vol. 13. - № 11. - P. 1382-1397.
5. Joseph-Silverstein J., Rifkin D.B. Endothelial cell growth factors and the vessel wall. // Semin/ Thromb. Hemost. - 1987. - Vol. 13. - № 4. - P. 504-513.
6. Kovanen PT. Ann Med. Mast cell granule-mediated uptake of low density lipoproteins by macrophages: a novel carrier mechanism leading to the formation of foam cells // 1991; 23(5):551-9.
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Понятие и функции стволовых клеток, их типы в зависимости от способов получения, потенциал. Характеристики эмбриональных стволовых клеток. Дифференцировки стволовых клеток костного мозга. Органы и ткани, которые ученые смогли вырастить с их помощью.
презентация [817,5 K], добавлен 04.11.2013Семейство клеток соединительной ткани. Ответ фибропластов на химические сигналы. Процесс развития жировой клетки. Влияние дефицита лептина на организм. Костный матрикс и реконструкция компактной кости. Схемы тоннелей, сформированных остеокластами.
реферат [3,3 M], добавлен 04.03.2014Основное свойство стволовых клеток - дифференциация в другие типы клеток. Виды стволовых клеток. Рекрутирование (мобилизация) стволовых клеток, их пролиферация. Болезни стволовых клеток, их иммунология и генетика. Генная терапия и стволовые клетки.
курсовая работа [94,3 K], добавлен 20.12.2010Роль тучных клеток в регуляции гомеостаза организма. Локализация тучных клеток, их медиаторы. Секреция медиаторов и их функции. Основные типы тучных клеток. Рецепторы и лиганды, эффекты медиаторов. Участие тучных клеток в патологических процессах.
презентация [2,2 M], добавлен 16.01.2014Знакомство с особенностями метода проведения хемилюминесцентного анализа. Рассмотрение способов получения изолированной фракции клеток. Оценка активности иммунокомпетентных клеток как важное направление клинического применения хемилюминесценции.
реферат [2,1 M], добавлен 13.05.2016Дифференциация стволовых клеток. Использование стволовых клеток в медицине: проблемы и перспективы. Пуповинная кровь как источник стволовых клеток. Лекарства будут испытывать на стволовых клетках. Эмбриональные и соматические стволовые клетки.
реферат [851,0 K], добавлен 24.07.2010Понятие, классификация и применение стволовых клеток. Эмбриональные, фетальные и постнатальные клетки. Клиническое применение стволовых клеток для лечения инфаркта. Опыт применения биологического материала в неврологии и нейрохирургии, эндокринологии.
реферат [26,1 K], добавлен 29.05.2013Ознакомление с понятием и историей использования стволовых клеток. Рассмотрение особенностей эмбриональных стволовых клеток, геном которых находится в "нулевой точке", а также соматических - клеток взрослого организма. Основы процесса регенерации.
реферат [22,6 K], добавлен 21.05.2015Причины, механизмы, виды необратимого повреждения клеток и тканей. Ишемическое и гипоксическое, токсическое повреждение, повреждение, вызванное свободными радикалами, включая активированный кислород. Реакции свободных радикалов при гибели клеток.
реферат [30,4 K], добавлен 06.02.2009Закладка и первичная дифференцировка парафолликулярных клеток щитовидной железы человека, их значимость в регуляции процессов жизнедеятельности. Цитология и физиология С-клеток щитовидной железы. Медуллярный рак как один из видов злокачественной опухоли.
реферат [21,5 K], добавлен 21.03.2011Роль клеток миелоидного и лимфоидного рядов в функционировании иммунной системы. Комплементарная система как составляющая врожденного иммунитета. Положительная и отрицательная селекция развивающихся Т-клеток в тимусе и вне его. Этапы развития В-клеток.
реферат [30,1 K], добавлен 10.10.2009Раздражимость как основное свойство живых клеток. Физиология возбудимых клеток. Строение и основные свойства клеточных мембран и ионных каналов. Физиология нервной ткани и синапсов. Классификация антиадренергических средств, механизм их действия.
курсовая работа [194,6 K], добавлен 02.03.2014Механизмы дифференцировки нервных клеток и нейрологии. Домедиаторный и медиаторный периоды дифференцировки нейронов из нейробластов. Дифференциация материала ганглиозных пластинок. Диффероны нервной ткани центральной и периферической нервной системы.
реферат [495,5 K], добавлен 18.05.2019Понятие иммунитета у беспозвоночных, классификация клеток крови, индуцибельные гуморальные защитные факторы. Эволюция В-клеток и иммуноглобулинов, клетки системы врожденного иммунитета, антимикробные пептиды. Лимфомиелоидные ткани у низших позвоночных
реферат [32,5 K], добавлен 27.09.2009Понятие "биотерапия" опухолей, характеристика маркёров. Иммунотерапия опухолей, эффекты макрофагов. Доклинические испытания препарата Галавит. Создание индивидуальных цитотоксических клеток. Принцип действия вакцин на основе белков теплового шока.
контрольная работа [2,3 M], добавлен 05.05.2014Морфологические проявления развития воспалительной реакции организма на туберкулезную инфекцию. Исследование ферментативных реакций, от активности которых зависит функциональное состояние всех органов и организма в целом. Роль клеток соединительной ткани.
реферат [459,2 K], добавлен 15.09.2010Основные процессы, регулируемые витамином D: пролиферация клеток, регуляция обменных процессов и синтеза рецептурных белков, поддержание функциональной активности органов. Факторы риска рахита, его симптомы, критерии диагностики и схема лечения.
презентация [331,8 K], добавлен 11.10.2014История открытия метода гибридизации соматических клеток, его использование в регенераторной медицине; инструменты клеточной инженерии. Иммунотерапия онкологических заболеваний с помощью стволовых и дендритных клеток. Направления развития наномедицины.
реферат [45,9 K], добавлен 14.12.2012История создания и понятие культуры клеток и тканей. Анализ влияния генетических, физических и химических факторов на рост и развитие культур. Особенности образования полифенолов, алкалоидов и вторичных метаболитов в культуре тканей различного рода.
курсовая работа [400,8 K], добавлен 18.05.2010Биографии лауреатов Нобелевской премии по физиологии и медицине 2007 г. Разработка метода генного таргетирования. Основные характеристики эмбриональных стволовых клеток. Использование нокаутированных мышей для изучения наследственных заболеваний человека.
курсовая работа [985,0 K], добавлен 02.08.2020
