Размещено на http://www.allbest.ru/

НАЦІОНАЛЬНА ФАРМАЦЕВТИЧНА АКАДЕМІЯ УКРАЇНИ

УДК 615.451:616-089.165

РОЗРОБКА СКЛАДУ ТА ТЕХНОЛОГІЇ

АНТИСЕПТИЧНОГО ПЕРЕВ'ЯЗУВАЛЬНОГО ЗАСОБУ

15.00.01 - технологія ліків та промислова фармація

АВТОРЕФЕРАТ

дисертації на здобуття наукового ступеня

кандидата фармацевтичних наук

Стрілець Оксана Петрівна

Харків - 2001

Дисертацією є рукопис

Робота виконана на кафедрі мікробіології Національної фармацевтичної академії України (м. Харків), Міністерство охорони здоров'я України.

Науковий керівник: доктор фармацевтичних наук, професор, СТРЕЛЬНИКОВ ЛЕОНІД СЕМЕНОВИЧ, Національна фармацевтична академія України, професор кафедри мікробіології.

Офіційні опоненти: доктор фармацевтичних наук, професор, ЯРНИХ ТЕТЯНА ГРИГОРІВНА, Національна фармацевтична академія України, професор кафедри аптечної технології ліків

доктор фармацевтичних наук, професор, КАЗАРІНОВ МИКОЛА ОЛЕКСАНДРОВИЧ, Державний науковий центр лікарських засобів, завідуючий лабораторією таблетованих лікарських засобів

Провідна установа: Київська медична академія післядипломної освіти ім. П. Л. Шупика МОЗ України, кафедра технології ліків та клінічної фармації

Захист відбудеться “ 15 “ червня 2001 року о 12⁰⁰ годині на засіданні спеціалізованої Вченої ради Д 64.605.01 при Національній фармацевтичній академії України за адресою: 61002, м. Харків, вул. Пушкінська, 53.

З дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці Національної фармацев-тичної академії України ( 61168, м. Харків, вул. Блюхера, 4).

Автореферат розісланий “ 12_ “ травня 2001 року.

Вчений секретар

спеціалізованої Вченої ради І. С. Гриценко

ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТИ

Актуальність теми. У загальній структурі інфекційних захворювань одне з провідних місць належить рановій інфекції і гнійно-запальним ураженням покривів шкіри та слизових оболонок.

В останні роки віддають перевагу створенню комбінованих і комплексних препаратів, якщо сукупний терапевтичний або профілактичний ефект носить адитивний або синергідний характер, а побічна дія не підсилюється. комбінований іммобілізований антисептик шкіра

Новим напрямком робіт у боротьбі з гнійною і рановою інфекціями є створення і впровадження в медичну практику антисептичних засобів у вигляді іммобілізованих препаратів. Як такі іммобілізовані антисептики можна використовувати перев'язувальні засоби з подовженою антимікробною дією.

В аспекті всього вищеозначеного, проведення досліджень з розробки складу комбінованої антисептичної композиції, технології антимікробного перев'язувального засобу і його стандартизації є актуальним науковим напрямком у рішенні питань створення високоефективних антимікробних іммобілізованих антисептичних препаратів.

Зв'язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Дисертаційна робота виконана згідно з планом науково-дослідних робіт НФАУ (№ держреєстрації 0198U007011) та проблемної комісії “Фармація” МОЗ України.

Мета і задачі дослідження. Метою роботи є розробка науково обгрунтованого складу, оптимальної технології, дослідження фізико-хімічних, специфічних властивостей і стандартизація комбінованого іммобілізованого антисептика у вигляді перев'язувального засобу для профілактики та лікування ранової інфекції і гнійно-запальних уражень покривів шкіри і слизових оболонок.

Для досягнення поставленої мети необхідно було вирішити такі задачі:

· проаналізувати і узагальнити дані літератури з питань місцевої терапії ранової інфекції і гнійно-запальних уражень покривів шкіри і слизових оболонок;

· теоретично і експериментально обгрунтувати оптимальний склад комбінованої антисептичної композиції;

· розробити оптимальну технологію отримання антисептичного перев'язувального засобу;

· розробити методики якісного і кількісного аналізу діючих речовин при їх сукупній присутністі;

· встановити основні показники якості розробленого перев'язувального засобу і вивчити його стійкість у процесі зберігання;

· вивчити специфічну активність і біологічну нешкідливість розробленого засобу;

· розробити нормативно-технічну документацію на антисептичний перев'язувальний засіб і представити її до ДФЦ МОЗ України.

Обєкти дослідження даної роботи є антисептики: вітчизняний засіб декаметоксин ( 1, 10 - Декаметилен-біс( N,N- диметилментоксикарбонілметил) амоній дихлорид і етакридину лактат (2 - етоксі-6,9- діаміноакридину лактат), а також перевязувальний матеріал - марля медична.

Предмет дослідження: розробка складу та технології антисептичного перевязувального засобу.

Методи дослідження. Технологічні: рівноважний діаліз, визначення втрати в масі при висушуванні, швидкісті змочуваності та капілярності; мікробіологічні: серійних розведень, дифузії (метод “зон”), вивчення бактерицидності зразків, стерильності; фізико - хімічні: проведення якісного аналізу антисептичних сполук при їх сукупній присутності з використанням кольорових хімічних реакцій та хроматографії у тонких шарах сорбенту, кількісне визначення діючих речовин за допомогою фотометрії; біологічні: визначення антимікробної та ранозагоюючої активностей in vivo, гострої та хронічної токсичності in vivo, місцевоподразнюючої і алергізуючої дії розроблюваного засобу in vivo.

Наукова новизна отриманих результатів. Вперше теоретично і експериментально обґрунтовано запропонований склад антисептичного перев'язувального засобу на основі антисептичних антимікробних речовин декаметоксину і етакридину лактату.

Вперше показано синергідний вплив суббактеріостатичних концентрацій етакридину лактату на антимікробну активність декаметоксину, що посилює його дію у 2,3 - 8,2 рази по відношенню до грампозитивних та грамнегативних мікроорганізмів і дріжджеподібних грибів.

Розроблена оптимальна технологія антисептичного перев'язувального засобу на основі природного полімеру, - целюлози у вигляді марлі, насиченого декаметоксином і етакридину лактатом, призначеного для профілактики та лікування ранових інфекцій і гнійно-запальних ушкоджень покривів шкіри і слизових оболонок.

Розроблені методи якісного і кількісного аналізу діючих речовин при їх сукупній присутності.

Практичне значення отриманих результатів. Створено новий антисептичний засіб під умовною назвою “Деліаз” у вигляді перевязувального засобу (марлевих серветок), призначеного для профілактики та лікування ранових інфекцій і гнійно-запальних ушкоджень покривів шкіри і слизових оболонок.

Розроблено технологічний тимчасовий регламент на виробництво перев'язувального засобу “Деліаз”.

Розроблено проект тимчасової фармакопейної статті.

У Державний фармакологічний центр Міністерства охорони здоров'я України представлена нормативно-технічна документація для отримання дозволу на проведення клінічних досліджень.

Особистий внесок здобувача. В наукових працях опублікованих зі співавторами Диким І. Л., Болотовим В. В., Шевельовою Н. Ю., Бевз Н. Ю. особисто дисертантом:

· проведено пошук та аналіз даних літератури з питань місцевої терапії ранової інфекції і гнійно-запальних уражень покривів шкіри і слизових оболонок з використанням перев'зувальних та іммобілізованих антисептичних засобів;

· обґрунтовано склад і розроблена технологія антисептичного перев'язувального засобу з декаметоксином і етакридину лактатом;

· розроблені методи контролю якості перев'язувального засобу “Деліаз”;

· проведені біологічні дослідження розробленого засобу;

· підтверджено стійкість перев'язувального засобу “Деліаз” у процесі зберігання;

· розроблена НТД на перев'язувальний засіб “Деліаз”.

Апробація роботи. Основні положення дисертаційної роботи доповідались на науково-практичній конференції “Досягнення сучасної фармації” (м. Харків, 1994 р.), V Національному зїзді фармацевтів України (м. Харків, 1999 р.), республіканській науковій конференції “ Научные направления в создании лекарственных средств в фармацевтическом секторе Украины” (м. Харків, 2000 р.), Міжнародній конференції “Стратегия и тактика применения антисептиков в медицине” (м. Вінниця, 2000 р.).

Публікації. За матеріалами дисертації опубліковано 9 наукових праць, у тому числі 5 наукових статей і 4 тез доповідей на науково-практичних конференціях, в яких відображені її основні положення.

Обсяг та структура дисертації. Дисертаційна робота складається з вступу, огляду літератури (розділ 1), розділу, присвяченого об'єктам та методам досліджень (розділ 2), експериментальної частини (розділи 3 - 5 ), загальних висновків, списку використаної літератури та додатків.

Робота викладена на 129 сторінках машинопису, містить 27 таблиць, 20 рисунків і 7 додатків. Список використаної літератури містить 153 джерела.

ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ

У процесі розробки складу та технології антисептичного перевязувального засобу “Деліаз” нами був використаний вітчизняний антисептик декаметоксин (1, 10-Декаметилен-біс (N,N-диметилментоксикарбонілметил) амонію дихлорид) (ТФС 42 -1814 -88), а також етакридину лактат (ФС 42 -2799 -91), марля медична ( ДОСТ 9412-77 ) та різноманітні розчинники, які широко використовуються у фармацевтичній промисловості.

При вивченні властивостей та стабільності розроблюваного перевязувального засобу “Деліаз” були застосовані загальноприйняті методи органолептичних, фізико - хімічних, технологічних, мікробіологічних та біологічних досліджень, які дозволяють обєктивно оцінювати якісні характеристики засобу на підставі експериментально одержаних, статистично оброблених результатів.

Розробка складу і технології антисептичного перев'язувального засобу

З метою можливого підвищення антимікробних властивостей декаметоксину в серії попередніх досліджень було вивчено синергідний вплив на нього де-

яких антисептичних речовин різних хімічних груп. У результаті було відібрано три антисептики: фурацилін, кислоту саліцилову та етакридину лактат, які і використовували в суббактеріостатичних концентраціях у відповідних композиціях з декаметоксином в подальших серіях експериментів для дослідження антимікробної активності по відношенню до різних штамів мікроорганізмів. Для цього брали музейні штами грампозитивних бактерій- золотистий стафілокок (Staphylococcus aureus АТСС 653 Р), грамнегативних - кишкова паличка (Escherichia coli АТСС 25922), паличка синьо-зеленого гною (Pseudomonas aeruginosa АТСС 9027); спорових - сінна паличка (Bacillus subtilis АТСС 6633); грибів - дріжджеподібний гриб роду Candida (Candida albicans АТСС 885-653).

Протимікробна активність вивчалась методом серійних розведень.

Результати даних досліджень представлені в таблиці 1.

Таблиця 1. Вплив суббактеріостатичних концентрацій деяких антисептиків на антимікробну активність декаметоксину

Анти септики	Тест - мікроорганізм
	S.au-reus МПК, мкг/мл	Підви-щення актив- ності (кіль-кість разів)	E.coli МПК, мкг/мл	Підви-щення актив- ності (кіль-кість разів)	Ps.aerug.МПК, мкг/мл	Підви-щення актив- ності (кіль-кість разів)	B.subt.МПК, мкг/мл	Підви-щення актив- ності (кіль-кість разів)	C.albі-cans МПК, мкг/мл	Підви-щення актив- ності (кіль-кість разів)
Декаметоксин	0,97± 0,042		3,9± 0,46		62,5± 7,12		1,9± 0,26		1,9± 0,16
Фураци-лін	7,8± 0,18	4,1	7,8± 0,09	2,0	-	-	1,9± 0,20	1,2	-	-
Декаметоксин + фураци-лін	0,24± 0,013		1,9± 0,18		-		1,5± 0,15		-
Етак-ридину лактат	31,3± 2,18	8,2	31,3±2,84	8,0	125,3±11,84	4,3	31,3±3,01	2,3	125,3±7,28	8,0
Декаметоксин + етакри-дину лактат	0,13±0,009		0,49± 0,016		15,6± 3,22		0,97± 0,038		0,25± 0,036
Кислота саліци-лова	250,0 ±14,97	3,2	250,0 ±15,10	1,8	500,0 ±20,01	О О 1 1,1	-	-	250,0 ±14,50	2,0
Декаметоксин + кислота саліци-лова	0,3± 0,02		2,2± 0,31		56,8± 4,48		-		0,95± 0,031

Примітка. n = 6; “ - “ - активність відсутня.

Дані, наведені в таблиці 1, свідчать, що фурацилін в суббактеріостатичних концентраціях підвищує активність декаметоксину у відношенні тільки трьох з п'яти культур: St. aureus, E.coli, B.subtilis у 4,0; 2,0; і 1,2 рази відповідно. Кислота саліцилова підвищує протимікробну активність декаметоксину в 1,1 - 3,8 рази відносно всіх використаних культур, крім спорової (стафілокок золотистий - в 3,2; кишкова паличка - 1,8; паличка синьо-зеленого гною - 1,1; гриб роду кандида - 2,0; сінна паличка - 0,0). Етакридину лактат в суббактеріостатичних концентраціях посилює дію декаметоксину відносно стафілокока золотистого, кишкової палички і дріжджеподібного гриба роду кандида - у 8,0 - 8,2 рази, відносно палички синьо-зеленого гною - у 4,3 рази і спорової культури сінної палички - у 2,3 рази, що значно перевищує дію фурациліну і кислоти саліцилової.

Отримані результати стали основою для вибору етакридину лактату як сполуки, що найбільш ефективно підсилює протимікробну дію декаметоксину, для включення його в розроблювану комбіновану антисептичну композицію з декаметоксином.

Враховуючи, що при клінічному застосуванні антисептичного засобу для профілактики і лікування ран і гнійно-запальних уражень покривів шкіри найчастіше органічними домішками є кров і сироватка, нами була вивчена антимікробна активність комплексного антисептичного складу “декаметоксин - етакридину лактат" (декаметоксин в концентрації 31,3 мкг/мл, етакридину лактат в суббактеріальних концентраціях в залежності від культури мікроорганізму) в їх присутності з урахуванням терміну загибелі бактерій. Результати досліджень наведені в табл. 2.

Таблиця 2. Антимікробна активність антисептичного розчину “декаметоксин-етакридину лактат" при наявності білкового захисту тест-штамів

Культури мікроорганізмів	Термін загибелі мікроорганізмів, сек.
	без білка	10 % білка	20 % білка
Staphylococcus aureus	102	284	603
Escherichia coli	903	1502	1805
Bacillus subtilis	604	1002	1302

Примітка. n = 6.

З наведених в табл. 2 результатів витікає, що активність антисептичної композиції “декаметоксин - етакридину лактат” при наявності білкового захисту тест-штамів в кількості 10 % і 20 % практично не відрізняється від активності без нього, що свідчить про збереження високого рівня специфічної активності композиції при наявності гнійного ексудату рани.

Представлялося потрібним дослідити дію даного антисептичного складу на мікроорганізми при різних значеннях рН поживного середовища, тому що в першій фазі ранового процесу в рані відзначається ацидоз, який досягає рН 5,6 0,1.

Після цього спостерігається нормалізація ранового середовища, його злужування, і в фазі грануляції рН складає 7,2 0,1.

Результати проведених досліджень, які наведені в таблиці 3, показують, що істотного впливу рН середовища в межах 5,0 - 8,0 на бактерицидну активність складу “декаметоксин - етакридину лактат" по відношенню до золотистого стафілокока, кишкової палички і вульгарного протею не встановлено. Це дає підставу зробити висновок про те, що розроблюваний засіб не втратить ефективності при лікуванні гнійних уражень шкіри.

Таблиця 3. Залежність бактерицидної активності антисептичної композиції “декаметоксин - етакридину лактат" від рН середовища

Досліджуваний склад	рН середовища	Культури мікроорганізмів
		Staphylococcus aureus	Escherichia coli	Proteus vulgaris
		Час загибелі мікроорганізмів, сек.
“Декаметоксин - етакридину лактат"	5,00,1 6,00,09 7,00,1 8,00,1	155 105 104 105	9010 905 9510 905	31015 30015 30020 30515

Примітка. n = 6.

З метою вибору носія для створення антисептичного перев'язувального засобу, нами були обрані два види природних матеріалів, похідні целюлози: густопетлиста марля і лігнін. Після попередньо проведених технологічних випробувань (визначення здатності до сорбції активнодіючих речовин, їх подальшого вивільнення, стабільності та інше) встановлено, що лігнін при його надто високій гігроскопічній здатності технологічно непридатний для використання як носія лікарських речовин, тому що дуже легко руйнується, не має достатньої пластичності, не втримує діючі сполуки в достатній мірі. Тому для створення перев'язувального засобу з антимікробними властивостями в подальших експериментах використовували природний полімер - целюлозу у вигляді густопетлистої марлі.

Проаналізувавши дані літератури, ми обрали технологічно простий спосіб придання матеріалам антимікробних властивостей - фізична іммобілізація антисептичної композиції, що включає декаметоксин та етакридину лактат і яка засновується на утриманні адсорбованих молекул активнодіючих речовин на поверхні носія за рахунок неспецифічних взаємодій (ван-дер-ваальсових, електростатичних).

Встановлено, що для іммобілізації діючих речовин носієм оптимальним є введення декаметоксину і етакридину лактату в розчиненому вигляді. Тому згідно з даними про їх розчинність, як розчинники були обрані і використані в подальших дослідженнях вода очищена, спирт етиловий 40 % і спирт етиловий 70 %.

Нами була вивчена здатність носія, марлі, адсорбувати антисептики з водних та спиртових розчинів і встановлені максимальні концентрації діючих речовин, що дають змогу встановлення кількісного складу антисептичної композиції “декаметоксин - етакридину лактат”. Для цього виготовляли зразки засобу, насичені різними концентраціями антисептиків у водному та спиртових (спирт етиловий 40 і 70 %) розчинах. Наявність діючих речовин на носії і їх кількісний склад підтверджували фізико-хімічними методами. Результати представлені на рис. 1.

Рис. 1 Адсорбційна здатність носія по відношенню до декаметоксину і етакридину лактату (водний та спиртовий розчини):

1. декаметоксин;

2. етакридину лактат.

Із даних, приведених на рис. 1, видно, що краща адсорбція діючих речовин носієм відбувається при насиченні його спиртовими розчинами антисептиків (концентрація спирту етилового 70 %). При цьому максимальна адсорбційна здатність спостерігається при 0,1 % концентрації робочих спиртових розчинів досліджуваних антисептичних речовин. Подальше підвищення концентрації розчину насичення як декаметоксину, так і етакридину лактату недоцільне, бо не призводить до збільшення вмісту діючих речовин на носії. При цьому концентрації декаметоксину й етакридину лактату були однаковими і відрізнялись значеннями, що не перевищували похибки експерименту. Таким чином, експериментально встановлено, що при розробці антисептичного засобу технологічно доцільно як розчинник антисептиків використовувати спирт етиловий 70 %, що дає змогу не тільки досягати максимального їх насичення носієм, але й у стислі терміни, що не перевищують 10 - 15 хв. при температурі 85-90 ⁰С, провести висушування розроблюваного засобу ( рис. 2).

Рис. 2 Залежність терміну висушування перев'язувального засобу від використовуваного розчинника:

1. вода очищена;

2. спирт етиловий 40 %;

3.спирт етиловий 70 %.

 Далі досліджувались зразки марлі, насичені розчинами декаметоксину 0,1 %, етакридину лактату 0,1 % і їх сумішшю, що містила рівні концентрації речовин ( 0,1 % ) з метою вивчення їх антимікробної активності в дослідах in vitro методом “зон” по відношенню до грампозитивних, грамнегативних, спорових культур бактерій і дріжджеподібного гриба роду кандида і визначення наявності синергідного впливу етакридину лактату на активність декаметоксину в марлевих зразках. Результати представлені в таблиці 4.

Таблиця 4. Порівняльна антимікробна активність зразків густопетлистої марлі, насичених досліджуваними антисептиками

Носій з антисептиком	St.aureus	E. coli	Ps.aerug.	B.subtilis	C.albicans
	Зони затримки росту культури навколо зразка, мм
Декаметоксин	60,1	50,08	20,009	70,02	50,09
Етакридину лактат	20,05	активність відсутня	активність відсутня	активність відсутня	активність відсутня
“Декаметоксин-етакридинулактат”	100,4	80,2	40,05	100,1	80,09

Примітка. n = 6.

Дані, приведені в табл. 4, свідчать про наявність синергідного впливу етакридину лактату на протимікробну активність декаметоксину, збільшуючи її в 1,6 -2,02 рази по відношенню до грампозитивних, грамнегативних, спорових культур мікроорганізмів і дріжджеподібного гриба роду кандида.

Таким чином, на підставі проведених досліджень теоретично і експериментально обгрунтовано склад антисептичної композиції з декаметоксином і етакридину лактатом на основі спирту етилового: декаметоксину - 0,10 г; етакридину лактату - 0,10 г; спирту етилового 70 % до 100 мл.

З метою розробки найбільш ефективної і економічно вигідної технології насамперед було вивчено термін максимального просочення марлі спиртовим розчином антисептиків визначеної раніше концентрації. Отримані дані свідчать, що максимальне насичення носія діючими речовинами відбувається через 203 хвилин від початку процесу.

Нами досліджено також вплив температури розчину суміші антисептиків на ступінь адсорбції носія активнодіючими речовинами. Для цього готували зразки перев'язувального засобу, використовуючи розчини антисептиків різних температур (15, 20, 25, 30, 40, 50 ⁰С). Результати наведені на рис. 3.

Рис.3 Залежність величини насичення носія активнодіючими речовинами від температури розчину:

1. декаметоксин;

2. етакридину лактат.

Як видно з даних, наведених на рис. 3, підвищення температури розчину до 20-30 ⁰С призводить до підвищення концентрації декаметоксину до 99,2 % від максимально можливої, а етакридину лактату до 98,1 %. Подальше підвищення температури призводить до зниження концентрації діючих компонентів, що можна пояснити можливою їх десорбцією. Таким чином, технологічно доцільно проводити насичення носія розчином антисептиків з температурою 20 - 30 ⁰С.

Згідно з вимогами , що пред'являються до засобів, які наносяться на відкриті рани, вони повинні бути стерильними, а весь технологічний процес повинен проводитись в строго асептичних умовах. Проведені експериментальні дослідження дозволили розробити метод стерилізації, заснований на повітряному способі, що здійснюється сухим гарячим повітрям в повітряних стерилізаторах. Проаналізувавши фізико-хімічні властивості діючих речовин і загалом перев'язувального засобу, експериментально встановлено, що стерильність зразків створеного засобу досягається при їх трикратній обробці сухим гарячим повітрям при температурі 905 ⁰С протягом 60 хвилин.

Ефективність методу підтверджена бактеріологічно у відповідності до вимог ДФ ХІ СРСР.

На підставі проведених досліджень розроблена і запропонована технологічна схема виготовлення антисептичного перев'язувального засобу у вигляді серветок під умовною назвою “Деліаз”. Схема наведена на рисунку 4.

За результатами проведених досліджень розроблено технологічний тимчасовий регламент на виробництво антисептичного перев'язувального засобу “Деліаз”.

Фізико - хімічні дослідження антисептичного перев'язувального засобу “Деліаз”

З метою стандартизації перев'язувального засобу “Деліаз” були вивчені органолептичні та фізико-хімічні властивості різних його серій (табл. 5).

Таблиця 5. Органолептичні і фізико-хімічні властивості перев'язувального засобу “Деліаз”

№	Найменування показників	Значення показників
1 2 3 4 5	Зовнішній вигляд рН водного розчину Втрати в масі при висушуванні Швидкість змочування Капілярність	Марля яскраво-жовтого кольору 6,8 - 7,8 5,0 - 8,5 % 4,6 0,2 сек 15 0,5 см/год

Примітка. n = 6.

Для ідентифікації діючих речовин перев'язувального засобу “Деліаз” - декаметоксину і етакридину лактату при їх сумісній присутності нами були розроблені методики проведення реакцій автентичності. Після отримання водного витягнення з наважки перев'язувального засобу проводили реакції: з нітритом натрію в середовищі хлористоводневої кислоти (етакридин); з ваніліном в концентрованій сірчаній кислоті (декаметоксин). Крім того, наявність діючих речовин підтверджували методом хроматографії в тонких шарах сорбенту. Як систему розчинників використовували суміш н-бутанол - кислота оцетова - вода (40:10:15). Rf декаметоксину - 0,23; Rf етакридину лактата - 0,56.



Рис. 4 Технологічна схема антисептичного перев'язувального засобу “Деліаз”

Розроблено методику кількісного визначення декаметоксину й етакридину лактату при їх сумісній присутності у водній витяжці з наважки перев'язувального засобу фотометричними методами. Етакридину лактат визначали за реакцією утворення солі діазонію, оптичну густину визначали на фотоколориметрі при довжині хвилі 540 нм.

Для визначення декаметоксину використовували реакцію утворення забарвленого продукту з розчином еозину. Попередньо нами було встановлено, що етак-

ридину лактат також реагує з розчином еозину з утворенням забарвленого продукту і оптична густина розчину , що містила декаметоксин і етакридину лактат після реакції з розчином еозину, не завжди підкоряється закону адитивності. У зв'язку з цим, при кількісному визначенні декаметоксину спектрофотометричним методом (при довжині хвилі 540 нм) ми готували розчин робочого стандартного зразка (РСЗ) декаметоксину та етакридину лактату з концентрацією етакридину лактату, знайденій за реакцією утворення солі діазонію.

Про відповідність вмісту декаметоксину судили за співпаданням оптичних густин при дослідженні витяжки з навісок перев'язувального засобу і дослідженням розчину РСЗ, що мав у своєму складі декаметоксин і етакридину лактат.

Нами були встановлені межі вмісту етакридину лактату і декаметоксину у витяжці, що досліджується, від 0,00323 до 0,00437 г. в 1,00 г перев'язувального засобу “Деліаз”.

Вивчення стерильності показало, що антисептичний перев'язувальний засіб “Деліаз” є стерильним і відповідає вимогам ДФ Хl СРСР, що пред'являють до стерильних засобів.

На підставі результатів експериментальних досліджень основних показників якості антисептичного засобу “Деліаз” розроблено проект тимчасової фармакопейної статті.

Стабільність різних серій засобу “Деліаз” при зберіганні в темному місці в пергаментних упаковках вивчали при різних температурних умовах 102 ⁰С; 202 ⁰С; 402 ⁰С протягом 2 років.

Результати досліджень, приведені в табл. 6, свідчать про те, що якість перев'язувального засобу відповідає вимогам, закладеним в проект ТФС в процесі зберігання протягом 2 років при різних температурах у сухому, захищеному від світла місці.

Вивчення специфічної активності перев'язувального засобу “Деліаз”

Вивчення фармакологічних властивостей антисептичного перев'язувального засобу “Деліаз” проводили на кафедрі мікробіології НФАУ і НДІМІ ім. І.І. Мечникова.

Таблиця 6. Стабільність антисептичного перев'язувального засобу “Деліаз” різних серій в процесі зберігання

№ п/п	Найменування показників за проектом ТФС	Строк зберігання, міс.
		Початок зберігання	6	12	18	24
		Температура зберігання 202 °С
1	Зовнішній вигляд	Марля забарвлена в жовтий колір
2	рН водного розчину	6,92	7,19	7,47	7,35	7,62
4	Реакції автентичності: -з натрію нітритом в середовищі кислоти хлористо-водневої (етакридин); -з ваніліном в концентрованій кислоті сірчаній (декаметоксин) ТШХ (система розчинників н-бутанол- кислота оцтова -вода 40:10:15)	Вишнево-червоне забарвлення Малиново-червоне забарвлення	теж теж	теж теж	теж теж	теж теж
		Rf декаметоксину
		0,23	0,23	0,22	0,24	0,23
		Rf етакридину лактату
		0,56	0,55	0,56	0,55	0,57
5	Втрати в масі при висушуванні (5,0-8,5 %), %	6,0	6,5	5,8	7,2	7,0
6	Кількісне визначення: декаметоксину в 1,00 г засобу (0,00323-0,00437) етакридину лактату в 1,00 г засобу (0,00323-0,00437)	0,00348± 0,00002 0,00348± 0,00002	0,00360± 0,00005 0,00360± 0,00005	0,00328± 0,00001 0,00328± 0,00001	0,00400± 0,00003 0,00400± 0,00003	0,00381± 0,00002 0,00381± 0,00002
7	Стерильність	Стерильне	теж	теж	теж	теж

Примітка. n = 6.

Антимікробну і ранозагоюючу активності перев'язувального засобу “Деліаз” вивчали на моделях різаних асептичних й інфікованих гнійних ран у морських свинок в порівнянні з марлевою підложкою бактерицидного пластиря, що містить діючі речовини: брильянтовий зелений, синтоміцин, фурацилін (хіміко-фармацевтичне підприємство м. Воронежа). Інфікування проводили сумішшю клінічних культур мікроорганізмів: стафілокока золотистого, кишкової палички і дріжджеподібного гриба роду кандида.

Дослідження показали переваги лікувально-профілактичної дії розроблюваного антисептичного засобу “Деліаз” з ряду експериментальних показників (термін загоювання, динаміка загоювання, мікробні показники обсіменіння ран тощо, табл. 7).

Таблиця 7. Ранозагоююча і антимікробна активність засобу “Деліаз” в експерименті

Серія дос-лідів	Вплив на шкіру тварин	Початок лікування	Група тварин	Стан ран	Строки заживлення ран, доби
1	Лінійні різані рани	з моменту нанесення рани	- використано “Деліаз”; - використано бактерицидний лейкопластир; - використано стерильну марлеву пов'язку; - контроль	- без нагнивання - без нагнивання -з явищем гнійного запалення -з явищем гнійного процесу	4-5 7-8 12 - 13 15 - 16
2	Різані рани з осіменінням мікробною асоціацією	Через 3 доби після інфікування і розвитку гнійного процесу	- використано “Деліаз”; - використано бактерицидний лейкопластир; - використано стерильну марлеву пов'язку; - контроль	Ознаки гнійно-некротичного процесу	9 - 10 12- 13 15- 16 15 - 17

Примітка. Кожна група складалася з 6 тварин.

До суттєвих переваг запропонованого антисептичного засобу можна віднес-ти і те, що за даними мікробіологічних досліджень біологічно активна композиція в субактивних дозах сприяє закономірному зниженню вихідного рівня антибіотикорезистентності збудників гнійно-запальних захворювань.

Вивчення гострої і хронічної токсичності показало, що перев'язувальний засіб “Деліаз” відноситься до практично нетоксичних. Доведено, що він не має сенсибілізуючої і місцевоподразливої дії на шкіру тварин.

Отримані експериментальні дані свідчать про перспективність впровадження в медичну практику перев'язувального засобу “Деліаз” як антисептичного засобу при лікуванні локальних бактеріальних інфекцій, що протікають як гнійно-запальний процес, завдяки наявності антимікробного та ранозагоюючого ефектів.

ВИСНОВКИ

1. Вперше теоретично і експериментально обгрунтовано склад комбінованої антисептичної композиції з використанням антисептичних засобів вітчизняного декаметоксину та етакридину лактату.

2. Вперше показано синергідний вплив суббактеріостатичних концентрацій етакридину лактату на антимікробну активність декаметоксину, що посилює його дію у 2,3 - 8,2 рази по відношенню до грампозитивних, грамнегативних мікроорганізмів та дріжджеподібних грибів.

3. Обґрунтовано оптимальну технологію антисептика у вигляді перевязувального засобу під умовною назвою “Деліаз”, яка полягає в максимальному насиченні носія, що являє собою целюлозу (марлю), активнодіючими речовинами (декаметоксином і етакридину лактатом) шляхом його просочення протягом 20 5 хвилин спиртовим розчином антисептиків з подальшим висушуванням при температурі 85-90 ⁰С. Показана висока ефективність створеного препарату по відношенню до хвороботворних мікроорганізмів, яка перевищує аналогічну дію засобу порівняння в 1,8 - 4,1 рази.

4. Вивчені фізико-хімічні властивості розробленого засобу “Деліаз”: визначені рН водного розчину, втрати в масі при висушуванні, швидкість змочування та капілярність, які дозволяють контролювати стабільність засобу в процесі зберігання. За допомогою метода рівноважного діалізу встановлено подовжене вивільнення діючих речовин антисептичного засобу “Деліаз”, 50 % яких перебігає через напівпроникну мембрану за термін, не менший 9 -11 годин, що дозволяє віднести створений перевязувальний засіб з антисептичною дією до ретардних форм лікарських засобів.

5. Розроблені методи якісного і кількісного аналізу діючих речовин антисеп-тичного засобу “Деліаз” при їх сумісній присутності, що засновуються на ідентифікації складових компонентів за допомогою відповідних реакцій, методів тонкошарової хроматографії і дозволяють визначити мінімальну кількість декаметоксину та етакридину лактату з достатньою точністю ( 15 %).

6. Фізико-хімічними та мікробіологічними дослідженнями підтверджена стабільність розробленого засобу протягом 2 років в процесі зберігання в темному сухому місці.

7. Встановлена висока фармакотерапевтична здатність засобу “Деліаз” при експериментальних гнійно-запальних захворюваннях, відтворених з використанням грампозитивних та грамнегативних бактерій і дріжджеподібних грибів. Виявлена виражена антимікробна та ранозагоююча здатності.

8. На основі результатів експериментальних досліджень розроблено проект тимчасової фармакопейної статті “Антисептичний перевязувальний засіб “Деліаз” та технологічний тимчасовий регламент його отримання. Розроблена НТД представлена до Державного фармакологічного центру МОЗ України.

9. Фрагменти роботи впроваджено до навчального процесу ряду вузів України.

ТЕМА ДИСЕРТАЦІЇ ВІДОБРАЖЕНА В ПУБЛІКАЦІЯХ:

Стрілець О.П., Дикий І.Л., Стрельников Л.С. Антисептика - нинішнє та майбутнє // Вісник фармації.- 1998.- № 1 (17).- С. 51 - 55.

Изучение антимикробных свойств новой лекарственной формы в виде антисептического перевязочного средства на основе декаметоксина и этакридина лактата / О.П.Стрилец, И.Л.Дикий, Л.С.Стрельников, Н.Ю.Бевз // Провизор.- 1999.-№ 7.- С. 46 - 47.

Мікробіологічне обгрунтування технологічних аспектів створення комплексного антисептичного препарату / О.П.Стрілець, І.Л.Дикий, Л.С.Стрельников, В.В.Болотов // Вісник фармації.- 1999.- № 1 (19).- С. 78 - 81.

Стандартизация антисептических салфеток, содержащих декаметоксин и этакридина лактат / О.П.Стрилец, В.В.Болотов, Л.С.Стрельников, И.Л.Дикий, Н.Ю.Бевз // Провизор.- 1999.- № 11.- С. 45-47.

Технологические и химиотерапевтические аспекты создания нового антисептического перевязочного средства / И.Л.Дикий, Л.С.Стрельников, Н.Е.Шевелева, О.П.Стрилец // Вісник Вінницького державного медичного університету.- 2000.- № 2.- С. 290 - 292.

Стрілець О.П., Гладух Є.В., Стрєльнікова Т.В. Технологічні аспекти вдосконалення перев'язочних матеріалів //Тез. доп. наук.-практ. конф. “Сучасні проблеми фармації”, Харків.- 1994.- С. 62.

Стрилец О.П., Дикий И.Л., Стрельников Л.С. Разработка технологии нового антимикробного перевязочного средства // Досягнення сучасної фармації та перспективи її розвитку у новому тисячолітті: Матеріали V Національного з'їзду фармацевтів України, Харків.- 1999.- С. 207 - 208.

Специфическая активность нового перевязочного средства “Дэлиас” в эксперименте / Стрилец О.П., Стрельников Л.С., Дикий И.Л., Шевеле- ва Н.Е. // Досягнення сучасної фармації та перспективи її розвитку у новому тисячолітті: Матеріали V Національного з'їзду фармацевтів України, Харків.- 1999.- С. 611 - 612.

Экспериментальное исследование фармакологических свойств нового комбинированного антисептика / Дикий И.Л., Стрельников Л.С., Стрилец О.П., Шевелева Н.Е. // Тез. докладов респ. научн. конф. “Научные направления в создании лекарственных средств в фармацевтическом секторе Украины”, 26 - 28 сентября 2000 г., Харьков.- 2000.- С. 12 - 13.

АННОТАЦИЯ

Стрилец О.П. Разработка состава и технологии антисептического перевязочного средства. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук по специальности 15.00.01 - технология лекарств и промышленная фармация. - Национальная фармацевтическая академия Украины, Харьков, 2001.

Впервые проведено комплексное исследование по созданию антимикробного перевязочного средства, с использованием комплексного антисептического состава, для профилактики и лечения раневой инфекции и гнойно-воспалительных поражений покровов кожи и слизистых оболочек.

В качестве базового антимикробного средства был выбран отечественный антисептик - декаметоксин из группы четвертично-аммониевых соединений. Микробиологическими исследованиями установлено, что комбинация декаметоксина с этакридина лактатом имеет синергидное действие на микроорганизмы, повышая антимикробную активность в 2,3 - 8,2 раза по отношению к грамположительным, грамотрицательным микроорганизмам и дрожжеподобному грибу рода кандида.

В результате исследований показано, что антимикробная активность антисептической композиции “декаметоксин - этакридина лактат” практически не зависит от присутствия органических примесей (сыворотка, кровь) и рН среды в пределах 5,0 - 8,0 и это дает основание сделать вывод, что разрабатываемое средство не утратит эффективности при лечении гнойно-воспалительных поражений кожных покровов.

После проведенных технологических испытаний (определение способности адсорбировать активнодействующие вещества, их дальнейшее высвобождение, стабильность и др.) остановились на природном полимере - целлюлозе в виде густопетлистой марли.

Экспериментально был обоснован выбор растворителя декаметоксина и этакридина лактата для приготовления антисептического раствора, которым насыщается носитель (марля) - 70 % спирт этиловый (время высушивания при этом сокращается до 10 - 15 минут при температуре 85 - 90 ⁰С) и время насыщения, которое составляет 20 минут.

Была изучена способность носителя адсорбировать на своей поверхности антисептики из растворов и установлены максимальные концентрации действующих веществ, с целью установления количественного состава антисептической композиции “декаметоксин - этакридина лактат”. Данные показали, что максимальная адсорбция носителем действующих веществ наблюдается при насыщении его 0,1 % растворами антисептиков в соотношении 1:1.

На основании проведенных исследований теоретически и экспериментально обоснован состав антисептической композиции с декаметоксином и этакридина лактатом : декаметоксина - 0,10 г; этакридина лактата - 0,10 г; спирта этилового 70 % до 100 мл.

Экспериментально обоснована и разработана оптимальная технология антисептического перевязочного средства в виде стерильных марлевых салфеток под условным названием “Дэлиас”. Показана высокая эффективность разработанного средства по отношению к музейним культурам и клиническим штаммам микроорганизмов, которая превышает аналогичное действие средства сравнения в 1,8 - 4,1 раза.

Разработаны методы качественного и количественного анализа действующих веществ в препарате при их совместном присутствии. Изучены основные физико-химические свойства разработанного средства “Дэлиас”. Разработан проект временной фармакопейной статьи на антисептическое перевязочное средство “Дэлиас”. С помощью метода равновесного диализа установлено продолжительное высвобождение действующих веществ (до 25 часов) антисептического средства, что дает возможность отнести разработанное средство с антисептическим действием к ретардным формам лекарственных средств.

Изучена стабильность средства в процессе хранения в пергаментной упаковке при обычном температурном режиме в темном сухом месте в течение 2 лет и методом “ускоренного старения” при двух температурных режимах. Физико-химическими и микробиологическими методами подтверждена стабильность разработанного средства в течение 2 лет при хранении в темном сухом месте.

Фармакологическими исследованиями установлено, что антисептическое перевязочное средство “Дэлиас” обладает выраженным профилактическим и лечебным действием с антимикробной активностью широкого спектра действия и ранозаживляющим эффектом. Не обладает местнораздражающим и аллергическим действием.

Ключевые слова: антисептическое перевязочное средство, салфетки, декаметоксин, этакридина лактат, технология.

АНОТАЦІЯ

Стрілець О.П. Розробка складу та технології антисептичного перев'язувального засобу. - Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата фармацевтичних наук за спеціальністю 15.00.01 - технологія ліків та промислова фармація.- Національна фармацевтична академія України, Харків, 2001.

Вперше проведено комплексне дослідження по створенню антимікробного перев'язувального засобу з використанням комплексного антисептичного складу для профілактики та лікування ранової інфекції і гнійно - запальних уражень покривів шкіри і слизових оболонок.

Розроблено оптимальний склад та раціональна технологія антисептичного засобу, методики якісного і кількісного аналізу діючих речовин при їх сумісній присутності, вивчені фізико - хімічні властивості препарату, стабільність у процесі зберігання, біологічна нешкідливість і специфічна активність антисептичного перев'язувального засобу “Деліаз”.

Ключові слова: антисептичний перев'язувальний засіб, серветки, декаметоксин, етакридину лактат, технологія.

ABSTRACT

Strilets O. P. Development of composition and technology of an antiseptic dressing-room resource. - Manuscript.

This report is for getting a scientific degree of the canolidate of farmaceutical scienses on a speciality 15.00.01 - technology of medicines and industrial pharmacy. The national farmaceutical acadamy of Ukrain, Khakiv, 2001.

Complex research on creation of an antimicrobial dressing-room resource, with usage of complex antiseptic composition for prophylaxis both treatment of a wound fever and purulent - inflammatory defeats of integuments of a skin and mucosas for the first time is carried out.

The optimal composition and rational technology of an antiseptic resource, technique qualitative and quantitative analysis of operating substances designed at their collateral presence, the physicochemical properties of a drug, stability are investigated during storage, biological harmlessness and specific activity of an antiseptic dressing-room resource "Dalias".

Key words: an antiseptic dressing-room resource, napkin, decametoxin, aethacridinum lactatum, technology.

Размещено на Allbest.ru

...