Дослідження антиоксидантних властивостей в ряду похідних п’яти- та шестичленних азагетероциклів і визначення їх ефективності при ішемії головного мозку

43,34,8

97,39,3*

188,216,2*

218,211,4*

220,816,8

Каталаза мкат/мг біл/хв

1,800,40

5,000,31*

5,880,21*

6,220,14*

6,160,48

ГПР мкм/мг біл/хв

34,57,2

48,64,2*

56,23,8*

68,21,4*

69,17,2

токоферол мкм/г тканини

3,110,49

3,740,42

3,880,33*

4,550,21*

4,730,22

ДК мкмоль/г тканини

2,440,11

2,000,07

1,770,09

1,520,08

1,320,07

ТК мкмоль/г тканини

1,140,03

0,870,02

0,720,03*

0,660,02*

0,460,01

МДА мкмоль/г тканини

1,260,07

0,810,08*

0,780,05*

0,600,02*

0,610,05

Примітка: * - Р0.05 по відношенню до контролю.

Курсове призначення ноотрилу і препаратів порівняння (тіотриазолін і пірацетам) тваринам з білатеральною перев'язкою загальних сонних артерій у реабілітаційний період приводило до відновлення показників вуглеводно-енергетичного обміну у всіх групах, функціональної активності ферментів антиоксидантної системи і зниження кількості продуктів ВРПО. Так, у тварин, що одержували протягом 18 діб препарат "Ноотрил", спостерігалося підвищення активності антиоксидантних ферментів вище значень інтактних тварин. Вміст продуктів ВРПО менший у порівнянні з контрольними тваринами. Показники активності ВВ-КФК в сироватці крові всіх експериментальних тварин знаходяться у межах показників інтактних щурів.

Таблиця 3 Вплив ноотрилу на біохімічно-функціональні показники головного мозку щурів на 4 добу після введення аутокрові у внутрішню капсулу головного мозку (ВКГМ)

Показники	ВКГМ (контроль)	ВКГМ + пірацетам	ВКГМ + тіотриазолін	ВКГМ + Ноотрил	Інтактні тварини
Лактат мкмоль/г тканини	6,110,17	5,210,14	5,000,18	4,880,17*	2,690,18
Піруват мкмоль/г тканини	0,160,02	0,170,02	0,200,03*	0,190,06	0,220,03
Малат мкмоль/г тканини	0,240,02	0,260,06	0,290,03	0,340,04*	0,380,01
АТФ мкмоль/г тканини	1,620,05	1,780,08	1,890,04	2,110,07*	2,800,06
АДФ мкмоль/г тканини	0,340,03	0,370,02	0,390,03	0,390,02*	0,430,04
АМФ мкмоль/г тканини	0,180,02	0,160,05	0,160,02	0,140,02*	0,140,01
СОД у.о./мг біл/хв	72,86,2	105,49,4*	198,811,6*	235,918,0*	220,816,8
Каталаза мкат/мг біл/хв	2,600,31	5,340,28*	6,000,34*	6,370,21*	6,160,48
ГПР мкм/мг біл/хв	41,74,3	57,76,6*	61,57,0*	71,59,1*	69,17,2
токоферол мкм/г тканини	3,240,34	3,910,27*	3,980,11*	4,150,29*	4,730,22
ДК мкмоль/г тканини	3,000,14	2,220,11*	2,000,09*	1,610,13*	1,320,07
ТК мкмоль/г тканини	1,810,01	0,700,02*	0,650,01*	0,620,05*	0,460,01
МДА мкмоль/г тканини	0,940,04	0,740,03*	0,700,06*	0,630,07*	0,610,05

Примітка: * - Р0.05 по відношенню до контролю.

На 18-у добу спостереження у тварин цілком відновлювався неврологічний статус. Ці зміни найбільш яскраво виражені у тварин, що одержували препарат "Ноотрил".

У тканинах головного мозку експериментальних тварин, що одержували на протязі 18 діб ноотрил, спостерігалося подальше посилення проліферації астроцитів, зменшення явищ периваскулярної деструкції. Позитивні зміни морфологічної картини при застосуванні пірацетаму і тіотриазоліну були менш виражені.

Подібний механізм посилення репаративних процесів у ішемізованому головному мозку характерний для багатьох ноотропних препаратів, зокрема для пірацетаму [Р.У. Островская, 1982; А. Ярош, 2002].

При введенні кролям таблеток "Ноотрил" максимально високі концентрації тіотриазоліну і пірацетаму спостерігаються через 60 хвилин, причому циркуляція їх у крові була більш пролонгована, ніж при пероральному введенні розчину цих речовин.

Абсолютна біодоступність тіотриазоліну і пірацетаму у складі таблеток "Ноотрил" складає 51,2% і 87,9% відповідно. При пероральному введенні розчину тіотриазоліну тільки 1/4 частина дози, яка вводилася, досягала системного кровотоку, інша частина не всмоктується і виводитися з калом. Введення тіотриазоліну у складі таблеток "Ноотрил" підвищує його біодоступність на 84,6% у порівнянні з пероральним введенням його водного розчину.

Досить висока біодоступність пірацетаму, що входить до складу таблеток "Ноотрил", свідчить про практично повну усмоктуваність пірацетаму з запропонованої лікарської форми і надходження його в системний кровотік. За 6 годин екскретуєтся 56,2% тіотриазоліну, який вводився в таблетках "Ноотрил", від усієї кількості, яка виділяється за добу. За 12 годин екскретуєтся 64,0% пірацетаму, який вводився в таблетках "Ноотрил", від усієї кількості, яка виділилася за добу. Екскреція тіотриазоліну і пірацетаму, який вводився перорально і внутрішньовенно у вигляді водних розчинів, також максимальна в ці строки.

Загальні висновки

У дисертації наведено теоретичне узагальнення експериментальних даних про антиоксидантні властивості та механізм дії похідних 1,2,4-триазолу і хіназоліну, запропоновано нове вирішення наукової проблеми пошуку лікарських засобів для лікування мозкових інсультів, що визначається створенням нового преперату "Ноотрил" ноотропної і церебропротективної дії.

Розроблені підходи до первинного скринінгу фізіологічно активних сполук на антиоксидантну активність в дослідах in vitro (ферментативне та неферментативне ініціювання ПОЛ, інгібування накопичення активних форм кисню).

Оклюзія загальних сонних артерій та введення аутокрові у ділянку внутрішньої капсули викликають ряд порушень метаболізму мозкової тканини (дискоординація в циклі Кребса, активація анаеробного гліколізу, зниження продукції АТФ), що приводить до активації вільнорадикального окислення - однієї з основних ланок патогенезу ГПМК. Тому ці експериментальні моделі можуть бути використані для дослідження антиоксидантної та протиішемічної активності вивчаємих сполук.

В дослідах in vitro 76 сполук, які є похідними 1,2,4-триазолу, встановлено, що 66 проявляють антиоксидантну активність при ферментативному ініціюванні ПОЛ, із них 28 за силою ефекту перевершують унітіол і метіонін, 69 проявляють активність при неферментативному ініціюванні ПОЛ, із них 52 перевершують за силою дії дибунол і -токоферол, 68 сполук інгібують утворення супероксидрадикала, 34 із них перевершують ефект сечовини.

Серед 44 сполук, які є похідними хіназоліну, 43 проявляють антиоксидантну активність в дослідах in vitro при ферментативному ініціюванні ПОЛ, з них 30 перевершують за силою дії унітіол і сечовину, 44 проявляють антиоксидантну активність при неферментативному ініціюванні ПОЛ, 36 з них перевершують ефект дибунолу і -токоферолу, всі сполуки активні по відношенню до супероксидрадикалу, з них 20 за силою дії перевершують сечовину.

Встановлено, що АОА похідних 1,2,4-триазолу і хіназоліну визначається наявністю структурних фрагментів (тіольний, гідроксильний, тіоалкільний, карбоксалкільний, карбоксалкілтіольний, карбоксариламіновий, гідразиновий, азаметиновий та ін.), для яких характерні окисно-відновні, комплексоутворюючі та кислотно-основні властивості, а також впливом замісників (алкільний, алкіларильний та ін.) на ліпофільність молекули.

З 23 досліджуваних сполук похідних 1,2,4-триазолу, 18 проявляють антиоксидантну та протиішемічну активність при однобічній перев'язці загальної сонної артерії тварин, перевищуючи за силою дії еталони порівняння - дибунол, -токоферол та пірацетам.

Похідні хіназоліну (6 сполук) проявляють антиоксидантну і протиішемічну активність при однобічній перев'язці загальної сонної артерії тварин, перевищуючи за силою дії ефект дибунолу і пірацетаму.

Похідні 1,2,4-триазолу і хіназоліну (1.2; 2.16; 4.39; 5.3) проявляють виражену антиоксидантну і протиішемічну дію в умовах експериментальної ішемії-реперфузії головного мозку, перевищуючи ефект пірацетаму.

В основі механізму антиоксидантної дії похідних 1,2,4-триазолу лежить здатність попереджати утворення активних форм кисню шляхом відновлення процесів біоенергетики і реактивації антиоксидантної системи, а похідних хіназоліну - їх власний антирадикальний ефект.

Інтракаротидне введення похідних 1,2,4-триазолу і хіназоліну (1.2; 2.16; 4.39; 5.3) в складі інфузійних розчинів підвищує ефективність експериментальної терапії в період ішемії головного мозку.

Помірна оксигенація інфузійних розчинів, що вміщують антиоксиданти (1.2; 2.16; 4.39; 5.3), підсилює їх лікувальну дію в умовах ішемії.

Комбінування пірацетаму і тіотриазоліну в співвідношенні 1:4 приводить до потенціювання їх антиоксидантних і протиішемічних властивостей, що з'явилося експериментальним обґрунтуванням для створення препарату "Ноотрил".

“Ноотрил” у дозі 250,0 мг/кг проявляє антиамнестичну дію, підвищує показники короткочасної і довгострокової пам'яті та активує орієнтовно-дослідницьку поведінку тварин, при цьому по силі ноотропної дії препарат “Ноотрил” перевершує ефективність пірацетаму.

Призначення препарату “Ноотрил” у дозі 250,0 мг/кг перорально тваринам з експериментальним порушенням мозкового кровообігу і крововиливом у внутрішню капсулу дозволяє досягти значного протиішемічного ефекту, знижуючи при цьому рівень смертності в 2-3 рази і сприяючи більш швидкому відновленню неврологічної симптоматики.

Застосування препарату в умовах експериментального порушенням мозкового кровообігу і крововиливу у внутрішню капсулу поліпшує трофіку ішемізованих нейроцитів, нормалізує біоенергетичні процеси (гліколіз, окиснення в циклі Кребса, енергетичний фонд), викликає посилення сателітозу, а також знижує активність вільно-радикальних процесів і реактивує антиоксидантну систему ферментів.

Практичні рекомендації

Для цілеспрямованого виявлення речовин з антиоксидантною активністю доцільно використовувати методи in vitro, в основі яких лежать ферментативні та неферментативні засоби ініціювання вільнорадикальних процесів, а також інгібіювання супероксидрадикалу.

Доцільним є використання експериментальних моделей ГПМК, які викликані однобічною перев'язкою загальної сонної артерії та введенням аутокрові у внутрішню капсулу головного мозку для вивчення антиоксидантної та протиішемічної дії синтезованих сполук.

Рекомендується використовувати комбінований препарат “Ноотрил” як ноотропний і церебропротективний засіб у гострий і відновний період ішемічних та геморагічних інсультів.

основний зміст дисертації викладено в публікаціях

Антиоксидантна і протимікробна активність іліденгідразидів (3,4-дигідро-4-оксохіназоліл-3)--пропіонової кислоти /С.І.Коваленко, Р.С. Синяк, І.А.Мазур, І.Ф.Бєленічев, П.М.Стеблюк // Фармац. журн. - 1992. - №5. - С. 38-40. (Особливий внесок здобувача: вивчення антиоксидантної активності, аналіз та узагальнення результатів, участь у написанні статті).

Антиоксидантная активность нового производного 4-гидразинохиназолина при экспериментальной гипоксии головного мозга / В.В.Дунаев, И.Ф.Беленичев, С.И.Коваленко, И.А.Мазур, Р.С.Синяк, И.Н.Башкин, В.С.Тишкин, В.А.Визир// Украинский биохимический журнал. - 1993. - Т.65, №3. - С.118-120. (Особистий внесок здобувача: вивчення антиоксидантної та протиішемічної активності, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Медикаментозная защита головного мозга при выполнении операций на плечеголовных артериях // В.Н.Клименко, И.Ф.Беленичев, И.Н.Башкин, В.А.Шаврин, В.А.Визир, М.М.Гуйтур // Клинич. хирургия. - 1993. - №7-8. - С.14-17. (Особистий внесок здобувача: вивчення антиоксидантної та протиішемічної активності, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Медикаментозна защита головного мозга при моделируемой ишемии и реперфузии / В.Н.Клименко, И.Ф. Беленичев, И.Н.Башкин, С.И. Коваленко, Р.С.Синяк, В.А.Визир, А.Г.Петренко // Клинич. хирургия. - 1993. - №12. - С.50-52. (Особистий внесок здобувача: вивчення антиоксидантної та протиішемічної активності, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Антиоксидантна активність похідних (3,4-дигідрохіназоліл-3-он-4)-карбонових кислот / І.А.Мазур, В.В.Дунаєв, Р.С.Синяк, С.І. Коваленко, І.Ф. Бєленічев, В.І.Носаченко, Н.В.Соколова, Д.В.Іванова // Фармац. журн. - 1995. - №1. - С. 80-82. (Особистий внесок здобувача: вивчення антиоксидантної активності, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Синтез і властивості похідних (3,4-дигідрохіназолон-4-іл-3)--пропіонової кислоти / І.А.Мазур, С.І.Коваленко, І.Ф.Бєленічев, Р.С. Синяк, Н.С. Луценко, Г.Л.Літінська, Г.Г.Берест // Вісник фармації. - 1995. - №3-4. - С. 29-34. (Особистий внесок здобувача: вивчення антиоксидантної та адреноблокуючої активності, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Комплексная оценка антиоксидантной активности ин витро производных (3,4-дигидрохиназолон-4-ил-3)-,-карбоновых кислот / И.Ф. Беленичев, С.И. Коваленко, И.А. Мазур, Р.С.Синяк, Д.А.Тараненко // Фармаком. - 1995. - №5-6. - С.40-43. (Особистий внесок здобувача: розробка методів та вивчення антиоксидантної активності, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Изучение влияния производных 4(3Н)-хиназолона на изолированную матку / В.Н.Фаворитов, С.И.Коваленко, В.В.Дунаев, И.Ф. Беленичев, И.А. Мазур, Р.С.Синяк, Г.Г.Берест // Фармаком. - 1995. - №11-12. - С.15-17. (Особистий внесок здобувача: вивчення адреноблокуючої та утеротонічної активності, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Антирадикальная и антиокислительная активность соединений производных 1,2,4-триазола и хиназолина при ишемии головного мозга /В.В.Дунаев, И.Ф.Беленичев, С.И.Коваленко, И.Н.Башкин, Н.А. Авраменко, И.А.Мазур, Е.Г.Кныш, В.С.Тишкин// Украинский биохимический журнал. - 1996. - Т.68, №1. - С.100-104. (Особистий внесок здобувача: модифікація методу оцінки антирадикальної та антиоксидантної активності іn vitro, вивчення антиоксидантної активності, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Дослідження антиоксидантних властивостей у ряду похідних 3-метил-1,2,4-триазоліл-4-аміно-5-тіонів в умовах моделювання ішемічних пошкодженнь тканин головного мозку / М.О.Авраменко, І.Ф.Бєленічев, Н.О. Нестерова, І.А.Мазур, А.В.Гончаров, Д.В.Биковець // Акт. питання фармац. та мед. наукі і практ. - Запоріжжя, 1997. - Випуск 1. - С.162-165. (Особистий внесок здобувача: вивчення антиоксидантної та протиішемічної активності на експериментальної моделі ішемії головного мозку, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Пошук біологічно-активних сполук у ряду похідних 3-алкіл-4-аміно-5-тіо-1,2,4-триазолу / М.О.Авраменко, Н.О.Нестерова, І.А.Мазур, І.Ф. Бєленічев, Л.Г.Черковська // Акт. питання фармац. та мед. наукі і практ. - Запоріжжя, 1997. - Випуск 1. - С.13-16. (Особистий внесок здобувача: вивчення антиоксидантної та протиішемічної активності на експериментальної моделі ішемії головного мозку, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Синтез, фізико-хімічні та біологічні властивості 3-алкіл(бензил)-8-нітро-4(3Н)-хіназолонів / С.І.Коваленко, І.А.Мазур, Р.С.Синяк, І.Ф.Бєленічев, О.О. Портна, П.М.Стеблюк, Г.Г.Берест// Фармац. журн. - 1997. - №6. - С.58-61. (Особистий внесок здобувача: вивчення антиоксидантної активності, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Консервация почек бесперфузионным методом с использованием раствора Б-2 /И.Ф. Беленичев, В.А.Дмитряков // Вестник проблем биологии и медицины. - 1997. - №27. - С.117-122. (Особистий внесок здобувача: розробка розчину з вмістом антиоксидантів, планування експерименту, проведення біохімічних досліджень у тканинах нирок та плазмі крові, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Поиск веществ с антиоксидантной активностью среди производных 2-R¹-6-R²-(3H)-хиназолон-4-ил-3--карбоновых кислот / И.Ф. Беленичев, С.И. Коваленко, И.А.Мазур, Р.С.Синяк, А.Ф.Власенко// Актуальні питання фармацевтичної та медичної науки і практики. - Запоріжжя, 1998. - Випуск 2. - Т.1. - С. 34-41. (Особистий внесок здобувача: вивчення антиоксидантної активності, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Бєленічев І.Ф. Дослідження церебропротективних властивостей деяких похідних 3-метил-1,2,4-триазоліл-5-тіокарбонових кислот за умов моделювання ішемічного пошкодження головного мозку // Одеський мед. журнал. - 1998. - №4(48). - С.5-9.

Беленичев І.Ф. Фармакокоррекция патобиохимических нарушений мозговой ткани в период моделирования острой ишемии и реперфузии мозговой ткани некоторыми производными 1,2,4-триазола // Акт. питання фармац. та мед. науки і практ. - Запоріжжя, 1998. - Випуск 2. - Т.ІІ. - С.10-16.

Беленичев І.Ф. Особенности патохимических изменений и активности свободно-радикальных процессов в тканях головного мозга при моделировании острых нарушений мозгового кровообращения // Акт. питання фармац. та мед. науки і практ. - Запоріжжя, 1998. - Випуск 2. - Т.ІІ. - С.16-19.

Бєленічев І.Ф. Фармакокорекція гіпоксичних станів головного мозку інфузійним розчином “МБ”, що містить антиоксиданти, під час моделювання гострого порушення мозкового кровообігу // Акт. питання фармац. та мед. науки і практ. - Запоріжжя, 1999. - Випуск 3. - С.76-83.

Бєленічев І.Ф. Порівняльна оцінка антиоксидантної і протиішемічної активності тіотриазоліну і пірацетаму за умов експериментальної ішемії головного мозку // Одеський мед. журнал. - 1999. - 4(54). - С.28-31.

Бєленічев І.Ф. Пошук речовин з антиоксидантною активністю в ряді галогенідів 1-(1-карбоксалкіл)-4-бензиліденаміно-1,2,4-триазолію в дослідженнях in vitro // Проблеми військової охорони здоров'я. - Київ,1999. - Випуск 5. - С.507-515.

Гостра токсичність, антиоксидантна і ранозагоююча активність похідних хіназоліну та хіноліну /І.Ф.Бєленічев, С.І.Коваленко, О.А.Бражко, О.В. Карпенко, В.Р.Стець, Р.С.Синяк // Вісник Запорізького держ. університету. - 2001. - №1. - С.143-147. (Особистий внесок здобувача: вивчення антиоксидантної активності, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Дослідження біологічної дії 4-тіопохідних хіноліну /О.А.Бражко, Л.О. Омельянчик, І.Ф.Бєленічев, І.С.Шестакова, М.П.Завгородній // Мед. хімія. - 2001. - Т.3, №1. - С.20-23. (Особистий внесок здобувача: вивчення антиоксидантної активності, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Дослідження антиоксидантної дії хіназоліл-4-(хіноліл-4)-тіо-()-карбонових кислот та їх похідних в умовах ініціювання вільно-радикальних процесів in vitro та моделюванні ішемії головного мозку./ І.Ф.Бєленічев, С.І.Коваленко, О.А.Бражко, О.В.Карпенко //Ліки. - 2001. - №5-6. - С.28-33. (Особистий внесок здобувача: вивчення антиоксидантної та протиішемічної активності, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Бєленічев І.Ф., Коваленко С.І., Дунаев В.В. Антиоксиданти: сучасне уявлення, перспективи створення // Ліки. - 2002. - № 1. - С.25-29. (Особистий внесок здобувача: написано розділ по сучасним антиоксидантним препаратам, природним антиоксидантам, запропонована класифікація антиоксидантних засобів).

Порівняльна оцінка антиоксидантної і протиішемічної дії тіотриазоліну і пірацетаму та їх комбінації за умов моделювання експериментальної ішемії головного мозку. / Бєленічев І.Ф., Мазур І.А., Волошин М.А., Стець В.Р., Коваленко С.І., І.В. Сідорова // Експериментальна фізіологія та біохімія. - 2001. - №4. - С.59-65. (Особистий внесок здобувача: вивчення антиоксидантної та протиішемічної активності, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Експериментальне дослідження ноотропної активності таблеток “Ноотрил” / І.Ф. Бєленічев, В.Р. Стець, І.А. Мазур, Б.С. Зіменківський, Н.А. Волошин, С.І. Коваленко, В.О. Дмитряков // Експериментальна фізіологія та біохімія. - 2002. - №1. - C.7-11. (Особистий внесок здобувача: вивчення антиамнестичної та ноотропної активності, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Вивчення біодоступності і фармакокінетики таблеток "Ноотрил"/ І.Ф. Бєленічев, Л.І.Кучеренко, Б.С. Зіменківський, С.І. Коваленко, І.В. Сідорова // Експериментальна фізіологія та біохімія. - 2002. - №2. - С. 24-29. (Особистий внесок здобувача: вивчення основних показників фармакокінетики, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Некоторые аспекты противоишемического действия тиотриазолина в условиях экспериментального нарушения мозгового кровообращения / И.Ф. Беленичев, И.А. Мазур, С.И. Коваленко // Актуальні питання фармацевтичної та медичної науки і практики. - Запоріжжя, 2002. - Випуск VIII. - С. 43-48. (Особистий внесок здобувача: вивчення антиоксидантної та протиішемічної активності, аналіз та узагальнення результатів, приймав участь у написанні статті).

Антиоксидантна система захисту організму / І.Ф. Бєленічев, Ю.І. Губський, Е.Л. Левицький, С.І. Коваленко, О.М.Марченко // Современные проблемы токсикологии. - 2002. - №3. - С.24-31. (Особистий внесок здобувача: написано розділ про роль ферментативної антиоксидантної системи, запропонована її класифікація).

Бєленічев І.Ф. Дослідження антиоксидантної та протиішемічної активності похідних 1-алкіл-(карбоксиалкіл)-4-бензиліденаміно-1,2,4-триазолію броміду в умовах експериментальної ішемії головного мозку // Вісник Запорізького держ. університету. - 2002. - №3. - С.88-94.

Патент на изобретение № 2140152 Российской Федерации С1 А01 N1/02. Консервирующий раствор “Б-2” для трансплантантов / Мазур И.А., Беленичев И.Ф., Дмитряков В.А., Георгиевский Г.В. (ИА). - №97103878/14; Заявлено 13.03.97; Опубл. 27.10.99. бюл. №30. (Особистий внесок здобувача: розробка лікарської форми, вивчення антиоксидантної, протиішемічної активності, аналіз та узагальнення результатів, оформлення патенту).

Патент 33730 А України, МПК А 61К 31/00. Інфузійний розчин для медикаментозної корекції патобіохімічних порушень при ішемічному і реперфузійному ураженнях / Бєленічев І.Ф., Дмитряков В.О. (Україна). - № 99031743; Заявл. 30.03.1999, Опубл. 15.02.2001. (Особистий внесок здобувача: розробка лікарської форми, вивчення антиоксидантної, протиішемічної активності, аналіз та узагальнення результатів, оформлення патенту).

Патент 28643 А України, МПК А 61К 31/41. Інфузійний розчин "МБ" для медикаментозного захисту органів та тканин від ішемічного та реперфузійного пошкодження / Мазур І.А., Бєленічев І.Ф., Дмитряков В.О., Геогрієвський Г.В., Гуйтур М.М., Кліменко А.В., Шумейко Н.М. (Україна). - № 97074033; Заявл. 14.01.1998, Опубл. 29.12.1999. Бюл. №8. (Особистий внесок здобувача: розробка лікарської форми, вивчення антиоксидантної, протиішемічної активності, аналіз та узагальнення результатів, оформлення патенту).

Методи оцінки антиоксидантної активності речовин при ініціюванні вільно-радикальних процесів у дослідах in vitro / Губський Ю.І., Дунаєв В.В., Бєленічев І.Ф., Левицький Е.Л., Літвінова Н.В., Коваленко С.І., Бухтіярова Н.В., Афанасенко О.В. // Метод. реком. - Київ: Державний Фармакологічний центр МОЗ України, 2002. - 26 с. (Особистий внесок здобувача: удосконалення методик оцінки антиоксидантної активності, патентний пошук, написано розділ № 5,6).

АННОТАЦІЇ

Бєленічев І.Ф. Дослідження антиоксидантних властивостей в ряду похідних п'яти- та шестичленних азагетероциклів і визначення їх ефективності при ішемії головного мозку.- Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня доктора біологічних наук за спеціальністю 14.03.05 - фармакологія. - Інститут фармакології і токсикології АМН України. - Київ, 2003.

Дисертацію присвячено дослідженню антиоксидантних властивостей 120 сполук - похідних 1,2,4-триазолу і хіназоліну як у дослідах in vitro при ферментативному та неферментативному ініціюванні ВРО і по інгібіюванню супероксидрадикалу, так і в умовах моделювання експериментальної ішемії головного мозку. Розроблено новий підхід до методів оцінки антиоксидантних властивостей речовин.

У механізмі антиоксидантного дії досліджуваних сполук лежить їх здатність попереджати утворення активних форм кисню шляхом відновлення основних ланок енергетичного обміну і активувати ферменти антиоксидантного захисту, а також власний антирадикальний ефект.

Виявлено деяку закономірність "структура-дія" в ряду похідних 1,2,4-триазолу і хіназоліну, визначені основні структурні фрагменти молекул, що визначають наявність і силу антиоксидантної дії.

Розроблено комбінований препарат "Ноотрил", який проявляє ноотропну і церебропротективну дію.

Ключові слова: 1,2,4-триазол, хіназолін, антиоксидантна активність, експериментальна ішемія мозку, методи дослідження, препарат "Ноотрил".

АННОТАЦИЯ

Беленичев И.Ф. Исследование антиоксидантных свойств в ряде производных пяти- и шестичленных азагетероциклов и определение их эффективности при ишемии головного мозга. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук по специальности 14.03.05 - фармакология. - Институт фармакологии и токсикологии АМН Украины. - Киев, 2003.

Диссертационная работа посвящена исследованию антиоксидантных свойств 120 соединений - производных 3-метил-1,2,4-триазолил-5-тиокарбоновых кислот, 3-пропил-1,2,4-триазолил-5-тионов, 1-алкил(карбоксалкил)-4-бензилиденамино-1,2,4-триазолия бромида, 1-алкил-1,2,4-триазолил-5-тионов, 4(3Н)-хиназолона, 6-нитро-4(3Н)-хиназолона и 4-аминохиназолина как в опытах in vitro при ферментативном и неферментативном инициировании СРО и по ингибированию супероксидрадикала, так и в условиях целостного организма при экспериментальной ишемии головного мозга. Выявлены соединения, по силе антиоксидантного и противоишемического действия превосходящие референс-препараты.

Производные 3-метил-1,2,4-триазолил-5-тиокарбоновых кислот, 1-алкил-(карбоксалкил)-4-бензилиденамино-1,2,4-триазолия бромида и производные хиназолина относятся к классу малотоксичных или практически нетоксичных соединений при их внутрибрюшинном введении.

Установлено, что исследуемые производные 1,2,4-триазола и хиназолина реализуют свой антиоксидантный эффект на инициальных этапах свободнорадикального-перекисного окисления липидов, реактивируют антирадикальные и антиперекисные ферменты, защищают запасы эндогенных антиоксидантов. В механизме антиоксидантного действия данных соединений лежит их собственный антирадикальный эффект, а также способность тормозить основные пути образования АФК за счет восстановления основных звеньев энергетического обмена.

Выявлены некоторые закономерности “структура-действие”, определены функциональные группы, которые обуславливают антиоксидантную и противоишемическую активности. Установлено, что АОА производных 1,2,4-триазола и хиназолина определяется следующими структурными фрагментами: тиольным, гидроксильным, тиоалкильным, карбоксалкильным, карбоксиалкилтиольным, карбоксиариламиновым, гидразиновым, азаметиновым и другими, для которых характерны окислительно-восстановительные, комплексообразующие, кислотно-основные свойства, а также влиянием заместителей (алкильный, алкиларильный и др.) на липофильность молекулы.

Выявлено противоишемическое и антиоксидантное действие производных 1,2,4-триазола и хиназолина в условиях моделирования ишемии-реперфузии головного мозга. По силе противошемического действия в условиях ишемии-реперфузии головного мозга исследуемые соединения достоверно превышали пирацетам.

Установлено, что интракаротидная инфузия растворов производных 1,2,4-триазола и хиназолина приводила к усилению эффективности экспериментальной противоишемической терапии за счет торможения реакций СРО, повышения активности ферментов АО-защиты, энергетического статуса нейроцитов, снижения явления периваскулярного и перицеллюлярного отеков, уменьшения количества измененных нейронов, активации глиального саттелитоза. Оксигенация инфузионных растворов усиливала терапевтическое действие за счет интенсификации аэробной продукции АТФ и повышения антиоксидантного статуса головного мозга.

Для повышения эффективности экспериментальной терапии ОНМК, был обоснован состав и применения инфузионного раствора комбинации тиотриазолина, пирацетама и натрия сукцината (рабочее название "МБ"). Интракаротидное введения раствора "МБ" собакам с ОНМК восстанавливало основные звенья энергообмена головного мозга, повышало его антиоксидантный статус.

Полученные результаты послужили обоснованием для создания препарата, в котором бы объединялись антиоксидантные, противоишемические и ноотропные свойства. Комбинация тиотриазолина и пирацетама в экспериментально обоснованном соотношении явились основой для создания препарата "Ноотрил", таблетки покрытые оболочкой 0,25 г (АО "Галичфарм" и НПО "Фарматрон").

Препарат "Ноотрил" предупреждает развитие ретроградной и антероградной амнезии УРПИ, активирует ориентировочно-исследовательское поведение в условиях открытого поля, улучшает показатели обучения и памяти животных и по силе ноотропного действия превосходит пирацетам.

Назначение ноотрила крысам с ОНМК и внутримозговым кровоизлиянием приводило к снижению смертности в 2-3 раза, нормализации показателей углеводно-энергетического обмена, торможению реакций СРО, реактивации АО-системы в тканях мозга и снижению гиперферментемии на 4-е сутки эксперимента. Препарат “Ноотрил” влияет на процессы аэробного и анаэробного окисления углеводов и увеличивает энергетический фонд клеток, достоверно повышает активность СОД, каталазы, ГПР, сохраняет затраты -токоферола и снижает накопления в мозговой ткани ДК, ТК и МДА. Применение ноотрила в острый период ишемии головного мозга усиливало активацию периневронального саттелитоза.

Назначение ноотрила животным с ОНМК в реабилитационный период приводило к восстановлению показателей углеводно-энергетического обмена, функциональной активности ферментов АО-системы и снижению продуктов СРО. Так, у животных, которые получали препарат "Ноотрил" к 18 суткам наблюдалось более полное восстановление неврологического и соматического статуса по сравнению с референс-препаратами.

Ключевые слова: 1,2,4-триазол, хиназолин, антиоксидантная активность, экспериментальная ишемия мозга, препарат "Ноотрил", методы исследования.

ANNOTATION

Belenichev I.F. The study antioxidant properties in series derivative to five- and hexatomic аzoheterocycles and definition of their efficiency at an ischemia of a brain.- Manuscript.

The dissertation for the scientific degree of the doctor of biological sciences in the speciality 14.03.05 - Pharmacology. - Institute of pharmacology and toxicology АМS of Ukraine. - Kiev, 2003.

The dissertation is devoted to research antioxidant properties 120 substances - derivatives of 1,2,4-triazole and quinazoline as in experiences in vitro at enzymatic and non-enzymatic initiation a FRO and on inhibition superoxidradical, and under conditions of modelling experimental ishemia of a head brain. The new approach to methods of estimation antioxidant properties is developed.

In the mechanism antioxidant action of researched connections their ability lays to inhibit formation of the active forms oxygen, by restoration of the basic parts of a power exchange and to activate enzymes antioxidant protection, and own antiradical effect.

Some law "structure - action" in a line derivative of 1,2,4-triazole and quinazoline, certain basic structural fragments of molecules are revealed which define presence and force antioxidant action.

The combined drug "Nootril" with nootropic and cerebroprotective by action is developed.

Key words: 1,2,4- triazole, quinazoline, аntioxydant activity, experimental ischemia of a brain, drug "Nootril", methods of research.

Підписано до друку 18.05.2003. Гарнітура Times New Roman Cyr

Папір друкарський. Формат 6084 1/16. Умовн. друк. арк. 1.7.

Наклад - 100 прим. Замовлення № 1994.

Надруковано з оригінал-макету в типографії

Запорізького державного медичного університету

м.Запоріжжя, пр. Маяковського 26

Размещено на Allbest.ru

...