Токсикологічна характеристика дельтаметрину у формі децис форте

4. Інтенсивність цитотоксичної дії децис форте залежить від його концентрації в ростовому середовищі і характеризується збільшенням мітотичної активності культури клітин нирки великої рогатої худоби МDВК. Патологія ділення клітин виявляється в пошкодженні мітотичного аппарату К-мітозами та хромосомного апарату клітин - хромосомами, що злиплися, утворенням „мікроядер”, що вказує на прояв мутагенних властивостей препарату.

5. Одноразове пероральне введення курям децис форте в токсичних дозах (50 та 100 мг/кг) викликає прояв симптомів, які вказують на його нейротоксичні властивості. За цих умов спостерігаються гіперактивність у поведінці, мотання головою, неадекватна реакція на зовнішні подразники, судоми, підвищення спонтанної активності, некоординованість рухів. Патологоморфологічні дослідження внутрішніх органів і тканин у курей за одноразового введення піретроїду в дозі 50 мг/кг значних структурних і функціональних відхилень не виявила, а 100 мг/кг - викликала ознаки десквамаційного гастроентериту, рексису клітин ферментативних фолікулів селезінки та декомпенсацію гепатоцитів печінки.

Тривале надходження пестициду з кормом упродовж 60 діб у курей істотних клінічних проявів не викликало. Водночас, патоморфологічні дослідження виявили ознаки руйнування епітеліальних клітин слизового шару та дезінтеграцію залоз, у кишковику десквамацію епітелію та руйнування залоз, лізис і підвищену плазматизацію клітин у селезінці, декомпенсацію клітин печінки.

6. За одноразового перорального введення децис форте курям у дозах 50 і 100 мг/кг максимальні залишкові кількості його визначали: на першу добу в м'язовому шлунку (0,25 і 0,37 мг/кг, відповідно до дози) і дванадцятипалій кишці (0,08 і 0,16 мг/кг), а також печінці (0,27 у групі з дозою 100 мг/кг), мозку, нирках (по 0,13 мг/кг) і легенях (0,021 мг/кг у дозі 50 мг/кг). Через три доби - у серці (0,011 і 0,38 мг/кг), легенях (0,16 мг/кг у групі з дозою 100 мг/кг), селезінці (0,11 мг/кг), червоних (0,075 і 0,083 мг/кг) і білих (0,038 мг/кг) м'язах, нирках (0,03 і 0,04 мг/кг), а також внутрішньому жирі (0,03 і 0,034 мг/кг). Через чотирнадцять діб у першій групі залишкові кількості визначали тільки у внутрішньому жирі, а в другій групі в мозку, нирках і внутрішньому жирі. У крові залишкових кількостей дельтаметрину не встановлено.

7. Одноразове пероральне введення курям токсичних доз децис форте викликає еритропенію (в середньому на 8 - 13 %), зниження показників обміну вуглеводів (глюкози на 18 - 21 % та піровиноградної кислоти на 30 - 44 %), активності АТФ-ази (на 16 - 36 %), активності ЛФ (на 18 - 32 %) на тлі відносно стабільної активності АЛТ і АСТ. Статистично вірогідні зміни активності ферментів функціонального стану печінки (АЛТ, АСТ, ЛФ) підтверджують ушкодження її клітин унаслідок гепатотоксичних властивостей піретроїду.

8. За тривалого згодовування децис форте в дозах 5 та 20 мг/кг корму найбільша концентрація інсектициду на шестидесяту добу визначається у внутрішньому жирі - 0,613 і 1,25 мг/кг та нирках - 0,165 і 0,29 мг/кг відповідно. В інших зразках тканин і органів у характері розподілу простежується тенденція залежності від дози препарату. Залишкові кількості розподілялися так: м'язовий шлунок (0,029 і 0,226 мг/кг), дванадцятипала кишка (0,029 і 0,225 мг/кг), серце (0,039 і 0,27 мг/кг), печінка (0,02 і 0,214 мг/кг) відповідно. Залишки препарату в червоних м'язах (0,197 мг/кг), мозку й селезінці (по 0,07 мг/кг), білих м'язах (0,034 мг/кг) визначали тільки в групі з дозою 20 мг/кг корму. У крові дельтаметрин не ідентифікувався.

9. Децис форте в дозах 5 і 20 мг/кг з кормом упродовж 60 діб впливав на гематологічні показники крові курей. Зокрема, рівень гемоглобіну в групі, яка отримувала 5 мг/кг, вірогідно знизився (на 16,3 %), а в групі, яка отримувала 20 мг/кг, через 60 діб зростав (на 18,1 %). Кількість еритроцитів у групі, яка отримувала 5 мг/кг, через шістдесят діб знизилася на 12,5 %.. Вірогідно підвищився вміст глюкози (на першу добу досліджень в обох групах на 23 %), а рівні ПВК та молочної кислоти були високими упродовж всього досліду в другій групі.

За відносно стабільних показників активності АЛТ і АСТ у сироватці крові курей активність ЛФ у групі, яка отримувала препарат у дозі 5 мг/кг, знижувалася на 30 добу на 23 %, а в групі, яка отримувала препарат у дозі 20 мг/кг - знижена упродовж усього досліду. Активність АТФ-ази вірогідно пригнічувалася на 30 та 60 доби в групі, яка отримувала 5 мг/кг. При визначенні активності амінотрансфераз у печінці було встановлено зниження показників АЛТ у середньому на 8 - 11 % та підвищення АСТ на 3 - 7 %. Виявлено статистично вірогідне пригнічення активності ЛФ, особливо в нирках та дванадцятипалій кишці.

ПРОПОЗИЦІЇ ВИРОБНИЦТВУ

1. „Максимально допустимі рівні (МДР) синтетичних піретроїдів (перметрин, циперметрин, дельтаметрин, цигалотрин, лямбда-цигалотрин, февалерат, флувалінат) в кормах для сільськогосподарських тварин”. Затверджені Державним департаментом ветеринарної медицини МАП України, наказ № 15-14/ 92 від 18 квітня 2000 року).

2. „Методичні вказівки щодо визначення дельтаметрину в молоці способом тонкошарової хроматографії”. Розглянуті та ухвалені на засіданні методичної комісії ННЦ „Інститут експериментальної і клінічної ветеринарної медицини”(протокол № 3 від 29.03.2007 року) та направлені до розгляду в Державний департамент ветеринарної медицини Міністерства аграрної політики України.

3. При підтвердженні діагнозу отруєння децис форте необхідно враховувати клінічні симптоми та патолого-анатомічні зміни внутрішніх органів. Для проведення діагностичних хіміко-токсикологічних досліджень рекомендуємо відбирати: м'язовий шлунок, проксимальну ділянку дванадцятипалої кишки, внутрішній жир, мозок, печінку, нирки. Терміни відбору проб повинні не перевищувати 2 - 4 діб з моменту передбачуваного контакту з інсектицидом.

4. Результати досліджень рекомендуємо включати в програму дисципліни „Ветеринарна токсикологія” для викладання студентам факультетів ветеринарної медицини навчальних закладів ІІІ та ІV рівнів акредитації.

СПИСОК ПРАЦЬ, ОПУБЛІКОВАНИХ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦІЇ

1. Ярошенко М.О. Изучение токсикодинамики пороговых доз дельтаметрина в хроническом опыте на курах // Науковий вісник НАУ.- Київ, 2002.- Вип. 55.- С. 177-182.

2. Ярошенко М.О. Изучение острой токсичности “Децис Форте” для кур // Ветеринарна медицина: Міжвід. тематич. наук. зб.- Харків, 2002.- Вип.80.- С. 649-655.

3. Ярошенко М.О. Определение параметров острой токсичности дециса форте для крыс при пероральном введении // Ветеринарна медицина: Міжвід. тематич. наук. зб. - Харків, 2005. - Вип.85.-С. 1182-1187

4. Патент 18381 Україна, МПК G01N 33/02. Спосіб визначення дельтаметрину в молоці / О.О. Малінін, О.Т. Куцан, М.О. Ярошенко (Україна).- № u 2006 03833; Заявлено 07.04.2006; Опубл. 15.11.2006, Бюл. № 11.- 4 с. (Дисертант провів експериментальні дослідження і оформив заявку на патент).

5. „Максимально допустимі рівні (МДР) синтетичних піретроїдів (перметрин, циперметрин, дельтаметрин, цигалотрин, лямбда-цигалотрин, февалерат, флувалінат) в кормах для сільськогосподарських тварин”. Затверджені Державним департаментом ветеринарної медицини МАП України, наказ № 15-14/ 92 від 18 квітня 2000 року).

Ярошенко М.О. Токсикологічна характеристика дельтаметрину у формі децис форте.- Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата ветеринарних наук за спеціальністю 16.00.04 - ветеринарна фармакологія та токсикологія. - ННЦ „Інститут експериментальної і клінічної ветеринарної медицини”, Харків, 2007.

Подано результати з удосконалення та валідації методики визначення дельтаметрину в молоці способом тонкошарової хроматографії. Методика є специфічною (селективною), лінійною, межа детекції становить 3 мкг, межа визначення 0,1 мг/л. Установлено параметри гострої токсичності децис форте (12,5 % к.е.) для білих щурів за перорального введення. Вивчено цитотоксичні та мутагенні властивості дельтаметрину у формі децис форте на перещеплюваній культурі клітин нирки великої рогатої худоби MDBK. У дослідах на птиці вивчені питання токсикокінетики та токсикодинаміки зазначеного піретроїду. Встановлено, що децис форте всмоктується через травний канал, розподіляється в тканинах і органах, достатньо швидко виводиться з організму. Гістоморфологічними дослідженнями встановлено зміни структури тканин і органів тільки від дії децис форте у більших дозах.

Вивчено вплив децис форте на організм курей за одноразового введення токсичних доз та тривалого надходження з кормом. Установлені клінічні симптоми нейротоксичного ефекту та гепатотоксичні властивості інсектициду - зниження показників системи крові, обміну вуглеводів та рівня активності неспецифічних печінкових ферментів.

Ключові слова: токсикологія, дельтаметрин, децис форте, залишкові кількості, тонкошарова хроматографія, газорідинна хроматографія, токсикокінетика, токсикодинаміка.

Ярошенко М.О. Токсикологическая характеристика дельтаметрина в форме децис форте.- Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук по специальности 16.00.04 - ветеринарная фармакология и токсикология. - ННЦ „Институт экспериментальной и клинической ветеринарной медицины”, Харьков, 2007.

В диссертационной работе представлены результаты по усовершенствованию и валидации методики определения остаточных количеств дельтаметрина в молоке способом тонкослойной хроматографии, согласно требованиям стандарта „ІSO 5725-1:1994” и „Европейской инструкции относительно применения аналитических методов и интерпретации результатов ЕС 657/2002”. Установлено, что методика является специфичной (селективной), линейной, граница детекции составляет 3 мкг, граница определения - 0,1 мг/л.

Определены параметры острой токсичности децис форте (12,5 % к.э.) для белых крыс при пероральном введении. Установлено, что величина DL50 составляет 22,15±2,27 мг/кг массы тела, DL84 - 27,7 мг/кг и DL16 - 16,6 мг/кг массы тела. Клинические признаки интоксикации децис форте характеризовались общим угнетением с последующей фазой возбуждения, тахипноэ, некоординированными движениями, клонико-тоническими судорогами, саливацией, что указывает на проявление нейротоксического эффекта пиретроида. Согласно классификации ВОЗ, децис форте 12,5 % к.э. (дельтаметрин) относится к сильнодействующим токсическим соединениям.

Изучены цитотоксические и мутагенные свойства децис форте в перевиваемой культуре клеток почки крупного рогатого скота MDBK.

В опытах на птице изучены вопросы токсикокинетики и токсикодинамики пиретроида при однократном введении токсических доз и длительного поступления с кормом. Определено, что децис форте всасывается через желудочно -кишечный тракт, распределяется в тканях, органах и относительно быстро выводится из организма. Гистоморфологические исследования показали изменения структуры тканей и органов только при действии больших доз препарата. В остром опыте в группе с действием препарата в дозе 100 мг/кг массы тела установлены клинические признаки десквамационного гастроэнтерита, рексиса клеток ферментативных фолликулов селезенки, декомпенсации гепатоцитов печени. В хроническом опыте, в группе с дозой 20 мг/кг корма - хроническое воспаление желудка и кишечника, лизис и повышенная плазматизация клеток селезенки, десквамация печеночных клеток.

При однократном введении курам пиретроида в дозах 50 и 100 мг/кг массы тела проявились клинические симптомы, характеризующие нейротоксические свойства препарата.

На первые сутки пиретроид идентифицировался в желудочно-кишечном тракте, печени, мозге. Максимальные остаточные количества обнаруживали в желудочно-кишечном тракте, внутреннем жире, красных мышцах, мозге. В крови остатки дельтаметрина были ниже уровня определения метода.

В крови установили эритропению (на 8 - 13 %), снижение показателей углеводного обмена (уровней глюкозы на 18 - 21 %, пировиноградной кислоты 30 - 44 %), активности АТФ-азы (на 16 - 36 %), активности ЩФ (на 18 - 32 %). Достоверное изменение активности ферментов функционального состояния печени (АЛТ, АСТ, ЩФ) подтверждает проявление гепатотоксических свойств инсектицида.

При длительном поступлении децис форте с кормом наибольшие концентрации препарата установили на шестидесятые сутки во внутреннем жире и почках. В других органах прослеживалась дозо-зависимая тенденция распределения препарата: максимальные остаточные количества обнаруживали в мышечном желудке (0,029 и 0,226 мг/кг), двенадцатиперстной кишке (0,029 и 0,225 мг/кг), сердце (0,039 и 0,27 мг/кг), печени (0,02 и 0,214 мг/кг) соответственно. В крови остатки дельтаметрина были ниже уровня определения метода.

В группе с действием децис форте в меньшей дозе определено достоверное снижение количества гемоглобина на 16,3 %, а в большей дозе показатель увеличился на 18,1 %. Были отмечены колебания показателей углеводного обмена во второй группе. В крови на фоне относительно стабильных показателей АЛТ и АСТ, установлено понижение активности ЩФ и АТФ-азы. В печени установили снижение показателей АЛТ на 8 - 11 % и повышение АСТ на 3 - 7 %; установлено достоверное угнетение активности ЩФ.

Ключевые слова: токсикология, дельтаметрин, децис форте, остаточные количества, тонкослойная хроматография, газожидкостная хроматография, токсикокинетика, токсикодинамика.

Yaroshenko M. O. Toxicological characteristic of deltamethrin in the form of decis forte.- Manuscript.

Thesis for scientific degree of the candidate of veterinary sciences on speciality speciality 16.00.04 - veterinary pharmacology and toxicology, National Scientific Center “Institute of Experimental and Clinical Veterinary Medicine”, Kharkiv, 2007.

In the work the results on the improvement and validation of the methods of determination of deltamethrin residue in milk by the method of thin layer chromatography, according to the requirements of the standard „ISO 5725-1:1994” and „European instruction concerning application of analytical methods and interpretation of the results EC 657/2002” are presented. There was determined, that the method is specific (selective), linear, the detection border makes 3 mkg, determination border is 0,1 mg/l.

The parameters of acute toxicity of decis forte (12,5 % c.e.) for white rats at peroral application have been determined. It was set, that the value DL50 makes 22,15 mg/kg, DL84 27,7 mg/kg and DL16 16,6 mg/kg the of body weight.

Cytotoxic and mutagenic characteristics of deltametrin in the decis forte form on cattle kidney continuous cell culture MDBK have been studied. At investigation on poultry some problems of toxicokinetics and toxicodynamics of pyrethroids have been studied.

There was determined that decis forte is absorbed through gastrointestinal tract, is divided in tissues and organs and relatively quickly is removed from the organism.

Histomorphological investigations have revealed changes of tissue and organ structure only in large doses of preparation.

Influence of deсіs forte onto chicken organism at one-time introduction of toxic concentration and long-time receipt with food has been studied.

Symptoms of neurotoxic effect hepatotoxic action of insecticide - loss of blood system indicates, carbohydrates exchange and levels of nonspecific hepatic ferments - have been determined.

Key words: toxycology, deltamethrin, decis forte, residual quantities, thin-layer chromatography, gas-liquid chromatography, toxicokinetics, toxicodynamics.

Размещено на Allbest.ru