Лекарственные средства

Размещено на http://www.allbest.ru/

Содержание

Глава 1. Фармакологическое значение лекарственных средств

1.1 Фармакология Атропина сульфата

1.2 Фармакология Пилокарпина гидрохлорида

1.3 Фармакология Кодеина фосфата

1.4 Фармакология Дикаина

1.5 Фармакология Новокаина

Глава 2. Методы анализа

2.1Температура плавления

2.2 Рефрактометрия

2.3 ИК и УФ спекторофотометрия

2.4 Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)

2.5 Газожидкостная хроматография

2.6 Плоскостная хроматография

Глава 3. Качественный и количественный анализ

3.1 Атропина сульфата

3.2 Пилокарпина гидрохлорид

3.3 Кодеина фосфат

3.4 Дикаин

3.5 Новокаин

Список литературы



Глава 1. Фармакологическое значение лекарственных средств

1.1 Фармакология Атропина сульфата

По современным представлениям, атропин является экзогенным антагонистом холинорецепторов. Способность атропина связываться с холинорецепторами объясняется наличием в его структурефрагмента, роднящего его с молекулой эндогенного агониста -- ацетилхолина.

Основной фармакологической особенностью атропина является его способность блокировать м-холинорецепторы; он действует также (хотя значительно слабее) на н-холинорецепторы. Атропин относится, таким образом, к неизбирательным блокаторам м-холинорецепторов.

Блокируя м-холинорецепторы, он делает их нечувствительными к ацетилхолину, в области окончаний постганглионарных парасимпатических (холинергических) нервов. Эффекты действия атропина противоположны поэтому эффектам, наблюдающимся при возбуждении парасимпатических нервов.

Введение атропина в организм сопровождается уменьшением секреции слюнных, желудочных, бронхиальных, потовых желёз (последние получают симпатическую холинергическую иннервацию), поджелудочной железы, учащением сердечных сокращений (вследствие уменьшения тормозящего действия на сердце блуждающего нерва), понижением тонуса гладкомышечных органов (бронхи, органы брюшной полости и др.). Действие атропина выражено сильнее при повышенном тонусе блуждающего нерва.

Под влиянием атропина происходит сильное расширение зрачков. Мидриатический эффект зависит от расслабления волокон круговой мышцы радужной оболочки, которая иннервируется парасимпатическими волокнами. Одновременно с расширением зрачка в связи с нарушением оттока жидкости из камер возможно повышение внутриглазного давления. Расслабление ресничной мышцы цилиарного тела ведёт к параличу аккомодации.

Атропин проникает через гематоэнцефалический барьер и оказывает сложное влияние на ЦНС. Он оказывает центральное холинолитическое действие и вызывает у больных паркинсонизмом уменьшение дрожания и мышечного напряжения. Он, однако, недостаточно эффективен; вместе с тем его сильное влияние на периферические м-холинорецепторы приводит к ряду осложнений (сухость во рту, сердцебиение и др.), затрудняющих его длительное применение для этих целей. В больших дозах атропин стимулирует кору головного мозга и может вызвать двигательное и психическое возбуждение, сильное беспокойство, судороги, галлюцинаторные явления. В терапевтических дозах атропин возбуждает дыхание; большие дозы могут, однако, вызвать паралич дыхания.Применяют атропин при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, пилороспазме, холецистите, желчнокаменной болезни, при спазмах кишечника и мочевых путей, бронхиальной астме, для уменьшения секреции слюнных, желудочных и бронхиальных желез, при брадикардии, развившейся в результате повышения тонуса блуждающего нерва.При болях, связанных со спазмами гладкой мускулатуры, атропин часто вводят вместе с анальгезирующими средствами (анальгин, промедол, морфин и др.).В анестезиологической практике атропин применяют перед наркозом и операцией и во время операции для предупреждения бронхиоло- и ларингоспазма, ограничения секреции слюнных и бронхиальных желез и уменьшения других рефлекторныхреакций и побочных явлений, связанных с возбуждением блуждающего нерва.Применяют также атропин для рентгенологического исследования желудочно-кишечного тракта при необходимости уменьшить тонус и двигательную активность желудка и кишечника.В связи со способностью уменьшать секрецию потовых желез атропин употребляют иногда при повышенной потливости.Атропин является эффективным антидотом при отравлениях холиномиметическими и антихолинэстеразными веществами, в том числе ФОС.

1.2 Фармакология Пилокарпина гидрохлорида

Пилокарпин выделяют из листьев растений рода пилокарпус, в которых его содержание достигает 0,8 % (в расчёте на сухое вещество).Пилокарпин возбуждает периферические М холинорецепторы, вызывающие усиление секреции пищеварительных и бронхиальных желёз, резкое повышение потоотделения, сужение зрачка с одновременным уменьшением внутриглазного давления, повышение тонуса гладкой мускулатуры. Применяется при глаукоме и других заболеваниях глаз.Алкалоид, добываемый из растения Pilocarpus pennatifolius, произрастающего в Бразилии.

Стимулирует мускариновые рецепторы гладкой мускулатуры, в т.ч. радужной оболочки глаза и желез пищеварительных, бронхиальных, внешней секреции (слюнных, потовых и др.). Вызывает сокращение циркулярной (миоз) и цилиарной (спазм аккомодации) мышц.

При приеме внутрь быстро всасывается, время достижения C_max составляет около 60 мин. Метаболизируется в синапсах и плазме. T_1/2составляет 0,76 ч и возрастает пропорционально дозе. Экскретируется преимущественно почками, в моче обнаруживается в неизмененном виде и в виде метаболитов. В конъюнктивальном мешке практически не абсорбируется и не оказывает общего действия. Системы с длительным высвобождением активного компонента (глазная пленка), смачиваясь слезной жидкостью, набухают и удерживаются в нижнем конъюнктивальном своде. Высвобождение пилокарпина начинается непосредственно после контакта пленки с конъюнктивой.

При закрытоугольной глаукоме суживает зрачок, вызывает смещение радужной оболочки от угла передней камеры и способствует открытию шлеммова канала и фонтановых пространств. У больных открытоугольной глаукомой также открывает шлеммов канал и трабекулярные щели и повышает тонус цилиарной мышцы. При первичной открытоугольной глаукоме или глазной гипертензии однократное закапывание 1% раствора вызывает снижение внутриглазного давления на 25-26%. Начинается действие через 30-40 мин, достигает максимума через 1,5-2 ч и продолжается 4-8 ч. Системы с длительным высвобождением пилокарпина обеспечивают контроль внутриглазного давления в течение 1 суток, при этом развивающаяся в течение первых часов индуцированная миопия быстро уменьшается и обычно не превышает 0,5 диоптрии.

При приёме внутрь пилокарпин быстро всасывается, однако перорально его обычно не назначают. При закапывании в конъюктивальный мешок глаза он в обычных концентрациях мало всасывается и выраженного системного действия не оказывает.Пилокарпин широко применяется в офтальмологической практике для понижения внутриглазного давления при глаукоме, а также для улучшения трофики глаза при тромбозе центральной вены сетчатки, острой непроходимости артерии сетчатки, при атрофии зрительного нерва, при кровоизлияниях в стекловидное тело.Пилокарпин применяют также для прекращения мидриатического действия после применения атропина, гоматропина, скополамина или других холинолитических веществ для расширения зрачка при офтальмологических исследованиях.Назначают пилокарпин в виде водных растворов; растворов с добавлением полимерных соединений (метилцеллюлозы и др.), оказывающих пролонгированное действие; мази и специальных плёнок из полимерного материала, содержащих пилокарпин.

Обычно применяют 1%-й или 2%-й водный раствор пилокарпина 2--3--4 раза в день. В редких случаях назначают более концентрированные растворы (5--6 %).Часто применяют пилокарпин в сочетании с другими препаратами, снижающими внутриглазное давление: ~-адреноблокаторами ,адреномиметиками и др.Перед сном можно закладывать за веки 1--2%-ю пилокарпиновую мазь.Глазные плёнки с пилокарпином целесообразно назначать в случаях, когда для нормализации тонуса глазного яблока требуется более чем 3--4-разовое закапывание растворов пилокарпина в сутки. Плёнку закладывают при помощи глазного пинцета за нижнее веко 1--2 раза в сутки. Смачиваясь слёзной жидкостью, она набухает и удерживается в нижнем конъюнктивальном своде. Непосредственно после закладывания плёнки следует удержать глаз в неподвижном состоянии в течение 30--60 секунд, пока произойдёт смачивание плёнки и переход её в мягкое (эластичное) состояние.

1.3 Фармакология Кодеина фосфата

Алкалоид, содержащийся в опии (0,2 - 2% в опии Papaver Somniferum); получается также полусинтетическим путём - метилированием морфина;алкалоид фенантренового ряда

По характеру действия кодеин близок к морфину, но болеутоляющие свойства выражены слабее; сильно выражена способность уменьшать возбудимость кашлевого центра. В меньшей степени, чем морфин, угнетает дыхание. Меньше тормозит также деятельность желудочно-кишечного тракта. На некоторых людей оказывает наоборот, возбуждающее действие, с сильно выраженной бессонницей.

Фармакологическое действие - анальгезирующее (опиоидное), противокашлевое, антидиарейное.

Обезболивающая активность обусловлена возбуждением опиатных рецепторов в различных отделах ЦНС и периферических тканях, приводящим к стимуляции антиноцицептивной системы и изменению эмоционального восприятия боли. Центральный противокашлевый эффект связан с подавлением кашлевого центра на уровне «моста». Активация опиатных рецепторов в кишечнике вызывает расслабление гладких мышц, снижение перистальтики и спазм всех сфинктеров.

После приема внутрь быстро всасывается. Связывание с белками плазмы незначительное. Подвергается биотрансформации в печени, причем 10% путем деметилирования переходит в морфин. T_1/2 составляет 2,5-4 ч. Экскретируется почками: 5-15% в виде кодеина и 10% в виде морфина и его метаболитов. Анальгезирующий эффект развивается через 10-30 мин после в/м и п/к и через 30-60 мин после энтерального введения. Максимальный эффект достигается через 30-60 мин после в/м введения и через 1-2 ч после энтерального. Продолжительность анальгезии -- 4 ч, блокады кашлевого рефлекса -- 4-6 ч.

В период лечения необходимо воздерживаться от приёма этанола и соблюдать осторожность при вождении автотранспорта, а также при занятии др. потенциально опасными видами деятельности, требующими повышенной концентрации внимания и быстроты психомоторных реакций. Контролируемые исследования при применении во время беременности не проведены; изучения на животных показали, что однократное введение кодеина мышам в дозе 100 мг/кг вызывает задержкуоссификации, а однократная доза 120 мг/кг у крыс -- увеличение костной резобции. Применение кодеина во время родов может вызвать их пролонгирование. Следует иметь в виду, что дети до 2 лет более чувствительны к эффектам опиоидных анальгетиков, и что у них могут возникнуть парадоксальные реакции. При беременности и в период грудного вскармливания применение допустимо только по жизненным показаниям (возможно угнетение дыхания и развитие лекарственной зависимости у плода и новорождённого). Опиоидные анальгетики снижают слюноотделение, что может способствовать развитию кариеса, заболеваний периодонта, кандидомикозу слизистой оболочки полости рта. Доза кодеина в количестве 120 мг внутримышечно или 200 мг внутрь эквивалентна дозе морфина 10 мг внутримышечно.



1.4 Фармакология Дикаина

Блокирует чувствительные нервные окончания и проводники; проникает через мембрану нервных клеток, нарушает трансмембранный транспорт ионов (особенно натрия), уменьшает поток импульсов в ЦНС.

При аппликации на слизистую оболочку глаза не влияет на внутриглазное давление и аккомодацию, не расширяет зрачки. Расширяет сосуды (целесообразно сочетание с адреналином или другими адреномиметиками). Анестезия развивается через 2-5 мин после закапывания и продолжается 15-20 мин.

Легко и полностью всасывается через слизистые оболочки (скорость абсорбции зависит от места введения и дозы). Из-за высокой скорости абсорбции его нельзя применять при повреждении слизистых оболочек. Связывание с белками плазмы -- высокое. Полностью гидролизуется в течение 1-2 ч холинэстеразой с образованием ПАБК и диэтиламиноэтанола. Выводится почками и с желчью, частично подвергается печеночно-кишечной рециркуляции.

Поверхностная анестезия при кратковременных операциях и манипуляциях в офтальмологической (удаление поверхностных инородных тел, амбулаторные хирургические вмешательства, гониоскопия, тонометрия, другие диагностические процедуры) и оториноларингологической практике; СУБА в случае наличия противопоказаний к использованию амидных местных анестетиков.

1.5 Фармакология Новокаина

Новокаин, он же прокаин ,гидрохлорид в-диметиламиноэтилового эфира п-аминобензойной кислоты) -- лекарственное средство с умеренной анестезирующей активностью.

Местноанестезирующее средство с умеренной анестезирующей активностью и большой широтой терапевтического действия. Являясь слабым основанием, блокирует Na⁺-каналы, препятствует генерации импульсов в окончаниях чувствительных нервов и проведению импульсов по нервным волокнам. Изменяет потенциал действия в мембранах нервных клеток без выраженного влияния на потенциал покоя. Подавляет проведение не только болевых, но и импульсов другой модальности. При всасывании и непосредственном сосудистом введении в ток крови снижает возбудимость периферических холинергических систем, уменьшает образование и высвобождение ацетилхолина изпреганглионарных окончаний (обладает некоторым ганглиоблокирующим действием), устраняет спазм гладкой мускулатуры, уменьшает возбудимость миокарда и моторных зон коры головного мозга. При внутривенном введении оказывает анальгезирующее, противошоковое, гипотензивное и антиаритмическое действие (увеличивает эффективный рефрактерный период, снижает возбудимость, автоматизм и проводимость), в больших дозах может нарушать нервно-мышечную проводимость. Устраняет нисходящие тормозные влияния ретикулярной формации ствола мозга. Угнетает полисинаптические рефлексы. В больших дозах может вызывать судороги. Обладает короткой анестезирующей активностью (продолжительность инфильтрационной анестезии составляет 0.5-1 ч). При внутримышечном введении эффективен у пожилых пациентов на ранних стадиях заболеваний, связанных с функциональными нарушениями центральной нервной системы(артериальная гипертензия, спазмы коронарных сосудов и сосудов мозга и др.).



Глава 2. Методы анализа

2.1Температура плавления

Под температурой плавления вещества подразумевают интервал температуры между началом плавления - появлением первой капли жидкости и концом плавления - полным переходом вещества в жидкое состояние.

Приведенные в частных статьях фармакопеи интервалы температур плавления указывают на то, что наблюдаемая температура плавления данного препарата должна находиться в указанных пределах, при этом интервал между началом и концом плавления не должен превышать 2^оС. Отдельные отклонения от этого интервала должны быть указаны в частных статьях.

В случаях нечеткого начала или конца плавления отдельных препаратов вместо интервала температуры плавления можно определять только конец плавления или только начало плавления. Тогда приведенный в частных статьях интервал температуры плавления указывает, что начало плавления (или конец плавления) должно укладываться в этих пределах.

Для веществ, неустойчивых при нагревании, определяют температуру разложения. Температурой разложения называют температуру, при которой происходит резкое изменение веществ (вспенивание).

В зависимости от физических свойств веществ следует применять один из нижеприведенных методов определения температуры плавления.

Методы 1 и 1a - для твердых веществ, легко превращаемых в порошок: устойчивых при нагревании (метод 1) и неустойчивых при нагревании (метод 1а).

Методы 2 и 3 - для веществ, не растирающихся в порошок, как жиры, воск, парафин, вазелин, смолы.

Для определения температуры плавления по методам 1, 1a и 2 допускаются два прибора.

I. "Прибор для определения температуры плавления с диапазоном

измерений в пределах от 20 до 360 ^оС " (ПТП) с электрическим обогревом. Прибор состоит из следующих частей:

1) основание со щитком управления и номограммой;

2) стеклянный блок - нагреватель, обогрев которого осуществляется константановой проволокой, навитой бифилярно;

3) оптическое приспособление (ГОСТ 7594-75);

4) приспособление для установки термометров;

5) приспособление для установки капилляров;

6) термометр укороченный с ценой деления 0,5 ^оС;

7) источник нагрева (электрический обогрев);

8) капилляры длиной 20 см.

II. Второй прибор состоит из следующих частей:

1) круглодонная колба из термостойкого стекла вместимостью от 100 до 150 мл; длина горла колбы 20 см; диаметр горла от 3 до 4 см;

2) пробирка из термостойкого стекла, вставленная в колбу и отстоящая от дна колбы на расстоянии 1 см; диаметр пробирки от 2 до 2,5 см;

3) термометр ртутный стеклянный укороченный с ценой деления 0,5 ^оС;

4) источник нагрева (газовая горелка, электрический обогрев);

5) капилляры.

Колбу наполняют на 3/4 объема шара соответствующей жидкостью:

1) вазелиновое масло (ГОСТ 3164-78) или жидкие силиконы;

2) концентрированная серная кислота (ГОСТ 4204-77) - для веществ с температурой плавления от 80 до 260 град. С;

3) раствор 3 частей калия сульфата (ГОСТ 4145-74) в 7 частях (массовых) концентрированной серной кислоты (ГОСТ 4204-77) - для веществ с температурой плавления выше 260 ^оС;

4) дистиллированная вода - для веществ с температурой плавления ниже 80 град. С.

Примечания. 1. Стеклянные трубки, из которых вытягивают капилляры, должны быть вымыты и высушены. Капилляры сохраняют в эксикаторе.

2. При приготовлении раствора калия сульфата в концентрированной серной кислоте смесь ингредиентов кипятят в течение 5 мин при энергичном перемешивании. При недостаточном перемешивании могут образоваться два слоя, в результате чего может произойти закипание смеси, приводящее к взрыву.

Во время определения температуры плавления колба и пробирка должны быть открыты.

Методика определения. Метод 1 и 1а. Если в частных статьях нет других указаний, тонко измельченное вещество сушат при температуре от 100 до 105 ^оС в течение 2 ч или в эксикаторе над серной кислотой в течение 24 ч. Любые другие условия должны быть указаны в частных статьях. Высушенное вещество помещают в капилляр, имеющий диаметр от 0,9 до 1 Mr и толщину стенки от 0,1 до 0,15 Mr, запаянный с одного конца.

При плавлении в приборе ПТП длина капилляра должна быть 20 см, в случае второго прибора - от 6 до 8 см. Для уплотнения вещества капилляр многократно бросают в стеклянную трубку высотой не менее 50 см, поставленную вертикально на стекло. Высота слоя вещества в капилляре должна быть около 3 Mr. Капилляр с веществом сохраняют до начала определения в эксикаторе.

Во внутреннюю пробирку второго прибора помещают термометр так, чтобы конец его отстоял от дна пробирки на 1 см.

Нагревание в обоих приборах проводят сначала быстро, а затем регулируют его так, чтобы за 10 ^оС до начала плавления была достигнута необходимая скорость подъема температуры, указанная ниже.

За 10^оС до ожидаемого начала плавления капилляр с веществом вносят в приборы (первый или второй) таким образом, чтобы запаянный конец его находился на нижней части столика, расположенной на уровне середины ртутного шарика термометра. При плавлении во втором приборе капилляр должен быть расположен таким образом, чтобы запаянный его конец находился на середине ртутного шарика термометра. Продолжают нагревание со скоростью:

- для веществ, плавящихся по методу 1:

Ш при определении температуры плавления ниже 100 ^оС - со скоростью от 0,5 до 1 ^оС в 1 мин;

Ш при определении температуры плавления от 100 до 150 ^оС - от 1 до 1,5^оС в 1 мин;

Ш при определении температуры плавления выше 150 ^оС - от 1,5 до ^оС в 1 мин;

- для веществ, плавящихся по методу 1a, - от 2,5 до 3,5 ^оС в 1 мин.

Проводят не менее двух определений; за температуру плавления принимают среднее арифметическое значение нескольких определений, проведенных в одинаковых условиях и отличающихся друг от друга не более чем на 1 ^оС.

В случае расхождений при определении температуры плавления на разных приборах в частной статье должна быть приведена температура плавления на каждом приборе.

Метод 2. а) Для мягких веществ: капилляр длиной 20 см при применении первого прибора и от 6 до 8 см - при применении второго прибора и внутренним диаметром от 1 до 2 Mr, открытый с обоих концов, погружают в вещество так, чтобы оно заполнило нижнюю часть капилляра и образовало слой высотой около 10 Mr.

б) Для твердых веществ: испытуемое вещество расплавляют на бане при возможно более низкой температуре, тщательно перемешивают, набирают его в капилляр, как указано выше (см. метод 2а), и оставляют при температуре 0 ^оС в течение от 1 до 2 ч.

С заполненным тем или другим способом капилляром проводят определение температуры плавления по методу 1.

За температуру плавления принимают ту температуру, при которой столбик вещества становится жидким, поднимаясь в некоторых случаях по капилляру. Проводят не менее двух определений. За температуру плавления принимают среднее значение. Расхождение между двумя определениями не должно превышать 1 ^оС.

Метод 3. При этом методе применяют термометр типа Убеллоде (ГОСТ 400-80 Е). Определение проводят следующим образом. Чашечку 1 (рис. 1) заполняют исследуемым веществом, избегая по возможности попадания пузырьков воздуха, и вставляют ее в нижнюю часть гильзы 2 до упора. Ртутный шарик термометра 3 при этом погружается в вещество, излишек которого выдавливается через боковые отверстия 4 гильзы. Последнюю тщательно протирают и термометр помещают в пробирку 5 длиной от 19 до 21 см и диаметром от 4 до 4,5 см с помощью пробки с прорезом таким образом, чтобы нижняя часть чашечки отстояла от дна пробирки на 2,5 см. Пробирку укрепляют в вертикальном положении в стакане 6 так, чтобы она была погружена на 2/3 в воду и нижний ее конец при этом отстоял от дна стакана на 2,5 см. Начинают нагревать прибор при постоянном перемешивании жидкости с помощью мешалки 7. Когда температура будет на 15 - 20 ^оС ниже ожидаемой, регулируют нагревание таким образом, чтобы температура поднималась на 1^оС в 1 мин. За температуру плавления принимают температуру, при которой из отверстия 8 упадет первая капля расплавленного вещества. Проводят не менее двух определений; за температуру плавления принимают среднее значение. Расхождение между двумя определениями не должно превышать 1^оС.

2.2 Рефрактометрия

Показателем преломления (индексом рефракции) называют отношение скорости света в вакууме к скорости света в испытуемом веществе (абсолютный показатель преломления). На практике определяют так называемый относительный показатель преломления (n), который является отношением скорости света в воздухе к скорости света в испытуемом веществе.

Показатель преломления зависит от температуры и длины волны света, при которой проводят определение. В растворах показатель преломления зависит также от концентрации вещества и природы растворителя.

Рефрактометрию применяют для установления подлинности и чистоты вещества. Метод применяют также для определения концентрации вещества в растворе, которую находят по графику зависимости показателя преломления раствора от концентрации. На графике выбирают интервал концентраций, в котором наблюдается линейная зависимость между показателем преломления и концентрацией. В этом интервале концентрацию вычисляют по формуле: X = (n - n )/F,

где: X - концентрация, в процентах;

n - показатель преломления раствора;

n - показатель преломления растворителя при той же температуре;

F - фактор, равный величине прироста показателя преломления при

увеличении концентрации на 1% (устанавливается экспериментально).

Для определения показателя преломления применяют рефрактометры.

Определение проводят при температуре (20 +/- 0,5) град. C и длине волны

линии D спектра натрия (589,3 нм). Показатель преломления, определенный при 20

таких условиях, обозначается индексом n D

Современные приборы откалиброваны таким образом, что отсчеты, полученные по их шкалам, соответствуют показателям преломления для D линии спектра натрия. При проведении измерений следует соблюдать указания в отношении соответствующего источника света, приведенные в инструкции к прибору. Если используют белый свет, то рефрактометр снабжен компенсирующей системой.

Цена деления термометра не должна превышать 0,5 град. C.

Обычно измерения показателя преломления проводят на рефрактометрах Аббе, в основу которых положено явление полного внутреннего отражения при прохождении светом границы раздела двух сред с разными показателями преломления. Диапазон измеряемых показателей преломления при измерении в проходящем свете 1,3-1,7. Точность измерения показателя преломления должна -4 быть не ниже +/- 2 x 10 .

Могут быть использованы рефрактометры других типов с такой же или большей точностью.

Рефрактометры юстируют по эталонным жидкостям, приведенным в табл. 10.1, значения показателей преломления которых обозначены на этикетке, или 20 25 по дистиллированной воде, для которой n = 1,3330 и n = 1,3325 D D (дельта n/дельта t = - 0,000085).

2.3 ИК и УФ спекторофотометрия

УФ - спектрофотометрические измерения проводят обычно в растворах. В качестве растворителя используется дистиллированная вода, кислоты, щелочи, спирты (метанол, этанол), некоторые другие органические растворители. Растворитель не должен поглощать в той области спектар, что и анализируемое вещество. Характер спектра (структура и положение полос поглощения) может изменяться в различных растворителях, а также при изменениях рН среды.

Метод УФ - спектрофотометрии включен в ГФ IХ, ГФ Х, а также в последние издания фармакопей почти всех стран для определения подлинности, чистоты и количественного определения лекарственных препаратов.

Изучение спектров поглощения химических веществ с разной структурой позволило установить, что основными факторами, обуславливающими поглощение света, являются наличие так называемых хромофоров, т. е. ненасыщенность (двойные и тройные связи), наличие карбонильной, карбоксильной, амидной, азо-, нитрозо-, нитро- и других функциональных групп. Каждая функциональная группа характеризуется поглощением в определенной области спектра. Однако имеется ряд факторов (присутствие нескольких хромофорных групп, влияние растворителя и др.), приводящих к смещению полос поглощения в сторону больших длин волн (батохромное смещение) или в сторону коротких длин волн (гипсохромное смещение). Кроме смещения может наблюдаться эффект увеличения (гиперхромный) или уменьшения (гипохромный) интенсивности поглощения.

В связи с этим для идентификации вещества по его УФ -спектру применяют обычно метод сравнения со спектром известного вещества, полученным в тех же условиях. Характеристикой спектра поглощения вещества является поглощение максимумов (минимумов) поглощения, а также интенсивность поглощения, что характеризуется величиной оптической плотности или удельного показателя поглощения.

Иногда для идентификации фармакопейных препаратов вместо абсолютных величин поглощения проводится отношение абсорбции при различных длинах волн. Инфракрасные (колебательные) спектры используются фармакопеями многих стран для идентификации лекарственных препаратов. ИК спектры большинства органических соединений в отличии от УФ спектров характеризуются наличием числа пиков поглощения.

Метод ИК -спектроскопии дает возможность получить наиболее полную информацию о строении и составе анализируемого вещества, позволяющую идентифицировать очень близкие по структуре соединения. В ГФ Х метод инфракрасной спектроскопии принят для идентификации лекарственных веществ с полифункциональными группами путем сравнения со спектрами стандартных образцов, снятыми в одиночных условиях.

2.4 Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)

В высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) характер происходящих процессов в хроматографической колонке, в общем идентичен с процессами в газовой хроматографии. Отличие состоит лишь в применении в качестве неподвижной фазы жидкости. В связи с высокой плотностью жидких подвижных фаз и большим сопротивлением колонок газовая и жидкостная хроматография сильно различаются по аппаратурному оформлению.

В ВЭЖХ в качестве подвижных фаз обычно используют чистые растворители или их смеси.

Для создания потока чистого растворителя (или смесей растворителей), называемого в жидкостной хроматографии элюентом, используются насосы, входящие в гидравлическую систему хроматографа.

Адсорбционная хроматография осуществляется в результате взаимодействия вещества с адсорбентами, такими как силикагель или оксид алюминия, имеющими на поверхности активные центры. Различие в способности к взаимодействию с адсорбционными центрами разных молекул пробы приводит к их разделению на зоны в процессе движения с подвижной фазой по колонке. Достигаемое при этом разделение зон компонентов зависит от взаимодействия, как с растворителем, так и с адсорбентом.

Наибольшее применение в ВЭЖХ находят адсорбенты из силикагеля с разным объемом, поверхностью и диаметром пор. Значительно реже используют оксид алюминия и другие адсорбенты. Основная причина этого:

- недостаточная механическая прочность, не позволяющая упаковывать и использовать при повышенных давлениях, характерных для ВЭЖХ;

силикагель по сравнению с оксидом алюминия обладает более широким диапазоном пористости, поверхности и диаметра пор; значительно большая каталитическая активность оксида алюминия приводит к искажению результатов анализа вследствие разложения компонентов пробы либо их необратимой хемосорбции.

Детекторы для ВЭЖХ

Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) используется для детектирования полярных нелетучих веществ, которые по каким-либо причинам не могут быть переведены в форму удобную для газовой хроматографии, даже в виде производных. К таким веществам, в частности, относят сульфоновые кислоты, водорастворимые красители и некоторые пестициды, например производные фенил - мочевины.

Детекторы:

УФ - детектор на диодной матрице. «Матрица» фотодиодов (их более двухсот) постоянно регистрирует сигналы в УФ- и видимой области спектра, обеспечивая таким образом запись УФ-В-спектров в режиме сканирования. Это позволяет непрерывно снимать при высокой чувствительности неискаженные спектры быстро проходящих через специальную ячейку компонентов.

По сравнению с детектированием на одной длине волны, которое не дает информации о «чистоте» пика, возможности сравнения полных спектров диодной матрицы обеспечивают получение результата идентификации с гораздо большей степенью достоверности.

Флуоресцентный детектор. Большая популярность флуоресцентных детекторов объясняется очень высокой селективностью и чувствительностью, и тем фактором, что многие загрязнители окружающей среды флуоресцируют (например, полиароматические углеводороды).

Электрохимический детектор используются для детектирования веществ, которые легко окисляются или восстанавливаются: фенолы, меркаптаны, амины, ароматические нитро- и галогенпроизводные, альдегиды кетоны, бензидины.

Хроматографическое разделение смеси на колонке вследствие медлен-ного продвижения ПФ занимает много времени. Для ускорения процесса хроматографирование проводят под давлением. Этот метод называют вы-сокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЖХ)

Модернизация аппаратуры, применяемой в классической жидкостной колоночной хроматографии, сделала ее одним из перспективных и совре-менных методов анализа. Высокоэффективная жидкостная хроматография является удобным способом разделения, препаративного выделения и про-ведения качественного и количественного анализа нелетучих термола-бильных соединений как с малой, так с большой молекулярной массой.

В зависимости от типа применяемого сорбента в данном методе используют 2 варианта хроматографирования: на полярном сорбенте с использованием неполярного элюента (вариант прямой фазы) и на неполярном сорбенте с использованием полярного элюента - так называемая обращенно-фазовая высокоэффективная жидкостная хроматография (ОфВЖХ).

При переходе элюента к элюенту равновесие в условиях ОфВЖХ устанавливается во много раз быстрее, чем в условиях полярных сорбентов и неводных ПФ. Вследствие этого, а также удобства работы с водными и водно-спиртовыми элюентами, ОфВЖХ получила в настоящее время большую популярность. Большинство анализов при помощи ВЖХ проводят именно этим методом.

Детекторы. Регистрация выхода из колонки отдельного компонента производится с помощью детектора. Для регистрации можно использовать изменение любого аналитического сигнала, идущего от подвижной фазы и связанного с природой и количеством компонента смеси. В жидкостной хроматографии используют такие аналитические сигналы, как светопоглощение или светоиспускание выходящего раствора (фотометрические и флуориметрические детекторы), показатель преломления (рефрактометрические детекторы), потенциал и электрическая проводимость (электрохимические детекторы) и др.

Непрерывно детектируемый сигнал регистрируется самописцем. Хроматограмма представляет собой зафиксированную на ленте самописца по-следовательность сигналов детектора, вырабатываемых при выходе из ко-лонки отдельных компонентов смеси. В случае разделения смеси на внеш-ней хроматограмме видны отдельные пики. Положение пика на хроматограмме используют для целей идентификации вещества, высоту или площадь пика - для целей количественного определения.

2.5 Газожидкостная хроматография

Газожидкостная хроматография основана на физико-химическом разделении анализируемых компонентов, находящихся в газовой фазе, при их прохождении вдоль нелетучей жидкости, нанесенной на твердый сорбент. Это один из наиболее перспективных методов анализа. Широкое распространение и перспективность методов ГЖХ обусловлены тем, что они позволяют разделить и количественно определить вещества в сложной смеси даже в тех случаях, когда они сходны по химическим свойствам, а температуры кипения W различаются на десятые доли градуса. Для анализа требуются очень малые количества вещества, а время определения обычно исчисляется минутами.

Разделение анализируемых веществ происходит в колонках (трубках), наполненных твердым пористым сорбентом, на который нанесена жидкая нелетучая стационарная фаза. Пары анализируемых веществ, смешанные с газом-носителем, движутся через колонку. При этом происходит многократное установление равновесия между подвижной газовой и жидкой стационарной фазами, обусловленное многократным повторением процессов растворения и испарения. Вещества, лучше растворимые в стационарной фазе, дольше удерживаются ею. Благодаря этому происходит разделение анализируемой смеси на отдельные компоненты, которые выходят из колонки отдельно и регистрируются на выходе.

Эффективность использования метода ГЖХ в каждом отдельном случае зависит от правильного выбора жидкой фазы, размера частиц и природы твердого носителя, скорости и природы газа-носителя, температуры, количества вводимой пробы, длины колонки и других факторов. Поскольку теоретический учет этих факторов не всегда возможен, эффективность анализа ГЖХ в большой степени зависит от практических знаний и опыта экспериментатора.

2.6 Плоскостная хроматография

К плоскостным видам хромотографии относят бумажную (БХ) и тонкослойную (ТСХ). Эти два вида жидкостной хромотографии просты по технике выполнения, экспрессны, не требуют дорогостоящего оборудования. Разделение этими методами может быть выполнено с использованием различных роматографических систем потому выделяют адсорбционную, распределительную, обращенно-фазавую и ионно-обменную БХ и ТСХ. ТСХ используют чаще чем БХ.

Бумажная и тонкослойная хромотографии сходны по технике выполнения анализа. В БХ в качестве носителя неподвижной фазы, например воды используют целлюлозное волокно бумаги, в методе ТСХ - различные сорбенты (оксид алюминия, силикогель, целлюлозу и др.), нанесенные на пластинку тонким слоем. В обоих методах используют храмотографические системы жидкость - твердый сорбент и жидкость - жидкость - твердый сорбент, причем в качестве неподвижной фазы используют различные растворители или их смеси, органические и неорганические кислоты. Хроматографическое разделение в плоскостных видах хроматографии, как и в колонке, обусловлено переносом компонентов подвижной фазы вдоль слоя неподвижной фазы с различными скоростями в соответствии с коэффициентами распределения разделяемых компонентов.

Разделяемые компоненты на пластинке или на полоске бумаги образуют отдельные зоны (пятна), положение которых на хроматограмме характеризуется величинами R_f - относительной скоростью перемещения компонентов в тонком слое или по бумажной полоске. Экспериментально величину R_f определяют как отношение расстояния Х, пройденного веществом к расстоянию L, пройденному растворителем от старта до линии фронта:

Величина R_f зависит от природы носителя (бумага, активности и природа сорбента, толщина слоя сорбента), качества и природы растворителя, способа нанесения пробы, детектирования, т.е. от техники эксперимента, температуры, некоторых других факторов. В идеальном случае R_f не зависит от концентрации определяемого вещества и присутствия других компонентов.

Получение и анализ плоскостных хроматограмм на полоске хроматографической бумаге или на тонком слое сорбента проводят острым карандашом стартовую линию на расстоянии 1 см от нижнего края бумаги (пластинки). Пробу наносят микропипеткой на линию старта. Диаметр пятная не должен превышать 2-3 мм; чем меньше пятно, тем лучше разделение. В ТСХ используют восходящий способ получения хроматограмм. Для этого применяют стеклянные, металлические или пластмассовые пластинки, покрытые тонким слоем сорбента (неподвижная фаза) обычно толщиной 100-300 мкм. Исследуемое вещество наносят микропипеткой на стартовую линию, как в БХ и помещают пластинку в камеру, содержащую растворители (подвижная фаза) для разделения компонентов.

Хроматографирование в БХ и ТСХ продолжают до тех пор, пока на растворитель не пройдет от линии старта ? 10 см. После этого хроматограмму вынимают из камеры и подсушивают на воздухе. Если образуются невидимые зоны хроматограммы проявляют.

КАЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ

Если на хроматограмме образуются окрашенные зоны, то проводят визуальное наблюдение. Невидимые хроматограммы проявляют соответствующими реагентами, как правило групповыми. По характерной окраски образующихся цветных зон судят о составе анализируемой пробы.

Для обнаружения компонентов используют также метод основанный на измерении величины R_F для стандартного и исследуемого растворов в одной камере, на одинаковых полосках бумаги или на одной и той же полоске. После проявления общих хроматограмм определяют R_F иследуемого и стандартного растворов. Сопоставляя их, делают заключение о наличии в исследуемом растворе тех или иных компонентов.

КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ

Количественный анализ осуществляют непосредственно на хроматограмме (на слое сорбента или на бумаге) или анализируемое вещество (пятно) вымывают из слоя сорбента (с бумажной полоски) после вырезания зоны, и полученный раствор анализируют каким-либо методом.

Непосредственно на хроматограммах количественный анализ можно осуществлять по размеру пятна (полуколичественное определение), спектрофотометрическим методом по спектрам поглощения (фотоденсиметрия) и по спектрам отражения, а также флуориметрическим, рентгенофлуорисцентным и радиометрическим методами. Определение компонентов после смывания можно выполнить, например, спектрофотометрическим, флуориметрическим, атомно-абсорбционным методами. Предел обнаружения дается в виде количества, приходящегося на 1 г сорбента, но лучше всего в виде концентрации в анализируемой пробе. Относительные стандартные отклонения при использовании спектрофотометрических методов анализа не превышают 1%.

В настоящее время плоскостная хроматография , главным образом ТСХ, интенсивно развивается. Представляется важным развитие радиальной тонкослойной хроматографии: растворитель с регулируемой скоростью подается в центр пластины, заставляя зоны перемещаться от центра к периферии. Оказалось, что существенно ускоряется процесс разделения (1 - 4 мин) сложной смеси и для этого достаточно иметь пластины со слоем сорбента длиной 20 - 25 мм. За счет создания принудительного движения подвижной фазы с регулируемой скоростью уменьшения размера частиц и насыщения пространства над пластиной парами растворителя удалось существенно ускорить процесс и повысить четкость разделения.



Глава 3. Качественный и количественный анализ

3.1 Атропина сульфата

Подлинность. 0,01 г препарата смачивают в фарфоровой чашке 1 мл концентрированной азотной кислоты и выпаривают на водяной бане досуха. К остатку прибавляют несколько капель 0,5 н. спиртового раствора едкого кали и ацетона; появляется фиолетовое окрашивание, исчезающее при стоянии.

0,2 г препарата растворяют в 12 мл воды, прибавляют 4 мл раствора аммиака; после потирания о стенки сосуда стеклянной палочкой выпадает осадок основания атропина. Осадок отфильтровывают, промывают водой и сушат в эксикаторе над серной кислотой. Температура плавления выделенного основания 115-117°.

(атропин)2H2SO4 + 2NH4OH > 2атропин v + (NH4)2SO4 + 2H2O

Раствор 0,05 г препарата в 2 мл воды дает характерную реакцию на сульфаты

SO42- H2SO4 + BaCI2 > BaSO4 v + 2HCI

белый

4)Осадительные реакции с общеалкалоидными реактивами (р-р пикриновой кислоты, р-р I2, реактив Драгендорфа)

Количественное определение:

1)ГФ X - метод неводного титрования. Титруют в б/в CH3COOH, Ind кристал.фиолетовый. Титрант HCIO4 до зеленого окрашивания.

HCIO4 + CH3COOH CIO4- + CH3COOH2+

CH3COOH2+ + CH3COO- > 2CH3COOH

Fэкв=1/2

2)Экстракционно-фотометрия определения атропина сульфата в ЛФ

Реакция образования окрашенной соли с пикриновой кислотой (l=420-425нм)

III При хранении атропина сульфата может образоваться апоатропин (не >0,2%)



IV В условиях аптеки применяется метод алкалиметрии по кислотному остатку

(атр)2H2SO4 + 2NaOH > 2 атр v + Na2SO4 + 2H2O

УЧ=1/2 Ind=ф/ф органический растворитель

3.2 Пилокарпина гидрохлорид

Подлинность. Обусловлены наличием лактонного кольца и кольца имидазола.

1.На лактонное кольцо:

1.1. Реакция Легаля. Реакцию проводят со щелочным раствором нитропруссида натрия - появляется красно - вишневое окрашивание.

1.2. Реакция образования окрашенных гидроксаматов.

Реакцию проводят со щелочным раствором гидроксиламино гидрохлоридом с последующим добавлением хлорида железа (III). Появляется гидроксамат железа красно-фиолетового цвета.

1.3. Реакция Хелча. Реакция фармакопейная.

Основана на образовании комплексной соли пилокарпина с хромпероксидом. Реакцию проводят с раствором дихромата калия, перекиси водорода в присутствии серной кислоты и хлороформа.

Хлороформный слой окрашивается в сине-фиолетовый цвет.

K2Cr2O7 + H2O2 + H2SO4 H2Cr2O8 + K2SO4 +H2O

2.Реакция на кольцо имидазола.

а) Реакция образования азокрасителя с солями диазония.

3.Реакция на третичный азот:

а) общеалкалоидными реактивами. С раствором Вагнера в кислой среде - бурый осадок.

б) реактивом Драгендорфа. В кислой среде осадки оранжевого цвета.

Количественное определение.

Метод кислотно-основного титрования в неводных средах.

Растворитель: безводная уксусная кислота, ацетат ртути (II) для связывания гидрохлорида.

Индикатор: кристаллический фиолетовый

Титрант: 0,1 моль раствор хлорной кислоты.

Этот метод не удобен в условиях аптеки, т.к в аптеке нет вытяжного шкафа, поэтому при внутриаптечном контроле лекарственной форме применяют методы:

1.По связанной хлористоводородной кислоте.

Метод Алкалиметрии.

Растворитель: Вода, прибавляют спирто-хлороформную смесь для растворения основания пилокарпина.

Индикатор: фенолфталеин

Титрант: NaOH 0,1 моль/л

Титруют до слабо-розовой окрашивания водного слоя.

Часто в аптечной практике вместо хлороформа прибавляют спирт.

2.По хлорид иону.Метод Аргентометрия. Фаянса

Среда: уксуснокислая

Индикатор: бромфеноловый синий.

Титрант: AgNO3 0.1 моль\л

Титруют от желто- зеленого окрашивания до сине-фиолетовой окрашивания осадка.F=1

3.Метод меркуриметрии.Среда: азотнокислаяИндикатор: дифенилкарбазон

Титрование ведут Hg(NO3)2 0,1 моль/л до появления сине-фиолетового окрашивания.В основе метода реакция образования малодиссоциируемого соединения.

3.3 Кодеина фосфат

Подлинность

Реакция с реактивами группового осаждения алкалоидов. При взаимодействии кодеина с реактивами Драгендорфа, Бушарда, Майера и другими образуются осадки.

Цветные реакции. Кодеин с реактивами Манделина, Марки и Фреде дает окрашенные продукты реакции, которые описаны выше .

Реакция Пеллагри. При нагревании кодеина с концентрированной соляной кислотой, а затем с концентрированной серной кислотой происходит деметоксилирование этого алкалоида и образуется апоморфин, который дает реакцию со спиртовым раствором иода.

К 3 мл раствора формальдегида в серной кислоте прибавляют несколько кристаллов препарата; появляется сине-фиолетовое окрашивание, усиливающееся при стоянии.

0,01 г препарата растворяют в 5 мл концентрированной серной кислоты, прибавляют 1 каплю раствора хлорида окисного железа, при слабом нагревании на водяной бане появляется синее окрашивание, переходящее в красное при добавлении 1 капли разведенной азотной кислоты.

0,5 г препарата растворяют в 5 мл воды, приливают 2 мл раствора едкого натра; после потирания о стенки сосуда стеклянной палочкой выпадает белый кристаллический осадок. Осадок отфильтровывают, промывают водой и сушат при 100-105° до постоянного веса. Температура плавления выделенного основания 154-157°.

1 мл раствора препарата (1 : 20) дает характерную реакцию А на фосфаты (стр. 746).

Количественное определение. Около 0,25 г препарата (точная навеска), предварительно высушенного при 100-105° до постоянного веса, растворяют в 20 мл безводной уксусной кислоты при слабом нагревании на водяной бане. После охлаждения титруют 0,1 н. раствором хлорной кислоты до голубовато-зеленого окрашивания (индикатор - кристаллический фиолетовый).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 н. раствора хлорной кислоты соответствует 0,03974 г C₁₈H₂₁NO₃ * Н₃Р0₄, которого в высушенном препарате должно быть не менее 99,0% и не более 101,0%.

Обнаружение кодеина методом хроматографии. На линию старта на хроматографической пластинке наносят каплю хлороформного раствора исследуемого вещества. Правее на расстоянии 2 см на линию старта наносят каплю раствора «свидетеля» (0,01 %-й раствор кодеина). Пятна нанесенных растворов подсушивают на воздухе, а затем пластинку вносят в камеру для хроматографирования, насыщенную парами растворителей (хлороформ-ацетон-диэтиламин в соотношении 50 : 30 : 2). После продвижения системы растворителей на 10 см выше линии старта пластинку вынимают из камеры, подсушивают на воздухе и опрыскивают реактивом Драгендорфа, модифицированным по Мунье.

При наличии кодеина в исследуемом растворе пятна этого алкалоида приобретают буровато-розовую окраску (Rf = 0,40± ±0,02).

3.4 Дикаин

Подлинность. 0,01 г препарата помещают в фарфоровую чашку, смачивают 2-3 каплями концентрированной азотной кислоты и выпаривают на водяной бане досуха. К охлажденному остатку прибавляют несколько капель 0,5 н. спиртового раствора едкого кали; появляется кроваво-красное окрашивание.

0,1 г препарата растворяют в 10 мл воды, приливают 1 мл 25% раствора роданида аммония; образуется кристаллический осадок. Осадок отфильтровывают, перекристаллизовывают из 5 мл воды и сушат при 80° в течение 2 часов. Температура плавления полученного осадка 130-132°.

Раствор препарата (1 : 100) дает характерную реакцию на хлориды (стр. 747).

Количественное определение. Около 0,3 г препарата (точная навеска) растворяют в 10 мл воды и 10 мл разведенной соляной кислоты и далее поступают, как указано в статье «Нитритометрия» . В случае применения внутренних индикаторов используют нейтральный красный или тропеолин 00. Переход окраски с тропеолином 00 от малиновой до светло-желтой.

1 мл 0,1 н. раствора нитрита натрия соответствует 0,03008 г C₁₅H₂₄N₂O₂ * НС!, которого в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 99,5%.



3.5 Новокаин

Подлинность. Препарат дает характерные реакции на ароматические первичные амины и хлориды (стр. 743; 747).

0,05 г препарата растворяют в 2 мл воды, прибавляют 3 капли разведенной серной кислоты и 1 мл 0,1 н. раствора перманганата калия; фиолетовая окраска моментально исчезает (отличие от совкаина).

0,2 г препарата растворяют в 2 мл воды, прибавляют 0,5 мл раствора едкого натра; выделяется бесцветный маслянистый осадок.

1.2 мл препарата дают характерную реакцию на первичные ароматические амины с образованием оранжево-красного окрашивания, переходящего ввишнево-красное.

2.К 2 мл препарата прибавляют 3 капли кислоты серной разведенной и 1 мл 0,1 М раствора калия перманганата, фиолетовая окраска моментально исчезает (отличие от совкаина).

Количественное определение. Около 0,3 г препарата (точная навеска) растворяют в 10 мл воды и 10 мл разведенной соляной кислоты и далее поступают, как указано в статье «Нитритометрия» . В случае применения внутренних индикаторов используют нейтральный красный-или тропеолин 00 в смеси с метиленовым синим.

...