Метод количественного определения аскорбиновой кислоты (по ГФ XI, вып. 2, стр. 294) основан на ее способности окисляться до дегидроформы раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята и восстанавливать последний до лейкоформы. Точка эквивалентности устанавливается появлением розового окрашивания, которое свидетельствует об отсутствии восстановителя, т. е кислоты аскорбиновой (2,6-дихлорфенолиндофенол имеет в щелочной среде синее окрашивание, в кислой - красное, а при восстановлении обесцвечивается): [4]

1. Определение содержания аскорбиновой кислоты. (таблица 4). Из грубо измельченной аналитической пробы плодов берут навеску массой 20 г, помещают в фарфоровую ступку, где тщательно растирают со стеклянным порошком (около 5 г), постепенно добавляя 300 мл воды, и настаивают 10 мин. Затем смесь размешивают и извлечение фильтруют. В коническую колбу вместимостью 100 мл вносят 1 мл полученного фильтрата, 1 мл 2%раствора хлористоводородной кислоты, 13 мл воды, перемешивают и титруют из микробюретки раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия (0,001 моль/л) до появления розовой окраски, не исчезающей в течение 30-60 с. Титрование продолжают не более 2 мин. В случае интенсивного окрашивания фильтрата или высокого содержания в нем аскорбиновой кислоты [расход раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолятанатрия (0,001 моль/л) более 2 мл], обнаруженного пробным титрованием, исходное извлечение разбавляют водой в 2 раза или более.

Содержание аскорбиновой кислоты в пересчете на абсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

где 0,000088 - количество аскорбиновой кислоты, соответствующее 1мл раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия (0,001 моль/л), в граммах; V - объем раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия (0,001 моль/л), пошедшего на титрование, в миллилитрах; m - масса сырья в граммах; W - потеря в массе при высушивании сырья в процентах.

Примечания. Приготовление раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия (0,001 моль/л): 0,22 г 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия растворяют в 500 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды при энергичном взбалтывании (для растворения навески раствор оставляют на ночь). Раствор фильтруют в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки. Срок годности раствора не более 7 сут при условии хранения в холодном, темном месте.

Установка титра. Несколько кристаллов (3-5) аскорбиновой кислоты растворяют в 50 мл 2 % раствора серной кислоты; 5 мл полученного раствора титруют из микробюретки раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия до появления розового окрашивания, исчезающего в течение 1-2 нед. Другие 5 мл этого же раствора аскорбиновой кислоты титруют раствором калия йодата (0,001 моль/л) в присутствии нескольких кристаллов (около 2 мг) калия йодида и 2-3 капель раствора крахмала до появления голубого окрашивания. Поправочный коэффициент вычисляют по формуле:

где V - объем раствора калий йодата (0,001 моль/л), пошедшего на титрование, в миллилитрах; V₁-объем раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия, пошедшего на титрование, в миллилитрах.

2. Определение содержания свободных органических кислот. Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм. 25 г измельченных плодов шиповника помещают в колбу вместимостью 250 мл, заливают 200 мл воды и выдерживают в течение 2 ч на кипящей водяной бане, затем охлаждают, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объем извлечения водой до метки перемешивают. Отбирают 10 мл извлечения, помещают в колбу вместимостью 500 мл, прибавляют 200-300 мл свеже-прокипяченной воды, 1 мл 1% спиртового раствора фенолфталеина, 2 мл 0,1 % раствора метиленового синего и титруют раствором натра едкого (0,1 моль/л) до появления в пене лилово- красной окраски.

Содержание свободных органических кислот в пересчете на яблочную кислоту в абсолютно сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

где 0,0067-количество яблочной кислоты, соответствующее 1 мл раствора натра едкого (0,1 моль/л), в граммах; V - объем раствора натра едкого (0,1 моль/л), пошедшего на титрование, в миллилитрах; m - масса сырья в граммах; W - потеря в массе при высушивании сырья в процентах. [1]

Таблица 4. Количественное определение аскорбиновой кислоты в плодах шиповника (фармакопейный метод)

Количественное определение химических веществ в цветках календулы.

Каротиноиды определяют в лекарственном сырье фотоколориметрическим методом, основанном на измерении интенсивности их природной окраски. Разработан спектрофотометрический метод определения каротиноидов. Каротиноиды из сырья экстрагируют петролейным эфиром, затем хроматографируют на пластинке "Силуфол" в системе петролейный эфир-бензол-метанол (60:15:4), элюируют хлороформом и спектрофотометрируют при длине волны 464 нм (-каротин) при 456 нм (в-каротин). [19]

1. Около 1 г (точная навеска) измельченных цветков ноготков, просеянных сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 50 мл спирта 70 %, колбу закрывают пробкой, взвешивают (с погрешностью ± 0,01 г) и оставляют на 1 ч. Затем колбу соединяют с обратным холодильником, нагревают, поддерживая слабое кипение в течение 2 ч. После охлаждения колбу с содержимым вновь закрывают той же пробкой, взвешивают и потерю в массе восполняют растворителем. Содержимое колбы тщательно взбалтывают и фильтруют через сухой бумажный фильтр, отбрасывая первые 20 мл, в сухую колбу вместимостью 200 мл (раствор А).

1 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 5 мл раствора алюминия хлорида, 0,1 мл кислоты уксусной и доводят объем раствора спиртом 96 % до метки и оставляют на 40 минут (раствор Б).

Через 40 минут измеряют оптическую плотность испытуемого раствора Б и раствора стандартного образца Б 1 на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны (408 + 2) нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя растворы сравнения для испытуемого раствора и стандартного образцов.

Содержание суммы флавоноидов в процентах (Х) в пересчете на рутин вычисляется по формуле:

где: А - оптическая плотность испытуемого раствора;

А_о- оптическая плотность раствора стандартного образца рутина;

а - навеска сырья, г;

а_о- навеска стандартного образца рутина, г;

W - влажность сырья, %;

Допускается проводить определение содержания суммы флавоноидов с использованием удельного показателя поглощения рутина.

Примечания

Приготовление спирта 70 %. 70 мл спирта помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.

Спирт 96 %. Этанол 96 %. Спирт этиловый 96% очищенный.

Приготовление алюминия хлорида раствора. 65,0 г алюминия хлорида растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до 100 мл. Прибавляют 0,5 г угля активированного, перемешивают в течение 10 мин и фильтруют. К фильтрату при непрерывном перемешивании прибавляют достаточное количество 1 % раствора натрия гидроксида (около 60 мл) до получения рН около 1,5.

Приготовление раствора сравнения для стандартного раствора.

К 1,0 мл стандартного раствора А 1 прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты раствора, доводят спиртом 96 % до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл и перемешивают (раствор сравнения готовится параллельно с раствором Б 1).

Приготовление раствора сравнения для испытуемого раствора Б. К 1 мл раствора А прибавляют 0,1 мл кислоты уксусной и доводят спиртом 96 % до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл и перемешивают (раствор сравнения готовится параллельно с раствором Б).

Приготовление раствора СО рутина. Около 0,05 г (точная навеска) рутина предварительно высушенного при 130-135 °С в течение 3 ч, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и растворяют при нагревании на кипящей водяной бане в 85 мл спирта 96 %, охлаждают, доводят объем раствора тем же спиртом до метки и перемешивают (раствор А 1).

2. Экстрактивные вещества, извлекаемые водой. В соответствии с требованиями ОФС "Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье" (таблица 5). Экстрагент - вода очищенная, спирт этиловый 70%. [18]

Таблица 5. Количественное определение суммы экстрактивных веществ в цветках ноготков

Таблица 6.Количественное определение суммы каротиноидов в пересчете на -каротин (нефармакопейный метод)

Заключение

Углубляя информационные исследования по вопросам характеристики химического состава, анализа, медицинского применения лекарственного растительного сырья, содержащего витамины, было рассмотрено ботанико - морфологическое описание лекарственных растений, содержащих витамины, былы даны методы качественного и количественного определения сырья крапивы двудомной, видов шиповника и календулы лекарственной. Были изучены фармакологические свойства и применение витаминов в медицине.

Лекарственное растительное сырье, содержащее витамины, и лекарственные средства на его основе обладают широким спектром фармакологического действия. Основная масса витаминосодержащего лекарственного растительного сырья используется для получения суммарных препаратов, поливитаминных, кровоостанавливающих сборов.

Препараты листьев крапивы обладают гемостатическими свойствами, что связывают с наличием в растении витамина К и хлорофилла. Галеновые препараты крапивы оказывают стимулирующее влияние на сократительную активность матки. Препараты крапивы усиливают деятельность пищеварительных желез, уменьшают метеоризм, обладают желчегонными свойствами, снижают уровень холестерина в крови. Витамины, хлорофилл и соли железа стимулируют эритропоэз, повышают уровень гемоглобина и основной обмен, улучшают регенерацию слизистых оболочек, активизируют сердечно-сосудистую систему и газообмен. Крапива оказывает общетонизирующее действие.

Препараты плодов шиповника оказывают общеукрепляющее действие, стимулируют неспецифическую резистентность организма, усиливают регенерацию тканей и синтез гормонов, уменьшают проницаемость сосудов, принимают участие в углеводном и минеральном обмене, обладают противовоспалительными свойствами. Обладают иммуностимулирующим (в отношении гуморального и клеточного иммунитета) и желчегонным действием (обусловлено наличием органических кислот и флавоноидов).

Препараты из календулы оказывают противовоспалительное и ранозаживляющее действие как при наружном применении, так и при приеме внутрь. Бактерицидные свойства по отношению к стафилококкам и стрептококкам выражены незначительно. Сумма флавоноидов, каротиноидов и органических кислот обеспечивает противовоспалительный и капилляроукрепляющий эффекты препаратов, способствует повышению метаболической функции печени (улучшается состав желчи, понижается концентрация билирубина и холестерина), повышает секреторную и выделительную функции, стимулирует репаративные процессы желудочно-кишечного тракта.

Список литературы

1. Задорожный А.М., Кошкин А.Г., Соколов С.Я. Справочник по лекарственным растениям.- М.: Лесная промышленность, 1988. - 452 c.

2. Карпович В.Н., Беспалова Е.И. Фармакогнозия. - М.: Медицина, 1976. - 448 c.

3. Лекарственные растения государственной фармакопеи / Под ред. И.А. Самылиной, В.А. Северцева. - М.: "АНМИ", 2003. - 534 с.

4. Лекарственные растения России. Иллюстрационная энциклопедия. М.:Ээксмо, 2006. - 192 с.

5. Лекарственные растительные средства / под ред. А.П. Арзамасцева, И.А. Самылиной. - М.: ГЭОТАР-МЕД, 2002. - 288 с.

6. Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия: Учеб.пособие/ Под ред. Г.П. Яковлева и К.Ф. Блиновой. - СПб.: СпепцЛит.,2004. - 765с.

7. Лекарственные средства растительного происхождения: справочное пособие / под ред. О.Н. Денисенко и В.А. Челомбитько. - Пятигорск: Изд. ПятГФА, 2003. - 270 с.

8. Лукашук С.П., Орловская Т.В. Лекарственные растения и сырье, содержащие витамины: методические указания для студентов. - Пятигорск: Изд-во ПятГФА, 2008. - 68 с.

9. Мазнев Н.И. Энциклопедия лекарственных растений. 3-е изд., исп. И доп. - М: Мартин. 2004. - 496 с.

10. Машковский, М.Д. Лекарственные средства. - 16-е изд. перераб. и доп.- М.: Новая волна, 2012. - 1216 с.

11. Методы фармакогностического анализа лекарственного растительного сырья. В 2-х ч. ч.II. Химический анализ: Учебное пособие / Г.И. Калинкина [и др.].- Томск: СибГМУ, 2008. - 55 с.

12. Минделл Э. Справочник по витаминам и минеральным веществам. - М.: Эксмо, 2003. - 312 c.

13. Муравьева Д.А., Самылина И.А., Яковлев Г.П. Фармакогнозия: Учебник. - 4-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 2002. - 656 с.

14. Практикум по фармакогнозии: учеб. пособие для студ. вузов / под ред. В.Н. Ковалева. - Харьков: Изд-во НФаУ: Золотые страницы: МТК-Книга, 2004. - 512 с.

15. Растения для нас: справочное издание / К.Ф. Блинова [и др.]. - СПб.: Изд-во "Учебная книга", 1996. - 654 с.

16. Фармакогнозия. Атлас / Под. ред. Н.И. Гринкевич, Л.Н. Сафронич. - М.: Медицина, 1983. - 512 с.

17. Фармакопейная статья "Цветки ноготков".ОФС 42-0168-06.

18. Фитохимический анализ лекарственного растительного сырья: учебное пособие / под ред. В.А. Челомбитько. - Пятигорск: Изд. ПятГФА, 2005. - 173 с.

19. Химический анализ лекарственных растений / Под ред. Н.И. Гринкевич, Л.Н. Сафронич. - М.: Высшая школа, 1983. - 176 с.

Размещено на Allbest.ru