Метаболические показатели при пневмониях

Размещено на http://www.allbest.ru//

Размещено на http://www.allbest.ru//

ОПРЕДЕЛЕНИЯ, ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ

СОЭ - скорость оседания эритроцитов

СРБ - С-реактивный белок, белок острой фазы

ЛДГ - лактатдегидрогеназа

IgG - иммуноглобулин G

IgM - иммуноглобулин M

IgA - иммуноглобулин A

CD3 - Т-лимфоциты

CD4 - Т-хелперы

CD8 - цитотоксические Т-лимфоциты

CD16 - NK-клетки

CD19 - В-лимфоциты

РЕФЕРАТ

Дипломная работа изложена на 30 страницах машинописного текста. Работа состоит из введения, трех глав, выводов и списка литературы включающего 28 источников. Ключевые слова: пневмония, клинический, биохимический анализ крови, белки острой фазы, иммунный статус.

Данная исследовательская работа была проведена на базе ЛИС (лабораторно-информационная система) в клинико-диагностической лаборатории Государственного бюджетного учреждения здравоохранения «Специализированной клинической инфекционной больницы» (ГБУЗ «СКИБ». Материалом исследования являлась сыворотка крови 25 людей больных пневмонией в стадии обострения или ремиссии.

Среди показателей клинического анализа можно отметить: повышение СОЭ в три раза, повышение уровня лейкоцитов в два раза, сдвиг лейкоцитарной формулы влево. Из биохимических показателей можно отметить увеличение уровня СРБ до 40,3 мг/л, увеличение уровня фибриногена до 7,7 г/л, повышение в два раза активности ЛДГ.

Среди иммунологических показателей отмечено увеличение количества В-лимфоцитов в три раза. У пяти больных было отмечено повышение уровня Ig G, IgM. У десяти больных отмечено снижение уровня С3 комплемента, что может быть одной из причин определяющих тяжесть пневмоний.

ВВЕДЕНИЕ

Пневмония относится к наиболее распространенным заболеваниям у человека и является одной из ведущих причин смерти от инфекционных болезней. Согласно официальной статистике (Центральный научно-исследовательский институт организации и информатизации здравоохранения Минздравсоцразвития РФ), на 2010 г. в РФ было зарегистрировано 449673 случая заболевания пневмонией, что составило у лиц в возрасте больше восемнадцати лет - 3,88 ‰. Наиболее высокая заболеваемость пневмонией среди взрослых отмечена в Сибирском и Дальневосточном федеральных округах (4,31 и 4,40‰ соответственно), наименьшая - в Южном федеральном округе (3,09‰). Очевидно, однако, что эти цифры не отражают истинной заболеваемости пневмонией в России, которая согласно расчетам достигает 14-15‰, а общее число больных ежегодно превышает 1,5 млн. человек [Блюменталь, 2011].

Пневмония сопровождается развитием дистрофических процессов не только в тканях легких, но и форменных элементах крови, в частности нейтрофильных гранулоцитах. Легочная патология связана с увеличением в крови продуктов эндотоксикации, обусловленных метаболическими нарушениями на клеточном уровне. Эндотоксикоз - действие токсинов бактериального происхождения и влиянием активных эндогенных аминов, освобождающихся из поврежденных клеток и тканей. Своевременное и регулярное определение показателей в крови позволяет контролировать состояние организма, как в норме, так и при патологии.

Цель работы - изменение метаболических показателей в оценке степени тяжести и прогноза при пневмониях.

Задачи:

1. Изучение метаболических показателей клинического и биохимического анализов при пневмониях.

2. Проанализировать отклонение от нормы метаболических показателей при пневмониях.

3. Изучить состояние иммунного статуса у людей больных пневмонией.

В связи с этим, пневмония является актуальной проблемой, исследования ее представляет значительный интерес в пульмонологии, так как, несмотря на постоянно растущее количество новых антибактериальных препаратов, сохраняется высокая летальность пневмоний.

1. ОСНОВНЫЕ МЕТАБОЛИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ В ЛЕГКИХ

Метаболизм - это ряд химических реакций необходимых для поддержания жизни. Метаболические процессы позволяют организму расти и размножаться, сохранять свои структуры и отвечать на воздействия окружающей среды.

Легкие не только обеспечивают газообмен, но и выполняют важные метаболические функции. Одна из них состоит в образовании фосфолипидов, например дипальмитоилфосфатидилхолина, входящего в состав сурфактанта. Важную роль играет также синтез белков, так как структурная основа легких образована коллагеном и эластином. Известно, что при патологии в легких из лейкоцитов или макрофагов выбрасываются протеазы, вызывающие распад белков, в результате чего возникает эмфизема. Большое значение имеет также обмен углеводов, особенно выработка мукополисахаридов, входящих в состав бронхиальной слизи.

В легких происходит обмен многих веществ, влияющих на сосуды. Только через эти органы проходит вся кровь, следовательно, они идеально подходят для превращений, циркулирующих в ней веществ. Именно в легких сосредоточена значительная часть всех сосудистых эндотелиальных клеток организма.

Единственное известное нам вещество, активируемое в легочных сосудах -- ангиотензин I, полипептид, который превращается здесь в мощный сосудосуживающий агент -- ангиотензин II, примерно в 50 раз более активный, чем его предшественник. При прохождении через сосуды легких ангиотензин II не изменяется. Это превращение катализируется так называемым ангиотензинконвертирующим ферментом, локализованным в небольших углублениях на поверхности эндотелиальных клеток капилляров.

Имеются также данные о том, что легкие играют определенную роль в свертывании крови в нормальных и патологических условиях. Так, в их интерстиции присутствует большое количество тучных клеток, содержащих гепарин. Наконец, легкие могут вырабатывать особые иммуноглобулины, в частности, IgA, они выделяются в бронхиальную слизь и участвуют в борьбе с инфекцией. Значение некоторых метаболических процессов, происходящих в легких, пока неясно, однако совершенно очевидно, что эти органы, помимо функции газообмена, выполняют и другие важные задачи [Дж. Уэст,1988].

1.1 Белковый обмен

Белки - наиболее важные биологические вещества живых организмов. Они служат основным пластическим материалом, из которого строятся клетки, ткани и органы тела человека. Они выполняют ряд важнейших биологических функций. Вся совокупность обмена веществ в организме (дыхание, пищеварение, выделение) обеспечивается деятельностью ферментов, которые являются белками. Все двигательные функции организма обеспечиваются взаимодействием сократительных белков -- актина и миозина.

Поступающий с пищей из внешней среды белок служит пластической и энергетической целям. Пластическое значение белка состоит в восполнении и новообразовании различных структурных компонентов клетки. Энергетическое значение заключается в обеспечении организма энергией, образующейся при расщеплении белков.

В тканях постоянно протекают процессы распада белка с последующим выделением из организма неиспользованных продуктов белкового обмена и наряду с этим -- синтез белков. Таким образом, белки организма находятся в динамическом состоянии: из-за непрерывного процесса их разрушения и образования происходит обновление белков, скорость которого неодинакова для различных тканей.

1.2 Исследования показателей белкового обмена

Белки осуществляют процессы обмена веществ. Показатели клинического и биохимического анализов имеют белковую природу, поэтому их условно можно разделить по функциям белка.

Клетки крови - эритроциты, лейкоциты, лимфоциты и т. д. можно отнести к пластической функции белков, так как они входят в состав всех клеток организма и межтканевых структур. Эта функция состоит в обеспечении роста и развития организма за счет процессов биосинтеза.

Лактатдегидрогеназа (ЛДГ) - это белок-фермент. Ферментная функция, которой, определяется участием в реакциях гликолиза. Она катализирует превращение лактата в пируват.

Защитная функция белков состоит в образовании иммунных белков -- антител (иммуноглобулины, cd-клетки). Белки способны связывать токсины и яды а также обеспечивать свертываемость крови (фибриноген). Также сюда можно отнести белки острой фазы - СОЭ, СРБ, серомукоид.

Транспортная функция заключается в переносе кислорода и двуокиси углерода эритроцитным белком гемоглобином, а также в связывании и переносе некоторых ионов (железо, медь, водород), лекарственных веществ, токсинов.

1.3 Исследования липидного и углеводного обменов

Липидный обмен - это выработка и расщепление жиров (липидов) в организме. Расщепление жиров осуществляется в основном в печени и в жировой ткани и имеет сложную регуляцию. Липидный обмен в легких осуществляется при помощи больших альвеолярных клеток, захватывающих нейтральные жиры, фосфолипиды и холестерин. Накоплено много данных о том, что основной функцией больших альвеолярных клеток является продукция сурфактанта (поверхностно-активного вещества), обеспечивающего стабилизацию воздушных просветов альвеол и предотвращающего их слипание. Также он выполняет бактерицидную и иммуномодулирующую функции.

Углеводы участвуют во многих метаболических процессах, но прежде всего они являются основными поставщиками энергии. Однако неправильно сводить функцию углеводов только к энергетическому обеспечению процессов жизнедеятельности организма. Следует отметить и структурную роль углеводов. В комплексе с белками и липидами они входят в состав мембраны эритроцита, легочного сурфактанта. А также углеводы присутствуют в бронхиальной слизи, которая выполняет барьерную функцию и способна связывать и транспортировать микроаргонизмы.

1.4 Характеристика пневмонии

Пневмония - острое инфекционное воспаление нижних дыхательных путей с обязательным вовлечением легочной ткани (альвеол, бронхов, бронхиол).

В настоящее время выделяют несколько разновидностей пневмоний:

1) Внебольничная пневмония - самый распространенный вид заболевания.

2) Нозокомиальная или госпитальная пневмония. К данной форме относят заболевание, развившееся при нахождении больного в стационаре более 72 часов. При этом при поступлении пациент не имел клинических проявлений пневмонии.

3) Аспирационная пневмония - возникает в результате попадания в дыхательные пути пищи, воды, инородных предметов.

4) Атипичная пневмония. Разновидность заболевания, вызываемая атипичной микрофлорой (хламидиями, микоплазмами, легионеллами и т.д.)

[Ковалева, Кулаков, 2004].

Выделяют также:

Очаговую пневмонию -- она занимает небольшой очаг лёгкого (бронхопневмония -- респираторные отделы плюс бронхи)

Сегментарную пневмонию -- распространяется на один или несколько сегментов лёгкого.

Долевую пневмонию -- захватывает долю лёгкого. Классическим примером долевой пневмонии является крупозная пневмония -- преимущественно альвеолы и прилежащий участок плевры.

Сливную пневмонию -- слияние из мелких очагов более крупные.

Тотальную пневмонию -- распространяется на всё лёгкое.

Кроме того, пневмония может быть односторонней, если поражено

только одно лёгкое, и двусторонней, если больны оба лёгких [Мавродий, 2009;Синопальников, 2000].

Пневмония может быть первичной, если она выступает как самостоятельное заболевание, и вторичной, если она развилась на фоне другой болезни, например, вторичная пневмония на фоне хронического бронхита.

Пневмония это, прежде всего, бактериальное заболевание. Основные возбудители пневмонии: пневмококк (Streptococcus pneumoniae), стафилококк (Staphylococcus aureus), гемофильная палочка (Haemophilus influenzae) а также «атипичные» инфекции (Chlamydya pneumoniae, Mycoplasma pneumoniae, Legionella pneumoniae).

Реже причиной острой пневмонии могут быть (Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter и т.д.). Они чаще встречаются у пациентов с тяжелыми сопутствующими заболеваниями, у у больных с ослабленной иммунной системой [Синопальников, 2010].

Пусковым фактором развития пневмонии могут быть различные вирусные инфекции. Они вызывают воспаление верхних дыхательных путей и обеспечивают «комфортные условия» для развития бактериальных возбудителей.

Возможны три пути проникновения в легкие возбудителей пневмоний: бронхогенный, гематогенный и лимфогенный.

Основные механизмы развития пневмонии:

1. Внедрение инфекции в легочную ткань чаще бронхогенным, реже -- гематогенным или лимфогенным путем.

2. Снижение функции системы местной бронхопульмональной защиты.

3. Развитие под влиянием инфекции воспаления в альвеолах и распространение его через межальвеолярные поры на другие отделы легких.

4 Развитие сенсибилизации к инфекционным агентам, формирование иммунных комплексов, взаимодействие их с комплементом, выделение медиаторов воспаления.

5. Повышение агрегации тромбоцитов, нарушения в системе микроциркуляции. метаболический пневмония биохимический

6. Активация перекисного окисления липидов, выделение свободных радикалов, дестабилизирующих лизосомы и повреждающих легкие.

7. Нервно-трофические расстройства бронхов и легких.

Характер морфологических изменений в легких определяется типом возбудителя, реактивностью организма, сопутствующими заболеваниями. В анализе крови часто определяются гиперлейкоцитоз (более 10 10^9/л), нейтрофилез с палочкоядерным сдвигом, у 1/3 больных - анэозинофилия, у всех значительно повышены СОЭ и содержание острофазовых белков крови.

Среди клинических показателей имеют значение общие признаки (слабость, вялость, адинамия, снижение аппетита, лихорадка, нарушенный уровень сознания). Респираторные симптомы (кашель, мокрота, одышка, боль при дыхании). Физикальные данные - изменение перкуторного звука, ослабленное или жесткое дыхание, хрипы, крепитация, гипотония, тахикардия [Григорьев, 2002].

Прогноз при острой пневмонии в наше время относительно благополучен, однако, знание основных диагностических критериев этого заболевания, ведущих принципов дифференциальной диагностики, ранних осложнений, а также лечебной тактики крайне необходимо врачам скорой помощи.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Материал исследования

Материалом клинико-биохимических исследований являлась сыворотка крови. Всего было обследовано 25 человек больных пневмонией.

Подготовка пациента к сдаче крови очень важна: кровь на исследование наличия инфекций сдается натощак (в утренние часы или спустя 4-5 часов после последнего приема пищи днем или вечером, причем этот последний прием не должен быть обильным, а продукты с высоким содержанием жиров следует исключить из рациона и накануне сдачи анализа). Результаты исследований на наличие инфекций зависят от периода инфицирования и состояния иммунной системы, поэтому отрицательный результат полностью не исключает инфекции. В сомнительных случаях целесообразно провести повторный анализ спустя три - пять дней.

Исследование крови на наличие антител классов IgG, IgM, IgA к возбудителям инфекций проводили не ранее 10-14 дня с момента заболевания, так как выработка антител иммунной системой начинается в этот срок.

Перед сдачей общего анализа крови последний прием пищи должен быть не ранее, чем за три часа до забора крови, так как после еды в крови повышается количество лейкоцитов. Лейкоциты являются показателем воспалительного процесса. На показатели красной крови (гемоглобин и эритроциты) прием пищи не влияет.

Необходимо отметить, что на сегодняшний день анализ мокроты используют очень редко, так как результаты посева мокроты не являются точными из-за загрязненности ее содержимым носоглотки и полости рта. Поэтому на практике в большинстве случаев возбудитель пневмонии остается не установленным [Маркина, 2006].

2.2 Методы исследования

Основными методами исследования являлись клинический и биохимический анализы крови. Производилось взятие крови у больных пневмонией для определения показателей необходимых для установления диагноза. Клинический анализ крови проводился на гематологическом анализаторе Sysmex kx-21N. Он представляет собой полностью автоматизированную систему, не требует дополнительной пробоподготовки и работает в режиме цельной крови. После нажатия клавиши запуска анализатор автоматически отбирает, разбавляет и анализирует пробу цельной крови, выполняя измерения по 19 параметрам.

Для измерения количества эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов используется метод прямого абсолютного счета, который не требует калибровки.

Определение уровня гемоглобина происходит с помощью безцианидного фотометрического метода, расчет производится по калибровочному графику.

Уровень показателя гематокрита определяется накопительным импульсным методом (по накоплению высоты эритроцитарного столба). Для расчета результатов используется калибровочный график.

В анализатор встроена специальная программа для контроля среднего значения и контроля по Левей-Дженнингсу.

Биохимический анализ крови проводился на автоматическом селективном биохимическом анализаторе Conelab-20. Он рассчитан на выполнение фотометрических, турбодиметрических, потенциометрических тестов. Открытая реагентная система позволяет гибко программировать и хранить в памяти анализатора до 500 различных методик. С помощью Conelab-20 определяют показатели в крови субстратов, ферментов, специальных белков, микроэлементов, электролитов. Для расчета результатов используют калибровочные графики [Камышников, 2001].

2.2.1 Клинический анализ крови

Клинический анализ крови - анализ, позволяющий оценить содержание гемоглобина в системе красной крови, количество эритроцитов, количество лейкоцитов и тромбоцитов. Также в него входят лейкоцитарная формула и скорость оседания эритроцитов (СОЭ). С его помощью можно выявить анемии, воспалительные процессы, состояние сосудистой стенки и многие другие заболевания.

Общий анализ крови помогает определить тяжесть и фазу процесса пневмонии. Выделяют следующие изменения показателей в общем анализе крови при пневмонии:

- при легком течении пневмонии в анализе крови умеренный лейкоцитоз и сдвиг лейкоцитарной формулы влево, повышена СОЭ;

- при средней тяжести - выраженный лейкоцитоз со сдвигом влево до юных форм, повышена СОЭ;

- при тяжелом течении в анализе высокий лейкоцитоз, токсическая зернистость нейтрофилов, резкий сдвиг лейкоцитарной формулы влево вплоть до миелоцитов, снижение числа эозинофилов, лимфоцитов, очень высокая СОЭ. В крови также возможна анемия при длительной интоксикации; увеличение количества эозинофилов более 5 % является ранним и характерным признаком аллергизации и аллергии.

- при благоприятном течении пневмонии в анализе крови перед кризом нарастает количество эозинофилов и моноцитов;

- отсутствие лейкоцитоза при анализе крови наблюдается у ослабленных и пожилых больных и является прогностически неблагоприятным признаком [ Метельский, Бова, 2005].

Скорость оседания эритроцитов определяют с помощью метода Панченкова. Принцип метода заключается в том, что в пробирке с кровью стабилизированной цитратом натрия, эритроциты оседают с различной скоростью в зависимости от физико-химических свойств крови. Выражается данная величина в мм/ч. В норме СОЭ составляет 0-19мм/ч [Царев, 2005]. (Таблица 1 - Нормы показателей общего анализа крови).

Концентрацию гемоглобина определяют модифицированным гемоглобинцианидным методом. Принцип метода: гемоглобин крови при взаимодействии с железосинеродистым калием (красная кровяная соль) окисляется в метгемоглобин (гемиглобин), образующий с ацетонциангидрином гемиглобинцианид (цианметгемоглобин), интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации гемоглобина в крови и измеряется фотометрически при длине волны 540 (500-560) нм. Норма составляет: 120-174 г/л. (таблица 1 - Нормы показателей общего анализа крови).

Таблица 1 - Нормы показателей общего анализа крови [http://pomni.info/pomni/home/view/med_normi.html]

№	Показатель	Референтное значение
1	Гемоглобин	120-174г/л
2	Эритроциты	4-5,5 10^12/л
3	Лейкоциты	5-10 10^9/л
4	СОЭ	0-19 мм/г
5	Гематокрит	36-52%
6	Эозинофилы	2-5%
7	Палочкоядерные нейтрофилы	2-8%
8	Сегментоядерные нейтрофилы	37-75%
9	Лимфоциты	19-45%
10	Моноциты	2-10%

Подсчет эритроцитов проводится в счетной камере. Принцип метода заключается в подсчете эритроцитов под микроскопом в определенном количестве квадратов счетной сетки с последующим пересчетом на 1 мкл крови, исходя из объёма квадратов и разведения крови. Определение количества лейкоцитов проводят после лизирования эритроцитов в 100 больших квадратах счетной сетки и пересчитывают на 1 л крови, исходя из объема квадратов и разведения крови. Подсчет лейкоцитов должен быть произведен в течение 2-4 ч. после взятия крови.

Лейкоциты в зависимости от плотности распределяются в мазках неравномерно: нейтрофилы, базофилы, эозинофилы - по периферии, ближе к краям; моноциты, лимфоциты - ближе к середине. При подсчёте лейкоцитов используют методы Шиллинга или Филиппченко. По Шиллингу определяют количество лейкоцитов в четырёх участках мазка (четырёхпольный метод). Всего в мазке подсчитывают 100 - 200 клеток. Метод Филиппченко состоит в том, что мазок мысленно делят на три части: начальную, среднюю и конечную (трёхпольный метод). Подсчёт ведут по прямой линии поперёк мазка от одного его края к другому. В каждой части подсчитывают одинаковое количество клеток. Всего учитывают 100 - 200 лейкоцитов. Обнаруженные клетки записывают в специальную таблицу дифференциального подсчёта (сетка Егорова) [Луговская, 2002].

2.2.2 Биохимический анализ крови

Биохимический анализ крови показывает повышение серомукоида, С-реактивного белка, фибриногена (даже более 10 г/л при тяжелом течении), общей ЛДГ.

Серомукоиды: фракция углеводно - белковых комплексов, состоит из восьми индивидуальных белков, относящихся к белкам «острой фазы». Методы определения серомукоида основаны на осаждении белков сыворотки крови 1,8 М раствором перхлорной кислоты (HCIO4), выделения серомукоида из фильтрата с помощью фосфорно-вольфрамовой кислоты и последующем количественном определении его по одному из компонентов: белку, гексозам или тирозину. В норме содержание серомукоидов составляет 0,22 - 0,28 г/л. (таблица 2 - Нормы показателей биохимического анализа крови). У больных с пневмонией количество серомукоидов в крови возрастает до 1г/л [Камышников, 2009].

Так же белком «острой фазы» является СРБ, он способен очень быстро реагировать на появившийся воспалительный процесс, в норме СРБ не превышает 5 мг/л [Сидельникова, 2006]. (Таблица 2 - Нормы показателей биохимического анализа крови).

Таблица 2 - Нормы показателей биохимического анализа крови [http://pomni.info/pomni/home/view/med_normi.html]

№	Показатель	Референтное значение
1	СРБ	0-5 мг/л
2	Ревматоидный фактор	0-8 Ме/л
3	Серомукоид	0,22-0,28 г/л
4	ЛДГ	200-450 Ед/л
5	Фибриноген	2-4 г/л

Одной из методик определения фибриногена является хронометрический метод по Клауссу; Определяется время свертывания разбавленной цитратной плазмы избытком тромбина. Время свертывания при этом пропорционально концентрации фибриногена, которую определяют по калибровочному графику.

Для определения общей активности ЛДГ в сыворотке крови используют две группы методов:

Спектрофотометрические, основанные на прямом оптическом тесте Варбурга: различия в разности поглощения окисленной и восстановленной форм НАД.

Калориметрические:

Динитрофенилгидрозиновые, базирующиеся на исследовании содержания пирувата с помощью 2,4 - динитрофенилгидрозина; из методов этой группы наиболее точным и чувствительным является метод Нательсона, состоящий в определении концентрации непрориагировавшего в реакции пирувата. Однако вследствие нестабильности раствора пировиноградной кислоты метод не получил широкого распространения. Метод Севела и Товарена, заключающийся в определении количества образовавшегося пирувата.

Редоксиндикаторные методы - точны и просты технически, в них используется способность некоторых веществ (индикаторов) менять цвет в реакциях окисления-востановления. Для определения изоферментов лактатдегидрогеназы наиболее распространено электрофоретическое разделение на ацетате целлюлозы и агарозе. [http://biokhimiya/ru/enzymes/lactatdg.html]

Иммунологические исследования

В ходе проведения иммунологического анализа крови комплексно оцениваются защитные функции организма. Оценивается количество и функция иммунных клеток крови, присутствие тех или иных антител. Иммунный статус -- это комплексный показатель состояния иммунной системы, это количественная и качественная характеристика состояния функциональной активности органов иммунной системы и некоторых неспецифических механизмов противомикробной защиты.

Существуют скрининговые тесты оценки иммунного статуса, которые позволяют быстро оценить основные показатели работы иммунной системы. Стандартный скрининговый тест включает:

- Подсчет абсолютного количества лейкоцитов, нейтрофилов, лимфоцитов и тромбоцитов.

- Определение концентрации сывороточных иммуноглобулинов различных классов (IgG, IgA и IgM).

- Определение гемолитической активности системы комплемента CH50.

- Проведение кожных тестов гиперчувствительности замедленного типа.

Количественное определение сывороточных иммуноглобулинов -- один из основных тестов в оценке гуморального звена иммунитета. Концентрация сывороточных иммуноглобулинов отражает функциональное состояние клеточного звена иммунитета.

Таблица 3 - Основные показатели иммунного статуса [http://pomni.info/pomni/home/view/med_normi.html]

показатель	Содержание, мг/дл	Показатель	Содержание, %
IgM	40-230	CD3+ (Т-лимфоциты)	48-80
IgG	700-1600	CD4+ (Т-хелперы)	33-58
IgA	70-400	CD8+ (цитотоксические Т-лимфоциты)	11-36
С-3 комплемент	90-180	CD16+ (NK-клетки)	8-19
С-4 комплемент	10-40	CD19+ (В-лимфоциты)	5-10

Определение содержания иммуноглобулинов (IgG, IgA, IgM) по Манчини. Исследуемую сыворотку помещают в лунки агарового геля, который содержит антитела к иммуноглобулинам одного из классов IgG, IgA или IgM в известной концентрации. Иммуноглобулины, диффундирующие из лунок в агар, при взаимодействии с соответствующими антителами образуют кольца преципитации, размер которых прямо пропорционален содержанию иммуноглобулина. Референтные значения приведены в таблице 3.

Более детальное изучение иммунного статуса включает изучение количества и функциональной активности клеточного и гуморального звеньев иммунной системы:

- Исследование фагоцитарной функции.

- Исследование системы комплемента.

- Исследование Т-системы иммунитета.

- Исследование В-системы иммунитета.

Такое более подробное исследование иммунного статуса проводится в несколько этапов. Вначале делают ориентировочные исследования для выявления значительных дефектов иммунной системы (1 уровень), а затем может понадобиться и более подробное изучение (2 уровень), основываясь на данных предыдущего исследования. [Караулов А. В. 2002]

2.3 Статистическая обработка данных

Для обработки результатов мы использовали среднюю арифметическую величину () к каждой группе, стандартная ошибка (±m) проводилась программой Microsoft office Excel 2007. Показатель достоверности (Р), достоверность различий по критерию Стьюдента (t) для одноименных показателей подсчитывалась на сайте: [http://www/psycho-ok.ru/ statistics/ student/]. В полученных данных различия считались достоверными при Р ?0,05.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1 Изменение показателей белкового обмена при пневмонии

Клинико-биохимическое исследование было проведено 25 больными пневмонией в возрасте от 26 до 72 лет. Им были проведены общие анализы крови и биохимические анализы крови. Всем больным ставился диагноз: неуточненная пневмония, т. к. анализ мокроты на возбудителя пневмонии не проводился.

Из 25 обследованных больных у семи наблюдался лейкоцитоз, и только у четырех наблюдалась лейкопения. Лейкопения обычно считается неблагоприятным признаком и наблюдается у ослабленных и пожилых больных.

При подсчете лейкоцитарной формулы выяснилось, что у большинства больных наблюдается сдвиг лейкоцитарной формулы влево.

Таблица 4 - Клинические показатели крови у больных пневмонией

n

Гемоглобин г/л

Эритроциты 10^12/л

Лейкоциты 10^9/л

СОЭ мм/ч

Гематокрит %

Лейкоцитарная формула %

эозинофилы

палочкоядерные нейтрофилы

сегментоядерные нейтрофилы

Лимфоциты

моноциты

Больные пневмонией

25

129,24 ±16,87

4,39 ±0,49

7,72 ±2,73

28,08 ±12,0

38,4 ±4,74

2,32 ±0,97

3,84 ±2,15

60,24 ±11,18

27,36 ±10,03

6,36 ±3,26

Контрольная группа

10

143,9 ±12,92

4,65 ±0,32

6,0 ±0,62

12,0 ±3,6

43,47 ±4,21

2,9 ±0,9

3,4 ±1,08

53,5 ±8,2

31,2 ±6,4

4,7 ±1,7

Достоверность различий

P < 0,01

P ? 0,01

P < 0,05

P < 0,05

P < 0,01

P ? 0,01

P ? 0,05

P < 0,05

P < 0,01

P < 0,05

Норма (литературные данные)

120 - 174

4 - 5,5

5 - 10

0 - 19

36 - 52

2 - 5

2 - 8

37 - 75

19 - 45

2 - 10

А также у семи - эозинопения и лимфопения, что может свидетельствовать о тяжелом течении пневмонии.

У большинства обследованных значительно повышена скорость оседания эритроцитов (СОЭ), которая при тяжелом течении болезни может достигать 30 - 48 мм/ч.

Гемоглобин и эритроциты у большинства больных находились в норме, а у шести пациентов наблюдалась анемия, снижение гемоглобина до 83г/л и одновременное уменьшение количества эритроцитов до 2,81 10^12/л. А также у восьми наблюдалось снижение показателя гематокрита.

Всем больным помимо клинического анализа обязательно проводился биохимический анализ. Из данных таблицы пяти можно увидеть признаки воспалительного процесса характеризующегося повышением белков «острой фазы». У всех больных наблюдалось повышение уровня СРБ и уровня серомукоида.

Таблица 5 - Биохимические показатели крови у больных пневмонией

	n	СРБ мг/л	Ревмотоидный фактор МЕ/л	Серомукоид г/л	ЛДГ Ед/л	Фибриноген г\л
Больные пневмонией	25	20,02 ±11,85	38,20 ±14,68	0,35 ±0,14	396,28 ±92,51	4,98 ±1,25
Контрольная группа	10	2,57 ±1,40	4,10 ±1,78	0,26 ±0,03	324,80 ±57,44	2,89 ±0,49
Достоверность различий		P<0,05	P<0,05	P?0,05	P<0,05	P<0,05
Норма (литературные данные)		0 - 5	0 - 8	0,22 - 0,28	200 - 450	2 - 4

А также у семнадцати больных мы выявили повышение фибриногена. При пневмонии определение фибриногена необходимы повторные динамические исследования, которые лишь при таком подходе и их оценке приобретает диагностическое значение.

У многих повышен показатель ревматоидного фактора, что может свидетельствовать о возрасте больных, т. к. у людей пожилого возраста часто наблюдается повышение ревматоидного фактора.

Отмечена зависимость между выраженностью воспалительного процесса в легких и гиперферментацией. Наиболее информативный показатель при пневмонии является ЛДГ. Из результатов исследования у восьми больных из 25 наблюдалось повышение ЛДГ, что может говорить о затяженности болезни и выраженности воспалительного процесса.

3.2 Определение иммунного статуса

Иммунологическое исследование было проведено 20 больным пневмонией проходящим стационарное лечение. Им был проведен полный анализ иммунного статуса.

Из двадцати больных у восемнадцати наблюдается повышение показателя CD19 (B-лимфоциты), это говорит об активации реакции гуморального иммунитета, в конечном итоге происходящей в сыворотке крови, и обеспечивающейся В-лимфоцитами. Распознав чужеродный агент, они дифференцируются в плазматические клетки, производящие антитела - сывороточные белки (иммуноглобулины). У пяти пациентов мы наблюдали значительное повышение Ig G и Ig M. Эти белки связываются с чужеродным агентом, блокируя его биологическую активность, и удаляют его из организма - это прямое действие иммуноглобулинов.

У семи обследованных больных наблюдается снижение показателя CD8 (Т-киллеры). Эти клетки полностью лизируют чужеродные клетки, покрытые иммуноглобулинами (Ig G). Также иммуноглобулины, связываясь

с антигенами, активируют систему комплемента - набор из одиннадцати сывороточных белков.

Таблица 6 - Показатели иммунного статуса у больных пневмонией

n

Ig A, мг/дл

Ig M, мг\дл

Ig G, мг/дл

C3 компл., мг/дл

С4 компл., мг/дл

СD3, %

СD4, %

СD8, %

СD16, %

СD19, %

Больные пневмонией

20

203,2 ±86,34

218,1 ±91,43

1463,9 ±427, 28

316,8 ±54,24

57,63 ±4,56

74,68 ±4,51

39,37 ±6,05

15,38 ±7,68

10,56 ±3,34

29,25 ±7,82

Контрольная группа

10

181,3 ±58,36

112,9 ±41,88

1131,9 ± 136, 68

81,2 ±17,44

26,6 ±5,32

74,27 ±4,97

38,56 ±7,24

17,49 ±4,11

12,01 ±3,03

12,56 ±2,56

Достоверность различий

P < 0,05

P < 0,05

P < 0,05

P < 0,05

P< 0,05

P ? 0,05

P ? 0,05

P < 0,01

P < 0,01

P < 0,05

Норма (литературные данные)

70 - 400

40 - 230

700 - 1600

90 - 180

10 - 40

48 - 80

33 -58

11 - 36

8 - 19

5 - 10

У половины больных мы выявили снижение показателя С3 комплемента. При тяжелых осложненных формах пневмоний С3 длительно остается на низком уровне, можно предположить, что у некоторых больных отсутствие нарастания С3 обусловлено недостаточной его продукцией в течение инфекционно-воспалительного процесса, что и является одной из причин, определяющих тяжесть пневмонии и развитие осложнений.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Данная исследовательская работа была проведена на базе ЛИС (лабораторно-информационная система) с 2011 по 2012 г. в клинико-диагностической лаборатории Государственного бюджетного учреждения здравоохранения «Специализированной клинической инфекционной больницы» (ГБУЗ «СКИБ». Материалом исследования являлись сыворотка крови людей больных пневмонией. Клинико-биохимические исследования были проведены 25 больным возраста от 26 до 72 лет. В иммунологическом исследовании участвовали 20 больных находящихся на стационарном лечении.

Согласно данным клинического анализа можно отметить изменения показателей крови относительно нормы: повышение уровня СОЭ в три раза, повышение количества лейкоцитов в два раза, сдвиг лейкоцитарной формулы влево. У семи больных наблюдалось снижение количества лейкоцитов, эозинопения, лимфопения, что говорит о тяжелом течении пневмонии. У шести была отмечена анемия, одновременное снижение гемоглобина и эритроцитов.

Из биохимических показателей можно отметить увеличение показателя СРБ до 40,3 мг/л, увеличение фибриногена до 7,7 г/л, повышение уровня в два раза ЛДГ.

Иммунологическое исследование свидетельствует о тяжелом течении пневмонии и нарушении иммунного ответа. Иммунный ответ протекает в виде каскадной реакции. Сначала в клетках печени и косном мозге образуется В-лимфоциты не дифференцированные клетки. Почти у всех больных мы отметили их увеличение в три раза. Далее они производят иммуноглобулины, у некоторых уже на данном этапе происходят нарушения, только у пяти больных было отмечено повышение Ig G, IgM. Затем иммуноглобулины связываются с системой комплемента. В нашем исследовании у большинства именно на этом этапе происходит сбой, у десяти больных мы отметили снижение С3 комплемента, он синтезируется в недостаточном количестве, что является одной из причин определяющих тяжесть пневмоний.

В результате работы были сделаны следующие выводы:

Среди показателей клинического анализа можно отметить: повышение СОЭ в три раза, повышение уровня лейкоцитов в два раза, сдвиг лейкоцитарной формулы влево. У семи больных с тяжелым течением пневмонии наблюдалось снижение уровня лейкоцитов, а так же эозинопения, лимфопения. У шести больных была отмечена анемия, при одновременном снижение уровня гемоглобина и уровня эритроцитов.

Из биохимических показателей можно отметить увеличение уровня СРБ до 40,3 мг/л, увеличение уровня фибриногена до 7,7 г/л, повышение в два раза активности ЛДГ.

Среди иммунологических показателей отмечено увеличение количества В-лимфоцитов в три раза. У пяти больных было отмечено повышение уровня Ig G, IgM. У десяти больных отмечено снижение уровня С3 комплемента, что может быть одной из причин определяющих тяжесть пневмоний.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

Блюменталь И.Я. Пневмония, связанная с оказанием медицинской помощи, и внебольничная пневмония: сравнительная характеристика, оптимизация лечения / Вестник современной клинической медицины. Казань: Медицина, 2011. Т. 4. № 1. С. 52 -55.

Григорьев А. В., Гуркин Ю. А., Добрянков И. В. Справочник болезней. М: 2002. 576с.

Дж. Уэст Физиология дыхания / перевод с английского канд. мед. наук Н. Н. Алипова // под редакцией д-ра биол. наук А. М. Генина. М.: Мир, 1988. С.53 - 56

Заболеваемость населения России в 2010 году: Статистические материалы. Часть III. М., 2011. 94 - 98с. [Электронный ресурс]. - URL:http//www. mednet.ru

Замотаев И. П. Острые пневмонии: болезни органов дыхания / Под. ред. Н.Г. Палеева. М.: Медицина, 1989. Т.2. С. 17 -102.

Зубков М. Н., Зубков М. М. Госпитальные пневмонии: этиология, патогенез, диагностика, профилактика и лечение / Consilium Medicum, М.: 2000. Том 2. №1. С. 17-22.

Камышников В. С. Техника лабораторных работ. Минск: Белорусская наука, 2001. 286с.

Камышников В. С. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике / 3e изд. М.: медпресс-информ, 2009. 896с.

Караулов А.В. Клиническая иммунология и аллергология. М.: МИА, 2002. 651с.

Ковалева Л.И., Кулаков Ю.В. Актуальность термина «вторичная пневмония» в современной классификации / Бюллетень физиологии и патологии дыхания. М.: 2004. № 16.С. 47 -51.

Кочегарова Е.Ю., Колосов В.П. Прогнозирование течения внебольничной пневмонии / Бюллетень физиологии и патологии дыхания. М.: 2010. № 37. С. 42 -46.

Луговская, С.А. Лабораторная гематология. М.: 2002. 114 с.

Мавродий В.М. Пульмонология: глобальный альянс. Донецк: 2009. 80с.

Маркина М. В. Общеклинические анализы крови, мочи, их показатели, референтные значения, изменение параметров при патологии. Новосибирск: 2006. 115с.

Метельский С. М., Бова А. А. Внебольничная пневмония / Медицинские новости. Минск: УП ЮПОКОМ, 2005. №6.С. 23 -35.

Молчанов Н.С. и Ставская В.В. Клиника и лечение острых пневмоний. М.: Медицина, 1971. 295с.

Никонова Е.В., Чучалин А.Г., Черняев А.Л. Пневмонии, эпидемиология, классификация, клинико-диагностические аспекты / Русский мед. Журнал, М.: 1998. Т.5. №17. С. 1095-1099.

Новожилова О. С. Биохимические показатели крови при бронхолегочных заболеваниях: Автореф.дис. канд.биол.наук. Уфа: 2007. 23с.

Нормы медицинских показателей [Электронный ресурс]. - URL: http//www.pomni.info/pomni/home/view/med_normi.html

Острая пневмония, медицинский портал, 2009-2011, http:// med@cureplant.ru

Приходько В. С. Справочник по детской пульмонологии. Киев: 1987. 538с.

Ронин В.С., Старобинец Г.М. Руководство к практическим занятиям по методам клинических лабораторных исследований / Учеб. Пособие. 4-е изд.- перераб. И доп. М.: Медицина, 1989. 320с.

Сидельникова В. И., Лифшец В. М. Биохимические анализы в клинике. М.: 2006. 210с.

Сильвестров В.П., Федотов П.И. Пневмония. М.: Медицина, 1987. 245с.

Синопальников А. И., Чучалин А. Г. Внебольничная пневмония у взрослых: практические рекомендации по диагностике, лечению и профилактике / пособие для врачей. М.: 2010. 106c.Размещено на Allbest.ru

...