Серологический контроль специфической профилактики лептоспироза крупного рогатого скота

Размещено на http://www.allbest.ru/

1

Серологический контроль специфической профилактики лептоспироза крупного рогатого скота

Горковенко Наталья Евгеньевна

д. б. н., профессор, РИНЦ SPIN-код 2648-5641

Макаров Юрий Анатольевич

д. в. н., профессор, академик РАН, РИНЦ SPIN-код 1713-0784

Кубанский государственный аграрный университет, Краснодар, Россия

В статье представлены результаты изучения иммунореактивности телочек при вакцинации против лептоспироза. Выявлена зависимость длительности циркуляции антител в крови вакцинированных телочек от степени интенсивности иммунного ответа на введение противолептоспирозной вакцины. Изучение динамики титров антител у телочек двухмесячного возраста после иммунизации выявило слабый иммунный ответ на введение вакцины, выражающийся либо в полном отсутствии антител, либо в наличии антител в невысоких титрах к лептоспирам одной из серогрупп, входящих в состав вакцины. Предложено использование иммуномодулирующих препаратов для повышения эффективности иммунизации телочек против лептоспироза. Установлено, что применение иммуномодулятора «Риботан» при вакцинации двухмесячных телочек против лептоспироза повышает эффективность иммунизации на 55,6%

Ключевые слова: ЛЕПТОСПИРОЗ, КРУПНЫЙ РОГАТЫЙ СКОТ, РЕАКЦИЯ МИКРОАГГЛЮТИНАЦИИ, ИММУНИЗАЦИЯ, ИММУНОМОДУЛЯТОР

Наиболее эффективной и экономичной мерой борьбы с лептоспирозом, являющимся одним из самых распространенных зооантропонозов, считается вакцинация. В настоящее время в ветеринарной практике для профилактики лептоспироза крупного рогатого скота вакцинируют телочек, начиная с двухмесячного возраста, затем через 6 месяцев их подвергают ревакцинации. Как правило, иммунизация осуществляется без предварительного исследования сыворотки крови животных в РМА и контроля напряженности поствакцинального иммунитета у привитых животных. К тому же достаточно противоречива картина иммунореактивности животных на фоне иммунизации против лептоспироза. По данным некоторых исследователей [1] у животных, вакцинированных против лептоспироза, специфические антитела не должны выявляться в РМА через 2-3 месяца после иммунизации. Однако есть противоположные сообщения о том, что специфические антитела у вакцинированного крупного рогатого скота в диагностических титрах сохраняются на протяжении более длительного периода времени [2]. Поэтому исследования в этом направлении представляют научный и практический интерес.

Известно, что адекватный ответ на введение антигенов возможен лишь при физиологически полном функционировании иммунной системы, а молодняк 1-2 месяцев, по мнению некоторых авторов, не способен формировать против лептоспироза активный иммунитет достаточной напряженности и продолжительности [1, 3, 4]. Кроме того, отсутствие в отечественной ветеринарной практике методов профилактики лептоспироза с учетом динамики напряженности противолептоспирозного иммунитета и иммунного фона у крупного рогатого скота предопределило проведение настоящего исследования.

Цель исследования состояла в изучении эффективности иммунизации молодняка крупного рогатого скота против лептоспироза и предложении мер по ее повышению.

Материал и методы исследования. Исследования проведены в опытном производственном хозяйстве ВНИИ сои (с. Лозовое, Амурской области) на благополучном по инфекционным заболеваниям фоне. В исследованиях использовали телочек черно-пестрой породы двух возрастных категорий (2 и 8 месяцев). Животные каждой возрастной категории для проведения экспериментов подбирались по принципу аналогов: сходные по физиологическому состоянию и массе тела. Условия содержания животных отвечали ветеринарно-санитарным правилам и зоогигиеническим требованиям. Всего было сформировано пять групп телочек: I группа - двухмесячные телочки (n=81), у которых для изучения динамики поствакцинального иммунитета брали пробы крови из яремной вены для серологических исследований перед плановой иммунизацией против лептоспироза и через 1 месяц после иммунизации. II и III группы - 8-ми месячные телочки по 12голов в каждой, у которых для изучения иммунореактивности после ревакцинации против лептоспироза брали сыворотку крови через 1; 3,5 и 6 месяцев после ревакцинации. IV и V группы (опытная и контрольная) - двухмесячные телочки, которых планово иммунизировали против лептоспироза. Телочкам опытной группы (n=9) одновременно с вакцинацией внутримышечно инъецировали иммуномодулирующий препарат «Риботан» в дозе 2 мл. Телочек контрольной группы (n=6) только иммунизировали. У телочек IV и V групп брали пробы крови перед иммунизацией через 2,5 недели и 6 недель после вакцинации для серологического исследования.

Иммунизировали телочек поливалентной вакциной ВГНКИ, включающей 4 штамма лептоспир - Grippotyphosa, Pomona, Tarassovi, Sejroe.

Серологические исследования проводились методом реакции микроагглютинации (РМА). Отбор проб крови, подготовку сывороток крови для исследования и постановку реакции микроагглютинации (РМА) осуществляли общепринятыми методами в соответствии с ГОСТ 25386-91 «Животные сельскохозяйственные. Методы лабораторной диагностики лептоспироза», Ветеринарно-санитарными правилами СП 3.1.091-96 (утв. Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России 06.1996 г.), «Наставлением по применению сывороток групповых агглютинирующих лептоспирозных». Для исследования сывороток крови в РМА использовали 15 диагностических штаммов лептоспир.

В сыворотке крови двухмесячных телят на фоне иммунизации против лептоспироза и применения иммуномодулятора общепринятыми методами определяли общий белок, белковые фракции, иммуноглобулины.

Полученные результаты обрабатывали с использованием методов вариационной статистики с помощью пакета прикладных программ Open Office.org 4.0. Для определения статистически значимых различий использовали критерий Стьюдента.

Результаты и обсуждение.

Результаты исследования поствакцинального иммунитета у двухмесячных телочек (I группа) после плановой иммунизации против лептоспироза показали следующее. Предварительно перед иммунизацией были исследованы сыворотки крови этих животных в РМА, все телята оказались серонегативны. После иммунизации у животных выявлен слабый иммунный ответ на введение вакцины, выражающийся либо в полном отсутствии антител, либо в наличии антител в небольших титрах к лептоспирам одной из серогрупп, входящих в состав вакцины. Через 1 месяц после вакцинации 77,8 % сывороток телят давали положительную реакцию с серогруппой Sejroe в титре 1:50 - 44,5 %; 1:100 - 22,2 %; 1:200 - 11,1 %. Через 2,5 месяца после вакцинации антител в титре 1:50 не выявлено. Полученные результаты подтверждают выводы авторов [1, 4] о том, что молодняк крупного рогатого скота 1-2 месячного возраста не способен формировать активный иммунитет достаточной напряженности и продолжительности против лептоспироза.

Изучение иммунореактивности у 8 месячных телочек после ревакцинации против лептоспироза вакциной ВГНКИ показало следующее. Через 1 месяц после ревакцинации в сыворотках крови телочек II группы выявлены антитела к лептоспирам серогрупп Sejroe, Hebdomadis, Grippotyphosa, Pomona, Tarassovi в титрах от 1:50 до 1:3200 (табл. 1).

В сыворотках крови телочек III группы выявлены антитела к лептоспирам трех серогрупп: Sejroe, Tarassovi, Pomona в титрах от 1:50 до 1:1600. Через три с половиной месяца после вакцинации в сыворотках крови 83 % телочек II группы титры антител к лептоспирам серогрупп Pomona, Tarassovi, Sejroe составили от 1:50 до 1:200; в III группе обнаружены антитела в титрах 1:50-1:100 (Pomona, Tarassovi) у 45,5 % животных. Через 6 месяцев после ревакцинации в сыворотках крови 45,5 % телочек II группы антитела сохранились в титре 1:100, в сыворотках крови животных III группы антител не выявлено.

профилактика лептоспироз скот вакцинация

Таблица 1 - Титры противолептоспирозных антител в сыворотках крови 8-ми месячных телочек в разные сроки после ревакцинации

Примечание: титры антител указаны от минимальных до максимальных

Таким образом, в результате проведенных исследований установлено, что антитела к лептоспирам в сыворотках крови ревакцинированных телочек сохраняются в течение трех месяцев и более (до 6 месяцев). Однако в наставлении по применению противолептоспирозной вакцины указано, что антитела у крупного рогатого скота сохраняются до 3 месяцев после иммунизации [5], по истечении этого срока их уровень снижается и должен быть менее 1:100.

Анализ полученных результатов позволил установить следующие закономерности. Во-первых, если иммунный ответ после ревакцинации у 8 месячных телочек недостаточно высок и титры антител через 1 месяц не превышают 1:400, то титр антител постепенно снижается до 1:50 и полного исчезновения. Таких животных следует подвергать ревакцинации в более ранние сроки во избежание их инфицирования. Сроки ревакцинации можно определить для каждого хозяйства на основе данных РМА. Во-вторых, если после вакцинации титры антител высокие (до 1:1600-1:3200), то они сохраняются до 6 месяцев (срок исследования) у 45,5 % животных в титре 1:100 и в данном случае сокращать сроки проведения ревакцинации не следует.

Таким образом, контроль интенсивности иммунного ответа на введение противолептоспирозной вакцины позволит скорректировать сроки проведения вакцинации и ревакцинации крупного рогатого скота в каждом хозяйстве. Что, в свою очередь, очень важно для обеспечения благополучной эпизоотической ситуации, особенно в зонах природных очагов лептоспироза.

С целью повышения эффективности иммунизации телочек против лептоспироза мы применяли Риботан - комплексный иммуномодулирующий препарат, состоящий из смеси низкомолекулярных полипептидов и фрагментов дрожжевой РНК. Препарат обладает широким спектром биологической активности: ускоряет процессы регенерации, стимулирует факторы естественной резистентности. Применяется в комплексной терапии в качестве иммуномодулирующего средства при заболеваниях сопровождающихся развитием иммунодефицита, а также для усиления эффекта вакцинации [6].

На базе молочно-товарной фермы опытного хозяйства были сформированы опытная и контрольная группы двухмесячных телят, которых планово иммунизировали вакциной ВГНКИ против лептоспироза. Опытной группе вводили Риботан в дозе 2 мл внутримышечно одновременно с вакцинацией. Контрольную группу только иммунизировали. Сыворотку крови телят исследовали в РМА перед иммунизацией, через 2,5 недели и 6 недель после вакцинации (таблица 2).

Перед иммунизацией все телята были серонегативны. Через 2,5 недели после иммунизации против лептоспироза в сыворотке крови 78 % телят опытной группы выявлены антитела в титрах от 1:50 до 1:200. Сыворотка крови 33 % телят контрольной группы давала положительную РМА лишь с одной серогруппой (Sejroe) в титрах до 1:100.

Таблица 2 - Эффективность иммунизации двухмесячных телят против лептоспироза

Через 6 недель после ревакцинации количество реагирующих телят в контрольной группе не изменилось. В опытной группе количество серопозитивных телят составило 88,9 %.

Таким образом, при использовании иммуномодулирующего препарата Риботан, эффективность иммунизации двухмесячных телят против лептоспироза была выше на 55,6 %.

Изучение белкового спектра сыворотки крови телят опытной и контрольной групп показало, что у телят, иммунизированных с иммуномодулятором, общий белок и уровень гамма-глобулинов был достоверно выше, чем у телят контрольной группы, за счет глобулинов фракций б2 и г2 (табл. 3).

Результаты, представленные в таблице 3, свидетельствуют о стимулирующем воздействии Риботана на гуморальное звено иммунной системы двухмесячных у телят в поствакцинальный период, а именно, на продукцию иммуноглобулинов, что способствует формированию более полноценного иммунного ответа на введение противолептоспирозной вакцины. Полученные результаты согласуются с данными [3].

Таблица 3 - Белковый спектр сывороток крови двухмесячных телят, иммунизированных против лептоспироза

Примечание: * р < 0,05

Следовательно, для полноценного функционирования иммунной системы и формирования активного и продолжительного иммунитета против лептоспироза достаточной напряженности, телочкам двухмесячного возраста необходимо применять иммуномодулирующие препараты во время вакцинации.

Заключение

Показано, что антитела к лептоспирам в сыворотках крови ревакцинированных телочек сохраняются в течение трех месяцев и более (до 6 месяцев). Выявлена зависимость длительности циркуляции антител в крови вакцинированных телочек от степени интенсивности иммунного ответа на введение противолептоспирозной вакцины. Анализ полученных результатов выявил следующую закономерность. Если иммунный ответ после ревакцинации у 8 месячных телочек недостаточно высок и титры антител через 1 месяц не превышают 1:400, то титр антител постепенно снижается до 1:50 или полного исчезновения. Если после вакцинации титры антител высокие (до 1:1600-1:3200), то они сохраняются до 6 месяцев (срок исследования) у 45,5 % животных в титре 1:100. Поэтому контроль интенсивности иммунного ответа на введение противолептоспирозной вакцины позволит скорректировать сроки проведения вакцинации и ревакцинации крупного рогатого скота в каждом хозяйстве. Это, в свою очередь, очень важно для обеспечения благополучной эпизоотической ситуации, особенно в зонах природных очагов лептоспироза.

Изучение динамики титров антител у телочек двухмесячного возраста после иммунизации выявило слабый иммунный ответ на введение вакцины, выражающийся либо в полном отсутствии антител, либо в наличии антител в невысоких титрах к лептоспирам одной из серогрупп, входящих в состав вакцины. Установлено, что применение комплексного иммуномодулирующего препарата Риботан одновременно с вакциной повышает эффективность иммунизации двухмесячных телочек против лептоспироза на 55,6 %.

Литература

1. Малахов, Ю.А. Лептоспироз животных / Ю.А. Малахов, А.Н. Панин, Г.Л. Соболева. - Ярославль : ДИА-пресс, 2000. - 584 с.

2. Иммунный ответ у крупного рогатого скота после вакцинации против лептоспироза / П.И. Барышников и др. // Ветеринария, 2002. - № 6. - С. 18?20.

3. Иммунореактивность у телочек при вакцинации против лептоспироза на фоне подкожного введения сукцината хитозана / Д.В. Иванов, Е.В. Крапивина, Ю.Н. Федоров, А.И. Албулов // Сельскохозяйственная биология, 2009. - № 2. - С.104-110.

4. Козин, А.И. Лептоспироз. Вопросы этиологии, диагностики, патогенеза, профилактики / А.И. Козин, А.А. Нафеев, Д.А. Васильев. Ульяновская гос. с-х. акад. - Ульяновск, 1999. - 37 с.

5. Наставление по применению поливалентной вакцины ВГНКИ против лептоспироза животных // Ветеринарное законодательство. - М. : Колос, 1988. - Т. 4. - С. 524?526.

6. Инструкция по применению лекарственного средства «Риботан» для коррекции иммунодефицитных состояний животных (Утверждено Департаментом ветеринарии 18 мая 2000 г.).

Размещено на Allbest.ru