Профилактическое действие в полости рта сахарозаменителей и особенности их метаболизма

(15,4 ±2,0)***

1,9 ± 0,2***

<на 79%

(8,3 ±0,7)

Сахароза 54%

0,83 ± 0,02

Ш на 4%

Ш (3,10 0,03)

1,5 ± 0,2

Ш на 15%

Ш (7,8 ±0,9)

1,5 ± 0,2

на 25%

(8,5 ±0,7)

2,3 ± 0,2

на > 49 %

(8,3 ±0,8)

1,02±0,1

на > 3%

(6,2±0,8)

0,40 ± 0,10

<на 2%

(5,6 ±0,4)

Сорбитол 27%

Сахароза 27%

0,92 ± 0,04

Ш на 15%

(5,2 ±0,05)

1,7 ± 0,2

Ш на 31%

(9,5 ±1,1)

1,9±0,2**58%

Ш (10,6±0,9)**

2,5 ± 0,3

на 56%

Ш (9,1

Ш ±1,1)

1,10± 0,04

Ш На

Ш 5%

(7,2 ±0,4)

2,04 ± 0,40*

Ш на 92%

(9,1 ±0,8)*

На этом основании предложены биохимические тесты, выявляющие повреждение клеток печени. Более точно характеризуется повреждение печени гистидаза, уроканиназа и изоферменты ЛДГ₄ и ЛДГ₅.Общая активность ЛДГ не отличается органоспецифичностью и поэтому имеет меньшее значение как тест повреждения гепатоцитов.

Во - вторых, можно предположить, что повышение активности СДГ в сыворотке крови отражает адаптивную индукцию фермента печени, вызванную избыточным поступлением сорбитола при продолжительном питании крыс рационом, содержащим 54 или 27% сорбитола.

Анализ наших исследований позволяет отдать предпочтение второму предположению. В пользу того, что повреждение гепатоцитов не служит главной причиной роста активности СДГ, свидетельствуют результаты опытов.

Повышение активности СДГ в сыворотке крови и в печени при питании диетой с 54% и 275 сахарозы можно объяснить ее гидролизом ферментами полости рта и кишечника на D - глюкозу и D - фруктозу, с последующим образованием из них сорбитола, который активирует СДГ по индуктивному механизму.

Нами впервые установлено колоссальное повышение активности СДГ в сыворотке крови и печени под влиянием избытка сахарозаменителя сорбитола в пище и показан его индуктивный механизм. Неожиданным оказалось увеличение активности СДГ в сыворотке и печени при избытке сахарозы в пище.

Удельная активность малатдегидрогеназы печени при диетах 2-й и 5-й групп достоверно превысила таковую при обычном корме в осенне-зимний период, а в весенне-летний подобного отличия диет с сахарозой и кормов с ксилитолом от контроля не было (рис.3). В осенне-зимнее время при диетах 2,3,%-й групп в 2-3 раза больше, чем при обычном корме, повысилась удельная активность Гл-6-ФДГ печени (рис.3). В весенне-летний период она в контроле значимо не отличалась от таковой при рационах 2-й и 5-й групп, но достоверно снижалась в 3-й группе и увеличивалась почти в 1,5-2,0 раза в 4-й группе. Более высокая удельная активность СДГ, ЛДГ и малатдегидрогеназы печени при всех диетах в весенне-летнем периоде преобладала, а удельная активность Гл-6-ФДГ была ниже.

Из двух похожих сахароспиртов индуктором СДГ оказался только сорбитол, хотя ксилитол несколько повышал удельную активность СДГ, но на много меньше, чем сорбитол. При 10% ксилитола повышение было более выражено, чем при 27%, а при 27% ксилитола - больше, чем при 54%. Вместе с тем на массу тела и на удельную активность ЛДГ сорбитол и ксилитол влияли почти одинаково (табл.5). Результаты свидетельствуют об индуктивном типе повышения активности СДГ, что вызвано увеличением количества субстрата, как и других ферментов с таким же механизмом действия. Так как другой сладкий сахароспирт ксилитол препятствует индукции СДГ, нецелесообразно комбинировать одновременное применение сорбитола и ксилитола.

Таким образом, резкое повышение активности СДГ под влиянием сорбитола, обнаруженное нами и объясненное как результат индукции, имеет адаптивно-защитное значение, так как избыток сорбитола может вызвать уролитиаз, диарею, повреждение хрусталика и сетчатки глаза [Murrey et al., 2000] и другие патологии. Полугодовые биоритмы активности СДГ и фермента гликолиза ЛДГ, цикла трикарбоновых кислот малатдегидрогеназы, пентозофосфатного пути Гл-6-ФДГ печени отражают адаптацию к сезонным изменениям.

Следует прежде всего упомянуть о том, что большое (почти 3 и 4-кратное в оба полугодия) увеличение удельной активности СДГ в печени крыс, содержавшихся на рационе с избытком (54%) сорбитола - субстрата этого фермента, послужило важным аргументом в пользу индукционного механизма активации СДГ. Для доказательства индукции фермента еще необходима прямая зависимость между увеличением содержания субстрата и повышением активности фермента.

Нами установлено, что УА ЛДГ, Гл-6-ФДГ и СуДГ при трех диетах, взаимоотношения СДГ и сорбитола соответствовали этим условиям, так как удельная активность (УА) СДГ в печени повысилась более чем в 2 раза при рационе 54% сорбитола, чем при 27% сорбитола+27% сахарозы, содержавших сорбитол и сахарозу, в оба полугодия не превышала удельную активность ферментов при пищевом рационе со 100% обычного корма. Более того, в 2 раза снизилась активность Гл-6-ФДГ в осенне-зимнее полугодие и СуДГ в весенне - летнее. Представляемые новые отрицательные результаты, полученные при изучении трех дегидрогеназ, служат еще одним аргументом в пользу индукционного механизма повышения активности СДГ, впервые обнаруженное нами.

Обнаруженные нами сезонные биоритмы массы тела и активности ферментов печени крыс вызываются комплексном факторов. Среди них основным является циркадианные ритмы фотопериодизма, питания и температуры окружающей среды.

В наших опытах фотопериодизм выражался сезонными колебаниями продолжительности светового дня. В осенне - зимнее полугодие (октябрь-февраль) световой день намного короче, чем в весенне-летнее (март-июль).

Чтобы приблизить эксперимент к условиям природного существования крысы получали корм, состав которого изменяли в соответствии с сезонами года. Стандартный корм без изменения состава во всех контрольных опытах не позволил бы обнаружить роль хронобиологического фактора природных сезонных изменений состава пищи.

При рассмотрении полученных результатов опытов была учтена и температура среды обитания, так как опыты проводили в помещении, в котором, несмотря на отопление, в осенне-зимний период в среднем было прохладнее, чем в весенне-летний.

По-видимому, исследования в выполненном нами направлении могут оказаться полезными при углубленном изучении механизм действия избытка СЗ и возникающих при этом патологических изменений в разное время года.

Физиологические и патологические биоритмы УА ферментов в основном отражают результаты адаптации молекулярных механизмов организма, в том числе закрепленных на генетическом уровне, к изменяющимся условиям сред обитания.

На основании проведенной работы следует считать, по нашей концепции, что большие дозы сорбитола в пище (54%, 27%) оказывают неблаготворный эффект на организм в целом и на биохимические параметры тканей и жидкостей полости рта. Поэтому такие квоты сахароспирта в пище не стоит рекомендовать для многомесячной профилактики кариеса зубов. Квоты в 10% сорбитола в этом плане предпочтительнее.

Следовательно, для профилактики стоматологических заболеваний сахароспирты следует применять в пищевом рационе в невысоких квотах и с известной осторожностью. Так как сладкий сахароспирт ксилитол, препятствует индукции СДГ, нецелесообразно комбинировать одновременное применение сорбитола и ксилитола.

Определение остеоиндуктивной активности

Показатели К₃, Са, Р и Са/Р - молярный коэффициент равны нулю подсаживаемого деминерализованного матрикса, т.к. он состоит из коллагена и не коллагеновых кислотоустойчивых белков. Показатель М% равен 20%, а Кик около 10%(в данном случае это Н₂О, связываемая матриксом). Показатели В, Ш в это время нулевые, а показатель П в ней равен единице.

В "мышечном кармане", матрикс атакуют макрофаги и он постепенно рассасывается. Почти одновременно со стороны воспринимающего ложа сосуды, который постепенно прорастают ткань саженца и приносят клетки-мишени для костных морфогенов (перициты). Если в этот момент саженец извлечь, то по сравнению с исходным матриксом у него в это время изменяется показатель В саженца (появилась васкуляризация), показатель П может иметь нулевую оценку, а показатель М% может быть меньше 20% вследствие рассасывания матрикса.

На следующем этапе, выделяющиеся из подсаженной ткани морфогены вызывают дифференцировку перицитов в скелетогенные клетки. Интенсивность этого процесса зависит от степени васкуляризации ткани и от количества в ней морфогенов. При полном отсутствии морфогенов подсаженный матрикс в 25% случаев подвергается полной резорбции в течение 6 недель. Новообразованные скелетогенные клетки достаточно быстро преобразуются в остеобласты, а те в остеоциты, т.е. идет процесс остеогенеза. Так как васкуляризация идет с периферии, то и остеогенез идет тоже с периферии. Извлеченная на этой стадии ткань будет представлять собой конгломерат из посаженной ткани и новообразуемой кости. Это значит, что плотность саженца начнет увеличиваться и начнет расти показатель М%.

На следующем этапе процессы остеогенеза усилятся и начнутся процессы минерализации новообразуемого матрикса. При этом извлекаемая ткань не только уплотняется, но на ее поверхности видны невооруженным глазом зоны оссификации в виде неравномерных напластований (показатель Ш больше нуля). Так как в ткани появляются Са и Р, то соответственно критерий Кик, Кз, Са и Р увеличитывается и тем больше, чем активнее процесс. Однако следует помнить, что Са и Р приходят из крови рецепиента. За счет очень активного метаболизма ткани Р в это время находится в ней не только в минеральной фазе, но и в виде других соединений. Минеральный компонент на этой стадии еще слабо организован и нормальное соотношение аморфной и кристаллической форм в виде фосфатов кальция еще не установилось. Следовательно, Са/Р - молярньй коэффициент существенно ниже характерных для апатитов значений - 0,9.

По мере созревания костной ткани увеличивается и превышает на следующем этапе величина Са/Р - молярного коэффициента характерный для апатитов уровень 1,33. По мере замещения ткани саженца, остальные показатели также растут. Однако через 6 недель, т.е. к концу эксперимента полного замещения матрикса еще не происходит и извлекаемая ткань представляет собой конгломерат из ткани саженца и из новообразованной костной ткани. Т.е. ни один из показателей не достигает возможных для него максимальных значений, но стремится к этому.

При описании биологической значимости исследуемых критериев чем согласованнее их рост, тем лучше идет процесс. Для этого используется критерий "интервал согласованности", представляющий собой разность между самым большим и самым малым значениями нормированных критериев, характеризующих данный объект. Например, если из 9 критериев максимальное значение имеет критерий М% (0,6), а минимальное - критерий Кз (0,1), то "интервал согласованности" будет равен 0,5. Чем меньше этот интервал, тем согласованнее процесс, а следовательно, все биоактивные белки матрикса находятся в эквивалентных количествах. Естественно, что активность белков - регуляторов из матрикса подчиняется закону вариационных рядов. Этому же закону подчиняется чувствительность реципиента к этим белкам. В результате каждый критерий имеет пределы вариационных изменений, зависящие как от состава донорской ткани, так и от состояния реципиента. Известно, что в ряде случаев внешнее воздействие, не меняя положения центра вариационного ряда (так называемого М), меняет его границы, сужая их или расширяя. Для выявления такого эффекта применяются различные статистические методы, но самый простой вариант - вычисление длины вариационного ряда. Для этого из максимального значения показателя вычитают минимальное. У животных, получавших нагрузку сорбитолом, показатель находится в классе "удовлетворительно" и через месяц нагрузки и через 3 месяца, т.е. адаптации к сорбитолу не произошло.При нагрузке ксилитолом в течение месяца регенераторные потенции кости существенно снижаются. Из 13 посаженных трансплантантов рассосались 6, еще I исключен из математической обработки, т.к. в извлекаемой ткани не обнаружены Са и Р, а следовательно, остеогенез не произошел. Оставшиеся 6 саженцев замещались костью, но с оценкой не более, чем "удовлетворительно". Причем общее снижение оценки определялось преимущественно показателями Са, Р, Кз и Ш, т.е. были ослаблены процессы минерализации. В то же время интервал согласованности увеличивался в этой группе статистически недостоверно. Во всех случаях введения смеси сорбитола с сахарозой (за исключением I) остеогенез по суммарному критерию оценивался как хороший.

В случаях введения смеси ксилитола с сахарозой остеогенез оценивался как удовлетворительный. Сопоставление «интервалов согласованности» не выявило различий между группами.

Разброс вариантов вариационных рядах отличается в разных группах опытов. Введение сорбитола или ксилитола влияло на характер распределения. Во всех случаях, когда животные получали сорбитол в течение месяца, резко возрастала широта вариационного ряда показателя Кик (более чем вдвое). Но в обеих этих группах снижалась длина вариационного ряда для показателя Са. Кроме того, в одном случае сужались границы ряда для показателя Кз, а в другом - для Са/Р-молярного коэффициента. Сужение границ ряда для показателя Са наблюдалось и когда в пище содержится 27% сорбитола с 27% сахарозы, хотя и слабее выраженное. При введении сорбитола в течение 3 месяцев и по этому критерию наблюдалась адаптация.

При введении ксилитола сужался разброс вариантов вариационных рядов всех показателей минерального обмена (Са, Р, Кз, Са/Р-молярный коэффициент). Причем для последнего показателя он остался сниженным и при введении 27% ксилитола в смеси с 27% сахарозы.

Сужение разброса вариантов трудно оценить качественно (хорошо или плохо). Можно говорить о том, что введение таких заменителей сахарозы, как сорбитол и ксилитол, влияет на характер стадии минерализации при эктопическом остеогенезе. Сахарозаменители не безразличны для регенераторных процессов в костях, а так как снижен показатель, то можно считать, что они подавляют остеоиндуктивный механизм регенерации кости. Например, при костной травме или при атрофическом процессе в альвеолярном отростке при пародонтите. Однако на основании данных по трехмесячной нагрузке сорбитолом с последующей ее трехмесячной отменой, можно предполагать, что со временем организм адаптируется к введению этого сахарозаменителя и его регенераторные потенции восстанавливаются.

Экспериментальное исследование на студентах - добровольцах^*

Результаты исследований и их обсуждение. Мы впервые критически обобщили разрозненные сведения о биохимических механизмах отдельных сахарозаменителей в профилактике кариеса (Ю.А. Петрович, В.А. Зубцов и др., 1991 г.). Так как сахарозаменители широко применяются при лечении сахарного диабета, ожирения, атеросклероза, то врачам - стоматологам и другим специалистам необходимо знать положительные стороны и особенно недостатки, свойственные конкретным сахарозаменителям. Кроме того, сахарозаменители широко применяются в промышленности для изготовления кондитерских изделий, напитков, а также они используются в лекарствах, зубных пастах и тому подобное. Нередко средства массовой информации рекламируют вредные для здоровья сахарозаменители, которые бесконтрольно продаются в ларьках, магазинах и даже в аптеках.

При проведении исследований в эксперименте на крысах, находившихся на различных диетах в сериях от 1 до 8-ой, нами не обнаружено отклонений в активности половых гормонов и инсулина.

С целью получения устойчивых урожаев стевии в средней полосе России с высоким содержанием в листьях детерпеновых гликозидов нами были поставлены дополнительные цели. Необходимо было подобрать из имеющихся стимуляторов роста или разработать новую технологию получения отечественного ростового стимулятора, который бы с успехом применялся в биохимии, биотехнологии, а также и в растениеводстве.

Мы разработали новую технологию получения отечественного стимулятора - казаминовые кислоты. За разработку технологии получения казаминовых кислот на Первом Международном Салоне инноваций и инвестиций (г. Москва 7-10 февраля 2001 г.) международное жюри отметило данную разработку большой Золотой Медалью. Технология получения казаминовых кислот включает следующие стадии: кислотный гидролиз, гель-фильтрацию, концентрирование, сушку готового продукта и упаковку. Для оптимизации процесса выделения активной фракции гидролизата казеина - казаминовых кислот нами разработана установка, состоящая из дозирующей камеры, хроматографической колонки, коллектора фракций, спектрофотометра - СФ - 46, потенциометра с самописцем. С целью автоматизации процесса нанесения и разделения на фракции применяли дозирующую камеру специальной конструкции. Хроматографическое разделение гидролизата казеина осуществляли методом гель-фильтрации на сефадексе G-25.

При анализе аминокислотного состава активной фракции гидролизат казеина обнаружены незаменимые непротеиновые аминокислоты. Используемый метод гель-фильтрации для хроматографического разделения гидролизата казеина позволил установить молекулярную массу активной фракции - казаминовых кислот. Ростостимулирующая активность казаминовых кислот определяется низкомолекулярными пептидами с молекулярной массой в пределах 1200-2200 Д.

Нами выпущены методические рекомендации по использованию казаминовых кислот (В.А. Зубцов, Л.Л. Осипова, 2004 г.).

В свете полученных нами результатов и литературных данных мы провели научные исследования по использованию казаминовых кислот в качестве ростостимулятора при возделывании растения Stevia rebaudiana Bertoni. Это растение, являющееся выходцем из Южной Америки, представляет большой интерес, поскольку листья этого растения являются источником перспективного сахарозаменителя - дитерпеновых гликозидов.

Учитывая сказанное, целью проведения работы явилось сравнительное изучение действия растворов стевиозида, ксилитола и сорбитола на изоферментный спектр ЛДГ смешанной слюны добровольцев, а также состояние КОР в полости рта, характер слюноотделения и свойств смешанной слюны: параметры изменений рН, скорость слюноотделения.

Исследование состояло из трех серий. Первая серия исследований проведена на 50 добровольцах в возрасте от 18 - 22 лет (25 мужчин и 25 женщин)- практически здоровых студентах стоматологического факультета Тверской государственной медицинской академии. Эта серия исследований была проведена при участии к.м.н. Подгорного Г.Н. на базе ТГМА. Изучали влияние на изоферментный спектр лактатдегидрогеназы (ЛДГ) смешанной слюны добровольцев раствором сахарозы, стевиозида и сорбитола. У контрольной группы для полоскания использовали дистиллированную стерильную воду.

В первой серии опытов мы изучили влияние различных концентраций водных растворов сахарозы, стевиозида и сорбитола у добровольцев- студентов стоматологического факультета Тверской государственной медицинской академии. Рот полоскали объемом 15 мл в течение 30 секунд. Одновременно изучали рН смешанной слюны после однократного полоскания рта объемом 15 мл в течение 30 секунд. Слюну собирали в пробирку и охлаждали до 4°С. Электрофорез проводили в 7% полиакриламидном геле трисглициновом буфере (рН 8,0) в течение 90 мин. При силе тока 1,5 - 2 мА на каждую электрфоретическую трубку (Ornstein,1964; Maurer,1971). Денсинограммы снимали на приборе SK: madzu corporation chart 200 - 91527.

Средние данные по влиянию сахарозаменителей на изоферментный спектр фермента лактатдегидрогеназы в смешанной слюне у добровольцев после полоскания 30 15 мл раствора сахарозаменителей представлены на рис.2. У добровольцев обнаружено 5 изоферментов ЛДГ в смешанной слюне.

Таблица 9

Некоторые сладкие дитерпеновые гликозиды, выделенные из раствора Stevia rebaudiana Berioni

Дитерпен	Химическая формула	Содержание Stevia reb., %	Сладость (сахароза -1)
Стевиозид	С38Н60О18	6-8	250-300
Ребаудиозид А	С44Н70О23 * 3Н2О	1,4 - 2	350-450
Ребаудиозид В	С38Н 60О * 2Н2О	0,03-0,07	300-350
Ребаудиозид С	С44Н70О22 * 3 Н2О	следы	50-120

Полученные результаты характеризуют у добровольцев значительное и достоверное снижение анаэробного гликолиза, это характеризует выявленное увеличение фракций ЛДГ₄ и ЛДГ₅ во всех случаях эксперимента. Наибольшее снижение анаэробного гликолиза наблюдалось в смешанной слюне добровольцев, использовавших для полоскания полости рта 0,2% раствор стевиозида по сравнению с контрольной группой исследуемых добровольцев. Изоферменты ЛДГ анаэробного типа (ЛДГ₅ и ЛДГ₄) - субъединицы М типа, которые избыточно катализируют превращение пирувата в лактат, способствуя тем самым инициальной деминерализации поверхностных слоев эмали.

Во второй серии исследования проведены на 25 добровольцах. Эти исследования были проведены на кафедре терапевтической стоматологии совместно с д.м.н. В.А.Румянцевым и сотрудницей РНИЛ по БАВ «ФАВИС» М.Н.Ивановой. Сравнивали влияние полоскания рта растворами стевиозида, ксилитола, сорбитола и сахарозы на состояние КОР в полости рта: рН, буферная емкость, вязкость, скорость слюноотделения. Проводили по 4 исследования у каждого пациента с перечисленными растворами (всего 100 определений). Оценивали одновременно органолептические свойства сахарозаменителей, включая длительность сохранения вкуса во рту. Во второй серии исследований проведена на 25 добровольца обоего пола в возрасте от 18 до 26 лет. Оценивали влияние 30-секундного полоскания рта 15 мл. 0,2% растора стевиозида и 10% растворов ксилитола, сорбитола и сахарозы (всего 100 исследований) на состояние кислотно-основного равновесия в полости рта, характер слюноотделения и свойства смешанной слюны (показатели кривых рН, буферная емкость, вязкость, скорость слюноотделения). Кроме того, сравнивали органолептические свойства сахарозаменителей и брали образцы смешанной слюны для последующего биохимического анализа.

Установлено то, что все изученные сахарозаменители вызывали в смешанной слюне физиологическое смещение КОР в щелочную сторону; анализируя результаты по водородному показателю. Время смещения находилось в пределах 20-30 мин. Однако сахароза вызывала длительный и стойкий ацидоз. Нами отмечены значительные изменения рН при использовании в эксперименте водного раствора стевиозида. В ротовой жидкости амплитуда кривой рН под влиянием раствора стевиозида была в 1,4 раза больше, чем сорбитола. Как и предполагалось, наибольшая скорость изменений рН в смешанной слюне (по К_к) обнаружена под влиянием раствора сахарозы. При исследовании по этому показателю сахарозаменителей первое место занимает стевиозид. После применения сахарозы длительность рН в смешанной слюне до начала проявления восстановительных и компенсаторных процессов наиболее выражена у сахарозаменителей стевиозида и ксилитола: этот показатель при сравнении был очень близок.

Рис. 2 Влияние сахарозы и ее заменителей на рН смешанной слюны после однократного полоскания рта 15 мл в течение 30 сек

Обнаружены статистически достоверные отличия во влиянии растворов стевиозида на буферную емкость в сравнении с изучаемыми сахарозаменителями. После применения раствора стевиозида на предмет изучения длительности сохранения вкусовых ощущений (по методу С.М.Будылина, Н.С.Зайко,1985) она была более 4-х минут, что значительно больше (в 2 раза), чем у других исследуемых сахарозаменителей (ксилитола, сорбитола). В этой серии экспериментов использовали 10% водные растворы сахарозы, сорбитола и ксилитола, а также водный 0,2% раствор дитерпеновых гликозидов (стевиозид). В исследовании использовали двойной слепой метод.

Рис. 3 Угловой коэффициент кривых изменений рН. смешанной слюны после однократного полоскания рта 15 мл в течение 30 сек растворами сахарозы и ее заменителей (М±m)

Размещено на http://www.allbest.ru/

Рис. 4 Длительность сохранения вкуса после однократного полоскания рта 15 мл в течение 30 сек растворами сахарозы и ее заменителей (М±m)

Размещено на http://www.allbest.ru/

Рис. 5 Влияние однократных полосканий рта раствором сахарозы и сахарозаменителей на буферную ёмкость смешанной слюны добровольцев (М±m)

В третьей серии эксперименты были проведены на 10 добровольцах и изучалось влияние исследуемых сахарозаменителей на функциональную активность ротовой микрофлоры. Активность кислотопродуцирующей микрофлоры оценивали путем сравнения амплитуд двух тестовых кривых Стефана в смешанной слюне. Первую тестовую кривую (контрольную) получали после полоскания рта 15 мл 54% раствора сахарозы в течение 30 сек (тестовый раствор). Вторую (опытную) тестовую кривую рН получали, применив 54% раствор сахарозы после полоскания.

Всего проведено 60 исследований по три парных наблюдения у каждого пациента. В день исследования все участвующие в эксперименте не чистили зубы и после приема пищи (завтрака) в день эксперимента проходило не менее 50 минут. Во всех сериях исследований растворы сахарозаменителей применяли в виде полосканий рта 15 мл в течение 30 сек.

Третья серия исследований проведена на 10 добровольцах обоего пола в возрасте от 20 до 26 лет и посвящена изучению влияния 0,2% раствора стевиозида на функциональную активность ротовой микрофлоры. Оценивали ацидогенную и уреазную активность смешанной микрофлоры полости рта in vivo после воздействия раствором стевиозида у лиц с активной микрофлорой и после ее подавления биглюконатом хлоргексидина.

Таблица 10

Влияние однократных полосканий рта растворами сахарозы и сахарозаменителей на некоторые показатели слюны и слюноотделения (М±m)

Раствор для полоскания рта (15 мл в течение 30 сек)	Максимальные изменения показателей смешанной слюны под влиянием полосканий полости рта
	Буферная, емкость, мэкв/л	вязкость, сПз	скорость слюно-отделенгия, мл/мин
	по кислоте	по щелочи
Стевиозид 0,2%	+ 40,81± 5,26	+108,83± 10,41	1,11± 0,12	1,43± 0,128
Сахароза 10%	+13,15± 4,19	+103,24 ±13,24	0,34± 0,16	1,57± 0,143
Ксилитол 10%	+21,44± 5,66	+86,33± 8,38	0,86± 0,10	0,94± 0,102
Сорбитол 10%	+26,92± 6,27	+80,02± 7,68	0,93± 0,09	1,06± 0,094
р1 - 2	<0,001	>0,5	<0,001	>0,5
р1 - 3	<0,01	>0,1	<0,05	<0,05
р1 - 4	<0,05	<0,05	<0,05	<0,05

Всего проведено 60 исследований в тех же условиях водными растворами поочередно, одним из сахарозаменителей. Таким же образом определили изменение аммиакобразующей активности находящейся микрофлоры в полости рта под влиянием использованных растворов сахарозаменителей, за исключением тестового раствора сахарозы, 15 мл 0,1М тестовый раствор карбамида использовали в течение 30 сек. Нами обнаружено, что все используемые сахарозаменители в полости рта обладают хотя и слабым, но подавляющим общее микробное кислотообразующее действие (по методу Л.М.Гаврикова, В.А.Храмов,1992).

Выделенный нами стевиозид в 2,1 раза превосходил известные ксилитол и в 1,3 раза сорбитол (Р<0,05) по влиянию на амплитуду тестовых кривых рН Стефана. (рис.10 ). Этот обнаруженный результат указывает на предпочтительность использования стевиозида перед широко известными и давно выпускаемыми сахарозаменителями, такими как ксилитол и сорбитол, как добавление вместо сахарозы в пищевые продукты, напитки. Из-за высокой сладости (в 150-300 раз) стевиозида его использование в продуктах питания несколько ниже, т.е. в меньшем количестве, чем используемое количество в пищевых продуктах известных сахароспиртов. Обнаруженная нами в несколько раз превосходящая способность дитерпеновых гликозидов - стевиозида подавлять микробную кислотообразующую продукцию в полости рта, позволяет считать его перспективным профилактическим средством в плане снижения карисогенности пищи. Нами обнаружен и тот факт, что стевиозид не ферментируется ацитогенной и уреазопозитивной микрофлорой полости рта. Этот факт подтверждается тем, что не выявлено значительное (Р>0,05) влияние используемых сахарозаменителей на амплитуду тестовых кривых рН в смешанной слюне добровольцев, полученных при стимуляции в течение 30 сек. 15 мл 0,1М раствором карбамида. Возможно, незначительное уменьшение этих амплитуд может быть отдельным незначительным подавляющим действием сахарозаменителей на микрофлору, использующих в качестве субстрата мочевину.



Размещено на http://www.allbest.ru/

Рис. 6 Влияние ротовых ванночек (30 с 15 мл) с профилактическим эликсиром для полости рта или раствором сахарозы на рН смешанной слюны у добровольцев

На основе полученных данных в ходе клинико-лабораторных исследований можно с высокой степенью достоверности сделать вывод, что выделанный по нашей технологии дитерпеновый гликозид из листьев стевии, выращенной на Тверской земле, является высоко эффективным сахарозаменителем, значительно превосходящим по своему действию в полости рта традиционно используемых сахароспиртов: ксилитола и сорбитола.

Нельзя оставить без внимания и подавляющее действие стевиозида на ацитогенную микрофлору полости рта, увеличение буферных свойств слюны и слюноотделения. Также необходимо подчеркнуть, что стевиозид превосходит ксилитол и сорбитол по длительности сохранения во рту вкусовых ощущений.

Резюмируя вышеизложенное, нужно отметить, что стевиозид, выделенный по нашей технологии из районированного нами, можно уже сказать, что тверское растение стевия является новым сахарозаменителем растительного происхождения, превосходящим все некариесогенные сахарозаменители. За стевиозидом большая перспектива как за заменителем сахара.

Изучение эффективности предложенного зубного эликсира

Зубной эликсир обладает хорошими дезодорирующим, освежающим, очищающим свойствами. Для достижения максимального эффекта не следует принимать пищу в течение 30-60 минут после полоскания.

Очищающие свойства эликсира изучали путем определения гигиенического индекса OHI-S,компонента ЗН индекса РНР. Для оценки исходного пародонтального статуса использовали индекс CPITN.

Очищающее действие. При первоначальном осмотре добровольцев, участников эксперимента, было выбрано 23 человека, разделенных на две группы А - 12 человек и В - 11 человек. А - была контрольная группа, а В - профилактическая. Выявлено, что, сравнивая исходные значения индекса контрольной и профилактической групп, достоверных различий не обнаружено. Величина компонента ЗН составила 1,54±0,06 в группе В - профилактической и 1,66±0,05 в группе А - контрольной. Уровень оценки гигиены полости рта у добровольцев - участников исследования соответствовал удовлетворительному критерию по величине компонента ЗН. Осмотр, проведенный через 15 дней от начала исследования по этому критерию, продемонстрировал достоверное (р<0,001) уменьшение показателя ЗН в профилактической группе до 1,25±0,06, тогда как в контрольной группе за этот же период наметилась лишь тенденция к снижению (1,58±0,06).Эти значения соответствовали удовлетворительному критерию оценки уровня гигиены полости рта у добровольцев - участников исследования.

Дальнейшие осмотры через 30 и 60 дней выявили дальнейшее снижение величины компонента ЗН в профилактической группе до значений равных 1,11±0,02 (р<0,001) и 1,01±0,03 (р<0,001). За этот период в контрольной группе через 30 дней наблюдалось уменьшение показателя ЗН лишь до 1,45±0,06 (р<0,001), а через два месяца, то есть к концу исследования отмечено незначительное его увеличение до 1,51±0,05 (р<0,01). Между тем, следует отметить, что при использовании эликсира у участников эксперимента в контрольной и профилактической группах оценочный критерий уровня гигиены полости рта оставался удовлетворительным. Эффективность от использования эликсира по компоненту ЗН индекса OHI-S за весь период эксперимента (60 дней) составил 34,4%, что в 3,8 раза больше, чем в контрольной группе.

Гигиенический индекс. Нами не выявлено при изучении изменений индекса РНР достоверных различий между исходными значениями применяемого индекса среди контрольной и профилактической групп. Эти показатели были в контрольной группе 2,75±0,12 и у лиц профилактической группы - до 2,35±0,08 (р<0,02). В обеих группах в дальнейшем наблюдалась также тенденция через 30 дней значение индекса в контрольной группе 2,18±0,05 (р<0,001) и в профилактической 2,05±0,06. В конце исследования в контрольной - 2,04±0,04 (р <0,001) и профилактической 1,89±0,05 (р<0,001).

Однако изменений уровня гигиены полости рта среди добровольцев не наблюдалось, эффективность от использования зубного эликсира в качестве дополнительного средства по индексу РНР составила около 34,2%, по сравнению с контрольной группой (25,8%).

Противовоспалительное действие. Сравнительный анализ состояния тканей пародонта перед экспериментом не показал достоверных различий между группами. Индекс гингивита в контрольной группе составил 1,07±0,05 (р>0,05) и в профилактической 1,01±0,08 (табл. 11). Оценивая исходный пародонтальный статус

Таблица 11

Динамика индекса гингивита при использовании эликсира

Группы	Исходное состояние (M±m)	Через 15 дней (M±m)	р (по сравне-нию с исходным)	Через 30 дней (M±m)	р (по срав-нению с исходным)	Через 60 дней (M±m)	р (по срав-нению с исход.)
Профилак тическая	1,01± 0,08	0,81± 0,07	р< 0,02	0,55± 0,05	р< 0,001	0,24± 0,04	р<0,001
Контрольная	1,07± 0,05	0,89± 0,07	р< 0,05	0,85± 0,06	р< 0,001	0,78 ±0,07	р<,001

использованием индекса CPITN у лиц контрольной группе, определялись в среднем 1,83±0,22 интактных сектантов пародонта,1,27±0,19 - секстантов с кровоточивостью и секстанта с зубным камнем 3,05±0,42, В профилактической группе эти показатели составили соответственно 1,11±0,23, 1,47±0,24, 3,48±0.28. Через 15 дней в профилактической группе индекс гингивита уменьшился (с 1,01±0,08 до 0,81±0,07) на 24,7,5%, а в контрольной - на 20,2%. В 2,3 раза уменьшилось среднее количество сектантов пародонта с зубным камнем у лиц обеих исследуемых групп способствовало проведение профессиональной гигиены полости рта в начале исслежования, в результате в 2,3 раза возросло количество секстантов с кровоточивостью, а в профилактической группе на 12% увеличилось число интактных скстантов.2%. В 2,3 раза уменьшилось среднее количество сектантов пародонта с зубным камнем у лиц в профилактической группе и контрольной -в 2,1 раза. Такому улучшению состояния тканей пародонта у лиц обеих исследуемых групп способствовало проведение профессиональной гигиены полости рта в начале исследования, в результате в 2,3 раза возросло количество секстантов с кровоточивостью, а в профилактической группе на 12% увеличилось число интактных секстантов. Через 30 дней от начала исследования оценка противовоспалительного действия зубного эликсира показало, что в профилактической группе отмечено достоверное (р <0,001) снижение индекса гингивита 0,81±0,007 до 0,55 ± 0,05 (на 47,2%), а также увеличение числа интактных секстантов пародонта в 2,7 раза за счет уменьшения количества секстантов кровоточивостью.



Рис. 7 Изменения показателей гигиенических индексов при применении зубного эликсира (М±m) в контрольной группе «А»

Рис. 8 Изменения показателей гигиенических индексов при применении зубного эликсира (М±m) в профилактической группе «В»

В то же время резко не изменялось число секстантов пародонта с зубным камнем (0,33%). Обнаружено достоверное снижение величины гигиенического индекса у лиц контрольной группы от 2,39±0,12 и у лиц профилактической группы - до 2,35±0,08 (p<0,02). В обеих группах в дальнейшем наблюдалась также тенденция через 30 дней значение индекса в контрольной группе 2,18±0,05 (p<0,001) и в профилактической 2,05±0,06. В конце исследования в контрольной - 2,04±0,04 (p<0,001) и профилактической 1,89±0,05 (p<0,001). Однако изменений уровня гигиены полости рта среди добровольцев не наблюдалось.

Оценка противовоспалительной эффективности зубного эликсира через 60 суток от начала эксперимента показала, что в профилактической группе наблюдалось дальнейшее улучшение состояния тканей пародонта. На 72,1% индекс гингивита снизился, а количество интактных секстантов увеличилось (с 1,10±0,23 до 4,05±0,12) в 3,6 раза, на фоне снижения числа секстантов с кровоточивостью (3,48±0,28 до 0,48±0,12) в 7,3 раза. В контрольной группе показатель индекса гингивита снижался и к концу окончания эксперимента был равен 0,78±0,07 (р<0,001). Одновременно в 1,4 раза увеличилось количество интактных секстантов пародонта. Таким образом, проведенные исследования показали эффективность от использования зубного эликсира в качестве дополнительного средства по индексу РНР составила около 34,2%, по сравнению с контрольной группой (25,8%) и по компоненту ЗН индекса OHI-S за весь период эксперимента (60 дней) составил 34,4%, что в 3,8 раза больше, чем в контрольной группе.

Оценка противовоспалительной эффективности зубного эликсира показала улучшение состояния тканей пародонта на 72,1%, индекс гингивита снизился, а количество интактных секстантов увеличилось (с 1,10±0,23 до 4,05±0,12) в 3,6 раза, на фоне снижения числа секстантов с кровоточивостью (3,48±0,28 до 0,48±0,12) в 7,3 раза.

В 1Х серии опытов предложили жевательную резинку «Блеск и Сила» с дитерпеновыми гликозидами, выделенными по нашему патенту из районированного в Тверской области растения Стевии. Состав жевательной резинки был приготовлен по традиционной рецептуре за исключением используемых сахарозаменителей: ксилитол сорбитол и других представителей, нами были включен сахарозаменитель стевиозид «Стевикс», состоящий из стевиозида и ребаудиозида А различной концентрации: 1,25 и 2,50.

Нами разработана и запатентована технология выделения и очищения дитерпеновых гликозидов стевии. В то же время этот сахарозаменитель еще мало используется в отечественной пищевой промышленности, в том числе не применяется в составе жевательных резинок.

Целью исследования явилось сравнительное контролируемое изучение двойным слепым методом влияния однократного применения ряда жевательных резинок и конфет, содержащих сахарозаменители, в том числе - стевиозид, на кислотно-щелочное равновесие в полости рта у добровольцев.

К участию в исследовании привлекли 126 студентов-добровольцев медицинской академии (68 мужчин и 58 женщин) в возрасте от 18 до 25 лет. Индекс КПУ у них не превышал 10, они не пользовались зубными протезами, не находились на ортодонтическом лечении, не имели сопутствующей соматической патологии. Все добровольцы привычно ухаживали за полостью рта.

Оценивали действие в полости рта 5 видов жевательных резинок разных производителей, среди которых преобладали производители Южной Кореи, и конфет для жевания R.O.C.S. Кроме того, для исследования подготовили два вида жевательной резинки, в состав которых вошли основа для резинки (поливинилацетат) и стевиозид в двух разных концентрациях. В качестве контроля использовали основу для резинки без каких-либо добавок (placebo). Тестовые продукты для жевания раскладывали в бумажные пакеты, которые произвольно нумеровались. Масса каждого продукта для жевания составляла 10 г. Таким образом, исследуемые и исследователи не знали, какой именно продукт используется. Результаты исследования обрабатывались на компьютере сторонним пользователем.

Все пациенты были поровну произвольно разделены на 2 группы: «А» и «В». У испытуемых группы «А» определяли рН сплюнутой смешанной слюны (начальное значение). Затем они в течение 10 минут жевали один из предназначенных для этого продуктов. Исследование в группе «В» отличалось только тем, что после определения начального значения рН смешанной слюны добровольцы проводили стимуляцию ротовой кислотопродуцирующей микрофлоры путем полоскания рта в течение 30 с 15 мл 47% раствора сахарозы. В результате получали начальную часть тестовой кривой рН Стефана в смешанной слюне. Спустя 10 мин. после полоскания рта сахарозой они так же, как и в группе «А», на протяжении 10 мин. жевали один из продуктов. По полученным кривым изменения рН смешанной слюны для группы «А» рассчитывали их амплитуды как разность между начальным и экстремальным (максимальным или минимальным) значениями рН. Кроме того, для группы «В» рассчитывали угловой коэффициент восходящей части кривой (анакроты) по формуле:

К_а = А/t Ч 10000, где: К_а - угловой коэффициент анакроты;

А - амплитуда кривой рН (ед. рН);

t - длительность анакроты (мин);

10000 - условный коэффициент.

Измерение рН ротовой жидкости проводили с интервалом в 5 мин. с помощью рН-метра «Jenco» (США) и стандартных стеклянных электродов в микрокювете объемом 5 - 10 мкл. Каждое исследование длилось 30 мин. Все исследования проводили в утренние часы, спустя не менее 1 часа после последнего приема пищи, в спокойном состоянии испытуемых. Всего было проведено 160 исследований, по 20 с каждым продуктом. В группе исследуемых «А», где добровольцы не использовали стимуляцию раствором сахарозы, а только пережевывали резинку или конфету в течение 10 минут, оказалось, что все исследованные продукты, кроме резинки «Color», вызывали в разной степени выраженное смещение реакции смешанной слюны в щелочную сторону. Судя по средней величине амплитуд кривых рН, наибольшие такие изменения вызывало употребление резинок со стевиозидом, а также жевательных конфет «R.O.C.S.». Наименьшие - жевательные резинки, содержащие ксилитол и сорбитол, а также чистая основа для резинки (placebo). Жевательные резинки «Color» провоцировали изменение рН смешанной слюны в кислую сторону с выраженной отрицательной амплитудой кривой (р<0,001). Таким образом, сахаросодержащие резинки (как, например, «Color») нельзя признать полезными, так как они провоцируют изменение кислотно-щелочного баланса в полости рта в кислую сторону, что при наличии других предрасполагающих факторов может быть рискованным в отношении развития кариеса зубов.

Таблица 12

Расчетные показатели кривых изменения рН смешанной слюны, спровоцированного разжевыванием жевательных резинок и конфет (M±m, ед. рН)

Название продуктов для жевания	Доступная информация о содержании сахарозы и сахарозаменителей	Амплитуда (группа «А»)	Угловой коэффициент анакроты (группа «В»)
«Color» («Lotte», Южная Корея)	сахароза, глюкоза, сорбитол	- 1,12 ± 0,153	715 ± 42
«Dirol» мятная («Dirol Kadbery», Россия)	сорбитол, аспартам	+ 0,10 ± 0,018	1010 ± 64
«Xylitol» сладкая мята («Lotte», Южная Корея)	ксилитол 74%, сахароза	+ 0,47 ± 0,022	1480 ± 78
«Xilitol» («Lotte», Южная Корея)	ксилитол 36% + сорбитол 11%	+ 0,45 ± 0,021	465 ± 38
Жевательные конфеты «R.O.C.S.» со вкусом ананаса (WDS)	ксилитол + сорбитол + стевиозид	+ 0,74 ± 0,035	770 ± 54
Основа со стевиозидом 1	стевиозид 1,25%	+ 0,62 ± 0,036	790 ± 55
Основа со стевиозидом 2	стевиозид 2,5%	+ 0,84 ± 0,047	910 ± 61
Основа (placebo)	-	+ 0,12 ± 0,013	560 ± 43

В группе «В» (табл.12), где пережевыванию исследуемых продуктов предшествовала стимуляция ацидогенной микрофлоры полости рта тестовым раствором сахарозы, нас в большей степени интересовала скорость ликвидации микробного ацидоза в смешанной слюне. Ее наиболее точно отражает угловой коэффициент анакроты кривой рН. Судя по его величине, после сахарозной нагрузки реакция смешанной слюны наиболее быстро возвращается к начальным значениям под влиянием жевательных резинок «Xylitol» и «Dirol», что мы связываем с наличием в их составе мятной отдушки. В то же время резинки со стевиозидом и жевательные конфеты «R.O.C.S.», несмотря на то, что они не содержали такой отдушки, также достаточно быстро ликвидировали ацидоз в смешанной слюне добровольцев. Не исключено, что это действие также обусловлено присутствием стевиозида в рецептуре конфет «R.O.C.S.». Наиболее медленно восстанавливалось значение рН под влиянием резинки «Xylitol» с 36% ксилитола и 11% сорбитола, а также placebo.

Исследования в обеих группах показали, что сахарозаменитель стевиозид, содержащийся в жевательных резинках в небольшом количестве (1,25 - 2,5%), способствует выраженному смещению рН смешанной слюны и его быстрому восстановлению после сахарозной стимуляции микробной кислотопродукции. Эти показатели статистически достоверно превосходят аналогичные, полученные с другими жевательными резинками и placebo. По нашему мнению, именно выраженный сладкий вкус стевиозида способствует количественному и качественному изменению состава секретируемой слюны во время жевания. Таким образом, сахарозаменитель стевиозид может являться полезной альтернативой ксилитолу, сорбитолу и другим известным сахарозаменителям, наиболее популярным в настоящее время в составе жевательных резинок.

Проведенное исследование показала, что двойное слепое исследование показало, что жевательные резинки и конфеты с сахарозаменителями на протяжении 10 минут жевания способствуют смещению реакции смешанной слюны в щелочную сторону и ликвидации микробного ацидоза, вызванного употреблением ферментируемых углеводов. Жевательные резинки с сахарозой потенциально опасны для зубов. В то же время использование стевиозида в составе жевательной резинки позволяет при сохранении ее положительных действий в полости рта существенно уменьшить (в 30 - 40 раз) концентрацию сахарозаменителя и, следовательно, его побочное действие на организм.

Предварительные клиническо - лабораторные исследования проведены на кафедре пародонтологии, зав. каф., проф. В.А. Румянцев.

Согласно поставленным задачам в настоящем исследовании проведены 9 серий экспериментов на животных и на добровольцах. Установлены сезонные хронобиологические ритмы под влиянием сахарозы и сахарозаменителей: ксилитолом, сорбитолом и профилактическая направленность в восстановлении рН полости рта у добровольцев после приема высоких концентраций сахарозы и сахарозаменителей. Мы отдаем предпочтение растительному сахарозаменителю, полученному по нашему способу из выращенной и акклиматизированной в средней полосе России бразильского растения стевии. Впервые установлено влияние сахарозаменителей и сахарозы на остеиндуктивную активность нижнечелюстной кости крысы.

Можно говорить о том, что введение таких заменителей сахарозы, как сорбитол и ксилитол, влияет на характер стадии минерализации эктопического остеогенеза. Сахарозаменители не безразличны для регенераторных процессов в костях, а так как снижен показатель суммарной характеристики регенераторной потенции кости (Сумма Х), то можно считать, что они подавляют остеоиндуктивный механизм регенерации кости. Например, при костной травме или при атрофическом процессе в альвеолярном отростке при пародонтите. Однако на основании данных по трехмесячной нагрузке сорбитолом с последующей ее трехмесячной отменой можно предполагать, что со временем организм адаптируется к введению этого сахарозаменителя и его регенераторные потенции восстанавливаются.

Внедрение в клиническую практику наших разработок может оказать положительное влияние на профилактику и снижение воспалительных заболеваний заболеваний полости рта при приеме в лечебных дозах изученных сахарозаменителей: сорбитола, ксилитола и стевиозида.

ВЫВОДЫ

1. У крыс, питавшихся обычным рационом вивария, отмечены сезонные изменения ряда биохимических параметров; активности Гл-6-ФДГ, ЛДГ и СуДГ, содержания лактата в печени и слизистой оболочке десны, активности МДГ в печени. Эти сезонные колебания сохранялись при питании рационом с 54% сорбитола или 54% сахарозы или смесью из 27% сорбитола с 27% сахарозы. Только в печени крыс, питавшихся рационом с 54% сорбитола, выявлена инвертная сезонная реакция, что отражает влияние сахароспиртов на углеводный обмен и метаболический цикл Кребса.

2. Установлена взаимозависимость между возрастом, сезоном, различными квотами сахароспиртов в диете животных и активностью ферментов углеводного обмена цикла трикарбоновых кислот.

3. Кормление крыс кариесогенной диетой с 54% сахарозы увеличивало содержание лактата в слюне и печени.

4. Диета, даваемая в течение месяца, с 54% сорбитола, вызывала диарею, снижала массу тела и печени крыс, резко повышала активность сорбитолдегидрогеназы сыворотки крови и печени, несколько уменьшала остеоиндуктивные потенции альвеолярного отростка нижней челюсти, а даваемая в течение 3 месяцев снижала уровень АТФ в слизистой оболочке десны. Диета с 27% сорбитола меньше снижала массу тела. Диета с 10% сорбитола не оказывала существенного влияния на изученные параметры.

5. Пища 54% ксилитола, даваемая в течение месяца, вызывала диарею, снижала массу тела и печени. Диета с 27% ксилитола меньше снижала массу тела. Пища с 10% ксилитола не влияла существенно на массу тела и печени крыс, но несколько ухудшала остеоиндуктивные свойства кости альвеолярного отростка челюсти.

6. Диета с 54% сорбитола, даваемая в течение 3 месяцев, меньше месячной диеты снижала массу тела и остеоиндуктивные потенции альвеолярного отростка кости и меньше повышала активность сорбитолде-гидрогеназы сыворотки крови по сравнению с животными, находившимися на обычном виварийном рационе.

7. Отмена трехмесячного 54% сорбитольного рациона и последующее трехмесячное кормление обычной виварийной пищей не приводило к полной нормализации массы тела и активности сорбитолдегидрогеназы сыворотки крови. Масса тела оставалась более низкой, а активность сорбитолдегидрогеназы более высокой, чем в контрольной группе крыс, питавшихся обычной пищей вивария.

8. Длительное кормление пищей с высоким содержанием сорбитола или ксилитола не следует рекомендовать для предупреждения кариеса зубов из-за вызываемых этими пищевыми рационами неблагоприятных изменений как в организме вообще, так и в тканях и жидкостях полости рта. Более благоприятной оценки в этом плане заслуживает диета с 10% ксилитола или 10% сорбитола, хотя некоторое ослабление остеоиндуктивных потенций кости альвеолярного отростка челюсти выявлено при 10% ксилитольной диете, что может иметь значение в направлении усиления атрофии кости альвеолярного отростка при пародонтите.

9. Разработаны новые отечественные технологии получения дитерпеновых гликозидов - перспективных сахарозаменителей и ростостимулятора - казаминовых кислот, имеющих также большие перспективы по их использованию. Обе технологии защищены патентами.

10. Разработана новая отечественная технология получения зубного элексира, превосходящая ныне существующие по поддержанию щелочного баланса в полости рта, КОР и обладающего положительным бактериоцидными свойствами. Технология защищена патентом.

...