Влияние Глутоксима на формирование и течение туберкулезного воспаления у экспериментальных животных

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Влияние Глутоксима на формирование и течение туберкулезного воспаления у экспериментальных животных

глутоксим химиотерапия туберкулез

Иммунопатологические состояния при туберкулезе являются показаниями для назначения иммунокорригирующих препаратов для повышения эффективности противотуберкулезной терапии.

Первые экспериментальные исследования по применению Глутоксима в комплексной химиотерапии свидетельствуют о положительном эффекте, что проявилось в снижении весовых индексов и высеваемости микобактерий туберкулеза на 37,5% по сравнению с контролем лечения одними противотуберкулезными препаратами.

Целью настоящего исследования явилось изучение влияния нового лекарственного препарата Глутоксим на формирование и течение туберкулезного воспалении в условиях эксперимента.

Модель генерализованного туберкулеза у мышей воспроизводили путем внутривенного введения 2-х недельной высоковирулентной культуры микобактерий туберкулеза (МБТ) штамма Н37Rv в дозе 0,05 мг на мышь.

Глутоксим вводили внутрибрюшинно один раз в день со второго дня после заражения мышей в течение 3 недель ежедневно. Дозы препарата рассчитаны исходя из рекомендуемых дозировок для человека - 5-40 мг. Минимальная - 0,08 мг/кг (1 группа); средние 0,5 мг/кг и 1 мг/кг (соответственно, 2 и 3 группа) и 10-кратное превышение средней терапевтической дозы - 5 мг/кг (4 группа). Контрольной группе мышей - спонтанное течение туберкулезного процесса - вводили физиологический раствор.

Оценку влияния препарата проводили в динамике через 7, 14, 21 день после заражения и в сравнении с контролем. В каждой группе на каждую временную точку было взято по 10 мышей.

Критериями оценки действия препарата на туберкулезное воспаление были изменения весовых индексов внутренних органов (легкие, селезенка, печень, почка); степени поражения легких (СТПЛ) у мышей по О.О. Макеевой; высеваемости МБТ из гомогенатов легких и селезенки.

Прогрессирование туберкулезного процесса у зараженных мышей характеризовалось повышением весовых показателей легких и селезенки и степени пораженности легких. Колебание весового индекса легких у мышей опытных групп зависело от дозы; в большей степени различия с контролем были у мышей 2 и 3 групп.

Морфологическая характеристика экспериментального туберкулезного воспаления у мышей, пролеченных различными дозами Глутоксима.

На 7 сутки после заражения мышей культурой H37Rv при микроскопическом исследовании выявлялась картина интерстициальной пневмонии. Метаальвеолярные перегородки были очагово инфильтрированы гистиоцитами, лимфоцитами и нейтрофилами. Из всех мышей только у 3 определялись единичные макрофагальные гранулемы без четкого просветления. Показатели объемной плотности воспалительного инфильтрата в легких мышей контрольной группы и всех опытных групп достоверно не различались (табл. 2). В сравниваемых группах не было существенных различий показателей содержания в составе воспалительного инфильтрата нейтрофилов и лимфоцитов.

В гистологических срезах печени определялись макрофагальные гранулемы без четкого просветления и перигранулемного лимфоидного вала, а также явления слабо- или умеренно выраженной мезенхимально-воспалительной реакции. Дистрофические изменения гепатоцитов ни в одной из групп не выявлялись. По морфометрическим данным у мышей 3 и 4 групп наблюдалась тенденция к увеличению числа гранулем по сравнению с контрольной группой. При введении различных доз Глутоксима отмечается тенденция к увеличению числа ретикулоэндотелиальных клеток в печеночных дольках. По сравнению с контролем показатели числа ретикулоэндотелиальных клеток в 1 и 2 группе мышей были статистически достоверно более высокими. Во всех сравниваемых группах число лимфоцитов, диффузно рассеянных по ходу печеночных балок, было сходным. Количество двуядерных гепатоцитов (косвенный показатель усиления регенераторных процессов) у мышей, леченных различными дозами Глутоксима было повышено. При этом у мышей 2 группы этот показатель статистически достоверно отличался от контрольной группы (табл. 3).

Таким образом, на 7-е сутки после заражения мышей МБТ по данным морфологического и морфометрического исследований в легких нелеченных и леченных различными дозами Глутоксима различий не выявлено. В печени мышей, получавших Глутоксим, по сравнению с контролем отмечена тенденция к увеличению числа ретикулоэндотелиальных (купферовских) клеток и двуядерных гепатоцитов, причем в 1 и 2 группах эти различия были статистически достоверными. Выявленные изменения свидетельствуют о выраженном активирующем воздействии Глутоксима на макрофагальную систему, что приводит к увеличению числа макрофагальных гранулем и купферовских клеток в печени. Кроме того, Глутоксим, по-видимому, оказывает стимулирующее действие на пролиферативные процессы (увеличено число двуядерных гепатоцитов), однако это требует более детального подтверждения с помощью более точных методов исследования (авторадиография).

На 14 сутки эксперимента при микроскопическом исследовании в легких мышей всех групп на фоне уже описанных в предыдущий срок изменений выявлялись единичные в препарате (1-3) макрофагальные гранулемы с тенденцией к просветлению. При морфометрическом исследовании показатели объемной плотности очагов туберкулезной пневмонии в сравниваемых группах были сходными. Статистически не различались и показатели числа нейтрофилов в составе инфильтрата. Содержание лимфоцитов в воспалительном инфильтрате у мышей 3 и 4 групп было достоверно ниже, чем в контрольной группе.

В печени мышей 1 и 2 групп число гранулем было выше, чем в контроле (р<0,05) (табл. 3). При этом у мышей, леченных Глутоксимом, было более высокое число зрелых гранулем (с «просветлением»); показатели числа гранулем с лимфоидным валом в опытных и контрольной группах не различались. У мышей 1 и 2 групп наблюдалось достоверное увеличение по сравнению с контролем числа ретикулоэндотелиальных клеток. Число лимфоцитов и двуядерных гепатоцитов было сходным в сравниваемых группах.

Таким образом, на 14 сутки экспериментального туберкулеза у мышей в легких под влиянием Глутоксима, примененного в дозах 1 и 5 мг/кг, выявлено достоверное снижение лимфоцитов в составе воспалительного инфильтрата, что указывает на иммунотропный эффект препарата. В печени по данным морфометрического исследования у мышей, получавших Глутоксим в дозах 0,08 и 0,5 мг/кг, отмечена активация макрофагального звена: увеличено число гранулем и среди них более зрелых со светлым центром, а также увеличено число диффузно рассеянных ретикулоэндотелиальных клеток, среди которых большую часть составляют клетки Купфера (тканевые макрофаги).

На 21 сутки после заражения мышей МБТ в легких животных всех групп выявлялись обширные сливающиеся между собой очаги интерстици альной пневмонии. В печени определялись гранулемы, большая часть которых была с просветлением в центре и перигранулемным лимфоидным валом. По ходу печеночных балок отмечалась умеренно выраженная ретикулоэндотелиальная реакция и скудная инфильтрация диффузно рассеянными лимфоцитами.

По морфометрическим данным в легких мышей опытных групп, леченных Глутоксимом, выявлялась тенденция к снижению распространенности пневмонии. При этом показатель объемной плотности очагов у мышей 2 группы был достоверно ниже, чем в контрольной. В составе воспалительного инфильтрата в легких мышей отмечено снижение содержания нейтрофилов и лимфоцитов (табл. 2). В печени у мышей 2, 3, 4 групп увеличивалось по сравнению с контролем число гранулем в целом, а также число гранулем с просветлением и гранулематозным лимфоидным валом. Отмечено также увеличение числа ретикулоэндотелиальных элементов под влиянием Глутоксима.

Таким образом, на 21 сутки после заражения МБТ в легких мышей, леченных Глутоксимом, отмечено уменьшение распространенности пневмонии, что сопровождалось снижением содержания в составе воспалительного инфильтрата нейтрофилов. Выявленная динамика морфологических изменений в легких свидетельствует об иммунокорригирующем действии Глутоксима на гранулематозный воспалительный процесс. Указанный эффект, по-видимому, реализуется через систему цитокинов, в частности за счет снижения продукции ИЛ-8, что приводит к снижению содержания нейтрофилов в составе воспалительного инфильтрата. По данным исследования воспалительного процесса в печени под влиянием Глутоксима отмечается активация макрофагального звена: повышается число гранулем и гранулем со светлым центром, увеличивается число диффузно рассеянных Купферовских клеток. Данные морфометрии представлены в табл. 2, морфологическая характеристика воспалительного процесса в печени - в табл. 3.

Анализируя данные морфологического исследования течения туберкулезного воспалительного процесса в разные сроки под влиянием разных доз Глутоксима следует отметить следующие закономерности. Глутоксим в сроки 7 и 14 суток наблюдения после заражения не утяжеляет течение воспалительного процесса в легких и печени. На 21 сутки под влиянием Глутоксима выявлена положительная динамика: в легких - тенденция к снижению распространенности пневмонии и уменьшению выраженности экссудативного компонента воспалительной реакции; в печени Глутоксим ускоряет эволюцию гранулем. Кроме того, в печени под влиянием этого препарата увеличивается число ретикулоэндотелиальных элементов, больную часть которых составляют клетки Купфера. Таким образом, влияние Глутоксима на развитие гранулематозного процесса реализуется, в основном, за счет влияния на систему макрофагальных клеток.

Глутоксим не оказывает гепатотоксического действия, более того, на ранних этапах развития туберкулезной инфекции стимулирует пролиферативную активность гепатоцитов.

При анализе данных по влиянию Глутоксима на течение туберкулезного процесса в зависимости от его дозы выявлен оптимальный эффект во 2 и 3 группах наблюдения, т.е. при использовании доз 0,5 мг/кг и 1,0 мг/кг.

Глутоксим положительно влияет на динамику развития туберкулезного воспаления. Он уменьшает выраженность экссудативного компонента и распространенность туберкулезной пневмонии и усиливает отграничительные реакции в гранулемах печени.

Размещено на Allbest.ru