Оценка антиноцицептивного потенциала антидепрессантов в терапии невропатической боли, индуцированной экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом

Размещено на http://www.allbest.ru/

УДК 616.832-004-08:615.212/.214-092.9

ГУ «Днепропетровская медицинская академия МЗ Украины»

ОЦЕНКА АНТИНОЦИЦЕПТИВНОГО ПОТЕНЦИАЛА АНТИДЕПРЕССАНТОВ В ТЕРАПИИ НЕВРОПАТИЧЕСКОЙ БОЛИ, ИНДУЦИРОВАННОЙ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫМ АЛЛЕРГИЧЕСКИМ ЭНЦЕФАЛОМИЕЛИТОМ

А.А. Нефедов,

В.И. Мамчур

Одним из малоизученных клинических разделов рассеянного склероза (РС) является проблема болевого синдрома, расцениваемого чаще всего как нетипичные проявления демие- линизирующего процесса при PC [11]. В ранних работах по рассеянному склерозу этой проблеме не уделялось достаточного внимания, хотя у части пациентов описывали боль, как сопутствующий симптом [3, 15]. Однако публикации последних лет показывают, что боль является частым и практически постоянным симптомом заболевания. По данным разных авторов, в настоящее время частота хронических болевых синдромов у пациентов с РС достигает 50-80 % [18, 23, 26]. При этом больные PC при наличии хронической боли более ин- валидизированы и социально дезадаптированы, чем пациенты с аналогичным неврологическим дефектом, но без болевого синдрома [4, 8, 26].

Самую многочисленную группу при рассеянном склерозе составляют боли невропатического характера. Их развитие обусловлено очагами демиелинизации в нервной системе, что приводит к изменениям функционирования ионных каналов в поврежденных аксонах, к формированию эктопических очагов генерации нервных импульсов. Невропатические боли при рассеянном склерозе могут проявляться жжением, дизе- стезиями, покалыванием или ощущением боли в ответ на неболевой стимул [4].

Наиболее часто при рассеянном склерозе встречаются дизестезии. Дизестезические боли обычно наблюдаются у пациентов с преимущественным вовлечением малых С-волокон (вызывающие поражение поверхностной болевой и температурной чувствительности и вегетативную дисфункцию). Несколько реже, при туннельных невропатиях, встречается трункальная боль, обусловленная, по-видимому, дисфункцией А5- волокон [6].

Для терапии невропатического болевого синдрома при рассеянном склерозе применяют амитриптилин, ламотриджин, карбамазепин, га- бапентин, топирамат, хотя широкомасштабных доказательных исследований эффективности этих препаратов не проводили [7, 16, 21].

Учитывая изложенное выше, нам представлялось целесообразным проведение сравнительного фармакологического анализа влияния амит- риптилина, флуоксетина, пароксетина и тразодо- на (триттико) в терапии невропатического болевого синдрома в условиях экспериментального аллергического энцефаломиелита (ЭАЭ) - экспериментального эквивалента РС [1].

Цель исследования. Изучение влияния антидепрессантов на проявления невропатического болевого синдрома в условиях экспериментального аллергического энцефаломиелита на фоне базовой терапии солу-медролом.

Материал и методы. До начала выполнения работ комиссией по вопросам биоэтики утвержден протокол предстоящих исследований. Согласно требованиям GLP и Европейской конвенции о защите позвоночных животных, которые используются для экспериментальных и других целей, согласованы все процедуры, связанные с содержанием животных, гуманным обращением с ними и их использованием в эксперименте.

Животных содержали в стандартных условиях со световым режимом день - ночь 12 час/12 час при температуре воздуха 20-220 С со свободным доступом к воде и пище. ЭАЭ индуцировали однократной подкожной инокуляцией энцефалитогенной смеси (ЭГС) в полном адъюванте Фрейнда (ПАФ) из расчета 100 мг гомогената гомологичного спинного мозга; 0,2 мл ПАФ (содержание убитых микобактерий 5 мг/мл) и 0,2 мл физиологического раствора на животное. ЭГС вводили в основание хвоста под легким эфирным наркозом в объеме 0,4 мл [1].

Иммунизированные животные были разделены на пять групп: І - животные с ЭАЭ (контроль), n=12; ІІ - ЭАЭ + солу-медрол (СМ) + амитриптилин (10 мг/кг), n=6; III - ЭАЭ + СМ + пароксетин (8 мг/кг), n=6; IV - ЭАЭ + СМ + флу- оксетин (25 мг/кг), n=6; V - ЭАЭ + СМ + триттико (40 мг/кг), n=6.

Солу-медрол вводили животным ІІ-V групп согласно клиническому алгоритму применения препарата [20] из расчета 3,4 мг/кг в вену капель- но в объеме физиологического раствора, состав-ляющего 1/10 ОЦК [13] в течение недели. Дополнительно, на фоне базовой гормональной терапии, этим грызунам внутрижелудочно один раз в сутки вводили исследуемые вещества в указанных дозах со второго по 16-й день после индукции ЭАЭ (латентная фаза + клиническая фаза до окончания пика заболевания). Группой контроля выступали животные с индуцированным ЭАЭ (І группа), в течение 16 дней внутрижелудочно получавшие дистиллированную воду.

Критериями развития невропатического болевого синдрома в условиях ЭАЭ были изменения порогов тактильной и болевой чувствительности в тесте тактильной аллодинии, в формалиновом тесте, а также в тесте «горячая пластина».

Тактильную аллодинию у животных изучали в модификации филаментного теста von Frey путем регистрацией давления, при котором животные отдергивали левую заднюю лапу, избегая воздействия нарастающих по степени стимулов. Пробу проводили в середине подошвы левой задней лапы, избегая менее чувствительных подушечек на подошвах. К лапе подносили набор из восьми волосков von Frey с логарифмически увеличивающейся жесткостью (0,41, 0,69, 1,20, 2,04, 3,63, 5,50, 8,51 и 15,14 г). Волосок фон Фрея прикладывали перпендикулярно к среднеподошвенной поверхности в зоне распределения ветвей седалищного нерва [25].

Оценку влияния препаратов на проявления химической гипералгезии проводили с использованием формалинового теста. Животных всех групп приучали к камере наблюдения в течение 1 часа перед получением подкожной инъекции 0,05 мл 0,5 % раствора формалина (Acros organics, США) в тыльную поверхность стопы правой задней конечности. Раствор формалина применяли через 30 минут после окончания курса введения тест-образцов. Наблюдение осуществляли в течение 60 минут после инъекции формалина путем регистрации числа вздрагиваний животного [24].

Изучение действия антидепрессантов на проявления термической гипералгезии проводили с использованием теста «горячая пластина». При использовании данного теста животных поочередно помещали на пластину, нагретую до 57580С; температуру поверхности пластины регулировали термостатом. По секундомеру засекали время от момента помещения животного на пластину до момента первого облизывания лап (задних), что и составляло латентный период реакции облизывания лапок (ЛП РОЛ). Максимальное время нахождения животного на пластине - 25 секунд [22].

Числовые экспериментальные данные обрабатывали методом вариационной статистики с помощью программы статистического анализа AnalystSoft, StatPlus. Версия 2006 [10]. Математическая обработка полученных данных включала в себя расчет средних арифметических значений (М), их ошибок (±m). Для количественных показателей проводилась проверка гипотезы нормального распределения данных в группах посредством критерия Шапиро-Уилка. Уровень значимости для данного критерия был равным 0,01. В условиях нормального распределения рядов опытные группы сравнивали с контрольной и между собой посредством однофакторного дисперсионного анализа ANOVA и критерия Дункана. В условиях ненормального распределения рядов достоверность различий средних арифметических (р) определялась с помощью непараметрического ^-критерия Манна-Уитни. Уровень значимости для данного критерия был равным 0,05.

Результаты исследования и их обсуждение. Показано, что подкожная инокуляция энцефалитогенной смеси вызывала развитие нейрональной сенситизации, аллодинии и гипералгезии (рис.).

В частности, у животных экспериментальных групп после индукции ЭАЭ регистрировалось статистически значимое снижение порога тактильной чувствительности в 2,3 раза (р<0,001) по отношению к интактному контролю. При этом инъекция 0,5 % раствора формалина в тыльную поверхность стопы крыс приводила к статистически значимому увеличению общего количества вздрагиваний в 9,5 раза (р<0,001) по отношению к группе интактных животных. К тому же, в тесте «горячая пластина» у крыс с ЭАЭ- индуцированной невропатией латентный период реакции избавления статистически значимо снижался в 1,7 раза (р<0,05) по отношению к группе интактного контроля (рис.).

Результаты оценки изменений аллодинии и гипералгезии после курсового применения антидепрессантов в условиях ЭАЭ-индуцированной невропатии представлены в таблице.

Установлено, что при проведении точечной механической стимуляции задней конечности после курсового введения антидепрессантов статистически значимое повышение порога аллоди- нии по отношению к показателям активного контроля регистрировалось только у животных ІІ и V экспериментальных групп. В частности, способность уменьшать выраженность тактильной ал- лодинии убывала в ряду амитриптилин (60 %, р<0,05) > триттико (40 %, р<0,05) >> флуоксетин (18 %, р>0,05) ~ пароксетин (14 %, р>0,05) (табл.).

По мнению Баринова Н.А. (2007), механизмы, связанные с нарушением процессов торможения на уровне заднего рога, участвуют в развитии стимулзависимых болей, возникающих в ответ на раздражение сенсибилизированных в результате повреждения периферических ноцицеп- торов [5]. Вследствие увеличения возбудимости чувствительных нейронов задних рогов спинного мозга, связанных с зоной иннервации поврежденного нерва, происходит сенсибилизация близлежащих интактных нейронов с расширением рецептивной зоны [9]. Сенсибилизация нейронов задних рогов ведет к снижению болевого порога и развитию аллодинии, то есть появлению болевых ощущений на раздражение, которое в норме ими не сопровождается [12].

Примечание. * - p<0,001; ** - p<0,05 по отношению к показателям контроля; ЭАЭ - экспериментальный аллергический энцефаломиелит

Рис. Характеристика проявлений невропатического болевого синдрома в условиях экспериментального эквивалента рассеянного склероза у крыс

Таблица Изменения аллодинии и гипералгезии у крыс после курсового применения антидепрессантов в условиях ЭАЭ-индуцированной невропатии

Примечание. * - p<0,05 по отношению к показателям активного контроля; ЭАЭ - экспериментальный аллергический энцефаломиелит

Показано, что после курсового введения антидепрессантов общее количество вздрагиваний, вызываемых инъекцией 0,5 % раствора формалина в тыльную поверхность стопы экспериментальных крыс, было меньшим, чем в группе контроля. Так, количество ответов ранней и поздней фазы под влиянием амитриптилина статистически значимо уменьшалось на 41 % (р<0,05) по сравнению с показателями животных контрольной группы. При этом ослабление химической гипералгезии после введения триттико (21%, р>0,05), носило лишь характер тенденции, а применение флуоксетина и пароксетина практически не влияло на высвобождение медиаторов боли и воспаления (табл.). антидепрессант невропатический склероз сенситизация

К тому же, в условиях курсового введения амитриптилина, флуоксетина, пароксетина и триттико статистически значимое увеличение латентного периода реакции облизывания лапок на 49 % (р < 0,05) по отношению к показателям контроля также регистрировалось только после применения амитриптилина (табл.).

Согласно данным Баринова Н.А. (2007), специфические тепловые TRPV-3 и TRPV-4 терморецепторы AS-афферентов (проводящих неболевую импульсацию) активируются в норме при более низкой температуре, чем TRPV-1 и TRPV-2 рецепторы C-афферентов (проводящих болевую импульсацию), и подавляют проведение ноцицептивной афферентации на центральном уровне. Повреждение Л5-афферентов при невропатии ведет к утрате тормозных влияний на спинальном уровне и изменению теплового болевого порога. Та-ким образом, боль возникает в связи с раздражением TRPV-1 рецепторов при более низкой, чем в норме, температуре вследствие нарушения центрального торможения [5]. Возможно, только курсовое введение амитриптилина способствовало восстановлению структурной организации миелинизированных Л5-афферентов, связанных с ваниллоидными терморецепторами TRPV-4 и TRPV-3, нормализуя тормозные влияния на спинальном уровне и вызывая центральную модификацию полимодального сенсорного импульса.

Следовательно, курсовое применение амит- риптилина и триттико, но не пароксетина или флуоксетина ослабляет индуцированные экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом нейрональную сенситизацию, аллодинию и гипералгезию,

Известно, что одним из направлений терапии невропатических болевых синдромов является применение психотропных препаратов, модулирующих опиоидные и моноаминергические нейромедиаторные системы. Антидепрессанты считаются препаратами первой очереди для лечения такой боли. И хотя их клиническое применение сопровождается развитием ряда побочных эффектов, амитриптилин и нортриптилин имеют наибольшую доказательную базу при терапии невропатических болевых синдромов [17, 19]: доказано дозозависимое болеутоляющее действие именно трициклических антидепрессантов в отношении аллодинии, жгучих и стреляющих болей при РС. Селективные ингибиторы обратного захвата серотонина (флуоксетин, пароксетин), несмотря на менее выраженные побочные эффекты, не нашли широкого применения из-за недостаточного антиноцицептивного потенциала, а клинические наблюдения за такими антидепрессантами, как тразодон (триттико), нефазодон и миртазапин свидетельствуют об их эффективности в терапии невропатического болевого синдрома [2, 8, 16].

Предполагается, что антиноцицептивные свойства антидепрессантов более выражены у препаратов, воздействующих как на серотони- нергическую, так и норадренергическую нейро- медиаторные системы [14], что подтверждают результаты нашего исследования.

Выводы

После подкожной инокуляции энцефалитогенной смеси у крыс регистрируются проявления невропатического болевого синдрома, проявляющегося развитием нейрональной сенситиза- ции, аллодинии и гипералгезии.

Курсовое применение амитриптилина и тразодона (триттико), но не пароксетина или флуоксетина в условиях ЭАЭ вызывает нормализацию тактильной и болевой чувствительности различной степени выраженности.

Способность ослаблять проявления невропатического болевого синдрома в условиях экспериментального эквивалента РС убывает в ряду амитриптилин > триттико >> флуоксетин ~ паро- ксетин.

Перспективы дальнейших исследований.

В рамках научно-исследовательской работы кафедры фармакологии ГУ «Днепропетровская медицинская академия МЗ Украины» «Системная фармакология неопиоидных анальгетиков и средств медикаментозной защиты мозга в условиях патологических состояний» (ГР № 0114U0- 00935) будет проведено изучение эффективности антидепрессантов в терапии соматогенных болевых синдромов в условиях экспериментального эквивалента РС.

Литература

1. Нефьодов О.О. Моделювання та оцінка перебігу експериментального алергічного енцефаломієліту / О.О. Нефьодов, В.Й. Мамчур, Ю.В. Марченко // Вісн. пробл. біол. і мед. - 2014. - Вип. 4. - Т. 2 (114). - С. 205-208.

2. Нефьодов О.О. Фармакологічний аналіз терапії болю за умов розсіяного склерозу / О.О. Нефьодов : матеріали XV конгресу СФУЛТ, 16-18 жовтня 2014 р., Чернівці-Київ-Чикаго. - С. 365.

3. Агафьина A.C. Болевой синдром в клинике рассеянного склероза: клинические формы, динамика, алгиче- ские варианты дебюта / A.C. Агафьина, И.А. Соколова: материалы Международной конференции [«Клинические нейронауки: нейрофизиология, неврология, нейрохирургия»]. - Ялта, 2003. - С. 107-108.

4. Агафьина А.С. Болевой синдром при рассеянном склерозе / А.С. Агафьина, В.М. Назаров, И.Д. Столяров // Нейроиммунология. - 2008. - Т. 6, № 3-4. - С. 27-33.

5. Баринов А.Н. Лечение невропатических болевых синдромов/ А.Н. Баринов // Укр. мед. часопис. - 2007. № 2 (58). - С. 91-96.

6. Бархатова В.П. Патофизиология демиелинизирующе- го процесса // Рассеянный склероз. Избранные вопросы теории и практики / Под ред. И.А. Завалишина, И. Головкина. - М.: Детская книга, 2000. - 185-204

7. Давыдов О.С. Принципы и алгоритмы лечения нейропатической боли/ О.С. Давыдов, А.Б. Данилов // РМЖ. 2008. - № 16 (спец. вып.). - С. 11-16.

8. Нефедов А.А. Возможности фармакологической коррекции болевого синдрома при рассеянном склерозе / А.А. Нефедов// Бук. мед. вісник. - 2015. - Т. 19, № 1 (73). - С. 232-236.

9. Новиков А.В. Невропатическая боль. Патофизиологические механизмы и принципы терапии / А.В. Новиков, Н.Н. Яхно // РМЖ. - 2001. - № 7-8. - С. 318-321.

10. Пурэв Дуламрагчаа. Клинико-эпидемиологическая, психофизиологическая характеристика и лечение болевого синдрома у пациентов с рассеянным склерозом: дисс. ... канд. мед. наук: 14.00.13 / Пурэв Дуламрагчаа. - М., 2004. - 125 с.

11. Сапон Н.А. Экспериментальное моделирование и оценка интенсивности невропатического болевого синдрома / Н.А. Сапон, Г.Е. Читаева // Укр. нейрохірург. ж. - 2006. - № 1. - С. 111-117.

12. Стефанов А.В. Доклинические исследования лекарственных средств / А.В. Стефанов. - К.: Авиценна, 2002. 568 с.

13. Тарасова С.В. Лечение хронической боли флувокса- мином, амитриптилином и транскраниальной электростимуляцией мозга / С.В. Тарасова, А.В. Амелин, А.А. Скоромец // Ж. неврол. и психиатр. им. С.С. Корсакова. - 2008. - № 6. - С. 43-46.

14. Торопина Г.Г. Боль при рассеянном склерозе / Г.Г. Топорина, Т.Е. Шмидт // Неврол. ж. - 2003. - № 1. - С. 40-44.

15. A comparative study of efficacy and safety of gabapentin versus amitriptyline as coanalgesics in patients receiving opioid analgesics for neuropathic pain in malignancy / M. Banerjee, S. Pal, B. Bhattacharya [et al.] // Indian J. Pharmacol. - 2013. - № 45 (4). - Р. 334-338.

16. A systematic review of antidepressants in neuropathic pai n / H.J.McQuay, M. Nye B.A. Tramer, D. Carroll [et al.] // Pain. - 1996. - Vol. 68, № 2-3. - 217 р.

17. Chatel M. Pain in multiple sclerosis / M. Chatel, M. Lanteri-Minet, C. Lebrun-Frenay // Rev Neurol. - 2001. - Vol. 157, № 8-9 (Pt 2). - Р. 1072-1078.

18. Cruccu G. Treatment of painful neuropathy / G. Cruccu // Curr Opin Neurol. - 2007. - Vol. 20, № 5. - Р. 531-535.

19. Double-blind trial of dexamethasone versus methylpredni- solone in multiple sclerosis acute relapses / L. La Mantia, M. Eoli, C. Milanese [et al.]// Europ. Neuro. - 1994. - № 34. - Р. 199-203.

20. EFNS guidelines on pharmacological treatment of neuropathic pain/ N. Attal, G. Cruccu, R. Baron [et al.] // Eur. J. Neurol. - 2010. - № 17 (9). - Р. 1113-1188.

21. Hunskaar S.A modified hot-plate test sensitive to mild analgesics / S. Hunskaar, O.G. Berge, K. Hole // Behavioural Brain Research. - 1986. - Vol. 21. - P. 101-108.

22. Maloni H.W. Pain in multiple sclerosis: an overview of its nature and management / H.W. Maloni // J. Neurosci. Nurs. - 2000. - Vol. 32, № 3. - Р. 139-144.

23. Modified formalin test: characteristic biphasic pain re- sponse/ M. Shibata, T. Ohkubo, H. Takahashi, R. Inoki // Pain. - 1989. - Vol. 38. - P. 347-352.

24. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw / S.R. Chaplan, F.W. Bach, J.W. Pogrel [et al.] // J. Neurosci Methods. - 1994. - Vol. 53 (1). - P. 55-63.

25. Siniscachi A. Drugs treatment of pain in multiple sclerosis / A. Siniscachi, L. Gallelli, G. De Sarro / Curr. Clin. Pharmacol. - 2007. - № 2 (3). - P. 227-233.

Аннотация

В работе представлен сравнительный фармакологический анализ влияния ряда антидепрессантов на проявления невропатического болевого синдрома в условиях экспериментального эквивалента рассеянного склероза. Показана способность амитриптилина и тразодона (триттико), но не пароксетина или флуоксетина ослаблять индуцированные экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом (ЭАЭ) нейрональную сенситизацию, аллодинию и гипералгезию,

Ключевые слова: ЭАЭ, антидепрессанты, невропатическая боль.

У роботі представлений порівняльний фармакологічний аналіз впливу ряду антидепресантів на прояви невропатичного больового синдрому за умов експериментального еквіваленту розсіяного склерозу. Показана здатність амітриптиліну і тразодону (тріттіко), але не пароксетину або флуоксетину послаблювати індуковані експериментальним алергічним енцефаломієлітом (ЕАЕ) нейрональну сенситизацію, алодинію та гіпералгезію,

Ключові слова: ЕАЕ, антидепресанти, невропатичний біль.

The work presents a comparative pharmacological analysis of the influence of some antidepressants on the manifestations of neuropathic pain syndrome in experimental equivalent of multiple sclerosis. It shows the ability of amitriptyline and trazodone (trittico), but not paroxetine or fluoxetine to weaken induced by experimental allergic encephalomyelitis (EAE) neuronal sensitization, allodynia and hyperalgesia,

Key words: EAE, antidepressants, neuropathic pain.

Размещено на Allbest.ru