Гепатопротекторные свойства флавоноидов (фармакодинамика и перспективы клинического изучения)

Интенсивность анаэробного пути окисления углеводов при алкогольном поражении печени на фоне применения флавоноидов, СЭ и карсила была значительно снижена, а также наблюдались восстановительные процессы в митохондриях печени и повышалось содержание АТФ. Более выраженное восстановление показателей энергетического обмена наблюдалось у животных под влиянием флавицина и СЭ, применяемых на фоне 7-дневной алкоголизации: соотношение лактат/пируват снизилось на 88% и 91%, содержание АТФ увеличилось на 127% и 106%, активности СДГ - на 135% и 137% и ЦТО- на 63% и 55% соответственно по отношению к контролю, что достоверно не отличалось от соответствующих значений у интактных животных.

В условиях алкогольной интоксикации было выявлено индуцирующее влияние на цитохром-Р450-зависимые реакции: гесперидина и карсила - на N-деметилазную (+22% и +97%) и n-гидроксилазную активности (+289% и +420%); кверцетина - на N-деметилазную активность (+131%); СЭ - на n-гидроксилазную активность (+519%). При применении флавицина и диосмина все те изменения в данных реакциях микросомального окисления, которые были вызваны введением этанола, полностью устранялись: снижалась активность N-деметилазы (-51% и -42%) и повышалась активность n-гидроксилазы (+153% и +150%) до уровня нормы (указаны проценты изменения по сравнению с контролем, получавшим только этанол).

Таким образом, наибольшая эффективность гепатозащитного действия при алкогольном поражении печени, которая превышает таковую карсила, выявлена у флавицина и СЭ. Сравнительный анализ показывает, что чем в большей степени вещества восстанавливают про-антиоксидантное равновесие и устраняют метаболические сдвиги, развивающиеся вследствие усиления окислительного метаболизма алкоголя, тем более выраженным гепатозащитным действием они обладают. Важным в защите печени от повреждающего воздействия в результате оксидативного стресса является не только собственный антиоксидантный эффект соединений, но и способность поддерживать высокую активность эндогенной антиоксидантной системы, нарушение функционирования которой, приводит к срыву компенсации и развитию синдрома пероксидации.

3. Изучение антиоксидантного действия флавоноидов, сухого экстракта из V. abbreviate (truncatula) и карсила in vitro и их влияния на системы АОЗ, энергетического обмена и детоксикации in vivo в условиях нормы

Исследования, проведённые in vitro и на здоровых животных после курсового введения флавоноидов, СЭ и карсила в эффективных гепатопротекторных дозах, позволили установить следующее: I. Гесперидин, диосмин и флавицин подавляют Fe2+-индуцированное ПОЛ в системе липосом и являются менее сильными антиоксидантами прямого действия, чем кверцетин (IC50 равно соответственно 7,010-2М, 4,910-2М, 4,910-3М и 6,310-5М). II. В результате курсового введения исследуемых флавоноидов в организме животных регистрируется: 1) снижение ТБК-активных продуктов крови; снижение активности антирадикальных и антиперекисных ферментов (СОД и ГП); 2) усиление глутатионовой системы (увеличение содержания GSH, активности ГР и НАДФ-редуктаз в печени); 3) снижение соотношения лактат/пируват и содержания глюкозы в печени; 4)повышение активности Mg2+АТФазы в митохондриях печени без снижения АТФ в этом органе; 5) повышение активности ферментов микросомального окисления.

Многие из выявленных эффектов флавоноидов проистекают, на наш взгляд, из природы химических свойств этих соединений, а именно способности участвовать в обратимых окислительно-восстановительных превращениях, проявляя как водороддонорные, так и водородакцепторные свойства. В силу этого биофлавоноиды могут формировать самостоятельные редокс-системы типа фенол-семихинон-хинон, что дает им возможность снижать количество и/или образование свободных радикалов и интенсивность ПОЛ и, вероятно, позволяет создавать в клетке резерв окисленных никотинамидных коферментов (NAD+; NADР+), которые могут обеспечить усиление метаболических реакций и поддержание пула восстановленного GSH, что повышает мощность эндогенной АОС. Формирование самостоятельных редокс-систем и усиление энергопродукции в ходе гликолиза может определять антигипоксическое действие флавоноидов, что помогает устранить усугубляющее влияние гипоксии и энергодефицита при развитии окислительного стресса.

Таким образом, исходя из полученных результатов, можно заключить, что механизм защитного действия биофлавоноидов против окислительного стресса, развивающегося при токсических поражениях печени, является многоплановым и многообразным. Это и прямое антиоксидантное действие в силу антирадикальных и хелатирующих свойств данных соединений. Это и непрямая защита путём активирования эндогенной системы АОЗ и детоксикации, а также повышение неспецифической устойчивости путём улучшения энергопродукции, защиты митохондрий и SH-групп белков от окислительного повреждения. Такое опосредованное повышение активности естественных защитных систем может иметь немаловажное значение в ускорении адаптации организма к действию повреждающих факторов среды. Следует подчеркнуть, что более значимым является активирование эндогенной защитной системы и оптимизация ее работы, чем собственная АОА соединений, что может достигаться, согласно последним данным литературы [Меньщикова Е.Б. и др., 2006], через активирование флавоноидами антиоксидант-респонсивного элемента (ARE), присутствующего в промоторах многих индуцибельных генов в ответ на окислительный и химический стресс.

4. Изучение влияния флавоноидов на эндотелиальную дисфункцию, продукцию NO, органный кровоток и гемореологические свойства крови

Хорошо известно положительное влияние биофлавоноидов на систему кровообращения, недостаточность которой способна усугублять метаболические нарушения, что требует коррекции гемодинамических и гемореологических расстройств при различных патологиях внутренних органов. Возможно, многие сосудистые эффекты флавоноидов связаны с их влиянием на эндотелийзависимые процессы [Benito S., 2002, Kowalczyk E., 2002, Lorenz M.,2004, Leikert J.F.,2002, Wallerath Th., 2005].

Наши исследования на животных с моделированием эндотелиальной дисфункции подтверждают данную точку зрения, демонстрируя эндотелий протективным действие гесперидина, диосмина, флавицина и кверцетина.

При тестировании эндотелиальной функции путем регистрации мозгового кровотока у крыс-самок с недостаточностью половых гормонов, получавших исследуемые флавоноиды в течение месяца в дозе 100 мг/кг, установлено улучшение реакции сосудов на ацетилхолин (стимулятор синтеза эндогенного NO), а также более выраженное снижение кровотока в ответ на введение блокатора NO-синтазы - нитро-L-аргинина по сравнению с экспериментальной патологией. Кроме этого, у животных, получавших флавоноиды, наблюдалось увеличение по сравнению с контролем степени прироста мозгового кровотока (гесперидин>кверцетин>диосмин>флавицин) в ответ на многократное введение ацетилхолина. Это позволяет сделать вывод об увеличении продукции NO эндотелиальными клетками под влиянием флавоноидов. Эндотелий протективное действие флавоноидов проявлялось и в том, что они увеличивали время тромбообразования, которое значительно снижалось у животных с дисфункцией эндотелия, располагаясь по эффективности своего действия в следующем порядке кверцетин>флавицин>диосмин>гесперидин.

Кроме того, флавоноиды на фоне эндотелиальной дисфункции оказывали корреггирующее действие на вязкость крови, уменьшали индекс агрегации эритроцитов и тромбоцитов и увеличивали индекс дезагрегации тромбоцитов, устраняли нарушение механических свойств эритроцитов (таблица 5).

Способность флавоноидов положительно влиять на функционирование сосудистого эндотелия имеет значение для нормализации органного кровотока и микроциркуляции. В опытах на наркотизированных крысах-самцах продемонстрировано улучшение печеночного кровотока при введении гесперидина и флавицина, а также показано, что данная реакция обусловлена их влиянием на эндотелий с активацией выработки NO.

Таблица 5 - Влияние флавоноидов на агрегацию тромбоцитов крови кастрированных крыс

Повышение содержания NO выявлено и методом ЭПР в организме животных, получавших гесперидин (100 мг/кг, 5 дней). О повышении уровня NO свидетельствовало увеличение компонентов сигнала парамагнитного аддукта NO-Fe2+-МГД2 в спектрах ЭПР мочи животных после применения гесперидина по сравнению с таковыми у интактных крыс (рис. 3).

Рисунок 3- Влияние введения гесперидина на образование аддуктов NO в организме здоровых животных

В результате инъекции CCl4 в печени наблюдался значительный рост интенсивности генерации радикалов NO, регистрируемой методом ЭПР с использованием Fe3+- ДЭТК2 в качестве ловушки NO, вероятнее всего, вследствие активации iNOS. Усиление экспрессии iNOS под действием СС14, возможно, связано с тем, что тетрахлорметан способен индуцировать ПОЛ и связанную с ним продукцию супероксидного анион-радикала (О2 -), который является активатором синтеза NO индуцибельной NO-синтетазной системой [Коваленко О.А. и др., 1996, Реутов Н.П., 2000, Данилович Ю.В., 2001,Okamoto T., 2000]. Повышение содержания в печени NO под действием СС14 может вносить дополнительный вклад в развитие окислительного стресса и в проявление гепатотоксического действия СС14, поскольку NO может функционировать и как ингибитор токсического действия О2 -, и как источник образования более опасных NOO.радикалов [M.E. de Vera,1995].

Предварительное введение флавоноидов кверцетина и гесперидина перед инъекцией СС14 значительно снизило амплитуды 3-х компонентов сигнала аддукта NO-Fe2+-ДЭТК2 в образцах печени.

Примечания 1 Интактные животные;2 Введение CCl4; 3 Кверцетин+CCl4;4 Гесперидин+CCl4

Рисунок 4- Спектры ЭПР образцов печени крыс из разных экспериментальных групп при температуре жидкого азота

У животных, которым вводили такие флавоноидные соединения, как диосмин и флавицин на фоне стимуляции продукции оксида азота СС14, выявить их влияние на процесс образования NO в печени крыс не удалось. В ЭПР спектрах образцов печени этих животных доминировал интенсивный синглентный сигнал, не связанный с образованием парамагнитных аддуктов NO-Fe2+-ДЭТК2. Снижение содержания NO в организме животных, которым вводили флавицин и диосмин, удалось установить при использовании в качестве ловушки Fe3+-МГД2 по подавлению соответствующих компонентов сигнала аддукта NO-Fe2+-МГД2 в спектрах ЭПР мочи животных, получавших на фоне CCl4 флавицин и диосмин, по сравнению с контрольными животными (введение только CCl4).

Подавление продукции NO флавоноидными соединениями, скорее всего, связано с их антиоксидантной активностью и способностью тормозить образование свободных радикалов. Кроме того, показано, что флавоноидные соединения уменьшают экспрессию iNOS в макрофагах, индуцированную липополисахаридами Chen Y. et al., 2000, Cheon B.S. et al., 2000, Chi Y. et al., 2001 через торможение связывания фактора транскрипции NF-B, который контролирует индукцию экспрессии генов iNOS.

Таким образом, эндотелий протективное действие исследуемых флавоноидов, улучшение гемореологических свойств крови, повышение продукции NO сосудистым эндотелием и увеличение печеночного кровотока, а также снижение гиперпродукции NO в печени индуцибельной NO-синтазой могут быть дополнительными факторами защиты печени от повреждения.

5. Изучение гепатозащитного действия СЭ из V. abbreviate (truncatula) при хронической экспериментальной патологии печени

Поскольку в клинической практике препараты чаще используются с лечебной целью на фоне уже сформировавшейся патологии, необходимо продемонстрировать терапевтическую эффективность нового средства, а также важно оценить его влияние на пролиферацию соединительной ткани, наблюдающуюся при хронических заболеваниях печени.

Лечебное действие СЭ при хронической алкоголизации в дозе 300 мг/кг в сравнении с карсилом в дозе 100 мг/кг изучали через 7, 14 и 21 день их применения после 60-дневного введения 40% этанола и затем совместно с ним.

Было установлено, что в результате 60-дневного введения алкоголя наблюдалось падение эффективности системы АОЗ и нарушение про-/антиоксидантного равновесия с преобладанием прооксидантной составляющей, т.е. развитие окислительного стресса. При этом отмечался рост содержания ТБК-активных продуктов в сыворотке крови на 135%, в печени на 175% и повышение количества ДК в печени на 332%. Одновременно регистрировалось снижение в печени активности основных антиоксидантных ферментов: СОД - на 55%, каталазы - на 45%, ГП - на 47%, ГР - на 41% и Г-S-ТР - на 48%, а также Г-6-ФДГ - на 88%, участвующей в обеспечении глутатионредуктазной реакции восстановительными эквивалентами. Кроме этого, отмечалось усиление анаэробиоза (повышалось соотношение лактат/пируват на 100%) и падение содержания АТФ (-52%), т.е. развивался энергодефицит, что, как известно, способствует дополнительной стимуляции свободно-радикального окисления и может вызвать необратимые изменения и гибель клетки.

У крыс после 60-дневной алкоголизации регистрировалось достоверное повышение в сыворотке крови активности АлАт (+134%) и ЩФ (+72%), содержания общего билирубина (+53%), показателя ТП - на 104%, увеличивалось содержание ТРГ в сыворотке крови (+132%) и в печени (+70%), снижалась активность ХЭ в сыворотке крови на 48%. Эти изменения свидетельствовали о развитии цитолиза и холестаза гепатоцитов, жировой дистрофии, снижении белково-синтетической функции печени, развитии воспаления в этом органе и активации мезенхимы. Такие показатели, как содержание ГАГ в сыворотке крови и ОП в печени, увеличивались на 15% и 35% соответственно, но достоверных отличий от нормы выявлено не было.

При дальнейшем приеме алкоголя выявлена активация адаптационно-приспособительных механизмов, направленных на защиту против повреждающего фактора (рис.5). Это проявилось, прежде всего, в том, что повышались активности ГП и Г-S-ТР, снижалось содержание GSH в печени и увеличивались активности Г-6-ФД и ГР.

При лечебном применении СЭ наблюдалась более выраженная активация ГП и Г-S-ТР. В то же время у животных, леченных карсилом, отсутствовала активация Г-S-ТР и наблюдалась менее выраженная активация ГП. В результате уже через 14 дней лечения сухим экстрактом наблюдалась полная нормализация содержания

продуктов ПОЛ, в то время, как при лечении карсилом нормализация их содержания происходила только к окончанию срока лечения.

У крыс, получавших только этанол, хотя и регистрировались изменения, направленные на восстановление ПОЛ, но все же содержание перекисных продуктов оставалось выше нормы, т.е. несмотря на развитие защитной реакции у этих животных, ее оказалось недостаточно для полного преодоления окислительного стресса.

У крыс, леченных СЭ, наблюдалось более выраженное снижение коэффициента окислительного стресса (1,73), чем у животных, леченных карсилом (7,27), что свидетельствовало о более полном восстановлении про-антиоксидантного равновесия у этих животных.

Рисунок 5-Влияние лечебного применения СЭ на НАДФН-GSH-зависимую систему печени крыс при хронической алкоголизации

На гистоморфологической картине печени контрольных животных выявлялись определенные патологические изменения, наиболее выраженные на 7-ой и 14-ый день дополнительного поения, но на 21 день эти изменения оказывались минимальными. Наличие восстановительных процессов нашло отражение и в изменении биохимических показателей состояния печени (снижение активности АлАт, некоторое снижение содержания ТРГ), но большинство показателей все же оставалось достоверно более высоким, чем в норме и, кроме того, нарастали явления фиброгенеза - увеличивалось содержание в печени ОП (+48%) и в сыворотке крови - ГАГ (+61%.

В отношении восстановления биохимических показателей лечебное действие СЭ оказалось более эффективным, чем карсила. При применении СЭ тормозилось образование элементов соединительной ткани: содержание ОП во все сроки лечения достоверно не отличалось от нормы, а содержание ГАГ в крови достоверно снижалось на 26% по сравнению с соответствующим контролем. Уменьшались и патогистологические изменения в печени: отмечалось уменьшение клеточной инфильтрации, отсутствовало фиброзирование портальных трактов, которое выявлялось в контроле на 14-ые сутки дополнительного введения этанола, а также признаки дистрофических изменений и сохранялось лишь умеренное расширение портальных вен и синусоидов.

Влияние СЭ на процесс фиброгенеза изучено также при хроническом СС14-гепатите, при котором было установлено четкое повышение количества ОП в печени по сравнению с нормальными значениями на 82% и ГАГ в крови - на 63%. На гистоморфологической картине также обнаруживалось замещение поврежденных гепатоцитов соединительнотканными тяжами.

В течение трех недель после воспроизведения модели хронического гепатита у нелеченных животных в печени достоверно повышался уровень ОП по сравнению с исходным контролем на 14 и 21 день на 48% и 63% соответственно, а содержание в сыворотке крови ГАГ на 39% и 44% соответственно, хотя темпы нарастания этих компонентов соединительной ткани несколько снижались.

Лечение хронического гепатита карсилом и СЭ препятствовало накоплению компонентов соединительной ткани на протяжении всего срока наблюдения. Но у животных, получавших карсил, к концу лечения на 21 сутки сохранялось повышенное количество ОП в гомогенате печени (+25%).

Через два месяца после лечения сухим экстрактом сохранялся стойкий лечебный эффект, полученный после окончания терапии - все основные биохимические показатели, характеризующие процессы цитолиза, холестаза, жирового перерождения, находились на уровне нормы, и отсутствовал процесс фиброгенеза. В группе животных, получавших карсил, сохранялись повышенными концентрация конъюгированного билирубина и активность ЩФ в сыворотке крови.

Довольно часто гепатопротекторная активность флавоноидов сочетается с желчегонным эффектом, что вносит определенный вклад в защиту печени. Нами установлено активирующее влияние СЭ на желчеобразовательную функции печени у здоровых животных и животных с поражением печени. В условиях острого СС14-гепатоза СЭ оказал нормализующие, более выраженное, чем у карсила, влияние на процессы образования и выделения желчи: увеличился объем желчи, увеличились содержание в желчи ЖК и холато-холестериновый коэффициент. У животных, леченных карсилом, концентрация ЖК не достигала уровня здоровых животных.

Общие выводы

1. Исследуемые флавоноиды и СЭ из V. abbreviate (truncatula) оказывают выраженное гепатопротекторное действие при поражении печени СС14 и длительной алкоголизации, уменьшая синдромы цитолиза, холестаза, мезенхимального воспаления, жировой дистрофии и печеночной недостаточности, вызванные развитием окислительного стресса.

2. На модели острого поражения печени СС14 у крыс установлено, что эффективной дозой гесперидина, диосмина, флавицина, кверцетина и карсила является доза 100 мг/кг, а СЭ- 300 мг/кг при испытании их в качестве гепатопротекторов.

3. Исследуемые вещества при лечебно-профилактическом введении в эффективных дозах в разной степени воздействуют на развитие основных патологических синдромов при СС14-гепатитогепатозе. В отношении устранения синдрома цитолиза флавицин, кверцетин и карсил проявляют более эффективное действие, чем гесперидин и диосмин. Но гесперидин, диосмин и флавицин превосходят кверцетин и карсил по влиянию на холестаз. Активацию мезенхимы кверцетин и карсил предупреждают более эффективно, чем флавицин, диосмин и гесперидин. Но флавицин и диосмин превышают действие кверцетина, карсила и гесперидина по влиянию на развитие синдрома печеночно-клеточной недостаточности. СЭ практически полностью нормализует все изученные показатели.

4. На фоне алкогольной интоксикации наибольшая эффективность лечебно-профилактического действия отмечается у флавицина и СЭ, которые практически полностью устраняют признаки поражения печени, а введение гесперидина в наименьшей мере нормализует показатели всех патологических синдромов, наблюдающихся при остром поражении этанолом. Как и при СС14-гепатитогепатозе, кверцетин и карсил превышают действие диосмина на цитолиз и мезенхимальное воспаление и дополнительно на белково-синтетическую функцию печени, но диосмин является более эффективным по воздействию на холестаз и метаболическую функцию печени (углеводный и липидный обмены), чем кверцетин и карсил.

5. При острых СС14- и алкогольном поражениях печени самые высокие и близкие коэффициенты гепатопротекции имеют СЭ (95% и 97%) и флавицин (92% и 96%), а наименьший - гесперидин (65% и 38%). При СС14-гепатитогепатозе флавицин и СЭ достоверно превышают в 1,5 -1,6 раза эффективность действия карсила (61%) и в 1, 2 раза - кверцетина (77%). При поражении печени этанолом флавицин и СЭ достоверно превышают эффективность действия и карсила (69%) и кверцетина (70%) в 1,4 раза. Действие флавицина и СЭ сходно как в качественном, так и количественном отношении.

6. Гистоморфологические исследования подтверждают наличие более выраженной гепатозащитной активности флавицина и СЭ по сравнению с карсилом при СС14-гепатитогепатозе и при алкогольном поражении печени, при введении которых признаки воспаления, нарушения микроциркуляции и жировой дистрофии, некрозы и нарушение цитоархитектоники печеночных балок, выражены в меньшей степени, чем у животных, получавших карсил.

7. Гесперидин, диосмин и флавицин обладают антиоксидантным действием in vitro, подавляя интенсивность Fe2+-индуцированного ПОЛ липосом в модельной системе, и по эффективности действия значительно уступают кверцетину: IС50 равно соответственно 7,010-2М, 4,910-2М, 4,910-3М и 6,310-5М.

8. При лечебно-профилактическом введении in vivo при острых токсических поражениях печени СС14 и этанолом индивидуальные флавоноиды, а также СЭ и карсил отличаются по влиянию на ферментативное звено АОЗ. Флавицин и СЭ способствуют нормализации практически всех показателей АОС, стимулируя активности ферментов, участвующих в регенерации НАДФН2 (ИЦДГ, Г-6-ФДГ, ГР). Диосмин в меньшей степени влияет на восстановление НАДФ+-редуктазной активности при обеих патологиях. Гесперидин, кверцетин и карсил не оказывают влияния не только на определенные звенья регенерации восстановительных эквивалентов (ИЦДГ, или МДГ, или Г-6-ФДГ, или ГР), но и ферменты, обеспечивающие детоксикацию перекисных продуктов (СОД, каталаза, ГП и Г-S-ТР).

9. По восстановлению равновесия в системе ПОЛ-АОС наибольшей эффективностью обладают флавицин и СЭ при обеих патологиях (коэффициент окислительного стресса близок к 1), которые хотя и в меньшей степени, чем кверцетин подавляют ПОЛ, но в большей степени способствуют сохранению активности антиоксидантных ферментов печени.

10. Установлена тесная обратная корреляция между коэффициентом окислительного стресса и процентом гепатопротекции, что указывает на первостепенное значение восстановления равновесия в системе про-антиоксиданты для защиты печени против действия токсических факторов. В его восстановлении важное значение имеет поддержание активности эндогенной ферментативной системы АОЗ.

11. Курсовое введение гесперидина, диосмина, флавицина и карсила здоровым животным в дозе 100 мг/кг приводит к некоторому снижению вторичных продуктов ПОЛ в крови и активности СОД, каталазы, и ГП в печени, но оказывает стимулирующее влияние на глутатионовую систему печени, повышая содержание GSH и активируя ферменты, участвующие в регенерации GSH (ГР и НАДФ+-редуктаза) и выполнении им защитных функций (Г-S-Т).

12. Исследуемые вещества улучшают энергообеспеченность клеток печени, увеличивают содержание АТФ, повышают N-деметилазную и n-гидроксилазную активностей в норме и в условиях острых поражений печени СС14 и этанолом.

13. При помощи метода ЭПР и косвенным путем показано, что гесперидин, диосмин, флавицин и кверцетин увеличивают содержание NO в норме, вероятно, через активирование eNOS и ограничивают гиперпродукцию NO, стимулированную СС14, а также обладают эндотелий протективным действием и повышают образование NO, сниженное в условиях моделирования эндотелиальной дисфункции. Фармакологическая модуляция синтеза NO флавоноидами может иметь существенное значение в проявлении ими гепатозащитных свойств.

14. СЭ из V. abbreviate (truncatula) в дозе 300 мг/кг обладает выраженным лечебным действием при поражении печени СС14 и этанолом, усиливая адаптационно-приспособительную реакцию, восстанавливая про-антиоксидантное равновесие, энергообмен, строение, метаболизм и функции печени, замедляя процесс фиброзирования, усиливая желчеобразовательную функцию печени в норме и в условиях патологии. По своей эффективности СЭ превышает действие карсила.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Влияние флавоноидов растительного происхождения на перекисное окисление липидов // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: Материалы Междунар. съезда (4; 29 июня-1 июля 2000; Великий Новгород). - СПб., 2000. - С.155 - 157.(Соавт. Оганесян Э.Т., Хочава М.Р., Мальцев Ю.А.).

2. Исследование защитного действия суммы флавоноидов из кожуры цитрусовых при остром токсическом поражении печени СС14 // Человек и лекарство: Тез. докл. 8 Рос. нац. конгресса 2-6 апреля 2001 г. - М., 2001. - С. 561. (Соавт. Хочава М.Р., Оганесян Э.Т., Фролова Л.М., Парфентьева Е.П., Москаленко С.В., Саджая Л.А., Репс В.Ф., Скульте И.В., Андреева О.А., Бобылев О.В.).

3. Антиоксидантные и гепатозащитные свойства флавоноидов цитрусовых // Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины: Материалы Рос. конф. молодых ученых России с междунар. участием (2; 24-28 апреля 2001; Москва). - М., 2001. - Т.2. - С. 250. (Соавт. Хочава М.Р., Оганесян Э.Т.).

4. Сравнительное изучение гепатозащитного действия индивидуальных и суммарных флавоноидов из кожуры цитрусовых // Регион. конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров (56; 2001; Пятигорск): Материалы… - Пятигорск: ПятГФА, 2001. - С. 189 - 191.(Соавт. Хочава М.Р., Оганесян Э.Т., Василенко Ю.К., Фролова Л.М., Парфентьева Е.П., Репс В.Ф., Москаленко С.В., Саджая Л.А., Скульте И.В., Андреева О.А., Бобылев О.В.).

5. Исследование защитного действия гесперидина и его сочетанного применения с аминокислотами при остром токсическом поражении печени тетрахлорметаном // Регион. конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров (56; 2001; Пятигорск): Материалы… - Пятигорск: ПятГФА, 2001. - С. 192 - 194. (Соавт. Хочава М.Р., Оганесян Э.Т., Василенко Ю.К., Фролова Л.М., Парфентьева Е.П., Репс В.Ф., Москаленко С.В., Саджая Л.А., Скульте И.В., Бобылев О.В.).

6. Выделение гесперидина и суммарной флавоноидной фракции из отходов цитрусовых и экспериментальное изучение их использования в качестве гепатозащитных средств //Пятигорск: ПятГФА, 2002. -31с. деп. в ВИНИТИ 11.07.9.2002, № 1308-В2002. Анн.: Библ. указ.: Деп. научные работы. - 2002. - № 9 (367). - с. 8 (реф. 72). (Соавт. Оганесян Э.Т., Хочава М.Р., Андреева О.А., Василенко Ю.К., Парфентьева Е.П., Скульте И.В., Саджая Л.А., Москаленко С.В., Постникова Н.В., Ващенко Т.Н.).

7. Изучение гепатозащитного действия флавоноидных соединений из растений рода Вика Паллиативная медицина и реабилитация в здравоохранении: Материалы конгр с междунар. участием (4; апрель 2002; Средиземноморье). - М., 2002. - № 2-3. (информация получена с сайта) (Соавт. . Оганесян Э.Т., Андреева О.А., Шаренко О.М., Терехов А.Ю.).

8. Использование квантово-химических методов для обоснования антирадикального (ОН·) действия полигидроксихалконов // Хим.-фармац. журнал. - 2002. - Т.36, № 12. - С. 21 - 25. (Соавт. Оганесян Э.Т., Хочава М.Р., Тускаев В.А., Мальцев Ю.А.).

9. Сравнительное изучение эффективности гепатозащитного действия флавона диосмина и флавонона гесперидина при отдельном и сочетанном применении у крыс с ССl 4-гепатозом // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции : сб.науч.тр./ Пятигорск:ГФА.-Пятигорск, 2004. - Вып.59.-С.266-268. (Соавт. Агаджанян З.С., Паукова Е.О., Шаренко О.М., Андреева О.А., Оганесян Э.Т.).

10. Изучение влияния гликозидов диосметина и гесперидина на микросомальное окисление в норме и при с ССl4-гепатозе у крыс. гепатозом // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции : сб.науч.тр./ Пятигорск:ГФА.-Пятигорск, 2004. - Вып.59.- С.270-271. (Соавт. Саджая Л.А., Биляч Я.И.. Ващенко Е.С.).

11. Изучение влияния растительных флавоноидов на показатели энергетического обмена при остром ССl 4-гепатозе// Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: материалы междунар. съезда: «Фитофарм 2004» (8; 21-23 июня 2004; Миккели, Финляндия). СПб.: ВВМ, 2004.-С.173-176. (Соавт. Андреева О.А., Шаренко О.М., Паукова Е.О., Агаджанян З.С., Биляч Я.И., Ващенко Е.С., Агаджанян В.С.).

12. Гепатозащитное действие флавоноидов вики изменчивой и вики обрубленной// Фармация. - 2004. - № 4. - С. 41 - 42. (Соавт. Оганесян Э.Т., Андреева О.А., Шаренко О.М., Терехов А.Ю.).

13. Гепатозащитное действие цветков бархатцев // Фармация. - 2004. - № 2. - С. 33-35. (Соавт. Терехов А.Ю., Оганесян Э.Т., Андреева О.А. и др.).

14. О биологически активных веществах некоторых представителей рода Vicia // Современные наукоёмкие технологии: сб. науч. тр. - М., 2004. - №6. - С.108-109. (Соавт. Оганесян Э.Т., Андреева О.А., Шаренко О.М. и др.).

15. Изучение гепатозащитного действия природных флавоноидных соединений //Эксперим. и клинич. фармакология. - 2004. -Т.67, №6. - С. 41- 45.

16. Изучение эффективности гепатозащитного действия флавицина и СЭ из вики обрубленной (Vicia truncatula Fish ex Bieb.) на модели острого тетрахлорметанового гепатоза у крыс. //Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции : сб.науч.тр./ Пятигорск:ГФА.-Пятигорск, 2005. - Вып.60. - С.330-333. (Соавт. Агаджанян З.С., Паукова Е.О., Шаренко О.М., Андреева О.А., Скульте И.В., Биляч Я.И., Ващенко Е.С., Агаджанян В.С.).

17. Защитное действие флавоноидных антиоксидантов кверцетина, гесперидина, диосмина и флавицина при тетрахлорметановом индуцированном оксидативном стрессе в печени крыс. //Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции : сб.науч.тр./ Пятигорск:ГФА.-Пятигорск, 2005. - Вып.60. -С.333-336. (Соавт. Паукова Е.О., Агаджанян З.С., Парфентьева Е.П., Оганесян Э.Т., Андреева О.А., Шаренко О.М.).

18. Антиоксидантное и мембраностабилизирующее действие природных флавоноидов при остром экспериментальном тетрахлорметановом гепатозе. //Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции : сб.науч.тр./ Пятигорск: ГФА.- Пятигорск, 2005. - Вып.60. - С.336-338. (Соавт. Паукова Е.О., Агаджанян З.С., Саджая Л.А., Павлова Л.М.).

19. Влияние антиоксидантов флавоноидной природы на перекисное и митохондриальное окисление и антиоксидантный статус у крыс при остром CCl4-гепатозе // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: материалы Междунар. съезда «Фитофарм 2005» и Конф. молодых ученых Европ. фитохим. общества «Растения и Здоровье» (9; 22-25 июня 2005; Санкт-Петербург).- СПб.:НИИХ СПбГУ, 2005. - С. 77-80. (Соавт. Парфентьева Е.П., Саджая Л.А., Шаренко О.М., Паукова Е.О., Андреева О.А., Оганесян Э.Т.).

20. Кверцетин и гесперидин подавляют образование радикалов оксида азота в печени и сердце крыс в условиях острого гепатоза // Биофизика. - 2005.- Т.50, №6. - С. 1145 - 1149. (Соавт. Тимошин А.А., Паукова Е.О., Ванин А.Ф.).

21. Использование растительных экстрактов для устранения синдрома холестаза при экспериментальном поражении печени // Известия высших учебных заведений. Сев.-Кавк. регион. Гастроэнтерология. Естествен. науки. - Спецвыпуск. - 2005. - С. 86 - 87. (Соавт. Терехов А.Ю., Паукова Е.О., Шаренко О.М., Андреева О.А., Саджая Л.А.).

22. Гепатозащитное действие ангиопротекторов флавоноидной природы //Гепатология сегодня: материалы Десятой Рос. конф. 28-30 марта 2005, Москва/ Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2005. - Т.15.- №1. - Приложение №24.-С.100. (Соавт. Паукова Е.О., Шаренко О.М., Андреева О.А.).

23. Кверцетин и гесперидин подавляют продукцию NO-радикалов в условиях строго СCl4-гепатоза // Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека: сб.тр.нац.науч.-практ.конф. с междунар. участием (4; 26-30 сент.2005; Смоленск).- Смоленск, 2005. - С.172-174. (Соавт. Тимошин. А.А., Паукова Е.О., Ванин А.Ф.).

24. Амброзия полыннолистная - источник фармакологически активных соединений. Сообщение 2 //Хим.-фарм. журнал. - 2006. - Т.40, №11ю - С.46 -51. (Соавт. Пархоменко А.Ю., Оганесян Э.Т., Андреева О.А., Паукова Е.О. и др.).

25. Влияние биофлавоноидов на про-/антиоксидантное равновесие при остром алкогольном отравлении // Гепатология сегодня: материалы Одиннадцатой Рос. конф. 27-29 марта 2006, Москва/ Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2006. - Т.16. - №1. - Приложение №27. - С. 68. (Соавт. Сергеева Е.О., Парфентьева Е.П., Саджая Л.А., Шаренко О. М.).

26. Влияние биофлавоноидов на микросомальное и митохондриальное окисление при CCl4 -гепатозе // Человек и лекарство: тез. докл. 13 Рос. нац. конгр. 3-7 апр. 2006 г. - М., 2006. - С. 520-521. (Соавт. Оганесян Э.Т., Сергеева Е.О., Шаренко О.М., Андреева О.А., Парфентьева Е.П., Саджая Л.А., Скульте Л.А.).

27. Фитохимическое изучение состава надземной части растений вики изменчивой (Vicia variabilis Freyn et Sint) и вики Гроссгейма (Vica Grossheimii Freyn et Sint) // Человек и лекарство: тез. докл. 13 Рос. нац. конгр. 3-7 апр. 2006 г. - М., 2006. - С.609. (Соавт. Шаренко О.М., Андреева О.А., Крикова А.В., Сергеева Е.О.,Самойленко Е.С.).

28. Мембраностабилизирующее действие биофлавоноидов при остром алкогольном отравлении у крыс // Разработка, исследование и маркетинг новой фармац. продукции: сб. науч. тр. / Пятигорск.ГФА. -Вып.61.-Пятигорск: ПятГФА, 2006. - С. 382-383. (Соавт. Сергеева Е.О., Саджая Л.А., Павлова Л.М.).

29. Изменение некоторых биохимических показателей у крыс при остром алкогольном отравлении и действии биофлавоноидов// Разработка, исследование и маркетинг новой фармац. продукции: сб. науч. тр. / Пятигорск.ГФА. -Вып.61.-Пятигорск: ПятГФА, 2006. - С. 347-349. (Соавт. Сергеева Е.О., Оганесян Э.Т., Парфентьева Е.П., Скульте И.В., Ващенко Е.С., Биляч Я.И, Шаренко О.М., Андреева О.А.).

30. Влияние гесперидина на уровень оксида азота (NO) в организме крыс в норме и при остром поражении печени тетрахлорметаном // Молекулярные, мембранные и клеточные основы функционирования биосистем: Междунар. науч. конф.; Седьмой съезд Белорус. общественного объединения фотобиологов и биофизиков, Минск , 21-23 июня 2006 г.: сборник статей.- Мн.: ИООО «Право и экономика», 2006. - Т.2.- С.261-263. (Соавт. Тимошин А.А., Сергеева Е.О., Ванин А.Ф., Оганесян Э.Т.).

31. Изучение механизмов гепатозащитного действия биофлавоноидов при остром алкогольном отравлении у крыс // Украiнськ. бiохiм. зiзд. (9; 24-27 животня 2006; Харькiв): матерiали…- Харькiв, 2006.-Т.2.- С.50. (Соавт. Парфентьева Е.П., Саджая Л.А.).

32. Влияние гесперидина и флавицина на печеночный кровоток в норме и в условиях стимуляции и блокады синтеза эндогенного оксида азота //Регионарное кровообращение и микроциркуляция. - 2006. - Т.5, № . - С. 84 - 87. (Соавт. Тюренков И.Н., Воронков А.В.).

33. Изучение биохимических основ защитного действия флавоноидов при экспериментальном поражении печени// Отчет НИР. (Соавт. Василенко Ю.К., Парфентьева Е.П., Саджая Л.А., Скульте И.В., Мазурина М.В., Паукова Е.О.).

34. Коррекция биофлавоноидами биохимических показателей печени при остром алкогольном отравлении у крыс// Гепатология сегодня: материалы Двенадцатой Рос. конф. 19-21 марта 2007, Москва/ Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2007. - Т.17. - №1. - Приложение №29.-С.64. (Соавт. Сергеева Е.О., Парфентьева Е.П., Саджая Л.А., Скульте Л.А., Оганесян Э.Т., Шаренко О.М., Андреева О.А., Духанина И.В.)

35. Влияние биофлавоноидов на перекисное окисление липидов и антиоксидантные системы печени крыс при остром алкогольном отравлении // Вестник ВГМУ. - Т.23, №3 .-2007.- С. 50-52. (Соавт. Сергеева Е.О., Оганесян Э.Т., Парфентьева Е.П., Саджая Л.А., Терехов А.Ю., Скульте И.В., Шаренко О.М., Андреева О.А., Духанина И.В.).

36. Влияние флавоноидов на перекисное окисление липидов и антиоксидантные ферменты в печени крыс // Фармация из века в век. Часть V. Синтез биологически активных веществ для создания фармацевтических субстанций. Фармаколог. исследования: Труды научн.-практ. конф. - Снкт-Петербург, 2008. - С. 67 - 71. (Соавт. Сергеева Е.О., Парфентьева Е.П., Саджая Л.А., Терехов А.Ю., Скульте И.В.).

37. Изучение влияния биофлавоноидов на показатели энергетического обмена при курсовой алкоголизации у крыс // Гепатология сегодня: материалы Тринадцатой Рос. конф. 17-19 марта 2008, Москва / Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2008. - Т.18. - №1. - Приложение № 31.-С.54. (Соавт. Сергеева Е.О., Терехов А.Ю., Парфентьева Е.П., Саджая Л.А., Скульте И.В.).

38. Изучение гепатозащитного действия СЭ из вики обрубленной ( Vicia truncatula Fish ex Bieb.) при остром тетрахлорметановом гепатозе у крыс //Разработка, исследование и маркетинг новой фармац. продукции: сб. науч. тр. / Пятигорск.ГФА. -Вып.63.-Пятигорск: ПятГФА, 2008. - С. 409-412. (Соавт. Сергеева Е.О., Саджая Л.А., Парфентьева Е.П., Терехов А.Ю., Скульте И.В., Андреева О.А., Шаренко О.М.)

39. Изучение влияния флавоноидов на систему детоксикации ксенобиотиков в норме и при токсических поражениях печени у крыс //Разработка, исследование и маркетинг новой фармац. продукции: сб. науч. тр. / Пятигорск.ГФА. -Вып.63.-Пятигорск: ПятГФА, 2008. - С. 412-414. (Соавт. Сергеева Е.О., Саджая Л.А., Шаренко О.М., Андреева О.А.).

40. Изучение влияния флавоноидов на системы детоксикации ксенобиотиков при курсовой алкоголизации у крыс // Гепатология сегодня: материалы Четырнадцатой Рос. конф. 16-18 марта 2009, Москва / Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2009. - Т.19. - №1. - Приложение № 33.-С.74. (Соавт. Сергеева Е.О., Терехов А.Ю., Парфентьева Е.П., Саджая Л.А., Скульте И.В.).

41. Влияние флавицина на механизмы, участвующие в развитии окислительного стресса при курсовом введении здоровым животным //Разработка, исследование и маркетинг новой фармац. продукции: сб. науч. тр. / Пятигорск.ГФА. -Вып.64.-Пятигорск: ПятГФА, 2009. - С. 418-421. (Соавт. Сергеева Е.О., Терехов А.Ю., Саджая Л.А., Парфентьева Е.П., Скульте И.В., Духанина И.В.).

42. Изучение влияния гесперидина на эндотелиальную функцию животных с экспериментально вызванным сахарным диабетом //Бюлл. Волгогр.научного центра РАМН. - 2009. - №1. - С.19-22. (Соавт. Тюренков И.Н., Воронков А.В., Слиецанс А.А., Доркина Е.Г.).

Размещено на Allbest.ru