Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на нейтрофилы и факторы мукозального иммунитета

Этап исследования иммунотропных эффектов лазеров низкой интенсивности in vivo

На современном этапе возможны 2 пути реализации эффектов действия лазеров низкой интенсивности: эффекты, обусловленные их локальным и системным применением в терапевтических целях. Исходя из возможностей применения лазеров красного спектра излучения в терапевтической практике, представляло огромный интерес изучение их возможностей для устранения иммунологических дисфункций. В связи с вышеизложенными обстоятельствами, следующим этапом наших исследований стало изучение влияния лазерного излучения на клеточные и гуморальные факторы системного иммунитета, состояние нитроксидергической системы, липидного профиля периферической крови при проведении внутрисосудистого лазерного облучения крови (ВЛОК) у женщин с хламидийной инфекцией нижнего отдела репродуктивного тракта.

У пациенток с воспалительными заболеваниями нижнего отдела репродуктивного тракта, вызванными хламидиями были выявлены сдвиги во всех изучаемых звеньях иммунной системы, характерные для хронического воспалительного процесса: лейкоцитоз, нейтрофилия с уменьшением абсолютного количества нейтрофилов, лимфоцитоз с изменением субпопуляционного состава, выраженном в снижении процента лейкоцитов, несущих CD3, СD 4, СD 16; СD 20 рецепторы, повышении CD8+лимфоцитов, снижения СD 95+клеток, иммнорегуляторного индекса (СD 4+/CD8+), активности нейтрофилов по НСТ-тесту угнетения фагоцитарной функции и функционального резерва нейтрофилов, усилении лизосомальной активности, повышении концентрации Ig A, Ig М, Ig G в сыворотке крови, снижения уровня циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), содержания С1-С3 компонентов комплемента, СН 50, уровня ИЛ-1б, ИЛ-1в, ФНО-б, ИФН-г, дефенсинов, бактерицидного протеина BPI, при повышении концентрации ИЛ-8. В соответствии с рекомендациями лечению урогенитального хламидиоза внутрисосудистое лазерное облучение крови (ВЛОК) может быть использовано в комплексе лечебных мероприятий.

Нами проведена оценка эффективности использования ВЛОК для коррекции выявленных иммунологических дисфункций. Исследование иммунологических показателей крови проведено до начала терапии и на следующий день после её завершения базисной терапии. Контрольную группу составили здоровые женщины без хламидийной инфекции нижнего отдела репродуктивного тракта (таблица 7).

Таблица 7 Иммунологические показатели периферической крови у женщин с хламидийной инфекцией нижнего отдела репродуктивного тракта до и после терапии с применением ВЛОК

Примечание: В таблице приведены различия между сравниваемыми группами. *- достоверность различий показателей по отношению к показателям здоровых женщин**- достоверность различий показателей по отношению к показателям женщин до лечения***- достоверность различий показателей по отношению к показателям женщин, пролеченных по базисной схеме****- достоверность различий показателей по отношению к показателям женщин, пролеченных по схеме базисная терапия + ВЛОК

Результаты исследований показали, что применение ВЛОК в комплексе с базисной терапией приводило к нормализации исследуемых показателей на момент окончания лечения, чего не происходило при использовании только базисной схемы. К моменту завершения лечения с применением ВЛОК зарегистрировано: восстановление количественного и субпопуляционного состава лейкоцитов, нормализации межклеточных взаимоотношений субпопуляций Т-лимфоцитов, что приводило к увеличению количества иммунокомпетентных клеток в крови, нормализация роста поглотительной способности нейтрофилов по тесту с латексом, восстановление биоцидной функции этих клеток по НСТ-тесту, функционального резерва, лизосомальной активности, содержания в сыворотке крови IgA, Ig М, Ig G, ЦИК.

Дисбаланс системы цитокинов, дефенсинов сыворотки крови женщин с хламидийной инфекцией нижнего отдела репродуктивного тракта, выраженный в снижении содержания ИЛ-1в, ИЛ-1б, ИФН-г, повышении ИЛ-8 в процессе комплексной терапии с применением ВЛОК был ликвидирован полностью, однако при использовании только базисного способа лечения дисфункции в продукции цитокинов и дефенсинов устранены не были (таблица 8).

Таблица 8 Содержание цитокинов, дефенсинов в сыворотке крови у женщин хламидийной инфекцией нижнего отдела репродуктивного тракта до и после терапии с применением ВЛОК

Сравнительный анализ динамики иммунологических показателей женщин леченых по базисной схеме, и с применением ВЛОК показал, однонаправленный характер изменений их значений при данных способах терапии, направленных в сторону восстановления показателей, однако степень нормализации данных факторов была более выраженной в группе пациенток, получавших комплексную терапию с применением ВЛОК.

После установленного иммуномодулирующего влияния внутрисосудистой лазеротерапии на показатели системного иммунитета было интересно изучить содержание оксида азота сыворотки крови женщин с хламидийной инфекцией и установить влияние внутрисосудистой лазеротерапии на их динамику (рисунок 1)

Рисунок 1

Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на продукцию оксида азота сыворотки крови женщин с хламидийной инфекцией нижнего отдела репродуктивного тракта до и после внутрисосудистой лазеротерапии

Одним из приоритетных направлений стало определение оксида азота в сыворотке крови, поскольку (-NO) -природный свободный радикал, выполняющий в организме несколько функций, две из которых особенно важны для понимания системного действия лазерного излучения. Во-первых, NO-предшественник, выделяемого клетками эндотелия стенок кровеносных сосудов фактора расслабления (EDRF- Endothelium Derivated Relaxity Factor), фактора вызывающего вазодилатацию микрососудов, что и определяет, по-видимому, появление различных положительных эффектов лазерного излучения. Во-вторых, NO выделяется фагоцитами и выполняет роль защитного средства против патогенов (Проскуряков С.Я.,2000). Учитывая значение NO в регуляции фагоцитарной активности, изучение его содержания под действие системной лазеротерапии даёт возможность расширить поиск возможностей немедикаментозной коррекции процессов фагоцитоза при локальных и системных воспалительных процессах.

Установлено, что средний уровень оксида азота, регистрируемый у пациенток с хламидийной инфекцией нижнего отдела репродуктивного тракта, оказался статистически достоверно ниже по сравнению с аналогичными показателями неинфицированных женщин, что согласуется с работами коллектива исследователей ЧелГМА по изучению нитроксидергических процессов при воспалительных заболеваниях урогенитального тракта. В частности, М.А. Захаровой с соавт. (2001г), было доказано достоверное снижение уровня оксида азота у женщин с ХИ органов малого таза. На наш взгляд изменение содержания NO может быть обусловлено значительным уменьшением пула аминокислоты L-аргинина, являющееся предшественником антипатогенной защиты при внедрении C. trachomatis в организм (Маеда Х.,1998; Проскуряков С.Я., 2000). К моменту завершения внутривенной лазеротерапии у пациенток с хламидийной инфекцией нижнего отдела репродуктивного тракта восстанавливались показатели нитроксидергической системы периферической крови. Возможно, повышение содержания NO в сыворотке крови при воздействии ВЛОК также происходит за счёт усиления окислительно-восстановительных процессов, в том числе ускорения реакции окисления аргинина гемсодержащим ферментом NO-синтазой, результатом которой и является образование оксида азота. Кроме того, фермент NO-синтаза экспрессируется под воздействием ФНО-б, и зарегистрированное нами повышение его содержания, возможно, косвенно способствовало, ускорению синтеза этого фермента и, соответственно, влияло на процесс усиления выработки оксида азота при ВЛОК.

Поскольку имеющиеся единичные работы содержат разноречивую информацию о влиянии ВЛОК на липидный обмен представлялось важным изучить липидный профиль женщин с хламидйной инфекцией нижнего отдела репродуктивного тракта и оценить возможность коррекции липидотранспортных дисфункций с помощью внутривенной лазеротерапии (Шилин Д.Е., 2003; Кутлубаева Э.Р., 2008). Для определения показателей липидного спектра плазмы крови у больных венозную кровь забирали в одноразовые пробирки до и после курса терапии (в утренние часы натощак).

Результаты липидного профиля женщин с инфекционно воспалительными заболеваниями урогенитального тракта, вызванными хламидиями, представлены в таблице 9.

Таблица 9 Показатели периферической крови у женщин с хламидийной инфекцией нижнего отдела репродуктивного тракта до и после терапии с применением внутрисосудистой лазеротерапии

Примечание: В таблице приведены различия между сравниваемыми группами. *- достоверность различий показателей по отношению к показателям здоровых женщин**- достоверность различий показателей по отношению к показателям женщин до лечения***- достоверность различий показателей по отношению к показателям женщин, пролеченных по базисной схеме****- достоверность различий показателей по отношению к показателям женщин, пролеченных по схеме базисная терапия + ВЛОК

Как видно из данных, представленных в таблице 9, внутрисосудистое лазерное облучение крови стимулирует образование качественных и количественных сдвигов в спектре липидов сыворотки крови, включающей нормализацию уровня холестерина, повышению Хс ЛПВН (на10%), снижению ХсЛПНП (на 8%), ЛПОНП (на 11%) (р<0,003, р=0,0012). Рост доли фосфолипидов, важнейших структурно-функциональных компонентов клеточных мембран, точнее, восполнение его фонда, следует отнести к позитивным фотоиндуцированным изменениям приспособительного и компенсаторного характера. Возможно, при внутривенном действии НИЛИ лазерное излучение подавляет накопление свободных жирных кислот, обладающих мембранно-деструктивным действием, что может приводить к активизации биосинтетических процессов, приводящих к увеличению содержания суммарных фосфолипидов. В этой связи становиться очевидным, что лазерное излучение, способствуя нормализации липидного обмена, стимулирует сдвиги в спектре липидов, которые сопряжены с изменениями физико-химического потенциала биомембран, и, вероятно, носят приспособительный характер, позволяющий частично нивелировать негативные последствия, вызванные понижением суммарного уровня фосфолипидов сыворотки крови. Динамика изменения содержания различных липидов в сыворотке крови является отражением высокой активности фосфолипаз и фотоиндуцированном запуске гидролитических процессов в сыворотке крови. Данный процесс биохимических изменений, в том числе изменение уровня холестерина, косвенно, как свидетельствуют литературные источники, среди прочих причин может влиять на агрегационную способность тромбоцитов, способствуя её нормализации (Борисенко К.К., 1998; Брагина Е.Е., 2000; Мортон Н.С., 2000). Полученные в исследовании результаты свидетельствуют о положительном влиянии НИЛИ на показатели липидного спектра сыворотки крови и позволяют рассматривать внутрисосудистое облучение крови как эффективный метод в комплексном реабилитационном лечении больных с местными воспалительными реакциями.

Таким образом, данные представленные при анализе иммунологических и биохимических показателей до и после системной лазеротерапии показали возможность влияния данного вида излучений на отдельные этапы воспалительной реакции. Открытым остаётся вопрос о генерализации эффекта лазерного излучения при внутрисосудистом облучении крови. На наш взгляд генерализацию эффектов ВЛОК можно объяснить с позиции «тригерных» воздействий. Пусковой или «тригерный» эффект, по нашему мнению, происходит, в основном, за счёт передачи воздействий через жидкие среды биообъекта, в нашем случае кровь, а также за счёт передачи энергии в клетке в виде АТФ при фоторегуляции и поглощении фотоакцепторами НГ квантов света. Суть концепции генерализации эффектов ЛО заключается в следующем: энергия низкоинтенсивных лазеров мала для адаптационной реакции всего организма, поэтому при ВЛОК активизируются процессы местной или клеточной саморегуляции, которые и становятся «триггером» для запуска адаптивных реакций всего организма.

Нормализация иммунологических и биохимических показателей под влиянием системной инвазивной лазеротерапии даёт основания для проведения исследований по оценке локального, неинвазивного применения лазера низкой интенсивности с постоянной и переменной генерацией импульса для коррекции дисфункций факторов мукозального иммунитета женщин с воспалительными заболеваниями нижнего отдела репродуктивного тракта, вызванных хламидиями. В соответствии с поставленной задачей был проведён сравнительный анализ динамики иммунологических факторов цервикального секрета при терапевтическом, локальном воздействии in vivo лазерным излучением с учётом биоэффективных параметров воздействия. Облучение воспалительного очага проводилось с помощью терапевтического аппарата «МУСТАНГ-2000», генерирующего лазерное излучение с постоянной и переменной генерацией импульса в соответствии с требованиями Роспотребнадзора РФ в сочетании с базисной терапией урогенитального хламидиоза на основании «Методических рекомендаций по диагностике и лечению заболеваний, передающихся половым путём» (ЦНИИКВИ, г. Москва, 2007).

Получение представления о роли нейтрофилов и факторов мукозального иммунитета при воспалительном процессе нижнего отдела репродуктивного тракта возможно при проведении исследования непосредственно из очага воспалительной реакции- шейки матки, месте наибольшей иммунологической активности нижнего отдела репродуктивного тракта и частой локализации C. trachomatis (Рюмин Д.В., 1999; Телешева Л.Ф., 2000).

У женщин с урогенитальным хламидиозом выявлена дисфункция клеточных факторов местной противоинфекционной защиты выраженная в увеличении количества лейкоцитов в цервикальном секрете, повышении процента жизнеспособных нейтрофилов, усилении лизосомальной активности, кислородозависимого метаболизма по НСТ-тесту, снижении функционального резерва нейтрофилов, угнетении активности и интенсивности фагоцитоза нейтрофильных гранулоцитов цервикальной слизи.

Выявленный дисбаланс в состоянии клеточных факторов местной антимикробной защиты может служить основанием для включения в комплексную терапию хламидийной инфекции локального воздействия лазерным излучением низкой интенсивности с постоянной и переменной генерацией импульса, как возможного средства повышения местной неспецифической защиты при воспалительных заболеваниях нижнего отдела репродуктивного тракта, в том числе, вызванных хламидиями (Брагина Е.Е.,2001; Стругацкий В.М., 2002).

Теоретическими предпосылками к использованию предложенного метода послужили работы, выполненные в Челябинском государственном институте лазерной хирургии Южно-уральского научного центра РАМН (2000-2006) и разработки Государственного научного центра лазерной медицины при президенте РФ МЗ РФ г. Москва (2000), которые свидетельствуют о влиянии лазерного изучения на все составляющие патологического процесса (органный, тканевой, клеточный) и способности физических факторов усиливать иммунные реакции на системном и локальном уровнях.

Сравнительный анализ локального действия лазера с переменной и постоянной генерацией импульса выявил больший иммунологический эффект воздействий ЛО с переменной генерацией импульса. У больных, пролеченных лазером с постоянной генерацией импульса, определялось снижение абсолютного и относительного количества нейтрофилов, их лизосомальной активности, интенсивности люминесценции лизосом нейтрофилов цервикального секрета, увеличение интенсивности спонтанного восстановления НСТ, нормализация функционального резерва этих клеток.

Таблица10 Состояние клеточных факторов цервикального секрета у женщин с хламидийной инфекцией при различных способах терапии.

У пациенток, пролеченных с использованием лазера с переменной генерацией импульса, помимо вышеуказанных изменений, определялось усиление поглотительных способностей и фагоцитарного числа нейтрофилов. К моменту завершения лечения с применением лазерного излучения с переменной генерацией импульса отмечено полное восстановление факторов колонизационной устойчивости цервикального секрета (таблица 10).

Примечание: сравнения между группами проведены по критерию Мана-Уитни;*р<0,003 по отношению к показателям в группе здоровых

**р<0,003 по отношению к показателям до лечения,***р<0,003 по отношению к показателям группы Базис+ЛО с переменной генерацией импульса после лечения по отношению к группе женщин получивших базисную терапию^ р<0,003 -достоверность по отношению к показателям после лечения в группе Базис+ЛО с переменной генерацией импульса по отношению к показателям Базис+ЛО с постоянной генерацией импульса.

Сопоставление динамики изменения иммунологических факторов при воздействии различных типов лазерного излучения, можно отметить следующее: после терапии с использованием НИЛИ с переменной генерацией импульса, были зарегистрированы более значимые изменения факторов врождённого иммунитета репродуктивного тракта по сравнению показателями, полученными после применения, как базисной терапии, так и терапии с применением НИЛИ с постоянной генерацией импульса. Достоверные позитивные изменения свойств НГ при лазерных воздействиях с различными режимами генерации импульса имели одинаковую направленность и заключались в усилении функционального ответа нейтрофилов цервикального секрета. Данные однонаправленные эффекты лазеротерапии мы можем объяснить включением однотипных процессов регуляции, на клеточном уровне, обеспечивающих адекватный ответ в пределах гомеостатического регулирования.

Основным результатом местного действия лазерных воздействий с постоянной и переменной генерацией импульса следует считать усиление функциональной активности нейтрофилов в воспалительном очаге, которое, по мнению А.Н. Маянского (1999) следует признать одним из интегральных показателей критериев действенности стимулирующей, в частности иммунопотенциирующей терапии.

Далее проводилось исследование гуморальных факторов местной противоинфекционной защиты женщин с хламидийной инфекцией нижнего отдела репродуктивного тракта, включающее в себя: оценку содержания в секрете ИЛ-1б, ИЛ-1в, РАИЛ1, ИЛ-8, ФНО-б, ИФН-г, IgА, IgМ, IgG, компонентов комплемента С1-С5, содержания дефенсинов, метаболитов оксида азота (таблица 11).

В цервикальном секрете было зарегистрировано: повышение IgА, Ig G снижение уровня провоспалительных цитокинов, дефенсинов, BPI, повышение содержания ИЛ-8, снижении содержания С1-С5 компонентов комплемента цервикального секрета, СН50, возможно, связанное с тем, что присутствие патогена приводит к непрерывной активации системы комплемента (Holers V.M., 1996).

К моменту завершения терапии у пациенток зарегистрировано восстановление показателей IgА. При оценке концентрации Ig G в цервикальной слизи, установлено, что его уровень, повышенный до начала лечения 4.85 ± 0.78 г/л, полностью нормализовался.

Таблица 11 Состояние гуморальных факторов цервикального секрета у женщин с хламидийной инфекции при различных способах терапии.

Примечание: сравнения между группами проведены по критерию Мана-Уитни; *р<0,003 по отношению к показателям в группе здоровых **р<0,003 по отношению к показателям до лечения,***р<0,003 по отношению к показателям группы Базис+ЛО с переменной генерацией импульса после лечения по отношению к группе женщин получивших базисную терапию^ р<0,003 -достоверность по отношению к показателям после лечения в группе Базис+ЛО с переменной генерацией импульса по отношению показателям Базис+ ЛО с постоянной генерацией импульса после лазеротерапии с переменной генерацией импульса и составил 3,03±0,1г/л, с постоянной генерацией импульса оставался повышенным-3.55±0.12, при базисной терапии его значения не отличались от показателей до лечения. Достоверных различий по содержанию Ig M в цервикальном секрете женщин до и после терапии во всех группах сравнения не выявлено.

Терапия с привлечением лазерного воздействия с постоянной и переменной генерациями импульса способствовала нормализации содержания ИЛ-1б, ИЛ-1в, РАИЛ1, ИЛ-8, ФНО-б, ИФН-г, дефензинов и BPI, компонентов С1-С5 комплемента, содержания IgG в цервикальном секрете. При использовании базисной терапии отмечены тенденции к нормализации исследуемых показателей. Таким образом, лазерное излучение низкой интенсивности с постоянной и переменной генерацией импульса, оказывая биостимулирующее действие на мембраны иммунокомпетентных клеток, возможно, приводит к усилению индукции медиаторов клеточного иммунитета, запускающих каскад иммунных реакций (Бартенева С.Н., 1996).

При рассмотрении результатов динамического иммунологического исследования гуморальных факторов местной противоинфекционной защиты репродуктивного тракта при действии терапевтических лазеров было выявлено однонаправленное влияние, выраженное в нормализации исследуемых показателей при использовании различных типов терапии: опосредованное восстановление показателей гуморального звена, угнетённых вследствие влияния на мукозальные иммунные факторы C. trachomatis.

Подводя итог проведённых исследований, необходимо отметить, что локальная и системная иммунокоррекция при воспалительных заболеваниях урогенитального тракта, основанная на стимулирующем действии низкоинтенсивного лазерного излучения, является эффективным средством комплексной терапии, поскольку способствует восстановлению локального и системного иммунного статуса, ликвидации дисбаланса эффекторных возможностей нейтрофилов в очаге воспалительной реакции, нормализации факторов колонизационной резистентности репродуктивного тракта, чем самым способствует скорейшей элиминации патогена под действием этиотропной терапии.

Всё вышеизложенное позволяет говорить о новом направлении в иммунокоррекции-физической иммуномодуляции, значительным преимуществом которой является рациональный подход к решению вопросов иммунологических дисфункций, заключающаяся в возможности селективного воздействия лазером низкой интенсивности на различные субпопуляции иммунокомпетентных клеток, в т.ч. и на НГ, доступность проведения, отсутствие побочных эффектов при адекватных лечебных режимах и относительная дешевизна, что делает перспективным дальнейшее развитие данного направления иммунокорекции и открывает широкие возможности применения терапевтических лазеров в клинической практике

ВЫВОДЫ

1.В экспериментальных условиях воздействие низкоинтенсивным лазерным излучением (длина волны 0,632мкм) с переменной генерацией импульса оказывает разнообразное по точкам приложения, направлению и степени выраженности влияние на функциональный статус нейтрофилов, зависящее от условий эксперимента, степени действия лазерного излучения, времени экспозиции. Частота 100 Гц, время экспозиции лазерного излучения 12,5 мин, доза облучения 0,56Дж\см2 приводит к снижению активности лизосом, повышению биоцидного потенциала, активности и интенсивности фагоцитоза нейтрофилов.

2.Облучение in vitro нейтрофилов крови здоровых доноров низкоинтенсивным лазером с постоянной генерацией импульса при длине волны 0,632 мкм, времени экспозиции 12,5 мин, дозе облучения 1,1 Дж\см2 приводит к усилению спонтанной и индуцированной НСТ-редуцирующей активности, увеличению функционального резерва и фагоцитарного потенциала данных клеток при снижении лизосомальной активности гранулоцитов.

3.Действие низкоинтенсивного лазерного излучения с постоянной и переменной генерацией импульса приводит к однонаправленным изменениям функциональных характеристик облучённых лазером нейтрофилов, выраженных в изменении их функциональной активности. При этом доза необходимая для максимальной активации нейтрофила при переменной генерации импульса составила 0,56дж\см2, что вдвое ниже дозы, необходимой для получения аналогичных стимулирующих эффектов при лазерном воздействии с постоянной генерацией импульса.

4.Культивирование интактных нейтрофилов in vitro сопровождается выделением провоспалительных цитокинов (ИЛ-1б, ИЛ-1в, РАИЛ, ИЛ-8, ФНО-б), растворимых антимикробных факторов (оксида азота, дефенсинов, бактерицидного/индуцирующего протеина), глюкозы, ионов кальция, магния. Индукция нейтрофилов крови лазерным излучением с постоянной и переменной генерацией импульса приводит к секреции биологически активных продуктов одинакового состава: увеличивается содержание провоспалительных цитокинов, бактерицидного/индуцирующего протеина, ионов кальция, снижается уровень глюкозы, ионов магния. При использовании в качестве индуктора низкоинтенсивного лазерного излучения с переменной генерацией импульса, то степень выраженности секреции исследуемых биологических веществ нейтрофилами выше по сравнению с лазерным излучением с постоянной генерацией импульса.

5. У больных с воспалительными заболеваниями нижнего отдела урогенитального тракта, вызванного хламидийной инфекцией регистрируется изменения клеточных и гуморальных факторов иммунной системы: лейкоцитоз, лимфоцитоз с уменьшением количества CD3+, CD4+, CD20+, CD16+-лейкоцитов, снижение иммунорегуляторного индекса (CD4+/CD8+), повышение CD8+, снижение фагоцитарной активности нейтрофилов, уменьшению активности нейтрофилов по НСТ-тесту при снижении их функционального резерва, повышении индекса люминесценции лизосом нейтрофилов, повышение содержания IgA, IgG, IgМ, снижение компонентов комплемента С1-С5, повышения количества циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови, снижения уровня противовоспалительных цитокинов, дефенсинов, содержания оксида азота, сдвиги липидной компоненты сыворотки крови, выраженной в снижении уровня холестерина, триглицеридов, холестерина липопротеидов низкой и высокой плотности, характерные для локальной воспалительной реакции.

6. Применение внутрисосудистого лазерного облучения крови в комплексе с базисной антибиотикотерапией приводит к нормализации иммунологических и биохимических показателей крови: снижению абсолютного и относительного числа лейкоцитов, восстановления количества и рецепторного пейзажа лимфоцитов, снижению лизосомальной активности, активности нейтрофилов по НСТ-тесту, снижении содержания IgA, IgG, IgМ и повышения С1-С5 компонентов комплемента, повышении концентрации ИЛ-1б, ИЛ-1в, ФНО-б, дефенсинов, BPI и снижении ИЛ-8. У пациенток с воспалительными заболеваниями нижнего отдела репродуктивного тракта, вызванных хламидиями, пролеченных без использования лазеротерапевтических воздействий дисфункция биохимических и иммунологических показателей периферической крови после проведённого лечения сохранялась.

7.Локальное действие лазером низкой интенсивности в комплексной терапии пациенток с хламидиозом нижнего отдела репродуктивного тракта стимулирует функциональную активность фагоцитов в очаге воспалительной реакции, что проявляется в: нормализации абсолютного и относительного количества нейтрофилов, восстановлении их лизосомальной активности и интенсивности люминесценции лизосом, увеличении интенсивности спонтанного восстановления НСТ нейтрофилов, повышении функционального резерва этих клеток, усиление поглотительных способностей и фагоцитарного числа нейтрофилов цервикального секрета.

8. Динамика показателей гуморальных факторов цервикального женщин с воспалительными заболеваниями нижнего отдела репродуктивного тракта, вызванными хламидийной инфекцией, под влиянием лазерного излучения с постоянной и переменной генерацией импульса имеет однонаправленный характер, выраженная в нормализации продукции Ig G, IgА, продукции С1-С5 компонентов комплемента, общей гемолитической активности, нормализации продукции цитокинов и дефензинов.

9.Использование лазерного излучения с переменной генерацией импульса с целью нормализации факторов местной противоинфекционной защиты женщин с воспалительными заболеваниями нижнего отдела репродуктивного тракта, вызванных хламидиями приводит к более быстрым позитивным изменениям факторов мукозального иммунитета репродуктивного тракта, направленных в сторону их нормализации по сравнению с применением лазерного излучения с постоянной генерацией импульса и базисных методов терапии.

10. Разработанные методы локальной иммунокоррекции с учётом биоэффективных доз воздействия 0,56Дж\см2 для импульсного режима и 1,1 Дж\см2 для режима с постоянной генерацией излучения открывают перспективу для проведения дальнейших испытаний по использованию лазерного излучения в терапевтической практике с целью коррекции дисфункций факторов врождённого иммунитета при их системном и локальном применении.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Гизингер, О.А. Влияние лазерного излучения на нейтрофилы цервикального секрета при урогенитальном хламидиозе / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин, О.Л. Колесников, О.И. Летяева // Рос. журн. кож. и венерич. болезней. - 2005. - № 1. - С. 50-53.

2. Гизингер, О.А. Влияние препарата бестим на клеточные факторы местного иммунитета у женщин с кандидозной инфекцией / О.А. Гизингер, М.Б. Овденко // Аллергология и иммунология. - 2005. - Т.6, № 2. - С. 190. - Тезисы II Российской конференции по иммунотерапии и иммунореабилитологии.

3. Гизингер, О.А. Использование лазеротерапии в комплексном лечении хламидийного цервицита / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин, О.Л. Колесников // Вестн. ЮУрГУ. - 2005. - № 5. - С.163-167. - (Сер. «Образование, здравоохранение, физическая культура». Вып.5, Т. 1).

4. Гизингер, О.А. Система провоспалительных цитокинов у женщин с урогенитальным трихомониазом / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин // Мед. иммунология. - 2005. - Т.7, № 5-6. - С. 601-604.

5. Гизингер, О.А. Уровни провоспалительных цитокинов в цервикальном секрете женщин с хламидийной инфекцией до и после терапии низкоиненсивным лазером / О.А. Гизингер // Актуальные вопросы дерматовенерологии: материалы регион. науч.-практ. конф. дерматовенерологов, акушеров-гинекологов, урологов. - Челябинск, 2005. - С. 53-54.

6. Гизингер, О.А. Факторы местного иммунитета репродуктивной системы у женщин с хламидийной инфекцией / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин, О.И. Летяева // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2005. - № 4. - С. 65-69.

7. Гизингер, О.А. Действие низкоинтенсивного лазера на факторы местного иммунитета у женщин с хламидийной инфекцией / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин // Вопр. курортологии, физиотерапии и лечеб. физ. культуры. - 2006. - № 5. - С. 20-23.

8. Гизингер, О.А. Изменение содержания провоспалительных цитокинов в цервикальном секрете женщин с хламидийной инфекцией до и после терапии низкоинтенсивным лазером «Урал-ИМ» / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин // Достижения и перспективы развития дерматовенерологии: материалы юбилейной науч.-практ. конф., посвящ. 60-летию дерматовенерол. службы Челяб. обл. - Челябинск, 2006. - С. 67.

9. Гизингер, О.А. Иммунологические и микробиологические аспекты действия низкоинтенсивного лазера на факторы местного иммунитета репродуктивного тракта женщин с хламидийной инфекцией / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин, Л.Ф.Телешева // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2006. - № 4. - С. 105-109.

10. Гизингер, О.А. Низкоинтенсивный лазер в комплексной терапии урогенитальных инфекций у женщин / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин // Достижения и перспективы развития дерматовенерологии: материалы юбилейной науч.-практ. конф., посвящ 60-летию дерматовенерол. службы Челяб. обл. - Челябинск, 2006. - С. 57.

11. Гизингер, О.А. Оценка клинико-иммунологической эффективности терапии хламидийного цервицита с применением низкоинтенсивного лазерного излучения / О.А. Гизингер, В.В.Панченко // Достижения и перспективы развития дерматовенеролигии: материалы юбилейной науч.-практ. конф., посвящ 60-летию дерматовенерол. службы Челяб. обл. - Челябинск, 2006. - С. 68-70.

12. Гизингер, О.А. Реакция нейтрофилов цервикального секрета у женщин с хламидийной инфекцией на низкоинтенсивное лазерное излучение / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин, В.В. Панченко, Н.В. Ермакова // 1-й Российско-чешский медицинский форум: сб. материалов. - Челябинск, 2006. - С.142-144

13. Гизингер, О.А. Система провоспалительных цитокинов в цервикальном секрете у женщин с урогенитальным хламидиозом / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин // Цитокины и воспаление. - 2006. - Т. 5, № 4. - С. 13-16.

14. Гизингер, О.А. Сравнительная оценка влияния лазеротерапии на иммунологические факторы местного иммунитета у женщин с герпесвирусной инфекцией / О.А. Гизингер, К.В. Никушина // Достижения и перспективы развития дерматовенерологии: материалы юбилейной науч.-практ. конф., посвящ. 60-летию дерматовенерол. службы Челяб. обл. - Челябинск, 2006. - С. 92-93.

15. Гизингер, О.А. Использование лазеротерапии в комплексном лечении хламидийного цервицита / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин // Иммунология Урала. - 2007. - №1 (6). - С.120. - Материалы VI конференции иммунологов Урала.

16. Гизингер, О.А. Оценка иммунологической эффективности терапии хламидийного цервицита с применением лазера низкой интенсивности / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин, Л.Ф. Телешева. - М., 2007. - 5 с. - Деп. в ГЦНМБ 23.10.2007, №-Д.27807.

17. Гизингер, О.А. Состояние функциональной активности нейтрофилов цервикального секрета у женщин с хламидийной инфекцией после терапии низкоинтенсивным лазером / О.А. Гизингер, О.И. Летяева // Иммунология Урала. - 2007. - №1 (6). - С.119. - Материалы VI конференции иммунологов Урала.

18. Гизингер, О.А. Аспекты действия низкоинтенсивного лазерного излучения на иммунологические факторы цервикального и вагинального секретов у женщин с хламидийной инфекцией / О.А. Гизингер, К.Г. Ишпахтина // Рос. иммунол. журн. - 2008. - Т. 2(11), № 2-3. - С. 248. - Материалы объединенного иммунологического форума.

19. Гизингер, О.А. Влияние низкоинтенсивного гелий-неонового лазера на функции нейтрофилов цервикального канала и влагалища у женщин с кандидозной инфекцией / О.А. Гизингер, К.Г. Ишпахтина, К.В. Никушкина // Рос. иммунол. журн. - 2008. - Т. 2 (11), № 2-3. - С. 248-249. - Материалы объединенного иммунологического форума.

20. Гизингер, О.А. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на иммунологическую реактивность организма / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин, К.Г. Ишпахтина // Вестн. новых мед. технологий. - 2008. - Т. 15, № 2. - С. 95-97.

21. Гизингер, О.А. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на нейтрофилы цервикального секрета у женщин с микоплазменной инфекцией / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин // Вопр. курортологии, физиотерапии и лечеб. физкультуры. - 2008. - № 4. - С. 29-31.

22. Гизингер, О.А. Изучение содержания рецептора индукции апоптоза-CD-95 [Fas/APO-1] на нейтрофилах секретов репродуктивного тракта у женщин с хламидийной инфекцией / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин, К.Г. Ишпахтина // Вестн. новых мед. технологий. - 2008. - Т. 14, № 3. - С. 118-119.

23. Гизингер, О.А. Низкоинтенсивный лазер в коррекции дисфункций нейтрофильных гранулоцитов пациентов с цервицитом хламидийной этиологии в эксперименте / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин // Иммунология. - 2008. -Т.29, № 6. - С. 346-349.

24. Гизингер, О.А. Низкоинтенсивный лазер в коррекции дисфункций нейтрофильных гранулоцитов пациентов с цервицитом хламидийной этиологии в эксперименте in vitro / О.А. Гизингер, К.В. Никушкина, Е.В. Плеханова // Материалы VI итоговой научно-практической конференции молодых ученых Челябинской государственной медицинской академии. - Челябинск, 2008. - С. 43-51.

25. Гизингер, О.А. Роль низкоинтенсивного лазерного излучения в коррекции дисфункций нейтрофильных гранулоцитов у женщин с хламидийной инфекцией / О.А. Гизингер, К.Г. Ишпахтина // Вестн. новых мед. технологий. - 2008. - Т. 14, № 3. - С. 116-118.

26. Гизингер, О.А. Содержание рецептора индукции апоптоза-CD-95 на нейтрофилах цервикального и вагинального секретов у женщин с хламидийной инфекцией / О.А. Гизингер, К.В. Никушкина, Е.В. Плеханова //Материалы VI итоговой научно-практической конференции молодых ученых Челябинской государственной медицинской академии. - Челябинск, 2008. - С. 51-56.

27. Гизингер, О.А. Влияние лавомакса на функции нейтрофилов цервикального канала у женщин с хламидийной инфекцией / О.А. Гизингер, О.И. Летяева // III Всероссийский конгресс дерматовенерологов: тез. науч. работ. - Казань, 2009. - С. 76.

28. Гизингер, О.А. Влияние лазера низкой интенсивности на количество нейтрофильных внеклеточных ловушек при различном временном воздействии / О.А. Гизингер, И.И. Долгушин, В.А. Маркова // Актуальные проблемы медицинской науки и практического здравоохранения: тр. науч. сессии, посвящ. 65-летию ЧелГМА. - Челябинск, 2009. - С.14-15.

29. Гизингер, О.А. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на нейтрофилы периферической крови доноров в условиях эксперимента / О.А. Гизингер, К.Г. Ишпахтина, О.Л. Колесников // Иммунология. - 2009. - Т.30, № 5. - С. 263-267.

30. Гизингер, О.А. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения с переменной генерацией импульса на процесс формирования нейтрофильных вне...