Создание новых типов цигайских и каракульских овец в Республике Молдова с использованием генетических маркеров

Размещено на http: //www. allbest. ru/

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

доктора биологических наук

06.02.01 - Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

03.00.15 - Генетика

Создание новых типов цигайских и каракульских овец в Республике Молдова с использованием генетических маркеров

Люцканов Петр Ильич

Дубровицы 2009

Работа выполнена в лаборатории технологии разведения и эксплуатации овец Научно-практического института биотехнологий в зоотехнии и ветеринарной медицине Академии Наук Республики Молдова и лаборатории генетики сельскохозяйственных животных Государственного научного учреждения «Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства Россельхозакадемии»

Научные консультанты: доктор биологических наук, профессор Марзанов Нурбий Сафарбиевич;

доктор сельскохозяйственных наук Радионов Владимир Алексеевич.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Кленовицкий Павел Михайлович;

доктор биологических наук, профессор Лобков Вячеслав Юрьевич;

доктор сельскохозяйственных наук Николайчев Вячеслав Александрович.

Ведущее учреждение: Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. академика К.И. Скрябина

Защита состоится "___" ________________ 2009 года, в 10 часов, на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций

Д 006.013.02 при Государственном научном учреждении «Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства Российской академии сельскохозяйственных наук»

Адрес института: 142132, Московская область, Подольский район, пос. Дубровицы, ВНИИЖ, т/факс (4967) - 65-11-01.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан "_____" ________________ 2009 года.

Ученый секретарь совета Д 006.013.02 В.И. Сельцов

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Овцеводство Молдовы, представленное цигайской и каракульской породой, играет важную роль в обеспечении населения традиционными продуктами питания. Брынза и баранина глубоко вошли в быт, как национальная пища и, наряду с овчиной и смушком, пользуются высоким спросом на рынке. Поэтому, дальнейшее наращивание объемов их производства является важной социально-экономической задачей в республике.

Отсутствие в период реформ государственной политики в области генетических ресурсов животных, привело к разрушению организационной структуры управления и сети специализированных предприятий племенного назначения. В результате, резко сократилась племенная база и численность элитных животных, а также снизились их продуктивные и племенные качества. Достаточно отметить, что численность племенных маток в настоящее время составляет 4,4 тыс., при потребности не менее 140 тыс. голов.

Не менее существенно и то, что около 98% поголовья овец указанных пород сосредоточено в мелких крестьянских (фермерских) хозяйствах и хозяйствах населения, где уровень развития основных факторов, влияющих на производство продукции овцеводства (качество животных, технология кормления, содержания, воспроизводства и др.), является крайне низким.

Создалась реальная угроза снижения биологического разнообразия и деградации генофонда овец цигайской и каракульской пород местной селекции. Поэтому, реализация программ разведения по сохранению и развитию генетических ресурсов этих пород, включая создание новых стад и типов овец, позволяющие производить конкурентоспособную продукцию, является актуальной проблемой. На это указывается и в отчете ФАО «О состоянии всемирных генетических ресурсов животных в сфере продовольствия и сельского хозяйства», представленном для обсуждения на международной технической конференции Генетических Ресурсов Животных в Интерлейкене (Швейцария, 2007) и в принятом Глобальном плане действий по сохранению генетических ресурсов животноводства.

В реализации указанных задач, повышается роль научно обоснованной зональной селекции с использованием генетических ресурсов, внутрипородных и заводских типов цигайских и каракульских овец, учитывая, что в селекционной программе приоритет должен быть отдан признакам, обеспечивающим повышение мясной и молочной продуктивности. Одновременно, крайне важно сохранить ценные качества животных этих пород - приспособленность к неблагоприятным климатическим факторам среды (пыльные бури, продолжительное отсутствие осадков, высокая температура и низкая влажность воздуха), способность эффективно использовать скудные кормовые ресурсы естественных угодий, отходов полеводства, как важное условие организации ресурсосберегающих технологий и смягчения последствий неблагоприятных климатических изменений глобального масштаба, наблюдаемых и в Республике Молдова. Перспективность использования внутрипородных и заводских типов цигайских овец в породообразовательном процессе подтверждена научно при создании новой базы производства цигайской шерсти в Западном Казахстане (Жиряков А.М., 1975).

В этой связи возникает необходимость оценить степень биоразнообразия, генетической дифференциации структурных элементов этих пород с использованием генетических маркеров, которые оцениваются во взаимоотношении генофондов пород как более адекватные, чем другие, полученные на иных методах анализа (Серебровский А.С., 1970; Глазко В.И. и др., 1991; Машуров А.М. и др., 1987).

Применение генетических маркеров позволяют более обоснованно решать ряд важных задач селекции. В их числе: выбор исходных пород и методов направленного воздействия на них; стабилизация генотипа животных желательного типа; мониторинг генетических процессов, происходящих в породах или отдельных стадах; корректировка схемы скрещивания при создании новых пород и типов; генетическая экспертиза достоверности происхождения племенных животных; оценки производителей по качеству потомства и т.д. (Егоров Е.А., 1973; Глазко В.И.,1985; Марзанов Н.С., 1994; Стакан Г.А., Минина Е.К., Глазко В.И. и др., 1987; Глазко В.И., Крутовский К.В., 1991; Радионов В.А., 1997; Амерханов Х.А., Марзанов Н.С., 1999; Tapio М. et al., 2003; Ozerov M. et al., 2004; Марзанов Н.С. и др., 2004).

Однако, овцы как вид, сравнительно мало изучены в этом аспекте (Иовенко В.Н., 1987; Лазовский А.А., 1987), а цигайской породы местной селекции - в особенности, если учесть, что научные данные получены на единичных стадах при создании молочного (Радионов В.А., 1997), шерстно-молочного типа (Ильев Ф.В. и др., 1974) с использованием в качестве маркеров - белков крови, причем не всех известных систем. Исследования же аллелофонда новых типов, созданных в цигайской и каракульской породах, с использованием известных систем групп крови, а также микросателлитов проведены впервые автором данной работы.

Во многом такая ситуация связана с проблемой создания Банка моноспецифических сывороток-реагентов. В их числе: ареактивность значительной части реципиентов или же низкий титр получаемых сывороток крови при иммунизации и реиммунизации, и даже замене доноров (Schmid D.O., 1977; Марзанов Н.С., 1994; Марзанов Н.С. и др., 2004). Различия могут быть связаны с иммунобиологической реактивностью отдельных антигенов в зависимости от их сочетания в крови донора, как при внутрипородной, так и межпородной иммунизациях (Марзанов Н.С., Люцканов П.И., 1989; Марзанов Н.С., 1994). Причины этих явлений пока недостаточно изучены.

Исследования проведены автором лично и совместно с исполнителями государственных научных тем, согласно:

- Постановления Государственного комитета по науке и технике бывшего СССР № 555 от 30 октября 1985 года «Об утверждении научно-технических программ (заданий и этапов) на 1986-1990 годы» (приложение №105);

- Государственной программы 31.02.04Ж «Создать стада племенных овец цигайской породы с настригом шерсти в мытом волокне 2,4-2,8 кг, производством мяса на матку 38-42 кг и товарного молока 20 кг»;

- Государственной программы Республики Молдова 04.49.02 «Создание новых типов каракульских и цигайских овец».

Цель и задачи исследований. Целью исследований явилось создание новых типов овец цигайской и каракульской породы в Республике Молдова с использованием генетических маркеров. В связи с этим решали следующие задачи:

- получить модельных животных и на их основе создать новый заводской шерстно-мясо-молочный тип овец цигайской и внутрипородный смушково-мясо-молочный тип овец каракульской породы;

- оценить овец нового типа по собственной продуктивности и генетической структуре с использованием полученных сывороток-реагентов, а также полиморфных белков крови и микросателлитов;

- обобщить информацию, касающуюся вопросов антителогенеза в крови овец; обосновать направления по созданию технологии получения сывороток-реагентов для определения групп крови и использования их в селекции овец; каракульский овца генетический донорский

- разработать принципы формирования донорского стада; изучить влияние различных вариантов подбора пар «донор - реципиент» на титры получаемых сывороток-реагентов; оценка иммуногенности эритроцитарных антигенов по уровню синтезируемых специфических антител при иммунизации овец; отработка методических подходов, повышающие направленность индуцированного антителогенеза;

- создать Банк сывороток-реагентов для массового использования групп крови при аттестации племенных овец в условиях Республики Молдова;

- разработать методы оценки зиготности ягнят-близнецов, проведения генетической экспертизы достоверности происхождения ягнят при разведении по линиям, оценке баранов-производителей по качеству потомства, генетической структуры внутрипородных типов овец, разводимых в Республике Молдова.

Научная новизна работы. Выведены заводской тип цигайских шерстно-мясо-молочных и внутрипородный тип каракульских смушково-мясо-молочных овец и дана их оценка по собственной продуктивности. Создан банк диагностикумов из 14 моноспецифических сывороток выявляющих 16 антигенов 7 систем групп крови овец и 3 экспериментальных реагента. Предложен метод оценки баранов-производителей по качеству потомства на основе использования генетических маркеров. Дана антигенная характеристика местной цигайской овцы и смушковой - «чушка».

На основе построения дендрограмм, показаны генетические расстояния между типами и породами овец, разводимых в Республике Молдова. Исследованы изменения полиморфизма белков крови по трансферрину и гемоглобину у цигайской породы овец во временном аспекте. Изучен аллелофонд и дана популяционно-генетическая характеристика по 3 типам генетических маркеров (группы крови, полиморфные белки и микросателлиты) новым типам цигайских и каракульских овец.

Теоретическая и практическая значимость работы. В цигайской и каракульской породе созданы новые типы овец численностью 4,8 тыс. голов селекционного ядра, которые выгодно отличаются от существующих типов более высокими показателями качества и количества продукции. Они могут служить племенной базой для развития в овцеводстве республики нового направления продуктивности: в цигайском - шерстно-мясо-молочное, а каракульском - смушково-мясо-молочное. Широкое внедрение указанных типов в производство внесет определенный вклад в сохранение и развитие генофонда этих пород, увеличение производства и расширение сортимента продукции в соответствии с запросами рынка, а отсюда - и в повышение продовольственной безопасности республики.

Овцы цигайской породы шерстно-мясо-молочного типа внедрены в производство в Сельскохозяйственном производственно-потребительском кооперативе «Элита Александерфельд» Кагульского района, Акционерном обществе «Гигант» Вулканештского района, Сельскохозяйственном производственном кооперативе «Албота» Тараклийского района, крестьянских и фермерских хозяйствах республики, а каракульской породы смушково-мясо-молочного типа - в Экспериментально-технологической станции «Максимовка» Научно-практического института биотехнологий в зоотехнии и ветеринарной медицине Академии Наук Республики Молдова (НПИБЗВМ АН Республики Молдова), Сельскохозяйственном производственном кооперативе «АгроСаргал» Хынчештского района и многочисленных личных хозяйствах крестьян.

Исследована генетическая структура более 5,0 тыс. голов овец различного происхождения цигайской и каракульской породы. Получены данные характеризующие специфичность аллелофонда, что крайне важно для объективной оценки генетического разнообразия, степени родства и эффективного использования генофонда этих пород.

Разработана технология получения сывороток - реагентов групп крови. Она включает изучение влияние породности, возраста и пола доноров и реципиентов на иммунореактивность, титры и качество получаемых диагностикумов. Показано становление антигенности в онтогенезе и его значение для определения достоверности происхождения ягнят и зиготности в многоплодных пометах. Предложен метод оценки баранов-производителей по качеству потомства с использованием генетических маркеров, что позволило реально провести оценку племенных животных, значительно уменьшить затраты на выращивание не всего потомства, а только достоверного по обоим родителям. Микросателлитный анализ показал участие цигайских овец в формирование молдавского каракуля. Наличие общих аллелей у двух пород подтверждает использование цигая в скрещивании со смушковыми овцами при создании животных типа стогоманы. Данный прием межпородного скрещивания использовался для улучшения мясных и шерстных качеств «чушки». С участием диссертанта и других авторов созданы молдавский заводской тип цигая «Tip de elitг de ovine (Ovis aries L.) Юigaie Moldovenesc» и молдавский внутрипородный тип каракуля «Tip de ovine (Ovis aries L.) Karakul Moldovenesc». Результаты исследований вошли в «Рекомендации по технологии производства продукции овцеводства в Республике Молдова» (Кишинев, 1992), используются при проведении научно-исследовательских работ в Научно-практическом институте биотехнологии в зоотехнии и ветеринарной медицине, в учебном процессе Государственного Аграрного Университета Молдовы по специальностям «Зоотехния» и «Ветеринария».

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- Создание новых молдавских типов в цигайской и каракульской породах овец и их генетическая оценка.

- Разработка технологии получения сывороток - реагентов групп крови.

- Повышение эффективности селекционной работы в овцеводстве на основе

использования генетических маркеров.

Апробация работы. Результаты исследований ежегодно докладывались и обсуждались на заседаниях Ученого Совета Научно-практического института биотехнологии в зоотехнии и ветеринарной медицине Республики Молдова; V и VI съездах генетиков и селекционеров Молдавии; Республиканских и Международных научных конференциях в Республике Молдова 1985, 1986, 1989, 1990-1995, 1997, 2006, 2008 гг.; Международных научно-практических конференциях (Россия - 1987, 1994, 1998, 2003 - 2006 гг.; Украина - 1993, 1996, 1997, 1999, 2001, 2004 - 2006 гг.; Белоруссия - 1996, 2004, 2007, 2008 гг.; Румыния - 2004, 2005 гг.).

Публикации. Материалы диссертационной работы опубликованы в научных журналах: «Доклады ВАСХНИЛ», «Доклады РАСХН», «Вестник РАСХН», «Цитология и генетика», «Известия Академии наук Молдовы», научно-производственных журналах - «Сельское хозяйство Молдавии», «Agricultura Moldovei», «Єtiinюa Agricola», «Зоотехния», а также в сборниках научных трудов Международного общества по генетике животных (МОГЖ) и Европейской ассоциации животноводства (ЕАЖ), и международных научно-практических конференций, прошедших в Италии, Нидерландах, Румынии, Венгрии, Финляндии, Северной Ирландии, России, Республики Молдова, Украины и Белоруссии.

По теме диссертации получен патент на изобретение за создание нового типа - молдавский заводской тип овец цигайской породы или в оригинальном названии «Tip de elitг de ovine (Ovis aries L.) Юigaie Moldovenesc», опубликовано 81 работа, в том числе три методических рекомендаций в соавторстве по технологии производства продукции овцеводства в Республике Молдова. Содержание диссертации наиболее полно отражено в 30 научных работах, приведенных в автореферате.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 220 страницах, содержит 41 таблицу, 37 рисунков и состоит из разделов - введение, обзор литературы, материал и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение, выводы, практические предложения, библиография и приложения. Библиография включает 233 названия, в том числе 130 на иностранных языках.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования проводили с 1985 по 2008 годы в базовых хозяйствах: Сельскохозяйственном производственно-потребительском кооперативе по производству семян «Элита Александерфельд» Кагульского района, Акционерного общества «Гигант» Вулканештского района, Межхозяйственного предприятия по выращиванию нетелей Тараклийского района, колхоза «Друмул Ленинист» Хынчештского района, Экспериментально-технологической станции «Максимовка», а лабораторные - в лаборатории технологии разведения и эксплуатации овец Научно-практического института биотехнологий в зоотехнии и ветеринарной медицине Академии Наук Республики Молдова, а также в лаборатории генетики сельскохозяйственных животных ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства Россельхозакадемии» в соответствии с государственной тематикой по созданию новых шерстно-мясо-молочного типа овец цигайской и смушково-мясо-молочного типа каракульской породы.

Исследования проводили по разработанной схеме с использованием общепринятых в зоотехнии и ветеринарии методик (рис. 1).

Изучение направленности индуцированного антителогенеза и практическое использование выявленных закономерностей проводилось на 4-х созданных донорских стадах численностью 231 головы. В качестве доноров были использованы 59 баранов остфризской и цигайской пород и их помесей в возрасте 2- 4 года, а реципиентов - 172 головы молодняка этих же пород в возрасте 4 и 12 месяцев. Проведено 1239 иммунизаций (36 циклов) и 16 реиммунизаций, изготовлено 14 моноспецифических сывороток-реагентов, выявляющих 16 антигенов 7 систем групп крови и 3 экспериментальных диагностикума (Mld1, Mld2, Mld3).

Моноспецифические сыворотоки анти-R и анти-О получали путем использования естественных (не иммунных) сывороток крови местных коз. Для этого исследовали сыворотки крови 321 головы овец на наличие анти- R и анти-О, (R система) и 45 коз - на наличие анти-О.

Изучение молочной продуктивности и химического состава молока проводили в соответствии с методическими рекомендациями по технике анализа молока и молочных продуктов (ВИЖ,1983).

Создание шерстно-мясо-молочного типа овец цигайской и смушково-мясо-молочного типа каракульской породы проводилось согласно разработанных схем (рис. 2, 8).

Кластерный анализ и построение дендрограммы осуществляли по методике А.М. Машурова и В.И. Черкащенко (1987). Частоту антигенных факторов, генотипов и аллелей проводили по методике Животовского Л.А. и Машурова А.М. (1974). Показатель степени гомозиготности и число эффективных аллелей в исследованных популяциях овец определяли по Robertson A. (1956), а уровень генетического сходства пород - по формуле Животовского Л.А. (1979).



Размещено на http: //www. allbest. ru/

Рис. 1

Показатели объединенного эффекта исключения недостоверного потомства по всем системам групп крови рассчитывали по формуле Wiener А.S. et al. (1930). Поиск предполагаемых родителей недостоверных животных, ценных в племенном отношении,

проводили анализом зоотехнической документации и с учетом специфики наследования групп крови по триаде отец-мать-потомок.

Исследования по полиморфизму белков крови - гемоглобина и трансферрина определяли на 7,5% полиакриламидном геле по методике Gane B. et al. (1977). Подсчет частот аллелей и генотипов в локусах гемоглобина и трансферрина проводили по общепринятым методикам, описанных Марзановым Н.С. (1991).

Аллелофонд новых типов овец (n = 69) с использованием микросателлитов оценивался по схеме Tapio M. et al. (2005). Уровень генетической изменчивости по каждому локусу определяли по Weir B., Cockerham C. (1984), внутрипородное разнообразие - с помощью Microsatellite Toolkit (Park S., 2001), а показатель числа аллелей в локусе - по El Mousadik A., Petit R.J. (1996). Эти значения для локусов и пород были подсчитаны с помощью программы FSTAT 2.9.3 (Goudet J., 1995), равно как и для вычисления подразделенности каждой породы, выраженной через FIS по всем локусам. Отклонение от равновесия по Харди-Вайнбергу для каждой породы было определено с помощью программы GENEPOP 3.1 (Raymond M., Rousset F., 1995). Для вычисления генетических расстояний была использована статистика общности аллелей (Bowcock A.M. et al., 1994), при этом каждая особь рассматривалась как таксономическая единица. Дендрограмма была построена на основе использования программы PHYLIP (Felsenstein J., 1993), по описанной схеме Saitou N., Nei M. (1987).

Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием персонального компьютера и прикладных статистических программ.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Создание новых типов овец

3.1.1 Шерстно-мясо-молочный тип овец цигайской породы

У местных молдавских цигайских овец шерстно-молочного типа была низкая мясная продуктивность, а в результате использования при скрещивании тонкорунных баранов шерсть стала короткой и потеряла свои специфические качества. Государственной программой селекции в Республике Молдова было предусмотрено для улучшения местного цигая использование приазовского и крымского типов овец, выполнение которой было начато в 1962 году. Программа основывалась на использовании метода чистопородного разведения путем спаривания цигайских маток местной селекции шерстно-молочного типа с баранами крымского шерстно-мясного и приазовского мясо-шерстного типов с дальнейшим отбором овец желательного типа и разведением «в себе».

По мере формирования животных желательного типа были разработаны минимальные требования целевого стандарта. В течение 1962-2000 гг. спаривания проводились в 5 этапов для получения животных с улучшенной шерстной и мясной продуктивностью, сохранением молочности присущей местным овцам шерстно-молочного типа (рис. 2).

В результате проведенной работы был создан новый заводской шерстно-мясо-молочный тип цигайской породы овец с долями кровности по крымскому шерстно-мясному типу-48,7%, приазовскому мясо-шерстному - 40,5% и местному шерстно-молочному - 10,8% и получен патент №12/2007. MD3440 G2.



Рисунок 2 Схема выведения шерстно-мясо-молочного типа овец цигайской породы

Классный состав молодняка нового типа цигая, оцененный во время бонитировки в 12-14 мес. возрасте, улучшился в несколько раз относительно исходных животных (рис. 3).



Рисунок 3 Классный состав ярок

Если в 1964 году элитных и I класса животных было 31,0%, то в 2005 году - 97,6 %. В 60-х годах вследствие использования мериносов, шерсть у ярок в 12-14 мес. возрасте была практически тонкой, 59,6% - 56 качества, 7,0% - 58 и 5,6% - 60 качества. С желательным 48-50 качеством животных было только 27,8% (рис. 4).

Рисунок 4 Качество шерсти ярок

К 1999 году в период завершения работ по созданию типа процент животных с 48-50 качеством увеличился в 2,7 раза и составил 74,7%. В процессе селекционной работы в 2005 году желательное качество шерсти для цигайской полутонкой шерсти улучшилось еще на 4,5% и при оценке ярок в 12-14 мес. возрасте удельный вес животных с 48-50 качеством шерсти достиг 79,2%.

Увеличилось число овец с более высокими настригами. Так, в 1962 году с настригом немытой шерсти от 4,0 до 5,9 кг было только 11,5% овцематок и настриг на одну голову по хозяйству составил 2,9 кг. При завершении работ по созданию типа к 1999 году их стало 56,1%, а в 2005 году - 60,9% и средний настриг на овцу достиг до 4,2 кг (рис. 5).

Рисунок 5 Настриг немытой шерсти у овцематок

Показатели продуктивности молодняка при проведении бонитировки в возрасте 13-14 мес. были также высокими. Живая масса баранчиков составляла 62,9 - 63,5 кг. Настриг шерсти в физическом весе 8,5-7,3 кг при длине штапеля 15,2 см.

Живая масса элитных ярок в начальный период создания типа цигая составляла 30,0 кг, а в 2005 году - 44,9 кг. Настриг шерсти в физическом весе увеличился на 1,32 кг или на 35,9%, соответственно и длина шерсти ярок возросла от 8,41 0,03 до 14,88 0,09 см (рис. 6).



Рисунок 6 Продуктивность элитных ярок

Показатели продуктивности овец селекционных половозрастных групп по живой массе и настригам шерсти при апробации превышали минимальные требования целевого стандарта (табл. 1). Живая масса выше в пределах от 18,47 кг до 2,05 кг и по настригам шерсти от 1,78 до 0,96 кг.

Таблица 1 Продуктивность овец селекционного ядра

Половозрастные группы	Гол	Живая масса, кг	Настриг шерсти, кг
		При апробации	Мин. Требов.	+/- к мин. Требов.	При апробации	Мин. Требов.	+/- к мин. Требов.
Бараны-производители	20	82,05±1,69	80,0	+ 2,05	7,78±0,15	6,0	+ 1,78
Овцематки	695	56,64±0,34	50,0	+ 6,64	5,18±0,04	4,0	+ 1,18
Баранчики 12 -13 мес.	30	63,47±1,11	45,0	+ 18,47	7,29±0,79	6,0	+ 1,29
Ярочки 12 - 13 мес.	275	48,12±0,22	40,0	+ 8,12	5,46±0,04	4,5	+ 0,96

Молочная продуктивность овцематок за 180 дней лактации составляет 126,3 кг, в том числе в дойный период 29,3 кг. Во время доения овец в первом месяце среднесуточный удой составляет в пределах 558 г, во втором 540-460 г и в третьем - 428 г.

На рисунке 7 представлен химический состав молока, исследованный в середине дойного периода по 10 овцематкам местного шерстно-молочного и нового шерстно-мясо-молочного типов.

Рисунок 7 Химический состав молока местных цигайских овец и созданного заводского типа

Показатели химического состава молока у овец шерстно-мясо-молочного направления продуктивности по основным показателям выше в сравнении с овцами местной популяции шерстно-молочного типа. По содержанию жира разница высоко достоверна (Р < 0,001), по протеину, казеину и сухому веществу (Р < 0,1). СОМО у местного шерстно-молочного типа выше, но разница не достоверна.

В Республике Молдова в год производится около 21,0 тыс. тонн овечьего молока, которое перерабатывается в домашних условиях на брынзу. По результатам оценки физико-химических свойств брынзы, массовая доля жиров в процентах к сухому веществу при норме не менее 50% составила в пределах 50,4 - 50,8. Доля влаги при максимуме 53% фактически оказалась 40,3 - 40,5%. Доля поваренной соли в брынзе, согласно нормативов от 3 до 8%, при исследованиях составила от 7,2% до 7,4%.

После выработки овечьей брынзы остается сыворотка, которая содержит по 1% белка и жира, 5% молочного сахара и 1% минеральных веществ. Наиболее рациональный способ использования сыворотки - приготовление альбуминного творога (урды). На приготовление 1 кг урды затрачивается 9,5-10 кг сыворотки. Урда готовится путем постепенного прогревания сыворотки до 80-85о в течении 15 минут. Полученная масса процеживается, добавляется 3-4% соли и плотно укладывается в посуду для хранения и дальнейшего использования.

Изученные убойные качества, морфологический и сортовой состав туш баранчиков 7- 7,5 мес. возраста созданного заводского типа цигайских овец и шерстно-молочного типа цигая местной популяции показали, что баранчики нового типа более развитые. При одинаковом возрасте их живая масса выше на 1,17 кг (табл. 2).

Таблица 2 Сравнительная оценка мясной продуктивности цигайских баранчиков разных типов

Показатели	Новый заводской тип	Местный шерстно-молочный тип
Предубойная масса, кг	35,67±0,94	34,50±1,64
Масса парной туши, кг	15,81±0,59*	13,86±0,61
Выход парной туши, %	44,32±0,71**	40,17±0,86
Масса внутреннего жира, кг	0,426±0,04	0,431±0,04
Убойная масса, кг	16,30±0,61*	14,29±0,64
Убойный выход, %	45,70±0,54**	41,42±0,88

Примечание: * - Р<0,05; ** - Р<0,01

Масса парной туши достоверно больше на 1,95 кг (Р<0,05), также и выход парной туши 4,15% (Р<0,01). Убойный выход туши баранчиков нового заводского типа цигая 45,7%, тогда как у баранчиков местного шерстно-молочного типа - 41,42% (Р<0,01).

Анализируя показатели морфологического состава туш полученные по баранчикам обоих типов следует отметить, что мякотная часть мяса у животных нового типа в среднем на одну голову больше на 2,18 кг (Р<0,001). Выход мякотной части мяса у баранчиков местной селекции 74,7%, тогда как у нового типа 79,7%, соответственно и выход костей 24,2 и 19,5%. Коэффициент мясности высокий у баранчиков нового типа - 3,93 и низкий у шерстно-молочного - 2,96 (табл. 3).

Таблица 3 Сравнительная оценка морфологического состава туш цигайских баранчиков разных типов

Показатели	Новый заводской тип	Местный шерстно-молочный тип
Масса охлажденной туши, кг	15,92±0,61*	14,06±0,52
Масса мякотной части мяса, кг	12,69±0,23***	10,51±0,26
Масса костей, кг	3,10±0,25	3,40±0,08
Масса сухожилий, кг	0,13±0,05	0,15±0,07
Выход, % мякотной части мяса костей сухожилий	79,7 19,5 0,8	74,7 24,2 1,1
Коэффициент мясности	3,93	2,96

Примечание: * - Р<0,05; *** - Р<0,001

Учитывая высокий спрос в стране и за рубежом на ягнятину и молодую баранину, молодняк нового заводского типа цигая более соответствует предъявляемым требованиям рынка, чем молодняк местного типа.

Сортовой состав туш, представленный в таблице 4, подтверждает полученные данные по морфологическому составу.

Таблица 4 Сравнительная оценка сортового состава туш цигайских баранчиков разных типов

Показатели	Новый заводской тип	Местный шерстно-молочный тип
Масса охлажденной туши, кг	15,92±0,61	14,06±0,52
Масса отрубов, кг: I сорта II сорта III сорта	11,97±0,50 2,62±0,27 1,31±0,08	10,41±0,53 2,39±0,18 1,25±0,11
Масса мякотной части мяса, кг: I сорта II сорта III сорта	9,95±0,27** 2,08±0,10* 0,66±0,03**	8,26±0,31 1,75±0,08 0,50±0,03

Примечание: * - Р<0,05; ** - Р<0,01

Масса отрубов первого и второго сортов у баранчиков нового типа была выше по сравнению с баранчиками шерстно-молочного типа. Масса мякотной части мяса первого сорта у ягнят нового типа на 1,69 кг больше (Р<0,01), второго сорта - на 0,33 кг (Р<0,05) и третьего - на 0,16 кг (Р<0,01), чем у баранчиков шерстно-молочного типа.

Проведенный анализ полученных данных показал, что убойные качества, морфологический и сортовой состав туш ягнят нового типа достоверно превышает показатели молодняка шерстно-молочного типа местной популяции, т.е. новый заводской тип цигайских овец обладает более высокими мясными качествами по сравнению с животными местной популяции.

В новом заводском типе цигайских овец созданы две линии: линия 7252 и 7016.

Линия 7252 - родоначальник линии баран-производитель 7252, 1997 года рождения. При бонитировке в 14 мес. возрасте живая масса у него составила 75,0 кг с настригом шерсти при первой стрижке 8,0 кг в оригинале. Шерсть соответствовала типичным качествам цигайской породы овец: густота шерсти - М; С - 4; длина штапеля - 13,0 см; извитость нормальная; тонина - 50 качества (29,1-31,0 мк); цвет жиропота - светлокремовый; оброслость и общая оценка - 00000; класс - элита. При постановке на проверку по качеству потомства его живая масса перед осеменением в 18 мес. возрасте составила 79,0 кг. Максимальный вес в 3,5 года - 82,0 кг.

В 2000 году при бонитировке дочерей барана-производителя 7252 в сравнении со сверстницами, превышали показатели по живой массе на 3,0 кг (P<0,001) и количестве немытой шерсти на 1,17 кг (P<0,001). Длина шерсти не менее 15 см и настриг шерсти в оригинале - 6,5 кг.

Линия 7016 - родоначальник линии баран-производитель 7016, 1997 года рождения, потомки которого легко узнаваемы из-за их комолости. При проведении комплексной оценки в 14 мес. возрасте получены следующие показатели: тип-С4; густота шерсти - М+; длина шерсти - 12,5 см; тонина - 50 качества (29,1-31,0 мк); цвет жиропота - кремовый; оброслость и общая оценка - 00000; живая масса - 64 кг; класс - элита. Настриг шерсти при первой стрижке 8,0 кг в оригинале. В возрасте 2,5 года его живая масса составила 93,0 кг и настриг шерсти в физическом весе 10,0 кг. Продуктивные показатели потомков барана 7016 соответствуют требованиям стандарта созданного заводского типа цигая. Молочная продуктивность овцематок комолой линии 7016 была выше, чем у овец линии 7252. За первые двадцать дней лактации составила не менее 35 кг и в целом за лактацию 130 кг.

3.1.2 Смушково-мясо-молочный тип овец каракульской породы

В соответствии с государственной программой по созданию в Республике Молдова новых пород и типов овец с 1978 года была начата работа по созданию внутрипородного типа каракуля смушково-мясо-молочного направления продуктивности путем скрещивания местных маток типа «чушка» с баранами каракульской породы узбекской селекции. Методика и схема создания нового типа была разработана Молдавским отделением ВНИИ каракулеводства под руководством Бузу И.А. и состояла из четырех этапов (рис. 8): I. этап (1978-1985 г.г.) - прямое и реципрокное скрещивание каракульских чистопородных овец с овцами местной популяции «чушка». II. этап (1986-1996 г.г.) - селекция на получение высококачественных смушков.

III. этап (1997-2000 г.г.) - использование прогрессивных методов селекции для получения максимальной живой массы, высокой молочной продуктивности и от ягнят высококлассных смушков.

IV. этап (2001-2005) - консолидация овцепоголовья нового типа.



Рисунок 8 Схема создания нового смушково-мясо-молочного типа овец каракульской породы Местные смушковые овцы - Каракульская порода овец

Новый тип овец характеризуется выравненностью экстерьера. Животные обладают крепкой конституцией, развитие статей достаточно гармоничное и соответствует направлению селекционной работы на получение овец массивного телосложения с хорошими смушковыми качествами. Сохранены ценные особенности местной популяции «чушка», таких как крепкая конституция, выносливость, устойчивость к заболеваниям, приспособленность к местным условиям разведения, хорошая молочность и приобретение высоких смушковых качеств, присущих каракульским овцам узбекской селекции.

При апробации в 2005 году перед проведением случной кампании в октябре-ноябре месяцах средняя живая масса баранов-производителей составила 98,5±2,9кг, что на 13,5 кг больше минимальных требований.

Созданный новый тип овец каракульской породы представлен в основном овцематками черной и серой расцветок. Овцематки, как и бараны-производители, довольно крупные по телосложению и во время апробации нового типа живая масса превысила минимальные требования на 3,5 кг и составила 55,5 кг. Молодняк обоих половозрастных групп в 18-ти и 6-ти мес. возрастах также превышал эти требования по баранчикам на 0,6 и 6,2 кг, и ярочкам 4,3 и 2,3 кг (табл. 5).

Таблица 5 Живая масса нового смушково-мясо-молочного типа овец каракульской породы по итогам государственной апробации

Половозрастные группы	Гол	M±m	Минимальные требования	+/- к мин. Требованиям
Бараны -производители	6	98,5±2,9	85,0	+ 13,5
Овцематки	209	55,5±0,3	52,0	+ 3,5
Баранчики 18 мес.	2	69,6±1,7	70,0	+ 0,6
Ярочки 18 мес.	81	49,3±0,4	45,0	+ 4,3
Баранчики 6 мес.	5	41,2±2,6	35,0	+ 6,2
Ярочки 6 мес.	95	32,3±1,2	30,0	+ 2,3

Каракульские смушки овец нового типа высокого качества. Серый каракуль имеет голубую расцветку темной вариации типа "брумэрие синитэ". Черный каракуль - жакетный и ребристо-плоских тонких сортов каракульчового типа. Желательные смушковые качества представлены в таблице 6.

Таблица 6 Смушковые качества каракульских овец нового типа при апробации

Половозрастные группы	Жакетный	Ребристый	Плоский
	n	%	n	%	n	%
Бараны-производители	1	16,7	2	33,3	3	50,0
Овцематки	139	70,2	42	21,2	17	8,6
Баранчики 18 мес. возраста	1	50,0	-	-	1	50,0
Ярки 18 мес. возраста	37	45,7	14	17,3	30	37,0

Смушки крупные (сухосоленые свыше 1400 кв. см) с наличием длинных или средней длины полукруглых вальков с шелковистым и блестящим волосяным покровом, умеренной длины (7-9 мм), плотным завитком, открытой стороной к голове.

При проведении работ по улучшению смушковых качеств и повышения живой массы селекция велась и на сохранение молочных качеств передающихся от овец местной популяции «чушка» (табл. 7).

Таблица 7 Молочная продуктивность каракульских овец нового типа

Годы	Дней лактации	Молочная продуктивность, кг	Среднесуточный удой, г
2003	174,2±2,7	72,4±1,3	415,6
2004	171,8±1,8	78,0±1,5	454,0
2005	157,5±1,3	77,8±1,1	494,0
В среднем	166,3±1,8	76,6±1,3	460,6

Овцематкам присуще высокая молочная продуктивность, которая по результатам государственной апробации составила в среднем 76 кг молока при среднесуточном удое 460,6 г.

Показатели мясной продуктивности, полученные при убое овец представлены в таблице 8.

Таблица 8 Показатели контрольного убоя каракульских овец нового типа

Наименование	Ед.изм.	Овцематки	Баранчики 6 мес.
Предубойная масса	кг	64,6 ± 1,1	35,8 ± 0,3
Масса парной туши	кг	32,3 ± 1,0	16,6 ± 0,3
Внутренний жир	кг	2,97 ± 0,4	0,32 ± 0,1
Убойный выход	%	54,6	47,3

Убойный выход по овцематкам составил 54,6% и по баранчикам 47,3%. Полученные показатели свидетельствуют о высокой мясности созданного нового молдавского типа овец. Животные довольно крупные, предубойная живая масса овцематок - 64,6 кг и баранчиков - 35,8 кг. Об этом показателе свидетельствует и площади шкур. У овцематок она составила в среднем 126,0 дм2 и по баранчикам - 99,8 дм2 .

В новом внутрипородном типе каракульских овец созданы три линии - линия черной окраски, серой окраски и линия сур.

Линия черной окраски «Corpolent - 7099». Родоначальником линии был отобран комолый баран класса элита, черной окраски, ребристо-смушкового типа.

Живая масса родоначальника в 2,5 гола составила 100 кг. За время четырех летнего использования от указанного барана-производителя было получено 146 потомков, из которых 131 голова элита и первого класса.

За весь период племенного использования барана 7099 количество элитных потомков составило 37%. В настоящее время в стаде используются в качестве продолжателей линий 3 сына и 1 внук.

Линия серой окраски «Delicat - 2049». Родоначальником данной линии был баранчик №2049 серой окраски сероголубой расцветки, жакетно-смушкового типа. Он отличался хорошим и гармоничным развитием с типичным телосложением для каракульских баранов нового типа. Живая масса в 2,5 года составила 100 кг. От родоначальника в стаде получено 263 потомка, в том числе 208 ягнят элита и первого класса.

В линии хорошо консолидирована уравненость серой окраски, 79,1% потомков обладали желаемой расцветкой. В линии 3 сына и 1 внук.

Линия сур «Buhar - 7001». Линия произошла от барана №7001, 1997 года рождения. Родоначальник характеризовался окраской сур, золотистой расцветки, плоского смушкового типа. По развитию, экстерьеру и конституции отвечал требованиям целевого стандарта. Баран комолый, крепкой конституции и типичного экстерьера для желательного типа.

В 3,5 года живая масса составила 94 кг.

Кроме желательной золотистой расцветки в линии особое значение уделялось отбору по молочной продуктивности, в частности мать родоначальника имела высокую молочность - 180 кг за лактацию. В результате индивидуального подбора были получены 196 потомков, в том числе 79,6% класса элита и первого. Продолжателями линии являются 4 сына и два внука.

3.2 Оценка и практическое использование закономерностей индуцированного антителогенеза при изготовлении сывороток-реагентов для определения групп крови у овец

Установлено, что иммунореактивность животных зависит от таких факторов, как происхождение, возраст и пол. При межпородном и разновозрастном подборе пар (донор - 2 года, реципиент - 4 месяца) количество иммунореактивных реципиентов составляет 63,6%, что больше на 17,4%, чем при внутрипородном разновозрастном подборе. Аналогичная закономерность проявилась при подборе пар «донор-реципиент», различающихся по полу. Численность реактивных животных при разнополых подборах была выше на 17,9% по сравнению с парами однополых овец. С увеличением возраста реципиентов, на 26,9% вырос и процент реактивных животных. Повысился максимальный титр антител у реципиентов от 1:64 в возрасте 4 мес. до 1:256 - в 12 мес. При возрасте доноров в 2 и 4 года, а реципиентов 12 мес., поголовье иммунореактивных животных увеличилось на 9,1% (рис. 9).

Отсюда следует, что для повышения иммунореактивности животных и титра сывороток следует использовать подбор пар «донор-реципиент», принадлежащих разным породам, различающихся по полу и возрасту. Для этого следует максимально использовать разнополых и разных пород овец. Возраст доноров должен быть старше двух лет, реципиентов не менее 12 мес.



Рисунок 9 Влияние возраста реципиентов и доноров на иммунореактивность и рост антител

По влиянию возраста, породы и пола на результат антителообразования у реципиентов при изоиммунизации установлено: средний титр сывороток, где реципиентам 12 мес., а донорам 2 года составил 116,2, что на 81,4 выше, чем у 4 мес. реципиентов и на 33,5 после проведения у них реиммунизации (Р< 0,01).

Рисунок 10 Титр антител при межпородной изоиммунизации и реиммунизации

Указанные закономерности были использованы для изготовления 44,5 тыс. доз 14 сывороток-реагентов, выявляющие 16 антигенов 7 систем групп крови овец и 3-х экспериментальных диагностикумов (табл. 9).

Таблица 9 Сыворотки-реагенты 7 систем групп крови, полученные в Республике Молдова

Система	Сыворотки-реагенты, анти-	Количество, тыс. доз
A B C D M R Экспериментальные	Aa, Ab Bb, Bd, Bg, Be1, Be2, Bi Ca, Cb Da Ma R, O Mld1, Mld2, Mld3	более 3,8 - « - 17,3 - « - 3,0 - « - 8,5 - « - 3,0 - « - 5,6 - « - 3,3
Итого	17	более 44,5

Из 17 сывороток-реагентов 15 были иммунными изогемолизинами, а один изоагглютинином (анти-Da). Все сыворотки-реагенты были овечьими, за исключением анти-R и анти-О, которые получали из неиммунных сывороток у коз. Моноспецифичность сывороток, была подтверждена в 1986 году в научно-исследовательском центре по изучению групп крови животных (Турин, Италия). Вторую сверку проводили в 1988 году во ВНИИ овцеводства и козоводства (Ставрополь, СССР). Последняя сверка полученных сывороток была осуществлена в 1996 году с реагентами ГНУ ВНИИЖ РАСХН, которые в свою очередь проверены в Институте Зоотехники (Краков, Польша).

3.3 Генетические особенности цигайских овец исходных внутрипородных типов и аллелофонд овец нового шерстно-мясо-молочного типа

Популяционно-генетическая характеристика проводилась на 306 овцах нового заводского типа, 25 - крымского шерстно-мясного типа, 37 - приазовского мясо-шерстного типа, 134 - шерстно-молочного типа местной селекции и 154 животных из АО “Гигант” Вулканештского района.

На основании суммарных частот антигенов вычислены показатели генетических дистанций между цигайскими овцами различных типов, проведен кластерный анализ и построена дендрограмма (рис. 11).

Рисунок 11 Дендрограмма кластеров анализируемых производственных типов цигайских овец

Анализируя представленную дендрограмму установлено, что точке А соответствует показатель генетической дистанции равный 0,1095, число отражает генетическую дистанцию между овцами нового заводского типа и разводимыми в АО «Гигант». Точка Б (0,1687) показывает расстояние между кластером А и овцами крымского шерстно - мясного типа. Точка В (0,3002) определяет генетическую дистанцию приазовского мясо - шерстного типа овец с кластером Б. В точке Г (0,3120) расстояние между овцами шерстно-молочного типа и всеми остальными исследованными животными. Таким образом, проведенный кластерный анализ показал своеобразие генетической структуры овец нового типа. По антигенному составу он оказался ближе к шерстно-мясному типу и мясо-шерстному типу и более удален от местных цигайских овец шерстно-молочного типа, что вполне соответствует ранее предусмотренному условию сохранения их доли кровности на уровне 48,7%, 40,5% и 10,8% и направлению селекционно-племенной работы.

Следовательно, частоты антигенов групп крови и вычисленные на их основе генетические расстояния, выраженные в форме дендрограммы, могут служить теоретической предпосылкой их использования в качестве критерия (меры) оценки генетической структуры отдельных пород и породообразовательного процесса.

На базе семейного анализа у овец, по системам А, В, С, D, R, M, I групп крови изучен аллелофонд цигайских овец нового заводского типа (табл. 10).

Таблица 10 Генетическая структура нового заводского шерстно-мясо-молочного типа овец цигайской породы

Системы групп крови	Количество выявленных	Степень гомозиготности	Число эффективных аллелей
	антигенов	генотипов	аллелей
A	2	8	4	0,4511	2,2168
B	3	9	4	0,5314	1,8818
C	2	9	4	0,5490	1,8215
D	1	3	2	0,5662	1,7662
I	2	3	2	0,5816	1,7194
M	1	3	2	0,5270	1,8975
R	2	3	2	0,5686	1,7587
Всего	13	38	20	В среднем
				0,5393	1,866

Выявлены 38 генотипов и 20 аллелей, подсчитаны частоты их встречаемости. Общая степень гомозиготности составила 0,5393, а число эффективных аллелей 1,866, что свидетельствует о высокой консолидации созданного типа.

3.4 Генетические особенности каракульских овец исходных типов и аллелофонд овец нового смушково-мясо-молочного типа

В начале третьего этапа создания молдавского типа каракульских овец с 1997 года было начато проведение генетических исследований. Она включала следующие направления исследований: оценка генетической структуры исходных животных по группам крови, расчет генетических дистанций между местной «чушкой», завозимыми чистопородными каракульским овцами, новым молдавским типом, характеристика аллелофонда овец нового молдавского типа каракуля, построение дендрограммы на основе полученных данных, типизация стада, формированием структуры стада и закладкой линий по смушковым расцветкам.

На основании частот встречаемости антигенных факторов рассчитаны генетические дистанции, проведен кластерный анализ с построением дендрограммы (рис. 12). Установлено наименьшее генетическое расстояние между овцами местной породы чушки серой и черной расцветок (d=0,1280), которые составили кластер А.

В кластере В новый смушково-молочный тип находится на расстоянии (d=0,2587) от местных овец чушка. Узбекский чистопородный каракуль располагается еще на более отдаленном расстоянии (d=0,3154).

Таким образом, кластерный анализ и полученная на ее основе дендрограмма отражают формообразовательный процесс создания нового молдавского смушково-молочного типа каракуля.



Рисунок 12 Дендрограмма кластеров анализируемых каракульских овец

Проведя семейный анализ по группам крови у каракульских овец нового типа, выявлены 48 аллелей и 136 генотипов (табл. 11).

Таблица 11 Генетическая структура нового смушково-мясо-молочного типа овец каракульской породы

Системы групп крови	Количество выявленных	Степень гомозиготности	Число эффективных аллелей
	антигенов	генотипов	аллелей
A	2	7	4	0,4429	2,2578
B	5	110	32	0,0777	12,8700
C	2	7	4	0,4563	2,1915
D	1	3	2	0,5308	1,8839
I	2	3	2	0,8940	1,1186
M	1	3	2	0,6474	1,5446
R	2	3	2	0,6116	1,6351
Всего	15	136	48	В среднем
				0,5230	3,3574

На основе полученных данных, проведены расчеты частот встречаемости этих биоструктур. В процессе проведенного анализа подсчитан уровень гомозиготности, который в среднем составил 0,523 и число эффективных аллелей - 3,3574.

3.5 Использование генетических маркеров овец в селекционно-племенной работе

3.5.1 Становление антигенности и оценка зиготности по антигенам групп крови у ягнят-близнецов

С целью определения становления антигенного статуса проведены исследования на 40 ягнятах. В каждой группе было по пять ягнят 1, 3, 5, 10, 20 дневного возраста и 1, 2, 3 месячного возраста. Анализ проводили путем сопоставления эритроцитов ягнят, отца и матери.

Анализ проведенных исследований показал, что антигены Аа, Аb (А система), Вb, Be, Вg, Bi (В система), Са, Сb (С система), Dа (D система) можно определять практически сразу после рождения. Нами выявлен R антиген (I случай) на 10 день, а О антиген (R система) только на 31 день жизни. В среднем R антиген (R система) можно было выявить на 20 день и Ма антиген начиная с 30 дня (1 случай из 5), а его становление завершалось к 2 меcяцам жизни.

Определение зиготности основано на индивидуальности типов крови у животных. При этом доказательством монозиготности близнецов является полная идентичность их типов крови.

Для определения зиготности использовали потомков из многоплодных пометов тексельских и остфризских овец при изучении аллелофонда у этих пород. В результате были установлены группы крови у 140 ягнят двойневого происхождения, из них 62 головы однопо...