Влияние культивируемых микробных ассоциаций на течение и исход при термической травме (экспериментальное исследование)

Размещено на http://www.allbest.ru/

УДК: [616-001.17+617-022]:576.8.073.3

Влияние культивируемых микробных ассоциаций на течение и исход при термической травме (экспериментальное исследование)

С.П. Сахаров, М.А. Аксельров

Изучение влияния культивируемых бактерий на течение ожоговой болезни у кроликов породы «шиншилла» показало, что подкожное введение животным смеси некультивируемых бактерий S. aureus и P aeruginosa в концентрации 10⁵ степени вызывало их гибель в 75% случаев на 13,58±0,36 сутки при развитии шока и полиорганной недостаточности.

Ключевые слова: культивируемые бактерии, ожог, инфекционный процесс.

Study of the effect of cultured bacteria on the course of burn disease in Chinchilla Rabbits showed that subcutaneous administration of a mixture of uncultivated bacteria Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa at a concentration of 10⁵ to animals caused their death in 75 % of cases on 13,58+0,36th day, because of the development of shock and multiple organ failure.

Keywords: cultivated bacteria, burn, infectious process.

Вивчення впливу культивованих бактерій на перебіг опіковоїхвороби у кролів породи «шиншила» показало, що підшкірне введення тваринам суміші некультивованих бактерій 5. aureus та Р. aeruginosa в концентрації 10⁵ степені викликало їхню загибель у 75% випадків на 13,58±0,36 добу при розвитку шоку та поліорганної недостатності.

Ключові слова: культивовані бактерії, опік, інфекційний процес.

Введение

Совершенствование методов лабораторной диагностики и лечения больных с термической травмой остается актуальным до настоящего времени. По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) и Детского фонда ООН (ЮНИСЕФ), смертность от термических травм у детей в мире занимает третье место среди всех травматических факторов после аварий на дорогах и утопления [1,3].

Одной из основных причин высокой летальности при ожоговой болезни является развитие генерализованной инфекции, вызванной полиэтио- логичной условно-патогенной микрофлорой, с последующим развитием полиорганной недостаточности, поэтому изучение патогенетических механизмов развития ожоговой болезни, осложненной культивируемыми микробными ассоциациями, является актуальным [2,4,7].

Цель научного исследования - на модели экспериментальных животных изучить влияние культивируемых микробных ассоциаций на течение и исход термической травмы.

Материал и методы исследования

В качестве экспериментальной модели термического ожога использовали кроликов породы «шиншилла» массой 3493,8±120,6 г в количестве 16 голов. Для воспроизведения экспериментальной инфекции использовали культуры Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus, выделенные от больных, находящихся на лечении в ожоговом отделении ГБУЗ ТО «Областной клинической больницы №1» г. Тюмени. Исследования проведены в виварии ФГБОУ ВПО «Государственный аграрный университет Северного Зауралья». Здоровых кроликов содержали в клетках в соответствии с требованиями санитарных правил (Утв. Главным Государственным санитарным врачом №1045-73). В течение трех дней карантина кроликов содержали в экспериментальных клетках собственной конструкции для адаптации животных к новым клеткам. В виварии поддерживали температуру воздуха 24-26°С в соответствии с приказом МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 и требованиями Европейской конвенции по содержанию, кормлению и уходу за подопытными животными, выводу их из эксперимента и последующей утилизации (Страсбург, 1986).

Термическую травму наносили на фоне наркоза по методике, предложенной А.В. Разиной [5]. Пре- медикацию проводили 2% раствором ксилазина гидрохлорида (рометара) в дозе 5,0 мг/кг, а на его фоне внутримышечно вводили 5% раствор золети- на в дозе 7,5 мг/кг массы тела кролика соответственно. У кроликов регистрировалось состояние общей анестезии, достаточной по глубине и продолжительности для воспроизведения экспериментальной ожоговой травмы. У животных удаляли волосяной покров со спины и боковой поверхности туловища площадью от 20 до 25% поверхности тела. Поверхность спины и боковые поверхности туловища кролика погружали в водяную баню на 10 секунд при температуре 90°С. На ожоговую поверхность накладывали стерильную асептическую марлевую повязку, для фиксации ее использовали выкройку из прозрачного эластичного термопластика. Для заражения животных использовали взвесь бактерий P aeruginosa и S. aureus в концентрации, обычно определяемой на поверхности ожоговых ран у больных. Смесь бактерий вводили кроликам подкожно по 1,0 мл S. aureus и P. aeruginosa в концентрации 105 микробных клеток в 1 мл. За кроликами проводили наблюдение в течение 21 дня. При вскрытии у погибших животных и у животных, находившихся под наблюдением в течение 21 дня, определяли количество культивируемых бактерий P. aeruginosa и S. aureus в следующих органах: почках, легких и печени. ожоговый шиншилла термический бактерия

Результаты исследований обрабатывали при помощи стандартных статистических пакетов (SPSS-11,5 for Windows), где M±m (выборочное среднее ± ошибка среднего).

Результаты исследований и их обсуждение

В результате моделирования у экспериментальных животных получились ожоговые раны со средней площадью поражения 17,03±0,63% поверхности тела. На 12-19 день после нанесения термической травмы и введения подкожно по 1,0 мл смеси бактерии S. aureus и P aeruginosa в концентрации 10⁵ микробных клеток в 1 мл гибель наблюдали у 12 (75%) из 16 кроликов. Свыше 21 суток выжило 4 (25%) животных. Средняя продолжительность жизни у погибших животных составила 13,58+0,36 суток.

При вскрытии погибших животных в сосудах трупов наблюдалось жидкое состояние крови. По мнению многих авторов [5], такое состояние крови является основным патологоанатомическим признаком шока.

Следует отметить, что ожоговая травма кожи в сочетании с микст-инфекцией вызывала изменения со стороны желудочно-кишечного тракта. За 2-3-е суток до летального исхода у 9 (75%) из 12 погибших экспериментальных животных наблюдали клиническую картину пареза кишечника, которая проявлялась отказом от еды и вздутием живота. Как показали гистологические исследования, у данной группы животных в кишечнике наблюдалось полнокровие сосудов подслизистого слоя. Полученные данные позволили сделать заключение о том, что в условиях проведенного эксперимента летальный исход был вызван микрофлорой пищеварительного тракта кролика в результате развившегося пареза кишечника, что углубляло инфекционный процесс.

При бактериологическом исследовании содержимого почек у 12 (100%) погибших экспериментальных животных наблюдали ассоциацию бактерий - E. coli+ P. aeruginosa, концентрация E. coli составила 2,5±0,6х10⁹,а P aeruginosa - 1,1±0,7х10⁵ микробных клеток в 1 миллилитре.

При микробиологическом исследовании легочной ткани у 9 (75%) кроликов содержание E. ^li и P aeruginosa определяли в количестве 5,5±1,1х10⁹ и 4,7±2,4х10⁹ микробных клеток в 1 мл соответственно. При этом у 6 (50%) погибших животных в легких наблюдали ассоциацию бактерий - E. coli+P aeruginosa.

В печени у 9 (75%) экспериментальных животных определяли E. ^li в титре 4,9±1,5х10⁹ микробных клеток в 1 мл, а у 3 (25%) кроликов - P aeruginosa в концентрации 4,2±2,5х10⁹ микробных клеток в 1 миллилитре.

Особое внимание обращает на себя тот факт, что у погибших животных S. aureus при микробиологическом исследовании почек, легких и печени обнаружить не удалось.

Результаты проведенных исследований показали, что на фоне ожоговой болезни возник генерализованный инфекционный процесс, вызванный ассоциацией культивируемых микроорганизмов P aeruginosa, E. coli и S. aureus. Основные патофизиологические изменения в организме кроликов произошли в септикотоксемический период ожоговой болезни в результате действия чрезвычайных раздражителей микробной этиологии. Отмечалось расстройство в системе кровообращения (полнокровие сосудов, очаговая лимфоидная инфильтрация), у кроликов возникли шоковые состояния с постепенным развитием полиорганной патологии, проявляющейся наличием смешанной дистрофии клеток, в органах появились участки запустения типа некрозов.

Выводы

Полученные результаты клинических, микробиологических и гистологических исследований на кроликах породы «шиншилла» свидетельствуют, что основные патофизиологические изменения в организме кроликов при ожоговой болезни, осложненной микст-инфекцией, происходят в септикотоксе- мическую стадию.

Основная причина летального исхода лабораторных животных - развитие шока и полиорганной недостаточности.

На развитие патологического процесса при ожоговой болезни, осложненной микст-инфекцией, оказывает влияние как экзогенная микрофлора (в условиях нашего эксперимента Р. aeruginosa), так и эндогенная условно-патогенная микрофлора (у кроликов происходила дислокация E. coli из кишечника животных в различные внутренние органы).

Литература

1. Алексеев А. А. Основные статистические показатели работы ожоговых стационаров Российской Федерации за 2013 год / А. А. Алексеев, Ю. И. Тюрников // Материалы Всерос. науч.- практ. конф. с междунар. уч. [«Ожоги и медицина катастроф»] (Уфа, 2014 г.) // Комбустиология. - 2014. - № 52-53.

2. Вазина И. Р. Летальность и причины смерти обожженных / И. Р Вазина, С. Н. Бугров // Российский мед. журн. - 2009. - № 3. - С. 14-17.

3. Всемирный доклад о профилактике детского травматизма / Всемирная организация здравоохранения и ЮНИСЕФ. - Женева, 2008. - 39 с.

4. Електронномікроскопічні зміни респіраторного відділу легень щурів після термічної травми шкіри в умовах застосування розчину №Cl / А. О. Очеретнюк, З. М. Небесна, І. В. Гунас [та ін.] // Світ медицини та біології. - 2013. - № 2. - С. 38-41.

5. Зербино Д. Д. Синдром дессеменированного внутрисосудистого свертывания крови как основное морфологическое проявление шока / Д. Д. Зербино, Л. Л. Лукасевич // Архив патологии. - 1983. - № 1. - С. 13-20.

6. Разина А. В. Влияние различных вариантов общей анестезии и операционной травмы на организм: автореф. дис. ... канд. вет. наук / А. В. Разина - Троицк, 2010. - 26 с.

7. Сахаров С. П. Летальные исходы ожоговой болезни у детей / С. П. Сахаров, В. В. Иванов, Н. П. Шень // Скорая медицинская помощь. - 2011. - № 3. - С. 52-57.

Відомості про авторів

Сахаров Сергій Павлович - к.мед.н., доц. каф. дитячої хірургії Тюменського державного медичного університету МОЗ Росії. Адреса: м. Тюмень, вул. Одеська, 54; тел. +79044940867.

Аксельров Михайло Олександрович - д.мед.н., зав. каф. дитячої хірургії Тюменського державного медичного університету МОЗ Росії, зав. дитячого хірургічного відділення№1ДБУЗ ТО ОКЛ№2 м. Тюмень. Адреса: м. Тюмень, вул. Одеська, 54; тел. +79292694933

Стаття надійшла до редакції 28.01.2017 р.

Размещено на Allbest.ru