Патогенетическое и диагностическое значение системы глутатиона в оценке цитотоксического действия противоопухолевых препаратов

Глутоксим, применявшийся в качестве токсикомодифицирующего препарата при полихимиотерапии РМЖ, также оказал положительное действие на систему глутатиона, достоверно повышая в эритроцитах пациентов концентрацию ВГ, активность Г-6-ФДГ, глутатионредуктазы и каталазы. Таким образом, выраженная цитопротекторная активность глутоксима достоверно отражала эффективность проводимой им коррекционной терапии.

Исследование лабораторных показателей гепато- и нефротоксичности у больных раком молочной железы в процессе курсового лечения циклофосфаном и доксорубицином показало незначительные колебания маркеров цитолиза печени (активности АЛТ и АСТ, концентрации билирубина) на протяжении всего исследования у больных с отсутствием существенных осложнений со стороны паренхиматозных органов. Выраженные признаки гепатотоксичности были отмечены в 2-х случаях после 3-го и 4-го цикла полихимиотерапии, что проявилось повышением активности АЛТ в 2,1 раза и увеличением концентрации билирубина в 1,8 раза (p<0,05) по сравнению со значениями перед началом химиотерапии.

Следует отметить, что на 7-й день после второго курса ПХТ и перед началом третьего курса концентрация билирубина и активность трансаминаз в сыворотке крови в этой группе больных были в пределах нормы. В то же время такие показатели системы глутатиона в эритроцитах этих пациентов, как концентрация сульфгидрильных групп белков, активность Г-6-ФДГ и каталазы были достоверно ниже, чем показатели доноров не только после второго курса ПХТ, но и перед началом третьего. Таким образом, изменения показателей системы глутатиона в эритроцитах больных происходили в более ранние сроки по сравнению с лабораторными показателями цитолиза печени в сыворотке крови.

Дискриминантный анализ показателей системы глутатиона в эритроцитах больных перед третьим циклом ПХТ позволил правильно спрогнозировать по исходным данным вероятность развития выраженных осложнений с точностью 97,1%, а по результатам кросс-проверки - 91,4%.

Таким образом, полученные данные экспериментального и клинического исследований существенно расширяют наши представления о механизмах цитотоксичности и естественной цитопротекции, подтверждают участие системы глутатиона в патогенезе побочного действия ЦФ и ДР и перспективность практического использования показателей обмена глутатиона для оценки и прогноза тяжести цитотоксических поражений паренхиматозных органов, определяют направления поиска новых средств цитопротекции и оценки их эффективности в условиях эксперимента и клиники.

ВЫВОДЫ

1. Изучение системы глутатиона в условиях эксперимента позволило установить, что применение доксорубицина приводит к наиболее выраженным ее нарушениям в тканях сердца, а циклофосфана - в тканях печени. Данные изменения указывают на наличие взаимосвязи между нарушениями обмена глутатиона и реализацией цитотоксических эффектов исследуемых противоопухолевых препаратов.

2. Нарастание выраженных морфологических признаков токсического повреждения ткани печени при повторном введении ЦФ и миокарда - при повторном введении ДР совпадает с динамикой изменений показателей системы глутатиона в результате кумулятивных эффектов цитостатиков.

3. Изменения активности Г-6-ФДГ, ГР, содержания ДК, МДА при повторном введении ЦФ происходили в более ранние сроки (3 - 5-е сутки) и предшествовали появлению морфологических признаков повреждения печени (5 - 7-е сутки), а также биохимических показателей цитолиза печени - АЛТ, АСТ, билирубин (7 -10-е сутки).

4. Цитопротекторные препараты, действие которых связано с нормализацией обмена глутатиона (повышение пула ВГ за счет введения экзогенного глутатиона или предшественников его синтеза (АЦЦ, изопропиловый эфир глутатиона); уменьшением процессов СРО за счет антиоксидантов (мексидол, ремаксол) и комплексообразователей (кардиоксан); стимуляцией энергетических процессов антигипоксантами (цитофлавин, трисан); усилением регуляторных процессов (глутоксим)), могут быть использованы в качестве средств фармакологической защиты тканей паренхиматозных органов от побочных эффектов кумулятивного действия ЦФ и ДР.

5. В условиях курсового применения ЦФ И ДР динамика изменений показателей системы глутатиона в эритроцитах (концентрация ВГ, СГ, МДА и активность Г-6-ФДГ, ГР, ГП) отражает состояние его обмена в повреждаемых тканях внутренних органов (печень, сердце, почки) и эффективность проводимой цитопротекторной терапии.

6. Определение концентрации ВГ, СГ, МДА и активности Г-6-ФДГ, ГР, ГП в эритроцитах пациентов, получающих полихимиотерапию, является патогенетически обоснованным для их применения в качестве лабораторных тестов оценки тяжести побочного действия ДР и ЦФ.

7. Для оценки риска развития и тяжести цитотоксического поражения тканей внутренних органов, эффективности применяемых препаратов цитопротекции в клинической практике необходимо проведение динамического исследования показателей системы глутатиона в эритроцитах пациентов перед каждым новым циклом полихимиотерапии и на 7-е сутки после введения ДР и ЦФ.

8. Совпадение данных клинико-инструментального исследования больных раком молочной железы, пролеченных по схеме САF + глутоксим, улучшение их состояния по шкале Карновского с нормализацией показателей обмена глутатиона в эритроцитах позволяет использовать их для скрининговой оценки цитопротекторных свойств как общеизвестных, так и новых перспективных препаратов фармакологической коррекции.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. В схему комплексного клинико-инструментального обследования больных РМЖ, проходящих курс полихимиотерапии, для оценки степени тяжести цитотоксического поражения паренхиматозных органов и сердечной мышцы рекомендуется включить определение в эритроцитах таких показателей системы глутатиона, как активность Г-6-ФДГ, ГР, ГП, концентрации ВГ, МДА.

2. В схему комплексной терапии больных РМЖ с целью предотвращения побочных цитотоксических эффектов действия цитостатиков целесообразно включение фармакологических препаратов, обладающих антиоксидантными и антигипоксантными свойствами (например, мексидол), а также препаратов-предшественников синтеза глутатиона - ацетилцистеина и препаратов окисленного глутатиона - глутоксима.

3. В протокол скрининговой оценки цитопротекторных свойств как общеизвестных, так и новых перспективных препаратов фармакологической коррекции рекомендуется включение динамического определения показателей обмена глутатиона в эритроцитах (активность Г-6-ФДГ, ГР, ГП, концентрация ВГ, МДА).

4. Полученные данные о патогенетическом и диагностическом значении системы глутатиона для оценки цитотоксического действия противоопухолевых препаратов рекомендуется использовать в процессе дополнительного образования врачей-специалистов в области клинической лабораторной диагностики, токсикологии, онкологии и др.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Глушков С.И. Состояние системы глутатиона в тканях различных органов при остром отравлении циклофосфаном / С.И. Глушков, Кашуро В.А., Т.М. Новикова // Медицинские аспекты радиационной и химической безопасности: Материалы Российской научной конференции, г. Санкт-Петербург, 11-12 октября 2001 г. - СПб: ВМА, 2001. - С. 296-298.

2. Кашуро В.А. Динамика активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в эритроцитах и тканях печени лабораторных животных при отравлениях циклофосфаном / В.А. Кашуро, А.И. Карпищенко, С.А. Куценко и др. // Тезисы докладов Всероссийской научной конференции, посвященной 110-летию кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики Военно-медицинской академии и 100-летию со дня рождения академика АМН СССР Г.Е. Владимирова, 31 января - 1 февраля 2002 г. - СПб. - 2002. - С. 35.

3. Кашуро В.А. Динамика изменений концентраций сульфгидрильных групп тканевых белков в эритроцитах и тканях печени лабораторных животных при отравлениях циклофосфаном / В.А. Кашуро, С.А. Куценко, С.И. Глушков и др. // Тезисы докладов Всероссийской научной конференции, посвященной 110-летию кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики Военно-медицинской академии и 100-летию со дня рождения академика АМН СССР Г.Е. Владимирова, 31 января - 1 февраля 2002 г. - СПб. - 2002. - С. 36.

4. Кашуро В.А. Динамика концентрации восстановленного глутатиона в эритроцитах и тканях печени лабораторных животных при отравлениях циклофосфаном / В.А. Кашуро, А.И. Карпищенко, С.А. Куценко и др. // Тезисы докладов Всероссийской научной конференции, посвященной 110-летию кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики Военно-медицинской академии и 100-летию со дня рождения академика АМН СССР Г.Е. Владимирова, 31 января - 1 февраля 2002 г. - СПб. - 2002. - С. 34-35.

5. Смирнов В.В. Процессы перекисного окисления липидов в тканях щитовидной железы при узловом эутиреоидном зобе и раке щитовидной железы /В.В. Смирнов, А.И. Карпищенко, Н.Е. Кушлинский и др. // Тезисы докладов Всероссийской научной конференции, посвященной 110-летию кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики Военно-медицинской академии и 100-летию со дня рождения академика АМН СССР Г.Е. Владимирова, 31 января - 1 февраля 2002 г. - СПб. - 2002. - С. 81.

6. Смирнов В.В. Глутатион-зависимая антиоксидантная система в тканях щитовидной железы при узловом эутиреоидном зобе и раке щитовидной железы СПб / В.В. Смирнов, А.И. Карпищенко, Н.Е. Кушлинский и др. // Тезисы докладов Всероссийской научной конференции, посвященной 110-летию кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики Военно-медицинской академии и 100-летию со дня рождения академика АМН СССР Г.Е. Владимирова, 31 января - 1 февраля 2002 г. - СПб. - 2002. - С. 81-82.

7. Аксенов В.В. Состояние системы глутатиона в тканях сердца при острых отравлениях доксорубицином / В.В. Аксенов, А.А. Новик, С.И. Глушков и др. // Тезисы научных докладов III съезда биохимического общества, 26 июня - 1 июля 2002 г. - СПб. - 2002. - С. 132.

8. Кашуро В.А. Состояние системы глутатиона в тканях лабораторных животных при острых отравлениях циклофосфаном / В.А Кашуро, А.И. Карпищенко, С.А.Куценко и др. // Тезисы научных докладов III съезда биохимического общества, 26 июня - 1 июля 2002 г. - СПб. - 2002. - С. 171- 172.

9. Смирнов В.В. Определение показателей глутатион-зависимой антиоксидантной системы в тканях щитовидной железы при узловом эутиреоидном зобе и раке щитовидной железы / В.В. Смирнов, В.В. А.И. Карпищенко, Н.Е. Кушлинский и др. // Клиническая лабораторная диагностика. - 2002. - № 10. - С. 8-9.

10. Глушков С.И. Нарушения состояния системы глутатиона как основа реализации цитотоксических эффектов действия ксенобиотиков / С.И. Глушков, С.А. Куценко, А.И. Карпищенко и др. // Медико-гигиенические аспекты обеспечения работ с особо опасными химическими веществами /Труды научно-практической конференции, посвященной 40-летию НИИГПЭЧ. - СПб. - 2002. - С. 228-229.

11 . Кашуро В.А. Экспериментальная оценка возможности использования показателей системы глутатиона в лабораторной диагностике отравлений ипритами / В.А. Кашуро, С.И. Глушков, В.В. Аксенов и др. // Медико-гигиенические аспекты обеспечения работ с особо опасными химическими веществами /Труды научно-практической конференции, посвященной 40-летию НИИГПЭЧ. - СПб. - 2002. - С. 229-230.

12. Кашуро В.А. Изучение влияния препарата «Трисан» на систему глутатиона при остром отравлении циклофосфаном / В.А. Кашуро, В.В. Пастушенков, А.И. Карпищенко и др. // Материалы Всеармейской Научно-практической конференции «Терапевтическая помощь в экстремальных ситуациях». - СПб.- 2003. - С. 227-228.

13. Глушков С.И. Влияние сукцинатсодержащего препарата Ремаксол на состояние цитопротекторной системы глутатиона в тканях печени при острых отравлениях циклофосфаном / С.И. Глушков, В.А. Кашуро, С.А.Куценко и др. // Тезисы докладов X Российского национального конгресса «Человек и лекарство», 7-11 апреля 2003 г. - М. - 2003. - С. 613.

14. Глушков С.И. Влияние сукцинатсодержащего препарата Ремаксол на состояние цитопротекторной системы глутатиона в тканях почек при острых отравлениях циклофосфаном / С.И. Глушков, В.А. Кашуро, С.А. Куценко и др. // Тезисы докладов X Российского национального конгресса «Человек и лекарство», 7-11 апреля 2003 г. - М. - 2003. - С. 613-614.

15. Глушков С.И.. Состояние системы глутатиона в тканях печени крыс при острых отравлениях циклофосфаном / С.И. Глушков, С.А. Куценко, В.А Кашуро и др. // Токсикологический вестник. - 2003. - №.4. - С. 25-30.

16. Глушков С.И. Изучение системы глутатиона при острых отравлениях циклофосфаном и диалкил-производным фосфорилтиохолина - перспективный метод оценки состояния здоровья персонала объектов уничтожения химического оружия / С.И. Глушков, С.А. Куценко, В.А. Кашуро и др. // «Медицинские и биологические проблемы, связанные с уничтожением химического оружия». Тезисы докладов международного симпозиума. Волгоград 26-28 августа 2003 года. - Волгоград. - 2003. - С. 205-206.

17. Глушков С.И. Фармакологическая коррекция системы глутатиона - перспективное направление профилактики и терапии острых и повторных отравлений нейро- и цитотоксикантами / С.И. Глушков, В.А. Кашуро, С.А. Куценко и др. // «Медицинские и биологические проблемы, связанные с уничтожением химического оружия». Тезисы докладов международного симпозиума. Волгоград 26-28 августа 2003 года. - Волгоград. - 2003. - С. 215.

18. Глушков С.И. Система глутатиона как перспективное направление изучения цитотоксических эффектов действия ксенобиотиков / С.И. Глушков, С.А. Куценко, Т.М. Новикова и др. // Тезисы докладов 2-го съезда токсикологов России. - М: Российский регистр потенциально опасных химических и биологических веществ Минздрава России, 2003. - С. 77-78.

19. Glushkov S.I. Research into glutathione system at acute intoxications by cyclophosphane and phosphorylthiocholine derivatives. A promising method for health state evaluathion of personnel of chemical weapon destruction facilities / S.A. Kutsenko, S.I. Glushkov, V.A. Kashuro et al. // Medical and Biological Aspects of Chemical Weapons Stockpile Demilitarization. Internatonal Symposium Proceedings. Volgograd, August 26-28, 2003. - Volgograd. - P. 58-59.

20. Glushkov S.I. Pharmacological correction of glutathione system as a promising aim of prophylaxis and therapy of acute and repeated poisonings by neuro- and cytotoxicants / S.I. Glushkov, V.A. Kashuro, S.A. Kutsenko et al. // Medical and Biological Aspects of Chemical Weapons Stockpile Demilitarization. Internatonal Symposium Proceedings. Volgograd, August 26-28, 2003. - Volgograd. - P. 67.

21. Кашуро В.А. Показатели перекисного окисления липидов при острых отравлениях циклофосфаном / В.А. Кашуро, С.И. Глушков, В.В. Смирнов // Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты. - СПб., 2004. - С. 100-101.

22. Глушков С.И.. Исследование эффективности антиоксидантных препаратов в качестве средств медицинской защиты при отравлениях алкилирующими агентами / С.И. Глушков, В.А Кашуро, В.В.Смирнов // Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты. - СПб., 2004. - С. 351-352.

23. Глушков С.И.. Синтетические производные глутатиона - новый подход к поиску антидотов резорбтивного действия ипритов/ С.И. Глушков, В.А Кашуро, Т.М. Новикова и др. // Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты. - СПб., 2004. - С. 350-351.

24. Глушков С.И. Влияние препарата «Мексидол» на содержание в тканях сердца лабораторных животных малонового диальдегида и глутатиона при повторной интоксикации доксорубицином в дозе 0,3 LD₅₀ / С.И. Глушков, С.А. Куценко, В.В. Аксенов и др. // Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты. - СПб., 2004. - С. 358-359.

25. Глушков С.И. Коррекция цитотоксических эффектов действия циклофосфана и состояния системы глутатиона / С.И. Глушков, В.А. Кашуро, С.А. Куценко и др. // Вестник СПГМА им. И.И. Мечникова. - 2004. - №3. - С. 62- 67.

26. Glushkov S.I. The alteration in the glutathione system by the influence of cyclophosphamide and the drugs of pharmacological correction / A.I. Karpischenko, S.I. Glushkov, V.A. Kashuro et al. // XXXVI World Congress on Military Medicine. - St. Petersburg, 2005. - P. 224.

27. Кашуро В.А. Cостояние системы глутатиона и перекисного окисления липидов в тканях печени и почек при острых отравлениях циклофосфаном / В.А. Кашуро, Карпищенко А.И., Глушков С.И. и др. // Нефрология.- 2006.- №2.- С. 81-85.

28. Кашуро В.А. Cостояние системы глутатиона в тканях паренхиматозных органов лабораторных животных при повторном введении циклофосфана / В.А. Кашуро, С.И. Глушков, А.И. Карпищенко, Т.М. Новикова // Нефрология.- 2006.- №4.- С. 82-86.

29. Кашуро В.А. Гепаторпротекторная активность мексидола при острых интоксикациях циклофосфаном / В.А. Кашуро, С.И. Глушков, А.И. Карпищенко и др. // Вестник СПГМА им. И.И. Мечникова. - 2007. - №1 (8). - С. 136- 139.

30. Кашуро В.А. Активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в тканях экспериментальных животных при повторном введении циклофосфана / В.А. Кашуро, Л.В. Минаева, С.И. Глушков // Актуальные вопросы повышения работоспособности и восстановления здоровья военнослужащих и гражданского населения в условиях чрезвычайных ситуаций: Материалы Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 40-летию НИО обитаемости и профессионального отбора ВМедА. - СПб, 2007. - С. 205- 206.

31. Кашуро В.А. Активность глутатионпероксидазы в тканях экспериментальных животных при повторном введении циклофосфана / В.А. Кашуро, Л.В. Минаева, С.И. Глушков // Актуальные вопросы повышения работоспособности и восстановления здоровья военнослужащих и гражданского населения в условиях чрезвычайных ситуаций: Материалы Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 40-летию НИО обитаемости и профессионального отбора ВМедА. - СПб, 2007. - С. 205- 206.

32. Кашуро В.А. Активность глутатионредуктазы в тканях экспериментальных животных при повторных введениях циклофосфана / В.А. Кашуро, Л.В. Минаева, С.И. Глушков и др. // Актуальные проблемы химической безопасности в Российской Федерации. - СПб, 2007. - С. 246.

33. Кашуро В.А. Изменения концентрации малонового диальдегида в тканях экспериментальных животных при повторных введениях циклофосфана / В.А. Кашуро, Л.В. Минаева, С.И. Глушков и др. // Актуальные проблемы химической безопасности в Российской Федерации. - СПб, 2007. - С. 247.

34. Кашуро В.А. Изучение влияния препарата трисан на систему глутатиона при повторных введениях циклофосфана / В.А. Кашуро, В.Л. Пастушенков, Л.В. Минаева и др. // Проблемы диагностики и коррекции эндоэкологического статуса в современных условиях: 3-я международная научная конференция Донозология - 2007. - СПб,2007. - С. 97.

35. Кашуро В.А. Изменение концентрации восстановленного глутатиона в эритроцитах при химиотерапии / В.А.Кашуро, К.А. Федоров, С.И. Глушков, и др. // Сборник трудов совместного заседания секции №4 «Токсикология, гигиена, профпатология, индикация, дегазация при работе с высокотоксичными веществами» Проблемной комиссии ФМБА России, Санкт-Петербургского отделения Всероссийского общества токсикологов и Ученого Совета ФГУП «НИИГПЭЧ» ФМБА России.16 ноября 2007 г. - СПб. - 2007. - С.252- 253.

36. Шилов Ю.В. Токсические эффекты циклофосфана и подходы к их фармакологической коррекции / Ю.В. Шилов, В.А. Кашуро, Л.В. Минаева и др. // Вестник Российской Военно-медицинской академии. - 2008. - №3 (23). - С. 68- 72.

37. Кашуро В.А Токсикомодифицирующее действие глутоксима при применении циклофосфана / В.А. Кашуро, В.Г. Антонов, Л.В. Минаева, С.И. Глушков // Актуальные проблемы лабораторной диагностики: Всероссийская научно-практическая конференция, посвященная 115-летию кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики Военно-медицинской академии, Санкт-Петербург, 27-28 марта 2008 г. - СПб. - 2008. - С. 29.

38. Лютов В.В. Хемопротективный эффект N-ацетилцистеина против циклофосфан-индуцированного повреждения тканей почек экспериментальных животных / В.В. Лютов, В.А. Кашуро, В.В. Аксенов // Вопросы нефрологии в практике терапевта и эндокринолога. - СПб., 2008. - С. 52.

39. Грашин Р.А. Активность про- и антиоксидантных процессов в культурах кератиноцитов больных псориазом / Р.А. Грашин, В.В. Барбинов, В.Г. Антонов и др. // Вестник Российской Военно-медицинской академии. - 2008. - №4 (24). - С. 115- 125.

40. Кашуро В.А. Изменение концентрации малонового диальдегида в тканях экспериментальных животных с перевитой лимфосаркомой Плиса в условиях повторного введения циклофосфана / В.А. Кашуро // Вестник Российской Военно-медицинской академии. - 2009. - №1 (25). - С. 481- 482.

Размещено на Allbest.ru