Штамм "Орлов-Д" для получения живой аттенуированной вакцины против краснухи

Согласно СП 3.3.2.561 -96, (п. 5.1.7.) в опыте использованы препараты сравнения однонаправленного действия: краснушная вакцина Rudivax (производства Санофи-Пастер, Франция), действующее начало препарата - вакцинный штамм Wistar RA27/3 и отечественный вакцинный штамм вируса краснухи «Орлов-В».

Исследование штамма «Орлов-Д» включало определение: специфической безопасности (определение остаточной нейровирулентности, контагиозности); специфической активности (определение иммуногенной и протективной активности); иммунологической безопасности.

Для контроля остаточной нейровирулентности в опыте были использованы 10 серонегативных к краснухе обезьян, каждая из которых была заражена одним из трех препаратов: штаммом «Орлов-Д» - обезьяны №№ 33639, 33551, 33669, 33211; № 33421; штаммом «Орлов-В» - обезьяны №№ 33364, 33213, 33736, 33830; штаммом Wistar RA27/3 (в составе вакцины Rudivax) - обезьяна № 33776. Заражение, вскрытие, морфологическое и гистологическое исследование органов и тканей обезьян проведено проф. Л.А. Яковлевой.

Исследуемый материал вводили интрацеребрально в область зрительных бугров обоих полушарий головного мозга. По окончании периода клинического наблюдения у животных брали образцы крови для определения антител к вирусу краснухи, после чего животных умерщвляли под глубоким гексеналовым наркозом, производили аутопсию и гистологическое исследование тканей ЦНС, региональных лимфатических узлов, легкого, печени, селезенки

На протяжении периода клинического наблюдения у инфицированных животных ни в одном случае не отмечали пареза конечностей, нарушения типичных движений (прыжки, лазанье, захват предметов), координации; не отмечали также патологических реакций на внешние раздражители, каких-либо других нарушений со стороны ЦНС, нарушения аппетита и сна. При пальпировании мышц конечностей в спокойном состоянии и при сгибании-разгибании ни в одном случае не отмечали нарушения мышечного тонуса. Тремор и гиперкинезы не регистрировали.

Морфологическое исследование. На вскрытии мозговых оболочек, а также ткани головного и спинного мозга с поверхности и на разрезе, как и при осмотре серозных полостей и внутренних органов грудной и брюшной полости, никаких патологических изменений обнаружено не было. Также не было обнаружено заметных следов в области трепанации черепа, за исключением одного случая (макак № 33830), в котором в теменной области правой половины имелось припаивание оболочек мозга к внутреннему апоневрозу черепа.

Гистологическое исследование включало в себя исследование тканей: головного мозга - передняя центральная извилина, задняя центральная извилина, зрительный бугор, продолговатый мозг; спинного мозга - шейное и поясничное утолщение. А также лимфатических узлов: затылочных задне- шейных, подчелюстных. Тканей легкого, печени, селезенки.

В тканях головного и спинного мозга патологических изменений в нейронах и глиальных клетках в исследованных областях выявлено не было. Нервные клетки имели четкие контуры, светлое пузырьковидное ядро с крупной центрально расположенной нуклеолой и отчетливые глыбки нисслевского вещества в цитоплазме. В нервной ткани головного и спинного мозга, а также в их оболочках каких-либо признаков воспаления или гиперемии не обнаружено. У половины животных (№№ 33830, 33551, 33211, 33639, 33736) были обнаружены признаки умеренной активации подчелюстных лимфатических узлов, а также ткани селезенки (№№ 33669, 33830, 33551, 33213, 33736), в основном в В-клеточном звене (увеличение размеров и количества лимфоидных фолликулов; преобладание бластных элементов - центробластов и иммунобластов и увеличение количества митозов). В тканях печени и легкого ни в одном случае никаких патологических изменений не обнаружено.

При исследовании сывороток крови обезьян в РТГА с 4 ГАЕ краснушного антигенного диагностикума было установлено, что у всех обезьян, зараженных вакцинными штаммами вируса краснухи, через 30 суток после инфицирования, определялись вирусспецифические антитела в титрах от 1:160 до 1 : 1280.

Исходя из критериев, изложенных в нормативном документе, а именно: отсутствие у всех подопытных животных клинических проявлений поражения ЦНС; отсутствие вирусспецифических поражений нейронов и глиальных клеток при гистологическом исследовании тканей головного и спинного мозга; выработка вирусспецифических АТ не менее чем у 80% интрацеребрально зараженных животных, и на основании полученных результатов, можно сделать заключение об отсутствии остаточной нейровирулентности штамма вируса краснухи «Орлов-Д». Аналогичные результаты получены в отношении препаратов сравнения. Образование вирусспецифических антител у 100% интрацеребрально зараженных животных, подтверждает факт их инфицирования штаммами вируса краснухи.

Иммуногенную активность штамма «Орлов-Д» оценивали по двум показателям: количеству сероконверсий и напряженности поствакцинального иммунитета в ответ на однократную иммунизацию вакцинным препаратом в дозе, составляющей не менее одной прививочной дозы для человека, то есть не менее 1000 ТЦД50. Параллельно проводили контроль контагиозных свойств исследуемого вируса.

В опыте были использованы 23 серонегативных к краснухе обезьяны, разделенные на три группы, каждая из которых была иммунизирована: препаратом из штамма «Орлов-Д» - 12 обезьян (№№ 34411, 36481, 34455, 34766, 36157, 34654, 35108, 35095, 34815, 34057; 32834, 32937); препаратом из штамма «Орлов-В» - 4 обезьяны (№№ 33385, 33309, 32923, 33238); вакциной Rudivax (Wistar RA27/3) - 3 обезьяны ( №№ 33719, 33730, 34469). Для контроля контагиозности штамма «Орлов-Д» были использованы 3 серонегативные обезьяны, каждая из которых на протяжении 28 суток наблюдения находилась в одной клетке с привитым животным.

В ходе эксперимента установлено, что однократная иммунизация сопровождалась 100% сероконверсией. В то же время, по окончании периода наблюдения (28 суток) в сыворотке крови контактных животных специфические антитела не определялись, что свидетельствует об утрате контагиозных свойств штаммом «Орлов-Д». Напряженность иммунитета во всех трех группах привитых животных характеризовалась высокими показателями: титры антигемагглютининов регистрировали на уровне 1: 160 и выше. При этом СГТ АТ во всех трех группах привитых практически совпадала (таблица 6).

Таблица 6 Показатели напряженности иммунитета у животных, привитых вакцинными штаммами вируса краснухи

У 5 привитых животных удалось оценить поствакцинальный иммунитет спустя 4 года после иммунизации (период наблюдения). Уровень антигемаггютининов составлял, в основном, 1: 80, (в одном случае 1:40) и существенно превышал защитный титр антител (1 : 20).

Протективную активность определяли в группе из 13 животных, иммунизированных: штаммом «Орлов-Д» - 8 макаков (№№ 34411, 36481, 34455, 34815, 34654, 35108, 35095, 36157); штаммом «Орлов-В» - 2 макака (№№ 33385, 33309); штаммом Wistar RA 27/3 (в составе вакцины Rudivax) - 3 макака (№№ 33719, 33730, 34469). Группу контроля составили 6 серонегативных к краснухе животных, которым патогенный штамм вводили по той же схеме, что и иммунизированным обезьянам. Поскольку низшие приматы переносят краснушную инфекцию в бессимптомной форме, наличие инфекционного процесса определяли по развитию у зараженных животных вирусемии, которую регистрировали в ПЦР в интервале от 4 до 24 суток после инфицирования. Результаты представлены в таблице 7 и свидетельствуют о том, что иммунизация как штаммом «Орлов-Д», так и препаратами сравнения защитила животных от проникновения вируса в кровяное русло; в то время как в контрольной группе обезьян в ответ на заражение патогенным штаммом “Лебедев” в 100% случаев в период с 4-7 по 17-20 сутки регистрировалась вирусемия, что свидетельствует о развитии краснушной инфекции.

Таблица 7 Выявление РНК вируса краснухи (в ПЦР) в сыворотке крови обезьян после заражения патогенным штаммом вируса

* « + » более 1000 копий /мл; « ± » 100 - 1000 копий /мл; « - » менее 100 копий /мл

** - не иммунизировали

В целом, полученные результаты характеризуют штамм «Орлов-Д» как аттенуированный вирус с высокой специфической активностью, не менее выраженной, чем у препаратов сравнения - вакцинных штаммов Wistar RА27/3 и «Орлов-В».

Определение иммунологической безопасности штамма проводили, контролируя изменения в системе иммунокомпетентных клеток иммунизированных животных. Согласно нормативному документу, неспецифическое влияние вакцинного препарата на иммунную систему должно удовлетворять следующим требованиям:

- продолжительность изменений иммунологических показателей не должна превышать 45 дней с момента введения вакцины;

- изменение величины показателя численности и функциональной активности иммунокомпетентных клеток не должны отличаться более чем в 1,5 раза от исходных показателей и аналогичного показателя в группе, получавшей плацебо и обследованной в те же сроки (СП 3.3.2.561 - 96, п. 12.2.4.).

Влияние иммунизации на факторы клеточного иммунитета и уровень ИНФ изучали в группе из 9 животных: 5 - привитых штаммом «Орлов-Д» (№№ 34455, 35108, 35095, 34411, 36157); 2 - штаммом Wistar RA 27/3 (№№ 34469, 34467); 2 - контрольные обезьяны: №№ 36481, 34766 (группа плацебо).

Количественные характеристики CD-антигенов (АГ) подсчитывали до иммунизации, через 7, 14, 28 и 45 суток после введения препаратов. Значительные колебания исходных величин каждой субпопуляции лимфоцитов у опытных и контрольных животных не позволили провести статистическую обработку результатов. Тем не менее, спустя 7 - 28 суток после иммунизации у всех привитых животных определилась тенденция к активации натуральных киллеров (CD-16); маркеров В-клеточного звена иммунитета (CD-19, CD-22), ответственных за выработку специфических антител; маркеров молекул ГКГ (HLA-DR). Так, в отдельных случаях количество натуральных киллеров (CD-16) повышалось в 3 - 4 раза (№№ 34467, 34469), количество CD-19 АГ превышало исходные показатели в 8 раз (№ 35095), CD-22 - в 10 раз (№ 34411), HLA-DR - в 4-6 раз (№№ 34455, 34411, 34467, 34469). Что касается маркеров молекул Т-клеточного звена иммунитета, то первичная встреча с вирусным антигеном не оказала существенного влияния на уровень Т-лимфоцитов, но привела, по-видимому, к премированию Т-клеток, о чем можно судить по активации маркеров молекул ГКГ (HLA-DR), принимающих участие в этом процессе. Через 45 суток после иммунизации количественные показатели активности иммунокомпетентных клеток возвращались к исходным величинам и не отличались от них более чем в 1,5 раза. ИФН-статус определяли регистрацией уровня б-ИФН, г- ИФН. Уровень цитокинов контролировали до иммунизации, через 14 и 28 суток после нее. Через 14 суток после вакцинации у всех иммунизированных животных, включая обезьян, получивших препарат сравнения, отмечали не продолжительное 4-8- кратное снижении уровня б- и г-ИФН. Исходный их уровень восстанавливался к 28 суткам после введения препарата.

Иммунологические сдвиги в системе врожденного иммунитета в контрольной группе не иммунизированных обезьян не наблюдались.

В целом, результаты свидетельствуют о иммунологической безопасности штамма «Орлов-Д».

Таким образом, доклиническое изучение полученного в ходе работы аттенуированного вируса краснухи показало (в пределах использованных методов), что по отсутствию остаточной нейровирулентности для приматов; высокой специфической активности, отсутствию контагиозности; иммунологической безопасности, не уступающим по вышеозначенным критериям препаратам сравнения, штамм «Орлов-Д» пригоден для получения на его основе вакцины против краснухи.

ВЫВОДЫ

1. Сравнительный филогенетический анализ современных изолятов вируса краснухи, циркулирующих на территории Пермского края, вакцинных штаммов «Орлов-В», Wistar RA27/3 и четырех штаммов вируса краснухи, выделенных на других территориях России в 1967- 97 г.г. показал, что российские штаммы относятся к одной генетической группе и идентифицированы как вирусы генотипа 2с; вакцинный штамм Wistar RA27/3 относится к вирусам Rubella 1 генетической линии. Установлено более тесное генетическое родство между российскими изолятами и штаммом «Орлов-В» по отношению к штамму Wistar RA27/3: индекс генетической близости составляет 0,74 и 0,99, соответственно.

2. Массовая иммунизация против краснухи детей 1-2 года жизни, проведенная на территории Пермского края вакциной Rudivax (действующее начало - вакцинный штамм Wistar RA27/3) оказала влияние на биологический фактор эпидемического процесса. Создание коллективного иммунитета в группе детей младшего возраста при пороге привитости, равном 460,0 на 1000 детского населения в течение четырех лет применения вакцины вызвало достоверное увеличение генетической дивергенции изолятов вируса краснухи (коэффициент корреляции r = 0,76; t = 4,58; р<0,01) с 1,15% (2000 - 2002 гг.) до 3,14 % ( 2004 - 2005 гг.) (р<005).

3. Диплоидные линии клеток фибробластов легкого, почек, кожно-мышечного лоскута эмбриона человека обеспечивают репродукцию вируса краснухи. Чувствительность диплоидной линии клеток кожно-мышечного лоскута эмбриона человека «М-22» к вакцинному штамму «Орлов-В» соответствует чувствительности первичной культуры клеток ППК, к которой адаптирован указанный штамм. Средние показатели инфекционной активности вируса в первичной (ППК) и диплоидной («М-22») культурах клеток составляют 3,9 lg ТЦД50/мл и 4,2 ТЦД50/мл, соответственно.

4. Проведением одного дополнительного пассажа штамма «Орлов-В» в диплоидной линии клеток «М-22» получен аттенуированный штамм вируса краснухи «Орлов-Д». Репродукция штамма «Орлов-Д» не требует адаптации вируса к данному тканевому субстрату: инфекционную активность, равную 4,0 - 4,2 lg ТЦД50/мл, стабильный rct40 ± фенотип регистрировали с первого по десятый пассаж вируса в указанной культуре клеток.

5. Сравнительный генетический анализ штаммов Wistar RA27/3 и «Орлов-Д» выявил, что доля нуклеотидных замен в структуре гена Е1 исследованных штаммов составляет 6,7 %. При этом 34,3 % из них является значимыми, обуславливают различия в структуре поверхностного глико-протеина Е1. Наиболее важным различием между штаммами является замена в положении 208 аминокислоты тирозин (штамм «Орлов-Д») на гистидин (штамм Wistar RA 27/3) в высоко консервативном участке молекулы Е1.

6. Диплоидная линия клеток «М-22» - тканевой субстрат, не требующий специальных условий культивирования, устойчива к криоконсервации; характеризуется стабильной чувствительностью к вирусу краснухи на протяжении длительного периода жизнедеятельности клеток в фазе их активного роста ( 20 - 35 пассаж линии клеток). Линия «М-22» поддерживает также репродукцию вакцинных штаммов вируса кори Л-16 (4,0-6,0 lg ТЦД50/0,5 мл) и вируса эпидемического паротита Л-3 (4,0 -5,0 lg ТЦД50/0,5 мл).

7. Репродукция штамма «Орлов-Д» в диплоидной линии клеток «М-22» не сопровождается цитодеструктивным действием вируса на клетки, характеризуется более интенсивной динамикой формирования инфекционных вирусных частиц по отношению к его репродукции в первичной культуре клеток ППК. Указанные особенности позволяют получить удвоенный объем вакцинного препарата с более низким содержанием белка (100 - 230 мкг/мл) по сравнению с препаратом, полученном на первичных клетках ППК (500-780 мкг/мл) при равном количестве инфицированных клеток. Лиофилизированный штамм «Орлов-Д» характеризуется стабильной биологической активностью (3,4 - 3,8 lg ТЦД50/0,5 мл) в условиях хранения при температуре - 20о С на протяжении 10 лет наблюдения. Это обстоятельство, а также наличие банка посевных клеток «М - 22» может обеспечить многолетнюю потребность в вакцине против краснухи на территории РФ.

8. Снижение реактогенности штамма «Орлов» с 30% до 2% клинических реакций средней тяжести в процессе аттенуации вируса в первичной культуре клеток ППК сопровождается заменой в положении 57 белка Е1 аминокислоты валин на изолейцин. Штамм «Орлов-Д» характеризуются стабильностью структуры гена Е1 при культивировании в культуре клеток «М-22» на протяжении минимум 5 пассажей вируса в указанной линии клеток.

9. В доклиническом изучении на обезьянах макака-резус установлено, что штамм «Орлов-Д не обладает остаточной нейровирулентностью, контагиозностью и по параметрам специфической безопасности соответствует требованиям, предъявляемым к штаммам для живых противовирусных вакцин.

10. Однократное введение серонегативным к краснухе обезьянам макака-резус препарата из штамма «Орлов-Д» с инфекционной активностью 1000 ТЦД 50/0,5 мл вызывает 100% сероконверсии и формирование вирусспецифических антител в высоких титрах (в РТГА 1 : 160 - 1 : 1280 ). Препарат из штамма «Орлов-Д» обладает протективностью, защищает иммунизированных животных от заражения патогенным вирусом краснухи (штамм «Лебедев»); характеризуется иммунологической безопасностью: продолжительность изменения активности иммунокомпетентных клеток и интерферонового статуса под влиянием вакцинации не превышает 45 суток после введения препарата. По изученным параметрам штамм «Орлов-Д» не уступает препаратам сравнения - вакцинным штаммам вируса краснухи «Орлов-В» и Wistar RA27/3.

11. Полученные результаты свидетельствуют о возможности получения живой аттенуированной вакцины против краснухи на основе штамма «Орлов-Д» и диплоидной линии клеток «М- 22» и целесообразности ее применения на территории с эндемичной циркуляцией вируса краснухи генотипа 2с.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Вакцинопрофилактика краснухи/ И.Н. Лаврентьева // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1996. - № 1. - С. 37 - 45.

2. Этиология и профилактика краснухи / И. Н. Лаврентьева // Краснуха. Синдром Врожденной краснухи. Информационный сборник Pasteur Merieux Connaught. - М. - СПб., 1997. - С. 5 - 17.

3. Вакцинопрофилактика краснухи. Анализ зарубежного опыта / И.Н. Лаврентьева // Матер. VII съезда всероссийского науч.-практ. общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. - М., 1997. - С. 104 -105.

4.Усовершенствование методов определения биологической активности вирусов кори, паротита и краснухи в моно- и ассоциированных препаратах / И.Н. Лаврентьева, Л.Ю. Тарос, Л.П. Сухобаевская, Е.А. Николаева // Матер.VII Съезда всероссийского науч.-практ. общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов - М.,1997.- С. 105 - 106.

5. Характеристика альтернативной клеточной культуры для производства моно- и ассоциированных вакцин против детских вирусных инфекций / И.Н. Лаврентьева, Л.П. Сухобаевская, Л.Ю. Тарос, Н.Б. Румель // Матер. VII съезда всероссийского науч.-практ.общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. - М.,1997. - С. 106 - 107.

6. Краснуха в России: стратегия и тактика вакцинации / В.В. Семериков, Л.И Мельчукова, А.Я. Колобов, В.Ф. Попов, И.Н. Лаврентьева // Матер. VII съезда всероссийского науч.-практ. общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. - М., 1997. - С. 139 - 140.

7. Эпидемиологический надзор за краснухой в Санкт-Петербурге /А.А. Соболевская, О. В. Парков, И.Н. Лаврентьева, В, П. Рыбков, С.С. Вашукова / Идеи Пастера в борьбе с инфекциями: Матер. II Междунар. конфер. - СПб., 1998. - С. 25.

8. Изучение чувствительности диплоидных линий клеток человека к вирусам кори, паротита и краснухи для совершенствования технологии производства детских противовирусных вакцин / И.Н. Лаврентьева, Л.П. Сухобаевская, Л.Ю. Тарос, Н.Б. Румель, Л.Ф. Литвинчук //Идеи Пастера в борьбе с инфекциями: матер. II Междунар. конфер. - СПб., 1998. - С. 49.

9. Разработка отечественной вакцины против краснухи / И.Н. Лаврентьева // вирусные инфекции на пороге XXI века: эпидемиология и профилактика: Матер. науч. конфер. с международ. участием, посвященной 200-летию ВМА. - СПб., 1999. - С. 223.

10. Вакцинопрофилактика краснухи. Стратегия и тактика/ И.Н. Лаврентьева, В.В. Семериков // Вакцинопрофилактика в XXI веке: матер. науч-прак. конф. Западно- Уральского региона. - Пермь, 2000 г. - С. 35 - 37.

11. Rubella in Russian Federation epidemiological feature and control measures to prevent the Congenetal rubella syndrome / V.V. Semericov, I.N. Lavrentyeva, V.F. Popov // Epidemiol. infect. - 2000. - v. 125. - 359 - 366 p.

12. Эпидемиологический надзор и контроль за краснушной инфекцией / В.В. Семериков, И.Н. Лаврентьева // Достижения отечественной эпидемиологии в XX веке. Взгляд в будущее: матер. науч. конференции, посвященной 80-летию академика В.Д.Белякова. - СПб., 2001. - С. 92 - 93.

13. Краснуха / В.В Семериков, И.Н. Лаврентьева, В.К. Таточенко, Л.Л. Нисевич, И.В. Фельдблюм. - Пермь - СПб- М., 2002. - 175 с.

14. О перспективах развития вакцинопрофилактики краснухи /В.В. Семериков, И.Н. Лаврентьева, И.В. Фельдблюм // Ликвидация и элиминация инфекционных болезней - прогресс и проблемы: Матер. 3-ей международ. конф., посвященной 80-летию института имени Пастера. - СПб., 2003 г. - С. 34.

15. Штаммы вируса краснухи для живой аттенуированной вакцины / И.Н. Лаврентьева, Л.П. Сухобаевская, В.З. Агрба, Л.А. Яковлева, Ю.А. Радюкевич, А.Б. Жебрун // Эпидемиология и вакцинопрофилактика.- 2003. - № 4.- С. 7 - 10.

16. Краснуха: Направления эпидемиологического надзора и профилактики/ В.В. Семериков, И.Н. Лаврентьева, И.В. Фельдблюм // Актуальные вопросы вакцинно-сывороточного дела в XXI веке: Матер. Всерос. науч. конф., посвященной 105-летию Пермского НПО «Биомед».- Пермь., 2003 г.- С.73 - 76.

17. Результаты доклинического изучения вариантов вакцинного штамма вируса краснухи «Орлов» для получения живой аттенуированной вакцины /

И. Н. Лаврентьева, Л.А. Яковлева, В.В. Семериков // Пермский медицинский журнал. - 2005. - № 1. - С. 78 - 81.

18. Актуальные вопросы и перспективы специфической профилактики краснухи в России/ И.Н. Лаврентьева, Л.П. Сухобаевская, А.Б. Жебрун // Теоретические и практические аспекты элиминации кори: сб. научных трудов к 145-летию со дня рождения Г.Н. Габричевского. - М., 2005. - С. 61 - 65.

19. Обезьяны макака-резус как модель для доклинического изучения вакцинных штаммов вируса краснухи/ И.Н. Лаврентьева, А.Б. Жебрун, В.З. Агрба, Л.А. Яковлева // Перспективные направления использования лабораторных приматов в медико-биологических исследованиях: Матер. Всерос. науч. конф. - Сочи-Адлер, 2006. - С. 38 - 43.

20. Доклиническое изучение вариантов вакцинного штамма вируса краснухи «Орлов» / И.Н. Лаврентьева, Л.П. Сухобаевская, В.З. Агрба, Л.А. Яковлева, А.В. Семенов // Биопрепараты. - 2006. - № 1. - С. 19 - 22.

21. Laboratoire des infections infantiles virales / I. Lavrenieva, L. Soukhobaevskaya, A. Antipova / Rapport D'Active des departments de recherchй en 2006 - 2007. - Institut Pasteur de Saint-Peterbourg., 2007. - P. 43 - 47.

22. Доклиническое изучение вакцинных штаммов вируса краснухи / И.Н. Лаврентьева, Л.П. Сухобаевская, В.З. Агрба, Л.А. Яковлева, А. Б. Жебрун // Итоги и перспективы обеспечения эпидемического благополучия населения российской Федерации: материалы IX съезда Всерос. научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. - М., Санэпидемиа., 2007. - Т.2. - С. 151 - 152.

23. Влияние иммунизации против краснухи на формирование специфических и неспецифических факторов иммунитета в опыте на обезьянах макака-резус / И.Н. Лаврентьева, А.Б.Жебрун, Л.П. Сухобаевская, В.З. Агрба, Д.Д. Карал-Оглы // Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии в опытах на обезьянах: Материалы междунар. научн. конф. - Сочи - Адлер, 2007. - С.86 - 94.

24. Генетическая характеристика вируса краснухи в период вакцинопрофилактики/ И. Н. Лаврентьева, В. В. Семериков// в кн.: Инфекционная заболеваемость в Северо- Западном федеральном округе России. Закономерности и особенности эпидемического процесса в современный период. - СПб., 2007. - С. 33 - 37.

25. Молекулярно-биологические механизмы аттенуации вируса краснухи / И.Н. Лаврентьева, А.В. Марков // Вестник Российской военно-медицинской академии. - 2008. - №2. - С. 112 - 113.

26. Краснуха в России: изменчивость возбудителя в период вакцинопрофилактики инфекции /И.Н. Лаврентьева, В.В. Cемериков, А.Б. Жебрун, И.В. Фельдблюм, А.В. Марков // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2008. - № 3. - С. 26 - 31.

27. Молекулярно-биологические свойства аттенуированных штаммов вируса краснухи / И.Н. Лаврентьева // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2008. - № 4. - С. 55 - 59

28. Поствакцинальный иммунитет при иммунизации против краснухи штаммом Орлов-Д» в эксперименте / И.Н. Лаврентьева, В.В. Семериков, В.З. Агрба, Л.П. Сухобаевская, А.Ю. Антипова // Пермский медицинский журнал. - Пермь. - 2008. - № 4. - С. 68 - 75.

29. Генетические маркеры аттенуации вируса краснухи / И.Н. Лаврентьева, А.В. Марков, Л.П. Сухобаевская, А.Ю. Антипова // Идеи Пастера в борьбе с инфекциями: Матер. IV-ой Междунар. конф. Института им. Пастера. - СПб., 2008. - С. 17.

30. Генетическая стабильность вируса краснухи при адаптации к новой системе клеток / И.Н. Лаврентьева, А.В. Марков, Л.П. Сухобаевская, А.М. Мартынова // Идеи Пастера в борьбе с инфекциями: Матер. IV-ой Международ. конф. Института им. Пастера. - СПб., 2008. - С. 18.

31. Изменчивость возбудителя краснухи в период вакцинопрофилактики краснушной инфекции / В.В. Семериков, И.Н. Лаврентьева, А.В. Марков // Создание и перспективы применения медицинских иммунобиологических препаратов: Материалы Всеросс. науч.-практ. Конф., посвященной 110-летию филиала ФГУП «НПО Микроген» «Пермское научно-производственное объединение «Биомед». - Пермь, 2008. - С. 46 - 48.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

BHK-21 - перевиваемая культура клеток почки сирийский хомяка

С - цитозин

G - гуанин

L - 41 - перевиваемая культура клеток костного мозга человека, больного лейкемией

RK-13 - перевиваемая культура клеток почки кролика

Vero - перевиваемая культура клеток почки зеленой мартышки

T - тимин

АГ - антиген

АТ - антитело

ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения

ВСЖ - вируссодержащая жидкость

ВБН - вирус болезни Ньюкасла

ВВС - вирус везикулярного стоматита

ВЭМ - вирус энцефаломиокардита мышей

ГИСК - Государственный институт стандартизации и контроля

ГКМВ - Государственная коллекция музейных вирусов

ДКЛЧ - диплоидные клетки фибробластов легкого эмбриона человека

ДКПЧ - диплоидные клетки фибробластов почки эмбриона человека

ИНФ - интерферон

МИ - множественность инфицирования

МИБП - медицинские иммунобиологические препараты

МУ - методические указания

НИИЭМ - научно исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии

НИИМП - научно-исследовательский институт медицинской приматологии

ОВС - объединенный вирусный сбор

П.о - пара оснований

ППК - первично-трипсинизированная культура клеток почки кролика

ПЦР - полимеразная цепная реакция

РТГА - реакция торможения гемагглютинации

СПЭВ - перевиваемая культура клеток почки свиньи

ТЦД50 - пятидесятипроцентная тканевая цитопатогенная доза

ЦНС - центральная нервная система

ЦПД - цитопатогенное действие

Размещено на Allbest.ru