Регионарные лимфатические узлы предстательной железы в норме, при венозном застое в малом тазу и в условиях физио– и фитокоррекции (анатомо-экспериментальное исследование)

Размещено на http://www.allbest.ru//

Размещено на http://www.allbest.ru//

14.00.02 - Анатомия человека

14.00.15 - патологическая анатомия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Регионарные лимфатические узлы предстательной железы в норме, при венозном застое в малом тазу и в условиях физио- и фитокоррекции (анатомо-экспериментальное исследование)

Тихонов Игорь Викторович

Новосибирск - 2008 г.

Работа выполнена в лаборатории общей патологии и физиологии лимфатической системы Научно-исследовательского института клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН (г. Новосибирск).

Научные консультанты:

доктор медицинских наук,

профессор, академик РАМН Бородин Юрий Иванович

доктор медицинских наук, профессор Асташов Вадим Васильевич

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Летягин Андрей Юрьевич

доктор медицинских наук, профессор Обухова Лидия Александровна

доктор медицинских наук Волков Александр Михайлович

Ведущая организация: Научно-исследовательский институт региональной патологии и патоморфологии СО РАМН (г. Новосибирск)

Защита состоится « » 2008 года в часов на заседании диссертационного совета Д 208.062.05 при Новосибирском государственном университете Росздрава (630091, Новосибирск, Красный проспект, 52).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Новосибирской государственной медицинской академии Росздрава.

Автореферат разослан « » 2008 года.

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор медицинских наук, профессор Волков А. В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Проблема профилактики и лечения хронического простатита (ХП) имеет, наряду с медицинской, огромное социальное значение (Буйлин В.А., 1997). В основе возникновения хронического простатита, независимо от вызвавшей его причины, лежат "микроциркуляторные" сдвиги (полнокровие и стаз) предстательной железы (Тарасов Н.И. и др., 1999; Soler J.L., et al., 1999; Комалов А.А., 2000; Lee H.J. et al., 2001; Potts J.M., 2001). Особенностью сосудистой сети, предрасполагающей к простатитам, является наличие обильных анастомозов между венами таза и предстательной железы, в результате чего венозный застой в тазу приводит к венозному стазу в ней, что препятствует быстрой ликвидации воспаления и обусловливает физиологические предпосылки для развития хронического простатита (Ломшаков А.А. 2000; Неймарк А.И., Ломшаков А.А., 2001; Mehik A, et al., 1999, 2000; Liang C.Z. et al., 2006).

Исследования, проводенные под руководством академика РАМН Ю.И.Бородина (1967, 1969; 1974, 1976), доказали, что жидкость между лимфатическим и венозным руслами перераспределяется в лимфатических узлах в двустороннем направлении, в норме до 40 % периферической лимфы переходит в венозное русло (Бородин Ю.И., Бикбулатов З.Т., 1974; Томчик Г.В., 1978; Бисенков Н.П., Прохоров Г.Г., 1980). При венозном застое часть жидкости из венозного русла переходит в эфферентное лимфатическое. Повышение лимфотока при венозном застое указывает не только на усиление лимфообразования в корнях лимфатической системы, но и на перераспределение жидкости между кровью и лимфой в лимфатических узлах, размеры и структурная организация их изменяется (Бородин Ю.И., Григорьев В.Н., 1986).

В доступной литературе нами не было обнаружено точных количественных данных о структурной организации регионарных лимфатических узлов предстательной железы в норме и в динамике ее острого циркуляторного повреждения при венозном застое в малом тазу. В связи с этим, параллельное структурное исследование регионарных лимфатических узлов предстательной железы 1-го и 2-го порядка, структуры самой железы и кровотока в окружающих ее мышечных тканях при венозном застое в малом тазу позволит выявить характерные морфофункциональные преобразования в лимфатическом регионе, зависящие от стадии развития циркуляторного повреждения.

Общепризнанным является участие лимфатической дренажной системы в ионном, водном, обмене макро- и микромолекул через интерстиций (Бородин Ю.И., и др., 1985; Бородин Ю.И., 1994; Гельфонд Н.Е. и др., 2005; Тыщенко О.Г., 2005). В литературе отсутствуют точные количественные данные о развернутом элементном статусе центральной лимфы в норме и в динамике венозного застоя, хотя как показали проведенные ранее исследования, уровень содержания микроэлементов может служить маркером тяжести метаболических повреждений и эффективности саногенных воздействий.

Сейчас все больше внимания уделяется сочетанию фармакологических препаратов и дополнительных нелекарственных средств воздействия (терапия лекарственными травами, физиотерапия). Вопросы об использовании препаратов, содержащих компоненты животного (пантогематоген) и растительного происхождения (лекарственные растения с антиоксидантными, сорбционными и простатотропным действием), для коррекции изменений структуры предстательной железы и ее регионарных лимфатических узлов при венозном застое в малом тазу изучены недостаточно, хотя известно, что введение антиоксидантов резко уменьшает интенсивность процессов перекисного окисления липидов, предотвращая развитие некроза (Владимиров Ю.А. и др., 1991; Зенков Н.К. и др., 1993), а использование энтеросорбентов позволяет снизить уровень эндогенной интоксикации в организме при различных патологических процессах (Григорьев В.Н., 1994; Левин Ю.М., 1997; Федорова А.И., 2000).

Эффект консервативных методов лечения простатита значительно возрастает, когда в терапевтический комплекс, включено одно из физиотерапевтических воздействий (Ясинский Б.В., Жиборев Б.Н., 1990; Лоран О.Б. и др., 1994; Суворов А.П. и др., 1995). В литературе отсутствуют точные количественные и функциональные данные о состоянии регионарного лимфатического русла предстательной железы при циркуляторном поражении, венозном застое в малом тазу в условиях коррекции КВЧ электромагнитным излучением, низкоэнергетической лазерной терапией, фитотерапией - биологически активной добавкой (БАД) «Фитопан М».

Разработка новых немедикаментозных способов лечения циркуляторного простатита, экспериментально-морфологическое обоснование воздействия факторов фито- и физиокоррекции как на организм в целом, так и на лимфатический регион при венозном застое в малом тазу является, на наш взгляд, актуальным с учетом полиэтиологии этого заболевания.

Цель исследования: выявить особенности морфофункциональной организации регионарных лимфатических узлов предстательной железы, центральной лимфы в норме, при экспериментальном венозном застое в малом тазу и в условиях фито- и физиотерапевтической коррекции.

Задачи исследования:

1) Изучить структурно-функциональную организацию регионарных лимфатических узлов предстательной железы, элементный статус центральной лимфы в нормальных условиях гемодинамики и в динамике экспериментального венозного застоя в малом тазу.

2) Исследовать структурно-функциональную организацию предстательной железы, ее регионарных лимфатических узлов, элементный статус центральной лимфы при венозном застое в малом тазу в условиях местного воздействия низкоэнергетическим лазерным излучением (НИЛИ)

3) Изучить структурно-функциональную организацию предстательной железы, ее регионарных лимфатических узлов, элементный статус центральной лимфы при венозном застое в малом тазу в условиях местного воздействия КВЧ- электромагнитным излучением.

4) Провести морфологическое исследование структурно-функциональной организации предстательной железы, ее регионарных лимфатических узлов предстательной железы, элементного статуса центральной лимфы при венозном застое в малом тазу в условиях энтеральной фитокоррекции (БАД к пище «Фитопан М»).

5) Изучить структурно-функциональную организацию предстательной железы, ее регионарных лимфатических узлов, элементный статус центральной лимфы при венозном застое в малом тазу в условиях сочетанной местной физио- (НИЛИ, КВЧ-излучение) и энтеральной фитотерапевтической (БАД к пище «Фитопан М») коррекции.

Научная новизна исследования. Впервые в эксперименте были получены данные об основных структурно-функциональных преобразованиях в простате (изменение паренхиматозно-стромального и артерио-венулярного соотношений), перфузии мышечной ткани стенки малого таза в период субкомпенсации (3 сутки) и в динамике развития периода компенсации (7 - 21 сутки) венозного застоя в малом тазу.

В работе впервые дана характеристика особенностей структурной организации регионарных лимфатических узлов предстательной железы (тазовые, подвздошные) на стадии субкомпенсации (3 сутки) и в динамике развития периода компенсации (7- 21 сутки) венозного застоя в анатомической области малого таза. Показано, что в условиях циркуляторной дисфункции в лимфатическом регионе предстательной железы в лимфатических узлах происходят (в зависимости от стадии компенсации венозного застоя) разнонаправленные структурные преобразования (зональность, клеточный состав), которые зависят от их анатомического расположения и степени участия в лимфатическом дренаже.

Впервые при венозном застое в анатомической области малого таза, в сравнении с группой с нормальной гемодинамикой, выявлены характерные особенности элементного статуса лимфы и крови, что может служить маркером глубины циркуляторного повреждения и эффективности саногенного лимфокоррегирующего воздействия.

Впервые проведено структурное исследование тазовых и подвздошных лимфатических узлов, предстательной железы, а также проанализировано содержание и распределение микроэлементов, при коррекции венозного застоя в анатомической области малого таза воздействием на область проекции предстательной железы электромагнитным крайневысокочастотным излучением (КВЧ) и низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением (НИЛИ). Впервые на морфологическом уровне показан эффект восстановления паренхиматозно-стромального соотношения в простате при воздействии на область проекции предстательной железы КВЧ и гелий-неоновым лазерным излучениями.

Впервые проведено структурное исследование тазовых и подвздошных лимфатических узлов, предстательной железы, а также проанализировано содержание и распределение микроэлементов при венозном застое в малом тазу в условиях применения фитокомплекса (БАД к пище «Фитопан М»). Показан простатотропный эффект, приводящий к усилению гемоциркуляции в малом тазу, транспортной функции регионарных лимфатических узлов.

Впервые показано, что сочетанное применение воздействия электромагнитного КВЧ-излучения и энтерального введения фитокомплекса (БАД к пище «Фитопан М») при венозном застое в малом тазу приводит к структурным преобразованиям в тазовых и подвздошных лимфатических узлах, свидетельствующих об усилении их транспортной функции по сравнению с группой без коррекции. Показан эффект повышения кровенаполнения предстательной железы и снижение кровотока в регионе малого таза в сравнении с группами с монокоррекцией.

Впервые показано, что сочетанное применение фитокомплекса (БАД к пище «Фитопан М») и воздействие гелий-неоновым лазерным излучением при венозном застое в малом тазу вызывает разнонаправленность структурных преобразований в регионарных лимфатических узлах предстательной железы, зависящих от их анатомической локализации: в тазовых лимфатических узлах выявлены структурные признаки активации Т- и угнетения В-зависимой зоны; в подвздошных лимфатических узлах - усиление транспортной функции в сравнении с группой без коррекции. Впервые показано на морфологическом уровне, что сочетанное применение фитокомплекса и гелий-неонового лазерного воздействия способствует повышению эффекта действия фитокомплекса.

Теоретическая и практическая значимость. Результатом проведенной работы является раскрытие возможностей направленного восстановления с помощью местных физиотерапевтических воздействий и общей диеткоррекции структурно-функциональной организации лимфоидных органов (регионарных лимфатических узлов) и предстательной железы при циркуляторных нарушениях (венозный застой) в малом тазу.

Экспериментальная модель венозного застоя в малом тазу у лабораторных животных (крысах - самцах линии Вистар), суть которой заключается в лигировании внутренних подвздошных вен с обеих сторон, позволила выявить динамику структурных циркуляторных повреждений в предстательной железе. Использование данной экспериментальной модели сделало возможным провести сравнительную оценку морфометрических показателей лимфатического региона малого таза и предстательной железы в динамике ее циркуляторного повреждения и в условиях физиотерапии (низкоэнергетическим лазерным излучением и электромагнитным КВЧ-излучением) и фитокоррекции (с использованием БАД к пище «Фитопан М»), что является фундаментальным обоснованием использования способов коррекции в практической медицине.

Результаты проведенного исследования показали, что венозный застой в малом тазу можно расценивать в качестве модели циркуляторного (конгестивного) простатита. Он является основой для проведения хронического эксперимента с целью подбора наиболее оптимального способа коррекции этого заболевания. Теоретические аспекты, полученные в работе служат морфологическим обоснованием механизмов комплексного воздействия КВЧ- и лазеротерапии в качестве факторов коррекции при заболеваниях органов мочеполовой системы у мужчин.

На основании полученных в результате выполнения работы фундаментально-теоретических обоснований разработаны два способа лечения больных хроническим простатитом (Патент на изобретение RU № 2290232 от 2005 г., Патент на изобретение RU № 295354 от 2005 г.).

Положения, выносимые на защиту:

1. Лимфатические узлы предстательной железы (тазовые и подвздошные) по своей структурно-функциональной специализации относятся к фрагментированному типу, причем наибольшим транспортным потенциалом в нормальных условиях гемодинамики (корково-мозговой индекс, мозговой и краевой синусы) обладают регионарные лимфатические узлы 1-го порядка (тазовые), что свидетельствует об их выраженной дренажно-детоксикационной функции. В условиях нормальной лимфо- и гемодинамики в центральной лимфе основные макро- и микроэлементы по количественному содержанию распределяются в следующем порядке: P,Ca, Mg, Fe, Cu, Al, B, Ba, Mn, Zn, Sn, Pb, элементный статус центральной лимфы отличается от такового в крови.

2. Острый венозный застой в малом тазу в динамике своего развития приводит к циркуляторному повреждению структуры предстательной железы (паренхиматозно-стромальное соотношение, кровоток), а так же к морфофункциональным преобразованиям в регионарных лимфатических узлах (зональность, клеточный состав), центральной лимфе и периферической крови (дисбаланс элементного статуса), выраженность которых зависит от стадии венозного застоя.

3. Применение местной физиотерапевтической коррекции (лазерное воздействие, КВЧ-терапия) или энтеральное применение фитокомплекса «Фитопан М» при венозном застое в малом тазу способствует восстановлению структурной организации предстательной железы, активации кровотока в окружающих мягких тканях (увеличение показателей перфузии) и дренажно-детоксикационной функции регионарных лимфатических узлов (увеличение площади мозгового вещества, В-зависимой зоны), снижению уровня эндотоксикоза в лимфатическом регионе, о чем свидетельствует количественное распределение микроэлементов в лимфе. предстательный венозный застой фитокомплекс излучение

4. Сочетанное использование фитокомплекса «Фитопан М» и местного воздействия электромагнитного КВЧ-излучения и низкоинтенсивного гелий-неонового лазерного излучения на проекцию предстательной железы при венозном застое в малом тазу способствует улучшению гемоциркуляции в предстательной железе и малом тазу (соотношение артериол и венул, перфузия передней брюшной стенки), обладает лимфостимулирующим (увеличение мозгового вещества, краевого и мозговых синусов) и лимфокоррегирующим (увеличение числа незрелых лимфоидных клеток) эффектами в отношении регионарных лимфатических узлов предстательной железы, степень выраженности которых зависит от анатомической локализации лимфатических узлов.

Апробация результатов исследования. Основные результаты исследования доложены и обсуждены на: научно-практической конференции «Современные проблемы курортологии и физиотерапии», посвященной 55-и летию санатория «Барнаульский» (Барнаул, 2000), VI Международном симпозиуме «Биологически активные добавки к пище и проблемы оптимизации питания» (Сочи, 2002), научной конференции «Курортология и физиотерапия Сибири в концепции развития здравоохранения и медицинской науки Российской Федерации» (Томск, 2002), региональной научно-практической конференции «Роль санаторно-курортного лечения в процессах реабилитации населения сибирского региона» (Новосибирск, 2003), I Российском конгрессе реабилитологов «Реабилитационная помощь населению» (Москва, 2003), I Международном конгрессе «Восстановительная медицина и реабилитация 2004» (Москва, 2004), Научной конференции «Информационно-волновые технологии в комплексной реабилитации пациентов в лечебных и санаторно-курортных учреждениях» (Томск, 2004), Internationaler Kongress «Euromedica» (Hannover, 2004); Всероссийском форуме «Здравница»: «Актуальные проблемы восстановительной медицины, курортологии и физиотерапии» (Санкт-Петербург, 2004), I Конференции с международным участием «Проблемы боли и обезболивания в клинической медицине», М., 2004; 3-ем Российском научном форуме «Мужское здоровье и долголетие» (Москва, 2005), II Национальной научно-практической конференции с международным участием «Теория и практика оздоровления населения России» (Москва., 2005), III Юбилейной научно-практической конференции, посвященной 60-и летию санатория «Барнаульский» «Современные проблемы восстановительной медицины и курортологии» (Барнаул, 2005), I Сибирском съезде лимфологов с международным участием «Проблемы экспериментальной, клинической и профилактической лимфологии» (Новосибирск, 2006), Internationaler Kongress Fachmesse «Moderne Aspekte der Rehabilitationsbebehandlung und funktioneller Ernahrung» (Hannover, 2006), V Региональной научно-практической конференции урологов Сибири «Актуальные вопросы детской и взрослой урологии» (Томск, 2006), Internationaler Kongress Fachmesse «Moderne Aspekte der Rehabilitationsbebehandlung und funktioneller Ernahrung» (Hannover, 2007), Региональной юбилейной научно-практической конференции «Современные технологии восстановительной медицины» (Белокуриха, 2007), VI Международной конференции «Гемореология и микроциркуляция (от молекулярных мишеней к органным и системным изменениям)» (Ярославль, 2007), XII Международном симпозиума «Новые технологии восстановительной медицины и курортологии (физиотерапия, реабилитация, спортивная медицина)» (Москва, 2007), Региональной юбилейной научно-практической конференции «Современные технологии восстановительной медицины» (Белокуриха, 2007).

Внедрение. Результаты работы внедрены в учебный процесс на кафедре восстановительной медицины Алтайского государственного медицинского университета (АГМУ) (на курсах повышения квалификации врачей физиотерапевтов в разделах: «Фототерапия», «КВЧ-терапия» и «Комплексные методы воздействия» по курсу «Общей физиотерапии»), на кафедре патологической анатомии (в разделе «Частные вопросы») в АГМУ и в Новосибирском государственном университете на кафедре фундаментальной медицины в разделе «Частная патология эндокринной системы» Результаты исследований, представленных в диссертации, вошли в тематический план работы ГУ научно-исследовательского института клинической и экспериментальной лимфологии (НИИКиЭЛ) СО РАМН за отчетный период с 2003 по 2007 г.г.; в рамках этого плана осуществлена научно-практическая работа на договорных условиях (Договор № 21 от 2004 по 2006 г.г.) между ГУ НИИКиЭЛ СО РАМН и санаторием «Барнаульский» (г. Барнаул) по клинической апробации стереотипных факторов физио- и фитокоррекции, представленными в диссертационной работе, на контингенте больных циркуляторным простатитом. Результаты исследований успешно внедрены в клиническую практику работы андрологической службы Алтайского края. Совместно с кафедрой урологии АГМУ разработана программа комплексной реабилитации больных хроническим простатитом, представленная в пособии для врачей (утверждено к печати на заседании Ученого совета ГУ НИИКиЭЛ СО РАМН от 23.12.2004 г., протокол № 9), одобренным Профессиональной ассоциацией андрологов России.

Публикации: По теме диссертации опубликовано 45 научных работ, из них в изданиях, рекомендованных ВАК - 7, патентов на изобретение - 2.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 320 страницах машинописного текста, содержит 64 рисунка, 27 таблиц, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, 6 глав собственных исследований, обсуждения, выводов, списка литературы, содержащего 443 отечественных и иностранных источников. Весь материал, представленный в диссертации, получен, обработан и проанализирован лично автором.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

В качестве экспериментальных животных были использованы крысы-самцы Вистар, с исходной массой 220 - 260 г. Работа выполнена на 300 животных. Их разделили на следующие группы: 1 - интактные животные; 2, 3, 4, 5 - группы животных с экспериментальным венозным застоем в малом тазу (3 , 7, 14, 21 сутки); 6 - группа с энтеральной фитокоррекции (БАД к пище «Фитопан М»); 7 - группа в условиях местного воздействия КВЧ- электромагнитным излучением на область проекции предстательной железы (надлобковая область передней брюшной стенки); 8 - группа в условиях местного воздействия гелий-неоновым лазерным излучением на область проекции предстательной железы (надлобковая область передней брюшной стенки); 9 - группа в условиях сочетанной местной физио- (КВЧ-излучение) и энтеральной фитотерапевтической (БАД к пище «Фитопан М») коррекции; 10 - группа в условиях сочетанной местной физио- (гелий-неоновое лазерное излучение) и энтеральной фитотерапевтической (БАД к пище «Фитопан М») коррекции (каждая группа - по 30 животных).

Для создания циркуляторного повреждения предстательной железы мы использовали модель создания острого венозного застоя в малом тазу, исходя из собственных данных (Бородин Ю.И. и др., 2007; Казаков О.В. и др., 2007) и механизмов развития циркуляторного простатита (Комалов А.А., 2000; Ломшаков А.А., 2000; Lee H.J. et al., 2001; Liang C.Z. et al., 2006). Венозный застой у экспериментальных животных создавался под нембуталовым наркозом (40 мг/кг веса внутрибрюшинным введением): проводили срединную лапаротомию, затем послойно выделяли общие подвздошные вены в месте бифуркации нижней полой вены, дистальнее определяли и тупым способом выделяли внутренние подвздошные вены с обеих сторон и производили их двухстороннее лигирование; осуществляли гемостаз, послойное ушивание раны, обработку антисептиком. В группе с коррекцией фитокоррекции, начиная с 8 суток эксперимента, в течение двух недель, ежедневно проводилось пероральное естественное скармливание с рационом вивария фитокомплекса (суточная доза 10 мг на 100 г массы животного) БАД к пище «Фитопан М» (санитарно-эпидемиологическое удостоверение №77.99.20.919.В.000446.04.04 от 02.04.2004 г.) в состав которого входит комплекс пищевых волокон и лекарственных растений, пантогематоген, обладающих антиоксидантным, простатотропным и лимфокорригирующим действием. В группе с коррекцией КВЧ - излучением воздействие проводилось (на наркотизированных животных) серийным аппаратом «Милта» (ЗАО «Милта ПКП ГИТ», Россия) в «шумовом» режиме генерации. Излучатель устанавливали на расстоянии 0,5 см от поверхности кожи в нижнем отделе передней брюшной стенки. Диапазон частот излучения 42-95 Ггц, спектральная плотность мощности «шумового» излучения, не менее 10-17 Вт/Гц. Время одного сеанса - 10 минут, курс - 12 процедур (ежедневно, начиная с 8 суток эксперимента). В группе с коррекцией гелий-неоновым лазерным излучением воздействие проводилось на наркотизированных животных, которым ежедневно в течение 12 дней, начиная с 8 суток эксперимента, проводилось чрескожное гелий-неоновое лазерное воздействие на нижние отделы передней брюшной стенки. Плотность потока мощности лазерного излучения 25 мВт/см2, время одного сеанса - 10 минут.

В качестве объекта морфологических исследований были выбраны тазовые и подвздошные лимфатические узлы, простата, центральная лимфа и периферическая кровь. Используя принцип морфометрии, в лимфатических узлах подсчитывали площадь всего среза и площади отдельных структур: капсулы, краевого синуса, первичных и вторичных лимфоидных узелков, коркового плато, паракортикальной зоны, мозговых тяжей и мозговых синусов. Рассчитывали корково/мозговой (к/м) индекс лимфатических узлов, по которому ориентировались при определении типа лимфоузла (Ю. И. Бородин, 1969). Выделение структурных компонентов и клеточных элементов лимфоидной паренхимы в лимфатических узлах проводили согласно Международной гистологической номенклатуре под редакцией В. В. Семченко и др. (1999). При определении класса лимфоцитов пользовались классификацией М. Р. Сапина и др. (1988). В предстательной железе определялись площади стромы и железистых структур (паренхимы), а также артериол и венул. На базе сертифицированной аналитической лаборатории Новосибирского института неорганической химии СО РАН методом атомно-эмиссионной спектрометрии с дуговым возбуждением спектров проводился количественный элементный анализ в пробах центральной лимфы, периферической крови по 12 элементам (Al, B, Ba, Ca, Cu, Fe, Mg, Mn, P, Pb, Sn, Zn) для всех экспериментальных групп. Выбор элементов определяли в соответствии с их биологической ролью в организме. Проводилось исследование периферического кровотока в области проекции предстательной железы (в нижнем отделе передней брюшной стенки), что помогло оценить состояние перфузии тканей в стенках и органах малого таза в наших исследования. Применяли серийно изготовленный лазерный анализатор капиллярного кровотока (ЛАКК-01, НПП «Лазма», Россия).

Методы статистической обработки данных. Обработку и графическое изображение результатов, представленных в диссертации, проводили с помощью компьютерных программ Statistica 6.0 и Excel 2003.

В работе использованы различные методы статистической обработки в зависимости от типа случайных величин и поставленной задачи исследования (Катинас Г.С. и др., 1969; Потапова И.Г. и др., 1983; Лакин Г.Ф., 1990; Гельман В.Я., 2002). Значения непрерывных величин представлены в виде M±m, где M - выборочное среднее и m - стандартная ошибка среднего. Для оценки формы распределения признаков использовали показатели эксцесса и асимметрии. Распределение считали нормальным при попадании данных показателей в интервал от -2 до 2 (Гельман В.Я., 2002). В случаях нормального распределения, а также равенства выборочных дисперсий, для сравнения средних использовали t-критерий Стьюдента. Равенство выборочных дисперсий оценивали по F-критерию. Для сравнения связанных выборок использовали парный t-критерий Стьюдента. В случае распределений, не соответствующих нормальному, а также при неравенстве дисперсий, использовали непараметрические тесты Вилкоксона, Манна-Уитни. Статистически значимыми результаты считались при p<0,05.

Корреляционный анализ признаков проводили с помощью оценки линейного коэффициента корреляции Пирсона (r) с последующей проверкой его значимости (p).

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Морфофункциональное исследование тазовых и подвздошных лимфатических узлов, предстательной железы в нормальных условиях гемо- и лимфоциркуляции

Морфометрия паренхимо-стромального соотношения предстательной железы интактных животных выявила, что относительная площадь ее паренхимы составляет 60,56 %, а стромы - 36,6 %. Кровоснабжение предстательной железы осуществляется многочисленными артериальными ветвями, которые составляют 1,06 % от всей исследуемой площади предстательной железы. При этом площадь венулярного звена предстательной железы составляет 1,79%.

Исследованные нами тазовые лимфатические узлы позволили выявить структурно-клеточные преобразования в лимфатических узлах собирающих лимфу от вентральной поверхности хвоста, области заднего прохода, прямой кишки. Исследование выявило, что у интактных животных тазовые лимфатические узлы (регионарные лимфатические узлы предстательной железы I порядка) по своей структурно-функциональной специализации относятся к фрагментированному типу (к/м индекс - 0,42). Площадь коркового вещества (Таблица 1) составляет 27,96 % (первичные и вторичные лимфоидные узелки составляют 1,22 % и 3,42 %, коркового плато - 1,32 %, паракортикальная зона - 22 %), а мозгового 67,2 % (мозговые синусы - 30,08 %, мозговые тяжи - 37,12 %). Относительная площадь краевого синуса - 2,43 %, капсулы - 2,03 %. Клетки в герминативных центрах вторичных лимфоидных узелков тазовых лимфатических узлов (Таблица 2) представлены лимфобластами (8,3 %), средними (14,95 %) и малыми (66,96 %) лимфоцитами, клетками на стадии митоза (1,07 %), макрофагами (4,96 %), ретикулярными клетками (3,76 %). В структуре паракортикальной зоны выявлены средние (4,35 %) и малые лимфоциты (89,57 %), лимфобласты (1,09 %), макрофаги (2,93 %), ретикулярные клетки (1,95 %). Мозговые тяжи представлены зрелыми (37,63 %) и незрелыми (3,26 %) плазматическими клетками, малыми лимфоцитами (33,58%), плазмобластами (7,28 %), клетками на стадии митоза (0,95 %), макрофагами (2,15%), ретикулярными клетками (3,93 %). Мозговые синусы содержат малые (44,4 %) и средние (2,91 %) лимфоциты, зрелые (40,37 %) и незрелые (5,86 %) плазматические клетки, плазмобласты (1,39 %), макрофаги (1,16 %), ретикулярные (3,79 %) и тучные (0,12 %) клетки.

Таблица 1. Относительные площади структурно-функциональных зон тазовых и подвздошных лимфатических узлов в условиях нормальной гемодинамики в малом тазу (Mm) (%).

Таблица 2. Цитоархитектоника структурно-функциональных зон тазовых и подвздошных лимфатических узлов в условиях нормальной гемодинамики в малом тазу (Mm) (%).

Исследование подвздошных лимфатических узлов (узлы II-го порядка для лимфы, прошедшей через тазовые, ягодичные и подколенные лимфатические узлы) интактных животных позволило нам выявить структурно-клеточные преобразования в лимфатических узлах, дренирующих тазовые конечности и органы малого таза. Согласно имеющимся данным подвздошные лимфатические узлы интактных крыс относятся к фрагментированному типу (Асташов В.В., 1998; Жданов А.П., 2003; Анцырева Ю.А., 2004). В нашем случае к/м индекс - 0,66. Относительная площадь коркового вещества - 39 % (первичные - 1,22 % и вторичные - 8,1 % лимфоидные узелки, корковое плато - 1,91 %, паракортикальная зона - 28,33 %), а мозгового 58,14 % (мозговые тяжи - 37,66 %, мозговые синусы - 20,48 %). Относительная площадь краевого синуса - 0,99 %, капсула - 1,09 %, трабекулы - 0,19 %. Клетки в герминативных центрах вторичных лимфоидных узелков тазовых лимфатических узлов представлены лимфобластами (9,31 %), средними (19,54%) и малыми (66,64 %) лимфоцитами, клетками на стадии митоза (0,71 %), макрофагами (3,59 %), ретикулярными клетками (0,4 %). В структуре паракортикальной зоны выявлены средние (2,1 %) и малые лимфоциты (94,38 %), лимфобласты (1,19 %), макрофаги (1,29 %), ретикулярные клетки (0,97 %). Мозговые тяжи представлены зрелыми зрелыми (47,92 %) и незрелыми (12,82 %) плазматическими клетками, малыми лимфоцитами (24,93 %), плазмобластами (2,48%), клетками на стадии митоза (0,62 %), макрофагами (1,65%), ретикулярными клетками (3,35 %). Мозговые синусы содержат малые (47,22 %) и средние (3,23 %) лимфоциты, зрелые (32,49 %) и незрелые (10,55 %) плазматические клетки, плазмобласты (1,3 %), макрофаги (1,54 %), ретикулярные (3,1 %) и тучные (0,55 %) клетки.

Выявлены характерные особенности микроэлементного статуса центральной лимфы и крови у интактных животных: 1) По количественному содержанию микроэлементы в центральной лимфе распределяются: в диапазоне от 29,0 до 6,0 мг/л - P (28,5 мг/л),Ca (20,8 мг/л), Mg (6,3 мг/л); в диапазоне от 1,0 до 0,1 мг/л - Fe (0,8 мг/л,), Cu (0,46 мг/л), Al (0,12 мг/л), B (0,1 мг/л); в диапазоне от 0,05 до 0,01 мг/л - Ba (0,05 мг/л), Mn (0,04 мг/л), Zn (0,03 мг/л), Sn (0,03 мг/л), Pb (0,01 мг/л). 2) В крови распределение содержания микроэлементов : в диапазоне от 32,0 до 5,0 мг/л - Р (31,5 мг/л), Ca (30,0 мг/л), Mg (5,82 мг/л); в диапазоне от 1,0 до 0,2 мг/л - Fe (1,0 мг/л), Al (0,95 мг/л), Cu (0,61 мг/л), Zn (0,4 мг/л), в диапазоне от 0,15 до 0,01 мг/л - Ba (0,15 мг/л), B (0,1 мг/л), Sn (0,1 мг/л), Pb (0,07 мг/л), Mn (0,01 мг/л).

С помощью лазерной допплеровской флоуметрии проводилось исследование периферического кровотока в нижнем отделе передней брюшной стенки, что помогло оценить состояние перфузии тканей в стенках и органах малого таза. У интактных животных значение показателя микроциркуляции (М) составляет 29,3 пф.ед. (перфузионные единицы), среднеквадратического отклонения () - 1,1 пф.ед., коэффициента вариации (КV) - 3,7%. Максимальная амплитуда колебаний определяющая активность собственных компонентов микроциркуляторного русла (АmaxLF) - 1,45 пф.ед; колебаний совпадающих с дыхательными ритмами и зависящими от колебаний венозного кровотока в связи с изменением давления в грудной клетке в фазы вдоха и выдоха (АmaxHF) - 1,0 пф.ед; колебаний совпадающих с пульсовыми колебаниями кровотока (кардиоритмы) (АmaxСF) - 0,42 пф.ед. Индекс эффективности микроциркуляции составляет - 1,04.

Морфофункциональное исследование подвздошных и тазовых лимфатических узлов, предстательной железы через в динамике венозного застоя (на 3-и, 7-е, 14-е и 21-е сутки) в малом тазу

Через 3 суток экспериментального венозного застоя в органах малого таза (стадия субкомпенсации) морфометрическое исследование предстательной железы выявило: увеличение площади стромы на 12,6 % и уменьшение паренхимы - на 12 %. Строма предстательной железы отечна, соединительно-тканный каркас разрыхлен. Значительное увеличение относительной площади, как венул (в 2,1 раза), так и артериол (на 60,4 %) предстательной железы свидетельствует о выраженном кровенаполнении предстательной железы, преимущественно за счет затруднения венозного дренажа.

Через 3 суток экспериментального венозного застоя в малом тазу тип структурно-функциональной организации тазовых лимфатических узлов соответствует фрагментированному типу (к/м индекс - 0,59). Общая площадь среза тазового лимфатического узла увеличивается на 35,52 %. Увеличивается площадь коркового вещества - на 26,14 % и уменьшается мозгового - на 10,3 %. Выявлены структурные признаки активации клеточного звена иммунитета: увеличена площадь тимусзависимой зоны - на 40,4 %. Транспорт лимфы через тазовый лимфатический узел снижен: краевой синус сужен, уменьшена относительная площадь мозговых синусов - на 24,7 %. В структурно-функциональных зонах тазовых лимфатических узлов выявлена активация процессов бласттрансформации: увеличивается число малых лимфоцитов на 4,85 % в герминативных центрах вторичных лимфоидных узелков, количества зрелых (на 18,6 %) и незрелых (на 66,3 %) плазматических клеток в мозговых тяжах, числа зрелых плазматических клеток - на 21 %, средних лимфоцитов - на 45,7 % в мозговых синусах.

Через 3 суток венозного застоя в подвздошных лимфатических узлах тип структурно-функциональной организации соответствует фрагментированному типу (корково-мозговой индекс - 0,58). Относительная площадь коркового вещества уменьшается на 12 %. В подвздошных лимфатических узлах выявлены структурные признаки угнетения клеточного и гуморального звеньев иммунитета: уменьшены площади паракортикальной зоны - на 15,5 %; В-зависимой зоны, мозговых тяжей. Транспорт лимфы через лимфатический узел повышен: площадь мозговых синусов увеличена на 29,44 %. Отмечается отек и разрыхление капсулы лимфатического узла: площадь капсулы увеличивается в 4,9 раза. В цитоархитектонике герминативных центров вторичных лимфоидных узелков отмечается уменьшение числа лимфобластов на 16,8 %. В паракортикальной зоне, мозговом веществе увеличивается численность незрелых форм клеток лимфоидного и плазматического рядов (лимфо- и плазмобластов, средних лимфоцитов), макрофагов.

Через 3 суток венозного застоя в малом тазу выявлены значительные изменения элементного содержания в сыворотке крови: Ca (на 53 %), Р (на 89 %) и Ba (2,3 раза), в центральной лимфе (в 2 - 3 раза) Al, Ca, Mg, Р, Sn, Fe (в 4,9 раза) и Zn (в 18 раз). Уменьшение элементного содержания Mg и Р в предстательной железе может являться следствием уменьшения элементного содержания В, который играет регуляторную роль по отношению к паратгормону и поэтому может косвенным образом влиять на метаболизм кальция, магния, фосфора и витамина Д (Минделл Э., 1997; Скальный А.В., 2004).

Через 3 суток экспериментального расстройства микроциркуляции и лимфодренажной функции региона малого таза результаты лазерной допплеровской флоуметрии свидетельствуют о снижении уровня перфузии ткани (на 33,79 %), обусловленном снижением как активного (миогенной активности вазомоторов), так и пассивного (колебаний венозного кровотока, обусловленными фазами вдоха и выдоха и пульсовыми колебаниями кровотока, обусловленными кардиоритмами) механизмов модуляции, что может свидетельствовать о циркуляторной гипоксии, развивающейся в стенках и органах малого таза, и подтверждается морфометрическими данными предстательной железы.

Через 7 суток экспериментального венозного застоя органов малого таза (начало периода компенсации) в предстательной железе, по сравнению с 3 сутками эксперимента и интактной группой, увеличивается площадь паренхимы на 5,7 % и уменьшается стромы - на 8,3 %. По сравнению с 3 сутками эксперимента уменьшается, до интактных значений, просвет артериол, а венул - уменьшается на 17,3 % по сравнению с интактной группой и на 61,5 % по сравнению с 3 сутками эксперимента. Уменьшение площади артериального и венулярного звеньев кровоснабжения предстательной железы может свидетельствовать о развитии адаптационно-компенсаторных процессов в тканевом микрорайоне, направленном на восстановление кровотока.

Через 7 суток венозного застоя в малом тазу, по сравнению с 3 сутками эксперимента, в тазовых лимфатических узлах выявлены структурные признаки угнетения клеточного (уменьшается площадь паракортикальной зоны на 26,4 %) и активация гуморального (увеличена площадь В- зависимой зоны на 20 %, вторичных лимфоидных узелков - в 2,6 раза, мозговых тяжей) звеньев иммунитета. В лимфатических узлах преобладает прямой путь транспорта лимфы: увеличена площадь краевого на 22,6 % и уменьшена мозговых синусов - на 19,1 %. В капсуле разрастание соединительной ткани более выражено, чем через 3 суток эксперимента. В тазовых лимфатических узлах выявлена активация процессов пролиферации и бласттрансформации: увеличена численность малых лимфоцитов в герминативных центрах, в мозговом веществе - зрелых и незрелых плазматических клеток, средних лимфоцитов, отмечается макрофагальная реакция. Отмечаемая плазматизация мозгового вещества, в сочетании с увеличением площади мозговых тяжей, указывает на активацию В-зависимых иммунологических реакций в организме.

Через 7 суток эксперимента в подвздошных лимфатических узлах отмечаемое увеличение площади мозговых синусов (на 59,8 %), более выраженное по сравнению с 3 сутками эксперимента, свидетельствует об усилении транспорта лимфы через лимфатический узел. Также как и через 3 суток эксперимента в подвздошных лимфатических узлах выявлены структурные признаки угнетения, как клеточного, так и гуморального звеньев иммунитета: уменьшаются площади паракортикальной зоны - на 31,5 %, В- зависимой зоны - на 11 %, вторичных лимфоидных узелков - на 28,3 %. Выявлены признаки органосклероза (увеличена площадь соединительно-тканных компонентов). В структурных компонентах подвздошных лимфатических узлов, как и через 3 суток эксперимента, отмечается увеличение численности незрелых форм клеток лимфоидного и плазматического рядов (лимфо- и плазмобластов, средних лимфоцитов). При этом в герминативных центрах вторичных лимфоидных узелков активизируются процессы бласттрансформации (увеличивается число малых лимфоцитов). В отличие от 3 суток эксперимента макрофагальная реакция выражена только в мозговом веществе.

Исследование элементного состава центральной лимфы выявило, как и через 3 суток эксперимента, увеличение содержания Ca (в 4 раза), Fe (в 2 раза), Mg (в 2,8 раза), Р (в 2,3 раза), Sn (в 3,3 раза), Zn (в 8,8 раза). Примечательно, что и в центральной лимфе и сыворотки крови значительно увеличивается содержание Ва, Fe, и Pb. Сохраняется более выраженный, по сравнению с 3 сутками эксперимента, дисбаланс в элементном содержании предстательной железы: увеличивается содержание Al, Ва, Cu и уменьшается содержание В, Fe, Mg, Р, Pb, Zn.

Исследование микроциркуляции через 7 суток венозного застоя в малом тазу выявило схожее с 3 сутками эксперимента уменьшение основных показателей, характеризующих перфузию ткани: среднего значения показателя микроциркуляции, показателя, характеризующего модуляцию кровотока в микроциркуляторном русле, индекса эффективности микроциркуляции, что может быть вызвано снижением миогенной активности вазомоторов, колебаний венозного кровотока, обусловленными фазами вдоха и выдоха, пульсовыми колебаниями кровотока, а также - с повышением сосудистого тонуса (более выраженного, чем через 3 суток эксперимента).

Через 14 суток экспериментального венозного застоя органов малого таза (период компенсации) выявлены сходные, но менее выраженные, по сравнению с 7 сутками эксперимента, отличия в изменении площади паренхимы и стромы предстательной железы: увеличена площадь паренхимы на 4,1 %, площадь стромы уменьшается на 4,2 %. По сравнению с интактной группой уменьшены относительной площади артериол (на 25,5 %) и венул - на 37,4 %, что может свидетельствовать о признаках редукции кровеносного русла в органе.

Через 14 суток экспериментального венозного застоя в органах малого таза в тазовых лимфатических узлах, как и через 7 суток эксперимента, отмечаются структурные признаки угнетения клеточного (уменьшается площадь паракортикальной зоны на 19,9 %) и активация гуморального (увеличена площадь В-зависимой зоны, вторичных лимфоидных узелков - в 2,1 раза) звеньев иммунитета. Транспорт лимфы через лимфатический узел снижен: в мозговом веществе, как и в предыдущие сроки эксперимента, сохраняется уменьшение площади мозговых синусов - на 11 %. Сохраняются признаки органосклероза, но в меньшей степени, чем через 7 суток эксперимента. В тазовых лимфатических узлах, по сравнению с 7 сутками эксперимента, отмечается еще более выраженная активация процессов бласттрансформации: увеличивается число зрелых форм клеток лимфоидного (в герминативных центрах - на 10 %) и плазматического (в мозговом веществе - на 24,7 %) рядов. Отмечается увеличение числа ретикулярных клеток.

В подвздошных лимфатических узлах через 14 суток экспериментального венозного застоя, по сравнению с предыдущими сроками (3 и 7 суток) эксперимента тип структурно-функциональной специализации лимфатических узлов изменяется с фрагментированного типа на промежуточный (корково-мозговой индекс - 1,23). Отмечаются структурные признаки активации гуморального (гиперплазия вторичных лимфоидных узелков, увеличение числа малых лимфоцитов, увеличение незрелых форм клеток плазматического ряда, митотической активности клеток (на 74,2 %) в мозговых тяжах) и клеточного (увеличена площадь тимусзависимой зоны - на 41,1 %) звеньев иммунитета. При этом транспорт лимфы через лимфатический узел снижен в более значительной степени, чем в предыдущие сроки эксперимента. Как и через 7 суток эксперимента, макрофагальная реакция выражена только в мозговом веществе.

Исследование микроэлементного состава центральной лимфы через 14 суток экспериментального венозного застоя в малом тазу выявило, как и через 7 суток эксперимента, увеличение содержания Ва (в 28 раз), Ca (на 49 %), Fe (в 2,4 раза), Р (в 2,6 раза), Pb (в 7 раз), Zn (в 9 раз). При этом содержание Ва и Р выражено в большей, а Са в меньшей степени. В элементном составе сыворотки крови, как и через 7 суток эксперимента, отмечается увеличение содержания В (в 2 раза). Уменьшается содержание Al, Fe и Zn. В предстательной железе выявлен менее выраженный, по сравнению с 7 сутками эксперимента, дисбаланс в элементном содержании. При этом сохраняется увеличенным содержание Al (на 94,7 %), уменьшается Mn (на 46,7 %), Р (на 35,2 %), Pb (на 36,7 %), Sn (на 50 %).

Уровень перфузии ткани в нижней части передней брюшной стенки через 14 суток экспериментального венозного застоя в малом тазу снижен: уменьшен показатель микроциркуляции на 47,6 %, индекс эффективности микроциркуляции - на 35,6 %. Необходимо отметить, что данные показатели не имеют достоверных отличий от значений 7 суток венозного застоя. При этом отмечается увеличение как вклада кардиального механизма регуляции капиллярного кровотока (на 51,72 %), так и соотношения амплитуды дыхательных ритмов и ритмов низкой частоты (на 48,61 %), что может быть обусловлено, как и в предыдущий срок эксперимента, сохраняющимся снижением активного механизма модуляции.

Через 21 сутки экспериментального венозного застоя (поздние сроки периода компенсации), в отличие от предыдущих экспериментальных групп, восстанавливается паренхимо-стромальное соотношение, и уменьшаются относительные площади, как венул - на 44, 2 %, так и артериол (на 42,8 %) предстательной железы. При этом отмечается дезорганизация структуры паренхимы: расширены просветы концевых секреторных отделов собственных желез, формирование в просвете участков конгестий, уплотнение секрета, кальцинация и петрификация секрета, разрастание в строме грубоволокнистой соединительной ткани.

Через 21 сутки венозного застоя в малом тазу в тазовых лимфатических узлах, по сравнению с интактной группой, выявлено увеличение площади коркового вещества за счет увеличения площади коркового плато - в 2,1 раза, первичных (на 41 %) и вторичных (в 2,3 раза) лимфоидных узелков. Отмечается, как и в предыдущие сроки венозного застоя, но в большей степени, по сравнению с 14 сутками эксперимента, снижение транспорта лимфы через лимфатический узел: уменьшена площадь мозговых синусов. Как и в предыдущие сроки эксперимента, в тазовых лимфатических узлах отмечаются структурные признаки активации гуморального звена иммунитета: увеличивается площадь В-зависимой зоны, мозговых тяжей и вторичных (в 2,3 раза) лимфоидных узелков. По сравнению с предыдущими сроками венозного застоя отмечается активация процессов пролиферации и бласттрансформации клеток лимфоидного и плазматического рядов: увеличивается число средних лимфоцитов, зрелых плазматических клеток, клеток на стадии митоза.

В подвздошных лимфатических узлах через 21 сутки венозного застоя в малом тазу тип структурно-функциональной специализации изменяется с промежуточного (14 сутки экспериментального простатита, корково-мозговой индекс - 1,23) на фрагментированный (корково-мозговой индекс - 0,49). Относительная площадь коркового вещества уменьшается на 19,8 % за счет паракортикальной зоны. В отличие от 14 суток эксперимента увеличивается площадь В-зависимой зоны, мозговых тяжей. Восстанавливается транспорт лимфы через лимфатический узел. По сравнению с предыдущими сроками эксперимента, в структурно-функциональных зонах подвздошных лимфатических узлов выявлена активность процессов пролиферации (увеличивается численность незрелых форм клеток лимфоидного и плазматического рядов, клеток на стадии митоза). Макрофагальная реакция выражена только в мозговом веществе.

Исследование элементного содержания выявило наибольшие изменения на 21 день эксперимента для Са, Mg, P, что подтверждает данные полученные другими авторами, которые исследовали лимфоток при флебогипертензии (Бородин Ю.И., Григорьев В.Н., 1986). Повышенное выведение этих макроэлементов из организма отмечено изменениями в элементном содержании центральной лимфы (выявлено, как и через 14 суток эксперимента, но в более выраженной степени, увеличение содержания Ca - на 79,3 %, Fe - в 2,8 раза, Mg - в 2,1 раза, Р - в 4 раза, Zn - в 12 раз) и сыворотки крови (повышается концентрация Са - на 83,3 %, Mg - в 2,3 раза, Р - в 2,5 раза). Картина изменения химического состава тканей предстательной железы значительно более четкая, так как химический состав тканей в меньшей степени подвержен колебаниям, связанным с внешним влиянием и интегрально отражает структурные изменения, протекающие в организме в течение длительного времени. Для тканей предстательной железы обнаружено постепенное уменьшение всех основных эссенциальных макро- и микроэлементов (Cu - на 48,4 %, Fe - на 35,2 %, Mg - 26,3 %, Р - на 47,6 %, Zn - на 60,9 %) с минимальными концентрациями этих элементов в группе животных на 21 сутки эксперимента.