Наименование препарата	Методы посева
	поверхностный	2-х слойный	глубинный	модифицированный глубинный
	Плесневые и дрожжевые грибы
1.Аллохол табл.	194,0+4,0	222,0+6,0	204,0+5,0	236,0+2,0
2.Гипозоль	250,0+4,0	210,0+1,0	190,0+3,0	260,0+1,0
3.Желчь медицин.	100,0+1,0	85,0+6,0	72,0+4,0	105,0+1,0
4.Парацетамол таблетки	(6,3+0,1) 103	(6,2+0,1) 103	(6,0+0,2) 103	(7,1+0,3) 103
5Финлепсин табл	(1,8+0,5) 104	(6,3+0,2) 104	(6,6+0,1) 104	(6,9+0,1) 104
6.Холензим табл.	250,0+8,0	300,0+6,0	300,0+2,0	350,0+8,0
7.Желчь мед.	(3,0+0,1) 103	(6,0+0,2) 103	(5,0+0,2) 103	(6,0+0,2) 103
8.Карсил-100кап.	(1,3+0,2) 104	(1,3+0,2) 104	(1,0+0,2) 104	(1,4+0,4) 104
9.Карсил-50 кап.	(2,8+0,1) 104	(1,7+0,2) 104	(1,3+0,2) 104	(2,2+0,1) 104
10.Пиперазина адипинат раствор	(1,9+0,1) 104	(0,9+0,2) 104	(2,4+0,2) 104	(2,7+0,2) 104
11Хай-Трим сусп	(4,4+0,2) 103	(4,0+0,1) 103	(4,0+0,2) 103	(4,2+0,1) 103
Особенности роста колоний	недиссоциированные колонии, но при подсчете их количества используют коэффициент 100, что не годится для определенных категорий ЛС.	диссоциация колоний, время инкубации более 72ч	недиссоциированные четко изоли-рованные, легко сосчитываемые колонии, облегчен учет через 48ч инкубации
	Аэробные бактерии
12.Альмагель	(2,4+0,1) 106	(2,6+0,2) 106	(3,0+0,1) 106	(3,0+0,1) 106
13.Феназепам таблетки	(4,5+0,1) 103	(4,8+0,2) 103	(4,4+0,2) 103	(6,6+0,3) 103
14.Ортосифона тычиночного листья	(2,1+0,3) 108	(2,1+0,2) 108	(2,1+0,1) 108	(2,1+0,1) 108
Особенности роста колоний	Диссоциированные колонии, склонные к слиянию.	Склонность к сливному росту, необходимость учета через 18ч, выраженная диссоциация колоний.	Недиссоциирован-ные изолирован-ные, легко учиты-ваемые колонии, учет через 24ч инкубации.

Преследуя цель гармонизировать методы контроля качества ЛС с методами Европейской Фармакопеи, на следующем этапе нами разработаны методы выделения из ЛС и идентификации отдельных видов бактерий, а именно: E. coli, Salmonella spp., P. aeruginosa, S. aureus, количественное определение E. coli, энтеробактерий и других грамотрицательных бактерий. На основании экспериментальных исследований определен алгоритм выделения и идентификации отдельных видов бактерий с использованием питательных сред отечественного производства наряду с импортными аналогами. Проведено сравнение среды №3^ГРМ (для выделения энтеробактерий) и бульона Мак-Конки, среды №4-М (для идентификации энтеробактерий) и агара Мак-Конки, среды №8^ГРМ (для культивирования бактерий) и Триптиказо-соевый бульона; среды №12 (селенитовой), магниевой среды (для накопления сальмонелл) и тетратионатного бульона, трех-сахарного агара с солями железа и среды №13. На основании достоверно выполненных экспериментов установлено:

1. Эффективность испытанного селективного агара для выделения и предварительной идентификации энтеробактерий в моче, сухого, (аналога Мак-Конки агара) производства НПО "Питательные среды" г. Махачкала позволяет рекомендовать эту среду для целей выделения E. coli из ЛС.

2. Наличие в препарате сопутствующей микрофлоры в виде грамположительных спорообразующих бактерий не влияет на выделение E. coli.

3. Количество бульона Мак-Конки или среды №3 ^ГРМ в схеме определения E. coli может быть уменьшено до 10 мл.

4. С целью гармонизации в схему испытания на наличие бактерий рода Salmonella дополнительно к висмут-сульфитному агару (среда №5) предложено ввести еще 3 плотные дифференцирующие среды: Дезоксихолат-цитрат агар, Ксилоза-лизин-дезоксихолат агар, Агар с бриллиантовым зеленым, феноловым красным, с лактозой и сахарозой. Обнаружение типичных колоний на 2-х из 4-х указанных питательных сред позволяет гарантировать, что выделенные из исследуемого образца бактерии относятся к роду Salmonella.

5.Эффективность разработанной нами среды - Агара с бриллиантовым зеленым позволяет рекомендовать его для выделения бактерий рода Salmonella из НЛС.

6. Результаты апробации диагностических наборов фирмы "HiMedia" (Индия) не позволяют рекомендовать их для целей выделения и идентификации контаминантов ЛС. Диагностические наборы представляют собой комплексные системы из жидких селективных и агаризованных дифференциально-диагностических питательных сред, помещенных во флакон, для идентификации E. coli, Salmonella spp., P. aeruginosa, S. aureus. Использование флакона, содержащего жидкую (накопительную) и 1 (или 2) плотные питательные среды, сокращает сроки анализа. Однако при использовании подобных наборов невозможна дальнейшая идентификация колоний, выросших на плотной среде во флаконе с жидкой. Это относится к НЛС, где были обнаружены несколько контаминатов.

Особенности испытания лекарственных растительных средств на микробиологическую чистоту

В рамках изучения ЛРС по показателю "Микробиологическая чистота" с целью формирования требований к их качеству было проведено комплексное изучение их физико-химических, биологических свойств и особенностей. На первом этапе определены категории в зависимости от способа применения: 4А (применяемые после термической обработки) и 4Б (применяемые без термической обработки). В зависимости от способов приготовления и применения этих препаратов нормы, ограничивающие микробную загрязненность ЛРС и сырья, различны и представлены в Изменении №3 к ГФXI изд. и ОФС 42-0016-04. В результате экспериментов выявлены существенные особенности ЛРС, которые следует учитывать:

· Высокий уровень контаминации аэробными бактериями и грибами, возникающий из-за объективных условий сбора, переработки и хранения сырья.

· Значительные пределы количественного содержания микроорганизмов (в 1 г образца допускается не более 10⁷ аэробных бактерий, 10⁵ дрожжевых и плесневых грибов). Большинство ЛРС используется после термической обработки, в результате которой микробная загрязненность отваров и настоев снижается в среднем на 2 порядка. Это положение доказано нами экспериментально на 157 образцах ЛРС 22 наименований отваров и настоев.

· Проба для анализа некоторых средств при массе 10 г может занимать большой объем, не смачиваемый разбавителем в количестве 100 мл.

· При добавлении разбавителя ЛРС в виде трав, листьев, цветков и их смесей, набухают настолько сильно, что невозможно использовать условное разведение 1:10 (смыв) для посева на питательные среды. В таких случаях рекомендовано разведение 1:100 (смыв) при контроле их качества.

С учетом перечисленных особенностей был разработан алгоритм определения микробиологической чистоты ЛРС категория 4А (в качестве примера), что отражено на рис.4.



Рис.4 - Схема испытания ЛРС (Кат. 4.А) по показателю "Микробиологическая чистота"

Состояние и перспективы развития материально-технической базы микробиологических исследований при контроле ЛС

Вопрос оснащенности лабораторий микробиологии в настоящее время стоит достаточно остро. В первую очередь это касается питательных сред. Из всего разнообразия выпускаемых промышленностью питательных сред для целей контроля качества ЛС используется ограниченный набор сред. Помимо накопительных и дифференциально-диагностических сред применяют специализированные среды для нейтрализации антимикробных агентов ЛС и для восстановления жизнеспособности поврежденных в технологическом процессе производства клеток.

Качество питательных сред - это тот фактор, от которого наравне с правильно выбранным методом испытания и квалификацией персонала зависит достоверность, воспроизводимость и повторяемость микробиологических анализов. Поэтому экспериментальное качество питательных сред подтверждается перед анализом микробиологической чистоты ЛС.

Проведенное научно-экспериментальное изучение качества питательных сред обосновывает общий подход к оценке их биологических свойств, который был разработан нами и утвержден в ВФС 42-3455-99 "Определение ростовых свойств питательных сред". На модельных опытах с тест-штаммами и с естественно контаминированными образцами Альмагеля, таблеток Карбамазепина, Феназепама, субстанции Метилурацила, листьев Ортосифона тычиночного подтверждено качество среды №1^ГРМ, сухой. Результаты, представленные на рис.5, показывают, что количество КОЕ тест-микроорганизмов и бактерий из ЛС находилось в пределах от 86 до 98 %, если за 100 % принять количество КОЕ, выросших на соево-казеиновом агаре. Аналогичные результаты были получены для других питательных сред, используемых для контроля качества ЛС. Таким образом, результаты изучения ростовых свойств питательных сред позволяют обосновать возможность их использования для целей микробиологического контроля качества ЛС.

Рис.5 Количество тест-микроорганизмов и КОЕ/г в контаминированных препаратах (время инкубации 48 ч)

Обозначение : Ряд 1- Количество КОЕ, выросших на соево-казеиновом агаре принято за 100%; Ряд 2- КОЕ, выросших на среде №1^ГРМ в % по отношению к первому ряду.

По оси абсцисс - 1 - B. cereus, 2- B. subtilis, 3- E. coli, 4- S. aureus, 5- Альмагель,

6- Карбамазепин таблетки, 7- Метилурацил субстанция, 8- Феназепам таблетки,

9- Ортосифона тычиночного листья

По оси ординат - количество КОЕ, %

В настоящее время в ГФ XI изд. для количественного определения бактерий, выделяемых из НЛС, рекомендована среда №1, приготовленная на основе мясной воды. В последних изданиях ЕР и USP для тех же целей предложена соево-казеиновая среда, в составе которой содержится 0,5% папаинового гидролизата бобов сои и 1,5% панкреатического гидролизата казеина. Переход на питательные среды с соевой основой перспективен и в нашей стране. Это обосновано их стандартностью, высокой биологической ценностью, уникальным химическим составом и относительной дешевизной сои. В связи с этим является актуальным разработка рецептов сред на соевой основе и оценка их ростовых свойств с использованием фармакопейных тест-микроорганизмов и бактерий, часто выделяемых из НЛС. Результаты представлены в виде коэффициентов прорастания (К_пр), т.е. отношением среднего числа колоний, выросших на испытуемой среде, к среднему числу колоний на контрольной среде. Данный раздел включает эксперименты по сравнению сконструированных сред (пептонно-соевого и казеиново-соевого) со средой №1^ГРМ и соево-казеиновым агаром (Casein Soya Bean Digest Agar, Merck, №1.05458). Статистически обработанные значения К_пр на испытуемых средах колебались от 0,5 до 1,2 (К_пр=1,0 на соево-казеиновом агаре (табл. 7). В соответствии со стандартом ИСО XP CEN ISO/TS 11133-2 (2004 г.) К_пр должен быть не менее 0,7. Экспериментальные партии были наработаны на ОАО "Биомед" и с положительными результатами прошли апробацию в ИСКЛС.

Таблица 7

Коэффициенты прорастания тест-штаммов на испытуемых питательных средах

Тест-микроорганизмы	Коэффициенты прорастания на питательных средах
	Соево-казеиновый агар (Merсk)	СКА (ОАО "Биомед")	№1ГРМ (п.Оболенск)
B.cereusATCC 10702	1,0	0,9	0,5
B.subtilis ATCC 6633	1,0	1,2	0,7
E. coli ATCC 25922	1,0	1,2	0,9
S.aureus ATCC 6538	1,0	1,2	1,0

Как видно из табл.7 предложенные среды не уступали традиционным.

Важным результатом выполненных исследований явились размеры клеток бактерий, культивируемых на испытуемых средах. Определение проводили в сравнении с размерами клеток бактерий по определителю Берджи (р. Bacillus 1,2-7,0 - 0,3-2,2, p. Escherichia 0,4-0,7 - 1,0-3,0, p. Staphylococcus 0,5-1,5 мкм в диаметре) (табл. 8).

Таблица 8

Размеры клеток фармакопейных тест-микроорганизмов на питательных средах

Тест-микро- Организмы	Размеры клеток тест-микроорганизмов на питательных средах, мкм
	Соево-казеиновый агар (Merсk)	СКА (ОАО"Биомед")	№1ГРМ (п.Оболенск)
	Длина	Ширина	Длина	Ширина	Длина	Ширина
B.cereus ATCC 10702	3,94+0,50	1,00+0,15	4,26+0,59	1,14+0,13	4,14+0,44	1,10+0,06
B.subtilis ATCC 6633	3,13+0,47	0,62+0,10	3,48+0,53	0,66+0,07	4,41+0,50	0,72+0,08
E. coli ATCC 25922	2,27+0,43	0,54+0,08	2,29+0,38	0,52+0,06	2,11+0,37	0,55+0,07
S.aureus ATCC 6538	Диаметр 0,59+0,04	Диаметр 0,52+0,05	Диаметр 0,52+0,06

Выполненное сравнительное изучение роста тест-микроорганизмов продемонстрировало высокие Кпр (от 0,9 до 1,2) через 24 ч инкубации, типичный вид колоний, а также характерные размеры клеток в мазках после окраски по Грамму доказывают целесообразность использования агара на основе соевого гидролизата в качестве среды для подсчета микроорганизмов-контаминантов ЛС.

Пути совершенствования эффективности работы микробиологических лабораторий в сфере лекарственного обращения

Микробиологические лаборатории фармацевтических предприятий и контрольных служб отличаются от других лабораторий. Это связано с тем, что сотрудники проводят контроль качества заведомо стерильной или незначительно контаминированной продукции при четком соблюдении правил GMP и GLP. В используемых в настоящее время нормативных документах приводятся только обобщенные положения работы любых лабораторий подобной направленности. При проектировании новых или перепланировке существующих лабораторий имеются отличительные особенности, без учета которых невозможно их дальнейшее функционирование. Микробиологический анализ на фармацевтическом производстве строго ограничен по времени в связи с экономическим аспектом. Основываясь на проведенном научно-экспериментальном изучении комплекса вопросов, связанных с микробиологическим контролем качества ЛС, определена необходимость решения этих вопросов в системе.

Система микробиологического контроля качества лекарственных средств (СМКК ЛС) - направление фармацевтической микробиологии, - комплекс элементов, технических средств и организационных мероприятий, обеспечивающих качество и безопасность ЛС по микробиологическим показателям. СМКК ЛС в составе контроля качества (QC), обеспечения качества (QA), надлежащей производственной (GMP) и лабораторной (GLP) практик является частью Государственной системы контроля качества, эффективности и безопасности ЛС, утвержденной Федеральным законом "О лекарственных средствах"(№86-ФЗ от 22 июня1998 г.)

Структура СМКК представлена следующими элементами:

1.Требования к качеству в виде допустимых пределов количественного содержания бактерий и грибов, а также ограничения по наличию или количественному содержанию определенных бактерий в лекарственных препаратах, субстанциях и вспомогательных веществах.

2.Методы микробиологического контроля качества ЛС.

3.Методы микробиологического мониторинга производственных и лабораторных помещений.

4.Питательные среды с гарантированными ростовыми и селективными свойствами и методами их определения.

5. Персонал, аттестованный на работу в контрольной службе.

6.Микробиологическая лаборатория (специализированный набор помещений) со специфическим оборудованием и методами его валидации и аттестации.

7.Документация (ОФС, ФСП, НД, СОП и др.)

Все элементы СМКК ЛС участвуют в оценке достоверности полученных результатов, подтверждая надежность указанной системы (рис. 7).

Методологический подход к совершенствованию СМКК ЛС с учетом особенностей разработанной системы действует на основе принципов: научности, адаптивности, оптимальности и экономичности (рис. 6).

Рис.6 Методический подход к совершенствованию СМКК ЛС

Рис.7 Оценка достоверности полученных результатов и принятия правильных решений в системе микробиологического контроля качества ЛС

Связи пользователей СМКК ЛС в составе системы Государственного контроля качества ЛС представлены на рис. 8.



Рис.8 Связи пользователей СМКК ЛС в составе системы Государственного контроля качества ЛС

Концепция рационального построения и функционирования СМКК ЛС:

1. Наличие современных нормативных документов, определяющих правовые нормы работы СМКК ЛС.

2. Взаимосвязь всех элементов СМКК, образующих 3 главных направления - регистрацию, производство и контроль качества ЛС.

3. Систематическое обучение персонала.

4. Регулярное проведение внутренних лабораторных проверок и периодическое выполнение заданий внешних аудитов.

ВЫВОДЫ

1. Созданная система микробиологического контроля качества лекарственных средств (СМКК ЛС), фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ позволяет обеспечить качество и безопасность ЛС по микробиологическим показателям и состоит из следующих элементов: - требования к качеству ЛС;

- методы микробиологического контроля и мониторинга производственных и лабораторных помещений; - питательные среды с гарантированными ростовыми и селективными свойствами и методами их определения; - персонал;

- микробиологическая лаборатория (специализированный набор помещений) со специфическим оборудованием и методами его валидации и аттестации;

- документация (ОФС, ФСП, НД, СОП и др.).

2. На основе системного анализа отечественных и зарубежных ЛС определено качество различных лекарственных форм фармацевтических препаратов по микробиологическим показателям и показана зависимость уровня контаминации микроорганизмами от природы ЛС: препараты на основе субстанций природного происхождения не соответствовали требованиям в 1,9%, лекарственные растительные средства - в 3,5%. Представленные методы определения микробиологической чистоты различных форм растительных препаратов в соответствии с утвержденной в ОФС 42-0016-04 схемой исключают преинкубацию в лактозном бульоне (среда №11), что сокращает сроки и трудоемкость анализа на 5 ч и приводит к экономии питательной среды.

3. Выявлено, что характер микрофлоры, выделяемой из ГЛС, фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ является полиморфным и обнаруживается преимущественно в виде аэробных бактерий, дрожжевых и плесневых грибов. Проведенный анализ количественного содержания и видового состава дрожжевых и плесневых грибов показал, что 28,9% изученных 570 серий 150 наименований ЛС содержали грибы выше допустимых пределов, при этом 69% идентифицированных штаммов 70 видов из 17 родов относились к родам Penicillium, Aspergillus, Mucor.

4. На основании анализа уровня микробиологической чистоты ЛС в нашей стране и за рубежом представлены и утверждены требования по микробиологической чистоте ЛС, гармонизированные с Европейской Фармакопеей. Впервые в России обозначены и утверждены нормы допустимого содержания бактерий и грибов в фармацевтических субстанциях и вспомогательных веществах.

5. Установлено антимикробное действие в условиях испытания микро-биологической чистоты различных ЛС, не являющихся бактериостатическими и фунгистатическими, а относящихся к фармакотерапевтическим группам: нейротропные, антидепрессанты, седативные, антигистаминные, спазмолитические, гипотензивные, сосудорасширяющие и др. Полученные результаты подтвердили необходимость определения антимикробного действия ЛС во избежание получения ложноотрицательных результатов контроля и возможность проводить анализ микробиологической чистоты в полном или сокращенном объеме. Разработанные методики определения антимикробного действия позволят стандартизовать подготовительный этап контроля качества ЛС.

6. Внедрены (ОФС 42-0067-07) современные методы количественного определения микроорганизмов в ЛС, в том числе альтернативный метод, который отличается экономичностью (за счет сокращения количества питательной среды) и высокой эффективностью ввиду ускоренного (48-72 ч) образования колоний, четкого, компактного их формирования, облегчающего их количественный учет. Выполненная валидация предложенного метода позволяет рекомендовать его для получения достоверных результатов в более короткие сроки. Разработанные методологические приемы определения отдельных видов бактерий-контаминантов ЛС (ОФС 42-0067-07) содержат испытание на наличие E.coli, Salmonella sp., P.aeruginosa, S. aureus, количественное определение E.coli, энтеробактерий и других родственных им грамотрицательных микроорганизмов. Они позволяют оценить качество ЛС на сухих питательных средах отечественного производства наравне с сухими и готовыми импортными питательными средами.

7. Апробация и сравнительное изучение отечественных аналогов Соево-казеинового агара, питательных сред типа Мосселя и Мак-Конки, изготовленных на ОАО "Биомед", наряду с зарубежными, позволяет рекомендовать их для использования в схемах испытания качества НЛС по показателю "Микробиологическая чистота".

Используемые сокращения:

GMP - правила надлежащей производственной практики

GLP - правила надлежащих лабораторных испытаний

ЛС - лекарственные средства

ЛП - лекарственный препарат

ГЛС- готовое лекарственное средство

НЛС - нестерильные лекарственные средства

ЛРС - лекарственные растительные средства

ИСКЛС ФГУ НЦ ЭСМП Росздравнадзора - Институт стандартизации и контроля лекарственных средств Федерального Государственного Учреждения Научный Центр экспертизы средств медицинского применения Росздравнадзора

ГФ - Государственная Фармакопея

ОФС - общая фармакопейная статья

ВФС - временная фармакопейная статья

Метод НВЧ - метод наиболее вероятных чисел

ОЧБ - общее число бактерий

ОЧГ - общее число грибов

К_пр - коэффициент прорастания питательной среды

СПИСОК НАУЧНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Гунар, О.В. Различные модификации среды Сабуро для количественного определения грибов, контаминирующих нестерильные лекарственные средства / О.В. Гунар, К.А. Каграманова// Химико-фармацевтический журнал.- 1992.- №6.- С.67-68.

2. Каграманова, К.А. Сравнительное изучение микробной загрязненности лекарственного растительного сырья и препаратов, изготовленных на его основе / К.А. Каграманова , О.В. Гунар // Фармация.- 1992.- №6. - С.24-26.

3. Каламова, Н.И. Изменение к статье ГФ XI изд. "Методы микробиологического контроля лекарственных средств"/ Н.И. Каламова, К.А. Каграманова, О.В. Гунар [и др.]// Фарматека.- 1997.- №1.- C.37-38.

4. Каламова, Н.И. Проекты фармакопейных статей. Дополнение к статье ГФ XI изд. "Методы микробиологического контроля лекарственных средств"/ Н.И. Каламова, К.А. Каграманова, О.В. Гунар [ и др.] //Фарматека.-1995.-№5.- С.7-8.

5. Каламова, Н.И. Определение ростовых свойств питательных сред / Н.И. Каламова, К.А. Каграманова, О.В. Гунар [и др.] // Ремедиум. Ведомости Научного Центра экспертизы и государственного контроля лекарственных средств МЗ РФ (НЦ ЭГКЛС). - 2001.- №2 (6).- С.75-76.

6. Каламова, Н.И. Количественное определение микроорганизмов в нестерильных лекарственных средствах/ Н.И. Каламова, К.А. Каграманова, О.В. Гунар// Ремедиум. Ведомости Научного Центра экспертизы и государственного контроля лекарственных средств МЗ РФ (НЦ ЭГКЛС). -2001.- № 2(6).- С.77-78.

7. Гунар, О.В. Валидация питательных сред, используемых для контроля микробиологической чистоты лекарственных средств/ О.В. Гунар, К.А. Каграманова, Н.И. Каламова // Мат-лы Междунар. науч.-практ. конф.: Химия в технологии и медицине. Махачкала, 2001.- С.53-54.

8. Гунар, О.В Микробиологический мониторинг окружающей среды фармацевтических производств/ О.В. Гунар, К.А. Каграманова// Мат-лы междунар. семинара: Современные проблемы химии и технологии косме-тических средств. Консерванты в косметике. РКПА , 2001.- С. 2-7.

9. Каграманова, К.А. Изменение N2 к статье ГФ XI изд. "Методы микробиологического контроля лекарственных средств" / К.А. Каграманова, Н.И. Каламова, О.В. Гунар // Ремедиум. Ведомости Научного Центра экспертизы и государственного контроля лекарственных средств МЗ РФ (НЦ ЭГКЛС).- 2002.- №1(9).- С.33-39.

10. Гунар, О.В. Определение качественного состава микофлоры в лекарственных средствах и сырье/ О.В. Гунар, Н.С. Евтушенко// Ремедиум. Ведомости Научного Центра экспертизы и государственного контроля лекарственных средств МЗ РФ (НЦ ЭГКЛС).- 2002.- №1(9).- С.110-112.

11. Гунар, О.В. К вопросу о качестве лекарственного растительного сырья по показателю "Микробиологическая чистота" / О.В. Гунар, Г.М. Булгакова, Н.И. Каламова [и др.]// Фармация.- 2002.- №1.- С.19-22.

12. Гунар, О.В. Проблемы оценки качества лекарственных средств по показателю "Микробиологическая чистота" на стадии Государственного контроля/ О.В. Гунар, К.А. Каграманова, Н.И. Каламова [и др.]// Ремедиум. Ведомости Научного Центра экспертизы и государственного контроля лекарственных средств МЗ РФ (НЦ ЭГКЛС). -2002.- №1(9).- С. 102-106.

13. Гунар, О.В. Качественный и количественный состав грибов-контаминантов нестерильных лекарственных средств/ О.В. Гунар // Мат-лы обучающего семинара: Современные требования к организации и деятельности микробиологических лабораторий отделов контроля качества фармацевтических предприятий. М., 2001г.- С.76-77.

14. Гунар, О.В. Определение антимикробного действия лекарственных средств. Практические подходы/ О.В. Гунар, Н.И. Каламова, Н.С. Евтушенко // Фармация. - 2002.- №2.- С.4-7.

15. Гунар, О.В. Микробиологическая лаборатория для контроля качества лекарственных средств по показателю "Стерильность": устройство и оборудование/ О.В. Гунар, К.А. Каграманова, А.Ф. Рылин// Химико-фармацевтический журнал.- 2002.- Т.36. № 6.- С.52-54.

16. Каграманова, К.А. Испытание на стерильность. Методы микробиологического контроля лекарственных средств. Проект Общей фармакопейной статьи для ГФ XII изд./ К.А. Каграманова, Н.И. Каламова, С.В. Денисова [и др.]// Ремедиум. Ведомости Научного Центра экспертизы и государственного контроля лекарственных средств МЗ РФ (НЦ ЭГКЛС).- 2002.- №2.- С.52-58.

17. Гунар, О.В. Особенности контроля качества некоторых лекарственных средств с противогрибковым действием по показателю "Микробиологическая чистота" / О.В. Гунар, Н.И Каламова., Н.С. Евтушенко // Химико-фармацевтический журнал. - 2003. - Т.37. №1. - С.46-48.

18. Гунар, О.В. Валидация метода количественного определения аэробных бактерий и грибов, выделяемых из лекарственных средств. Альтернативный агаровый метод / О.В. Гунар // Химико-фармацевтический журнал. - 2003. - Т.37. № 3.- С.53-56.

19. Гунар, О.В. Особенности испытания лекарственных растительных средств на микробиологическую чистоту / О.В. Гунар // Фармация.- 2003.- №3.- С.5-8.

20. Гунар, О.В. Микробиологические аспекты анализа качества воды / О.В. Гунар // Фармация.- 2003.- №1.- С.21-23.

21. Гунар, О.В. Использование нейтрализующей жидкости для снятия антимикробного действия некоторых лекарственных средств // О.В. Гунар/ X Рос. нац. конгр.: Человек и лекарство. М., 2003.- С. 710.

22. Гунар, О.В. Разработка питательных сред для контроля микробиологической чистоты нестерильных лекарственных средств на основе ферментативного гидролизата соевой муки / О.В. Гунар, К.А. Каграманова // Мат-лы Междунар. науч.-практ. конф.: Разработка и стандартизация микробиологических питательных сред и тест-систем. Махачкала, 2003.- С.62-63.

23. Гунар, О.В. Сравнение селективных свойств диагностических питательных сред для выделения Salmonella spp. / О.В. Гунар // Мат-лы Междунар. науч.-практ. конф.: Разработка и стандартизация микробиологических питательных сред и тест-систем. Махачкала, 2003.- С.11-12.

24. Гунар, О.В. Этапы контроля качества питательных сред, используемых в фармацевтической микробиологии, на стадии их валидации. / О.В. Гунар // Мат-лы Междунар. науч.-практ. конф.: Разработка и стандартизация микробиологических питательных сред и тест-систем. Махачкала, 2003.- С.71-72.

25. Гунар, О.В. Некоторые аспекты использования метода мембранной фильтрации при контроле стерильности некоторых лекарственных средств/ О.В. Гунар, А.С. Колбикова// Мат-лы XI конгр.: Человек и лекарство. М., 2004.- С. 867.

26. Гунар, О.В. Значение количеств тест-микроорганизмов, вносимых в чашки Петри при определении антимикробного действия лекарственных средств/ О.В. Гунар, Г.М. Булгакова // Мат-лы XI Рос. нац. конгр.: Человек и лекарство. М., 2004,- С. 20.

27. Гунар, О.В. Развитие методов оценки безопасности лекарственных препаратов/ О.В. Гунар, С.И.Столяров, А.Г. Ковалев, [и др.]// Мат-лы XV Междунар. Симпозиума: Медико-экологическая безопасность, реабилитация и социальная защита населения. Италия, 2004.- С.227-232.

28. Гунар, О.В. Определение и нейтрализация антимикробного действия лекарственных средств/ О.В. Гунар // Фармация.- 2004.-№3.- С.5-8.

29. Гунар, О.В. Метод мембранной фильтрации в контроле качества лекарственных средств/ О.В. Гунар, А.С. Колбикова// Фармация.- 2004.- №4.- С.11-13.

30. Науменко, А.В. Роль биомеханических характеристик бактерий при фильтрационном анализе стерильности лекарственных средств/ А.В. Науменко, О.В. Гунар, Н.С. Снегирева// Мат-лы VII Всерос. конф. по биомеханике. 2004 , Н. Новгород.- Т.2.- С.81-82.

31. Гунар, О.В. Совершенствование методов микробиологического контроля качества лекарственных средств / О.В. Гунар // Мат-лы VII съезда фармацевтов Республики Беларусь: Фармация XXI века. Витебск, 2004.- С.147-149.

32. Гунар, О.В. Разработка критериев оценки работы специалистов-микробиологов фармацевтических производств и контрольных служб / О.В. Гунар // Мат-лы VII съезда фармацевтов Республики Беларусь: Фармация XXI века. Витебск, 2004.- С.49-51.

33. Каграманова, К.А. Сравнение жидких питательных сред, применяемых для выделения Salmonella из нестерильных лекарственных средств/ К.А. Каграманова, О.В. Гунар, И.А. Буйлова// Мат-лы - XII Рос. нац. конгр.: Человек и лекарство. М., 2005.- С.19-20.

34. Денисова, С.В. Особенности отбора образцов при контроле стерильности лекарственных средств / С.В. Денисова, О.В. Гунар, Е.С. Новик [и др.]// Мат-лы XII Рос. нац. конгр.: Человек и лекарство. М., 2005.- С.16.

35. Гунар, О.В. Риск получения ложных микробиологических результатов при контроле качества лекарственных средств/ О.В. Гунар// Фармация.-2005.-№2.- С.29-31.

36. Гунар, О.В. Определение антимикробного действия лекарственных средств различными методами/ О.В. Гунар, К.А. Каграманова// Химико-фармацевтический журнал.-2005.- Т.39. №5. - С.53-56.

37. Гунар, О.В. Анализ риска получения ложных результатов контроля качества лекарственных средств по микробиологическим показателям / О.В. Гунар // Мат-лы XVI междунар. конф. АСИНКОМ: Правила GMP: задачи и опыт внедрения. Техника чистых помещений. М., 2005.- С. 56-59.

38. Гунар, О.В. Изучение антимикробного действия некоторых нейротропных лекарственных средств в условиях испытания микробиологической чистоты препарата/ О.В. Гунар// Мат-лы 60-й регион. конф.: Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции. Пятигорск, 2005.- С.326.

39. Гунар, О.В. Зависимость уровня микробиологической чистоты лекарственных средств от природы субстанций/ О.В. Гунар, К.А. Каграманова // Мат-лы IX междунар. съезда: Фитофарм. С.-Пб., 2005.- С.249-251.

40. Гунар, О.В. Современные методы выделения E. coli и Salmonella из нестерильных лекарственных средств/ О.В. Гунар // Фармация.- 2005.- №4.- С.42-46.

41. Гунар, О.В. Современные методы контроля микробиологической чистоты поверхностей при мониторинге помещений фармацевтических предприятий и контрольных лабораторий/ О.В. Гунар, С.Ю. Шишканов //Медицинский бизнес - Лекарства.- 2005.- №7-8 (131-132).- С.38-41.

42. Гунар, О.В. Особенности подготовки таблетированных препаратов для посева на микробиологическую чистоту/ О.В. Гунар, Г.М. Булгакова, Т.Н. Красильникова// Мат-лы XII Рос. нац. конгр.: Человек и лекарство. М., 2005.- С.656.

43. Гунар, О.В. Изучение возможности переживания микроскопических грибов в НЛС и вспомогательных веществах для их производства/ О.В. Гунар// Химико-фармацевтический журнал. -2006.- Т.40. №2.- С.54-56.

44. Денисова, С.В. Изучение эффективности антимикробных консервантов некоторых отечественных лекарственных средств/ С.В. Денисова, О.В. Гунар, Ж.И. Аладышева // Ведомости НЦ ЭСМП,-2006,- №1, с. 70-73.

45. Гунар, О.В. К вопросу о контроле качества некоторых антигистаминных лекарственных средств (ЛС) по показателю "Микробиологическая чистота"/ О.В. Гунар// Мат-лы 61 рег. конф.: Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции. Пятигорск, 2006.- С.188-189.

46. Багирова, В.Л. Направления развития микробиологического контроля лекарственных средств в Российской Федерации/ В.Л. Багирова, О.В. Гунар, К.А. Каграманова, [и др.]// Ведомости НЦ ЭСМП. - 2006.- №2.- С. 65-67.

47. Гунар, О.В. Микробиологическая чистота новой лекарственной формы антисептических препаратов для местного применения / О.В. Гунар, А.С. Колбикова // Ведомости НЦ ЭСМП.-2006.- №2.- С. 75-76.

48. Гунар, О.В. Гармонизация подходов к анализу качества питательных сред, используемых для микробиологического контроля лекарственных средств с международными требованиями/ О.В. Гунар, К.А. Каграманова, В.А. Мельникова// Мат-лы Всерос. науч.-практ. конф.: Вакцинология 2006. Совершенствование иммунобиологических средств профилактики, диагностики и лечения инфекционных болезней. М., 2006.- С.37-38.

49. Новик, Е.С. Изучение качества некоторых препаратов инсулина по показателю "Стерильность" / Е.С. Новик, О.В. Гунар// Химико-фармацевтический журнал. - 2007.- Т.41. №3.- С.55-56.

50. Гунар, О.В. Влияние некоторых лекарственных средств, обладающих антимикробным действием, на морфометрические характеристики Bacillus cereus АТСС 10702/ О.В. Гунар, Г.М. Булгакова// Мат-лы XIV Рос. нац. конгр.: Человек и лекарство. М., 2007. - С.14.

51. Новик, Е.С. Особенности пробоподготовки некоторых лекарственных средств при определении размера частиц методом Каултера / Е.С. Новик, О.В. Гунар // Мат-лы XIV Рос. нац. конгр.: Человек и лекарство. М., 2007. - С.26.

52. Денисова, С.В. Сравнение методов определения антимикробной активности препаратов хлорофиллипта в масле / С.В. Денисова, О.В. Гунар // Мат-лы XIV Рос. нац. конгр.: Человек и лекарство. М., 2007.- С.16-17.

53. Гунар, О.В. Современное положение и задачи фармацевтической микробиологии, как одного из разделов микробиологии / О.В. Гунар // Мат-лы XIV съезда Всерос. науч.-практ. общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов: Итоги и перспективы эпидемического благополучия населения Российской Федерации. М., 2007.- т.1.- С.142-143.

54. Зилфикаров, И.З. Вопросы стандартизации препарата Хлорофиллипт раствор в масле 2% / И.З. Зилфикаров, О.В. Гунар // Фармация.- 2007.- №3.- С.7-9.

55. Гунар, О.В. Пробоподготовка лекарственных препаратов на основе клея БФ-6 перед испытанием на микробиологическую чистоту/ О.В. Гунар, А.С Колбикова// Мат-лы XIV Рос. нац. конгр.: Человек и лекарство. М., 2007.- С.15.

56. Гунар, О.В. К вопросу о качестве препарата уголь активированный по показателю "Микробиологическая чистота" / О.В. Гунар, А.С. Колбикова // Мат-лы XV Рос. нац. конгр.: Человек и лекарство. М., 2008.-С.535.

57. Новик, Е.С. Определение частиц в неиньекционных лекарственных средствах методом Каултера/ Е.С. Новик, О.В. Гунар // Мат-лы XV Рос. нац. конгр.: Человек и лекарство. М., 2008.- С. 555.

58. Гунар, О.В. Влияние фунгистатического действия некоторых противогрибковых препаратов на морфологические характеристики Candida Albicans NCTC 885-653/ О.В. Гунар, Г.М. Булгакова, Т.Н. Красильникова// Мат-лы XV Рос. нац. конгр.: Человек и лекарство. М., 2008.-С. 535.

59. Денисова С.В. К вопросу устранения антимикробного действия некоторых лекарственных средств для наружного применения при контроле по показателям "Стерильность" и "Микробиологическая чистота" / С.В. Денисова, О.В. Гунар // Мат-лы XV Рос. нац. конгр.: Человек и лекарство. М., 2008.- С.536.

60. Гунар, О.В. Проблемы, возникающие при оценке качества фармацевтических субстанций по микробиологическим показателям/ О.В. Гунар, К.А. Каграманова// Мат-лы 63 рег. конф.: Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции. Пятигорск, 2008.- С.401-402.

61. Гунар, О.В. Руководство по медицинской микробиологии. Общая и санитарная микробиология. Книга 1 /О.В. Гунар, Л.А. Каграманова// Санитарно-микробиологическое исследование фармацевтических препаратов/ Под ред. А.С. Лабинской, Е.Г. Волиной. - М., Изд. БИНОМ, 2008.- С.989-1011.

62. Одегова, Т.Ф. Микроорганизмы и лекарства: опастность и польза /Т.Ф Одегова,. О.В. Гунар, Н.В Николаева // Мат-лы Российск. науч.-практ. конф.: Современное состояние и пути оптимизации лекарственного обеспечения населения. Пермь, 2008. - С. 27-29.

63. Одегова, Т.Ф. Методическое руководство. Микробиологический контроль качества лекарственных средств/ Т.Ф. Одегова, О.В. Гунар // Пермь, Изд. ПГФА, 2008. -68с.

ГУНАР Ольга Викторовна (Россия)

Методологические основы совершенствования

системы микробиологического контроля качества лекарственных средств

Предложен методологический подход по совершенствованию системы микробиологического контроля качества лекарственных средств (ЛС), как основы фармацевтической микробиологии, Проведена оценка результатов испытания микробиологической чистоты более 11,5 тыс. серий ЛС различных фармакологических групп и лекарственных форм. Выявлено, что наиболее контаминированными являются препараты на основе природных субстанций (1,9%) и лекарственных растительных средств (3,5%). Установлено, что 28,9% от 570 изученных серий НЛС содержали грибы выше допустимых пределов, Разработаны методы определения антимикробного действия ЛС, количественного и качественного определения аэробных бактерий, дрожжевых и плесневых грибов, энтеробактерий и других грамотрицательных бактерий, E. coli, Salmonella spp. Обоснованы схемы испытания различных ЛС (в том числе, растительных препаратов) на отечественных и зарубежных питательных средах. Разработаны рецептуры питательных сред на соевой основе и проведена их апробация. Об

общены принципы работы современных микробиологических лабораторий, занимающихся контролем качества ЛС на фармацевтических производствах и в контрольных службах.

Olga Victorovna Gunar

Methodological base of perfection of the system of control quality pharmaceutical preparation

We offered the methodological base of perfection of the system of control quality pharmaceutical preparation. There is a complex decision of drug microbiological control in pharmaceutical microbiology. More than 11500 series of pharmaceutical preparation have been controlled, various pharmaceuticals gropes and forms.

It was establish, that the preparations of the natural raw material and herb had the highest level of microbial contamination, exactly: 1,9% and 3,5%. From 570 inspected series 28,9% of non-sterile preparations had more molds, than in allowed. We worked out methods of microbial count (bacteria, moulds, yeasts, enterobacteria), methods of identification of bacteria (E. coli, Salmonella spp.).

There is guidance of various drugs examination using home and foreign nutritive media. The formulas of soya media have been formed. Media of firm "Biomed" were examined.

The work principles of modern microbiological laboratories whish control drugs in firms and control service have been summarized.

Размещено на Allbest.ru

...