Применение пребиотиков для восстановления биоценоза влагалища

Размещено на http://www.allbest.ru/

На правах рукописи

14.01.01 - Акушерство и гинекология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

ПРИМЕНЕНИЕ ПРЕБИОТИКОВ ДЛЯ ВОССТАНОВЛЕНИЯ БИОЦЕНОЗА ВЛАГАЛИЩА

ЧЕРНЫШОВА Е.А.

САМАРА 2010

Работа выполнена в ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации»

НАУЧНЫЙ РУКОВОДИТЕЛЬ

доктор медицинских наук, профессор МЕЛЬНИКОВ ВЛАДИМИР АЛЕКСАНДРОВИЧ ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ:

доктор медицинских наук ШАТУНОВА ЕЛЕНА ПЕТРОВНА

доктор медицинских наук КАНН НИНА ИВАНОВНА

Ведущая организация: ГОУ ДПО «Казанская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию РФ»

Защита диссертации состоится 19 марта 2010 года в 10.00 часов на заседании диссертационного Совета Д 208.085.04 при ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию РФ» (443079, г. Самара, пр-т К.Маркса, 165 ''б'').

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию РФ»» (443001, г. Самара, ул. Арцыбушевская, 171).

Автореферат разослан « » 2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук Е.С. Гасилина

1. Общая характеристика работы

Актуальность проблемы

Клинические исследования последних лет изменили традиционные взгляды на микробную этиологию инфекционно-воспалительных заболеваний, их диагностику и лечение. В настоящее время, на фоне роста ИППП, отмечается значительное распространение дисбиозов: инфекций протекающих с участием микроорганизмов из состава нормальной микрофлоры влагалища. Прежде всего, это связано с урбанизацией общества, ухудшением экологической обстановки, и является последствием бесконтрольного применения антибиотиков [Башмакова М.А., 1995, Акопян Т.Э., 1996, Кира Е.Ф., 2000].

Дисбиоз влагалища часто увеличивает риск акушерских осложнений, таких как: самопроизвольный выкидыш, преждевременные роды, преждевременное излитие околоплодных вод, хориоамнионит, внутриутробное инфицирование плода [Кулаков В.И., Серов В.Н., Кира Е.Ф. 2002; Мельников В.А. 2007, 2008].

Одним из наиболее частых гинекологических заболеваний является вагинальная инфекция, вызванная дисбиотическим процессом во влагалищном биотопе, вследствие чего отмечается усиленный рост облигатно-анаэробных бактерий. Триггерным механизмом, ведущим к возникновению дисбиоза влагалища является: применение антибиотиков, длительное использование контрацептивов, перенесённые раннее или сопутствующие воспалительные заболевания половых органов, нарушения гормонального статуса, постоянное влияние неблагополучной экологической среды, стрессовые воздействия на организм, частая смена полового партнёра (Целкович Л.С., Родкина.Р.А., Тум В.А., 1997; Доброхотова Ю.Э., Ясин С.В., Кареева Н.В., 2006).

Ярким проявлением дисбиоза влагалища является бактериальный вагиноз, частота которого среди женщин репродуктивного возраста составляет 15-25%, а среди пациенток с хроническими заболеваниями влагалища - 64-80% [Анкирская А.С., 2005г.].

Основополагающим принципом лечения бактериального вагиноза уже много лет было использование антибактериальных препаратов, что является агрессивным вмешательством в микроэкологическое равновесие и часто приводит к дисбиозу влагалища [Анкирская А.С., 2005, Захарова Т.В., 2005].

Для восстановления биоценоза влагалища после антибактериальной терапии используют эубиотики, пробиотики и симбиотики. В 13,2-24,6% наблюдений после лечения наблюдается рецидив заболевания из-за низкого уровня приживаемости чужеродных штаммов микроорганизмов во влагалище [Кисина В.И., 2003, Серов В.Н., 2004, Boselli F., 2004].

Использование для восстановления биоценоза влагалища биопрепаратов, содержащих аллогенные лактобактерии вагинального происхождения «Жмелик», не приводит к устойчивому восстановлению биоценоза и не имеет широкого распространения [Саркисов С.Э., 2000, Анохин В.А., 2001, Кафарская Л.И., 2005].

В последних научных публикациях в России (Мельников В.А, Денисова Н.Г., Высоцких Т.С., 2005, 2008, Ван Ликуй, 2006) и Германии (R. Kirkaam, 2001), была показана возможность выделения аутоштаммов лактобактерий у женщин, страдающих бактериальным вагинозом, до начала антибактериальной терапии. Кроме того, было доказано, что аутоштаммы вагинальных лактобактерий обеспечивают эффективное восстановление индивидуального биоценоза влагалища и достоверно снижают рецидив бактериального вагиноза.

В гастроэнтерологии с целью лечения дисбактериоза используются пребиотики [Лебедев В.А., 2005]. Многие авторы обращают внимание на единство дисбактериоза кишечника и дисбиоза влагалища [Кира Е.Ф., 1995, Царькова М.А., 1998], но для восстановления индивидуального биоценоза после антибактериальной терапии бактериального вагиноза пребиотики до настоящего времени не применялись, что является перспективным направлением и требует глубокого клинического изучения.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Изучение терапевтической и профилактической эффективности пребиотика из растительных моносахаридов в восстановлении индивидуального биоценоза влагалища у женщин с бактериальным вагинозом.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Обосновать выбор пребиотика из растительного гликогена для стимуляции роста аутолактобацилл.

2. Освоить получение пребиотика из растительного гликогена и методы его применения.

3. Изучить в эксперименте возможность культивирования in vitro молочнокислой флоры влагалища в среде из растительных моносахаридов.

4. Оценить состояние биоценоза у женщин с бактериальным вагинозом после санации влагалища и восстановления биоценоза пребиотиком из растительных моносахаридов.

5. Провести рандомизированное исследование клинической и профилактической эффективности восстановления биоценоза влагалища пребиотиком из растительных моносахаридов.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Впервые в акушерско-гинекологической практике применен метод восстановления индивидуального биоценоза влагалища после антибактериальной терапии бактериального вагиноза пребиотиком из растительного моносахарида (рационализаторское предложение № 588 от 09.04.2008).

Впервые доказана эффективность использования селективного пребиотика из растительного моносахарида для коррекции нарушенного биоценоза после антибактериальной терапии.

Разработаны и предложены критерии оптимальной тактики лечения бактериального вагиноза с использованием селективного пребиотика из растительного моносахарида (рационализаторское предложение № 579 от 14.02.08).

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

1. Доказано, что растительный гликоген по своему строению близок к гликогену животного происхождения, он может служить источником сырья для производства селективного пребиотика.

2. Разработанные технологии лечения пребиотиком, дают возможность эффективно восстанавливать микробиоценоз влагалища, нарушение которого обусловлено воздействием различных факторов.

3. Применение пребиотика стимулирует рост собственной молочнокислой флоры и формирует индивидуальный биоценоз влагалища.

4. При лечении бактериального вагиноза следует восстанавливать индивидуальный биоценоз, что приводит к достоверному снижению рецидивов бактериального вагиноза по сравнению с использованием для восстановления флоры влагалища аллогенных штаммов лактобактерий.

ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. Растительный гликоген по своему строению идентичен гликогену животного происхождения и может быть использован в качестве селективного пребиотика для стимуляции роста собственных лактобактерий.

2. Рост только молочнокислой флоры в среде из растительных моносахаридов in vitro доказывает селективность предложенного пребиотика, а применение его у конкретной женщины стимулирует формирование индивидуального биоценоза влагалища.

3. Способ восстановления нарушенного биоценоза влагалища, основанный на использовании селективного пребиотика, позволяет с высокой эффективностью восстанавливать молочнокислую флору влагалища при дисбиотических состояниях и достоверно снизить число рецидивов заболевания по сравнению с аллогенными пробиотиками.

ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ В ПРАКТИКУ

Результаты клинического исследования внедрены в лечебную практику перинатального центра Областной клинической больницы им. М.И.Калинина, женской консультации ММУ «Городская поликлиника №1» г.о. Самара.

Результаты исследований используются в учебном процессе на кафедре акушерства и гинекологии №1 ГОУ ВПО «СамГМУ Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию РФ».

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Результаты диссертационной работы доложены на межвузовской конференции молодых ученых «Аспирантские чтения - 2005» (г. Самара), Межвузовской конференции молодых ученых «Аспирантские чтения - 2006» (г. Самара), Всероссийском научно-практическом семинаре «Инновационные технологии в акушерстве и гинекологии» (Москва 2006), УIII Всероссийском научном форуме «Мать и Дитя» (Москва 2006), I-м Международном Семинаре «Инфекция в акушерстве и перинатологии» (Москва 2007), Всероссийской научно-практической конференции «Проблемы репродуктивного здоровья и безопасного материнства» (Пермь 2007), Республиканской научно-практической конференции «Инновационные технологии в охране репродуктивного здоровья женщины» (Екатеринбург 2007), научно-практической конференции «Рациональная фармакотерапия в акушерстве и гинекологии» (Самара 2009), на совместном заседании кафедр акушерства и гинекологии №1, акушерства и гинекологии №2, акушерства и гинекологии ИПО СамГМУ (Самара, 2009).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 7 печатных работ в материалах областных и региональных научно - практических конференций, одна из которых является статьей в реферируемых журналах списка ВАК РФ.

Получено 3 удостоверения на рационализаторские предложения.

СТРУКТУРА И ОБЪЁМ РАБОТЫ

Диссертация изложена на 125 страницах машинописного текста и включает в себя введение, обзор литературы, главу результатов собственных исследований и их обсуждения, выводы, практические рекомендации, 14 таблиц, 19 рисунков. Библиография содержит 187 источников, в том числе 121 отечественных и 66 зарубежных авторов.

2. Содержание работы

Материал и методы исследования

Объектом нашего исследования стали 163 женщины репродуктивного возраста с диагнозом «Бактериальный вагиноз» за период наблюдения с сентября 2006 по август 2009 гг., которые проходили лечение в женской консультации ММУ «Городская поликлиника № 1» г.о. Самара. Средний возраст составил 31,2 ± 4,4 года.

Методы исследования включали в себя клиническую часть - жалобы, анамнестические данные и социальный статус, исследование секреторной функции влагалища, гинекологический статус, лабораторные данные - рH-метрия, аминный тест, определение количества ВЖ, микроскопическое исследование вагинальных мазков, бактериологическое исследование материала.

Проведенное нами клиническое исследование условно было разделено на две части. Первая часть была экспериментальной, по культивированию in vitrо индивидуальной влагалищной молочнокислой флоры в среде из растительного моносахарида: 37 женщин с диагностированным бактериальным вагинозом. Одновременно мы оценивали эффективность восстановления биоценоза пребиотиком из растительного моносахарида на втором этапе лечения.

Вторая часть нашего исследования включала 126 женщин, которым было проведено рандомизированное исследование клинической и лабораторной эффективности восстановления биоценоза влагалища пребиотиком из растительного моносахарида.

Основная группа состояла из 62 пациенток, которым было проведено двухэтапное лечение. I этап - санация влагалища метронидазолом по 500 мг 2 раза в сутки per os 7 дней; II этап - восстановление биоценоза влагалища пребиотиком растительного происхождения.

Контрольную группу составили 64 пациентки, которым была проведена коррекция дисбиоза влагалища по следующей схеме: I этап: метронидазол по 500 мг 2 раза в сутки per os 7 дней. II этап: «Ацилакт» в виде интравагинальных свечей по одной 2 раза в сутки - 10 дней.

Препарат пребиотика для коррекции дисбиотических изменений во влагалище у больных бактериальным вагинозом готовили специалисты лаборатории ГУЗ СО «Клинического центра клеточных технологий» по предложенной нами методике (рационализаторское предложение №587 от 09.04.2008).

Сотрудниками кафедры акушерства и гинекологии № 1 СамГМУ был разработан график рандомизации и обеспечена верификация распределения. Полученные данные подвергались статистической обработке, которая осуществлялось с помощью лицензионного пакета программ Statistica (версия 5.1, фирмы Stat Soft). Для оценки статистической достоверности различий между категориями использовались метод хи-квадрат и критерий Фишера, а для оценки непрерывных переменных применялся t-тест с поправкой для неравной дисперсии. Оценка различий для количеств и результатов проводилась при помощи регрессионной модели. Логистическая регрессия использовалась для бинарных результатов с целью расчета уровня Р для сравнения между группами пациенток. Достоверность различий между сравниваемыми показателями определяли по критерию Стьюдента и его аналогу для непараметрических распределений - Критерию Манна-Уитни. Достоверными считали различия при степени доверительной вероятности 95% и выше (Углов Б.А., Котельников Г.П., Углова М.В., 1994).

Результаты лечения как основной, так и контрольной групп оценивались через 10 дней после начала лечения, через 1, через 3, 6 и 12 месяцев.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Сотрудниками кафедры акушерства и гинекологии №1 СамГМУ под руководством профессора В.А. Мельникова в 2004 году была создана накопительная среда из растительного моносахарида для молочнокислых бактерий. Нами впервые эта среда была использована в качестве пребиотика для стимуляции роста собственной молочнокислой флоры и восстановления индивидуального биоценоза влагалища (рационализаторское предложение №588 от 2 апреля 2008г.). Учитывая однородное строение гликогена, продуцируемого эпителиальными клетками влагалища и растительного крахмала, последний был нами использован как пребиотик растительного происхождения.

Изучив теоретическую часть проблемы, и обосновав выбор растительного пребиотика для стимуляции роста индивидуальной молочнокислой флоры влагалища, мы провели эксперимент по культивированию индивидуальной молочнокислой флоры в условиях in vitro. В эксперименте приняло участие 37 женщин с диагностированным по критериям Амсела бактериальным вагинозом.

Перед началом нашего исследования мы провели микроскопический и микробиологический анализ питательной среды из растительного гликогена. Полученные результаты исследования показали, что экспериментальная среда во всех случаях была стерильная: роста колоний микроорганизмов на жидкой и твердой питательных средах обнаружено не было, бактериоскопически бактерии не определялись, рН = 7,8.

Было проведено микроскопическое исследование мазков, окрашенных по Граму. Выраженные изменения микробиоценоза влагалища, присущие БВ наблюдались у всех 37 пациенток. Бактериологическое исследование качественного и количественного состава микрофлоры влагалища выявило у пациенток во влагалищной жидкости анаэробов 73,7%, аэробов 23,4%, т.е. соотношение анаэробов/аэробам 3,1: 1.

Лактобактерии были культивированы в 86,6% случаев в количестве lg 1,9±0,11 КОЕ/г, микроаэрофильные лактобактерии обнаружены в 17% случаев в концентрации lg 0,11±0,07.

Изучение видового и количественного состава микрофлоры влагалища у 37 женщин с БВ показало увеличение видового числа микроорганизмов с преобладанием строгих анаэробных бактерий и уменьшение количества молочнокислых бактерий.

Был установлен факт отсутствия лактобактерий у 13,4% пациенток, у 86,6% лактобактерии определялись, у 17% культивировались микроаэрофильные лактобактерии, продуцирующие в основном перекись водорода. На фоне снижения лактобактерий остальные компоненты флоры Додерлейн (Bifidobacterium spp. и Peptostreptococcus spp.) превышали показатели нормы как по встречаемости, так и по концетрации. Преобладающими микроорганизмами из флоры Додерлейн были пептострептококки, с частотой выделения 73,3%.

Доминирющими микроорганизмами у женщин с БВ были неспорообразующие анаэробы и гарднереллы. Наряду с этим во флоре Додерлейна имелся дисбаланс: уменьшение популяционной концентрации лактобацилл, увеличение концентрации и частоты выделения бифидобактерий, преобладание пептострептококков.

После заселения ВЖ пациенток в среду из растительного моносахарида, мы в течение 5 суток проводили исследование роста микроорганизмов. Микроскопия мазков из экспериментальной среды показала, что процесс размножения в среде из растительного моносахарида идет динамично и через 5 дней определяются однородные грамположительные палочки в количестве 60-100, другая флора не визуализируется. Среднее значение рН среды снижается до 3,8 ± 0,11.

Тестирование экспериментальной среды через 5 суток после культивирования в ней микроорганизмов из вагинального биотопа показало, что бактериологически определяется молочнокислая флора (Lactobacillus spp., Bifidobacterium spp. и Peptostreptococcus spp.) в достаточном количестве (105-106 КОЕ/г).

При идентификации микробных культур в экспериментальной среде из растительного гликогена после культивирования было установлено, что Lactobacillus spp. выявляются в количестве 104 и более КОЕ/г и в концентрации lg 6,5±0,21 КОЕ/г, Bifidobacterium spp. в количестве 10і и более КОЕ/г и в концентрации lg 1,17 ± 0,11 КОЕ/г, и Peptostreptococcus spp. в количестве 10І и более КОЕ/г и в концентрации lg 0,7 ± 0,11 КОЕ/г. Другая микрофлора не высевалась.

Таким образом, нами было доказано, что растительный моносахарид после специальной обработки может быть использован в качестве селективного пребиотика для стимуляции роста молочнокислой флоры in vivo.

С целью изучения эффективности селективного пребиотика для восстановления микробиоценоза влагалища было проведено обследование и лечение 37 женщин. Мы изучили возможность восстановления биоценоза влагалища пребиотиком из растительного моносахарида после лечения метронидазолом по стандартной схеме. Применяя метронидазол с целью санации влагалища, мы выявили, что лечение бактериального вагиноза дает достаточно хороший эффект в элиминации условно-патогенных микроорганизмов. Однако, у 17,8% женщин после санации метронидазолом развился вагинальный кандидоз, поэтому на втором этапе восстановления биоценоза участвовали 30 пациенток.

Проведенный анализ клинико-лабораторных данных, полученных при обследовании и лечении 30 пациенток, свидетельствует о высокой эффективности селективного пребиотика из растительного моносахарида.

После окончания курса терапии селективным пребиотиком у 82,3% пациенток исчезли такие проявления заболевания, как обильные патологические выделения из половых путей, запах, жжение во влагалище, дизурические расстройства.

Контрольное микроскопическое исследование показало, что у 82,2% женщин была достигнута элиминация анаэробных микроорганизмов, причем лактобактерии в вагинальном отделяемом занимали доминирующее положение, то есть достигнут нормоценоз влагалища.

Анализируя научные работы отечественных и зарубежных ученых, можно сделать вывод, что основной проблемой в лечении бактериального вагиноза является высокая частота развития реинфекций [Кира Е.Ф., 1990, 2006, Прилепская В.Н., 2002, Petersen E.E., 2004]. Поэтому, нами было проведено рандомизированное исследование с целью сравнительного изучения эффективности селективного пребиотика из растительного моносахарида, который восстанавливает индивидуальную лактофлору влагалища и аллогенного препарата «Ацилакт», который состоит из микробной массы живых ацидофильных бактерий.

Мы оценивали результаты лечения и изучали возникновение реинфекций заболевания в течение 12 месяцев.

Всем 126 женщинам был проведен I этап лечения: санация влагалища метронидазолом. Следует отметить, что после проведенной санации у 23 женщин (19%) был выявлен вульвовагинальный кандидоз, они были исключены из исследования. Оставшиеся 103 пациентки методом слепой выборки были разделены на две группы:

I основная группа - 51 женщина, которым проводилось восстановление биоценоза влагалища селективным пребиотиком из растительного моносахарида;

II контрольная группа - 52 женщины, которым восстановление биоценоза было проведено аллогенным препаратом «Ацилакт».

Эффективность терапии оценивали на основании клинических данных и результатов лабораторных исследований. Оказалось, что через 1 месяц после восстановления микробиоценоза влагалища был выявлен положительный клинический эффект как в первой, так и во второй группах. Жалобы, характерные для бактериального вагиноза исчезли у 84,3% пациенток I группы и у 78,8% - II группы.

При исследовании микроскопической картины мазка мы обнаружили нормоценоз у 82,4±3,2% женщин первой группы и у 78,8±2,8% пациенток второй группы, различия не явились статистически значимыми (р>0,05) (табл. 1). пребиотик моносахарид бактериальный вагиноз

При изучении других критериев БВ мы получили похожие результаты.

Таким образом, исследуя эффективность восстановления биоценоза влагалища через 1 месяц после лечения, мы пришли к выводу, что селективный пребиотик из растительного гликогена так же эффективен как применяемый в настоящее время препарат «Ацилакт».

Также нами было замечено, что через 1 месяц после восстановления биоценоза во II группе, у 1,9±0,6% (р<0,05) отмечен рецидив заболевания, в то время как в I группе рецидивов заболевания не было.

Таблица 1 Микроскопическая характеристика микроценоза влагалища в процессе рандомизированного исследования через 1 месяц.

Виды биоценоза	1 группа n=51	2 группа n=52
	абс.	%, M±m	абс.	%, M±m
Нормоценоз	42	82,4±3,2	41	78,8±2,8
Промежуточный тип	9	17,6±1,6	10	19,2±1,8
Дисбиоз влагалища	0	0	1	1,9±0,4*
Вагинит кандидозный	0	0	0	0

*различия статистически достоверны, р < 0,05

Через три месяца мы также не получили статистически достоверных различий, у 3 пациенток (5,9%) I группы и у 5 пациенток (9,8%) II группы появились субъективные жалобы. Отмечался рост женщин с нормоценозом 86,3±3,7%, который происходил за счет уменьшения числа пациенток с промежуточным типом мазка 11,8±0,9%. Рецидив заболевания возник у 2,0±0,4% пациенток за счет развития дисбиоза влагалища. При исследовании других показателей отмечен рост пациенток до 70,6±4,5% (р<0,05) с количеством ВЖ до 5г, увеличение доли женщин с рН 3,5-4,0 до 64,7±3,6%.

Во II группе выявлено некоторое ухудшение показателей, уменьшилось количество женщин с нормоценозом до 78,4±2,1%, что произошло за счет роста доли пациенток с дисбиозом влагалища 3,9±0,9% (р<0,05), а также выявлена 1 пациентка с кандидозным вагинитом 2,0±0,3% (р<0,05).

При исследовании количества влагалищной жидкости был отмечен рост доли женщин с весом ВЖ 10-15г (2,0±0,6%) и 15-20г (4,0±0,6%), уменьшилось количество пациенток с рН ВЖ 3,5-4,0 до 58,8±2,8%.

Таким образом, во II группе увеличилось количество рецидивов БВ до 5,9±0,9% (р<0,05) уже через 3 месяца после восстановления биоценоза за счет возникновения дисбиоза влагалища и кандидоза.

Более значимые различия и более выраженный положительный клинический эффект при применении селективного пребиотика из растительного моносахарида по сравнению с препаратом «Ацилакт» мы получили через 6 и 12 месяцев исследования.

В I группе субъективные жалобы, характерные для БВ появились у 9,8% через 6 месяцев и у 6,1% через 12 месяцев., в то время как во II группе - у 10,4% пациенток жалобы появились через 6 месяцев и у 20,9% через 12 месяцев. Появление субъективных признаков БВ мы связываем с изменениями микробиоценоза влагалища (табл. 2).

Таблица 2 Микроскопическая характеристика микробиоценоза влагалища через 12 месяцев.

Виды биоценоза	1 группа n=49	2 группа n=43
	абс.	% M±m	абс.	% M±m
Нормоценоз	42	85,7±4,6*	30	69,8±2,1
Промежуточный тип	6	12,2±1,6	6	14,0±1,9
Дисбиоз влагалища	1	2,0±0,3	4	9,3±1,3*
Вагинит кандидозный	0	0	3	7,0±1,3*

*различия статистически достоверны, р < 0,05

В I группе мы отметили прогрессивный рост доли пациенток с нормоценозом влагалища 84,0±4,9% (р<0,05) через 6 месяцев и 85,7±4,6%(р<0,05) через 12 месяцев. Это произошло за счет уменьшения количества пациенток с промежуточным типом мазка и дисбиозом влагалища. В течение всего исследования ни у одной женщины не развился кандидозный вагинит.

Пропорционально росту нормоценоза происходило значительное увеличение доли пациенток с весом ВЖ до 5г - 84,0±4,9% (р<0,05) через 6 месяцев и 85,7±5,1% (р<0,05) через 12 месяцев, увеличилось количество женщин с рН 3,5-4,0 до 66,0±3,2% (р<0,05) через 6 и 69,4±3,9% (р<0,05) через 12 месяцев соответственно. Ни у одной женщины в течение всего исследования не был выявлен положительный аминный тест, доля пациенток с отрицательным аминным тестом увеличилась с 60,8±4,6% в начале исследования до 63,3±3,0% (р<0,05).

Мы связываем такие улучшения всех показателей в течение одного года с тем, что селективный пребиотик из растительного моносахарида восстанавливает индивидуальную лактофлору влагалища, которая способна прогрессивно размножаться, конкурировать с условно-патогенными микроорганизмами и тем самым вызывать стойкий нормоценоз влагалища.

Рис. 1. Динамика изменения нормоценоза влагалища в основной и контрольной группах.

Это подтверждает незначительное количество рецидивов заболевания - 8,2±1,1%* через год после лечения пребиотиком.

Динамика изменения доли пациенток с нормоценозом влагалища в течение 12 месяцев представлена на рисунке 1.

В отличие от I группы, во II группе мы заметили прогрессивное ухудшение всех показателей: выросло число пациенток с клиническими признаками БВ - через 6 месяцев 10,4%, через 12 - 20,9%. Это связано с уменьшением доли женщин с нормоценозом влагалища с 71,9±2,8% через 6 месяцев после исследования до 69,8±2,1% через 12 месяцев. К 12 месяцам увеличилось количество женщин с дисбиозом влагалища до 9,3±1,8%(р<0,05) и вульвовагинальным кандидозом до 7,0±1,3% (р<0,05).

Увеличение количества рецидивов заболевания мы отмечали и по другим тестам. Выросла доля пациенток с количеством ВЖ 15-20г до 6,3±0,8% (р<0,05) через 6 месяцев и 7,0±0,7% (р<0,05) через 12 месяцев, в то время как в I группе таких пациенток не было.

Во II группе через 6 месяцев выявлен положительный аминный тест у 2,1±0,1% (р<0,05) и было отмечено увеличение к 12 месяцам до 4,7±0,7%(р<0,05). Такая же динамика отмечалась при исследовании рН-метрии. Нами был сделан вывод, что использование аллогенного препарата «Ацилакт» эффективно непосредственно после лечения, так как обеспечивает заселение влагалища живыми лактобактериями, которые восстанавливают нормоценоз влагалища. Но эти лактобактерии являются чужеродными, постепенно они погибают, что в большинстве случаев приводит к возникновению рецидива заболевания. По нашим данным в этой группе пациентов за год возникло 37,2±2,9% (р<0,05) рецидивов, что соответствует данным литературы [Кира Е.Ф., 1990, 2006, Мельников В.А., 2007,2008].

Таким образом, полученные результаты показали, что селективный пребиотик из растительного моносахарида, применяемый по разработанной нами схеме эффективно восстанавливает микробиоценоз влагалища сразу после применения и предотвращает рецидив БВ (табл. 3).

Таблица 3 Частота реинфекций в зависимости от способа восстановления биоценоза влагалища.

Показатель	Через 1 месяц	Через 3 месяца	Через 6 месяцев	Через 12 месяцев
	I группа n=51	II группа n=52	I группа n=51	II группа n=51	I группа n=50	II группа n=48	I группа n=49	II группа n=43
	% M±m	% M±m	% M±m	% M±m	% M±m	% M±m	% M±m	% M±m
Рецидив заболевания	0	1,9± 0,6*	2,0± 0,4	5,9± 0,9*	4,0± 0,3	10,4± 1,2*	2,0± 0,2	16,3± 1,7*
Всего за Один год							8,2± 1,1*	37,2± 2,9*

Клиническая и микробиологическая эффективность селективного пребиотика из растительного моносахарида и препарата «Ацилакт» в течение 12 месяцев представлена на рисунке 2.

Рис. 2. Клиническая и микробиологическая эффективность селективного пребиотика и препарата «Ацилакт» в течение 1 года исследования.

На рисунке показано, что применение как селективного пребиотика из растительного моносахарида так и «Ацилакта», непосредственно после лечения обладает выраженной терапевтической эффективностью, однако в течение года эффект от применения препарата «Ацилакт» уменьшается, а эффективность селективного пребиотика практически не изменяется.

Таким образом, селективный пребиотик из растительного моносахарида является эффективным препаратом на втором этапе лечения бактериального вагиноза.

Выводы

1. Проведенный эксперимент in vitro по культивированию молочнокислой флоры влагалища в среде из растительных моносахаридов доказал, что через 5 суток отмечается рост лактофлоры: Lactobacillus spp. выявлялись в количестве 104 и более КОЕ/г. Среднее значение рН среды снизилось с 7,8 до 3,8.

2. У женщин с бактериальным вагинозом общее число бактерий увеличивается до 109-1011КОЕ/г при соотношении анаэробов/аэробов 3,1:1. Лактобактерии культивировались у 86,6% женщин в значительно сниженной концентрации lg 1,9±0,11 КОЕ/г.

3. Санация влагалища метронидазолом приводит к элиминации анаэробной микрофлоры, при невысокой частоте выделения Lactobacillus spp. - 102 КОЕ/г.

4. Непосредственно после окончания курса восстановления биоценоза влагалища пребиотиком из растительных моносахаридов у 82,2% женщин была достигнута элиминация анаэробной микрофлоры, причем лактобактерии в вагинальном отделяемом занимали доминирующее положение - 108 КОЕ/г.

5. Разработанный нами способ восстановления биоценоза с применением селективного пребиотика из растительного гликогена позволяет нормализовать микробиоценоз влагалища на 2 этапе лечения бактериального вагиноза. В основной группе через 12 месяцев после лечения нормоценоз влагалища был достигнут у 85,7±4,6% (р<0,05), в контрольной группе - только у 69,8±2,1%, поэтому, в основной группе достоверно снизилось число рецидивов бактериального вагиноза до 8,2%.

Практические рекомендации

1. Для оптимизации результатов лечения у больных с БВ следует восстанавливать индивидуальный биоценоз влагалища.

2. Для восстановления нормоценоза влагалища мы рекомендуем применять селективный пребиотик из растительного моносахарида, с целью избирательной стимуляции роста лактобактерий и их метаболической активности.

3. Рекомендуемая нами схема терапии бактериального вагиноза: Первый этап - санация влагалища метронидазолом по 500 мг - 2 раза в день, 7 дней. Второй этап - шприцевое введение во влагалище 2-3мл среды селективного пребиотика из растительного моносахарида два раза в день, 10 дней.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1.Чернышова, Е.А. Прогнозирование и ранняя диагностика ИППП - основа догестационной подготовки в раннем репродуктивном возрасте /О.И. Краснянская, В.А. Мельников, Е.А. Чернышова// Материалы I Международного Семинара «Инфекции в акушерстве и перинатологии».- Москва, 2007. - С. 82-83.

2.Чернышова, Е.А. Состояние биоценоза влагалища при беременности. Эффективность ранней коррекции/Н.А. Семенова, Е.В. Павленко, М.А.Усова, Т.С. Высоцких, Е.А. Чернышова// Материалы I конференции молодых ученых медико-биологической секции Поволжской ассоциации государственных университетов. - Ульяновск, 2007. - С.173.

3.Чернышова, Е.А. Клиническая эффективность применения культуры собственных лактобацилл для восстановления биоценоза влагалища/В.А. Мельников, Н.А. Краснова, Т.С. Высоцких, Н.Г. Миронова, Е.А. Чернышова// Пермский медицинский журнал. Проблемы репродуктивного здоровья и безопасного материнства. - Т.24. - 1-2'2007. - С.36-38.

4.Чернышова, Е.А. Новый метод лечения бактериального вагиноза в догестационном периоде и в ранние сроки беременности/В.А. Мельников, Н.А. Краснова, О.Б. Калинкина, Е.А. Чернышова, Н.А. Семенова// Материалы I Международного Семинара «Инфекции в акушерстве и перинатологии».- Москва, 2007. - С. 101.

5.Чернышова, Е.А. Восстановление нарушенного микробиоценоза влагалища у беременных в I триместре беременности/В.А. Мельников, Э.Т. Нурмухаметова, Е.А. Чернышова, Н.Г. Миронова, М.А. Усова// Материалы I Международного Семинара «Инфекции в акушерстве и перинатологии».- Москва, 2007. - С. 101 - 102.

6.Чернышова, Е.А. Основные репродуктивные проблемы молодежи в современных условиях/В.А. Мельников, Н.А. Краснова, О.Б. Калинкина, О.В. Тюмина, Е.Е. Пилягина, М.А. Усова, А.П. Тикина, Н.А. Семенова, Н.Г. Миронова, В.Ю. Щукин, Д.М. Юсупов, М.Х. Беккиева, Е.А. Чернышова, Е.В. Ермолаева//Известия Самарского Научного Центра Российской Академии Наук. Специальный выпуск. XIII конгресс «Экология и здоровье человека». - Самара,2008. - Т.1 - С. 86-88.

7.Чернышова, Е.А. Новый метод восстановления биотопа влагалища при бактериальном вагинозе/В.А. Мельников, Н.А. Краснова, М.А. Усова, Е.А.Чернышова//Современные аспекты решения медико - социальных проблем репродуктивного здоровья женщин. - Самара, 2009. - С. 298 -301.

Рационализаторские предложения:

1.Чернышова, Е.А.Способ профилактики дисбиоза влагалища после антибактериальной терапии/ Т.С. Высоцких, Н.Г., Миронова, Д.М. Юсупов//Рационализаторское предложение № 579, принятое СамГМУ от 14 февраля 2008г.

2.Чернышова, Е.А. Способ лечения бактериального вагиноза, ассоциированного с вагинальным кандидозом/ Т.С. Высоцких, М.А. Усова, В.Ю. Щукин, Е.Е. Пилягина, Е.В., Ермолаева, М.Х. Беккиева, Е.А. Чернышова// Рационализаторское предложение № 588, принятое СамГМУ от 9 апреля 2008г.

3.Чернышова, Е.А. Способ лечения бактериального вагиноза с применением пребиотика/В.А. Мельников, Т.С. Высоцких, О.Б. Калинкина, Н.А. Краснова, Д.М. Юсупов, Е.Е. Пилягина// Рационализаторское предложение № 587, принятое СамГМУ от 9 апреля 2008г.

Список сокращений

БВ - бактериальный вагиноз

ВЖ - влагалищная жидкость

КОЕ - колонии образующие единицы

ИППП - инфекции, передающиеся половым путем

Размещено на Allbest.ru

...