Изучение метаболитов арахидоновой кислоты и иммунных параметров при атопическом дерматите

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Азербайджанский медицинский университет

Кафедра биохимии

Изучение метаболитов арахидоновой кислоты и иммунных параметров при атопическом дерматите

Азизова Гюльнара Ибрагим кызы, доцент кафедры биохимии,

Гасанова Шайман Ибрагим кызы, доцент.

Ариф М. Эфендиев, доктор биологических наук, профессор

В настоящее время во многих странах регистрируется устойчивая тенденция к росту числа аллергических заболеваний. Особое внимание уделяется проблеме атопического дерматита (АД) в связи с его высоким удельным весом в структуре как аллергологической, так и дерматологической патологии. По данным литературы, АД имеют от 4 до 23% детей [1-4]. У части детей формируются тяжелые формы заболевания, торпидные к традиционной терапии, имеющие прогрессирующее течение и приводящие к инвалидизации и снижению качества жизни [5].

Центральная роль в патогенезе АД отводится иммунной системе; заболевание рассматривается, как хроническое аллергическое иммунозависимое воспаление с генетической предрасположенностью к атопии и признаками развития вторичного иммунодефицитного состояния [6].

В последние годы опубликованы результаты исследования большого количества исследований, посвященных изучению иммунитета (неспецифического, клеточного, гуморального) у больных АД.

Целью настоящей работы явилось изучение роли антител G класса и их авидитета при атопическом дерматите; определение соотношения высоко- и низкоавидных антител, а также взаимосвязи между метаболитами арахидоновой кислоты и иммунными показателями.

Материалы и методы

Под наблюдением находилось 60 больных с АД в возрасте 14-40 лет (мужчин 63%, женщин - 37%). У большинства больных заболевание начиналось с первых лет жизни, при этом длительность заболевания у некоторых больных составляла 10-25 лет. Сопутствующей патологией чаще всего являлись аллергические заболевания - 50% и болезни желудочно-кишечного тракта - 30%. У 15% больных близкие родственники имели аллергические заболевания. Группой контроля служили 10 здоровых доноров в возрасте 16-30 лет.

Исследования проводились в биохимической лаборатории АМУ и в Институте Биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова в г. Москве. Содержание метаболитов арахидоновой кислоты - ЛТС₄, ЛТВ₄ и простагландинов определяли методом колоночной хроматографии на кремниевой кислоте с последующим анализом с помощью наборов реагентов «Amersham» (Англия), «Clinical Assay» (США) [7].

Оценку протективной активности В-системы иммунитета проводили на основании анализа конформационного состояния молекулы IgG и авидитета антител, для чего IgG₁ выделяли из сывороток крови доноров и больных АД методом хроматографии на ДЭАЭ сефарозе. Чистоту полученных препаратов подтверждали методом электрофореза в полиакриламидном геле и методом радиальной иммунодиффузии по Ухтерлони с применением коммерческих антисывороток к классам иммуноглобулинов и подклассам IgG человека, а также с помощью N-концевого секвенирования Fab и Fc фрагментов методом Эдмана. Fc фрагмент получали путем гидролиза иммуноглобулинов трипсином. Гидролиз проводили в 0,05 M NH₄HCO₃ буфере, pH 7,8, при 37?C, в течение 24 ч, при соотношении фермент: субстрат 1:20. Полученные фрагменты разделяли при помощи ионообменной хроматографии на ДЭАЭ-сефарозе [8-9].

Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью параметрических критериев пакета Biostat, 1998. Достоверность значимых различий средних показателей иммунитета оценивали с помощью парного t-критерия Стъюдента.

Результаты исследования и их обсуждение

Данные о содержании метаболитов арахидоновой кислоты у больных АД представлены в таблице 1. Для сравнительного анализа изученных показателей в периоде обострения все больные были разделены на 3 группы:

I группа - пациенты с неосложненным течением распространенного АД (n=20);

II группа - пациенты с осложненным течением распространенного АД (n=22);

Таблица 1. Содержание метаболитов арахидоновой кислоты у больных атопическим дерматитом.

Прим.: * p<0,05 ** p<0,01*** p<0,001.

III группа - пациенты с осложненным течением диффузного АД (n=18).

Полученные данные указывает на то, что в периоде обострения заболевания существенно увеличивается содержание ЛТС₄, ЛТВ₄. Уровень простагландинов практически не отличался от показателей у здоровых людей.

На основании корреляционного анализа удалось выявить две группы функционально значимых связей авидетета антител G класса с показателями иммунограммы: с одной стороны - с ЦИК, фагоцитарной активностью нейтрофилов, способностью нейтрофилов генерировать радикалы кислорода, т.е. с комплексом показателей, которые характеризуют течение реакций, обеспечивающих фагоцитоз аллергенсодержащих ЦИК, разрушение аллергенов и атопенов и выведение их из организма; с другой - с количеством метаболитов арахидоновой кислоты - Л ТС₄ ЛТВ₄и т.п.

Таблица 2. Иммунологические показатели у больных АД.

Секреция низкоавидных антител G класса с аномальной конформацией, низкой функциональной активностью, как было показано нами ранее, приводит к ряду последствий, среди которых наиболее важным в патогенетическом отношении является образование с антигеном мелких растворимых длительно циркулирующих в крови иммунных комплексов, неспособных активизировать классический путь системы комплемента и подключать каскад клеточно-опосредованных механизмов защиты. Такие мелкие растворимые ЦИК обладают цитофильностью, т.е. способностью к связыванию с тканями. Именно в силу этих причин можно считать, что аллергены и атопены, длительно циркулирующие в крови, ведут к гиперактивации В- и Т-звеньев иммунитета и супрессии антибактериальной активности макрофагальных клеток. С позиции нарастания низкоавидных IgG становятся объяснимыми персистенция в организме аллергенов и атопенов.

Таким образом, патогенез АД можно рассматривать как цепь взаимосвязанных механизмов, среди которых триггерная роль принадлежит недостаточности протективной функции В-системы иммунитета, связанной с секрецией антител G класса с низкими авидитетом и протективной активностью, при этом аллерген-специфические CD Th 2 клоны лимфоцитов выступают в качестве эффекторного звена, подключающего клеточно-опосредованные механизмы аллергического воспаления дермы.

Установлено, что у больных АД независимо от степени тяжести заболевания в крови происходит резкое снижение высокоавидных (до 12-25%) и нарастание низкоавидных (до 75-88%) антител G класса с аномальной конформацией и низкой функциональной и протективной активностьями, что свидетельствует о нарушении протективной функции В-системы иммунитета. Супрессия протективной функции В-системы иммунитета, патогенетически связанная с расстройствами фолдинга антител в плазматических клетках, позволяет отнести АД к заболеваниям группы вариабельной иммунной недостаточности. Открывается возможность для разработки способов лечения и профилактики аллергических и атопических заболеваний путем коррекции протективной функции В-системы иммунитета.

дерматит антитело иммунный арахидоновый

Литература

1. Пыцкий В.И. Атопическая болезнь // Сб. трудов, Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии. Материалы первой научной конференции РАКИ, ВИНИТИ РАН. - 1997. - с. 38- 45.

2. Виноградов А.И., Балаболкин И.И., Виноградова Н.А. Содержание эйкозаноидов у детей с атопическим дерматитом // Педиатрия, 1991, № 10, с. 29-32.

3. Leuhg D. Atopic dermatitis: immunobiology and treatment with immune modulators // Clin. Exp. Immunol. - 1997. - vol. 107 (Suppl. 1). - p. 25-30.

4. Кабулов Г.Г. Распространенность симптомов атопического дерматита в регионах Азербайджана // Биомедицина, № 2, 2007, с. 16-19.

5. Булина О.В., Горланов И.А., Калинина Н.М. Параметры цитокинового звена иммунитета у детей старшего возраста при атопическим дерматите // Аллергология, 2004, № 1, с. 27-30.

6. Бережная Н.М. В-лимфоциты и патогенез атопических заболеваний // Internatiuonal Journal Immunoreabilitation. - 1997. - N. 6. - P. 101-108.

7. Эфендиев А.М., Помойнецкий В.Д. Методические указания к количественному анализу простагландинов, тромбоксана, простациклина и циклических нуклеотидов в биологических жидкостях и тканях. - Баку, 1984, 42 с.

8. Петрив Р.В., Лопухин Ю.М., Чередеев А.Н. и др. Оценка иммунного статуса человека: Методическая рекомендация. - Москва, 1984, 123 с.

9. Клиническая иммунология и аллергология: Под. Ред. Л.Йегера. - Пер. с нем. - 2-ое изд. - Москва, Медицина, 1990. - Т. 1. - 528 с.

Размещено на Allbest.ru