Бета-талассемии в сочетании с наследственной ферментопенической метгемоглобинемией

Размещено на http://www.allbest.ru/

Бета-талассемии в сочетании с наследственной ферментопенической метгемоглобинемией

ЭфендиевАриф Мустафа оглы,

доктор биологических наук, профессор, зав. кафедрой биохимии,

Аскерова Таира Алемшахкызы,

доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник,

Мусаев МиршахинАзизагаоглы,

аспирант.

Азербайджанский медицинский университет, Баку

В последнее время проводятся интенсивные исследования по изучению наследственных форм гемолитических анемий, обусловленных нарушением синтеза глобиновой цепи и образованием различных патологических гемоглобинов [4, 5]. талассемия анемия гемолитический

В данный момент накоплен большой материал, показывающий распространение гемоглобинопатий, в основном талассемии во многих странах мира, в том числе и в Азербайджанской Республике. Значительный генетический полиморфизм талассемии обуславливается наличием в одной и той же популяции разнообразных мутаций бета-глобинового гена. Иногда наблюдается сочетание бета-талассемии с НФМ.

Метгемоглобинемии обусловлены повышенным содержанием метгемоглобина (MtHb), неспособного переносить кислород. Выделяют наследственные и приобретенные метгемоглобинемии. К наследственным относят наследственные энзимопенические метгемоглобинемии (НФМ), обусловленные резким снижением или полным отсутствием в эритроцитах активности фермента липоамид-дегидрогеназа-зависимой метгемоглобинредуктазы, и наследственные, развивающиеся в результате наличия нестабильных или аномальных гемоглобинов (М-гемоглобинопатии), в которых в результате генных мутаций произошла замена аминокислотных остатков в альфа- или бета-цепях глобина [1-3].

Диагноз таких спорадических случаев, протекающих с различными клиническими проявлениями, ставят на основании личного и семейного анамнеза с учетом этнической принадлежности обследуемого, географических и эпидемиологических данных, а также результатов клинико-лабораторных исследований, включая специальные диагностические тесты.

Количество MtHb и MtHb-R определяли методом изоэлектрофокусирования метгемоглобинредуктазы, проводили на приборе «Мultiphor-2117» фирмы LKB (Щвеция), используя амфолины рН 3,5-10 [6, 7]. Определение MtHb и MetHb-R исследовали также спектрофотометрическим методом [8]. Электрофоретическое разделение гемоглобинов на ацетат-целлюлозных пленках проводили в трис-ЭДТА боратном (р-9,0) буфере по Маrенgо-Rove [9]. Для определения HbF использовали метод Бетке [10].

Для выявления сочетанных форм метгемоглобинемии с -талассемией обследовано 48 гомозиготных и 84 гетерозиготных больных с -талассемией в возрасте от 6 месяцев до 41 лет. Из 48 гомозиготных больных 27 были женского и 21 мужского пола. Среди гетерозиготных больных были 20 мужчин и 64 женщин.

Талассемия диагностировалась на основании анамнеза, клинических проявлений, определений осмотической резистентности эритроцитов, фетального гемоглобина, гемоглобина А₂ и медико-генетического обследования членов семей пробанда. У всех больных определяли количество MtHb и MetHb-R для выявленияметгемоглобинемии.

Картина крови характеризовалась тяжелой гипохромной анемией с выраженными морфологическими изменениями эритроцитов (анизо- и пойкилоцитоз, микроцитоз, мишеневидность, гипохромия). Биохимическая характеристика показателей крови этих больных представлена в таблице 1.

Критерием диагностики для гомозиготной талассемии является повышение количества фетального гемоглобина. Содержание фетального Hb в этой группе больных 34,3% раза было повышено по сравнению с контрольной группой. Другой диагностический показатель талассемии HbA₂ также было достоверно повышено на 39,2% (p< 0,001). Изменение количества MtHb и MetHb-R показано в таблице 2 (рис.1).

Таблица 1. Биохимические показатели крови больных с гомозиготной талассемией (n=48).

Прим.: p - статистически значимая разница с контрольными показателями вычислена по W-критерию Уайта.

Рис. 1. Количество MtHb и MtHb-R у больных с талассемией.

Уровень MtHb колебался от 9,5% до 67% т.е. в 9,7 раз было выше по сравнению с контрольной группой (норма 1-2%). Обнаружено достоверное повышение активности (p<0,001) MtHb-R на 37,7%, чем в контрольной группе. За больными шло наблюдение в динамике. После 15-ти дневного лечения у них повторно было определено количество MtHb и активность MtHb-R. У больных 6 чел. уровень MtHb остался высоким 16,2 раза выше, а содержание MtHb-R низким. Активность фермента варьировала от 0,6 ед. акт. до 3,5 ед.акт.

Таблица 2. Биохимические показатели крови больных с гомозиготной талассемией и метгемоглобинемией (n=6).

Прим.: статистически значимая разница вычислена по W-критерию Уайта:

1. p - с контрольными показателями;

2. p₂ - с показателями группы с MtHb;

3. p₃ - с показателями группы ?-талассемия.

Анализ полученных результатов подтверждает наличие у этих больных сочетание НФМ с ?-талассемией.

Рис. 2. Диаграмма показателей HbA₂ и HbF у больных с -талассемией и -талассемия с сочетанием НФМ.

На рисунке 2 показаны данные количества HbA₂, HbF у больных с -талассемией и сочетанием -талассемии с НФМ. Надо отметить, что уровень HbA₂ и HbF у больных с только талассемией наблюдается высоким, чем в случае сочетание талассемии с НФМ.

Сравнительная оценка полученных данных показывает, что при талассемии до лечения у всех больных выявляется повышенный уровень MtHb, и снижение активности MtHb-R. Но у 42 больных в ходе комплексного лечения талассемии улучшение общего состояния больного сопровождается нормализацией данных показателей.

Семейно-генеалогический анализ родственников подтвердил поставленный диагноз «сочетание НФМ с гомозиготной -талассемией».

Нами в ходе работы на основании полученных биохимических данных обследованные были разделены на 3 группы. В I группу (6 чел.)вошли больные с сочетанием -талассемии с НФМ, во II группу (10 чел.) больные только с НФМ и III группу (48 чел.) больные с диагнозом гомозиготной талассемии (рис.2).

Следует отметить, что в 3-х группах у всех обследованных был установлен высокий уровень MtHb: в I группе 16,2 раза выше по сравнению с контрольной группой и достоверное p<0,01 снижение MtHb-R, в II группе количество MtHb было 19,8 раза выше норме, при достоверном снижение (p<0,001) активности MtHb-R и в III группе уровень метHb было 3,7 раза выше норме придостоверном снижение 1,4 раза (p<0,001) активности MtHb-R.

Данные результаты показывают, что во всех группах уровень MtHb был повышен, наиболее высокий уровень MtHb был во II группе. Но в этих обследованных группах установлен низкий уровень активности MtHb-R.

Вышесказанное показывает, что во II группе устойчивое повышение уровня MtHb и снижение или отсутствие активности MtHb-R связано с наследственным носительством метгемоглобинемии.

В периферической крови гетерозиготных больных по -талассемии (84 человек: 64 женщин и 20 мужчин, возраст больных было от 2 лет до 41 года) часто наблюдали анизо- и пойкилоцитоз, сравнительно редко мишеневидные эритроциты. При этом биохимические показатели крови были следующими: количество HbА₂ - 4,9 ± 0,11%, HbF - 1,93 ± 0,15% (таблица 3.).

По результатам видно, что при гетерозиготной -талассемии также наблюдается достоверное (p<0,001) повышение количества MtHb в 1,7 раза и (p<0,001) в 1,5 раза активности MtHb-R.

Основываясь на полученных результатах, можно сделать вывод, что при гомозиготном носительстве -талассемии наблюдается более достоверное повышение MtHb и снижение MtHb-R, чем при носительстве гетерозиготной -талассемии.

Таблица 3. Биохимические показатели крови больных с гетерозиготной талассемией (n=84).

Прим.: статистически значимая разница вычислена по W-критерию Уайта:

1. p - с контрольными показателями;

2. p₂ - с показателями гомозиготной группы.

Анализируя полученные данные содержания MtHb и активности MtHb-R, можно предполагать, что количественный дисбаланс глобиновых белков в эритроцитах при талассемиях приводит к накоплению в большом количестве активных форм кислорода внутри клетки, которые создают окислительный стресс. При наличии такого окислительного стресса в эритроцитах увеличивается содержание метгемоглобина.

Чрезмерное накопление активных форм кислорода, в свою очередь, приводит к окислительному повреждению различных макромолекул эритроцитов, в том числе гемоглобина и мембранных белков.

Литература

1. Аскерова Т.А., Назарли А.Г., Мовсум-заде К.М., Токарев Ю.Н. Постнатальная диагностика гемоглобинопатий и эритроцитарных энзимопатий // Гематология и трансфузиология, 1988, № 2, с. 14-18.

2. Аскерова Т.А., Мовсумзаде К.М., Кичибеков Б.Р. Выявление сочетанных форм гемоглобино- и энзимопатий у новорожденных // Вопросы медицинской химии, 1993, № 6, с. 51-54.

3. Герман С.В., Напалкова Н.Н., Колокольникова О.А. О наследственной энзимопеническойметгемоглобинемии // Клиническая медицина, 1997, № 10, с. 94-95.

4. Гребенев А.Л., Бокерило А., Бурков С.Г. Метгемоглобинемия после приема анестезии // Клиническая фармакология и терапия, 1993, № 2, с. 47-48.

5. Ильинская И.Н., Токарев Ю.Н., Беляев В.В., Дервиз Г.В. Гетерогенность наследственных метгемоглобинемий / I Всесоюзный съезд гематологов и трансфузиологов. М.: 1979, с. 203.

6. Мовсум-заде К.М., Ахундова А.И., Расулов Э.М. Сочетание генетически различных эритроцитарных нарушений ?-талассемии с аномалиями структур HbS и дефицитом Г-6-ФД // Известия АН Азербайджанской ССР, Серия Биологических наук, 1986, № 1, с. 110-116.

7. Betke K., Merbi H., Schicht J. Estimation of small percentages of fetal hemoglobin // Nature, 1959, 184, p. 1877-1880.

8. Marengo-Rove A.J. Rapid electrophoresis and quantitation of haemoglobins on cellulose acetate // J. Clin. Pathol. 1965, v. 18, p. 790-792.

9. Jamal A. Hereditary methemoglobinemia // J. CoUPhysieiansSurg Pak, 2006, 16(2), p. 157-159.

10. Jeffrey Black. Isoelectrifocusing in agarose gel for detection and identification of haemoglobin variants // Haemoglobin, 1984, v.8, N 2, p. 117-127.

Размещено на Allbest.ru