Способы лечения диабета

Размещено на http://www.allbest.ru/

ВВЕДЕНИЕ

диабет инсулин глюкагон

Распространенность диабета типа 1 неуклонно возрастала в течение последних нескольких десятилетий [1]. У многих из этих пациентов осложнения, связанные с диабетом, являются основной причиной заболеваемости и смертности [2].

Диабет 1 типа (СД1), являющийся следствием прогрессирующей потери клеток, продуцирующих инсулин после иммунной атаки, является одним из наиболее распространенных хронических заболеваний среди детей и подростков с приблизительно 500 000 детей в возрасте до 15 лет, живущих с болезни. Имеются также свидетельства увеличения заболеваемости примерно на 3% в год [1]. Когда инсулин был обнаружен в 1921 году, болезнь внезапно стала поддающейся лечению, и в первые годы после ее введения инсулин рассматривался как лекарство от диабета. Хотя терапия инсулином была усовершенствована, а технические средства значительно улучшились с годами, невозможно полностью имитировать физиологическую тонкую настройку уровней глюкозы в крови. При современном лечении диабета предпринимаются большие усилия для мониторинга и предотвращения долгосрочных осложнений, но в большинстве случаев их нельзя полностью избежать. Как следствие, ожидаемая продолжительность жизни для пациентов с СД1 снижается более чем на 10 лет, несмотря на современное лечение и клиническую помощь [2].

Поскольку эндогенное продуцирование инсулина обычно отсутствует или продуцируется в очень малых количествах, требуется длительное лечение инсулином [3].

По оценкам, во всем мире 415 миллионов человек страдают диабетом 2 типа, а диабет 1 типа составляет примерно 7-12% случаев [4].

Стрептозотоцин (STZ) - обработанные грызуны стали надежной моделью для исследования механизмов и терапии диабета [5].

Лабораторные животные, в основном грызуны, обычно используются в качестве моделей заболеваний человека. Понятие таких моделей основано на определенной степени «аналогии» между патологическими процессами, которые происходят при прогрессировании заболевания у пациентов и у животных, изучаемых как их заменители [6]. Хотя модель не должна считаться идентичной человеку, она должна включать сходящийся набор аналогов между пациентом, у которого развивается болезнь, и экспериментальным животным, в котором происходят «аналогичные» патологические процессы. Создание животной модели болезни человека требует, по крайней мере, некоторых общих знаний о механизме болезни. При достаточной степени аналогии животные модели должны оказаться полезными в попытках понять детали процесса болезни и в трансляционных исследованиях для выбора экспериментальной терапии до начала клинической оценки [7].

Таким образом, актуальность данной работы определяется повышением уровня заболевания СД1 типа и поиском новых способов его лечения

Целью нашего исследования является сравнительный динамический анализ инсулин позитивных и глюкагон позитивных клеток поджелудочной железы в эксперименте со стрептозоцином.

Исходя из цели были поставлены следующие задачи:

1)Изучить динамический анализ инсулин позитивных клеток

2) Изучить динамический анализ глюкагон позитивных клеток

3)Сравнить и проанализировать динамику глюкагон и инсулин позитивных клеток

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СД1 - Сахарный диабет 1 типа

STZ - Стрептозоцин

HIF - Фактор индуцируемый гипоксией

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Сахарный диабет 1 типа

Сахарный диабет 1 типа (СД1) является результатом аутоиммунного разрушения в-клеток эндокринной поджелудочной железы. Здесь представлены генетические, экологические и иммунологические факторы, которые разрушают в-клетки эндокринной поджелудочной железы и приводят к дефициту инсулина. Процесс аутоиммунного разрушения происходит у генетически восприимчивых индивидуумов под воздействием одного или нескольких факторов окружающей среды и обычно прогрессирует в течение периода от нескольких месяцев до нескольких лет, в течение которого пациенты бессимптомны, но позитивны для соответствующих аутоантител. Симптоматическая гипергликемия и истинный диабет происходят после длительного латентного периода [8].

Генетические факторы

Диабет типа 1 обычно присутствует у лиц без семейной истории. Только 10-15% пациентов имеют родственников первой или второй степени с этим заболеванием. Тем не менее, срок службы риска для развития СД1 значительно возрастает у родственников пациентов, так около 6% детей, 5% братьев и сестер, и 50% монозиготных близнецов , присутствующих заболевание по сравнению с 0,4% распространенности общей популяции [9,10].

Факторы окружающей среды

Факторы окружающей среды также играют важную роль в патогенезе СД1 [9,10]. К экологическим факторам относятся вирусы (краснуха, коксакивирус B или энтеровирусы), токсины и питательные вещества (коровье молоко, крупы). Точный эффект этих факторов остается неясным, но важно определить, поскольку эти факторы могут быть изменены и, возможно, привести к профилактике или лечению.

Вирусы и вакцинации

Вирусы представляют собой важные триггеры для патогенеза СД1, и это было изначально описано эпидемиологическими наблюдениями. У детей, подвергшихся воздействию во время эмбриональной жизни краснухи, наблюдается повышенная частота СД1, помимо других аутоиммунных нарушений, таких как аутоиммунный тиреоидит [11].

Другой механизм, посредством которого аутоиммунный ответ может быть вызван вирусами, - это молекулярная мимикрия. Гипотеза молекулярной мимикрии предполагает, что иммунный ответ направлен против аутоантигенов, которые напоминают антигены вирусов, и это приводит к разрушению клеток [12,13]. В СД1 наиболее изученной парадигмой молекулярной мимики является белок P2-C вируса Coxsackie B4. Существует существенное сходство в аминокислотной последовательности между белком Coxsackie B4 P2-C и ферментом декарбоксилазы глутаминовой кислоты (GAD65), обнаруженным в в-клетках эндокринной поджелудочной железы [14].

Диета и микробиота кишечника

Важность диеты в развитии СД1 остается спорной. В нескольких исследованиях сообщалось о ассоциациях раннего введения в рацион младенца коровьего молока с повышенным риском заболевания, подтверждая, что воздействие инсулина на младенца, содержащееся в молоке, вызывает аутоиммунный ответ [15]. Кроме того, ранее экспериментальные исследования показали, что определенная часть альбумина, содержащегося в коровьем молоке, известная как ABBOS (17 пептид, позиции 152-167), может функционировать как самореактивный эпитоп, поскольку она напоминает протеин p69, обнаруженный в поверхность клеток в поджелудочной железы [16,17].

Недавние данные показывают, что кишечная микробиота, микрофлора триллионов микроорганизмов, живущих в желудочно-кишечном тракте, участвует в патогенезе СД1. Действительно, пациенты с СД1 обнаруживают различия в их микробиоте кишечника по сравнению с здоровыми контрольными группами, в частности, снижением коэффициента Firmicutes и Bacteroidetes [18,19].

Иммунологические факторы

Человеческая иммунная система сталкивается с огромным разнообразием антигенов, и ее цель состоит в том, чтобы отличить иностранца от самого себя. Потенциально опасные иммунные клетки при росте Т-лимфоцитов в тимусе и В-лимфоцитах в костном мозге отрицательно выбраны и устранены (центральная толерантность). Самореактивные лимфоциты, которые выходят из механизмов центральной толерантности и заканчиваются на периферии, естественно входят в процессы, которые либо нейтрализуют, либо подавляют их (периферическая толерантность). Нарушения этих иммунных механизмов могут возникать при различных аутоиммунных состояниях [20]. Мутации в гене AIRE, но также и не генетические факторы, могут нарушить центральную толерантность к тимусу и привести к развитию СД1 [21,22].

Разрушение в-клеток эндокринной поджелудочной железы в СД1 происходит, скорее всего, через апоптоз, механизм, также известный как запрограммированная гибель клеток, который включает в себя каскад активации цистеин-аспарагиназы, известный как каспазный путь. Действительно, исследования на животных и эксперименты in vitro поддерживают апоптоз в качестве основного типа гибели клеток для в-клеток [23,24,25].

Стрептозотоцин (STZ) является широко используемым химическим веществом для индукции экспериментального диабета у грызунов [26 , 27]. Диабет типа 1 может быть индуцирован у грызунов с помощью одной инъекции STZ [28,29].

Стрептозотоцин, выделенный в конце 1950-х годов из штамма почвенных бактерий Streptomyces achromogenes , запатентован и первоначально разработан как антибиотик, позже в качестве противоопухолевого препарата. До сих пор он незначительно использовался в терапии некоторых редких нейроэндокринных опухолей [30], хотя он более популярен в неклинических исследованиях, поскольку внутривенно или внутрибрюшинно вводится подопытным животным.

Более 40 лет назад было показано, что у крысы (штамм Вистара) однократная внутривенная инъекция STZ приводит к дозозависимому диабетогенному ответу, заключающемуся в увеличении уровня глюкозы в сыворотке и объема мочи и уменьшении концентрации инсулина в сыворотке и поджелудочной железе; дозы 45-65 мг / кг уменьшали инсулин более чем в 10 раз [ 31 ]. В настоящее время считается, что внутривенная или внутрибрюшинная инъекция СТЗ в дозе 40-60 мг / кг или выше представляет собой модель диабета типа 1 (инсулинзависимый) [32,33].

Современное понимание диабетогенного свойства стрептозотоцина и задействованных в этом механизмов было обобщено Лензеном [34,35]. В отличие от других нитрозомочевин, которые являются липофильными и быстро растворяются клетками, STZ из-за замены гексозы менее липофилен и требует, специфический транспортер GLUT2 через клеточные мембраны. Селективность STZ в отношении бета-клеток, продуцирующих инсулин в поджелудочной железе, объясняется наличием GLUT2 в мембранах уязвимых клеток. Действие внутриклеточной метилнитрозомочевины фрагмента ДНК STZ-алкилатов; клеточная смерть, которая возникает при некрозе, является следствием активации поли (ADP-рибозы) полимеразы (PARP) с последующим истощением NAD ⁺ и, в конечном счете, истощение запасов ATP. Помимо инсулин-продуцирующих бета-клеток поджелудочной железы, STZ токсичен по отношению к другим органам, экспрессирующим транспортер GLUT2, особенно почкам и печени. Мозг не затрагивается напрямую, потому что STZ не может проникнуть в гематоэнцефалический барьер, в котором отсутствует транспортер GLUT2.

Действие стрептозотоцина считается аналогичным действию другого хорошо известного диабетогенного вещества аллоксана. Оба соединения переносятся переносчиками GLUT2, действуют внутриклеточно, избирательно токсичны в отношении клеток, продуцирующих панкреатический инсулин, и их токсичность может быть блокирована периферическим применением не метаболизируемого аналога глюкозы 3- O- метил-глюкозы. Однако механизмы их диабетогенной активности, по-видимому, различаются в некоторых случаях. Одно из отличий заключается в том, что d- глюкоза и d -манноза, как сообщается, способны блокировать токсический эффект аллоксана, но не STZ [ 36 ].

Транспортирующий белок GLUT2, является частью распределительного механизма обнаружения глюкозы, который расположен в бета-клетках поджелудочной железы и некоторых других органах, например печени [ 37]. GLUT2 также экспрессируется в мозге, в частности в гипоталамусе и мозге, где он встречается у нейронов, астроцитов и эпителиальных клеток, выстилающих желудочки мозга [38 ].

Он содержит молекулу глюкозы (в дезоксильной форме), которая связана с частью метилнитрозомочевины , которая, как полагают, оказывает цитотоксическое действие STZ, тогда как глюкозный фрагмент направляет этот химикат к в-клеткам поджелудочной железы [39]. STZ распознает рецептор GLUT2, который расположен в плазматической мембране в-клеток [27]. Поэтому панкреатическая в-клетка является специфической мишенью STZ. Поскольку GLUT2 также существует в печени и почках в меньшей степени, 40 высоких доз STZ могут также ухудшать функции печени и почек [40].

Инсулин

Инсулин --гормон пептидной природы[41], содержащий две цепи, A (21 остаток) и B (30 остатков) [42]. Хотя гормон функционирует как мономер без содержания Zn ²⁺ в кровотоке [43], он хранится в панкреатических в-клетках в качестве стабилизированного Zn ²⁺ гексамера. Оказывает многогранное влияние на обмен практически во всех тканях. Основное действие инсулина заключается в снижении концентрации глюкозы в крови. Считается самым изученным гормоном [41]. Такая самосборка имеет первостепенное значение для стабильной фармацевтической композиции. Действительно, при отсутствии самосборки растворы инсулина будут иметь ограниченный срок хранения. Таким образом, защитная самосборка задерживает химическую деградацию гормона (перегруппировка атомов или химических связей в молекуле) и физическую деградацию (связанное с агрегацией смещение, приводящее к амилоиду) [44]. Фармацевтические составы, повторившие стратегию хранения в-клетки [45], позволили широко распространять, хранить и клинически использовать инсулин более 80 лет в лечении сахарного диабета.

Скелетная мышца составляет 60-70% от общего потребления инсулином глюкозы в организме и, таким образом, играет важную роль в регуляции гомеостаза энергии всего тела [46]. Инсулин регулирует мышечный метаболизм, способствуя поглощению глюкозы, синтезу гликогена, а также использованию и хранению липидов. Инсулин стимулирует поглощение глюкозы в скелетных мышцах, способствуя мембранной транслокации GLUT4, основного транспортера глюкозы в скелетной мышце [ 47].

Инсулин стимулирует поглощение глюкозы в адипоцитах, где он превращается в липиды в качестве более эффективной формы хранения энергии [ 48 ]. Хотя жировая ткань составляет относительно небольшую долю (<10%) от использования периферической глюкозы в ответ на инсулин [ 49 ], она не является пассивным хранилищем избыточной энергии в течение исследований за последние десятилетия [ 50 , 51 ]. Жировая ткань является основным местом хранения триглицеридов [ 52 ], в то время как усиление поглощения глюкозы увеличивает синтез триацилглицерина и жирных кислот в жировых тканях и может привести к ожирению [ 53]. Инсулин регулирует липидный, глюкозный и белковый обмен в основном в жировой ткани [ 50 , 54 ]. Прежде всего, инсулин эффективно снижает скорость липолиза в жировых тканях, что приводит к снижению уровня жирной кислоты в плазме. Инсулин также обладает способностью увеличивать поглощение триглицеридов из крови в жировую ткань . Во-вторых, основным эффектом инсулина на жировую ткань является увеличение скорости гликолиза и продвижение транспорта глюкозы через клеточную мембрану. Инсулин стимулирует транслокацию транскриптора глюкозы GLUT4 из внутриклеточных пулов на поверхность клеточной мембраны для увеличения поглощения глюкозы в жировой и мышце. Наконец, инсулин увеличивает скорость синтеза белка в жировой ткани [ 55].

Глюкагон

Глюкагон, пептидный гормон, секретируемый из б-клеток островков поджелудочной железы, имеет решающее значение для гомеостаза глюкозы в крови

Глюкагон является основным повышающим глюкозу (противорегуляторным) гормоном млекопитающих, а также обладающий различными другими эффектами. Он высвобождается из б-клеток островков поджелудочной железы, составляя лишь несколько процентов от общей массы клеток островка. Стимуляция секреции глюкагона является вторичной по отношению к повышенному потенциалу действия, а также может быть затронута паракринными сигналами (опосредованными факторами, высвобождаемыми из соседних в- и д-клеток), включая инсулин, Zn ²⁺ , гамма-аминомасляную кислоту (ГАМК) и соматостатин, эндокринные сигналы , такие как глюкагон-подобный пептид-1 (GLP-1) или лептина. Глюкагон играет критическую роль в гомеостазе глюкозы, диабетическом кетоацидозе и его секреции дисрегулируется при гипогликемии, связанной с диабетом [56].

Глюкагон стимулирует печеночный глюконеогенез и поддерживает уровень глюкозы в крови во время голодания. Механизм, который ослабляет действие глюкагона после повторного питания, не понимается. Настоящее исследование демонстрирует увеличение печеночной гипоксии печени сразу после кормления, которое стабилизирует фактор индуцируемый гипоксией (HIF) 2б в печени. Переходное постпрандиальное увеличение печеночной HIF2а ослабляет сигнализацию глюкагона. Специфическое для гепатоцитов нарушение HIF2 увеличивает глюкозу в крови после приема пищи и усиливает ответ глюкагона. Независимо от сигнализации инсулина, активация печеночной HIF2б приводила к снижению уровня глюкозы в крови, улучшению толерантности к глюкозе и снижению глюконеогенеза из-за притупленного действия глюкагона в печени. Механически HIF2 отменял сигнализацию глюкагона, активируя цАМФ-фосфодиэстеразы. Репрессия передачи глюкагона с помощью HIF2б улучшала гипергликемию при стрептозотоцин-индуцированном диабете и острой инсулинорезистентной модели на животных. Это исследование показывает, что HIF2б необходим для острого постпрандиального регуляции передачи сигналов глюкагона в печени и предлагает HIF2б в качестве потенциальной терапевтической цели при лечении диабета [57].

Контррегуляторный гормон глюкагон участвует в голодающей энергетике, стимулируя выход глюкозы в печени через глюконеогенез и гликогенолиз [58 ]. Глюкагон-опосредованная стимуляция протеинкиназы A (PKA) -циклический AMP (cAMP) сигнальный каскад-связывающий белок (CREB) и дефосфорилирование CREB-регулируемого транскрипционного коактиватора 2 (CRTC2) [ 59] увеличивает транскрипция глюконеогенных генов, глюкоза-6-фосфатаза ( G6-фаза ) и фосфоенолпируваткарбоксикиназа ( Пепк ). Во время избытка питательных веществ действие глюкагона ослабляется снижением секреции глюкагона [ 60]. Тем не менее, существует долгая задержка в возврате глюкагона обратно к базальным уровням после кормления [ 61 ]. Длительное, но контролируемое действие глюкагона во время пост-абсорбирующей фазы необходимо для предотвращения гипогликемии после болюса высвобождения инсулина [ 62 ]. Кроме того, действие глюкагона важно для воздействия инсулина на глюконеогенез печени и синтез гликогена [63 ]. Однако нарушение регуляции глюкагона приводит к гипергликемии у пациентов с диабетом 2-го типа с неудовлетворительно высоким уровнем глюкагона [ 64 ]. Инсулин частично ослабляет сигнализацию глюкагона посредством фосфорилирования и деградации CRTC2 киназами SIK [65 ]. Однако внутриклеточные механизмы, участвующие в регуляции сигнализации глюкагона-PKA-CREB, в значительной степени неизвестны.

Осложнения, связанные с диабетом типа 1

Осложнения в диабете типа 1 (и типа 2) классифицируются как макрососудистые или микрососудистые. Сердечно-сосудистые заболевания становятся более распространенным макроваскулярным осложнением, так как люди с диабетом типа 1 живут дольше [66]. У лиц с диабетом 1 типа риск развития сердечно-сосудистых заболеваний в десять раз выше (например, инфаркт миокарда, инсульт, стенокардия и необходимость реваскуляризации коронарной артерии), чем возрастные недиабетические популяции [67]. Исследование эпидемиологии в Питтсбурге [68] случаев диабета типа 1 показало, что сердечно-сосудистые события у взрослых пациентов моложе 40 лет составляют 1% в год и в три раза выше у лиц старше 55 лет. Изучение эпидемиологии диабетических вмешательств и осложнений [69], которые следовали за участниками диабета типа 1 для долгосрочных осложнений, обнаружили, что интенсивное лечение диабета снижает риск сердечно-сосудистых событий на 42% по сравнению с традиционным лечением. Пациенты с диабетом типа 1 имеют менее благоприятные результаты, чем пациенты без диабета после острого коронарного синдромa [70] ,что может быть объяснено недавним сообщением о том, что после инфаркта миокарда пациенты с диабетом типа 1 экспрессируют антитела к сердечным белкам, тогда как пациенты с диабетом типа 2 нет[71]. Риск возникновения микрососудистых осложнений, включая ретинопатию, нефропатию и невропатию, снижается при интенсивной терапии инсулином

Лечение

Пациенты с диабетом типа 1 требуют пожизненной терапии инсулином для контроля уровня глюкозы в крови. Инсулин можно вводить одним из двух способов:

· Через иглу и шприц или ручку инсулина, которая вводит инсулин под кожу

· Через инсулиновую помпу, которая соединяет резервуар инсулина с катетером, вставленным под кожу живота

Однако, несмотря на оптимальное лечение инсулином, некоторые пациенты по-прежнему испытывают частые большие и непредсказуемые колебания уровня глюкозы в крови. Эта редкая форма тяжелого диабета известна как хрупкий (или лабильный) диабет, и он затрагивает около 3 из 1000 человек с диабетом типа 1 [72]. Пациенты испытывают повторяющиеся эпизоды гипергликемии и гипогликемии, гипогликемическую неосведомленность (состояние, когда уровни глюкозы в крови снижаются до опасно низких уровней без каких-либо предупреждающих симптомов) и диабетический кетоацидоз (потенциально опасное для жизни осложнение, которое приводит к токсичным высоким уровням кетоновых тел в крови). Для этих пациентов нестабильная концентрация глюкозы в крови снижает качество жизни, потенциально может привести к повторной или продолжительной госпитализации и привести к осложнениям, которые могут снизить продолжительность их жизни [72].

Несмотря на то, что были улучшены качество лечения диабета и системы доставки инсулина, они по-прежнему не могут обеспечить эффективное лечение диабета 1-го типа. Таким образом, усилия по сохранению и восстановлению эндогенной функции поджелудочной железы через заместительную терапию в-клетками предлагают альтернативный вариант лечения для этих пациентов.

Технология / Техника

Трансплантация островков была впервые проведена в 1972 году, когда было обнаружено, что она может вылечить химический диабет у крыс [73]. В 1989 году была проведена первая успешная клиническая трансплантация островков; однако, независимость инсулина длилась всего лишь месяц из-за неадекватной иммуносупрессии и отторжения островков [74]. Поиски независимости инсулина продолжались в 1990-х годах, и было предпринято более 450 попыток лечить диабет 1-го типа с трансплантацией островков. Однако результаты были бесперспективными: менее 10% сохраняли независимость инсулина на 1 год [75]. Только после введения знакового Эдмонтонского протокола в 2000 году [76] трансплантация островков стала жизнеспособным вариантом лечения пациентов с диабетом типа 1.

Эдмонтонский протокол

Исследование Эдмонтона изменило трансплантацию островков для лечения диабета типа 1. Все семь пациентов в исследовании достигли независимости от инсулина на 1 год, что стало беспрецедентным результатом в то время, по сравнению с предыдущими результатами [76].В исследовании Эдмонтона были отобраны только пациенты с лабильным диабетом и опасной для жизни гипогликемией. Исследователи также отделили трансплантацию островков от болезни почек и исключили пациентов, у которых была почечная болезнь терминальной стадии или предыдущая трансплантация почки или других органов.

В Эдмонтонском протоколе было четыре основных подхода, которые отличались от предыдущих протоколов трансплантации островков:

1.Режим бессимптомной иммуносупрессии. Имуносупрессия состояла из сиролимуса, низкодозного такролимуса и даклизумаба. Предыдущие схемы включали глюкокортикоиды, которые повышают резистентность к инсулину

2.Было использовано достаточное количество жизнеспособных островков от нескольких доноров. Были использованы поджелудочные железы от более чем одного донора (обычно от двух до четырех). Более 10000 эквивалентов островков на килограмм были экстрагированы и вливались через несколько недель; ранее порог составлял 6 000 эквивалентов островков на килограмм. Это увеличение общего количества трансплантированных островков улучшило вероятность независимости инсулина после трансплантации

3.Изоляция и очистка островков. Неинвазивная среда (например, сыворотка плода теленка) была удалена из процесса выделения и очистки для устранения воздействия ксенопротеинов

4.Короткое холодное ишемическое время хранения. Чтобы оптимизировать функцию островков, островки были трансплантированы сразу после процесса очистки. Протокол Эдмонтона ограничен холодильным хранилищем менее 13 часов, включая время процесса изоляции островков, поскольку было показано, что хранение более 12 часов снижает выход островков [77]. Предыдущие методы культивируемых клеток в течение нескольких дней до вливания

Ключевыми особенностями, которые способствовали успеху Эдмонтонского протокола, по сравнению с более ранними процедурами трансплантации островков, были использование нескольких донорских поджелудочных желез для получения большого количества жизнеспособных островков и устранения стероидов после иммуносупрессивного режима после трансплантации. Хотя Эдмонтонский протокол стал поворотным пунктом для трансплантации островков, в его воспроизводимости были выявлены проблемы, и последующие наблюдения через 5 лет показали потерю функции трансплантата, причем 90% пациентов в конечном итоге возвращались к терапии инсулином [78].

Процедура

Существует два метода или источники клеток для замены в-клеток: аллотрансплантация островков и аутотрансплантация островков. Аллотрансплантация трансплантация островков включает сбор островков от поджелудочной железы доноров умерших органов; эта процедура используется для пациентов с диабетом 1 типа. Напротив, аутотрансплантация островков проводится после общей поджелудочной железы с использованием островков, выделенных из собственной поджелудочной железы пациента; островная аутотрансплантация является вариантом для пациентов с хроническим панкреатитом для предотвращения диабета или снижения тяжести диабета после удаления поджелудочной железы.

Отобранная островка начинается с выбора поджелудочной железы у умершего донора , за которым следует экстракция, выделение и очистка островков. Последующим вливанием островков в приемлемого реципиента является фактическая процедура трансплантации. Выбор доноров оказывает значительное влияние на результаты трансплантации островков. На количество островков и на их качество влияют возраст донора и индекс массы тела (и время ишемического холодного хранения) [79]. Старые доноры могут обеспечить адекватный выход островков; однако, осевая функция может быть уменьшена. Напротив, молодые доноры поджелудочной железы предоставляют островки с превосходной функцией, но извлечение островков из поджелудочной железы затруднено [80].

Показания и противопоказания к трансплантации островков в одиночку

По сравнению с трансплантацией всей поджелудочной железы трансплантация островков менее инвазивна для реципиента. Островки вводятся через чрескожный трансгепатический катетер, который направляется в портальную вену печени. Получатели обычно подвергаются одному или двум инфузиям в зависимости от общей массы трансплантированных островков и гликемического контроля и требований к инсулину после первой инфузии. К осложнениям, связанным с процедурой, относятся тромбоз воротной вены (сгусток крови, который вызывает закупорку или сужение воротной вены), кровотечение и портальную гипертензию. Увеличение качества метода инфузии снизило частоту осложнений.

Пациенты при трансплантации островков требуют лечения иммунодепрессантами для предотвращения отторжения. Были внесены изменения в оригинальный протокол Эдмонтона: моноклональное антитело даклизумаба было заменено тимоглобулином, базиликхимабом или алемтузумабом [81-83]. Ингибиторы воспалительных факторов (этанерцепт [84,85] и инфликсимаб [86]) были введены, и недавно экзенатид был использован для стимуляции секреции инсулина [87].

В течение периода после трансплантации требуется тщательный мониторинг. Функцию трансплантации можно оценить по уровням HbA _1c (гликозилированный гемоглобин) и испытаниям толерантности к оральному уровню глюкозы. Определения успеха трансплантации островков различны; в то время как конечной целью трансплантации островков является достижение независимости инсулина, для пациентов с хрупким диабетом типа 1 с опасностью гипогликемии, угрожающей жизни, снижение этих гипогликемических событий может значительно улучшить качество их жизни, даже если независимость от инсулина не будет достигнута. Таким образом, частота гипогликемических эпизодов и снижение требований к дозе инсулина являются важными клиническими исходами для трансплантации островков в дополнение к основному результату независимости инсулина.

Текущие ограничения и будущие исследования

Двумя основными ограничивающими факторами, которые препятствуют широкому использованию трансплантации островков, являются ограниченная доступность донорских поджелудочной железы для трансплантации и необходимость иммуносупрессивной терапии. Были рассмотрены альтернативные стратегии для устранения ограничений для доноров [88]:

· Использование одной пожертвованной поджелудочной железы

· Живущие доноры поджелудочной железы

· Ксенотрансплантация (трансплантация островков, экстрагированных из другого вида, у островка которого близка к гомогенам к островкам человека, таким как свиньи)

· Эфирные клетки, полученные из стволовых клеток, которые могут обеспечить неограниченное количество островковых клеток

· Расширение существующих в-клеток, которые продуцируют инсулин и клетки протоков поджелудочной железы человека

· Трансдифференцировка (преобразование одного типа клеток в другой) печени, желчных протоков и экзокринных клеток поджелудочной железы [89].

Иммуноизоляция представляет собой привлекательный подход к защите островков и продлевает их выживаемость после трансплантации без иммуносупрессивной терапии. Островки заключены в полупроницаемую иммунозащитную капсулу, но островки защищены от иммунной системы хозяина. В методах микрокапсуляции используются биосовместимые материалы, которые также должны обеспечивать васкуляризацию и очищение трансплантата, так как существенным фактором, влияющим на выживаемость и функцию островков, является быстрая и адекватная реваскуляризация [90]. По состоянию на 31 марта 2015 года было проведено более 70 текущих испытаний трансплантации островков для диабета типа 1, зарегистрированного в клинических исследованиях [91].

2.ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Материалы и методы

Исследование проведено на 15 белых беспородных крысах самцах, которые были разделены на группы. Животным 1 группы внутрибрюшинно вводили стрептозоцин. Животным 2 группы ничего не вводили (норма). Через 1, 2, 3, 5, 7, 14, 21, 28 сут. животных выводили из эксперимента и эксплантировали ПЖ для морфологического анализа. Парафиновые срезы ПЖ окрашивали иммуногистохимически с антителами к инсулину - маркёру дифференцированных в-клеток и глюкагону - маркёру дифференцированных б-клеток.

Протокол ИГХ (anti-aSMA, 1:50, Envision detection system)

*Депарафинизация-регидратация

Ш Ксилол I, 7'

Ш Ксилол II, 7'

Ш 96%-ный спирт, 5'

Ш 96%-ный спирт, 5'

Ш dH?O, ?3'

*TBS рН 7.4 - 5 мин

*Heat-induced antigen retrieval (цитратный буфер рН 6.0), 30 мин

*Охладить, выдержать в TBS - 5 мин

*Блокирование эндогенной пероксидазы (Н2О2 3%) - 30 мин

*Промывка TBS - 5 мин

*Первичные Ат (anti-aSMA, 1:50, 50 мкл) - 30 мин

*Промывка TBS - 5 мин - 2 раза

*Набор Envision dual link (50 мкл) - 15 мин

*Промывка TBS - 5 мин - 2 раза

*Проявка (АЭК - 50 мкл, ацетатный буфер рН 5.0 - 450 мкл, Н2О2 3% - 15 мкл)

*Гематоксилин - 1 мин

*Промывка в проточной воде - 5 мин

*Заключение под покровное стекло в глицерин-желатину

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1)Farmer A. J., Gibson O. J., Dudley C., Bryden K., Hayton P. M., Tarassenko L., et al. (2005). A randomized controlled trial of the effect of real-time telemedicine support on glycemic control in young adults with type 1 diabetes (ISRCTN 46889446). Diabetes Care 28 2697-2702. 10.2337/diacare.28.11.2697

2)You W.-P., Henneberg M. (2016). Type 1 diabetes prevalence increasing globally and regionally: the role of natural selection and life expectancy at birth. BMJ Open Diabetes Res. Care 4:e000161 10.1136/bmjdrc-2015-000161

3) Patterson C, Guariguata L, Dahlquist G, Soltesz G, Ogle G & Silink M. Diabetes in the young - a global view and worldwide estimates of numbers of children with type 1 diabetes.Diabetes Research and Clinical Practice 2014 103 161-175

4) Livingstone SJ, Levin D, Looker HC, Lindsay RS, Wild SH, Joss N, Leese G.Estimated life expectancy in a Scottish cohort with type 1 diabetes, 2008-2010. JAMA 2015 313 37-44

5) Jia J-J, Zeng X-S, Song X-Q, Zhang P-P, Chen L. Diabetes Mellitus and Alzheimer's Disease: The Protection of Epigallocatechin-3-gallate in Streptozotocin Injection-Induced Models. Frontiers in Pharmacology. 2017;8:834. doi:10.3389/fphar.2017.00834.

6) National Institute for Health and Care Excellence. Continuous subcutaneous insulin infusion for the treatment of diabetes mellitus. Technology Appraisal Guidance No 151. NICE 2008. Accessed 30 Aug 2016.

7) International Diabetes Federation. IDF Diabetes Atlas. 7 ed Brussels, Belgium: International Diabetes Federation; 2015.

8) Paschou SA, Papadopoulou-Marketou N, Chrousos GP, Kanaka-Gantenbein C. On type 1 diabetes mellitus pathogenesis. Endocrine Connections. 2018;7(1):R38-R46. doi:10.1530/EC-17-0347.

9) Beyan H, Riese H, Hawa MI, Beretta G, Davidson HW, Hutton JC, Burger H, Schlosser M, Snieder H, Boehm BO, et al Glycotoxin and autoantibodies are additive environmentally determined predictors of type 1 diabetes: a twin and population study. Diabetes 2012. 61 1192-1198. (10.2337/db11-0971)

10) Redondo MJ, Rewers M, Yu L, Garg S, Pilcher CC, Elliott RB, Eisenbarth GS. Genetic determination of islet cell autoimmunity in monozygotic twin, dizygotic twin, and non-twin siblings of patients with type 1 diabetes: prospective twin study. BMJ 1999. 318 698 (10.1136/bmj.318.7185.698)

11) Menser MA, Forrest JM, Bransby RD. Rubella infection and diabetes mellitus. Lancet 1978.1 57 (10.1016/S0140-6736(78)90001-6)

12) Szopa TM, Titchener PA, Portwood ND, Taylor KW. Diabetes mellitus due to viruses - some recent developments. Diabetologia 1993. 36 687 (10.1007/BF00401138)

13) Yoon JW, Austin M, Onodera T, Notkins AL. Isolation of a virus from the pancreas of a child with diabetic ketoacidosis. New England Journal of Medicine 1979. 300 1173 (10.1056/NEJM197905243002102)

14) Dotta F, Censini S, van Halteren AG, Marselli L, Masini M, Dionisi S, Mosca F, Boggi U, Muda AO, Del Prato S, et al Coxsackie B4 virus infection of beta cells and natural killer cell insulitis in recent-onset type 1 diabetic patients. PNAS 2007. 104 5115 (10.1073/pnas.0700442104)

15) Virtanen SM, Saukkonen T, Savilahti E, Ylцnen K, Rдsдnen L, Aro A, Knip M, Tuomilehto J, Akerblom HK. Diet, cow's milk protein antibodies and the risk of IDDM in Finnish children. Childhood Diabetes in Finland Study Group. Diabetologia 1994. 37 381.

16) Karges W, Pietropaolo M, CAckerley CA, Dosch HM. Gene expression of islet cell antigen p69 in human ,mouse, and rat. Diabetes 1996. 45 513-521. (10.2337/diab.45.4.513)

17) Karlsson MG, Ludvigsson J. The ABBOS-peptide from bovine serum albumin causes an IFN-gamma and IL-4 mRNA response in lymphocytes from children with recent onset of type 1 diabetes. Diabetes Research and Clinical Practice 2000. 47 199-207. (10.1016/S0168-8227(99)00127-8)

18) Beyan H, Wen L, Leslie RD. Guts, germs, and meals: the origin of type 1 diabetes. Current Diabetes Reports 2012. 12 456-462. (10.1007/s11892-012-0298-z)

19) Hu C, Wong FS, Wen L. Type 1 diabetes and gut microbiota: friend or foe? Pharmacological Research 2015. 98 9-15. (10.1016/j.phrs.2015.02.006)

20) Janeway CA, Jr, Travers P, Walport M, Shlomchik MJ. Immunobiology, 6th ed. London, UK: Garland Science, 2005.

21) Jaпdane H, Sanй F, Hiar R, Goffard A, Gharbi J, Geenen V, Hober D. Immunology in the clinic review series; focus on type 1 diabetes and viruses: enterovirus, thymus and type 1 diabetes pathogenesis. Clinical and Experimental Immunology 2012. 168 39-46.

22) Jaпdane H, Caloone D, Lobert PE, Sane F, Dardenne O, Naquet P, Gharbi J, Aouni M, Geenen V, Hober D. Persistent infection of thymic epithelial cells with coxsackievirus B4 results in decreased expression of type 2 insulin-like growth factor. Journal of Virology 2012.86 11151-11162.

23) Eizirik DL, Colli ML, Ortis F. The role of inflammation in insulitis and beta-cell loss in type 1 diabetes. Nature Reviews Endocrinology 2009. 5 219-226. (10.1038/nrendo.2009.21)

24) Cunha DA, Igoillo-Esteve M, Gurzov EN, Germano CM, Naamane N, Marhfour I, Fukaya M, Vanderwinden JM, Gysemans C, Mathieu C, et al Death protein 5 and p53-upregulated modulator of apoptosis mediate the endoplasmic reticulum stress-mitochondrial dialog triggering lipotoxic rodent and human в-cell apoptosis. Diabetes 2012. 61 2763-2775. (10.2337/db12-0123)

25) Grieco FA, Sebastiani G, Juan-Mateu J, Villate O, Marroqui L, Ladriиre L, Tugay K, Regazzi R, Bugliani M, Marchetti P, et al MicroRNAs miR-23a-3p, miR-23b-3p, and miR-149-5p regulate the expression of proapoptotic BH3-only proteins DP5 and PUMA in human pancreatic в-cells. Diabetes 2017. 66 100-112. (10.2337/db16-0592)

26) Szkudelski T. The mechanism of alloxan and streptozotocin action in B cells of the rat pancreas. Physiol Res. 2001;50(6):537-546.

27) Lenzen S. The mechanisms of alloxan- and streptozotocin-induced diabetes. Diabetologia. 2008;51(2):216-226.

28) Junod A, Lambert AE, Stauffacher W, Renold AE. Diabetogenic action of streptozotocin: relationship of dose to metabolic response. J Clin Invest. 1969;48(11):2129-2139.

29) Yin D, Tao J, Lee DD, et al. Recovery of islet beta-cell function in streptozotocin-induced diabetic mice: an indirect role for the spleen. Diabetes. 2006;55(12):3256-3263.

30) Turner NC, Strauss SJ, Sarker D, Gillmore R, Kirkwood A, Hackshaw A, Papadopoulou A, Bell J, et al. Chemotherapy with 5-fluorouracil, cisplatin and streptozocin for neuroendocrine tumours. Br J Cancer. 2010;102:1106-1112.

31) Junod A, Lambert AE, Stauffacher W, Renold AE. Diabetogenic action of streptozotocin: relationship of dose to metabolic response. J Clin Invest. 1969;48:2129-2139.

32) Ganda OP, Rossini AA, Like AA. Studies on streptozotocin diabetes. Diabetes. 1976;25:595-603.

33) Degenhardt TP, Alderson NL, Arrington DD, Beattie RJ, Basgen JM, Steffes MW, Thorpe SR, Baynes JW. Pyridoxamine inhibits early renal disease and dyslipidemia in the streptozotocin-diabetic rat. Kidney Int. 2002;61:939-950.

34) Lenzen S (2007) Alloxan and streptozotocin diabetes. In: Peschke E (ed) Endokrinologie III Vortrдge im Rahmen des Projektes `Zeitstrukturen endokriner Systeme'. [Endocrinology III lectures within the `time structures of endocrine systems' project framework]. Abhandlung der Sдchs. Akad. Wiss., Mathnaturwiss Klasse, Verlag der Sдchsischen Akademie der Wissenschaften, Leipzig, commissioned by S. Hirzel Verlag, Stuttgart/Leipzig, pp 119-138

35) Lenzen S. The mechanisms of alloxan- and streptozotocin-induced diabetes. Diabetologia. 2008;51:216-226.

36) Ganda OP, Rossini AA, Like AA. Studies on streptozotocin diabetes. Diabetes. 1976;25:595-603.

37) Seyer P, Vallois D, Poitry-Yamate C, Schьtz F, Metref S, Tarussio D, Maechler P, Staels B, et al. Hepatic glucose sensing is required to preserve в cell glucose competence. J Clin Invest. 2013;123:1662-1676.

38) Thorens B. Brain glucose sensing and neural regulation of insulin and glucagon secretion. Diabetes Obes Metab. 2011;13(Suppl 1):82-88.

39) Johansson EB, Tjalve H. Studies on the tissue-disposition and fate of [14C]streptozotocin with special reference to the pancreatic islets. Acta Endocrinol. 1978;89(2):339-351.

40) Bouwens L, Rooman I. Regulation of pancreatic beta-cell mass. Physiol Rev. 2005;85(4):1255-1270.

41)Parlevliet E.T., Coomans C.P.d, Rensen P.C.N., Romijn J.A. The Brain Modulates Insulin Sensitivity in Multiple Tissues // How Gut and Brain Control Metabolism / Delhanty P.J.D., van der Lely A.J.. -- Basel: Karger Publishers, 2014. -- P. 50. -- 194 p. -- (Frontiers of Hormone Research). -- ISBN 978-3-318-02638-2. -- DOI:10.1159/000358314

42) Baker E. N., Blundell T. L., Cutfield J. F., Cutfield S. M., Dodson E. J., Dodson G. G., Hodgkin D. M., Hubbard R. E., Isaacs N. W., Reynolds C. D. (1988) The structure of 2Zn pig insulin crystals at 1.5 Ѓр resolution. Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 319, 369-456

43) De Meyts P. (2004) Insulin and its receptor: structure, function and evolution. Bioessays 26, 1351-1362

44) Dodson G., Steiner D. (1998) The role of assembly in insulin's biosynthesis. Curr. Opin. Struct. Biol. 8, 189-194

45) Brange J., Andersen L., Laursen E. D., Meyn G., Rasmussen E. (1997) Toward understanding insulin fibrillation. J. Pharm. Sci. 86, 517-525.

46) DeFronzo RA, et al. The effect of insulin on the disposal of intravenous glucose. Results from indirect calorimetry and hepatic and femoral venous catheterization. Diabetes. 1981;30(12):1000-7.

47) Kristiansen S, Hargreaves M, Richter EA. Exercise-induced increase in glucose transport, GLUT-4, and VAMP-2 in plasma membrane from human muscle. Am J Physiol. 1996;270(1 Pt 1):E197-201.

48) Frayn KN. Adipose tissue as a buffer for daily lipid flux. Diabetologia. 2002;45(9):1201-10.

49) Coppack SW, Patel JN, Lawrence VJ. Nutritional regulation of lipid metabolism in human adipose tissue. Exp Clin Endocrinol Diabetes. 2001;109(Suppl 2):S202-14.

50) Czech MP, et al. Insulin signalling mechanisms for triacylglycerol storage. Diabetologia. 2013;56(5):949-64.

51) Bluher M, et al. Adipose tissue selective insulin receptor knockout protects against obesity and obesity-related glucose intolerance. Dev Cell. 2002;3(1):25-38.

52) Dimitriadis G, et al. Glucose and lipid fluxes in the adipose tissue after meal ingestion in hyperthyroidism. J Clin Endocrinol Metab. 2006;91(3):1112-8.

53) Newsholme EA, Dimitriadis G. Integration of biochemical and physiologic effects of insulin on glucose metabolism. Exp Clin Endocrinol Diabetes. 2001;109(Suppl 2):S122-34.

54) Shepherd PR, Kahn BB. Glucose transporters and insulin action--implications for insulin resistance and diabetes mellitus. N Engl J Med. 1999;341(4):248-257.

55) Pause A, et al. Insulin-dependent stimulation of protein synthesis by phosphorylation of a regulator of 5?-cap function. Nature. 1994;371(6500):762-7.

56) Fridlyand LE, Philipson LH. A computational systems analysis of factors regulating б cell glucagon secretion. Islets. 2012;4(4):262-283. doi:10.4161/isl.22193.

57) Ramakrishnan SK, Zhang H, Takahashi S, et al. HIF2б is an essential molecular brake for postprandial hepatic glucagon response independent of insulin signaling. Cell metabolism. 2016;23(3):505-516. doi:10.1016/j.cmet.2016.01.004

58)Habegger KM, Heppner KM, Geary N, Bartness TJ, DiMarchi R, Tschop MH. The metabolic actions of glucagon revisited. Nature reviews Endocrinology. 2010;6:689-697.

59) Koo SH, Flechner L, Qi L, Zhang X, Screaton RA, Jeffries S, Hedrick S, Xu W, Boussouar F, Brindle P, Takemori H, Montminy M. The CREB coactivator TORC2 is a key regulator of fasting glucose metabolism. Nature. 2005;437:1109-1111.

60) Walker JN, Ramracheya R, Zhang Q, Johnson PR, Braun M, Rorsman P. Regulation of glucagon secretion by glucose: paracrine, intrinsic or both? Diabetes, obesity & metabolism. 2011;13(Suppl 1):95-105.

61) Unger RH, Eisentraut AM, Madison LL. The effects of total starvation upon the levels of circulating glucagon and insulin in man. The Journal of clinical investigation. 1963;42:1031-1039.

62) Тse TF, Clutter WE, Shah SD, Cryer PE. Mechanisms of postprandial glucose counterregulation in man. Physiologic roles of glucagon and epinephrine vis-a-vis insulin in the prevention of hypoglycemia late after glucose ingestion. The Journal of clinical investigation. 1983;72:278-286.

63) Lewis GF, Vranic M, Giacca A. Glucagon enhances the direct suppressive effect of insulin on hepatic glucose production in humans. The American journal of physiology. 1997;272:E371-378.

64) D'Alessio D. The role of dysregulated glucagon secretion in type 2 diabetes. Diabetes, obesity & metabolism. 2011;13(Suppl 1):126-132.

65)Dentin R, Liu Y, Koo SH, Hedrick S, Vargas T, Heredia J, Yates J, 3rd, Montminy M. Insulin modulates gluconeogenesis by inhibition of the coactivator TORC2. Nature. 2007;449:366-369.

66) Melendez-Ramirez LY, Richards RJ, Cefalu WT. Complications of type 1 diabetes. Endocrinol Metab Clin North Am. 2010;39:625-40.

67) Orchard TJ, Costacou T, Kretowski A, Nesto RW. Type 1 diabetes and coronary artery disease. Diabetes Care. 2006;29:2528-38.

68) Maser RE, Wolfson SK, Jr, Ellis D, et al. Cardiovascular disease and arterial calcification in insulin-dependent diabetes mellitus: interrelations and risk factor profiles. Pittsburgh Epidemiology of Diabetes Complications Study-V. Arterioscler Thromb. 1991;11:958-65.

69) Nathan DM, Cleary PA, Backlund JY, et al. Intensive diabetes treatment and cardiovascular disease in patients with type 1 diabetes. N Engl J Med. 2005;353:2643-53.

70) Eckel RH, Eisenbarth GS. Autoimmune diabetes inflames the heart. Sci Transl Med. 2012;4:138fs18.

71) Gottumukkala RV, Lv H, Cornivelli L, et al. Myocardial infarction triggers chronic cardiac autoimmunity in type 1 diabetes. Sci Transl Med. 2012;4:138ra80.

72) Brittle diabetes (labile diabetes) [Internet]. United Kingdom: Diabetes.co.uk; 2015. [cited 2015 Feb 5].

73) Ballinger WF, Lacy PE. Transplantation of intact pancreatic islets in rats. Surgery. 1972; 72(2): 175-86.

74) Scharp DW, Lacy PE, Santiago JV, McCullough CS, Weide LG, Falqui L, et al. Insulin independence after islet transplantation into type I diabetic patient. Diabetes. 1990; 39(4): 515-8.

75) Brendel MHB, Schulz A, Bretzel R. International islet transplant registry report. Giessen, Germany: University of Giessen; 2001.

76) Shapiro AM, Lakey JR, Ryan EA, Korbutt GS, Toth E, Warnock GL, et al. Islet transplantation in seven patients with type 1 diabetes mellitus using a glucocorticoid-free immunosuppressive regimen. N Engl J Med. 2000; 343(4): 230-8.

77) White SA, James RF, Swift SM, Kimber RM, Nicholson ML. Human islet cell transplantation--future prospects. Diabet Med. 2001; 18(2): 78-103.

78) Ryan EA, Paty BW, Senior PA, Bigam D, Alfadhli E, Kneteman NM, et al. Five-year follow-up after clinical islet transplantation. Diabetes. 2005; 54(7): 2060-9.

79) Hilling DE, Bouwman E, Terpstra OT, Marang-van de Mheen PJ. Effects of donor-, pancreas-, and isolation-related variables on human islet isolation outcome: a systematic review. Cell Transplant. 2014; 23(8): 921-8.

80) Ricordi C, Alejandro R, Zeng Y, Tzakis A, Casavilla A, Jaffe R, et al. Human islet isolation and purification from pediatric-age donors. Transplant Proc. 1991; 23(1 Pt 1): 783-4.

81) Matsumoto S, Takita M, Chaussabel D, Noguchi H, Shimoda M, Sugimoto K, et al. Improving efficacy of clinical islet transplantation with iodixanol-based islet purification, thymoglobulin induction, and blockage of IL-1beta and TNF-alpha. Cell Transplant. 2011; 20(10): 1641-7.

82) Froud T, Baidal DA, Faradji R, Cure P, Mineo D, Selvaggi G, et al. Islet transplantation with alemtuzumab induction and calcineurin-free maintenance immunosuppression results in improved short- and long-term outcomes. Transplantation. 2008; 86(12): 1695-701.

83) Anazawa T, Saito T, Goto M, Kenmochi T, Uemoto S, Itoh T, et al. Long-term outcomes of clinical transplantation of pancreatic islets with uncontrolled donors after cardiac death: a multicenter experience in Japan. Transplant Proc. 2014; 46(6): 1980-4.

84) Koh A, Senior P, Salam A, Kin T, Imes S, Dinyari P, et al. Insulin-heparin infusions peritransplant substantially improve single-donor clinical islet transplant success. Transplantation. 2010; 89(4): 465-71.

85) Hering BJ, Kandaswamy R, Ansite JD, Eckman PM, Nakano M, Sawada T, et al. Single-donor, marginal-dose islet transplantation in patients with type 1 diabetes. JAMA. 2005; 293(7): 830-5. Erratum in: JAMA. 2005. Apr 6; 293(13): 1594.

86) Froud T, Ricordi C, Baidal DA, Hafiz MM, Ponte G, Cure P, et al. Islet transplantation in type 1 diabetes mellitus using cultured islets and steroid-free immunosuppression: Miami experience. Am J Transplant. 2005; 5(8): 2037-46.

87) Ghofaili KA, Fung M, Ao Z, Meloche M, Shapiro RJ, Warnock GL, et al. Effect of exenatide on beta cell function after islet transplantation in type 1 diabetes. Transplantation. 2007; 83(1): 24-8.

88) Shapiro AM. Islet transplantation in type 1 diabetes: ongoing challenges, refined procedures, and long-term outcome. Rev Diabet Stud. 2012; 9(4): 385-406.

89) Hatziavramidis DT, Karatzas TM, Chrousos GP. Pancreatic islet cell transplantation: an update. Ann Biomed Eng. 2013; 41(3): 469-76.

Размещено на Allbest.ru

...