Отдельного внимания заслуживает анализ временной динамики ноотропного действия реамберина в условиях экспериментального СД. Прежде всего, это касается минимальной и максимальной доз данного ЛС. Как видно (табл. 8), лишь однократное применение Ѕ ЭСТД и 2 ЭСТД реамберина вызывало достоверное возрастание показателя качества формирования УРАИ. Повторное применение этих доз реамберина не корригировало когнитивный дефицит у больных животных. Лишь единственная доза реамберина (ЭСТД) значимо корригировала нарушения формирования УРАИ только при повторном (7 и 14 кратном) введении.

Полученные данные позволяют считать, что длительное курсовое введение реамберина приводило к развитию толерантности в отношении его ноотропного эффекта при аллоксановом диабете у крыс. Это касается минимальной и максимальной дозировок данного ЛС. 14 дневное применение относительно высоких доз реамберина, по-видимому, также связано с развитием толерантности в отношении его влияния на интенсивность груминга. Коррекция этологических расстройств у животных с аллоксановым диабетом под действием изученных ЛС сопровождалась уменьшением выраженности диабетогенных нарушений углеводного и липидного обмена. Наиболее ярко эта закономерность проявилась в условиях курсового (14 дневного) применения б-ЛК. Как видно (табл. 7), этот режим введения всех изученных дозировок б-ЛК приводил к более чем двукратному уменьшению показателя гликемии. То же самое касалось коррекции гиперхолестеринемии и гипертриглицеридемии, выраженность которых достоверно снижалась в результате 14 дневного введения всех исследуемых дозировок б-ЛК. Следует добавить, что даже однократное введение максимальной дозы б-ЛК (2 ЭСТД) вызывало существенную коррекцию показателей гиперлипидемии у крыс с аллоксановым диабетом. Однократное применение относительно низких доз б-ЛК (Ѕ ЭСТД и ЭСТД) статистически значимо уменьшало выраженность гипертриглицеридемии у больных животных. Полученные результаты позволяют считать, что анксио-ноотропный и тимоаналептический эффекты б-ЛК развиваются главным образом в те же сроки, что и её корригирующее действие в отношении расстройств углеводно-липидного обмена. Это касается в первую очередь, длительного, 14 дневного применения б-ЛК. Вместе с тем, анксио-ноотропные эффекты б-ЛК наблюдаемые при однократном применении этого ЛС, тоже сопровождаются улучшением состояния липидного обмена (табл. 7). Анализ изменений гликемии и липидемии при аллоксановом диабете под действием реамберина свидетельствует о менее выраженной связи между его метаболическими и психотропными эффектами в сравнении с б-ЛК. Невзирая на наибольшую выраженность коррекции этологических расстройств под действием минимальной дозы реамберина (табл. 8), данная дозировка этого ЛС не оказывала значимого влияния на выраженность гипергликемии и даже усугубляла дислипидемические расстройства у крыс с аллоксановым диабетом (табл. 6). Это проявилось достоверным увеличением показателя гиперхолестеринемии при однократном применении Ѕ ЭСТД реамберина и существенным усугублением гипертриглицеридемии при 14 кратном применении этой дозировки реамберина.

Таблица 6 Влияние реамберина на показатели углеводного, липидного обмена и перекисного окисления липидов - антиоксидантной защиты в сыворотке крови крыс с экспериментальным сахарным диабетом (Мm)

Примечания к табл. 6: 1) содержание фруктозамина представлено в расчете на 1 грамм альбумина сыворотки крови; 2) содержание продуктов перекисного окисления липидов представлено в виде индексов окисления (ед.и.о.) ДК - Е232/Е220 ; КД и СТ - Е278/Е220; буквенные подиндексы [ г ] и обозначают, соответственно гептановую и изопропанольную фазы липидного экстракта; 3) интактным крысам вместо аллоксана и реамберина вводили 0,9% раствор NaCl; контрольным крысам с аллоксановым диабетом вместо реамберина вводили эквиобъемное количество 0,9% раствора NaCl; 4) - p < 0,05 по сравнению с интактным контролем; - p< 0,05 по сравнению с контрольной группой крыс с аллоксановым диабетом; 5) значимость межгрупповых различий оценивали с помощью непараметрических критериев Манна-Уитни, Вальда-Вольфовица, Колмогорова-Смирнова.

Таблица 7 Влияние -липоевой кислоты на показатели углеводного, липидного обмена и перекисного окисления липидов - антиоксидантной защиты в сыворотке крови крыс с экспериментальным сахарным диабетом (Мm)

Примечания к табл.7: соответствуют примечаниям к таблице 6.

Таблица 8 Влияние -липоевой кислоты и реамберина на поведение в «открытом поле» и формирование условного рефлекса активного избегания (УРАИ) у крыс с экспериментальным сахарным диабетом (Mm)

Примечания к табл. 8:

1) в таблице представлены результаты регистрации актов поведенческой активности, полученные в течение десятиминутного наблюдения за животными в «открытом поле»; показатель анксиогенной дефекации представлен числом фекальных болюсов (Волчегорский И.А. и др., 1993, 2000); показатель УРАИ представлен кратностью снижения латентного периода избегания через 24 часа после обучающей попытки (Буреш Я. и др., 1991);

2) интактным крысам вместо аллоксана и б-липоевой кислоты или реамберина вводили 0,9% раствор NaCl; контрольным крысам с аллоксановым диабетом вместо б-липоевой кислоты или реамберина вводили эквиобъемное количество 0,9% раствора NaCl;

3) - p < 0,05 по сравнению с интактным контролем; - p< 0,05 по сравнению с контрольной группой крыс с аллоксановым диабетом;

4) значимость межгрупповых различий оценивали с помощью непараметрических критериев Манна-Уитни, Вальда-Вольфовица, Колмогорова-Смирнова.

В результате применения максимальной дозы реамберина (2 ЭСТД) удалось выявить только достоверное усугубление гипертриглицеридемии при однократном введении этого ЛС. Лишь ЭСТД реамберина вызывал значимую коррекцию гликемии и гипертриглицеридемии при однократном введении. Повторное (7 и 14 дневное) применение ЭСТД реамберина, сопровождалась лишь нарастанием показателя гипертриглицеринемии.

Сопоставление метаболических и психотропных эффектов реамберина при аллоксановом диабете не позволяет установить между ними непосредственную взаимосвязь. Это качественно отличает фармакодинамику реамберина от б-ЛК при аллоксановом диабете.

Влияние изученных ЛС на показатели системы ПОЛ-АОЗ носило двухфазный характер и существенно различалось для отдельных категорий липопероксидов и компонентов АОЗ. Наиболее яркие эффекты б-ЛК были зарегистрированы в отношении изопропанол-растворимых продуктов ПОЛ. Прежде всего, это касалось содержания ДК[и] в сыворотке крови, уровень которых наиболее ярко изменялся при введении относительно высоких доз б-ЛК (ЭСТД и 2 ЭСТД). Как видно (табл. 7), лишь повторное (7 и 14 кратное) введение б-ЛК приводило к значимым сдвигам уровня ДК[и]. При этом, 7 кратное применение данного ЛС вызывало достоверное уменьшение уровня ДК[и] при использовании как ЭСТД, так и 2 ЭСТД данного ЛС. При 14 дневном введении, наоборот, отмечалось достоверное увеличение содержания ДК[и] при использовании всех изученных доз. Неоднозначный характер временной динамики изменения ДК[и] под действием б-ЛК не позволяет связать её позитивные психотропные эффекты с антиоксидантным действием этого ЛС. Более того, следует подчеркнуть, что 14 дневное введение б-ЛК характеризующееся наиболее выраженной коррекцией расстройств УРАИ и поведения, оказывало отчетливое прооксидантное действие in vivo. Стоит добавить, что в отношении влияния б-ЛК на уровень гептан-растворимых КД и СТ удалось зарегистрировать только увеличение этой категории липопероксидов при 14 кратном применении ЭСТД и однократном введении 2 ЭСТД данного ЛС. Только минимальная (Ѕ ЭСТД) и максимальная (2 ЭСТД) дозы б-ЛК оказали значимое влияние на содержание КД и СТ [и] в сыворотке крови больных животных. В обоих случаях, это проявилось достоверным уменьшением содержания вторичных изопропанол-растворимых продуктов ПОЛ в результате 7 дневного применения б-ЛК.

Менее выраженным оказалось влияние б-ЛК на показатели АОЗ. Достоверные изменения показателей АОЗ под действием б-ЛК были зарегистрированы только при однократном введении максимальной дозы (2 ЭСТД) этого ЛС, что проявилось значимым снижением концентрации ЦП в сыворотке крови больных животных.

Влияние реамберина на содержание циркулирующих продуктов ПОЛ у крыс с аллоксановым диабетом во многом напоминало соответствующее действие б-ЛК. Реамберин, так же как б-ЛК, оказывал преимущественное влияние на содержание циркулирующих ДК[и], уровень которых двухфазно изменялся при 7 и 14 дневном введении реамберина. Как видно (табл. 6), все изученные дозировки реамберина вызывали снижение сывороточного содержания ДК[и] при 7 кратном введении этого ЛС и повышали уровень ДК[и] при 14 кратном применении реамберина. Содержание КД и СТ[г] значимо повышалось при 14 кратном введении максимальной дозы реамберина (2 ЭСТД) и достоверно уменьшалось при 7 кратном применении минимальной (Ѕ ЭСТД) дозы данного ЛС. 7 кратное введение ЭСТД реамберина тоже приводило к достоверному уменьшению содержания КД и СТ[и].

Также, как б-ЛК, реамберин способствовал снижению содержания ЦП в крови больных животных (табл. 6). Это проявилось достоверным уменьшением концентрации циркулирующего ЦП в результате 14 кратного введения ЭСТД реамберина. Ни одно из изученных ЛС не оказало значимого влияния на содержание б-ТК в сыворотке крови животных с аллоксановым диабетом.

В целом, полученные данные свидетельствуют о том, что оба изученных ЛС (б-ЛК и реамберин) при длительном (14 дневном) применении оказывают скорее про-, нежели анти-оксидантное действие. Это не позволяет рассматривать постулируемое в литературе антиоксидантное действие б-ЛК в качестве единственного и тем более основного механизма её корригирующего влияния на расстройства церебральных функций и метаболизма при аллоксановом диабете. Справедливость этого положения иллюстрируется преимущественным снижением содержания липопероксидов под действием изученных ЛС в те сроки, когда течение аллоксанового диабета связано с активацией липопероксидации и, наоборот, на фоне подавления липопероксидации к 17-ому дню после индукции аллоксанового диабета б-ЛК и реамберин вызывали увеличение уровня циркулирующих продуктов ПОЛ.

Результаты экспериментов по применению реамберина и б-ЛК у крыс с аллоксановым диабетом позволяют прийти к выводу о высокой эффективности обоих ЛС. Важно подчеркнуть, что способность реамберина и б-ЛК корригировать расстройства мотивированного поведения и условно-рефлекторного обучения крыс с аллоксановым диабетом хорошо согласуется с особенностями динамики влияния этих ЛС на нарушения углеводного и липидного обмена.

Установленные факты свидетельствуют о возможности практического применения реамберина в комплексном лечении больных СД, страдающих диабетической энцефалопатией. Краткосрочные курсы применения относительно низких доз реамберина в диабетологической практике могут оказаться не менее эффективными, чем длительное применение препаратов б-ЛК.

Выводы

1. Реамберин и б-липоевая кислота обладают инсулин-потенциирующим действием, выраженность которого зависит от интенсивности прооксидантного эффекта этих лекарственных средств in vitro. б-липоевая кислота превосходит реамберин по способности усиливать липидную пероксидацию in vitro и выраженности инсулин-потенциирующего действия in vivo.

2. Инсулин-потенциирующее действие б-липоевой кислоты связано с увеличением толерантности крыс к сахарной нагрузке после однократного введения этого лекарственного средства. Несмотря на выраженную инсулин-потенциирующую активность реамберина, его однократное введение оказывает гипергликемизирующее действие и снижает толерантность крыс к нагрузке глюкозой.

3. Курсовое введение реамберина и б-липоевой кислоты лабораторным грызунам с аллоксановым диабетом корригирует расстройства метаболизма, мотивированного поведения и условно-рефлекторного обучения в зависимости от влияния изученных лекарственных средств на чувствительность к инсулину и толерантность к сахарной нагрузке.

4. Краткосрочное (1 и 7 дневное) применение относительно низких доз реамберина снижает выраженность гипергликемии и существенно корригирует нарушения мотивированного поведения и условно-рефлекторного обучения при экспериментальном сахарном диабете. Более продолжительное (14 дневное) применение реамберина сопровождается развитием толерантности в отношении его сахароснижающего и психотропного эффектов с одновременным усугублением дислипидемических расстройств при аллоксановым диабете.

5. б-липоевая кислота, в отличие от реамберина обладающая антигипоксическим и противовоспалительным действием, характеризуется кумулятивным развитием сахароснижающего, гиполипидемического, тимоаналептического, анксиолитического и ноотропного эффектов при аллоксановом диабете. Выраженность этих эффектов б-липоевой кислоты достигает максимума при 14 дневном курсовом применении данного лекарственного средства.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Мирошниченко И.Ю. Влияние отечественных антиоксидантов на расстройства поведения и условно-рефлекторного обучения животных при экспериментальном сахарном диабете / И.Ю. Мирошниченко // Материалы VI итоговой научно-практической конференции молодых ученых Челябинской государственной медицинской академии. - Челябинск: Изд-во «Челябинская государственная медицинская академия», 2008. - С. 95-97.

2. Волчегорский И.А. Антиоксиданты при экспериментальном сахарном диабете / И.А. Волчегорский, Л.М. Рассохина, И.Ю. Мирошниченко // Проблемы эндокринологии. - 2008. - Т. 54, № 5. - С. 43-49.

3. Волчегорский И.А. Сравнительный анализ влияния производных 3-оксипиридина и янтарной кислоты на устойчивость к острой гипоксической гипоксии / И.А. Волчегорский, Л.М. Рассохина, И.Ю. Мирошниченко // V Российская конференция «Гипоксия: механизмы, адаптация, коррекция». - Москва: Научно-практический журнал «Патогенез», 2008. - Т. 6, № 3. - С. 50-51.

4. Волчегорский И.А. Антидепрессивное действие производных 3-оксипиридина при аллоксановом диабете у мышей / И.А. Волчегорский, Л.М. Рассохина, И.Ю. Мирошниченко // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2009. - Т. 72, № 2. - С. 11-15.

5. Волчегорский И.А. Антидепрессивное действие б-липоевой кислоты и реамберина при аллоксановом диабете у мышей / И.А. Волчегорский, Л.М. Рассохина, И.Ю. Мирошниченко // Проблемы эндокринологии. - 2009. - Т. 55, № 4. - С. 20-25.

6. Мирошниченко И.Ю. Антидепрессивное действие реамберина при экспериментальном сахарном диабете у мышей / И.Ю. Мирошниченко // Материалы VII итоговой научно-практической конференции молодых ученых Челябинской государственной медицинской академии. - Челябинск: Изд-во «Челябинская государственная медицинская академия», 2009. - С. 81-83.

7. Волчегорский И.А. Влияние лекарственных средств с «антиоксидантной активностью» на переокисление липидов нервной ткани in vitro /И.А. Волчегорский, Л.М. Рассохина, И.Ю. Мирошниченко, К.М. Местер, П.Н. Новоселов, Т.В. Астахова, И.А. Денисенко// Актуальные проблемы медицинской науки и практического здравоохранения: труды научной сессии, посвященной 65-летию медицинской академии. - Челябинск, 2009 - С.73-77.

8. Волчегорский И.А. Влияние производных 3-оксипиридина и янтарной кислоты на толерантность к глюкозе и этологические проявления экспериментальной диабетической энцефалопатии / И.А. Волчегорский, Л.М. Рассохина, И.Ю. Мирошниченко // Вестник Уральской медицинской академической науки. - 2009. - № 4. - С. 94-99.

9. Волчегорский И.А. Инсулинпотенциирующее действие антиоксидантов и их эффективность при экспериментальном сахарном диабете / И.А. Волчегорский, Л.М. Рассохина, И.Ю. Мирошниченко // Проблемы эндокринологии. - 2010. - Т. 56, № 2. - С. 27-35.

Размещено на Allbest.ru