Дослідження вмісту біологічно активних речовин та седативні властивості Calendula Officinalis

Размещено на http://www.allbest.ru/

ДОСЛІДЖЕННЯ ВМІСТУ БІОЛОГІЧНО АКТИВНИХ РЕЧОВИН ТА СЕДАТИВНІ ВЛАСТИВОСТІ CALENDULA OFFICINALIS

Сівко Г.І.,

Швець І.О.

Постановка проблеми. Загальне погіршення екологічної ситуації в країні і в світі призвело до зниження імунітету населення. Підвищити його можна шляхом регулярного споживання продуктів, які відрізняються високим вмістом біологічно активних речовин (БАР), що сприяють зміцненню захисних сил організму, до числа яких відносять вітаміни, каротиноїди, фенольні сполуки, хлорофіл, харчові волокна, мікро-, макроелементи та інші БАР рослинної сировини. Їх дефіцит призводить до зменшення активності імунної системи, зниження працездатності й опору хворобам, підвищення ризику розвитку серцево-судинних, онкологічних та інших захворювань. Особливе місце серед БАР, що відповідають за захисні властивості організму, поряд з вітамінами антиоксидантного ряду, мінеральними речовинами, займають каротиноїди та флавоноїди, які, за даними медиків, здійснюють на організм людини протипухлинну, антиоксидантну, імуномоделюючу дію.

Крім того, останнім часом значно підвищився інтерес до дослідження процесів вільно радикального окислення і, як наслідок, - до лікарських препаратів та харчових біокомпонентів, здатних знижувати інтенсивність цих процесів. Для регулювання вільно радикальних процесів в організмі людини застосовують біологічно активні речовини, що виявляють антиоксидантні властивості. Серед них особливо важливе значення мають рослинні комплекси, до складу яких входять біофлавоноїди та каротиноїди. Саме біоан- тиоксиданти є найбільш ефективним природним засобом захисту організму людини від надмірної кількості вільних радикалів. Лікарські рослини широко використовують у медицині, однак як джерело антиоксидантів вони вивчені мало. Тому метою нашої роботи є дослідження вмісту біоантиоксидантів у зразках лікарської рослини Calendula officinalis.

Аналіз останніх досліджень і публікацій. Лікарські рослини -- традиційна сировина для виготовлення ліків. На сьогоднішній день третину лікарських засобів отримують саме з рослинної сировини. Висока ефективність фітотерапії, підтверджена багатовіковим досвідом, зумовлює широке застосування препаратів на основі рослинної сировини у клінічній практиці. Багатьох клініцистів фітопрепарати приваблюють тим, що їх застосування супроводжується мінімальною кількістю побічних ефектів, вони не взаємодіють з іншими лікарськими засобами. Calendula officinalis -- широко відома лікарська й декоративна рослина. На сьогодні Calendula officinalis входить у десятку самих популярних в Європі лікарських рослин. По статистиці, вона випереджає шавлію, валеріану, звіробій, уступаючи тільки ромашці аптечної, і посідає друге місце по площі вирощування, однак проблема раціонального використання сировинних ресурсів як і раніше залишається актуальної [1, с. 237; 2, с. 160].

Широкий спектр фармакологічної дії календули обумовлений вмістом різних класів біологічно активних сполук: каротиноїдів, флавоноїдів (глікозіди кемпферола, кверцитина й ізорамне- тина), сапонінів. Даний фактор робить календулу перспективним джерелом для виробництва препаратів на її основі [3, с. 84].

За результатами попередніх досліджень відомо, що з календули виділена олеанова кислота як у вільному виді, так і у вигляді глікозидів. Вміст суми глікозідів олеанової кислоти в коріннях і надземної частини календули коливається від 4 до 5%. Встановлено, що один із глікозидів -- календулозид В (С₄₈Н₇₈О₁₈ -2, 5Н₂О) володіє нейротропною активністю, поліпшує проведення й передачу нервових імпульсів [4, с. 96]. Цей аспект використання лікарської рослини недостатньо вивчено, тому метою даного дослідження було вивчення можливості використання лікарської рослини у якості седативного засобу.

Виділення невирішених раніше частин загальної проблеми. Актуальність даної теми обумовлена тим, що з року в рік у нашій країні зростає інтерес до лікарських рослин і препаратів з них. Наскільки ні ефективні нові препарати, що випускаються хіміко-фармацевтичною промисловістю, скромні трави наших лісів і полів користуються довірою сотень тисяч пацієнтів. І це цілком зрозуміло тому, що терапевтична цінність великої кількості лікарських рослин визнана науковою медициною. Все більше число науково дослідних інститутів і вузів проводять поглиблені дослідження давно відомих і широко використовуваних лікарських рослин, щоб виявити нові можливості для їх застосування в медичній практиці.

Мета статті. Метою нашого дослідження стало вивчення вмісту біологічно активних речовин з антиоксидантними властивостями у різних зразках квітів лікарської рослини Calendula officinalis. У ході досліджень було вивчено також можливості використання лікарської рослини у якості седативного засобу. Було вивчено седативну та анксіолітичну дію настою зразків квітів Calendula officinalis на орієнтаційно-дослідницькі реакції експериментальних тварин в умовах стресу за тестами «відкритого поля» та «чорно-білої камери».

Виклад основного матеріалу дослідження. Об'єктом дослідження були зразки квітів календули лікарської виробників «Ліктрави» (І), «Віола»(ІІ), та зразок квітів Calendula officinalis сорту Кальта, власної заготовки (ІІІ). Збір сировини проводили в момент масового цвітіння. Сушіння сировини проводилося природнім повітряно-тіньовим способом відразу ж після збору.

Кількісний аналіз суми флавоноїдів проводили за методикою. 1г подрібненої сировини поміщали в колбу зі шліфом місткістю 150 мл, додавали 30 мл 70 % розчину спирту. Колбу приєднували до зворотнього холодильника і нагрівали на киплячій водяній бані протягом 30 хвилин. Після охолодження екстракт фільтрували крізь вату в мірну колбу, обсяг доводили до мітки 70 % розчином спирту і перемішували. В якості стандарту було використано рутин. Вимірювання проводилося при довжині хвилі 413 нм.

Результати, отримані в ході дослідження представлені в таблиці 1.

Таблиця 1. Визначення вмісту флавоноїдів спиртовому екстракті зразків квітів Calendula officinalis у перерахунку на рутин, мкг/мл

Визначення вмісту каротиноїдів у досліджуваної сировині проводили за наступною методикою. До наважки 2 г подрібненої сировини додавали 40 мл гексану. Колбу з вмістом залишали на екстракцію протягом 2 годин при по стійному перемішуванні. Після проведення 2-х годинної екстракції екстракт фільтрували через паперовий фільтр з червоною смугою в колбу місткістю 50 мл. Вміст колби ретельно перемішували (випробовуваний розчин). Вимірювання оптичної щільності проводили на спектрофотометрі при довжині хвилі 450 нм. Як розчин порівняння використовували гексан. Паралельно виміряли оптичну густину розчину стандартного зразка біхромату калію, використовуючи як розчин порівняння дистильовану воду. Вміст суми каротиноїдів в сировині (в мг%) в перерахунку на абсолютно суху сировину (Х) розраховували за формулою:

де D -- оптична густина досліджуваного розчину; D₀ -- оптична густина розчину стандартного зразка біхромату калію; 0, 00208 -- кількість каротину в розчині, відповідне по концентрації 1 мл розчину стандартного зразка біхромату калію, мл; m -- навіска сировини, г; V -- об'єм виймання, мл; W -- втрата в масі при висушуванні, %.

В ході проведених експериментів визначено вміст суми каротиноїдів у зразках квітів Calendula officinalis виробників «Ліктрави», «Віола» та зразку квітів сорту Кальта власної заготовки. Встановлено, що цей показник в екстрактах досліджуваних зразків розміщується на рівні 6, 4-4, 1мг% в перерахунку на суху речовину.

Седативну дію настою зразків календули вивчали за методом «відкритого поля». Піддослідних тварин через певні проміжки часу після введення естерів поміщали у «відкрите поле», що є рівномірно освітленою камерою 40 х 40 см, підлога якої розділена на 16 рівних квадратів з 16 отворами, діаметром 1, 5 см в центрі. Реєстрували число пересічених експериментальними тваринами квадратів (рухова активність), число стійок тварин на задніх лапах (вертикальна активність), і число заглядань в отвори (дослідницька активність). Спостереження проводилося протягом 3 хв.

Визначення спонтанної рухової та дослідницької активності експериментальних тварин після перорального одноразовог введення настою квітів Calendula officinalis дозою 60 мг/кг показало, що в інтервалі часу до п'яти годин після введення спостерігається значне зниження цих показників, порівняно з контролем, для всіх досліджуваних зразків (рис. 1).

Значне зниження показників активності експериментальних тварин на протязі п'яти годин після одноразового перорального введення всіх зразків дозою 60 мг/кг свідчить про наявність вираженої седативної дії досліджуваних настоїв квітів Calendula officinalis.

Анксіолітичну дію зразків настою квітів на орієнтаційно-дослідницькі реакції експериментальних тварин в умовах стресу оцінювали за методом «чорно-білої камери». Реєструвався час знаходження миші в темному відсіку (рефлекс нори) і кількість виходів і виглядань в світлий відсік за певний проміжок часу. Спостереження проводилося протягом 3 хв.

Данні, отримані за допомогою тесту „чорно-білої” камери свідчать, що рухова активність експериментальних тварин при одноразовому пероральному введенні всіх досліджуваних зразків значно знижується. У випадку введеня настою зразка квітів сорту Кальта дозою 60 мг/кг спостерігаєтся значне зниження актівності до 40% від контрольних значень на протязі п'яти годин після введення, що свідчить про виражену анксіолітичну дію досліджуваних зразків.

Відомо, що анксіолітики збільшують число виходів і час знаходження в світлому відсіку камери, контрольні ж тварини вважають за краще знаходитися в темному відсіку.

За результатами дослідження часу сидіння у норі експериментальних тварин при пероральному одноразовому введенні зразків настоїв квітів Calendula officinalis дозою 60мг/кг спостерігається зниження цього показника до 80% від контрольних значень на протязі трьох годин після введення, що свідчить про прояв анксіолітичної дії досліджуваних зразків.

Висновки. В ході проведених експериментів визначено вміст суми флавоноїдів у зразках квітів Calendula officinalis виробників «Ліктрави», «Віола» та зразку квітів сорту Кальта власної заготовки. Встановлено, що цей показник в екстрактах досліджуваних зразків розміщується на рівні 175-185 мкг/мл. Вміст суми каротиноїдів в екстрактах досліджуваних зразків розміщується на рівні 6, 4-4, 1мг% в перерахунку на суху речовину.

Дані, отриманні за тестами «відкритого поля» та «чорно-білої камери» свідчать, що настої квітів досліджуваних зразків Calendula Officinalis проявляють виражений седативний та анксіолітичний ефект в інтервалі часу від 1 до 5 год. після одноразового перорального введення, що підтверджує можливості використання лікарської рослини у якості седативного засобу.

лікарський рослина седативний анксіолітичний

Список літератури

1. Куркин В.А. Фармакогнозия. Учебник для студентов фармацевтических вузов / В.А. Куркин. - Самара: ООО «Офорт», ГОУ ВПО «СамГМУ», 2007. - С. 237-240.

2. Куркин В.А.Основы фитотерапии: учебное пособие. / В.А. Куркин. - Самара: ООО «Офорт», ГОУ ВПО «СамГМУ», 2009. - С. 160-165.

3. Ладигина Е.Я. Календула лекарственная / Е.Я. Ладигина // Фармация. 1992. Т.40, №4. С. 84-86.

4. Исмагилов Р.Р. Календула / Р.Р. Исмагилов, Д.А. Костылев - Уфа: БГАУ, 2000. - 102 с.

Размещено на Allbest.ru