Динаміка імунобіологічної реактивності організму корів протягом фізіологічних пологів і в післяпологовий період

Размещено на http://www.allbest.ru/

Динаміка імунобіологічної реактивності організму корів протягом фізіологічних пологів і в післяпологовий період

Кот С.П., Давиденко В.М., Мельник В.О., к.б.н., доценти Миколаївського державного аграрного університету

Вивчено динаміку імунобіологічної реактивності організму корів протягом фізіологічних пологів і в післяпологовий період. Встановлені зміни Т- і В- клітинного імунітету та фагоцитарної активності нейтрофілів крові у корів протягом пологів та в післяпологовий період.

Изучено динамику иммунобиологической реактивности организма коров в течение физиологических родов и в послеродовый период. Установлены изменения Т- и В- клеточного иммунитета и фагоцитарной активности нейтрофилов крови у коров в течение родов и в послеродовый период.

The dynamics of reactivity of organism of cows during physiological travails and during after-travailing period. Kot S.P., Davydenko V.M., Melnyk V.O.

The dynamics of immunobiological reactivity of organism of cows during physiological travails and during after-travailing period was studied. There were established variations of T- and В-cell immunity and phagocytal activity of neutrophils in cattle's blood during travails and during after-travailing period

Вступ. Пологи і післяпологовий період, відображаючи ряд складних фізіологічних і метабіологічних процесів в організмі самок, здійснюють сильний вплив на всі його системи, в тому числі і на імунну. Ззагально-прийняте визнання багатофакторної причинності еволюції вагітності і початку пологів. Однак, пусковий фактор продовжує викликати появу багаточисельних теорій, до яких належить і імунологічна. Вказується, що імунологічні явища відіграють важливу роль в пологовій діяльності, яка є наслідком розвитку певної чутливості материнського організму до органоспецифічних антигенів аллотрансплантанта. Ця сенсибілізація, яка наступає під час дозрівання плода, супроводжується в подальшому дегенеративними плацентарними змінами, з втратою здатності до гормонального біосинтезу і послабленням явищ імунологічної толерантності [4].

Дана робота спрямована на вивчення функціонального стану імунокомпетентних систем організму, виявлення резервних захисних сил, що важливо для об'єктивної оцінки перебігу післяпологового періоду.

Методика досліджень. Стан імунобіологічної реактивності організму тварин оцінювали за абсолютною і відносною кількістю Т- і В-лімфоцитів та фагоцитарною активністю нейтрофілів і моноцитів. Для вивчення імунобіологічної реактивності організму досліджували периферичну кров, (яку стабілізували гепарином 20-25 ОД на 1 мл) 10 клінічно здорових корів-аналогів чорно-рябої породи за 3-5 днів до пологів, в день пологів, на 4-5, 9-10, 14-15 і 19-20-й дні післяпологового періоду. Пологи у всіх тварин перебігали нормально і тривали 2-5 годин. Післяпологових ускладнень у тварин не спостерігали, послід відділявся вчасно.

Т-лімфоцити визначали за методикою Jondal e.a. (1972) в модифікації П.Д. Зуєва та ін. (1978) в реакції утворення лімфоцитами спонтанних розеток з еритроцитами барана.

Кількість В-лімфоцитів визначали за методом Г.В. Коромислова та ін. (1980) в реакції комплементарного розеткоутворення з еритроцитами барана, які мали активовані компоненти комплементу. При цьому еритроцити барана сенсибілізували гемолітичною сироваткою, яку готували шляхом однократного внутрішньовенного введення кроликам 10 мл 10 %-ної суспензії еритроцитів барана із взяттям крові на п'яту добу після імунізації. В якості комплемента використовували свіжу сироватку миші у розведенні 1:10.

При оцінці препаратів підраховували не менше 100 лімфоцитів. Розеткоутворюючими вважали лімфоцитів, які приєднували до своєї поверхні не менше трьох еритроцитів. Для визначення абсолютної кількості Т- і В-лімфоцитів у венозній крові підраховували в мазках, зафарбованих за Романовським-Гімзою, відсоток лімфоцитів і визначали кількість лейкоцитів в 1 мкл крові (в камері Горяєва) за загальноприйнятою методикою.

Кількість Т- і В-лімфоцитів на 1 мкл визначали за формулою: , де А - кількість лейкоцитів в 1 мкл крові; В - відсоток всіх лімфоцитів серед лейкоцитів; С - відсоток лімфоцитів, які утворили „розетки”.

Фагоцитарну активність нейтрофілів крові вивчали за методикою А.П. Ємельяненка та ін. (1980). В якості тест-мікроба використовували суспензію клітин із добової агарової культури E. coli, штам 817, на стерильному 0,85 % розчині натрію хлориду з таким розрахунком, щоб в 1 мл її містилось 50 млн. клітин бактерій.

Результати досліджень. При оцінці загальної кількості лейкоцитів в крові корів встановлено, що до і після пологів вона коливається в межах фізіологічної норми (табл. 1). Так, за 3-5 днів до пологів загальна кількість лейкоцитів в крові становила 8,56±0,81 тис./мкл, а в день пологів - 8,96±0,22 тис./мкл. На 4-5 день післяпологового періоду спостерігалось високо вірогідне зниження числа лейкоцитів (Р < 0,001). На 9-10-й і 14-15-й дні їх кількість дещо підвищувалась, а на 19-20-й день знову знижувалась, досягаючи мінімального рівня (7,20±0,17 тис./мкл).

Вивчення відносного числа лімфоцитів показало деяке зниження його в день пологів з наступним різким підвищенням у післяпологовий період. Так, якщо в день пологів відсоток лімфоцитів знизився з 47,2±1,12 % у передпологовий період до 46,6±1,01 %, то вже на 4-5-й день післяпологового періоду він становив 51,6±1,38 %, а на 14-15 й день - 59,0±1,5 %.

Аналіз рівня Т- і В-систем лімфоцитів у дослідних тварин показав, що обидві популяції лімфоїдних клітин Т і В, змінюються за кількісним складом синхронно.

Звертає на себе увагу той факт, що в день пологів у корів як відносна, так і абсолютна кількість Т- і В- лімфоцитів знижувалася.

Таблиця 1

Імунологічні показники крові корів з нормальним перебігом пологів і післяпологового періоду (n=10, M±m)

Примітка: вірогідність різниці представлена по відношенню до показників у день пологів *Р?0,05; **Р?0,01; *** Р?0,001

Так, за 3-5 днів до пологів відносна кількість тимусзалежних лімфоцитів становила 42,8±1,71 %, а абсолютна - 1,74±0,1 тис./мкл, а в день отелення цей показник знизився відповідно до 35,1±1,74 % і 1,46±0,08 тис./мкл. На 4-5 день після отелення спостерігалося підвищення відносної кількості Т- лімфоцитів, яка залишалась майже на однаковому рівні до 14-15 дня післяпологового періоду і дещо підвищувалась на 19-20 день. В кінці досліду число Т- клітин відповідно перевищувало показники до пологів і особливо під час їх.

Відновлення абсолютної кількості Т- клітин після пологів наступало дещо пізніше. На 4-5-й день кількість Т- лімфоцитів залишалась такою ж, як в день отелення і була приблизно на 18 % нижчою ніж перед пологами. В наступні 10 днів вона збільшилась майже на 20 % (1,76±0,08 і 1,91±0,12 тис./мкл), а на 19-20-й день після пологів, хоча відносне число Т- лімфоцитів і було вірогідно вищим, ніж в день отелення (44,7±2,30 %), абсолютне їх число дещо знизилось, залишаючись все-таки вищим (Р>0,01) контрольного показника. Ця числова варіація показників Т- клітинного імунітету пов'язана із зниженням загальної кількості лейкоцитів у циркулюючій крові корів у цей період.

Аналізуючи динаміку В- лімфоцитів, можна відзначити, що найбільш вірогідними зміни їх кількісного рівня спостерігались у період пологів (16,7±0,91 в порівнянні з 20,7±1,34 %, коли відносне число їх різко знижувалось. Протягом післяпологового періоду відбувалося поступове збільшення кількості В- лімфоцитів і на 19-20-й день вона вірогідно перевищувала контрольний рівень. Абсолютне число В- клітин було також низьким в день отелення і на 4-5 день після нього, а в наступні дні воно поступово підвищувалося.

Аналіз показників фагоцитарної активності крові корів показав, що вони змінювались протягом пологів і в післяпологовий період. Так, було помітне деяке підвищення фагоцитарної активності нейтрофілів в крові корів за 3-5 днів до пологів (94,8±1,47 %). Однак, найбільш високу здатність нейтрофілів поглинати тест-культуру встановлено в день пологів (96,4±1,11 %).

Інша картина спостерігалась в післяпологовий період: фагоцитарна активність нейтрофілів поступово знижувалась.

Аналізуючи зміни фагоцитарного індекса нейтрофілів протягом досліду, відзначали підвищення його за 3-5 днів до пологів, з наступним зниженням в післяпологовий період.

Висновки. 1. Помірне підвищення імунологічних показників у корів перед пологами обумовлене, мабуть, мобілізацією захисних сил організму в процесі підготовки до стресової ситуації, якою є пологи.

2. Інтенсивний лейкоцитоз під час пологів можна пояснити гемоконцентрацією і, особливо, мобілізацією лейкоцитів різних органів. Можна припустити, що лейкоцитоз на передодні і в день пологів є захисним механізмом. Це припущення базується на факті підвищення фагоцитарної активності в цей період.

3. Короткочасне зниження розеткоутворюючої активності Т- і В-лімфоцитів у період пологів, яке змінюється підвищенням їх кількості в післяпологовий період, очевидно, є закономірним пристосувальним механізмом організму самок і пов'язане з пологовим актом, а також інволюцією статевих органів в післяпологовий період.

4. Підвищення активності клітинних факторів неспецифічної резистентності організму корів перед, під час і після пологів є закономірною реакцією на подразнення рецепторів матки. Не виключена активна участь фагоцитуючих лейкоцитів і в інволюції статевих органів. Таким чином, за показниками імунологічної реактивності організму можна прогнозувати, певною мірою, перебіг післяпологового періоду.

імунобіологічний організм пологи корова

Таблиця 2

Імунологічні показники крові корів з нормальним перебігом пологів і післяпологового періоду (n=10, M±m)

Примітка: вірогідність різниці представлена по відношенню до показників в день пологів *Р?0,05; **Р?0,01; *** Р?0,001

Література

1. Емельяненко П.А., Грызлова О.Н., Денисенко В.Н.и др. Методические указания по тестированию естественной резистентности телят. - М., 1980. - 64 с.

2. Зуев П.Д., Королев В.М., Галич С.И. К вопросу определения Т-лимфоцитов в нефракционной суспензии лейкоцитов периферической крови // Лаб. дело. - 1978. - № 4. - С. 198-201.

3. Коромыслов Г.Ф., Климов Н.М., Полоз Д.Д. и др. Методические рекомендации по биохимическим и иммунологическим методам исследования клеток, их компонентов и других биологических субстратов. - М., 1980. - 39 с.

4. Соколовская И.И., Милованов В.К. Иммунология воспроизведения животных. - М.: Колос, 1981. - 264 с.

5. Jondal M., Holm I., Wigzell H. Surface markers on human T and B lymphocytes. 1. A largo population of lymphocytes forming nonimmune rosettes with sheep red blood cells // I. Exp. Med. - 1972. - V. 136. - № 2. - p. 207-222.

Размещено на Allbest.ru