Изменение содержания биологически активных веществ в водно-этанольных экстрактах в процессе их хранения

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Изменение содержания биологически активных веществ в водно-этанольных экстрактах в процессе их хранения

Н.Ю. Колбас

Брест, БрГУ имени А.С. Пушкина

Производство лечебно-профилактических средств растительного происхождения является перспективным направлением фармацевтической промышленности РБ. В предыдущих работах отмечалось, что на основе плодов растений Amelanchier spicata, Rubus caesius, Rubus fruticosus, Rubus nessensis и Rubus idaeus (семейство Rosaceae) могут быть получены фитопрепараты поливалентного действия с высокой антиоксидантной активностью (АОА). Преимущественной лекарственной формой на основе данного растительного сырья является водно-этанольный экстракт. Антоцианы составляют более 70% всех полифенолов данной лекарственной формы, обеспечивают ее АОА и терапевтическое действие [1]. Однако, антоцианы - нестабильные химические соединения и их устойчивость зависит от ряда факторов: строения, рН среды, температуры, природы растворителя и наличия окислителей [2]. Для достижения наибольшего содержания действующего вещества необходимо не только соблюдать точные сроки заготовки растительного сырья и условия его переработки, но и учитывать условия и сроки хранения той или иной лекарственной формы.

Цель работы - изучить динамику АОА, а также изменение содержания фенольных соединений и антоцианов в процессе хранения водно-этанольных экстрактов.

В качестве объектов исследования использовали экстракты плодов A. spicata, R. caesius, R. fruticosus, R. nessensis и R. idaeus, полученные двукратным извлечением этанолом (70%-ный водный раствор), согласно описанной ранее методике [1]. Полученные экстракты хранили при температуре +4°C в сосудах из темного стекла с плотной пробкой. Для изучения изменения АОА, общего количества фенольных соединений (ОКФС) и антоцианов экстракты тестировали через 6, 12 и 18 месяцев, хранения. Для оценки АОА использовали метод, основанный на блокировке антиоксидантами долгоживущего катион-радикала АБТС (2,2'-азинобис[3-этил-2,3-дигидро-6-бензо-тиазол-сульфокислоты]). Раствор AБТС*⁺ готовили по методике, описанной Riedl [3] и диспергировали 70%-ным этанолом до значения абсорбции 0,7±0,02 при л = 734 нм. Изменение оптической плотности анализируемой смеси регистрировали в течение 10 минут при л =734 нм, температуре +25°С и постоянном перемешивании. В качестве стандарта применяли тролокс (6-гидрокси-2,5,7,8- тетраметилхроман-2-карбоновая кислота). АОА выражали в мкмоль тролокс-эквивалента (ТЭ) на мл исследуемого экстракта. Количественный анализ фенольных соединений проводили согласно методике [4] по реакции с реактивом Folin-Ciocalteu. ОКФС рассчитывали в мг галловой кислоты (ГК) на мл водно-этанольного экстракта. Для определения общего количества антоцианов (ОКА) использовали методику Giusti-Wrolstad [2], которая эффективна при наличии деградированных полимерных пигментов и других экранирующих соединений. ОКА выражали в мг цианидин-глюкозида (ЦГ) на мл водно-этанольного экстракта. Все опыты проводили в трехкратной повторности, измерения были сделаны на спектрофотометре Proscan МС 122 (РБ).

Начальные значения АОА водно-этанольных экстрактов варьировали от 4,91 до 11,00 мкмоль ТЭ/мл, а ОКФС - от 0,83 до 1,45 мг ГК/мл, в порядке снижения: R. nessensis ? R. caesius > A. spicata > R. fruticosus > R. idaeus. Изменения значений АОА и ОКФС в процессе хранения экстрактов незначительны и находится в пределах статистической погрешности.

водный этанольный экстракт хранение

Рисунок - Динамика изменения общего количества антоцианов в процессе хранения водно-этанольных экстрактов: плодов AS - Amelanchier spicata, RC - Rubus caesius, RF - Rubus fruticosus, RN - Rubus nessensis, RI - Rubus idaeus; по оси абсцисс - сроки хранения (х0 - начальное; х1 - 6 месяцев; х2 - 12 месяцев; х3 - 18 месяцев); по оси ординат - значения параметра в мг цианидин-глюкозида на мл; a,b,c - статистические различия (Tukey-тест, р<0,05)

На рисунке представлены данные об изменении ОКА в процессе хранения изученных водно-этанольных экстрактов. Начальные значения параметра варьировали от 0,326 до 0,074 мг ЦГ/мл и снижались в следующей последовательности: R. caesius>A. spicata?R. nessensis>R. fruticosus >R. idaeus. После 12 месяцев хранения ОКА водно-этанольных экстрактов составляло 0,065-0,280 мг ЦГ/мл, при этом их ранжирование изменилось следующим образом: A. spicata> R. nessensis ? R. caesius > R. fruticosus > R. idaeus.

Минимальные потери ОКА выявлены для экстрактов плодов A. spicata и составили 2,8%, 7,0% и 20,3% от начального значения за 6, 12 и 18 месяцев хранения соответственно. Максимальные потери ОКА при хранении характерны для экстрактов плодов R. caesius и R. idaeus. ОКА экстрактов плодов R. idaeus снижалось на 6,9% при хранении 6 месяцев, на 12,7% - за 12 и 47,6% - за 18 месяцев. Для экстрактов плодов R. caesius снижение ОКА от начального составило 4,5% за 6 месяцев хранения, 22% - за 12 и 44% - за 18 месяцев.

Выявленные особенности изменения ОКА водно-этанольных экстрактов в процессе хранения связаны с особенностями биохимического состава плодов. В предыдущих наших исследованиях установлено, что плоды A. spicata отличаются от других видов наличием неацилированных антоцианов, а плоды R. caesius и R. idaeus в своем составе содержат соединения пеларгонидина, петунидина и мальвидина. Кроме того, плоды A. spicata отличаются более высоким содержанием проантоцианидинов, которые могут участвовать в копигментации и тем самым стабилизировать антоцианы.

Таким образом, полученные результаты об изменении ОКФС, АОА и ОКА свидетельствуют, что хранение в предложенных условиях может быть пролонгировано без потери фармакологической ценности до 1 года для водно-этанольных экстрактов плодов A. spiсata и до 6 месяцев для R. nessensis, R. caesius и R. fruticosus. Водно-этанольные экстракты плодов R. idaeus уступают остальным изученным видам не только по содержанию полифенолов и проявляемой АОА, но и по срокам хранения.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Колбас, Н.Ю. Оценка антиоксидантной активности водно-этанольных экстрактов плодов некоторых представителей рода Rubus / Н.Ю. Колбас, В.Н. Решетников // Труды БГУ. - 2011. - Т. 6, ч. 1. - С. 136-143.

2. Giusti, M.M. Characterization and Measurement of Anthocyanins by UV-Visible Spectroscopy / М.М. Giusti, R.E. Wrolstad // Cur. Prot. Food Anal. Chem. - 2001. ? F1.2.1-F1.2.13.

3. Riedl, K.M. Tannin-protein complexes as radical scavengers and radical sinks / K.M. Riedl, A.E. Hagerman // J. Agric. Food Chem. - 2001. - Vol. 49, № 10. - P. 4917-4923.

4. Waterhouse, A.L. Determination of Total Phenolics / A.L. Waterhousе // Cur. Prot. Food Anal. Chem. - 2002. ? I1.1.1-I1.1.8.

Размещено на Allbest.ru