Структурные преобразования щитовидной железы на этапах онтогенеза в норме и при воздействии на организм серосодержащего газа

Размещено на http://www.allbest.ru

Размещено на http://www.allbest.ru

Введение

Актуальность работы. В последние десятилетия во многих регионах России отмечается неуклонный рост тиреоидной патологии (Шадлинский Б.В., 1999; Глумова В.А., 2000; Кандор В.И., 2001; Дедов И.И., Свириденко И.Ю., 2001; Старкова Н.Т., 2002; Тесля Е.Ф.с соавт., 2003; Келлер А.А., 2004; Фадеев В.В., 2006; Berglund J., 1990; Barrere X. et al., 2000; Martinez I. et al., 2001; Carpenter D.O. еt. аl., 2001; Schroder van der Elst J.P. et al., 2001; Baloch Zubair W. еt. аl., 2002; Magri F. еt. аl., 2002).

Известно, что Астраханская область является экологически дестабилизированной территорией, где наряду с умеренным йоддефицитом, отмечается значительное техногенное воздействие на внешнюю среду (Асфандияров Р.И. с соавт., 1995; Джумагазиев А.А. с соавт., 2001; Тагирова Г.К.с соавт., 2001, 2004; Шабанов Д.И., 2004; Тризно Н.Н. с соавт., 2005; Жилкин А.А., Курьянова Н.Н., 2005).

В связи с вышеизложенным, несомненный интерес представляют данные по функциональной анатомии щитовидной железы на этапах онтогенеза (Черенков И.А., 2001; Степанов С.А., Родзаевская Е.Б., 2002; Глумова В.А.с соавт., 2004).

Изучению структуры и функции щитовидной железы посвящено значительное количество работ. Большое внимание исследователи уделяют макроморфологии органа. Так, ультразвуковая морфометрия щитовидной железы позволила выявить возрастные и половые особенности линейных размеров и объема органа, описать его эхографические формы (Цыб А.Ф. с соавт., 1997; Костюченко В.А., Пиманов С.И., 1998; Вахтель В.М. с соавт., 2001; Olbricht T. et al., 1983; Guteknst R. et al. 1986, 1988; Hegedus L., 1990; Barrere X. et al., 2000; Toma P.L., Rossi U.G., 2001; Shapiro R.S. et al., 2001).

Ультразвуковая сонография является наиболее распространенным методом исследования щитовидной железы. Определение линейных размеров долей, объема и структуры железы позволяют объективно оценить состояние органа. Однако выявление формы долей щитовидной железы при ультразвуковой сонографии в значительной степени затруднено, поскольку требует дополнительных измерений и вычислений. Вместе с тем, клиницистами все чаще поднимается вопрос о необходимости определения не только точного объема, но и формы ее долей.

По мнению О.Е. Марковой и А.А. Должникова (2002) понятие «нормы» в строении щитовидной железы должно кроме внешних признаков конкретизироваться особенностями внутреннего строения в связи с высокой частотой латентных патологических изменений и значимой возрастной инволюционной перестройкой.

В работах многих исследователей (Пузик В.И., 1951; Повова-Латкина Н.В., 1952, 1954; Аксенова Н.П., 1981; Быков В.Л., 1979, 1976; Глумова В.А., Погорелов Ю.В., 1978; Костиленко Ю.П., Ковалев Е.В., 1978; Алешин Б.В., 1982; Архипенко В.И., Федченко Н.П., 1983; Хмельницкий О.К., Ступина А.С., 1989; Вальнович Э.И., Суворова А.В., 1992; Коваленко Т.В., 2000; Черенков И.А. с соавт., 2001; Степанов С.А., Родзаевская Е.Б., 2002) дана морфологическая характеристика щитовидной железы на различных этапах онтогенеза. Однако до сих пор не предпринята попытка рассмотреть структурные преобразования щитовидной железы на протяжении всего онтогенеза человека.

В последние годы активно внедряются методы прижизненного изучения микроциркуляторного русла отдельных органов методом лазерной доплеровской флуометрии, позволяющие определить показатель микроциркуляции, скорость кровотока, вычислить индекс эффективности кровотока в тканях (Козлов В.И., 1994, 2006; Белый Л.Е., 2004).

В связи с этим, комплексное морфофункциональное исследование щитовидной железы на этапах онтогенеза представляется нам актуальным. В доступной литературе не обнаружено данных по использованию информационного анализа в изучении преобразований щитовидной железы. Применение этого метода позволило бы определить состояние системы «щитовидная железа» на этапах онтогенеза и при воздействии неблагоприятных факторов.

Цель исследования - установить закономерности структурно-функциональных преобразований щитовидной железы человека на этапах онтогенеза.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Выявить особенности структурных преобразований щитовидной железы в плодном периоде, у новорожденных, детей грудного, раннего, первого и второго периодов детства, в подростковом, юношеском, зрелом, пожилом и старческом периодах онтогенеза человека.

2. Изучить состояние микроциркуляторного русла щитовидной железы человека методом лазерной доплеровской флуометрии у детей, подростков, юношей и девушек, у людей в зрелом, пожилом и старческом периодах онтогенеза.

3. Исследовать состояние щитовидной железы у юношей и девушек, проживающих в различных районах Астраханской области по данным ультразвукового исследования и лазерной доплеровской флуометрии.

4. В эксперименте на крысах с воздействием серосодержащего газа, выявить критические периоды в развитии щитовидной железы на этапах онтогенеза.

5. С использованием методов информационного анализа определить критические периоды в развитии системы «щитовидная железа» у человека.

Научная новизна исследования.

Впервые разработан метод определения формы долей щитовидной железы на основании трех линейных размеров (длины, ширины и глубины доли). С использованием регрессионного анализа выявлена динамика формы щитовидной железы на протяжении плодного и постнатального онтогенеза человека.

Впервые дана комплексная оценка структурно-функциональных преобразований щитовидной железы человека на этапах онтогенеза, основанная как на морфометрическом исследовании гистологических препаратов, так и на прижизненной оценке микроциркуляторного русла органа. Представлены данные о структурной организации щитовидной железы человека на протяжении плодного и постнатального периодов онтогенеза. Впервые предпринято исследование микроциркуляторного русла щитовидной железы методом лазерной доплеровской флуометрии у людей в возрастном интервале от 1 года 3 месяцев до 90 лет.

Проведена морфофункциональная оценка щитовидной железы у лиц из различных районов Астраханской области и жителей города Астрахани. Впервые на основании ультразвукового обследования, а также лазерной доплеровской флуометрии дана оценка состояния щитовидной железы и ее микроциркуляторного русла у девушек и юношей, проживающих в различных экологических условиях Астраханского региона. Впервые с позиций системного подхода и с использованием метода информационного анализа определено состояние системы «щитовидная железа» на протяжении плодного и постнатального онтогенеза человека. Выявлены периоды морфофункциональной нестабильности этой системы на этапах онтогенеза.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Исследование формы долей щитовидной железы и разработка метода для определения вариантов ее внешнего строения, позволяет прижизненно получить более полную информацию о особенностях строения органа. Данные о динамике формы долей щитовидной железы в онтогенезе расширяют представления о строении щитовидной железы человека в различных возрастных периодах.

Полученные в работе сведения, демонстрирующие структурно - функциональные преобразования органа на протяжении части плодного и всего постнатального онтогенеза человека, важны для понимания процесса морфофункционального становления железы и механизмов развития в ней патологических процессов.

Доказано наличие периодов повышенной чувствительности щитовидной железы к неблагоприятным внешним воздействиям, что позволит целенаправленно проводить профилактические мероприятия в возрастных группах наибольшего риска.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Развитие щитовидной железы характеризуется динамичностью, гетерохронией и половым диморфизмом в ряде периодов онтогенеза.

2. Для щитовидной железы характерна периодичность морфофункционального состояния: чередование периодов высокой и низкой функциональной активности органа.

3. Воздействие на организм серосодержащих газов Астраханского газоконденсатного месторождения приводит к существенной структурной перестройке щитовидной железы.

4. Действие стрессорного фактора (серосодержащего газа Астраханского газоконденсатного месторождения) приводит к снижению коэффициента относительной организации системы «щитовидная железа».

5. Наименьшая упорядоченность системы «щитовидная железа» наблюдается у новорожденных, подростков и в старческом периоде онтогенеза.

Апробация работы.

Основные положения работы представлены на 14 конференциях, симпозиумах и конгрессах:

V Конгрессе Международной ассоциации морфологов (Ижевск,2000), Международной конференции. «Структурные преобразования органов и тканей на этапах онтогенеза человека в норме и при воздействии антропогенных факторов. Экология и здоровье населения. Актуальные проблемы биологии и медицины» (Астрахань, 2000), Конференции «Теоретические вопросы современной медицины, биологии и общественного здоровья» (Астрахань, 2000), Третий международный симпозиум «Современные проблемы нейробиологии. Исследования висцеральных систем и их регуляции в возрастном аспекте» (Саранск, 2001), Конференции «Теоретические вопросы современной медицины, биологии и общественного здоровья» (Астрахань, 2001), Общероссийская конференция с международным участием «Проблемы морфологии (теоретические и клинические аспекты)» (Сочи, 2002), VI Конгрессе Международной ассоциации морфологов (Уфа, 2002), Конференции «Функциональная нейроморфология. Фундаментальные и прикладные исследования (К 100-летию академика НАН Беларуси Давида Мовшевича Голуба)», (2002), Конференции «Структурные преобразования органов и тканей в норме и при воздействии антропогенных факторов» (Астрахань, 2004), Научно-практической конференции «Актуальные вопросы современной клинической медицины: 14 научные чтения памяти академика Н.Н.Бурденко» (Пенза, 2004), Научно-практической конференции и школе-семинаре для молодых ученых с международным участием. «Современные достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань - Москва, 2004), III Российской научной конференции «Роль природных факторов и туризма в формировании здоровья населения» (Уфа, 2005), «Вопросы морфологии» (Уфа, 2006), II Всероссийской научной конференции «Микроциркуляция в клинической практике» (Москва, 2006).

1. Материалы и методы исследования

В работе использована возрастная периодизация онтогенеза человека, принятая на VII Всесоюзной конференции по проблемам возрастной морфологии, физиологии и биохимии АПН СССР (1965).

Для гистологических исследований использовались щитовидные железы 205 людей обоего пола (107 мужчин и 98 женщин), полученные из прозектур и патолого-анатомических бюро г.Астрахани в период с 1999 по 2004гг. Распределение материала для исследования по полу и возрасту приведено в таблице 1. Исследованию подвергались щитовидные железы, иссеченные не позднее 24 часов после наступления смерти.

Таблица 1. Распределение материала по полу и возрасту для гистологического исследования

П-оды онтогенеза	Плодный	Новорожденные	Грудной	Раннее детство	Первый п-од детства	Второй п-од детства	Подростковый	Юношеский	Зрелый первый п-од	Зрелый второй п-од	Пожилой	Старческий
Муж	14	9	7	5	6	6	7	7	11	12	11	12
Жен	13	7	8	6	5	6	5	6	10	10	10	12

Щитовидные железы плодов, новорожденных и грудных детей подвергали органометрии: определяли длину, ширину и толщину каждой доли. Используя формулу Brunn (1) вычисляли объем органа.

ТО=([IxWxT]левой доли + [IxWxT]правой доли)x0,479, (1)

где ТО - тиреоидный объем, I - длина, W - ширина, T - толщина каждой доли (Brunn J. et al., 1981). Объемом перешейка пренебрегали.

Железы фиксировали в 5-10% растворе формалина на фосфатном буфере и заливали в парафин по общепринятой методике (Меркулов Г.А., 1961). Срезы толщиной 5-7 мкм окрашивали гематоксилином-эозином и «азаном» по Гейденгайну.

Выбор параметров для морфометрического исследования проводился с учетом рекомендаций, представленных в работах В.Л. Быкова (1979), О.К. Хмельницкого и М.С. Третьяковой (1997, 1998), А.В. Безденежных и Н.И. Петровой (2000).

Определяли: Dб - диаметр фолликула больший, Dм - диаметр фолликула меньший, Dс - диаметр средний, вычисляли Аs- индекс асимметрии фолликула (отношение Dм/Dб), hEf - высоту тиреоидного эпителия; относительные объемы: фолликулярного эпителия (Ef), интерфолликулярного эпителия (Ei), коллоида (С), сосудистого русла (V) и стромы (S).

На основании полученных данных вычислялся фолликулярно-коллидный индекс, характеризующий функциональную активность щитовидной железы, по формуле:

ФКИ=V(Ef+ Ei) / VC, (2)

где ФКИ - фолликулярно-коллидный индекс, V(Ef+ Ei) - сумма относительных объемов фолликулярного и интерфолликулярного эпителия, VC - относительный объем коллоида.

Для выявления динамики морфофункционального состояния щитовидной железы в зависимости от пола и возраста был использован метод естественной периодизации процессов (Катинас Г.С., Быков В.Л., 1976).

Проведен анализ 1582 сонограмм щитовидной железы жителей города Астрахани и Астраханской области (685 лиц мужского пола и 879 - женского) в возрасте от 1,5 до 78 лет. Распределение обследованных по полу и возрасту приведено в таблице 2.

Ультразвуковое исследование щитовидной железы выполнялось в течение 2002-2004 гг. на аппаратах “Logic”-500 фирмы “GE” линейным датчиком на 7,5 МГц и в Областной Александро-Мариинской клинической больнице и Областной детской клинической больнице г.Астрахани и в УНДЦ АГМА по единой, строго соблюдавшейся методике (Цыб А.Ф.с соавт., 1997).

Критериями отбора обследуемых для этой части нашей работы служили: отсутствие у индивидуума заболеваний щито видной железы в анамнезе, а также клинических и эхографических признаков тиреоидной патологии.

На основании данных, полученных при ультразвуковой морфометрии щитовидной железы, определяли динамику роста и форму ее долей в онтогенезе.

Таблица 2. Распределение обследованных лиц по полу и возрасту лиц, прошедших ультразвуковое исследование (УЗИ) и лазерную доплеровскую флуометрию (ЛДФ)

Периоды онтогенеза	Количество обследованных
	УЗИ	ЛДФ
	Муж.	Жен.	Муж.	Жен.
Раннее детство	8	9	4	5
Первый п-од детства	16	28	9	7
Второй п-од детства	34	37	12	14
Подростковый	54	63	15	17
Юношеский	198	246	162	198
Зрелый первый п-од	154	203	28	32
Зрелый второй п-од	136	198	18	23
Пожилой	64	78	8	11
Старческий	21	35	4	7
Всего	685	879	260	314
	1582	574

При вычислении объема принято допущение, что доли щитовидной железы имеют форму эллипсоида (Brunn J. et al., 1981; Hanson G.A. et al., 1983; Gutekunst R. et al., 1986; Hegebus L., 1990; Szebeni A., Belernay E., 1992). Вычисление объема щитовидной железы в см 3 производилось по формуле Brunn (1).

Для выявления формы доли органа использовали длину, ширину и толщину доли, объем доли расценивать как интегрирующий признак. С целью унификации полученных параметров вычислялись коэффициенты: К1 - отношение ширины к толщине и К2 - отношение длины к толщине каждой доли. На основании полученных коэффициентов определяли варианты формы доли щитовидной железы.

С использованием универсального математического пакета MathCad проведен множественный регрессионный анализ, определен коэффициент детерминации R2 - одна из эффективных оценок адекватности регрессионной модели, мера качества уравнения регрессии, характеризующая долю вариации зависимой переменной Z, обусловленной регрессией или изменчивостью объясняющих переменных (Дрейпер И., Смит Г., 1986, 1987).

При помощи множественного регрессионного анализа имеющиеся данные по коэффициентам К1, К2 аппроксимированы функцией общего вида:

, (3)

где i =1…5, где х - коэффициент отношения ширины к толщине К1, y - коэффициент отношения длины к толщине К2, Zi - коэффициент формы.

Методом наименьших квадратов найдены параметры множественной линейной регрессии. Получена зависимость для определения формы доли щитовидной железы Z1:

, (4)

Проведен анализ формы долей щитовидной железы в зависимости от пола и возраста: Z2 и Z3 - правой и левой долей железы у мужчин (соответственно) и Z4 и Z5 - у женщин. Для проверки значимости всех полученных типов множественных регрессий использован дисперсионный анализ.

Была проведена проверка гипотезы о возможности объединения выборок, определяющих зависимости Z2 и Z3, Z4 и Z5.

Для проверки гипотезы на уровне значимости =0,01 использовался критерий Чоу. Результаты подтвердили возможность попарного объединения выборок. Для определения таких факторов, как асимметрия и пол, принимающих одно из двух альтернативных значений, использовался прием введения в модель фиктивных переменных, число которых равно m-1, где m - количество градаций этой переменной (в частности, m=2).

Комплексная модель оценки приняла вид:

, (5)

где р - бинарная переменная, принимающая значение1 при наличии признака, 0 - при его отсутствии.

Лазерная доплеровская флуометрия (ЛДФ) выполнялась на флуометре ЛАКК-01. Исследование проводилось в 2003-2005гг., с учетом критериев стандартизации методики (В.И.Козлов, 2000), на 574 (260 мужчин и 314 женщин) добровольцах (Таб. 2.), из которых были отобраны (на основании осмотра и УЗИ обследования) лица, без тиреоидной патологии.

2. Результаты собственных исследований и их обсуждение

При значительном разнообразии внешнего строения щитовидной железы, во всех случаях (в норме) ее доли стремятся принять наиболее выгодную форму - эллипсоид. Варианты формы долей органа многочисленны, но все они объединены нами в пять групп.

Первая группа - форма правильного эллипсоида, когда отношение ширины к глубине приближается к единице (К1=1,055+0,145), а длина превышает толщину в три раза (К2=3,0+0,5). Вторую группу составили доли в форме эллипсоида, уплощенного во фронтальной плоскости - ширина доли превышает толщину (К1=1,41+0,195), а К2 равен 3,0+0,51. К третьей группе отнесены железы с долями в форме эллипсоида, уплощенного в сагиттальной плоскости, который характеризуется коэффициентом отношения ширины к глубине, имеющим значение меньше единицы (К1=0,85+0,075) при К2=3,0+0,51. В четвертую группу вошли доли в виде эллипсоида, вытянутого по продольной оси (К1=1,055+0,145 и К2=4,055+0,545), т. е. длина превышает глубину почти в четыре раза. Пятая группа - доли в форме эллипсоида, укороченного по продольной оси, когда соотношение ширины и толщины близки к единице (К1=1,055+0,145), а отношение длины к толщине (К2) составляет 2,075+0,415.

Разнообразие внешнего строения долей щитовидной железы в каждом периоде онтогенеза оценено нами по величине дисперсии их процентного содержания (Рис. 1). В процессе развития железы наблюдается увеличение разнообразия ее форм. Наивысшие значения дисперсии, а, следовательно, и большая вариабельность внешнего строения органа отмечена нами у мальчиков и девочек во втором периоде детского возраста. Это, по-видимому, связано с тем, что в ходе органогенеза железы происходит как бы «накопление» возможных вариантов форм органа, но, с началом полового созревания, дальнейшее развитие идет по оптимальному для каждого индивидуума пути.

Начиная с подросткового периода онтогенеза, наблюдается уменьшение разнообразия форм долей щитовидной железы, причем у девочек более заметное, чем у мальчиков. Такая динамика может быть объяснена более ранним взрослением девочек, и необходимостью женского организма достичь оптимума к моменту полового созревания.

Наименьшие значения дисперсии отмечены в зрелом возрасте; в пожилом и старческом периодах онтогенеза, разнообразие форм долей щитовидной железы несколько увеличивается, причем более заметно у женщин (Рис. 1).

Рис. 1. Дисперсия вариантов формы долей щитовидной железы у мужчин и женщин в онтогенезе

С целью выявления онтогенетической динамики формы каждой доли щитовидной железы у мужчин и женщин, методом наименьших квадратов найдены параметры множественной линейной регрессии -Z1 (формула 4.). Графическое выражение этой формулы приведено на Рис. 2.

Рис. 2. Графическое изображение зависимости для определения коэффициента формы долей щитовидной железы

Из щитовидных желез подопытных и контрольных животных изготовлялись гистологические препараты, по описанной выше методике и подвергали морфометрии.

Информационная характеристика сложности и организации морфологической системы «щитовидная железа» осуществлялась путем вычисления информационной (структурной) энтропии (H), характеризующей состояние системы; максимальной энтропии (Hmax) как степени неопределенности системы; относительной «загруженности» системы информацией или относительной энтропии (h) и коэффициента избыточности (R) как меры надежности системы по формулам:

, , , , (6).

где Р - элементы множества m - число исходов, при которых событие осуществлялось.

Расчет энтропии и коэффициента избыточности системы вычисляли, согласно рекомендациям Г.Г. Автандилова (1990), А.С. Леонтюка (1996), И.Г. Герасимова (1998), В.А. Забродина (2004).

Все полученные данные подвергались статистической обработке методами вариационной и непараметрической статистики. Степень точности исследования определена вероятностью безошибочного прогноза меньшим или равным 0,95%; уровнем значимости Р?0,05; для признаков с нормальным распределением использован критерий Стьюдента t=2, для признаков с распределением, отличным от нормального - непараметрический U-критерий Уилкоксона (Манна-Уитни) с тем же уровнем значимости (Гублер Е.В., 1990; Лакин Г.Ф., 1990).

В работе использовался универсальный математический пакет MathCad.

Для анализа формы правой доли щитовидной железы в зависимости от возраста мужчин, выведен коэффициент формы Z2 (Рис. 3):

(7)

Для определения коэффициента формы левой доли щитовидной железы в зависимости от возраста мужчин (Z3) справедливо равенство (Рис. 3):

(8)

Рис. 3. Изменение коэффициентов формы правой (Z2) и левой (Z3) долей щитовидной железы у мужчин в зависимости от возраста

Коэффициент формы правой доли у женщин в онтогенезе (Z4) описывается зависимостью (Рис.4):

(9)

Для определения коэффициента формы левой доли у женщин в зависимости от возраста, Z5 (Рис. 4.):

(10)

Коэффициент детерминации R2 показал, что в среднем, на 97% изменчивость всех функций Zi (формула 3) объясняется вариацией х и y, а в остальном зависит от случайных, незарегистрированных факторов.

Рис. 4. Изменение коэффициентов формы правой (Z4) и левой (Z5) долей щитовидной железы у женщин в зависимости от возраста

Анализ полученных центрированных средних одиннадцати морфометрических параметров щитовидной железы (Таб. 4, 5.) и фолликулярно-коллоидного индекса, выявил, что наиболее высокие значения дисперсии наблюдаются в плодном периоде онтогенеза, т.к. этот этап развития характеризуется значительным разнообразием структуры органа (Рис. 5).

Рис. 5. Показатели дисперсии морфометрических параметров щитовидной железы у мужчин и женщин

В ходе лазерной доплеровской флуометрии регистрировались: показатель микроциркуляции (ПМ), его среднее квадратическое отклонение или колебания скорости потока эритроцитов (СКО) и Кv - коэффициент вариации.

Проведен анализ показателей амплитудно-частотного спектра ЛДФ, характеризующих активные - вазомоторную активность (Ваз.) и сосудистый тонус (СТ), пассивные механизмы модуляции кровотока - респираторные флуктуации (РФ) и пульсовые флуктуации (КФ), также определялись реологический фактор (Реол.) и ИЭМ - индекс эффективности микроциркуляции (Козлов В.И., 1994, 2000, 2004, 2006).

На основании анкетирования сформированы 3 группы по месту проживания: город Астрахань (юношей - 52, девушек - 85); в районах, расположенных на севере области (юношей - 34, девушек - 48); южных районах (юношей - 22, девушек - 39).

С целью выявления критических периодов в развитии щитовидной железы в онтогенезе был проведен эксперимент на 75 белых беспородных крысах-самцах, из которых 50 вошли в экспериментальные группы и 25 - в контрольные (Таб. 3).

Таблица 3. Распределение экспериментальных и контрольных животных по полу и возрасту и их соответствие периодами онтогенеза человека

Периоды онтогенеза лабораторной крысы	Период онтогенеза человека	Кол-во животных
Период	Возраст
			опыт	контроль
Новорожденности	1-3сут.	Новорожденные	10	5
Неполовозрелый	22-50 сут.	Первый и второй периоды детство	10	5
Предслучный	51-120сут	Подростковый	10	5
Зрелый	11-18 мес.	Зрелый первый период	10	5
Старческий	25-28мес.	Старческий	10	5

Животные содержались в открытой системе, клетки Т-4 (по 5 особей в каждой), со стандартной подстилкой, при температуре 23+2,1оС, при искусственном освещении (12-ти часовой режим смены свет/темнота), влажность не контролировалась. Кормление регистрировалось в соответствии с Приказом МЗ СССР № 1179 от 10.10.1983, доступ к воде был свободен.

Протокол эксперимента в разделах выбора, содержания животных, моделирования повреждающего действия стрессорного фактора, эвтаназия животных составлялся в соответствии с принципами биоэтики, правилами лабораторной практики (GLP), соответствовал этическим нормам, изложенным в «Международных рекомендациях по проведению медико- биологических исследований с использованием животных» (1985) и Приказе МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 «Об утверждении правил лабораторной практики». Программа эксперимента была согласована с Локальным независимым этическим комитетом.

В качестве стрессового фактора был выбран природный осушенный газ Астраханского газоконденсатного месторождения (АГКМ), полученный из скважины № 17.

Эксперимент проводился в осеннее - зимний период 2004-2005гг в камере Курляндского статическим методом в соответствии с требованиями, предъявляемыми к токсикологическим экспериментам, изложенными в издании ВОЗ «Принципы и методы оценки токсичности химических веществ» (1981).

Затравка подопытных животных осуществлялась в течение 40 минут обезвоженной газо - воздушной смесью с концентрацией газа 600±83 мг/м3 по сероводороду. Одновременно в камере находилось 5 экспериментальных животных. Концентрацию сероводорода в затравочной камере измеряли индикаторными трубками фирмы «Auer», запотевание стенок камеры не наблюдалось, температура в камере составляла +22±2С.

Животные из контрольных групп также помещались в камеру по 5 особей в тех же условиях без добавления газа.

Таблица 4. Данные морфометрии щитовидной железы (в мкм)

Параметр/ Период онтогенеза	Dб	Dм	Аs	Dс	hEf
	Мужчины
Плодный	55,1±1,5	47,9±1,4	0,87±0,02	51,5±1,5	8,13±0,32
Новорожденные	63,5±2,7*	52,1±1,4*	0,82±0,01*	8,13±0,32**	8,29±0,37
Грудной	71,4±1,9*	53,5±1,7	0,75±0,02*	62,5±1,8	7,46±0,29
Раннее детство	95,4±1,7*	70,6±1,5*	0,74±0,02	83,0±1,6*	7,01±0,25*
Первый п-од детства	111,2±2,1*	86,7±1,8*	0,78±0,03	98,9±1,9*	6,20±0,23*
Второй п-од детства	120,0±3,4*	91,2±1,9	0,76±0,02	105,6±2,1*	5,30±0,21*
Подростковый	158,0±4,1	116,9±2,0*	0,74±0,01	137,5±3,5*	7,48±0,38*
Юношеский	177,4±4,3*	120,6±2,5	0,68±0,01*	149,0±3,9*	5,50±0,26*
Зрелый первый п-од	175,3±3,2	122,7±2,7	0,70±0,01*	149,0±3,1	5,60±0,19
Зрелый второй п-од	167,4±2,9	122,2±2,0	0,73±0,01*	144,8±2,2	5,02±0,17*
Пожилой	135,3±2,0*	101,5±2,0*	0,75±0,02	118,4±2,1*	5,28±0,21
Старческий	116,2±1,9*	85,9±1,4*	0,74±0,02	101,1±1,6*	6,01±0,32
	Женщины
Плодный	55,0±1,4	48,4±1,3	0,88±0,02	51,7±1,3	8,14±0,30
Новорожденные	65,2±1,9*	54,1±1,2*	0,83±0,01*	59,6±1,7*	8,24±0,35
Грудной	69,5±1,9	52,1±1,7	0,75±0,02*	60,8±1,8	7,45±0,27
Раннее детство	93,1±2,0*	67,9±1,5*	0,73±0,02*	80,5±1,9*	6,70±0,39
Первый п-од детства	107,7±2,1*	80,8±1,6*	0,75±0,02	94,2±2,0*	6,30±0,31
Второй п-од детства	128,4±3,1*	95,0±2,0*	0,74±0,03	111,7±2,4*	5,90±0,29
Подростковый	139,3±4,2*	100,3±2,0	0,72±0,02	119,8±3,7	7,09±0,41*
Юношеский	163,3±4,2*	109,4±2,5	0,67±0,01*	136,3±3,2*	5,46±0,27*
Зрелый первый п-од	173,2±4,1	119,4±2,5*	0,69±0,02	146,3±3,1*	5,31±0,21
Зрелый второй п-од	159,6±3,0*	111,7±1,9*	0,70±0,01	135,6±2,2*	4,54±0,15*
Пожилой	135,3±2,4*	97,4±1,9*	0,72±0,02	116,3±2,1*	4,89±0,20
Старческий	124,0±1,7*	91,7±1,3*	0,74±0,02	107,8±1,2*	5,43±0,31

Примечания: Dб - диаметр фолликула больший; Dм - диаметр фолликула меньший; Аs - коэффициент асимметрии; Dс - диаметр средний; hEf - высота фолликулярного эпителия; * р<0,05 по сравнению с предыдущим этапом онтогенеза.

Таблица 5. Относительная площадь структурных компонентов щитовидной железы (в%)

Параметр/ Период онтогенеза	Ef	Ei	C	Vas	S
	Мужчины
Плодный	33,0±0,71	28,0±0,41	8,0±0,70	12,7±0,53	18,3±0,32
Новорожденные	40,8±0,92*	13,4±0,59*	15,8±0,50*	13,4±0,32	17,6±0,61
Грудной	45,1±0,83*	10,7±0,32*	19,6±0,55*	9,9±0,55	14,7±0,75*
Раннее детство	44,2±0,75	8,1±0,43*	21,4±0,45*	9,4±0,52	16,9±0,81*
Первый п-од детства	43,7±0,61	6,7±0,34*	27,8±0,61	7,7±0,37*	14,1±0,61*
Второй п-од детства	44,3±0,63	5,3±0,45	30,70±0,53	7,3±0,35	12,4±0,43*
Подростковый	45,7±0,92	4,5±0,30*	31,2±0,43*	7,80±0,39	12,80±0,3
Юношеский	38,9±0,74*	2,7±0,45*	44,3±0,27*	3,3±0,27*	10,8±0,47*
Зрелый первый п-од	36,3±0,71*	1,5±0,32*	48,6±0,29*	2,4±0,25*	11,2±0,52
Зрелый второй п-од	33,1±0,69*	1,6±0,29	42,3±0,25*	2,1±0,29	20,9±0,63*
Пожилой	27,2±0,67*	2,9±0,34*	31,8±0,31*	2,9±0,32	35,2±0,75*
Старческий	28,7±0,59	3,7±0,41	21,7±0,29*	1,9±0,27*	44,0±0,81*
	Женщины
Плодный	33,2±0,72	26,8±0,39	8,5±0,63	12,5±0,55	19,0±0,30
Новорожденные	40,2±0,91*	12,7±0,57*	16,0±0,59*	13,4±0,35	17,7±0,63
Грудной	45,7±0,84*	9,6±0,30*	20,0±0,52*	10,1±0,52*	14,6±0,81*
Раннее детство	43,6±0,73	8,3±0,32*	22,0±0,43*	9,2±0,50	16,9±0,79*
Первый п-од детства	43,0±0,60	6,5±0,32*	27,9±0,63*	7,4±0,57*	15,1±0,60
Второй п-од детства	48,0±0,65*	6,0±0,47*	29,9±0,65*	5,3±0,32*	10,8±0,41*
Подростковый	45,0±0,91	3,9±0,35	33,1±0,45	6,3±0,41	11,7±0,35
Юношеский	37,5±0,75*	2,8±0,48	45,1±0,61*	3,2±0,25*	11,4±0,52
Зрелый первый п-од	35,0±0,73*	1,0±0,32*	50,5±0,39*	2,3±0,21*	11,2±0,57
Зрелый второй п-од	32,4±0,67*	1,3±0,27	43,6±0,27*	2,5±0,31	20,2±0,71*
Пожилой	28,3±0,67*	2,7±0,35*	33,1±0,21*	2,8±0,3	33,1±0,79*
Старческий	29,1±0,57	3,5±0,43	25,4±0,23*	2,0±0,25	40,0±0,80*

Примечания: Ef-относительная площадь фолликулярного эпителия; Ei-относительная площадь интерфолликулярного эпителия; C-относительная площадь коллоида; Vas-относительная площадь сосудистого русла; S-относительная площадь стромы, * р<0,05 по сравнению с предыдущим этапом онтогенеза.

После рождения дисперсия изучаемых признаков резко снижается, и эта тенденция сохраняется до периода второго детства, характеризуя стабилизацию морфофункционального состояния щитовидной железы (Рис. 5.). Значения фолликулярно-коллоидного индекса в эти периоды онтогенеза уменьшаются, что свидетельствует о снижении функциональной активности органа (Рис. 6).

Нами были обнаружены все три типа строения щитовидной железы, характеризующих ее морфофункциональное состояние: фолликулярный коллоидный, фолликулярный с десквамацией эпителия и смешанный.

Рис. 6. Динамика фолликулярно-коллоидного индекса у мужчин и женщин

щитовидный железа гетерогенность старческий

В течение раннего, первого и второго периодов детства у мальчиков и девочек наблюдается относительно стабильное состояние органа. Фолликулы увеличиваются, происходит накопление в них коллоида, доля интерфолликулярного эпителия снижается (Таб. 4., 5.).

Во втором периоде детского возраста у мальчиков фолликулярно-коллоидный индекс продолжает снижаться, у девочек же наблюдается его рост на 6%, что свидетельствует о более ранней функциональной активизации щитовидной железы у последних в

Увеличение показателя микроциркуляции в юношеском и первом периоде зрелого возраста сопровождается ростом значений среднего квадратического отклонения показателя микроциркуляции (СКО), характеризующего временную изменчивость микроциркуляции и коэффициента вариаций Kv - отражающего вазомоторную активность (Рис. 7, 8). Начиная со второго периода зрелого возраста, наблюдается ухудшение перфузии ткани щитовидной железы, как у мужчин, так и у женщин (Рис. 7, 8).

Изменения в онтогенезе интегративной характеристики микроциркуляции - индекса флаксомоций, характеризующего эффективность регуляции модуляций кровотока в системе микроциркуляторного русла щитовидной железы и демонстрирующего соотношение активных (миогенная и нейрогенная активность вазомоторов) и пассивных (сердечный и респираторный ритмы) механизмов модуляции кровотока приведены на рис. 9.

Рис. 7. Динамика центрированных показателей перфузии ткани щитовидной железы по данным ЛДФ у мужчин на этапах онтогенеза (ПМ-показатель микроциркуляции, СКО-среднее квадратическое отклонение показателя микроциркуляции, Kv-коэффициент вариации показателя микроциркуляции)



Рис. 8. Динамика центрированных показателей перфузии ткани щитовидной железы по данным ЛДФ у женщин на этапах онтогенеза (ПМ-показатель микроциркуляции, СКО-среднее квадратическое отклонение показателя микроциркуляции, Kv-коэффициент вариации показателя микроциркуляции)

В детском и подростковом возрасте роль активных механизмов модуляции кровотока возрастает, достигая максимальных значений у девочек-подростков (2,14±0,07) и у юношей (2,18±0,08). Начиная с первого периода зрелого возраста, увеличивается роль пассивных механизмов модуляции кровотока (Рис. 9).

Результаты ультразвукового обследования, показали наличие разного уровня тиреоидной патологии в различных районах Астраханской области. Увеличение объема щитовидной железы у девушек, проживающих в городе Астрахани, наблюдалось в 29,5%, причем у 10,1% обследованных выявлены изменения эхоструктуры органа. Девушки, проживающие в северных районах области, в 16,5% имели увеличение объема щитовидной железы, изменение эхоструктуры органа отмечалось в 6,9% случаев. У девушек, проживающих на юге области, в 12,4% случаях выявлено увеличение объема щитовидной железы, а ее эхографические изменения обнаружены у 9,2% обследованных.

У юношей увеличение объема и изменение эхоструктуры органа отмечались значительно реже. С наибольшей частотой патология встречалась у городских жителей (9,5%), причем на долю увеличения щитовидной железы пришлось 6,7%, а на изменение эхоструктуры 2,8% случаев. У жителей севера области патологически неизмененные щитовидные железы встретились у 92,4% обследованных, тогда как увеличение железы в объеме наблюдалось у 5,2% студентов, а на изменение эхоструктуры пришлось 2,4% случаев. У юношей, проживающих в южных районах области, увеличение объема и изменение эхоструктуры железы обнаружено нами в 2,5% и 3,2% случаев соответственно.

Полученные данные согласуются со сведениями, приведенными в информационно-методическом пособии «Анализ заболеваемости населения Астраханской области» Департамента здравоохранения Астраханской области и ФГУ «Центр государственного санитарно-эпидемиологического надзора Астраханской области» (2004) и связаны со степенью экологической напряженности и йодного дефицита в различных районах области.

Рис. 9. Динамика индекса эффективности регуляции модуляций кровотока у мужчин и женщин (ИФМ)

Анализ основных параметров микроциркуляторного русла щитовидной железы, полученных методом лазерной доплеровской флуометрии у юношей и девушек, проживающих в различных районах Астраханской области и г.Астрахани подтвердил, полученные нами данные. Показатели перфузии ткани щитовидной железы у юношей и девушек города Астрахани имели меньшие значения, по сравнению с областными жителями. Так, показатель микроциркуляции ткани щитовидной железы у юношей г.Астрахани составил 6,51±0,5 перф.ед., среднее квадратическое отклонение показателя микроциркуляции - 0,94±0,1 перф.ед., а коэффициент вариаций показателя микроциркуляции - 14,97±1,1. У девушек-астраханок указанные показатели перфузии ткани имели значения: 6,31±0,5 перф.ед., 0,98±0,1 перф.ед. и 14,92±1,1 соответственно.

Лучшие показатели перфузии ткани железы отмечены у испытуемых из южных районов области: у юношей - показатель микроциркуляции - 6,73±0,5 перф.ед., среднее квадратическое отклонение показателя микроциркуляции - 14,99±1,1 перф.ед., а коэффициент вариаций показателя микроциркуляции, у девушек - 6,67±0,5 перф.ед., 1,02±0,1 перф.ед. и 15,21±1,0 соответственно.

Совокупный показатель модуляции колебаний в системе микроциркуляторного русла - индекс флаксомоций имел более низкие значения и существенный диапазон у жителей города (1,78±0,1 - юноши, 1,69±0,09 - девушки), чем у представителей северных (1,81±0,09 - юноши, 1,76±0,06 - девушки) и южных (1,93±0,09 - юноши, 1,81±0,06 - девушки) районов области, что может свидетельствовать о напряжении адаптационно-компенсаторных процессов у этой группы обследованных. Этот показатель всегда был ниже у девушек, что можно расценить, как некоторую «разбалансированность» системы микроциркуляции у последних (Назарочкин Ю.В., 2005).

При анализе гистологических препаратов животных, подвергавшихся воздействию серосодержащего газа, выявлена мозаичность строения железы: наличие участков нормальной структуры и областей деструкции ткани органа. У экспериментальных животных наблюдалось разрушение части фолликулов, десквамация фолликулярного эпителия (Рис. 10.а), уменьшение размеров и коллабирование фолликулов с выходом коллоида в межфолликулярные пространства (Рис. 10.б).

Увеличение фолликулярно-коллоидного индекса начинается у мальчиков в подростковом возрасте и продолжается у юношей, составляя 7%.

Значения дисперсии морфометрических показателей в подростковом, а далее и в юношеском периодах онтогенеза превалируют у представителей мужского пола.

В зрелом возрасте строение щитовидной железы меняется мало: фолликулы крупные, в них содержится много коллоида, фолликулярный эпителий плоский, интерфолликулярный - в минимальном количестве, строма развита умеренно (Таб. 4, 5).

Большие значения дисперсии морфометрических показателей отмечены у женщин, что обусловлено морфологическим разнообразием органа, связанным, очевидно, с циклическими колебаниями уровня половых гормонов (Ходоровский Е.И., 1987; Кондратенко Е.И., 2003).

Щитовидная железа в старческом возрасте отличается выраженной гетерогенностью строения, что отражается в увеличении дисперсии морфометрических показателей в ходе инволюции (Рис. 5).

Увеличение фолликулярно-коллоидного индекса в этом периоде онтогенеза может быть расценено как функциональное напряжение органа, необходимое для поддержания оптимального уровня жизнедеятельности в этом периоде онтогенеза (Рис. 6.), что согласуется с данными Н.П.Аксеновой (1981), Ю.Л.Авдеенко и О.К.Хмельницкого (2001).

Анализ состояния перфузии ткани щитовидной железы методом лазерной доплеровской флуометрии (ЛДФ) выявил, что в детском возрасте происходит снижение показателя микроциркуляции с 8,96±0,35 перф.ед. у мальчиков и 8,75±0,30 перф.ед. у девочек раннего периода детства до 6,62±0,32 перф.ед. и 6,27±0,30 перф.ед. у мальчиков и девочек подростков соответственно. Это явление связано со снижением с возрастом площади микроциркуляторного русла железы (Таб. 4, 5).

Однако в юношеском возрасте появляется тенденция к росту показателя микроциркуляции и в первом периоде зрелого возраста у мужчин он составляет 6,97±0,49 перф.ед., а у женщин - 6,95±0,50 перф.ед. Динамика центрированных показателей перфузии ткани щитовидной железы в % приведена на Рис. 7. и 8.

Отмечен отек и утолщение соединительнотканных прослоек (Рис. 10.в), расширение сосудов, переполнение их кровью, агрегация эритроцитов (Рис. 10.г).

Такие изменения структуры щитовидной железы могут быть расценены как неспецифическая адаптивная реакция на неблагоприятное внешнее воздействие (Петрова Н.И., 1988; Степанов С.А., Родзаевская Е.Б., 2002; Уварова И.А. с соавт., 2006). Наибольшая выраженность описанных изменений наблюдалась у новорожденных крысят, животных трех месяцев и двух с половиной лет.

Информационный анализ системы «щитовидная железа» выявил самые высокие значения информационной энтропии у плодов и новорожденных детей (2,120 бит у плодов мужского пола и 2,154 бит у новорожденных мальчиков; 2,167 бит у плодов женского пола и 2,160 бит у новорожденных девочек). Если рассматривать энтропию как меру неопределенности ситуации и морфологической организации системы, то именно в этих периодах онтогенеза отмечается наибольшая нестабильность системы «щитовидная железа».

После рождения энтропия волнообразно снижается, достигая минимальных значений в первом периоде зрелого возраста (1,610 бит у мужчин и 1,573 бит у женщин), т.е. в период выполнения основной биологической функции человека - репродукции. Уже во втором периоде зрелого возраста (1,738 бит у мужчин и 1,730 бит у женщин), а дальше и в пожилом возрасте энтропия возрастает (1,863 бит у мужчин и 1,856 бит у женщин), отражая дестабилизацию системы «щитовидная железа» в ходе инволюции. Уменьшение энтропии в старческом периоде онтогенеза до 1,831 бит у мужчин и 1,831 бит у женщин может быть объяснено, естественной убылью субъектов с критическим уровнем энтропии в предыдущем периоде онтогенеза (Герасимов И.Г., 1996, 1998).

Динамика коэффициента относительной организации системы демонстрирует рост этого показателя от периода новорожденности, когда система является вероятностной, находясь в состоянии бифуркации, т.е. имеет большое разнообразие исходов, до первого периода зрелого возраста, когда система приближается к состоянию детерминорованной. Такая динамика коэффициента относительной организации системы свидетельствует о повышении структурного запаса системы «щитовидная железа» в периоде от новорожденности до первого периода зрелого возраста (Рис. 11).

Рис. 10. Изменения структуры щитовидных желез крыс, подвергавшихся воздействию серосодержащим газом: а) крыса 1 месяца, окраска гематоксилином-эозином (Ок.10, об.20.); б) крыса 3 месяцев, окраска гематоксилином-эозином (Ок.10, об.8.); в) крыса 12 месяцев, окраска гематоксилином-эозином (Ок.10, об.20.); г) крыса 2,5 лет окраска гематоксилином-эозином (Ок.10, об.20.).

Коэффициент относительной организации системы «щитовидная железа» у крыс также имеет минимальные значения в период новорожденности (Рис. 12).

В процессе онтогенеза наблюдается увеличение этого показателя, и в течение первого года жизни животных он меняется мало, но к старческому возрасту (2,5 года), как и у людей, происходит резкое снижение коэффициента относительной организации системы.

Исследование энтропии и, на ее основе, коэффициента относительной организации системы у животных, подвергавшихся воздействию серосодержащего газа, показало, что во всех исследуемых группах коэффициент относительной организации системы у экспериментальных животных был ниже, чем у контрольных (Рис.12.). Наибольшие различия этого информационного показателя так же отмечались у новорожденных крысят, у крыс в возрасте трех месяцев (предслучный период, соответствующий подростковому у человека) и двух с половиной лет, т.е. старых животных.

Рис. 11. Коэффициент относительной организации системы «щитовидная железа» на этапах онтогенеза человека

Во втором периоде зрелого и пожилом возрасте коэффициент надежности системы снижается, что является проявлением дезорганизации системы «щитовидная железа» в ходе инволюции.

Рис. 12. Коэффициент относительной организации системы «щитовидная железа» на этапах онтогенеза крыс в контрольной и экспериментальной группах

Заключение

1. Щитовидная железа являясь вероятностно- детерминированной системой в ходе онтогенеза претерпевает существенные морфофункциональные преобразования.

2. Определены пять форм долей щитовидной железы: правильный эллипсоид; эллипсоид, уплощенный во фронтальной плоскости; эллипсоид, уплощенный в сагиттальной плоскости; эллипсоид, вытянутый по продольной оси; эллипсоид, укороченный по продольной оси.

Во всех периодах онтогенеза преобладают доли в форме правильного эллипсоида от 57,5% до 75,9%. В детском возрасте значительный процент составляют щитовидные железы с долями в форме эллипсоида, укороченного по продольной оси (11,3 - 36,2%). В подростковом и юношеском периодах онтогенеза возрастает количество желез с долями, вытянутыми по продольной оси до 14,3% у юношей и 13,2% у девушек.

Литература

1. Варианты формы и топографии щитовидной железы в плодном периоде у человека. // Макро- и микроморфология: сб.тр. - Саратов: . Изд-во СГМУ, 1999. - Вып.2. - С.5.

2. Критические периоды онтогенеза биологических систем // Гигиена окружающей среды и экология человек: сб.тр. - Саратов: Изд-во СГМУ, 1999. - С.47. (Асфандияров Ф.Р.,Бердиев И.П., Лазько А.Е., Лазько М.В., Ярошинская А.П.).

3. Перспективы использования криотехники при морфологических исследованиях // Холодильная техника. Проблемы и решения. (Материалы международной конференции). - Астрахань: Изд-во АГТУ, 1999. - С.57. (Асфандияров Р.И., Галимова Л.В., Лазько А.Е.).

4. Варианты васкуляризации щитовидной железы у плодов человека. // Морфология. - 2000. - №3. - С.377.

5. Динамика роста щитовидной железы у плодов человека // Структурные преобразования органов и тканей на этапах онтогенеза человека в норме и при воздействии антропогенных факторов. Экология и здоровье населения. Актуальные проблемы биологии и медицины (Материалы международной конференции). - Астрахань: Изд-во АГМА, 2000 - С.163.

6. Структурные преобразования фолликулов щитовидной железы в плодном периоде онтогенеза человека. // Структурные преобразования органов и тканей на этапах онтогенеза человека в норме и при воздействии антропогенных факторов. Экология и здоровье населения. Актуальные проблемы биологии и медицины. (Материалы международной конференции). - Астрахань: Изд-во АГМА, 2000 - С.163-164.

7. Динамика роста щитовидной железы в пренатальном периоде онтогенеза человека. // Теоретические вопросы современной медицины, биологии и общественного здоровья. - Труды АГМА. - Астрахань: Изд-во АГМА, 2000. - Т. 20. - С.112-117.

8. Структурные преобразования микроциркуляторного русла и фолликулов щитовидной железы человека как части гормональной регуляции пренатального периода онтогенеза. // Современные регуляции в возрастном аспекте. Третий международный симпозиум- Саранск., 2001 - С.134-135.

9. Динамика роста щитовидной железы в пренатальном периоде онтогенеза человека // Теоретические вопросы современной медицины, биологии и общественного здоровья. - Труды АГМА. - Астрахань: Изд-во АГМА, 2001. - Т.20. - С.112-117.

10. Структурные преобразования фолликулов щитовидной железы человека в пренатальном онтогенезе // Проблемы морфологии (теоретические и клинические аспекты). Общероссийская конференция с международным участием: тез. докладов. М.: Изд-во [Академия естествознания], 2002, - С.110.

11. Динамика роста щитовидной железы человека в пренатальном онтогенезе // Биомеханика - 2002. VI Всероссийская конференция по биомеханике: тез. докладов. - Н. Новгород: Изд-во. ИПФ РАН, 2002. - С. 58.

12. Структурные преобразования фолликулов щитовидной железы в пренатальном периоде онтогенеза человека. // Морфология. - 2002. - №2-3. - С.159.

13. Варианты формы щитовидной железы по данным ультразвукового исследования // Вiсник проблем бiологiп i медицини. Полтава. - 2003. - № 3. - С. 38-39.

14. Сравнительная оценка процессов формирования щитовидной железы и надпочечников в плодном периоде развития человека // Функциональная нейроморфология. Фундаментальные и прикладные исследования (К 100-летию академика НАН Беларуси Давида Мовшевича Голуба). - Минск. - С. 306--307. (Лазько М.В.).

15. Структурные преобразования щитовидной железы человека в процессе инволюции // Успехи современного естествознания. Общероссийская конференция с международным участием: тез. докладов. М.: Изд-во [Академия естествознания], Москва. - 2003. - № 8. - С. 122.

16. Особенности строения щитовидной железы у лиц пожилого и старческого возраста // Труды Астраханской государственной медицинской академии. - Астрахань: Изд-во АГМА, 2003. - Том 28. - С.101-106.

17. Структурные преобразования фолликулов щитовиднойжелезы человека в процессе инволюции // Структурные преобразования органов и тканей в норме и при воздействии антропогенных факторов. - Астрахань: Изд-во АГМА,, 2004. - С. 64-67.(Асфандияров Р.И.).

18. Сравнительная оценка состояния щитовидной железы у юношей и девушек различных районов Астраханской области // Экология человека.. - 2004. - №3. - С.27-29. (Асфандияров Р.И., Назарочкин Ю.В., Панова Т.Н.).

19. Варианты формы щитовидной ж...