Клинико-диагностическое значение исследования активности аденозиндезаминазы, АМФ-дезаминазы и адениндезаминазы в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных системной склеродермией

Размещено на http://www.allbest.ru/

1

Размещено на http://www.allbest.ru/

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ АКТИВНОСТИ АДЕНОЗИНДЕЗАМИНАЗЫ, АМФ-ДЕЗАМИНАЗЫ И АДЕНИНДЕЗАМИНАЗЫ В ЛИЗАТАХ ЛИМФОЦИТОВ, ЭРИТРОЦИТОВ И ПЛАЗМЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ СИСТЕМНОЙ СКЛЕРОДЕРМИЕЙ

14.00.39 - ревматология

Абрамов Николай Борисович

Волгоград - 2009

1. Общая характеристика работы

Актуальность проблемы. Системная склеродермия (ССД) или системный склероз (по МКБ-10:М34) является относительно редким заболеванием (первичная заболеваемость от 3,7 до 19,0 на 1 млн. населения в год). Но учитывая, что ССД развивается в наиболее трудоспособном возрасте (30-45 лет), поражает преимущественно женщин, характеризуется прогрессирующим, инвалидизирующим течением, значительным ухудшением качества жизни и сокращением ее продолжительности, высокими материальными затратами на лечение, борьба с этим заболеванием является значимой актуальной медико-социальной проблемой. Сложность борьбы усугубляется неясностью этиологии и патогенетических механизмов ССД, многообразием терапевтических подходов и их недостаточной эффективностью, отсутствием методов профилактики. Кроме того, даже при точно установленном диагнозе ССД нередко бывает сложно разграничить фазу клинической ремиссии и обострения процесса, так как довольно часто (40-50%) обострение заболевания течет субклинически на фоне малоизмененных лабораторных показателей, что приводит к запоздалому назначению адекватной терапии. Поэтому поиск и разработка новых параклинических методов, способствующих своевременному распознаванию минимальных проявлений активации «склеродермического» процесса, является также актуальной задачей практической ревматологии.

В патогенезе ССД важную роль играют нарушения метаболических и иммунологических процессов (В. Насонова, 1986; Д. Лебедев, 1988), и поэтому в решении диагностических и патогенетических проблем перспективным направлением является изучение пуринового метаболизма (ПМ) с помощью определения активности энзимов, катализирующих реакции метаболизма пуринов.

Пуриновые метаболиты участвуют в синтезе нуклеиновых кислот, созревании, пролиферации и дифференциации иммунокомпетентных клеток, регуляции многих жизненноважных функций организма, в том числе и иммунных, а энзимы, регулирующие обменные реакции пуринов, являются весьма чувствительными индикаторами изменений метаболизма и иммунного статуса (В. Уманский и др., 1989; Н. Дмитренко, 1990). Имеется много данных о нарушениях ПМ и изменениях активности энзимов этого цикла при остеоартрозе, ревматоидном артрите, системной красной волчанке в сыворотке крови, но отсутствуют сведения об изменениях активности энзимов ПМ при ССД. Учитывая это, нами были проведены исследования активности некоторых энзимов ПМ: аденозиндезаминазы (АДА), АМФ-дезаминазы (АМФДА) и адениндезаминазы (АД) параллельно в трех биологических средах: в лимфоцитах, эритроцитах и плазме крови больных ССД. Эти энзимы действуют на различных этапах ПМ, но являются звеньями одного цикла, и по их активности представляется возможным суждение об изменениях адениловых метаболитов при ССД.

Цель исследования. Повышение качества диагностики активности патологического процесса при ССД, характера течения и стадии болезни, объективизации контроля эффективности лечения больных ССД с использованием показателей активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови и выяснение особенностей пуринового метаболизма при ССД и бляшечной склеродермии (БСД), способствующих раскрытию патогенетических механизмов и дифференциации этих заболевания.

Задачи исследования.

1. Отработать методы выделения лимфоцитов и эритроцитов из венозной крови и методы определения активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови здоровых людей, установить референтные величины (условную норму) активности этих энзимов у здоровых, изучить зависимость энзимных показателей от пола и возраста.

2. Изучить активность АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ССД в процессе стационарного лечения в зависимости от степени активности процесса, характера течения, стадии болезни при поступлении в стационар, через 10-12 дней лечения и по окончании стационарного лечения.

3. Выявить энзимологические особенности крови больных ССД, способствующие уточнению степени активности патологического процесса, характера течения и стадии болезни.

4. Изучить корреляционные связи между активностями изученных энзимов в плазме, лимфоцитах и эритроцитах больных ССД с различной активностью патологического процесса, а также корреляционные связи между активностью энзимов в лизатах лимфоцитов и иммунологическими показателями: иммуноглобулинами, ЦИК и АНФ.

5. Определить наиболее оптимальный набор энзимных показателей крови больных ССД, способствующий выявлению минимальной активности патологического процесса.

6. Оценить возможность использования энзимных показателей крови в качестве дополнительных объективных критериев эффективности проводимой терапии больных ССД.

7. Оценить степень влияния на энзимные показатели крови больных ССД активности процесса, характера течения и стадии болезни.

8. Исследовать активность АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных БСД и сравнить энзимные профили крови больных ССД и БСД на предмет выявления энзимных различий между ними.

Научная новизна. Впервые в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ССД было проведено параллельное комплексное исследование активности трех энзимов адениловой ветви ПМ: АДА, АМФДА и АД в процессе стационарного лечения и показано, что изученные энзимные показатели в комплексе с клиническими данными способствуют уточнению степени активности патологического процесса, характера течения, стадии болезни и объективизации оценки эффективности проводимой терапии больных ССД. Показано, что изменения активности ферментов обусловлены клиническими особенностями заболевания. Впервые изучены корреляционные связи между активностями энзимов в плазме, лимфоцитах и эритроцитах, а также связи между лимфоцитарными энзимами и иммунными показателями и показаны их взаимосвязи. Выявлены существенные энзимные нарушения в лимфоцитах, способные оказать негативное влияние на иммунокомпетентные клетки и регуляцию иммунных процессов при ССД. Выявлены энзимологические особенности крови больных ССД и БСД, способствующие их дифференциации.

Практическая значимость. Исследования активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ССД в комплексе с клиническими данными могут быть использованы в клинической практике для выявления и уточнения степени активности патологического процесса, характера течения, стадии болезни, что способствует назначению индивидуализированной, адекватной терапии. В процессе лечения контроль динамики энзимных показателей способствует объективизации оценки эффективности проводимой терапии больных ССД, прогнозированию ее длительности. Исследования активности АДА, АМФДА и АД в лизатах клеток и плазме крови в комплексе с клиническими данными способствуют дифференциации ССД и БСД.

Основные положения, выносимые на защиту. Показатели активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ССД могут быть использованы в качестве дополнительных параклинических данных для ранней диагностики минимальных проявлений обострения заболевания, уточнения степени активности патологического процесса, характера течения, объективизации оценки эффективности проводимой терапии, дифференциации ССД и БСД.

Внедрение в практику. Методы определения активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови с целью выявления минимальной активации патологического процесса при ССД, уточнения степени активности процесса, контроля за эффективностью проводимой терапии внедрены в практику работы муниципального учреждения здравоохранения «Городская клиническая больница № 25» г. Волгограда. С результатами энзимных исследований, возможностями энзимной диагностики ССД, их перспективой и значимостью систематически знакомятся студенты Волгоградского государственного медицинского университета, аспиранты, клинические ординаторы, практические врачи на лекциях, научно-практических и клинических конференциях.

Публикации и апробация работы. Основные положения диссертации опубликованы в 13 печатных работах. Материалы диссертации ежегодно (2005, 2006, 2007, 2008 гг.) докладывались на научно-практических конференциях ГУ НИИ клинической и экспериментальной ревматологии РАМН, Волгоградского государственного медицинского университета и заслушивались на заседаниях ученого совета ГУ НИИ КиЭР РАМН совместно с кафедрой госпитальной терапии Волгоградского государственного медицинского университета.

2. Материал и методы исследования

Под наблюдением в условиях стационара наблюдались 54 больных ССД, из которых 48 (88,9%) женщин и 6 (11,1%) мужчин. Средний возраст больных - 43,1±1,08 (у=7,9) лет, средняя продолжительность заболевания - 8,1±0,6 лет. Основную прослойку составили больные в возрасте 41-50 лет (51,8%), с длительностью болезни 6-10 лет (44,4%). В соответствии с диагностическими критериями (В. Насонова и др., 1989) I степень активности патологического процесса установлена у 18 (33,3%), II степень - у 29 (53,7%) и III степень - у 7 (13%) больных, хроническое течение заболевания - у 22 (40,7%), подострое - у 27 (50%) и острое течение - у 5 (9,3%) больных. I стадия болезни определялась у 18 (33,3%), II стадия - у 36 (66,7%) больных. При I степени преобладало хроническое течение (83,3%), при II степени - подострое (75,9%) и при III степени - острое течение (71,4%). При длительности болезни до 5 лет преобладала I стадия (84,6%), 6-10 лет - II стадия (70,8%), а при длительности свыше 10 лет у всех больных была II стадия болезни. При поступлении в стационар суставной синдром отмечался в 98,1% случаев, кожный -- в 96,3%, сосудистый -- в 94,4% и мышечный синдром -- в 79,6% случаев. Поражения легких наблюдались в 77,8%, желудочно-кишечного тракта -- в 79,6%, сердца -- в 74,1%, почек -- в 37% случаев. Чаще наблюдались сочетанные поражения внутренних органов.

В качестве группы сравнения были больные с бляшечной склеродермией, клиническая картина которой, особенно на дебютной стадии, весьма сходна с больными ССД. Под наблюдением в амбулаторных условиях наблюдались 15 больных БСД, из которых 12 (80%) женщин и 3 (20%) мужчин. Средний возраст больных -- 41,80,7 лет, длительность болезни -- 4,20,3 лет. У больных наиболее часто отмечались поражения кожи туловища (80%), конечностей (33,3%) и довольно редко (13,3%) -- кожные покровы лица. Количество очагов кожных поражений колебалось от 1 до 10-12. Некоторые очаги носили сливной характер. Большинство очагов поражения кожи находились в стадии эритемы и уплотнения (индурации), а в 1/3 очагов наблюдались стадии атрофии. Наиболее частые жалобы на чувство онемения, жжения, зуд в очагах поражения (86,7%), раздражительность (40%), боли в сердце (26,7%), артралгии (26,7%). Повышение СОЭ, количества лейкоцитов, гамма-глобулинов, СРБ выявлено у больных БСД в 20% случаев.

Контрольную группу составили 30 практически здоровых людей.

Выделение лимфоцитов, эритроцитов из венозной крови проводилось по методике Bцyum (1980) с использованием лимфосепа (JCN Biomedical) с плотностью раствора 1,077-1,079 г/мл. Лизаты клеток готовились путем замораживания-оттаивания и центрифугирования. Активность энзимов в лизатах клеток рассчитывалась для лимфоцитов в нмоль/мин на 1 мл, содержащий 1Ч10⁷ клеток (до лизиса), для эритроцитов в нмоль/мин на 1 мл, содержащий 1Ч10⁹ клеток. Определение активности АДА в лизатах клеток и плазме крови проводилось по методу R. Martinek (1963), АМФДА - с использованием цветной реакции Бертло (1984), АД - по методу T. Sakai et al. (1978). Энзимные исследования у больных ССД проводились при поступлении в стационар, через 10-12 дней лечения и перед выпиской, а у больных БСД -- однократно при поступлении. У всех больных определялись: общий анализ крови и мочи, фибриноген, общий белок и белковые фракции, СРБ, иммуноглобулины А, М, G, ЦИК, АНФ, антитела к н-ДНК, сиаловые кислоты. Использовались также инструментальные методы исследований (ЭКГ, УЗИ, рентген-исследования и др.). В лечении использовались НПВП, глюкокортикоиды, сосудорасширяющие препараты (трентал, курантил, кавинтон), антиаггреганты, метотрексат, лидаза, Д-пеницилламин, ЛФК, массаж.

Статистическая обработка данных проводилась с использованием программного пакета STATISTICA 6.0 для Windows с вычислением средней арифметической (М), ошибки средней (m), стандартного отклонения средней (у), достоверности различий с использованием критериев Стьюдента, Вилкоксона, Манна-Уитни, коэффициента корреляции (r) по Пирсону. Различия считались достоверными при р<0,05.

3. Результаты исследований и их обсуждение

Существенных различий показателей активности АДА, АМФДА и АД у здоровых во всех трех биологических средах в зависимости от пола и возраста не выявлено, что позволило в дальнейших исследованиях у больных эти факторы не учитывать.

У больных ССД (всей группы) при поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активность АМФДА (р=0,042), АД (р=0,006), в лизатах эритроцитов (табл. 2) выше активность АДА (р<0,001) и АД (р=0,038), в лизатах лимфоцитов (табл. 3) ниже активность АДА, АД (все р<0,001) и выше АМФДА (р<0,001). Через 10-12 дней лечения в плазме наметилась тенденция к повышению активности АДА, снижению АМФДА и АД (все р>0,05), в эритроцитах -- тенденция к снижению активности АДА и АМФДА (р>0,05), в лимфоцитах повысилась активность АДА (р<0,001), АД (р=0,008) и снизилась активность АМФДА (р<0,001). По окончании курса стационарного лечения наблюдалась существенная положительная динамика всех энзмных показателей (табл. 1-3): нормализовалась активность всех энзимов в плазме, АМФДА и АД в эритроцитах, но остались сниженными активности АДА и АД в лимфоцитах и повышенными активности АДА в эритроцитах и АМФДА в лимфоцитах (все р<0,001).

У больных с хроническим течением заболевания, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активности АДА (р=0,007) и АД (р=0,042), в эритроцитах (табл. 2) выше активность АДА (р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001). У больных ССД с подострым течением, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активности АМФДА (р=0,007), АД (р=0,045), в эритроцитах (табл. 2) выше активности всех энзимов: АДА (р=0,038), АМФДА (р=0,046) и АД (р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001). У больных ССД с острым течением, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активность АМФДА (р=0,039), в эритроцитах (табл. 2) ниже активность АДА (р=0,005), выше АМФДА и АД (все р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001).

Между всеми вариантами течения по большинству энзимных показателей выявлены существенные энзимные различия. Так, у больных с хроническим течением заболевания, по сравнению с подострым, в плазме выше активность АДА и ниже АМФДА, в эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001); по сравнению с острым течением, в плазме выше активность АДА, ниже АМФДА, в эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активности АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001).

У больных с подострым течением, по сравнению с острым течением, в плазме выше активность АДА (р=0,004), ниже АМФДА (р=0,038) и АД (р=0,041), в эритроцитах ниже активность АМФДА (р<0,001) и АД (р<0,001), в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже активность АМФДА (все р<0,001).

То есть, анализ энзимных показателей при различных вариантах течения заболевания показал, что чем острее течение, тем в плазме и эритроцитах ниже активность АДА, выше АМФДА и АД, в лизатах лимфоцитов выше активность АМФДА, ниже активности АДА и АД.

У больных ССД с I стадией болезни, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) существенных энзимных различий не выявлено, в эритроцитах (табл. 2) выше активность АДА (р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активность АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001). У больных ССД с II стадией, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активности АД (р=0,007) и АМФДА (р=0,042), в эритроцитах (табл. 2) выше активность АДА (р=0,004) и АМФДА (р=0,048), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше активность АМФДА (все р<0,001).

Сравнительные исследования показали, что у больных ССД с I стадией, по сравнению с II стадией, в плазме выше активность АДА (р=0,038) и ниже АМФДА (р=0,037), в эритроцитах существенных энзимных различий не определялось, в лимфоцитах выше активность АДА (р=0,005), АД (р=0,006) и ниже АМФДА (р=0,032). Выявлена определенная закономерность: чем больше стадия болезни, тем в плазме и эритроцитах ниже активность АДА и выше АМФДА, АД, а в лимфоцитах ниже активности АДА, АД и выше АМФДА.

Таким образом, проведенные исследования показали, что на активность энзимов при ССД существенное влияние оказывают характер течения заболевания, стадия болезни и меняющееся клиническое состояние больных в процессе лечения. В то же время нами не учитывался такой фактор как интенсивность патологического процесса или степень его активности. Исходя из того, что в клинической практике очень важно четкое определение степени активности процесса, так как от этого зависит тактика и стратегия лечения больных, ниже нами представлен анализ энзимного профиля крови больных в зависимости от степени активности «склеродермического» процесса.

ССД - I степень активности процесса

При поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, у больных в плазме (табл. 1) выше активность АДА (р=0,008) и АД (р=0,006), в лизатах эритроцитов (табл. 2) выше активность АДА (р<0,001), ниже активности АМФДА (р=0,007) и АД (р<0,001), в лизатах лимфоцитов (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001).

Таблица 1 Активность энзимов в плазме крови здоровых и больных ССД в процессе лечения

Таблица 2 Активность энзимов в лизатах эритроцитов здоровых и больных ССД в процессе лечения

Таблица 3 Активность энзимов в лизатах лимфоцитов здоровых и больных ССД в процессе лечения

Если же ориентироваться не на среднестатистические величины активности ферментов, а на индивидуальные энзимные показатели, то за пределы условной нормы (референтные пределы) у здоровых, вычисленной по формуле М±2у (95% вероятность), в плазме не выходил ни один энзимный показатель, в лизатах эритроцитов только активность АДА у всех больных (100%) превышала верхние границы нормы, в лизатах лим-фоцитов активность АДА в 94,4% случаев была меньше нижней границы нормы, активность АМФДА была выше верхней границы в 50% случаев, а активность АД ни у одного больного не выходила за референтные пределы. В то же время у этих же больных среди общепринятых клинико-иммуно-биохимических показателей, отражающих активность иммуно-воспалительного процесса при ССД, отклонения от уровня здоровых лиц для СРБ, гамма-глобулинов, иммуноглобулинов G определялись в 44,4% случаев, сиаловых кислот -- в 38,9%, альфа-2-глобулинов, СОЭ, иммуноглобулинов М -- в 33,3%, фибриногена, ЦИК, иммуноглобулинов А -- в 27,8%, антител к н-ДНК и АНФ (+) -- в 22,2% случаев. То есть, показатели активности АДА в лизатах эритроцитов и лимфоцитов отличались более значительной чувствительностью и информативностью в отражении минимальной активности патологического процесса при ССД, чем самые демонстративные в этом аспекте вышеуказанные клинико-иммуно-биохимические показатели.

Корреляционный анализ показ наличие прямых умеренных связей в плазме между активностями АДА--АД (r=0,34), в эритроцитах -- умеренные прямые связи между АМФДА--АД и обратные умеренные связи между АДА--АМФДА, в лимфоцитах -- обратные умеренные связи между АДА--АМФДА. Также определены обратные умеренные связи между активностью АДА и IgG (r=-0,33), АДА и АНФ (к=-0,34). Между активностью АМФДА и IgG (r=0,34), АМФДА и АНФ (r=0,29) выявлены прямые умеренные связи.

Через 10-12 дней лечения в плазме существенной динамики энзимных показателей не наблюдалось, в эритроцитах снизилась активность АДА (р=0,008) и повысилась ранее сниженная активность АД (р=0,039), в лимфоцитах повысилась активность АДА (р<0,001) и снизилась активность АМФДА (р=0,033). После проведенного курса лечения наблюдалась существенная положительная динамика всех энзимных показателей (табл. 1-3): нормализовались активности всех энзимов в плазме, АМФДА и АД в эритроцитах и лимфоцитах, но остались повышенной активность АДА в эритроцитах (р<0,001) и сниженной в лимфоцитах (р<0,001).

У больных с хроническим течением заболевания, по сравнению со здоровыми (табл. 4), в плазме выше активность АДА (р=0,007) и АД (р=0,008), в эритроцитах выше активность АДА (р<0,001), ниже активность АМФДА (р=0,007) и АД (р<0,001), в лимфоцитах ниже активность АДА (р<0,001), АД (р=0,004) и выше активность АМФДА (р<0,001).

У больных с подострым течением, по сравнению со здоровыми (табл. 4), в плазме выше активность АД (р=0,006), в эритроцитах выше активность АДА (р<0,001), в лимфоцитах ниже активность АДА (р<0,001), АД (р=0,036) и выше АМФДА (р<0,001).

Сравнительные исследования показали, что у больных с хроническим течением, по сравнению с подострым, в плазме выше активность АДА (р<0,001) и ниже АМФДА (р=0,032), в эритроцитах ниже активность АМФДА (р=0,004) и АД (р=0,033), в лимфоцитах ниже активность АМФДА (р=0,039), но выше активность АД (р=0,003).

У больных ССД с I стадией болезни, по сравнению с II стадией (табл. 4), в плазме выше активность АДА (р<0,001), ниже активности АМФДА (р<0,001) и АД (р=0,032), в эритроцитах ниже активность АДА (р=0,042), в лимфоцитах выше активность АДА (р=0,003), АД (р=0,041), ниже активность АМФДА (р=0,033). То есть, при одинаковой активности процесса между вариантами течения и стадиями болезни определяются статистически значимые энзимные различия.

Таблица 4 Активность энзимов у больных ССД в зависимости от клинических особенностей

ССД - II степень активности процесса

При поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активность АМФДА (р=0,004), в эритроцитах (табл. 2) выше активности АДА (р=0,005), АМФДА (р=0,007) и АД (р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001). Корреляционный анализ показал в плазме наличие прямых умеренных связей между АМФДА и АД, в эритроцитах -- прямых умеренных связей между АМФДА и АД, АДА и АД, в лимфоцитах -- прямых умеренных связей между АДА и АД, обратных умеренных -- между АДА--АМФДА, АМФДА--АД. Также выявлены обратные умеренные связи в лимфоцитах между активностью АДА и всеми изученными иммунными показателями, наиболее выраженные между АДА и IgG (r=-0,58). Между активностью АМФДА и иммунными показателями определялись прямые умеренные связи, наиболее выраженные между АМФДА и IgG (r=0,53). Между активностью АД и иммунными показателями выявлены умеренные, за исключением между АД и IgА, обратные связи, наиболее статистически значимые между АД и IgG (r=-0,51).

То есть, определяются некоторые закономерности: чем ниже в лимфоцитах активность АДА и АД, выше активность АМФДА, тем выраженнее изменения изученных иммунных показателей в негативную сторону.

Через 10-12 дней лечения в плазме повысилась активность АДА (р=0,005), снизилась АМФДА (р=0,043), в эритроцитах существенных изменений активности энзимов не произошло, в лимфоцитах повысилась активность АДА и снизилась АМФДА (все р<0,001).

По окончании курса стационарного лечения наблюдалась значимая положительная динамика всех энзимных показателей (табл. 1-3), нормализовались активности всех энзимов в плазме, АМФДА и АД в эритроцитах, но осталась повышенной активность АДА в эритроцитах, АМФДА в лимфоцитах и сниженной активность АДА и АД в лимфоцитах.

У больных с хроническим течением, по сравнению с подострым (табл. 4), в плазме выше активность АДА, ниже АМФДА и АД (все р<0,001), в эритроцитах выше активность АДА (р<0,001), АМФДА (р=0,004) и ниже активность АД (р=0,003), в лимфоцитах выше активности АДА (р<0,001), АД (р=0,004) и ниже активность АМФДА (р<0,001).

У больных ССД с I стадией болезни, по сравнению с II стадией (табл. 4), в плазме выше активность АДА (р=0,003) и ниже АД (р<0,001), в эритроцитах выше активность АДА (р<0,001), в лимфоцитах ниже активность АМФДА (р=0,042) и выше активность АД (р<0,001). То есть, как при I степени, так и при II степени выявлены существенные энзимные различия между вариантами течения и стадиями болезни.

ССД - III степень активности процесса

При поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) ниже активность АДА (р<0,001) и выше АД (р=0,037), в эритроцитах (табл. 2) ниже активность АДА (р=0,006), выше АМФДА и АД (все р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активность АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001).

По сравнению с II степенью, в плазме все корреляционные связи между энзимами упрочились без изменения направлений, в эритроцитах поменялись направления связей между АДА--АМФДА и АДА--АД на обратные, в лимфоцитах направления связей остались прежними, но более упрочились. В лимфоцитах между активностью АДА, АД и всеми изученными иммунными показателями определялись умеренные обратные связи, наиболее выраженные между АДА и IgG (r=-0,72) и АД и IgG (r=-0,42); а между активностью АМФДА и иммунными показателями выявлены прямые умеренные связи, наиболее выраженные между АМФДА и IgG (r=0,56).

Через 10-12 дней лечения в плазме и эритроцитах наметилась тенденция к нормализации энзимных показателей, а в лимфоцитах повысились ранее сниженные активности АДА (р<0,001), АД (р=0,007) и снизилась активность АМФДА (р<0,001).

После проведенного курса лечения наблюдалась существенная положительная динамика всех энзимных показателей (табл. 1-3): в плазме отмечалась нормализация всех показателей, в эритроцитах нормализовалась активность АДА, но остались повышенными активности АМФДА и АД, в лимфоцитах остались сниженными активности АДА, АД и повышенной активность АМФДА.

Таким образом, проведенные исследования показали, что каждой степени активности «склеродермического» процесса свойственен определенный энзимный профиль крови.

У больных ССД с I степенью активности процесса, по сравнению с II степенью, в плазме выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001), в эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД (все р<0,001), в лимфоцитах выше активности АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001); по сравнению с III степенью, в плазме выше активность АДА и ниже АМФДА, в эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001). При II степени, по сравнению с III степенью, в плазме и эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001). То есть, между всеми степенями активности процесса имеются существенные энзимные различия, способствующие их дифференциации.

Проведенные исследования свидетельствуют о том, что на энзимные показатели крови, помимо активности процесса, оказывают существенное влияние характер течения и стадии болезни. Для того чтобы выяснить, что же в большей степени влияет на энзимный профиль крови: степень активности процесса, характер течения или стадия болезни, мы провели сравнительные исследования энзимных показателей при одном варианте течения, одной стадии болезни, но разных степенях активности процесса. Результаты исследования показали, что у больных ССД с хроническим течением и I степенью, по сравнению с больными с хроническим течением и II степенью, в плазме выше активность АДА, АД и ниже АМФДА, в эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001). Примерно, такая же ситуация наблюдается и у больных с подострым вариантом течения при сравнении энзимных показателей с различной активностью процесса. То есть, независимо от характера течения, между сравниваемыми группами выявлены различия, свойственные различиям между I и II степенями активности процесса, а это доказывает, что влияние активности патологического процесса на энзимные показатели значительно более выражено, чем характера течения заболевания. Аналогичная ситуация наблюдалась и по отношению к стадиям болезни. Это имеет важное практическое значение, так как ни стадия, ни любой вариант течения заболевания не способны «маскировать» активность процесса, что позволяет в комплексе с клиническими данными четко определять степень активности патологического процесса при ССД и назначать адекватную терапию.

Больные бляшечной склеродермией

Больные БСД были выбраны для исследования в качестве группы сравнения. Выбор этой нозологической формы ограниченной склеродермии был обусловлен как близостью клинической картины заболевания с ССД, так и схожестью отдельных патогенетических звеньев ССД и БСД. При этих заболеваниях нарушены процессы фиброобразования в коже, микроциркуляции и иммунного статуса. Весьма похожи и гистоморфологические изменения кожи (А.И. Струков, 1969; Н.Г. Гусева, 1993; Ю.К. Скрипкин, 1996). До настоящего времени остается актуальной проблема возможности трансформации ограниченных форм склеродермии в ССД, и ее решение имеет важное значение в клинической практике. Наблюдения перехода БСД в ССД немногочисленны, но они есть (Е.В. Вербенко, 1966; В.А. Гребенников, А.Г. Чалинова, 1983; А.В.Смирнов, 1997). Поэтому были предприняты исследования энзимного профиля крови больных БСД с целью выявления особенностей энзимного статуса крови в сравнении с больными ССД.

У больных БСД, по сравнению со здоровыми (табл. 5), в плазме выше активность АДА (р<0,001) и ниже активность АД (р=0,004), в эритроцитах ниже активность АДА (р<0,001), в лимфоцитах ниже активность АДА (р<0,001), но выше АД (р<0,001) и АМФДА (р=0,044).

Таблица 5 Активность энзимов в крови больных бляшечной склеродермией

Сравнительные исследования показали, что у больных БСД, по сравнению с больными ССД, в плазм...