Соотношение между перекисным окислением липидов и окислительной модификацией белков во внутренних органах в динамике тридцатисуточной гипокинезии

Размещено на http://www.allbest.ru/

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Соотношение между перекисным окислением липидов и окислительной модификацией белков во внутренних органах в динамике тридцатисуточной гипокинезии

Тимофеева Татьяна Георгиевна

Челябинск - 2012

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Челябинская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Научный руководитель: Доктор биологических наук, профессор

Цейликман Вадим Эдуардович

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор

Телешева Ираида Борисовна

Доктор медицинских наук

Аглетдинов Эдуард Феликсович

Ведущая организация:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Защита состоится « » 2012 г. в часов на заседании диссертационного совета Д 208.117.02 при ГБОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (454092, г. Челябинск, ул. Воровского, 64).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Челябинской государственной медицинской академии

Автореферат разослан « » 2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор медицинских наук, профессор Н.В. Тишевская

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность

Гипокинезия относится к факторам, негативно влияющим на здоровье человека. В современном обществе, в связи с возрастанием среди населения лиц, у которых профессиональная деятельность сопряжена с низкой двигательной активностью, гипокинезия превратилась в важную медико-социальную проблему (Коваленко Е.А., Гуровский Н.Н., 1980; Тигранян Р.А., 1988; Фёдоров И.В., 1984; Миллер E., Рутковский М., Mrowicka M., Матушевский Т., 2007). Безусловно, моделирование гипокинезии на крысах, не в состоянии полностью воспроизвести все проявления гипокинезии у человека. Тем не менее, такой подход широко используется в медико-биологических исследованиях (Коваленко Е.А., Гуровский Н.Н., 1980; Меерсон Ф.З. и соавт., 1987; Павлова В.И. 1990 - 1999; Кривохижина Л.В., Ганченкова Г.П., 1997; Цейликман В.Э. и соавт., 2008). Это связано с тем, что длительная гипокинезия является удобной экспериментальной моделью, воспроизводящей сочетание хронического стресса с кахексическими проявлениями. Стресс характеризуется отчётливыми изменениями со стороны свободно - радикального окисления (Меерсон Ф.З., 1986; Кулинский В.И., Ольховский И.А., 1992; Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П., 2000). Однако данные, касающиеся состояния свободно - радикального окисления при гипокинезии, весьма противоречивы. Так, состояние липопероксидации по данным одних авторов усиливается на ранних этапах гипокинезии (Фёдоров И.В. и др., 1984;), а по данным других авторов снижается (Белоусова Н.А., 1999; Локтионова И.В., 2000). В более поздние этапы (начиная с 15 суток и далее) отмечается усиление липопероксидации в крови и во внутренних органах (Латюшин Я. В., 2010). В течение нескольких суток после завершения гипокинезии наблюдается снижение как липопероксидации, так и окисления белков (Бояринова Н.В., 2010; Романов Д.А., 2011). Следует отметить, что исследования посвящённые изучению свободно - радикального окисления при гипокинезии в основном посвящены липопероксидации. Имеются только единичные данные, касающиеся окисления белков при этом состоянии (Романов Д.А., 2011). Между тем, кахексия, имеющая место при длительной гипокинезии, характеризуется усилением протеолиза (Рассолова Н.П., 1973; Власова Т.Ф. и др., 1978; Федоров И.В., 1973, 1982; Коваленко Е.А. и др., 1980; Довганский А.П. и др., 1989; Boldwin et al., 1990; Грицук А.И., 1995). В свою очередь окисление белков является одной из составляющих убиквитин - зависимого протеолиза (Tsvetkov et al., 2007). Поэтому представляется правомерным предположение о том, что активация свободно - радикального окисления при гипокинезии проявляется не столько в усилении липопероксидации, сколько в усилении окисления белков. К сожалению, до настоящего времени отсутствуют данные, в которых одновременно исследованы липопероксидация и окисление белков в условиях гипокинезии. В основном эти звенья свободно - радикального окисления изучаются изолированно друг от друга, что существенно затрудняет оценку их соотношения.

Поэтому целью исследования являлось определение соотношения между липопероксидацией и окислением белков во внутренних органах в динамике 30-суточной гипокинезии.

Задачи исследования

1. Изучить особенности липопероксидации в головном мозге в динамике 30 - суточной гипокинезии.

2. Определить особенности окисления белков в головном мозге в динамике 30 - суточной гипокинезии.

3. Оценить особенности липопероксидации в печени в динамике 30 - суточной гипокинезии.

4. Исследовать особенности окисления белков в печени в динамике 30 - суточной гипокинезии.

5. Определить особенности липопероксидации в органах системы крови в динамике 30 - суточной гипокинезии.

6. Изучить особенности окисления белков в органах системы крови в динамике 30 - суточной гипокинезии.

Научная новизна. Установлено, что при гипокинезии усиление свободно - радикального окисления во внутренних органах преимущественно проявляется в повышении уровня карбонилирования белков. Обнаружено одновременное усиление карбонилирования белков и липопероксидации в головном мозге на 7е, 10е и 30е сутки гипокинезии. Установлено, что в головном мозге усиление ПОЛ выражается в повышении содержания изопропанол - растворимых диеновых конъюгатов. Обнаружено, что в печени, начиная с трёхдневной гипокинезии и по 30е сутки включительно, повышенный уровень окисления белков ассоциируется с увеличением активности МАО-Б. Установлено, что в печени усиление ПОЛ на базальном уровне проявляется в повышенном содержании гептан - растворимых Шиффовых оснований на 7е, 10е сутки гипокинезии. Выявлено, что в печени повышение базального уровня ПОЛ в гептановой фазе сопряжено со снижением уровня Fe⁺²/аскорбат - индуцированного ПОЛ в изопропанольной фазе. Обнаружено, что в органах системы крови и в плазме крови в динамике 30-суточной гипокинезии происходит снижение липопероксидации. При этом тимусе, селезёнке и костном мозге уменьшается содержание гептанофильных продуктов ПОЛ. Установлено, в тимусе, селезёнке, костном мозге и в плазме крови увеличивается содержание карбонилированных белков, причём в тимусе и селезёнке преимущественно усиливается базальный уровень карбонилирования, а в костном мозге преимущественно усиливается Fe⁺²/H₂O₂ - индуцированное карбонилирование белков. При этом на 30е сутки гипокинезии обнаружено снижение содержания карбонилированных белков. Установлено, что повышенный уровень карбонилированных белков в плазме крови с 10х по 30е сутки гипокинезии ассоциируется с увеличением ксантиноксидазной активности крови.

Теоретическое и практическое значение

Полученные результаты обосновывают новое представление об усилении окисления белков как наиболее раннем признаке окислительного стресса при гипокинезии. Дано объяснение реципрокным отношениям между липопероксидацией и окислением белков при гипокинезии. На основании полученных результатов возможна оптимизация использования антиоксидантных препаратов для коррекции стрессорных расстройств.

Положения, выносимые на защиту

1. Для головного мозга характерно одновременное усиление липопероксидации и окисления белков на 10е и 30е сутки гипокинезии.

2. Наблюдаемое на 7е, 10е и 30е сутки гипокинезии увеличение содержания карбонилированных белков в печени сопряжено с увеличением содержания гептан - растворимых Шиффовых оснований и снижением уровня Fe⁺²/аскорбат - индуцированного ПОЛ.

3. Реципрокные отношения между липопероксидацией и окислением белков в органах системы крови в динамике 30 - суточной гипокинезии проявляются в усилении карбонилирования белков и снижении уровня липопероксидации.

Апробация работы

Основные положения работы изложены и представлены на международном молодёжном медицинском конгрессе (Санкт-Петербург, 2005), на российской конференции, посвящённой 80-летию со дня рождения Р.И. Лифшица «Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии» (Челябинск, 2009), на IV международном молодежном медицинском конгрессе (Санкт-Петербург, 2011).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 8 печатных работ, из них 3 - в рецензируемых журналах по перечню ВАК Минобразования РФ.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 120 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, главы собственных исследований, обсуждения результатов, выводов. Библиографический указатель включает 214 источников: 105 - на русском языке и 109 - иностранных. Работа содержит 9 таблиц, 10 рисунков.

Материалы и методы исследования

В работе проводилось экспериментальное моделирование различных режимов гипокинетического стресса. Исследование выполнено на 156 лабораторных крысах массой 180 - 300 г. обоего пола. В экспериментах использовались беспородные животные.

Гипокинетический стресс моделировали путём помещения крыс в специальные клетки - пеналы, ограничивающие подвижность животных при свободном доступе к пище и воде. Применялись 1-,3-,7-,10-,30-суточные модели гипокинетического стресса.

Биохимические методы

Содержание продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) оценивали спектрофотометрически в липидном экстракте исследуемых тканей по методике Волчегорского И.А. и др. (1989). Определение конечных продуктов ПОЛ (Шиффовы основания) проводилось спектрофотометрическим методом по методике Львовской Е.И. с соавт. (1998). Для изучения интенсивности индуцированного ПОЛ (окисляемости липидов) производилось определение интенсивности аскорбат-индуцированного ПОЛ по Львовской Е.И. (1998).

Окислительную модификацию белков оценивали по уровню образования динитрофенилгидразонов по методу Е.Е. Дубининой (1995).

Активность моноаминоксидазы - Б в гомогенатах головного мозга и печени определяли спектрофотометрическим методом, используя в качестве субстрата солянокислый бензиламин (Волчегорский И.А., 1991).

Определение активности ксантиноксидазы производилось по методу Hashimoto (1974).

Определение активности каталазы производилось по методу М.А. Королюк и соавт. (1988), содержание гемоглобина в крови определяли гемихромным методом с использованием тест - систем компании “Вектор-Бэст”.

Статистический анализ результатов

Результаты обрабатывались общепринятыми методами вариационной статистики (Лакин Г.Ф., 1990) и выражались в виде среднеарифметической (М) и её стандартной ошибки (m). Применялись критерии непараметрической статистики (Гублер Е.В., Генкин А.А 1969): Манна-Уитни (U) и Вальда-Вольфовица (WW). Различия считали значимыми при P?0,05. Статистические взаимосвязи изучали при помощи непараметрического корреляционного анализа, выполняя расчёт коэффициентов корреляции рангов по Спирмену (rs) и Кенделлу (rk).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Длительная гипокинезия характеризуется усилением процессов, проявляющихся кахексией, связанных со снижением веса животного и массы внутренних органов (Коваленко Е.А., Гуровский Н.Н., 1980; Латюшин Я. В., 2010). Обычно проявления кахексии сопряжены с активацией протеолиза. Поэтому представляется вполне вероятной активация окислительной модификации белков при гипокинетическом стрессе. Возможно, что активация этого звена свободно - радикального окисления характеризуется наличием как синхронных, так и гетерохронных реакций с липопероксидацией в различных органах. Мы изучали органо - специфические особенности соотношения между липопероксидацией и окислением белков в динамике гипокинетического стресса.

1. Влияние гипокинетического стресса на липопероксидацию и окислительную модификацию белков в головном мозге

Установлено, что после завершения односуточной гипокинезии (ГК1) содержание молекулярных продуктов ПОЛ (таблица 1) и карбонилированных белков в головном мозге не отличалось статистически значимо от контрольных значений (рисунок 1).



Рисунок 1 Содержание карбонилированных белков в головном мозге при гипокинезии

Примечание: * - статистически значимые отличия от показателей контрольной группы, Р<0,05. Обработка произведена с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни.

При трехсуточной гипокинезии (ГК3) на фоне тенденции к увеличению содержания карбонилированных белков, которая не достигла статистически значимых различий, наблюдалось снижение содержания карбонилированных белков в ответ на индукцию Fe⁺²/H₂O₂. Это можно интерпретировать как проявление недостаточности их антиоксидантной защиты. После завершения семидневной гипокинезии (ГК7) в органе отмечено усиление окислительной модификации белков, что проявлялось в трёхкратном приросте содержания карбонилированных белков и наблюдалось снижение содержания карбонилированных белков в ответ на индукцию Fe⁺²/H₂O₂. Трёхкратный прирост содержания карбонилированных белков наблюдался также после завершения десятидневной гипокинезии (ГК10). Прирост окислительной модификации белка сохранялся и при тридцатисуточной гипокинезии (рисунок 1).

При ГК3 увеличивается содержание изопропанол - растворимых диеновых конъюгатов, кроме того, при ГК10 наблюдается увеличение содержания изопропанол - растворимых диеновых конъюгатов при одновременном снижении содержания данной категории продуктов липопероксидации в гептановой фазе липидного экстракта (таблица 1). Важно отметить, что в это время также наблюдалось снижение содержания изопропанол - растворимых кетодиенов и сопряжённых триенов в ответ на индукцию Fe⁺²/аскорбат. Снижение содержания гептан - растворимых диеновых конъюгатов при одновременном увеличении содержания изопропанол - растворимых диеновых конъюгатов может быть связано с угнетением активности фосфолипазы А₂, обеспечивающей транслокацию ацильного радикала из фосфолипидов мембран (Климов А.К., Никульчева Н.Г., 1999).

Таблица 1 Содержание молекулярных продуктов ПОЛ в головном мозге при гипокинезии

Показатель	1 Контроль (n=6)	2 Гипокинезия 1 сутки (n=9)	3 Гипокинезия 3 суток (n=9)	4 Гипокинезия 7 суток (n=10)	5 Гипокинезия 10 суток (n=10)	6 Гипокинезия 30 суток (n=8)
ДК [г]	0,84±0,004	0,83±0,001	0,83±0,003	0,83±0,002	0,82±0,002 P1,5=0,01U	0,83±0,003
ШО [г]	0,006±0,004	0,01±0,006	0,003±0,001	0,01±0,006	0,01±0,007	0,007±0,002
ДК [и]	0,89±0,02	0,89±0,009	0,92±0,010 P2,3=0,01U	0,94±0,02	0,94±0,008 P1,5=0,03U	0,94±0,01
ДК [и] (индукция Fe2+ / аскорбат)	1,07±0,04	1,21±0,07	1,20±0,06	1,19±0,06	1,15±0,07	1,43±0,07 P1,6=0,01U P5,6=0,03U
КДиСТ [и] (индукция Fe2+ / аскорбат)	6,99±0,67	7,87±0,87	7,01±1,03	6,58±1,12	5,23±0,49 P1,5=0,03U	8,61±1,13 P5,6=0,03U

Примечания к таблице: ДК - диеновые коньюгаты (первичные продукты ПОЛ), КД и СТ - кетодиены и сопряженные триены (вторичные продукты ПОЛ); ШО - шиффовы основания (конечные продукты ПОЛ) буквенные подиндексы [г] и [и] обозначают продукты ПОЛ, извлекаемые соответственно гептановой и изопропанольной фазами липидного экстракта; U - критерий Манна-Уитни. WW - критерий Вальда-Вольфовица. Содержание молекулярных продуктов ПОЛ выражено в условных единицах окислительного индекса.

Необходимо обратить внимание на синхронизацию между увеличением базального уровня липопероксидации в изопропанольной фазе и снижением уровня Fe⁺²/аскорбат - индуцированного ПОЛ. Это свидетельствует о снижении эффективности антиоксидантной защиты. По-видимому, в результате усиления базального уровня ПОЛ, формируется дефицит ненасыщенных ацилов, что приводит к снижению содержания Fe⁺²/аскорбат - индуцированных продуктов ПОЛ.

После завершения ГК30 сохранялся повышенным уровень карбонилированных белков в органе (рисунок 1). При этом в отличие от ГК10, наблюдалось усиление Fe⁺²/аскорбат - индуцированного ПОЛ (таблица 1), что свидетельствует об увеличении эффективности антиоксидантной защиты.

Существуют данные о причастности церебральной МАО-Б к активации свободно - радикального окисления при стрессе (Цейликман В.Э. и соавт., 2009). Наши результаты показывают, что на всём протяжении гипокинетического стресса, несмотря на явную тенденцию к снижению активности фермента (рисунок 2), отсутствуют статистически значимые изменения активности церебральной МАО-Б, что указывает на МАО - независимый характер индукции свободно - радикального окисления при гипокинетическом стрессе.

Рисунок 2 Активность МАО-Б в мозге при гипокинезии

Полученные результаты свидетельствуют о том, что в динамике гипокинетического стресса в головном мозге активация окислительной модификации белков опережает по времени усиление ПОЛ. По мере увеличения продолжительности гипокинезии наблюдается генерализованное усиление свободно - радикального окисления, проявляющееся в одновременном увеличении ПОЛ и карбонилирования белков.

2. Влияние гипокинетического стресса на содержание молекулярных продуктов ПОЛ и окислительную модификацию белков в печени

В печени при ГК1 происходит снижение содержания общего белка (с 8,40±0,41% в контроле (n=6) до 6,29±0,51% в опытной группе (n=9); P=0,02U) при одновременном увеличении уровня карбонилирования белков в ответ на индукцию Fe⁺²/H₂O₂ (рисунок 3).

При этом отсутствуют статистически значимые изменения содержания молекулярных продуктов ПОЛ (таблица 2). При ГК3 отмечается снижение содержания кетодиенов и сопряжённых триенов в ответ на индукцию Fe⁺²/аскорбат. Одновременно наблюдалось увеличение содержания карбонилированных белков. Снижение уровня Fe⁺²/аскорбат -индуцированного ПОЛ свидетельствует об уменьшении резервов для переокисления в органе. Это обстоятельство создает благоприятный фон для атаки свободными радикалами белковых молекул. Усиление свободно-радикального окисления при ГК3 синхронизировано с трехкратным приростом активности МАО-Б в органе (рисунок 4). Известно, что этот фермент может усиливать окислительный стресс за счёт генерации H₂O₂, являющейся копродуктом окислительного дезаминирования.

При ГК7 наблюдается увеличение содержания гептан - растворимых Шиффовых оснований, а так же сохраняется сниженный уровень кетодиенов и сопряжённых триенов при индукции в системе Fe⁺²/аскорбат, что свидетельствует о снижении резервов для липопероксидации (таблица 2).



Рисунок 3

Окислительная модификация белков печени при гипокинетическом стрессе

Примечание: * - статистически значимые отличия от показателей контрольной группы, Р<0,05. ** - от показателей группы ГК 1. Статистическая обработка произведена с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни.

Характерные для гипокинезии процессы кахексической направленности, в органе проявляются в виде снижения содержания общего белка (с 8,40±0,41% в контроле (n=6) до 4,10±0,55% при ГК7 (n=10); P=0,002U). При этом увеличивается интенсивность карбонилирования белков при индукции Fe⁺²/H₂O₂ (рисунок 3). Интересно отметить, что и при ГК7 также наблюдался повышенный уровень активности МАО-Б (рисунок 4).

Рисунок 4 Активность МАО-Б в печени при гипокинезии

Примечание: * - статистически значимые отличия от показателей контрольной группы, Р<0,05. ** - от показателей группы ГК 7. Статистическая обработка произведена с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни.

Выявлена обратная корреляционная зависимость между активностью МАО-Б и содержанием конечных гептан - растворимых продуктов ПОЛ (Rs = -0,82, p=0,02, n=7), и прямая корреляционная зависимость между активностью МАО-Б и содержанием конечных изопропанол - растворимых продуктов ПОЛ (Rs = 0,93, p=0,002, n=7). Таким образом, выявлена зависимость: при увеличении активности МАО-Б увеличивается содержание конечных изопропанол-растворимых продуктов ПОЛ. При этом, обнаружена обратная корреляционная зависимость между активностью МАО-Б и содержанием вторичных изопропанол - растворимых продуктов ПОЛ при индукции Fe⁺²/аскорбат (Rs= -0,86, p=0,01, n=7), и между активностью МАО-Б и содержанием карбонилированных белков при индукции Fe⁺²/H₂O₂ (Rs = -0,78, p=0,04, n=7).

При ГК10, содержание гептан - растворимых Шиффовых оснований было повышено по сравнению с контролем. При ГК10 отмечено увеличение базального уровня карбонилирования белков и снижение содержания общего белка (с 8,40±0,41% в контроле (n=6) до 4,80±0,74% в опытной пробе (n=10); P=0,01U) на фоне повышения уровня карбонилирования протеинов при индукции Fe⁺²/H₂O₂ (рисунок 3).

В этот период активность МАО-Б была снижена в 2 раза по сравнению с ГК7 и не отличалась статистически значимо от контрольных значений (рисунок 4). Вероятно, этот фермент стал одной из мишеней «карбонильного стресса», что позволило в какой - то мере ограничить процесс свободно - радикального окисления.

В условиях ГК30 по-прежнему оставался сниженным уровень Fe⁺²/аскорбат индуцированных изопропанол - растворимых кетодиенов и сопряжённых триенов (таблица 2). Кроме того, на фоне сниженного содержания белка в органе (с 8,40±0,41% в контроле (n=6) до 4,25±0,63% при ГК30 (n=6); P=0,005U), оставался повышенным базальный уровень окислительно-модифицированных белков при одновременном усилении Fe⁺²/H₂O₂ - индуцированного карбонилирования белков (рисунок 3). При этом в органе вновь повысилась активность МАО-Б, что может быть связано с увеличением её экспрессии или со снижением уровня эндогенных ингибиторов активности МАО (рисунок 4). Выявлена прямая корреляционная зависимость между активностью МАО-Б и содержанием вторичных гептан - растворимых продуктов ПОЛ (Rs = 0,90, p=0,04, n=5, Rk =0,80, p=0,05, n=5). Выявлена прямая корреляционная зависимость между активностью МАО-Б и содержанием конечных гептан - растворимых продуктов ПОЛ (Rk=1,00, p=0,01, n=5). Таким образом, при увеличении активности МАО-Б увеличивается содержание вторичных и конечных гептан - растворимых продуктов ПОЛ.

В динамике тридцатисуточной гипокинезии в печени происходит усугубление процессов свободно - радикального окисления. На фоне усиления процессов окислительной модификации белков, происходит снижение содержания общего белка и снижение интенсивности индуцированного ПОЛ. При этом выявлена корреляционная зависимость, что при повышении активности фермента МАО-Б увеличивается содержание вторичных и конечных гептан - растворимых продуктов ПОЛ.

Таблица 2 Содержание молекулярных продуктов ПОЛ в печени при гипокинезии

Показатель	1 Контроль (n=6)	2 Гипокинезия 1 сутки (n=9)	3 Гипокинезия 3 суток (n=9)	4 Гипокинезия 7 суток (n=10)	5 Гипокинезия 10 суток (n=10)	6 Гипокинезия 30 суток (n=6)
ДК [г]	0,90±0,01	0,91±0,004	0,91±0,01	0,91±0,007	0,92±0,009	0,92±0,008
ШО [г]	0,005±0,002	0,03±0,02	0,03±0,01	0,02±0,009 P1,4=0,02U	0,05±0,02 P1,5=0,008U	0,06±0,02
ДК [и] (индукция Fe2+ / аскорбат)	1,50±0,09	1,62±0,12	1,60±0,14	1,64±0,13	1,78±0,13	1,60±0,11
КДиСТ [и] (индукция Fe2+ / аскорбат)	2,86±0,23	2,54±0,36	1,75±0,31 P1,3=0,03U	1,88±0,28 P1,4=0,02U	2,08±0,18 P1,5=0,03U	1,42±0,16 P1,6=0,005U

Примечания к таблице: ДК - диеновые коньюгаты (первичные продукты ПОЛ), КД и СТ - кетодиены и сопряженные триены (вторичные продукты ПОЛ); ШО - шиффовы основания (конечные продукты ПОЛ) буквенные подиндексы [г] и [и] обозначают продукты ПОЛ, извлекаемые соответственно гептановой и изопропанольной фазами липидного экстракта; U - критерий Манна-Уитни. WW - критерий Вальда-Вольфовица. Содержание молекулярных продуктов ПОЛ выражено в условных единицах окислительного индекса.

3. Влияние гипокинетического стресса на содержание молекулярных продуктов ПОЛ и карбонилированных белков в крови

В первую декаду гипокинетического стресса в плазме крови наблюдалось снижение уровня липопероксидации (таблица 3). Так, при ГК3 наблюдалось снижение содержания гептан - растворимых Шиффовых оснований. Начиная с 7 суток гипокинезии, отмечено снижение содержания изопропанол - растворимых диеновых конъюгатов, а также кетодиенов и сопряжённых триенов. Содержание этих категорий молекулярных продуктов ПОЛ остаётся пониженным и при ГК10. В этот период увеличивается содержание кетодиенов и сопряжённых триенов в ответ на индукцию (Fe⁺²/ аскорбат), что свидетельствует об увеличении окисляемости липидов, повышении резервов для липопероксидации, а также о повышенной эффективности гуморальной антиоксидантной защиты применительно к липофильным факторам.

При ГК30 содержание изопропанол - растворимых диеновых конъюгатов, а также кетодиенов и сопряжённых триенов по-прежнему остаётся сниженным относительно показателей контрольной группы. Таким образом, при ГК30 наблюдается устойчивая тенденция к снижению содержания молекулярных продуктов ПОЛ в плазме крови. Важно отметить, что липидные факторы плазмы преимущественно аккумулируются в составе липопротеидных частиц. Поэтому факт сниженного содержания ПОЛ может отражать уменьшение уровня перекисно - модифицированных липопротеидов.

Таблица 3 Содержание молекулярных продуктов ПОЛ в плазме крови при гипокинезии

Показатель	1	2	3	4	5	6
	Контроль (n=6)	Гипокинезия 1 сутки (n=9)	Гипокинезия 3 суток (n=8)	Гипокинезия 7 суток (n=7)	Гипокинезия 10 суток (n=9)	Гипокинезия 30 суток (n=7)
ДК [г]	0,61±0,03	0,63±0,02	0,65±0,02	0,62±0,02	0,61±0,03	0,62±0,03
КДиСТ [г]	0,01±0,001	0,01±0,0008	0,01±0,0007	0,01±0,0006	0,01±0,0009	0,01±0,0006
ШО [г]	0,002±0,0006	0,001±0,0002	0,0009±0,0002 P1,3=0,03WW	0,001±0,0003	0,001±0,0003	0,001±0,0002
ДК [и]	1,01±0,03	1,08±0,06	0,99±0,03	0,89±0,03 P1,4=0,03U	0,88±0,04 P1,5=0,01U	0,92±0,02 P1,6=0,04U
КДиСТ [и]	0,27±0,05	0,19±0,02	0,17±0,01	0,14±0,01 P1,4=0,03U	0,14±0,008 P1,5=0,01U	0,14±0,01 P1,6=0,04U
ШО [и]	0,08±0,03	0,06±0,01	0,07±0,02	0,09±0,02	0,08±0,01	0,07±0,01
ДК [и] (индукция Fe2+ / аскорбат)	1,07±0,09	0,91±0,04	1,08±0,06 P2,3=0,03U	1,13±0,04	1,13±0,08	1,12±0,04
КДиСТ [и] (индукция Fe2+ / аскорбат)	5,34±1,26	5,96±0,54	6,12±0,59	6,75±0,56	6,82±0,70	7,08±0,81

Примечания к таблице: ДК - диеновые коньюгаты (первичные продукты ПОЛ), КД и СТ - кетодиены и сопряженные триены (вторичные продукты ПОЛ); ШО - шиффовы основания (конечные продукты ПОЛ) буквенные подиндексы [г] и [и] обозначают продукты ПОЛ, извлекаемые соответственно гептановой и изопропанольной фазами липидного экстракта; U - критерий Манна-Уитни. WW - критерий Вальда-Вольфовица. Содержание молекулярных продуктов ПОЛ выражено в условных единицах окислительного индекса.

Совершенно противоположная тенденция характерна для процесса окислительной модификации белков плазмы крови (рисунок 5). Начиная с третьих суток гипокинетического стресса, наблюдалось увеличение базального уровня карбонилированных белков. Для ГК7 увеличение уровня Fe⁺²/H₂O₂ - индуцированного карбонилирования белков проявлялось в условиях сниженного содержания общего белка плазмы (в контроле 7,34±0,33% (n=6) до 5,66±0,17% при ГК7 (n=7); P=0,008U), что может быть равнодействующей как усиления окислительной деструкции белков крови, так и снижением белок - синтезирующей функции печени.

При ГК10 обнаружены статистически значимые изменения увеличения базального уровня карбонилированного белка в плазме. При ГК30 наблюдалось снижение содержания белка плазмы (с 7,34±0,33% (n=6); в контроле до 6,05±0,20% при ГК30 (n=7); P=0,01U) при повышенном базальном уровне карбонилированных белков, а также на фоне увеличения уровня Fe⁺²/H₂O₂ - индуцированного карбонилирования белков. Таким образом, белковые факторы плазмы при гипокинетическом стрессе в большей степени подвержены свободно - радикальному окислению по сравнению с липидными.



Рисунок 5 Окислительная модификация белков плазмы крови в динамике гипокинетического стресса

Примечание: * - статистически значимые отличия от показателей контрольной группы, Р<0,05. Обработка произведена с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни.

Известно, что окислительной модификации в первую очередь подвергаются белки, утратившие свою функциональную значимость (Дубинина Е.Е., 2001).

В свою очередь, образующиеся после протеолиза пептидные факторы обладают антиоксидантным действием. Последнее обстоятельство также может внести вклад в снижение интенсивности ПОЛ при гипокинезии.

При ГК1 и ГК3 статистически значимо увеличивается содержание Fe²⁺/аскорбат - индуцированных изопропанол - растворимых диеновых конъюгатов в эритроцитах (таблица 4).

Это свидетельствует об увеличении эффективности действия липофильных антиоксидантов в клетках. При ГК7 статистически значимо повышается содержание вторичных и конечных гептан - растворимых продуктов ПОЛ. На этом фоне наблюдается снижение содержания изопропанол - растворимых первичных и конечных продуктов ПОЛ. Это может быть объяснено активацией фосфолипазы, с последующей транслокацией ацильного радикала из фосфолипидов эритроцитарной мембраны в цитоплазму. Эта же тенденция сохраняется и при ГК10, где на фоне снижения содержания изопропанол - растворимых диеновых конъюгатов, отмечен прирост содержания гептан - растворимых кетодиенов и сопряжённых триенов, а также Шиффовых оснований. На 30-е сутки гипокинезии остаётся повышенным содержание этих категорий продуктов ПОЛ.

Таблица 4 Содержание молекулярных продуктов ПОЛ в эритроцитах при гипокинезии

Показатель	1 Контроль (n=6)	2 Гипокинезия 1 сутки (n=9)	3 Гипокинезия 3 суток (n=9)	4 Гипокинезия 7 суток (n=10)	5 Гипокинезия 10 суток (n=10)	6 Гипокинезия 30 суток (n=8)
ДК [г]	0,69±0,01	0,72±0,03	0,68±0,01	0,71±0,02	0,74±0,04	0,83±0,06
КДиСТ [г]	0,11±0,01	0,13±0,02	0,10±0,002	0,13±0,01 P3,4=0,01U	0,16±0,03 P1,5=0,04U	0,25±0,07 P1,6=0,02U
ШО [г]	0,03±0,02	0,06±0,03	0,01±0,01	0,08±0,02 P3,4=0,02U	0,11±0,04 P1,5=0,02U	0,24±0,10 P1,6=0,01U
ДК [и]	0,79±0,02	0,77±0,01	0,79±0,01	0,75±0,01 P1,4=0,03WW	0,78±0,01 P1,5=0,03WW	0,77±0,005
КДиСТ [и]	0,17±0,01	0,16±0,01	0,17±0,01	0,15±0,004	0,16±0,007	0,15±0,005
ШО [и]	0,06±0,03	0,06±0,02	0,06±0,02	0,01±0,009 P3,4=0,04U	0,02±0,007	0,02±0,008
ДК [и] (индукция Fe2+ / аскорбат)	1,33±0,07	1,64±0,08 P1,2=0,02U	1,57±0,05 P1,3=0,04U	1,39±0,09	1,41±0,07	1,38±0,07
КДиСТ [и] (индукция Fe2+ / аскорбат)	6,32±0,47	7,32±0,73	7,78±0,81	7,10±0,77	6,59±0,53	7,37±0,47

Примечания к таблице: ДК- диеновые коньюгаты (первичные продукты ПОЛ), КД и СТ-кетодиены и сопряженные триены (вторичные продукты ПОЛ); ШО-шиффовы основания (конечные продукты ПОЛ.)Буквенные подиндексы [г] и [и] обозначают продукты ПОЛ, извлекаемые соответственно гептановой и изопропанольной фазами липидного экстракта; U - критерий Манна-Уитни. WW - критерий Вальда-Вольфовица. Содержание молекулярных продуктов ПОЛ выражено в условных единицах окислительного индекса.

4. Влияние гипокинетического стресса на содержание молекулярных продуктов ПОЛ и карбонилированных белков в тимусе

При ГК1 не выявлено статистически значимых изменений перекисного окисления липидов (таблица 5) и окислительной модификации белков (рисунок 6) в тимусе по сравнению с показателями контрольной группы.

При ГК3 происходит снижение содержания вторичных и конечных изопропанол - растворимых продуктов ПОЛ. При этом не обнаружено значимых изменений окислительной модификации белков.

С седьмых суток гипокинетического стресса снижается содержание вторичных и конечных гептан - растворимых продуктов ПОЛ (таблица 5). Остается сниженным содержание изопропанол-растворимых кетодиенов и сопряженных триенов. На этом фоне снижается содержание КДиСТ при индукции ПОЛ Fe²⁺/аскорбат в изопропанольной фазе липидного экстракта, что свидетельствует о снижении антиоксидантного резерва ткани.

Указанные изменения липопероксидации сохраняются вплоть до тридцатых суток гипокинезии. При ГК7 увеличивается содержание уровня карбонилированных белков в тимусе (рисунок 6) на фоне снижения содержания белка в органе (до 1,44±0,02% n=10; P_3,4=0,005U при ГК7, в отличие от ГК3 1,56±0,03%, n=6). Таким образом, активация свободно - радикального окисления в тимусе также проявляется активацией окислительной модификации белка.

На десятые сутки гипокинезии остается сниженным, по сравнению с соответствующими показателями контрольной группы, содержание вторичных и конечных продуктов ПОЛ в гептановой и изопропанольной фазах липидного экстракта гомогенатов тимуса (таблица 5).

Таблица 5 Содержание молекулярных продуктов ПОЛ в тимусе при гипокинезии

Показатель	1 Контроль (n=6)	2 Гипокинезия 1 сутки (n=9)	3 Гипокинезия 3 суток (n=9)	4 Гипокинезия 7 суток (n=10)	5 Гипокинезия 10 суток (n=10)	6 Гипокинезия 30 суток (n=8)
КДиСТ [г]	0,12±0,008	0,11±0,004	0,12±0,003	0,09±0,003 P1,4=0,005U	0,09±0,004 P1,5=0,03U	0,09±0,003 P1,6=0,01U
ШО [г]	0,07±0,005	0,06±0,005	0,06±0,004	0,01±0,005 P1,4=0,003U	0,01±0,004 P1,5=0,003U	0,01±0,004 P1,6=0,004U
ДК [и]	0,84±0,02	0,80±0,009	0,80±0,008	0,81±0,007	0,79±0,007	0,78±0,009 P1,6=0,03U
КДиСТ [и]	0,27±0,09	0,17±0,005	0,15±0,003 P1,3=0,01U	0,15±0,006 P1,4=0,02U	0,15±0,003 P1,5=0,003U	0,14±0,002 P1,6=0,004U
ШО [и]	0,42±0,30	0,08±0,01	0,06±0,002 P1,3=0,02U	0,09±0,02	0,07±0,003 P1,5=0,03U	0,07±0,004 P1,6=0,01U
КДиСТ [и] (индукция Fe2+ / аскорбат)	3,95±1,19	3,35±0,47	3,32±0,34	2,72±0,11 P1,4=0,02U	2,96±0,12	2,82±0,13

Примечания к таблице: ДК - диеновые коньюгаты (первичные продукты ПОЛ), КД и СТ - кетодиены и сопряженные триены (вторичные продукты ПОЛ); ШО - шиффовы основания (конечные продукты ПОЛ) буквенные подиндексы [г] и [и] обозначают продукты ПОЛ, извлекаемые соответственно гептановой и изопропанольной фазами липидного экстракта; U - критерий Манна-Уитни. WW - критерий Вальда-Вольфовица. Содержание молекулярных продуктов ПОЛ выражено в условных единицах окислительного индекса.

Окислительная модификация белков тимуса при ГК10 в 3,7 раза превышает контрольные значения (рисунок 6). Это происходит на фоне снижения содержания общего белка в органе (с 1,50±0,07% в контрольной группе, (n=6) до 1,37±0,08% при ГК10, (n=10); P=0,01WW). При этом сохраняется высокий уровень карбонилирования белков при индукции Fe²⁺/Н₂О_2, что говорит о снижении антиоксидантной защиты в органе (рисунок 6).

При ГК 30 остается сниженным уровень липопероксидации в тимусе (таблица 5). Та же картина снижения содержания гептан и изопропанол - растворимых кетодиенов и сопряженных триенов и Шиффовых оснований. Достоверно снижается содержание изопопанол - растворимых диеновых конъюгатов. При этом сохраняется повышенный уровень карбонилирования белка (рисунок 6).

Рисунок 6 Окислительная модификация белков тимуса при гипокинетическом стрессе

Примечание: * - статистически значимые отличия от показателей контрольной группы, Р<0,05. ** - от показателей опытных групп1. Статистическая обработка произведена с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни.

Таким образом, в тимусе процессы окислительной модификации белка более выражены и опережают процессы ПОЛ.

5. Влияние гипокинетического стресса на содержание молекулярных продуктов ПОЛ и карбонилированных белков в костном мозге

При ГК1 повышается уровень гептан- и изопропанол- растворимых вторичных продуктов ПОЛ (таблица 6). Так же повышается содержание кетодиенов и сопряжённых триенов в ответ на индукцию Fe⁺²/аскорбат, что свидетельствует об увеличении окисляемости липидов. При этом увеличивается содержание индуцированных карбонилированных белков (рисунок 7). В динамике тридцатисуточной гипокинезии не выявлено статистически достоверных изменений содержания общего белка.

При ГК3 снижается содержание изопропанол - растворимых вторичных продуктов ПОЛ (таблица 6). При этом нет статистически достоверных изменений окислительной модификации белков (рисунок 7).

При ГК7 снижается содержание вторичных изопропанол - растворимых продуктов ПОЛ. При этом повышается уровень КДиСТ индукция ПОЛ Fe ²⁺ / аскорбат (таблица 6), что так же говорит о повышении антиоксидантной активности. На 7 суточной гипокинезии идет снижение базального уровня карбонилированных белков и увеличение индуцированного (рисунок 7).

При ГК10 снижается содержание первичных, вторичных и конечных гептан - растворимых продуктов ПОЛ (таблица 6). При ГК30 остается сниженным содержание гептан - растворимых КДиСТ.

Таблица 6 Содержание молекулярных продуктов ПОЛ в костном мозге при гипокинезии

Показатель	1 Контроль (n=6)	2 Гипокинезия 1 сутки (n=9)	3 Гипокинезия 3 суток (n=9)	4 Гипокинезия 7 суток (n=10)	5 Гипокинезия 10 суток (n=10)	6 Гипокинезия 30 суток (n=8)
ДК [г]	0,7±0,003	0,73±0,02	0,70±-0,008	0,69±-0,004	0,69±-0,004 P1,5 =0,04U	0,69±0,008
КДиСТ [г]	0,13±0,002	0,14±0,006 P1,2=0,03WW	0,13±0,001-	0,13±0,002	0,12±-0,002 P1,5 =0,01U	0,12±0,002 P1,6 =0,04U
ШО [г]	0,01±0,002	0,02±0,002-	0,01±-0,001	0,02±-0,002	0,01±-0,002 P4,5 =0,03U	0,01±0,002
ДК [и]	0,50±0,01	0,51±-0,01	0,50±0,01	0,49±-0,005	0,56±-0,05	0,50±0,007
КДиСТ [и]	0,09±0,01	0,10±0,01 P1,2=0,007WW	0,08±0,01 P1,3=0,03WW	0,06±-0,01 P1,4=0,04U	0,07±-0,009	0,10±0,01
КДиСТ [и] (индукция Fe2+ / аскорбат)	13,29±1,76	13,55±-2,69 P1,2=0,007WW	15,08±-2,67	22,30±-2,79 P1,4=0,04U	16,73±-2,28	12,78±1,83

Примечания к таблице: ДК - диеновые коньюгаты (первичные продукты ПОЛ), КД и СТ - кетодиены и сопряженные триены (вторичные продукты ПОЛ); ШО - шиффовы основания (конечные продукты ПОЛ) буквенные подиндексы [г] и [и] обозначают продукты ПОЛ, извлекаемые соответственно гептановой и изопропанольной фазами липидного экстракта; U - критерий Манна-Уитни. WW - критерий Вальда-Вольфовица. Содержание молекулярных продуктов ПОЛ выражено в условных единицах окислительного индекса.

Для ГК30 характерно снижение базального уровня карбонилированных белков при одновременном усилении Fe⁺²/H₂O₂ индуцированного карбонилирования (рисунок 7).

Рисунок 7 Окислительная модификация белков в костном мозге при гипокинетическом стрессе

Примечание: * - статистически значимые отличия от показателей контрольной группы, Р<0,05. ** - от показателей опытных групп. Статистическая обработка произведена с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни.

7. Влияние гипокинетического стресса на содержание молекулярных продуктов ПОЛ и карбонилированных белков в селезенке

При ГК1отсутствуют статистически значимые изменения уровня ПОЛ (таблица 7) и окислительной деструкции белков (рисунок 8). При ГК3 повышается базальный уровень карбонилированных белков и в ответ на индукцию Fe²⁺/Н₂О₂. При этом масса органа статистически достоверно уменьшается (с 1,008±0,07 г. в контрольной группе, (n=6) до 0,70±0,04г., в опытной (n=8); Р=0,01U).

При ГК7 снижается содержание вторичных и конечных гептан - растворимых продуктов ПОЛ при одновременном снижении уровня Fe⁺²/аскорбат - индуцированного ПОЛ (таблица 7), что свидетельствует о снижении окисляемости липидов. На этом фоне происходит увеличение содержания карбонилированных белков на базальном уровне. При этом масса органа снижается (в контрольной группе 1,008±0,07г. до 0,74±0,07г., при ГК7, (n=10); P=0,03U), что говорит о превалировании прооксидантных процессов над антиоксидантными.

На 10 суточной гипокинезии ГК10 так же снижается содержание вторичных и конечных гептан - растворимых продуктов ПОЛ при одновременном снижении уровня Fe⁺²/аскорбат индуцированного ПОЛ (таблица 7). При этом нет статистически значимых изменений карбонилирования белков (рисунок 8). Масса органа при этом снижается (с 1,008±0,07г. в контрольной группе, (n=6) до 0,67±0,05г., при ГК10, (n=10); P=0,005U).

Таблица 7 Содержание молекулярных продуктов ПОЛ в селезенке при гипокинезии

Показатель	1 Контроль (n=6)	2 Гипокинезия 1 сутки (n=9)	3 Гипокинезия 3 суток (n=8)	4 Гипокинезия 7 суток (n=10)	5 Гипокинезия 10 суток (n=10)	6 Гипокинезия 30 суток (n=7)
ДК [г]	0,66±0,03	0,62±0,02	0,59±0,02	0,63±0,02	0,68±0,03	0,69±0,03
КДиСТ [г]	0,009±0,0009	0,008±0,0004	0,008±0,0004	0,006±0,0004 P1,4=0,02U	0,007±0,0004 P1,5=0,04U	0,008±0,0009
ШО [г]	0,006±0,0007	0,005±0,0003	0,005±0,0004	0,004±0,0003 P3,4=0,02U	0,004±0,0003 P1,5=0,03U	0,005±0,0005
ДК [и]	0,84±0,02	0,82±0,01	0,84±0,01	0,85±0,009	0,86±0,01	0,82±0,02
КДиСТ [и]	0,26±0,007	0,26±0,01	0,27±0,01	0,26±0,01	0,26±0,009	0,27±0,005
ШО [и]	0,05±0,002	0,05±0,003	0,05±0,001	0,05±0,002	0,05±0,002	0,05±0,002
ДК [и] (индукция Fe2+ / аскорбат)	1,42±0,09	1,40±0,11	1,29±0,07	1,19±0,06 P1,4=0,03U	1,33±0,07 P1,5=0,03WW	1,27±0,07
КДиСТ [и] (индукция Fe2+ / аскорбат)	4,97±0,35	4,35±0,41	4,16±0,38	3,83±0,17 P1,4=0,008U	4,58±0,36	3,90±0,20 P1,6=0,04U

Примечания к таблице: ДК - диеновые коньюгаты (первичные продукты ПОЛ), КД и СТ - кетодиены и сопряженные триены (вторичные продукты ПОЛ); ШО - шиффовы основания (конечные продукты ПОЛ) буквенные подиндексы [г] и [и] обозначают продукты ПОЛ, извлекаемые соответственно гептановой и изопропанольной фазами липидного экстракта; U - критерий Манна-Уитни. WW - критерийВальда-Вольфовица. Содержание молекулярных продуктов ПОЛ выражено в условных единицах окислительного индекса.

При ГК30 снижается содержание кетодиенов и сопряженных триенов в ответ на индукцию Fe⁺²/аскорбат. Если рассматривать окислительную деструкцию белков, то наблюдается снижение содержания индуцированного Fe²⁺/Н₂О₂ карбонилированного белка до контрольных значений. При этом повышается базальный уровень карбонилированных белков (рисунок 8), что может говорить о преобладании окислительных процессов в органе над антиоксидантной защитой. Так же окисление белков превалирует над окислением липидов, что может характеризовать дистрофические процессы в органе. Известно, что окислительной модификации в первую очередь подвергаются белки, утратившие свою функциональную значимость (Tsvetkov et al., 2007). Вполне возможно, что карбонилирование сопряжено с убиквитин - зависимым протеолизом, а пептидные факторы, образующиеся после протеолиза, в свою очередь, обладают антиоксидантным действием, что может привести к снижению интенсивности ПОЛ.

Рисунок 8 Окислительная модификация белков в селезенке при гипокинетическом стрессе

Примечание: * - статистически значимые отличия от показателей контрольной группы, Р<0,05. ** - от показателей опытных групп. Статистическая обработка произведена с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни.

Таким образом, в нашем исследовании выявлено, что в большинстве органов усиление окисления белков является атрибутивным признаком гипокинезии. В изученных органах: в головном мозге, печени, а так же в иммунных органах и крови на ранних этапах гипокинетического стресса процессы карбонилирования белков преобладают над липопероксидацией. При этом в головном мозге, печени, иммунных органах и сыворотке крови это проявляется на фоне снижения базального уровня липопероксидации. Ранее наличие реципрокных отношений между липопероксидацией и окислением белков неоднократно указывалось и другими авторами (Волчегорский И.А., 2007, Телешева И.Б., Шумелева О.В., 2008; Цейликман В.Э. и соавт., 2009).Так же выявлена зависимость между повышением активности прооксидантных ферментов, таких МАО, с повышением содержания вторичных и конечных гептан - растворимых продуктов ПОЛ в печени. Это происходит на фоне кахексических процессов в органе.

ВЫВОДЫ

1. Усиление перекисного окисления липидов в головном мозге в динамике 30 суточной гипокинезии проявляется в увеличении содержания изопропанол- растворимых диеновых конъюгатов на 7е, 10е и 30е сутки ограничения двигательной активности крыс.

2. Усиление окисления белков в головном мозге при 30 суточной гипокинезии проявляется в увеличении уровня Fe⁺²/Н₂О₂ индуцированного карбонилирования на 3 сутки и увеличения содержания карбонилированных белков на 7е, 10е и 30е сутки ограничения двигательной активности крыс.

3. Начиная с третьих суток и во все последующие сроки экспериментальной гипокинезии для печени характерно снижение уровня Fe⁺²/аскорбат индуцированного перекисного окисления липидов. При этом на седьмые, десятые сутки гипокинезии увеличивается содержание гептан - растворимых Шиффовых оснований.

4. В печени усиление окисления белков при 30 суточной гипокинезии синхронизировано со снижением содержания общего белка в органе. Увеличение содержания карбонилированных белков на 7е, 10е и 30е сутки ограничения двигательной активности синхронизировано с увеличением в органе активности МАО-Б.

5.Гипокинезия приводит к снижению содержания гептан - растворимых продуктов перекисного окисления липидов в органах системы крови. В тимусе на 7е сутки гипокинезии снижается содержание Шиффовых оснований, а в костном мозге кетодиенов и сопряжённых триенов на фоне усиления Fe⁺²/аскорбат индуцированного ПОЛ. В селезёнке одновременно уменьшается содержание Шиффовых оснований и снижается уровень Fe⁺²/аскорбат индуцированного ПОЛ на 10е сутки ограничения двигательной активности.

6.Для тимуса, селезёнки и плазмы крови в динамике 30 суточной гипокинезии характерно усиление карбонилирования белков на базальном уровне. В костном мозге преимущественно увеличивается уровень Fe²⁺/Н₂О₂ индуцированного карбонилирования белков.

липопероксидация белок мозг печень

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ по теме диссертации РАБОТ

1. Лаптева И.А., Постстрессорное увеличение устойчивости к гипоксии и осмотическая резистентность эритроцитов /Лаптева И.А., Тимофеева Т.Г.// Международный молодежный медицинский конгресс: Санкт - Петербургские научные чтения, СПб. - 2005.- С.114

2. Тимофеева Т.Г., Прооксидантные эффекты МАО-Б при тридцатисуточной гипокинезии / Тимофеева Т.Г., Деев Р.В. //Материалы Всероссийской конференции «Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии», посвященной 80-летию со дня рождения профессора Р.И.Лифшица, 5-8 октября 2009, г.Челябинск.- С.41-42.

3. Тимофеева Т.Г., Изменение активности ксантиноксидазы в динамике тридцатисуточной гипокинезии / Тимофеева Т.Г., Аверина Е.П. //Материалы Всероссийской конференции «Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии», посвященной 80-летию со дня рождения профессора Р.И.Лифшица, 5-8 октября 2009, г.Челябинск. - С.50.

4. Синицкий А.И., Свободно-радикальное окисление в тимусе, селезенке и костном мозге при гипокинетическом стрессе / Синицкий А.И., Тимофеева Т.Г., Филимонова Т.А., Романов Д.А., Стрельникова Л.А // Вестник Уральской медицинской академической науки 2011 №2 /1 (35) Тематический выпуск по аллергологии и иммунологии - С. 67-68.

5. Козочкин, Д.А., Соотношение между липопероксидацией и окислением белков в крови и головном мозге в динамике тридцатисуточной гипокинезии/ А.И.Синицкий, Д.А.Романов, Тимофеева Т.Г., Л.А. Стрельников И.В. Стрельникова Л.А., Филимонова Т.А., Цейликман В.Э.//Омский научный вестник. Серия. Ресурсы земли. Человек. 2011 №1(104).- С. 102 - 104.

6. Тимофеева Т.Г., Активность моноаминоксидазы и состояние свободно-радикального окисления в печени при 30-суточной гипокинезии /Тимофеева Т.Г. // IV Международный молодежный медицинский конгресс: Санкт - Петербургские научные чтения, СПб. - 2011.- С.29.

7. Тимофеева, Т.Г., Соотношение между перекисным окислением липидов и окислительной модификацией белка в крови в динамике тридцатисуточной гипокинезии / Тимофеева Т.Г. // Актуальные проблемы гуманитарных и естественных наук. -2011. - №12.- С.206 - 209.

8. Тимофеева Т.Г., Соотношение между липопероксидацией и окислительной модификацией белка в печени в динамике тридцатисуточной гипокинезии / Синицкий А.И., Филимонова Т.А., Панков Н.Е., Козочкин Д.А, Деев Р.В. // Фундаментальные исследования. - 2012. - №2.-С.143-146.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ГК1 - односуточная гипокинезия

ГК3 - трехс...