Возможности использования высокоинтенсивного лазерного излучения инфракрасного диапазона в хирургии молочной железы

Размещено на http://www.allbest.ru/

[Введите текст]

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ВЫСОКОИНТЕНСИВНОГО ЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ ИНФРАКРАСНОГО ДИАПАЗОНА В ХИРУРГИИ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)

Комиссарова Оксана Сергеевна

14.01.17 - хирургия

Челябинск - 2012

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Челябинская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации на кафедре факультетской хирургии

Научные руководители:

кандидат медицинских наук,

доцент Ануфриева Светлана Сергеевна

доктор медицинских наук,

профессор Куренков Евгений Леонидович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор,

заведующий кафедрой топографической анатомии

и оперативной хирургии

ГБОУ ВПО ЧелГМА Минздравсоцразвития России Чукичев Александр Викторович

доктор медицинских наук, профессор,

заведующий кафедрой общей хирургии

ГБОУ ВПО УГМА Минздравсоцразвития России Ходаков Валерий Васильевич

Ведущая организация: Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Оренбургская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Защита состоится «____» __________________ 2012 года в _____________ часов

на заседании диссертационного совета Д 208.117.01 при Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Челябинская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации по адресу: 454092, ул. Воровского, 64.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Челябинская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Автореферат разослан «_____» ___________________ 2012 года.

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор медицинских наук,

профессор Казачкова Элла Алексеевна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Высокоинтенсивное лазерное излучение достигло широкого применения в хирургии различных органах, что определяется его коагулирующими, бактериостатическими свойствами, щадящим воздействием на биологические ткани, стимулированием процессов регенерации [Берлиен Х.П., Мюллер Г.Й., 1997; Селиверстов О.В. и др., 2001; Полтавский Л.И., Привалов В.А., 2005; Игнатьева Е.Н., 2007; Durtschi M.B. et al., 1980; Wacker F.K. et al., 2001]. Частота выполняемых хирургических операций при фиброзно-кистозной болезни обусловлена широким кругом показаний, возникающих в ходе диагностической и лечебной тактики ведения пациенток с данной патологией молочных желез [Кира Е.Ф. и др., 2000; Летягин В.П., 2000; Прилепская В.Н., Тагиева Т.Т., 2000; Андреева Е.Н., Леднева Е.В.. 2002; Кулаков В.И. и др., 2003; Манушарова Р.А., Черкезова Э.И., 2004; Синицын В.А., Руднева Т.В., 2006; Беспалов В.Г., 2007; Летягин В.П., Высоцкая И.В., 2007; Кулаков В.И. и др., 2003; Летягин В.П., Высоцкая И.В., 2007].

К одним из недостатков хирургических вмешательств на молочной железе относится риск развития в послеоперационном периоде гематом, лигатурных свищей, раневой инфекции, а также грубых косметических дефектов [Золтан Я., 1974; Летягин В.П. и др., 1997; Ciatto S. et al., 1998: Lifrange E. et al., 2001; Bakker X.R., Roumen R.M., 2002; Vilar-Compte D. et al., 2004; El-Tamer M. et al., 2007; Van Esser S. et al., 2007]. Роль лазерной хирургии достигла некоторого определенного значения и развития в хирургическом лечении патологии молочных желез. В отечественной и зарубежной литературе представлены результаты экспериментальных и клинических исследований применения диодного, СО₂, Nd:YAG лазеров в интерстициальной термотерапии доброкачественных и злокачественных образований молочной железы [Ануфриева С.С. и др., 2009, 2010; Van Esser S. et al., 2009; Dowlatshahi K. et al., 2010; Zhao Z., Wu F., 2010]. Однако возможности применения диодного лазера при выполнении оперативных вмешательств на молочной железе, а также реакция тканей молочной железы на воздействие лазерного излучения ближнего инфракрасного диапазона, в настоящее время недостаточно изучены, что определило актуальность проведенного экспериментально-морфологического исследования и обоснование его применения в клинической практике.

Цель исследования

На основании комплексного экспериментально - морфологического и клинического исследований обосновать возможность использования высокоинтенсивного лазерного излучения инфракрасного диапазона при хирургических вмешательствах на молочной железе.

Задачи исследования

1. Определить оптимальные параметры высокоинтенсивного лазерного излучения инфракрасного диапазона для рассечения паренхимы молочной железы в эксперименте на животных и провести их клиническую апробацию при выполнении секторальных резекций молочных желез.

2. Изучить особенности характера тканевых реакций и процессов заживления в зоне воздействия диодного лазера с длиной волны 805 нм при хирургических вмешательствах на молочной железе кроликов.

3. Провести сравнительный экспериментально-морфологический анализ основных показателей оперативных вмешательств на молочных железах экспериментальных животных с использованием высокоинтенсивного лазерного излучения, электроножа и скальпеля.

4. Экспериментально-морфологическим путем определить оптимальные режимы высокоинтенсивного лазерного излучения для выполнения сварного соединения паренхимы молочной железы.

5. Разработать и апробировать методику лазерной облитерации кисты молочной железы у пациенток с фиброзно-кистозной болезнью.

Научная новизна

Впервые в результате проведенного экспериментально-морфологического исследования определены оптимальные параметры лазерного излучения инфракрасного диапазона с длиной волны 805 нм и 970 нм для достижения рассечения и соединения паренхимы молочной железы; разработаны методы рассечения и соединения паренхимы молочной железы кролика с применением высокоинтенсивного лазерного излучения; изучены тканевые реакции в зоне лазерного воздействия (отграничение зоны повреждения, индукция воспалительной реакции тканей, ускорение процессов фибриллогенеза) и обоснована возможность использования диодного лазера с длиной волны 805 нм и 970 нм при секторальных резекциях молочных желез у пациенток с фиброзно-кистозной болезнью. На основе полученных экспериментальным путем данных об оптимальных параметрах высокоинтенсивного лазерного излучения для формирования соединения паренхимы молочной железы разработана авторская методика лазерной облитерации кисты молочной железы у пациенток с фиброзно-кистозной болезнью (патентная справка, регистрационный № 2012102298 от 23.01.2012). лазер молочный железа заживление

Теоретическая и практическая значимость работы

Расширены представления о возможностях использования высокоинтенсивного лазерного излучения при хирургических вмешательствах на молочной железе. Разработаны подходы к патоморфологической оценке особенностей характера тканевых реакций в молочной железе экспериментальных животных при воздействии высокоинтенсивного лазерного излучения. Полученные результаты исследования воздействия высокоинтенсивного лазерного излучения на ткань молочной железы кроликов и проведенная клиническая апробация разработанных режимов лазерного излучения свидетельствуют о возможности использования методик лазерной резекции и соединения тканей при хирургических вмешательствах на молочных железах пациенток с фиброзно-кистозной болезнью.

Положения диссертации, выносимые на защиту

1. Оптимальными параметрами диодного лазера с длиной волны 805 нм и 970 нм для рассечения паренхимы молочных желез экспериментальных животных являются мощность излучения 20 Вт, импульсно-периодический режим генерации с длительностью импульс/пауза 0,05/0,05 с, что характеризуется минимальным повреждающим действием, ускорением репаративных процессов в тканях органа по сравнению с таковыми при использовании электроножа и скальпеля.

2. Секторальные резекции молочных желез у пациенток с фиброзно-кистозной болезнью с использованием высокоинтенсивного лазерного излучения (длина волны 805 нм и 970 нм, мощность излучения 20 Вт, импульсно-периодический режим генерации 0,05/0,05 с) характеризуются наличием адекватного гемостаза, меньшим объемом кровопотери, увеличением времени рассечения тканей, формированием в более ранние сроки зрелого тонкого послеоперационного рубца.

3. Оптимальными параметрами высокоинтенсивного лазерного излучения с длиной волны 805 нм и 970 нм для формирования соединения паренхимы молочных желез кроликов являются: мощность излучения 0,7 Вт, импульсно-периодический режим генерации с соотношением импульс/пауза 0,1/0,05 с, позволяющие уменьшить зону повреждения, воспалительную реакцию тканей, ускорить процессы фибриллогенеза в зоне воздействия лазерного излучения с формированием в ранние сроки зрелого тонкого послеоперационного рубца.

4. Полноценная облитерация просвета остаточной кистозной полости после тонкоигольной аспирационной биопсии у пациенток с фиброзно-кистозной болезнью может быть достигнута путем воздействия на стенки кисты высокоинтенсивного лазерного излучения с использованием экспериментально разработанных параметров.

Внедрение результатов исследования в практику

Материалы исследования используются в учебном процессе на кафедре факультетской хирургии, кафедре топографической анатомии и оперативной хирургии ГБОУ ВПО

ЧелГМА Минздравсоцразвития России, в научно-исследовательской деятельности патоморфологического отдела центральной научно-исследовательской лаборатории ГБОУ ВПО ЧелГМА Минздравсоцразвития России; в клинической работе - ГБУЗ ЦОСМП «Челябинский государственный институт лазерной хирургии» и НУЗ ДКБ «ОАО РЖД» ст. Челябинск.

Апробация работы

Основные материалы диссертационной работы доложены на студенческой конференции молодых ученых ГБОУ ВПО ЧелГМА Минздравсоцразвития России (2010), Межрегиональной научно-практической конференции с международным участием «Актуальные вопросы хирургии» (Челябинск, 2010), V Международной (XIV Всероссийской) Пироговской научной медицинской конференции студентов и молодых ученых (Москва, 2010), II Междисциплинарном форуме «Медицина молочной железы» (Москва, 2012).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 9 работ, из которых 4 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Объём и структура диссертации

Диссертация изложена на 146-ти страницах машинописного текста, включает 19 таблиц, 34 рисунка; состоит из введения, обзора литературы, главы «Материалы и методы исследования», двух глав результатов собственных исследований, главы обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций, списка использованной литературы. Указатель использованной литературы включает 219 источников (107 отечественных и 112 зарубежных авторов).

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

Работа основана на результатах экспериментальных, морфологических и клинических исследований, проведенных с 2006 по 2011 гг. на кафедре факультетской хирургии, в патоморфологическом отделе центральной научно-исследовательской лаборатории ГБОУ ВПО ЧелГМА Минздравсоцразвития России, ГБУЗ ЦОСМП «Челябинский государственный институт лазерной хирургии» и НУЗ ДКБ «ОАО РЖД» ст. Челябинск.

Экспериментальная часть исследования проведена на 240 половозрелых самках кроликов, массой тела 3-6 кг. Количество опытов составило 1480 (учитывая наличие у самок кроликов 4-5 пар молочных желез).

Операции на молочных железах экспериментальных животных проводились под наркозом 2% раствором ксилазина гидрохлорида в дозе 2 мл/кг. Хирургические вмешательства у животных выполнялись в фазу анэструса, что подтверждалось исследованием вагинальных мазков.

Все экспериментальные исследования осуществлялись в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных», регламентированных в приказе МЗ СССР № 755 от 12.09.77г. и принципами, изложенными в конвенции по защите позвоночных животных, используемых для эксперимента и других целей (г. Страсбург, Франция, 1986). Исследование проводилось в соответствии с протоколом на соответствие работы требованиям Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации (ВМА) последнего пересмотра (Эдинбург, 2000) с Ассамблеей ВМА (Вашингтон, 2002).

План клинических исследований был одобрен этическим комитетом ГБОУ ВПО ЧелГМА Минзравсоцразвития России (протокол № 2 от 15.10.2010 года).

Дизайн исследования

I. Изучение возможностей использования высокоинтенсивного лазерного излучения при выполнении резекций молочных желез кроликов

1. Подбор режимов лазерного излучения для рассечения паренхимы молочных желез

· на основании технических параметров резекций молочных желез (группа А, n=88);

· на основании морфологических изменений тканей после резекций с использованием лазерного излучения мощностью: 10 Вт (опытная группа IA, n=80); 15 Вт (опытная группа IB, n=80); 20 Вт (опытная группа IC, n=80);

2. Сравнительное изучение влияния диодного лазера на ткань паренхимы молочных желез кроликов, посредством выполнения оперативных вмешательств:

· резекции молочных желез кроликов с применением лазерного излучения мощностью 20 Вт (опытная группа IIА, n=180);

· резекции молочных желез кроликов с применением электроножа (группа сравнения IIB, n=180);

· резекции молочных желез кроликов с применением скальпеля (группа сравнения IIС, n=180);

3. Клиническая апробация методики рассечения паренхимы при выполнении секторальных резекций молочных желез у пациенток с фиброзно-кистозной болезнью (2 клинических случая)

II. Изучение возможностей использования высокоинтенсивного лазерного излучения при выполнении сварного соединения паренхимы молочных желез кроликов

1. Подбор режимов лазерного излучения для формирования сварного соединения и сравнительное изучение влияния лазера на ткани паренхимы молочных желез

· на основании технических параметров формирования лазерного сварного соединения паренхимы молочных желез (группа В, n=72);

· на основании морфологических изменений паренхиматозных тканей после операций с использованием лазерного излучения мощностью: 0,5 Вт (опытная группа IIIA, n=180);0,7 Вт (опытная группа IIIB, n=180);1 Вт (опытная группа IIIC, n=180);

2. Клиническая апробация способа лазерной облитерации полости кисты у пациенток с фиброзно-кистозной болезнью (2 клинических случая).

На этапе подбора режимов лазерного излучения для осуществления рассечения паренхимы молочной железы выполнялись резекции молочных желез (группа А) с использованием излучения диодного лазера с длиной волны 805 нм и 970 нм с различными показателями мощности, длительностью и соотношением импульс/пауза. Группа А составила 88 экспериментальных операций, выполненных на 11 кроликах.

Для выполнения хирургического вмешательства кролик укладывался на операционном столе на спину и фиксировался за четыре конечности. Шерсть тщательно сбривалась в областях расположения молочных желез. Операционные поля обрабатывались трижды раствором антисептика. Около соска в продольном направлении скальпелем производился разрез кожи длиной 15-20 мм. Ориентируя направление лазерного луча строго перпендикулярно поверхности кожи, выполнялось воздействие высокоинтенсивным лазерным излучением с длиной волны 805 нм и 970 нм на ткань молочной железы контактным способом, перемещая световод продольно, рассекая всю толщу паренхиматозной ткани. Рана ушивалась наглухо однорядными узловыми швами капроном.

Для рассечения тканей молочных желез кроликов подбирались оптимальные параметры лазерного излучения путем поэтапного увеличения мощности излучения (10 Вт; 15 Вт; 20 Вт) и смены соотношения длительности импульса и паузы (0,05с; 0,1с; 1,15с)

При подборе оптимальных параметров лазерного излучения оценивались продолжительность (быстрота) выполнения манипуляции, адекватность гемостаза, степень обугливания тканей и показатели динамической термометрии.

В объем экспериментальной работы входило термометрическое исследование степени нагрева тканей молочных желез кроликов в результате воздействия на них высокоинтенсивного лазерного излучения при рассечении тканей. Регистрация температуры тканей молочной железы выполнялась с использованием инфракрасного медицинского термометра «IRTIS-2000М», обработка полученных температурных показателей производилась с помощью специализированной программы.

При подборе режимов лазерного излучения было выполнено 240 резекций молочных желез (40 особей кроликов) с использованием лазерного излучения мощностью 10 Вт (опытная группа IA), 15 Вт (опытная группа IB), 20 Вт (опытная группа) в импульсном режиме с длительностью импульс пауза 0,05/0,05 с. Каждая опытная группа включала 80 операций с дальнейшей оценкой морфологических изменений тканей в зонах лазерного воздействия на сроках 1, 3, 30 и 60 суток.

Следующим этапом экспериментальной работы были выполнены 540 резекций молочных желез кроликов с применением лазерного излучения с длиной волны 805 нм, мощностью 20 Вт, в импульсном режиме генерации (0,05/0,05 с) (опытная группа IIA), а также с использованием электроножа (группа сравнения IIB) и скальпеля (группа сравнения IIC). Каждая опытная группа включала 180 резекций молочных желез.

Резекции молочных желез опытной группы IIA заключались в выполнении разреза кожи молочных желез скальпелем; паренхима молочных желез рассекалась с использованием высокоинтенсивного лазерного излучения контактным способом. Послеоперационная рана ушивалась наглухо наложением отдельных узловых швов капроном.

Группа сравнения IIB включала резекции молочных желез, при которых рассечение кожи производилось скальпелем, а паренхимы молочных желез - электроножом. В дальнейшем накладывались отдельные узловые швы капроном.

В объем оперативных вмешательств группы сравнения IIC входило рассечение кожи и паренхимы молочных желез только скальпелем, после чего рана ушивалась отдельными узловыми швами капроном наглухо.

Сравнительный анализ и изучение влияния высокоинтенсивного лазерного излучения на ткань молочных желез экспериментальных животных основывался на оценке морфометрических данных и морфологических изменений тканей в области воздействия хирургического инструмента на фиксированных сроках наблюдения (1,3,7,14,30 и 60 сутки).

С целью подбора режимов лазерного излучения для формирования сварного соединения тканей молочных желез кроликов выполнено 72 операции (группа В) на 9 экспериментальных животных с использованием высокоинтенсивного лазерного излучения с длиной волны 805 нм и 970 нм, различными показателями мощности (0,5 Вт; 0,7 Вт; 1 Вт) и соотношением импульс/пауза.

В области молочной железы полностью сбривалась шерсть, кожа обрабатывалась трижды раствором антисептика. Около соска в продольном направлении скальпелем производился разрез кожи и всей толщи паренхимы молочной железы кролика. Далее выполнялось воздействие высокоинтенсивным лазерным излучением с длиной волны 805 нм и 970 нм на ткани контактным способом, постепенно сдвигая при этом стенки раны по направлению от дна к краям до уровня кожи. Воздействие лазера на ткани оказывалось до появления эффекта слипания стенок послеоперационной раны. Для удержания краев раны и предотвращения их расхождения в послеоперационном периоде, накладывались 2-3 поддерживающих шва.

При подборе режимов лазерного излучения для соединения тканей молочных желез оценивались технические характеристики операций (степень слипания и удержания стенок послеоперационной раны, скорость выполнения манипуляции и визуальные признаки повреждения тканей в результате лазерного воздействия) и температурные показатели нагревания тканей.

С целью сравнительного изучения влияния высокоинтенсивного лазерного излучения при выполнении сварного соединения паренхимы молочных желез выполнялись операции с формированием сварного соединения с использованием лазерного излучения длиной волны 805 нм, мощностью 0,5 Вт (опытная группа IIIA), 0,7 Вт (опытная группа IIIB) и 1 Вт (опытная группа IIIС) в импульсно-периодическом режиме генерации с соотношением импульс/пауза 0,1/0,05 с, включающие по 180 оперативных вмешательств.

Оценка морфометрических данных и характера тканевых реакций осуществлялась на 1-е, 3-и, 7-е, 14-е, 30-е и 60-е сутки.

Клиническая апробация разработанных методик секторальных резекций молочных желез и облитерации полости кисты молочной железы с использованием лазера у пациенток с фиброзно-кистозной болезнью выполнена в 4 клинических случаях. Уточнение диагноза и показаний к использованию разработанного метода производилась на основании данных, полученных при осмотре и пальпации молочных желез женщин (в положении стоя и лежа); маммографическом (у пациенток старше 35 лет) и ультрасонографическом исследовании, и выполнении тонкоигольной аспирационной биопсии фиброаденом, кист молочных желез.

В экспериментальной работе использовалось высокоинтенсивное излучение, генерируемое диодными лазерами марки «Sharplan 6020» (Израиль) с длиной волны 805 нм и «Милон - Лахта» с длиной волны 970 нм в импульсно-периодическом режиме. Доставка энергии от лазерного аппарата к объекту осуществлялась посредством кварцевого моноволоконного световода, покрытого полимерной оболочкой, с диаметром светонесущей жилы 0,6 мм. Динамическая термометрия производилась с помощью инфракрасного термометра «IRTIS-2000М». Для выполнения резекций молочных желез с использованием электроножа, применялся аппарат электрохирургический ЭХВЧ-250-6. С целью рассечения паренхимы молочной железы и осуществления гемостаза устанавливались режимы резания с показателем мощности - 70 и коагуляции с мощностью - 86.

Гистологические срезы препаратов молочных желез окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по ван Гизону для выявления коллагеновых волокон, по Вейгерту-эластических волокон и Гомори-ретикулярных волокон. Измерение ширины зоны некроза и рубца осуществлялось при помощи лицензионной программы анализа изображения микрообъектов «Видеотест-Морфология 5.0» (Россия). Определение характера инфильтрата с установлением клеточной плотности составляющих его элементов проводилось путем подсчета клеток (нейтрофилов, макрофагов, эозинофилов, лимфоцитов, плазмоцитов, фибробластов) в перифокальной зоне при увеличении х400 в 5-15 полях зрения микропрепарата (Автандилов Г.Г., 1990). Иммуногистохимическое исследование проводилось на серийных парафиновых срезах для выявления клеток моноцитарно-макрофагального ряда. Демаскировка антигенных детерминант на депарафинированных, обезвоженных срезах проходила в течение 10 минут в СВЧ-печи в 0,01М цитратном буфере (рН=6,0). Затем срезы охлаждались 30 минут, промывались в фосфатно-солевом буфере (рН=7,4). Иммунное окрашивание проводилось стрептавидин-биотиновым пероксидазным методом. Срезы инкубировали с моноклональными антителами к CD68 макрофагальных клеток (clone kp-1, разведение 1:100, «Сell margue»). На заключительном этапе гистологические срезы докрашивались гематоксилином. Каждый элемент рассматривался как отдельная генеральная совокупность: подсчитывалось содержание клеток на срезе, которое переводилось в показатели на единицу площади 1 мм². Объемную плотность фуксинофильных, эластических, ретикулярных волокон определяли с использованием окулярной сетки Г.Г. Автандилова на 25 тест-точек при увеличении х400.

Полученные в результате исследований цифровые данные подвергались статистической обработке на персональном компьютере с помощью лицензионного пакета прикладных программ «Statistica 6.0» («StatSoft, Inc.»). Применялись методы вариационной статистики: определение средней арифметической, среднее квадратичное отклонение, стандартной ошибки средней арифметической. Статистическая значимость различий сравниваемых признаков в группах проводилась с помощью непараметрического U-теста Манна-Уитни с поправкой Бонферрони, в группах с нормальным распределением признака вычисляли t-критерий Стьюдента. Различия считались статистически значимыми при уровне р<0,05, что соответствует 95% вероятности безошибочного прогноза.

Результаты исследования и их обсуждение

Проведенное исследование показало, что использование лазерного излучения с соотношением импульс\пауза 0,05/0,05 с независимо от показателя мощности приводило к статистически значимому (р<0,05) снижению продолжительности рассечения тканей при внутригрупповом анализе (табл. 1). Технически рассечение паренхимы молочной железы с использованием диодного лазера с длиной волны 805 нм, мощностью 10 Вт, с соотношениями импульс/пауза 0,05/0,05с; 0,1/0,1с и 0,15/0,15с происходило очень медленно - не более 1 мм в секунду. Продолжительность манипуляции также увеличивалась за счет необходимости выполнения дополнительного гемостаза в лазерной ране до 29,5±0,2 с. Обугливание тканей молочной железы наблюдалось умеренное, обусловленное необходимостью длительного воздействия лазерного излучения для достижения эффекта рассечения паренхиматозных тканей.

При использовании лазерного излучения с длиной волны 805 нм, мощностью 15 Вт, с соотношениями импульс/пауза 0,05/0,05с; 0,1/0,1с и 0,15/0,15с длительность выполнения рассечения тканей молочных желез была меньше, чем в предыдущей группе и сократилась до 17,5±0,3 с. Одновременный гемостаз в лазерной ране достигался адекватный. Обугливание тканей молочной железы наблюдалось умеренное.

При рассечении паренхимы молочной железы с применением диодного лазера с длиной волны 805 нм, мощностью излучения 20 Вт, с соотношением импульс/пауза 0,15/0,15с и 0,1/0,1с продолжительность манипуляции уменьшалась до 16,25±0,5 с. Обугливание тканей молочной железы наблюдалось значительное при длительности импульса в 0,1с и 0,15с. Воздействие лазерного излучения в импульсно-периодическом режиме с соотношением импульс/пауза 0,05/0,05с приводило к быстрому рассечению паренхимы молочной железы (13,75±0,26 с), что вызывало незначительное обугливание тканей. Одновременный гемостаз в лазерной ране отмечался адекватный.

Таблица 1 Длительность рассечения тканей молочных желез кроликов в зависимости от параметров лазерного излучения (с)

Длина волны	Мощность излучения	Длительность импульса/ длительность паузы, с	Количество опытов	Продолжительность манипуляции, с
805 нм	10 Вт	0,15/0,15	4	29±0,2
		0,1/0,1	4	29,5±0,2
		0,05/0,05	4	28,5±0,1*
	15 Вт	0,15/0,15	4	19,5±0,58
		0,1/0,1	4	18,7±0,7
		0,05/0,05	4	17,5±0,3*
805 нм	20 Вт	0,15/0,15	4	16,25±0,96
		0,1/0,1	4	16,25±0,5
		0,05/0,05	8	13,75±0,26*
		0,05/0,1	8	28,13±0,25
		0,1/0,05	8	14,75±0,4
970 нм	20 Вт	0,15/0,15	4	15,75±0,5
		0,1/0,1	4	15,75±0,5
		0,05/0,05	8	13,6±0,2*
		0,05/0,1	8	28,2±0,3
		0,1/0,05	8	13,9±0,74

Примечание.

* Достоверность различий с показателями внутри группы (р<0,05). Использован U-критерий Манна-Уитни с поправкой Бонферрони.

Применение излучения с длительностью импульс/пауза 0,05/0,1с приводило к увеличению продолжительности времени манипуляции до 28,13±0,25 с за счет длительности паузы (0,1 с). Использование лазерного излучения с соотношением импульс/пауза 0,1/0,05с сокращало время выполнения манипуляции (14,75±0,4 с), но приводило к существенному обугливанию тканей молочной железы за счет увеличения длительности импульса до 0,1с.

Несмотря на полученные удовлетворительные технические результаты рассечения паренхимы молочных желез при использовании излучения мощностью 15 Вт, получено статистически значимое различие в длительности манипуляции: 17,5±0,3с при применении излучения мощностью 15 Вт и 13,75±0,26 с - мощности излучения 20 Вт в импульсном режиме с соотношением импульс\пауза равном 0,05/0,05 с (р<0,05), что свидетельствует о целесообразности использовании лазерного излучения с мощностью 20 Вт для резекции паренхимы органа.

Учитывая, что повреждающий эффект лазерного излучения напрямую зависит от температуры нагрева тканей в точке приложения лазерной энергии и окружающих ее тканей, в 24 опытных случаях был произведен динамический мониторинг температуры в режиме реального времени при осуществлении рассечения тканей молочной железы кроликов с помощью ВИЛИ мощностью 10 Вт, 15 Вт и 20 Вт в импульсно-периодическом режиме генерации с длительностью импульса и паузы по 0,05 с (табл. 2). Использование лазерного излучения мощностью 20 Вт с изучаемыми параметрами соотношения импульса и паузы независимо от длины волны (805 нм или 970 нм) одинаково приводило к максимальному нагреву тканей, прилегающих к торцу световода и составляет 229,7±4,9 єС и 234,5±3,6 єС (р>0,05). В то же время, температура тканей вокруг световода при их рассечении прогрессивно снижалась при уменьшении мощности излучения с 20 Вт до 10 Вт, составляя 229,7±4,9 єС , 185,4±5,9 єС и 160,2±6,9 єС, при 20 Вт, 15 Вт и 10 Вт, соответственно (р<0,05). Средняя температура тканей, окружающих область воздействия лазерного излучения на расстоянии 0,5 см от края раны, при их рассечении не зависела от используемых параметров лазерной установки (р>0,05), что свидетельствует о локальном действии данного типа ВИЛИ на ткани органа.

Таблица 2 Показатели температуры окружающих тканей при рассечении паренхимы молочных желез кроликов лазером с длиной волны 805 нм и 970 нм

Длина волны/ Кол-во опытов,n	Мощность излучения, Вт	Длительность импульса/ длительность паузы, с	Максимальная температура тканей, є С	Средняя температура тканей, є С
805 нм (n=8)	10 Вт	0,05/0,05	160,2±6,9*	54,2±3,8
805 нм (n=8)	15 Вт	0,05/0,05	185,4±5,9*	55,4± 5,3
805 нм (n=8)	20 Вт	0,05/0,05	229,7±4,9*	57,3±4,8
970 нм (n=8)	20 Вт	0,05/0,05	234,5±3,6*	58±5,2

Примечание. * Достоверность различий с показателями между группами (р<0,05). Использован U-критерий Манна-Уитни с поправкой Бонферрони.

Сопоставляя данные термометрии с техническими параметрами оперативных вмешательств (быстрота и удобство рассечения тканей, адекватность одномоментного гемостаза), был сделан вывод о том, что для оптимального рассечения тканей молочных желез кроликов с помощью лазерного излучения с длиной волны 805 нм и 970 нм в импульсно-периодическом режиме генерации необходимо достижение температуры тканей, прилегающих к торцу световода, до 232,1±4,3 єС, что соответствует мощности 20 Вт.

В результате первого этапа подбора режимов лазерного излучения (по техническим параметрам операций) было установлено, что использование лазерных установок с длиной волны 805 нм и 970 нм, оказывает схожие действия на ткани молочных желез кроликов. В экспериментальных операциях в дальнейшем нами применялся диодный лазер «Sharplan 6020» с длиной волны 805 нм, характеризующийся наибольшей маневренностью, простотой и удобством использования.

Следующим этапом подбора и обоснования выбора оптимальных параметров лазерного излучения для рассечения паренхимы явился сравнительный анализ степени повреждения и выраженности рубцовых изменений тканей молочных желез, основанный на данных морфологического и морфометрического исследований тканевых срезов зоны лазерного воздействия на ранних (первые и третьи сутки) и отдаленных (30- и 60-ые сутки) сроках наблюдения в экспериментальных группах IA, IB и IC.

При морфологическом исследовании изменений в тканях молочной железы оценивались: протяженность зоны некроза; характер повреждения железистого комплекса, элементов протоковой системы и экстрацеллюлярного матрикса; выраженность клеточной инфильтрации и клеточный состав воспалительного клеточного инфильтрата; ширина и состав послеоперационного рубца.

В зоне лазерного воздействия через 1-е сутки при морфологическом исследовании обнаруживался лазерный канал, в обе стороны от которого располагались некротически измененные ткани. Содержимое лазерного канала было представлено вспененным экссудатом и частицами ожогового струпа. Отмечалось выраженное расширение сосудов. Некротические изменения носили коагуляционный характер. Зона некроза была представлена гомогенной массой с вкраплениями ядерного детрита и полями гемолизированных эритроцитов.

Наибольшие значения ширины зоны некрозов к 1-м суткам отмечались в опытной группе IС - 137,2±8,6 мкм. Зона некротических изменений после воздействия лазерного излучения уже к 1-м суткам имела четкие границы с неповрежденными окружающими тканями и отграничивалась от них узким лейкоцитарным валом. Клетки ацинусов молочных желез зоны демаркационного вала были выстроены частоколом, секрет желез имел вид неправильных многогранных капель. Значения клеточной плотности перифокальной зоны в области воздействия лазера мощностью 20 Вт к 1-м суткам составляла 475,9±34,1 в 1 мм², представляя достоверно меньшее значение, чем после применения лазера мощностью 10 Вт - 654±50,2 в 1 мм² и мощностью 15 Вт - 704,7±50,1в 1 мм² (р<0,05). К 3-м суткам во всех опытных группах наблюдалось увеличение протяженности зон некротических изменений и перифокального воспаления тканей молочной железы, представляя наименьшие значения при этом в тканях после резекции лазером, мощностью 20 Вт (опытная группа IС) - 182,4±1,3 мкм и 553,4±29,9 в 1 мм² соответственно (p<0,05) (рис. 1).

а б

Рис. 1. Ширина зоны некроза (а) и суммарное количество клеток воспалительного инфильтрата (б) тканей молочных желез кроликов после резекций лазером.

Зона некроза четко отграничивалась лейкоцитарным валом от окружающих тканей. В зоне демаркационного вала наблюдался отек стромы, жировой ткани с резко расширенными сосудами. Среди отечной стромы отмечалось большое количество клеточных элементов - нейтрофилов, лимфоцитов, эозинофилов, эритроцитов. Структуры молочных желез были разрушены, ядра клеток ацинусов долек приобретали вытянутую, нитевидную форму. Ширина зоны некроза в тканях после лазерной резекции опытных групп IA, IB и IC на этом сроке достигает 223,4±20,0 мкм, 272±28.8 мкм и 182,4±1,3 мкм соответственно (p<0,05).

К 30-м суткам после лазерных резекций опытных групп IA, IB и IC наблюдалось формирование послеоперационного рубца с образованием зрелой соединительной ткани с небольшим количеством клеточных элементов и параллельно ориентированными сосудами. Коллагеновые волокна соединительной ткани располагались параллельно проекции лазерного канала.

Количество фибробластов и объемная плотность фуксинофильных волокон в зоне рубца составляли соответственно 95,4±5,8 в мм² и 25,7±1,1% (опытная группа IC), 151,9±11,1 в мм² и 40,8±3,2% (опытная группа IB), 121,2±5,0 в мм² и 29,8±2,1% (опытная группа IA) (р<0,05). Объемная плотность эластических и ретикулярных волокон составляли 8,35±0,93% и 18,4±1,91% (опытная группа IA), 6,4±0,74% и 19,5±1,29% (опытная группа IВ), 7,57±0,68% и 15,2±1,73% (опытная группа IС) (р<0,05).

К 30-м суткам после лазерных резекций молочных желез кроликов опытных групп IA и IB в тканях резко снижались макрофагальная, лимфоцитарная, плазмоцитарная инфильтрации на фоне полного исчезновения к этому сроку нейтрофильной инфильтрации тканей после операций всех опытных групп. Следует отметить, что клеточный состав зоны рубца после лазерных резекций опытной группы IC на сроке 30 суток был представлен только лимфоцитами и фибробластами, уровень которых составлял 12±3,3 в 1 мм² и 95,4±5,8 в 1 мм² соответственно. Дольки молочных желез были представлены ацинусами и протоками разного калибра, выстланные сосочками и содержащие небольшое количество секрета.

На 60-е сутки после экспериментальных операций всех опытных групп в областях лазерных воздействий отмечалось наличие рубца, представленного зрелой соединительной тканью, содержащей ацинусы с выводными протоками, характеризующейся отсутствием инфильтрации нейтрофилами, макрофагами, эозинофилами, лимфоцитами, плазмоцитами. Выводные протоки молочных желез были извиты, очень мелкие, свободны от секрета.

Количество фибробластов соединительной ткани рубцов после выполненных резекций опытной группы IA на 60-е сутки составляло 66,8±6,0 в 1 мм², в опытной группе IB - 74,1±6,0 в 1 мм², в опытной группе IC - 51,9±3,0 в 1 мм² (р<0,05).

Объемная плотность фуксинофильных, эластических и ретикулярных волокон рубцовой зрелой соединительной ткани к 60-м суткам после экспериментальных лазерных резекций молочных желез уменьшалась до 26,3±1,9%, 7,84±0,75% и 16,66±1,24% (опытная группа IA), 33,9±2,5%, 6,2±0,81% и 17,91±1,39% (опытная группа IB) и 20,2±1,4%, 7,39±0,55% и 14,11±1,2% (опытная группа IC) (р<0,05) (рис. 2).

а б

Рис. 2. Объемная плотность фуксинофильных волокон (а) и ширина рубца (б) тканей после резекций молочных желез животных лазером.

Ширина послеоперационного рубца после воздействия лазером мощностью 20 Вт на сроке 30-х суток составляла 453,2±12,7 мкм, на 60-е сутки - 387,6±11,2 мкм, что являлось достоверно меньше протяженности рубца после применения лазера мощностью 10 Вт - 562,4±18,5 мкм и 498,5±22,4 мкм, лазера мощностью 15 Вт - 689,8±20,4 мкм и 574,3±15,9 мкм соответственно, что свидетельствовало о формировании более тонкого рубца в тканях молочных желез кроликов после выполнения резекции тканей органа с помощью высокоинтенсивного лазерного излучения с длиной волны 805 нм, мощностью излучения 20 Вт в импульсно-периодическом режиме генерации с длительностью импульса и паузы по 0,05 с (р<0,05).

Результаты проведенного комплексного экспериментально-морфологического и термометрического исследования позволили сделать вывод о том, что оптимальными параметрами высокоинтенсивного лазерного излучения, используемого для выполнения рассечения паренхимы молочной железы экспериментальных животных являются: длина волны 805 нм и 970 нм; мощность излучения 20 Вт; импульсно-периодический режим генерации излучения с длительностью импульс/пауза 0,05/0,05с.

Сравнительный анализ возможностей использования лазерного излучения при оперативных вмешательствах основывался на оценке технических параметров операций и морфологических изменений в тканях молочной железы экспериментальных животных после резекций лазером, электроножом и скальпелем.

Резекции молочных желез опытной группы IIA с использованием лазерного излучения мощностью 20 Вт характеризовались быстротой выполнения этапа рассечения паренхиматозных тканей (1-2 мм/с) с одновременным адекватным гемостазом и умеренным обугливанием окружающих тканей молочных желез кроликов. В послеоперационном периоде отмечались признаки первичного заживления лазерных ран без развития осложнений. Послеоперационный рубец в паренхиматозных тканях и на коже молочной железы после лазерных резекций был тонкий, а на сроках наблюдения 30-х и 60-х суток - едва заметный.

Рассечение паренхимы молочных желез экспериментальных животных электроножом осуществлялось быстрее (2-3 мм/с), чем с помощью лазерного излучения. Одновременный гемостаз оказывался адекватным. Однако, степень обугливания тканей молочных желез, оцениваемая визуально при рассечении их электроножом, была выраженной. Заживление ран после резекций молочных желез отмечалось первичным натяжением.

Выполнение резекций молочных желез кроликов с применением скальпеля сопровождалось кровотечением из сосудов, что увеличивало длительность выполнения операций, обусловленную необходимостью проведения гемостаза и очищения раны от сгустков крови. Гемостаз в 100 % случаев осуществлялся с помощью вазолигирования. Заживление послеоперационных ран происходило первичным натяжением.

Следующим этапом исследования явился сравнительный анализ степени повреждения, характера тканевых реакций, особенностей процессов заживления с формированием рубцовых изменений тканей молочных желез, основанные на данных морфологического и морфометрического исследований тканевых срезов, полученных из области воздействия хирургического инструмента на фиксированных сроках наблюдения.

В зоне лазерного воздействия через 1 сутки при морфологическом исследовании обнаруживался лазерный канал, в обе стороны от которого располагались некротически измененные ткани. Канал был заполнен частицами ожогового струпа и вспененным экссудатом. Некротические изменения носили коагуляционный характер. Зона некротических изменений после воздействия лазерного излучения уже к 1-м суткам имела четкие границы с неповрежденными окружающими тканями и отграничивалась от них узким лейкоцитарным валом. Клетки ацинусов молочных желез демаркационной зоны были выстроены частоколом, секрет желез имел вид неправильных многогранных капель.

Область рассечения тканей молочных желез электроножом через 1 сутки была представлена каналом, стенки которого выполняли ткани, измененные по типу коагуляционного некроза. Дольки молочных желез в зоне некроза были представлены измененным эпителием в виде кариопикноза и кариолизиса. Сосуды демаркационной зоны содержали свежие и выщелоченные эритроциты. Клетки поврежденного эндотелия были увеличены в размерах, цитоплазма их была вакуолизирована. Эпителий выводных протоков обнаруживался в виде частокола, местами лизированный. Мелкие выводные протоки содержали коагулированный секрет. Клеточная реакция отграничения зоны некроза наблюдалась слабая.

К 3-м суткам во всех опытных группах наблюдалось увеличение протяженности некротических изменений и перифокального воспаления тканей молочной железы, представляя наименьшие значения при этом в тканях после резекции лазером, мощностью 20 Вт (опытная группа IIA). Зона некроза тканей после воздействия лазером четко отграничивалась лейкоцитарным валом от окружающих тканей. В зоне демаркационного воспаления наблюдался отек стромы, жировой ткани с резко расширенными сосудами. Среди отечной стромы отмечалось большое количество клеточных элементов - нейтрофилов, лимфоцитов, эозинофилов, эритроцитов. Структуры молочных желез были разрушены, ядра клеток ацинусов долек приобретали вытянутую, нитевидную форму. Ширина зоны некроза в тканях после резекции групп IIA, IIB и IIC на этом сроке достигала 182,4±1,3 мкм, 620,9±50,7 мкм и 1261,4±80,1мкм соответственно (p<0,05).

В области воздействия электроножом на 3 сутки зона некроза представляла однородные структуры розового цвета с содержанием клеточных элементов в виде редко расположенных гиперхромных фрагментов и контуров сосудов. По периферии некроза наблюдалась клеточная инфильтрация стромы преимущественно из нейтрофилов, кровоизлияния, венозное полнокровие, васкулиты, смешанные тромбы в сосудах.

Морфологические изменения тканей после резекций скальпелем характеризовалась наличием обширных кровоизлияний, венозным стазом. Зона повреждения после резекций скальпелем содержала нити фибрина, в клетках наблюдался кариорексис.

Наряду с увеличением ширины зоны некроза к 3-м суткам происходило нарастание выраженности клеточной плотности зоны демаркационного воспаления перифокальных тканей молочной железы лазером, скальпелем и электроножом.

Количество нейтрофилов демаркационной зоны тканей после резекций лазером к 3 суткам уменьшалась до 412,9±33,2 в 1 мм² в отличие от содержания нейтрофилов тканей после операций с использованием электроножа, инфильтрация которыми возрастала до 1534,2±51,6 в 1 мм², а с использованием скальпеля - до 1828,7±91,0 в 1 мм² (р<0,05) (табл. 3).

К 3-м суткам после рассечения тканей молочных желез электроножом и скальпелем в зоне демаркационного воспаления происходило возрастание инфильтрации нейтрофилами, макрофагами, эозинофилами, лимфоцитами, плазмоцитами.

К 7-м суткам отмечается резкое уменьшение размеров зоны некроза и выраженности воспалительных изменений в тканях после резекций молочных желез всех групп. Протяженность зоны некротических изменений в тканях после резекций молочных желез лазером на 7-е сутки составляла 153,1±14,1 мкм, электроножом- 367,±32,6 мкм, скальпелем - 464,2±76,7 мкм (p<0,05) (рис. 3).

Таблица 3 Клеточный состав демаркационной зоны тканей после резекций молочных желез кроликов, в 1 мм² (абс.)

Вид клеток	Сроки наблюдения	Лазерное излучение (n=30)	Электронож (n=30)	Скальпель (n=30)
Нейтрофилы	1 сутки	422,6±33,8* **	861,7±8,1**	1160,8±37,4
	3 сутки	412,9±33,2* **	1534,2±51,6**	1828,7±91,1
	7 сутки	166,2±17,3* **	605,3±26,7**	927±39,1
	14 сутки	14,8±2,4* **	284,3±8,2**	92,3±28,6
	30 сутки	0	2,3±2,1**	305±8,7
	60 сутки	0	0	0
Макрофаги	1 сутки	4,7±1,2**	2,7±1,2	2,2±0,9
	3 сутки	14,2±1,1* **	4,8±1,1	5,3±0,9
	7 сутки	12,3±2,3	11,7±4,1	9,1±2,1
	14 сутки	5,2±1,02* **	12±4,5	13,3±1,8
	30 сутки	0	4±1,5	6,0±1,1
	60 сутки	0	0	0,2±0,1
Эозинофилы	1 сутки	5,2±0,6* **	9,0±1,5**	15,5±1,9
	3 сутки	3,6±0,3* **	11,8±2,3	18,7±6,3
	7 сутки	2,3±0,6* **	7±0,6**	20,7±4,3
	14 сутки	1±0,01* **	4±1,1**	7±1,5
	30 сутки	0	1±0,01**	4,5±1,6
	60 сутки	0	0	0
Лимфоциты	1 сутки	22,6±2,7* **	42±2,5**	53,2±6,5
	3 сутки	37,9±3,6* **	71,2±6,6	63,7±5,9
	7 сутки	98,8±3,1* **	117,3±7,1**	134,7±4,8
	14 сутки	47,3±4,2* **	130,3±9,3**	150,7±24,9
	30 сутки	12±3,3* **	83,7±5,2**	119,8±7,1
	60 сутки	0	0,3±0,12	1,2±0,2
Плазмоциты	1 сутки	1,4±0,2* **	2,7±0,33**	4,0±0,9
	3 сутки	2,9±0,6* **	5,5±0,6	7,3±1,4
	7 сутки	3,5±0,5* **	6±0,6**	10,1±1,3
	14 сутки	2,9±0,9* **	10,7±3,1	13,7±1,8
	30 сутки	0	1,3±0,7	2,2±0,8
	60 сутки	0	0	0
Фибробласты	1 сутки	9,5±0,9* **	0,7±0,4	0,2±0,1
	3 сутки	62,1±3,6* **	12,2±2,3	10±1,7
	7 сутки	115,6±7,2* **	34,7±2,1	30,8±3,2
	14 сутки	118,3±3,2* **	146,3±12,3**	213,7±5,7
	30 сутки	95,4±5,8* **	182,7±32,2**	287,2±8,6
	60 сутки	51,9±3,1* **	161,7±11,7**	253,2±24,5

Примечание.n-количество экспериментальных операций с фиксированным сроком наблюдения

* Достоверность различий с показателями группы IIB (р<0,05). Использован t-критерий Стьюдента.

** Достоверность различий с показателями группы IIC (р<0,05). Использован t-критерий Cтьюдента.

Клеточная плотность перифокальной зоны в тканях после резекций снижалась к 7-м суткам и составляла 386,3±11,8 в 1 мм² (резекции лазером), 782±39,8 в 1 мм² (резекции электроножом) и 1132,5±41,1 в 1 мм² (резекции скальпелем) (p<0,05).

Инфильтрация нейтрофилами перифокальных тканей уменьшалась к 7-м суткам после резекций молочных желез лазером, электроножом и скальпелем. Содержание макрофагов демаркационной зоны после лазерного воздействия уменьшалось. Количественный состав макрофагов, лимфоцитов и плазмоцитов в перифокальной зоне тканей области рассечений электроножом и скальпелем продолжал нарастать.

а б

Рис. 3. Ширина некроза (а) и суммарное количество клеток воспалительного клеточного инфильтрата (б) перифокальной зоны тканей после резекций молочных желез кроликов.

При морфологическом исследовании тканей молочных желез на 7-е сутки после резекций лазером в проекции лазерного канала отмечалось появление грануляционной ткани с фуксинофильными пучками коллагеновых волокон, расположенных по ходу канала и вокруг ожоговых частиц. Начиная с 1-х суток, в тканях перифокальной зоны происходило нарастание количества фибробластов, к 7 суткам наблюдалось формирование слоя вертикальных сосудов и горизонтальных фибробластов.

В области воздействия электроножом и скальпелем на данном сроке наблюдения отмечалось появление грануляционной ткани, увеличение количества фибробластов и появление сосудов микроциркуляторного русла. В грануляционной ткани выявлялись фуксинофильные пучки коллагеновых волокон, что свидетельствовало о начале фиброзной трансформации. Грануляционная ткань зоны воздействия электроножом содержала макрофаги с пигментом, лимфоциты, фибробласты. По мере формирования зрелой соединительной ткани, возрастало количество фибробластов в тканях к 14 суткам после резекций молочных желез лазером до 118,3±3,2 в 1 мм², электроножом - 146,3±12,3 в 1 мм², скальпелем - 213,7±15,7 в 1 мм² (табл. 3).

Объемная плотность фуксинофильных, эластических и ретикулярных волокон в формирующейся соединительной ткани рубца после резекций молочных желез лазером увеличивалась к 14-м суткам. Резко уменьшалась инфильтрация нейтрофилами, макрофагами, лимфоцитами тканей в зонах формирования зрелой соединительной ткани. В проекции лазерного канала обнаруживалась соединительная ткань с извитыми выводными протоками, сохраненными дольками и ацинусами. В области лазерного воздействия среди зрелой соединительной ткани обнаруживались поля из сидерофагов, частиц бурого цвета, окруженных круглоклеточными элементами (лимфоциты, макрофаги, плазматические клетки) в небольшом количестве, фибробластами и фиброцитами.

В тканях области скальпельного рассечения формировалась соединительная ткань с малым количеством сосудов, возрастало количество фибробластов, увеличивалась плотность фуксинофильных волокон. Среди коллагеновых волокон обнаруживались очаговые инфильтраты из эозинофилов. В области рассечения тканей электроножом отмечалось наличие грануляционной ткани с расположенными в ней дольками и протоками, содержащими коагулированный секрет, и большого количества сидерофагов (макрофагов с пигментом бурого цвета), фибробластов.

В тканях молочных желез после резекций электроножом и скальпелем сохранялся воспалительно-клеточный компонент с увеличением к данному сроку количества макрофагов, лимфоцитов и плазмоцитов.

К 30-м суткам после резекций лазером в тканях продолжалось формирование послеоперационного рубца с образованием зрелой соединительной ткани с небольшим количеством клеточных элементов и параллельно ориентированными сосудами. Коллагеновые волокна соединительной ткани располагались параллельно проекции лазерного канала. Количество фибробластов и объемная плотность фуксинофильных волокон в зоне рубца снижалось до 95,4±5,8 в 1 мм² и 25,7±1,1% соответственно (табл. 3). Объемная плотность эластических волокон составляла 7,57±0,68%, ретикулярных волокон-15,2±1,73%.

После резекций молочных желез с использованием лазерного излучения в тканях продолжали резко снижаться макрофагальная, лимфоцитарная, плазмоцитарная инфильтрации на фоне полного исчезновения к этому сроку нейтрофильной инфильтрации. Следует отметить, что клеточный состав тканей после резекций лазером на сроке 30-и суток был представлен лимфоцитами и фибробластами, уровень которых составлял 12±3,3 в мм² и 95,4±5,8 в мм² соответственно (табл. 3). Дольки молочных желез были представлены ацинусами и протоками разного калибра, выстланные сосочками и содержащие небольшое количество секрета.

На 30-е сутки в области воздействия электроножом и скальпелем обнаруживалась зрелая соединительная ткань. Количество фибробластов продолжали нарастать, увеличивалась объемная плотность фуксинофильных волокон.

В формирующейся соединительной ткани области рубца после данных резекций уменьшалась инфильтрация нейтрофилами, эозинофилами, макрофагами, лимфоцитами и плазмоцитами. В просвете выводных протоков и желез обнаруживался секрет.

...