Характер изменений нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови под влиянием терагерцовых волн на частотах оксида азота 150,176-150,664 ГГц

Анализ закономерностей и механизмов влияния электромагнитного излучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц на нарушенные коагуляционные и фибринолитические свойства крови.

Рубрика Медицина
Вид автореферат
Язык русский
Дата добавления 06.08.2018
Размер файла 1,6 M

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

ХАРАКТЕР ИЗМЕНЕНИЙ НАРУШЕННЫХ КОАГУЛЯЦИОННЫХ И ФИБРИНОЛИТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ КРОВИ ПОД ВЛИЯНИЕМ ТЕРАГЕРЦОВЫХ ВОЛН НА ЧАСТОТАХ ОКСИДА АЗОТА 150,176-150,664 ГГЦ

03.00.13 - физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

ЦЫМБАЛ АЛЕКСАНДР АЛЕКСАНДРОВИЧ

Саратов 2007

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Саратовский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научный руководитель: заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор Киричук Вячеслав Федорович.

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Анищенко Татьяна Григорьевна;

доктор медицинских наук, профессор Пучиньян Даниил Миронович.

Ведущая организация - ГОУ ВПО «Российский государственный медицинский университет Росздрава»

Защита состоится “____”_____________________2007 г. в _____часов на заседании диссертационного совета Д. 208.094.03 при ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ Росздрава» по адресу: 410012, Саратов, Б.Казачья, 112.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ Росздрава».

Автореферат разослан “____”_________________ 2007г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

кандидат медицинских наук, доцент Бабиченко Н.Е.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИССЛЕДОВАНИЯ

Актуальность работы

Высокий уровень сердечно-сосудистых заболеваний, в частности, ИБС, нестабильной стенокардии, инфаркта миокарда и непрекращающийся их рост - одна из характерных особенностей современного общества, а совершенствование методов лечения и реабилитации больных ИБС продолжает оставаться одним из чрезвычайно актуальных аспектов практического здравоохранения, поскольку данная патология по-прежнему лидирует среди основных причин смертности взрослого творчески активного, работоспособного населения Российской Федерации [Оганов Р.Г., 1993; Тожиев М.С., Шестов Д.Б., Воробьев В.И., 2000].

В возникновении перечисленных и многих других форм патологии человека важную роль играет чрезмерная по интенсивности или длительности стрессорная реакция, вызванная различными факторами окружающей среды [Селье Г., 1979; Меерсон Ф.З., 1986; Тигранян Р.А., 1990; Судаков К.В., 1992; Толянина В.Г., 1997].

В исследованиях, проводимых в последние годы, показана эффективность многофакторной профилактики ИБС, касающаяся снижения уровней факторов риска и смертности от данного заболевания [Чазов Е.И., 1997]. Современное медикаментозное лечение больных с заболеваниями органов кровообращения способно благоприятно влиять на выживаемость определенных групп больных и улучшать качество их жизни [Амосова Е.Н., 1998; Руксин В.В., 2003]. Вместе с тем, использование лекарственных препаратов, наряду с желаемым эффектом, нередко сопровождается развитием тяжелых побочных и аллергических реакций, требует тщательного лабораторного и клинического контроля во время применения [Steptol A., 1993].

Таким образом, очевидна необходимость совершенствования методов лечения пациентов с патологией органов системы кровообращения и поиска новых альтернативных терапевтических подходов.

В последние годы значительно расширен арсенал физиотерапевтических методов лечения болезней сердечно-сосудистой системы за счет новых физических факторов, ранее не применявшихся в кардиологической практике. Анализ данных литературы и клинические наблюдения свидетельствуют о том, что низкоинтенсивные ММ- волны эффективны при многих хронических заболеваниях как в качестве монотерапии, так и в комбинации с медикаментозными средствами, усиливая и закрепляя лечебное действие последних [Девятков Н.Д., Бецкий О.В., 1985; Головачева Т.В., 1991; Девятков Н.Д., Голанд Н.Б., Бецкий О.В., 1991; Родштат И.В., 1991; Киричук В.Ф., Головачева Т.В., Чиж А.Г., 1999; Паршина С.С., Киричук В.Ф., Головачева Т.В. и др., 2004].

В настоящее время исследуются вопросы взаимодействия биологических объектов с более широким диапазоном низкоинтенсивных ММ-волн. Низкоинтенсивное ЭМИ терагерцового диапазона частот все больше обращает на себя внимание, поскольку в этом диапазоне сосредоточены частотные спектры излучения и поглощения важнейших активных клеточных метаболитов (NO, O2, СО2, СО, ОН- и др.) [Rothman L.S., Barbe A., Chris Benner D. et. аl., 2003].

Совершенно закономерно, что наибольший интерес в экспериментальной науке и клинической медицине вызывают электромагнитные волны терагерцового диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц, поскольку оксид азота является одним из важнейших биологических медиаторов, вовлеченный во множество физиологических и патофизиологических процессов [Iggnaro L.G., 1990; Murray J., 1991; Furchgot R.F., Jothianandan D., 1991; Snуder S.H., Bredt D.S., 1992; Murad F., 2003].

Цель исследования

Изучить закономерности и механизмы влияния электромагнитного излучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения (МСИП) оксида азота 150,176-150,664 ГГц на нарушенные коагуляционные и фибринолитические свойства крови белых крыс, находящихся в состоянии иммобилизационного стресса, разработать оптимальные режимы терагерцового облучения, при которых наблюдается максимальная нормализация нарушенных показателей коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза.

Задачи исследования

1. Установить нарушения коагуляционного потенциала и фибринолитических свойств крови крыс обоего пола, находящихся в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса.

2. Изучить влияние ЭМИ терагерцового диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в непрерывном режиме в течение 30 минут на процессы гемокоагуляции и фибринолитический потенциал крови интактных крыс- самцов.

3. Исследовать и выявить наиболее эффективное влияние ЭМИ терагерцового диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на процессы свертывания крови и фибринолиз белых крыс-самцов, находящихся в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса, в зависимости от времени и режима облучения.

4. Провести сравнительный анализ непрерывного и дробного режимов терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на показатели коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза белых крыс- самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса. кровь азот электромагнитный излучение

5. Сопоставить влияние предварительного и последующего терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на показатели коагуляционной и фибринолитической активности крови белых крыс- самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса.

6. Изучить и выявить наиболее эффективное влияние ЭМИ терагерцового диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на показатели гемокоагуляции и фибринолиза белых крыс-самок, находящихся в одной из двух фаз эстрального цикла Dioestrus и Oestrus, при остром иммобилизационном стрессе в зависимости от режима облучения.

7. Изучить особенности влияния предварительного 15-минутного непрерывного ЭМИ терагерцового диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на концентрацию стресс-реализующего гормона кортикостерона в крови крыс-самцов, находящихся в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса.

Научная новизна

Впервые показано, что при остром и хроническом иммобилизационном стрессе у крыс-самцов и крыс-самок, находящихся в одной из двух фаз эстрального цикла Dioestrus или Oestrus наблюдаются нарушения коагуляционных и фибринолитических свойств крови. Белые крысы - самки реагируют на острый иммобилизационный стресс не одинаково в зависимости от фазы эстрального цикла: в фазе Dioestrus они менее чувствительны к стрессорному фактору, чем в фазе Oestrus.

Воздействие ТГЧ-облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в непрерывном режиме в течение 30 минут на интактных животных не вызывает изменений в прокоагулянтной, антикоагулянтной и фибринолитической активности крови крыс- самцов.

ТГЧ-облучение на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц частично или полностью нормализует нарушения в коагуляционной и фибринолитической активности крови у стрессированных белых крыс-самцов в зависимости от времени и режима облучения.

Впервые установлено, что при облучении животных в непрерывном режиме на фоне острого иммобилизационного стресса наиболее эффективным является 30 минутный режим воздействия. Предварительное облучение животных до действия стрессора в непрерывном режиме предупреждает развитие нарушений в различных фазах процесса свертывания крови и фибринолиза при 15-минутном облучении. При дробном режиме облучения животных на фоне острого иммобилизационного стресса происходит полное восстановление исследуемых показателей коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза при 15-минутном ТГЧ - воздействии на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц. Ежедневное предварительное ТГЧ - облучение в непрерывном режиме в течение 30 минут крыс-самцов, находящихся в состоянии хронического иммобилизационного стресса, полностью предупреждает нарушения в системе свертывания крови и фибринолизе.

Сравнительный анализ влияния непрерывного и дробного режимов терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на показатели коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза крови белых крыс-самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, показал, что при 15-минутном ТГЧ - воздействии в дробном режиме наблюдалась полная нормализация нарушенных показателей гемокоагуляции и фибринолитической активности крови. Непрерывный режим облучения в том же временном пределе показал лишь частичное восстановление показателей коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза.

Влияние предварительного и последующего терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на показатели коагуляционной и фибринолитической активности крови белых крыс-самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса неоднозначно. Впервые показано, что предварительное непрерывное облучение стрессированных животных в течение 15 минут полностью предотвращает развитие нарушений в коагуляционном звене системы гемостаза и фибринолизе. Непрерывный режим облучения на фоне развившегося иммобилизационного стресса в том же временном пределе оказывает лишь частичное восстановление показателей коагуляционной активности крови и фибринолитического потенциала.

Впервые обнаружены особенности влияния ЭМИ ТГЧ-диапазона на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц на коагуляционное звено системы гемостаза и фибринолиз белых крыс-самок, находящихся в одной из двух фаз эстрального цикла Dioestrus и Oestrus, при остром иммобилизационном стрессе в зависимости от режима облучения. Показано, что предварительное облучение крыс-самок в непрерывном режиме ТГЧ-волнами на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут, до действия стрессорного агента, полностью предупреждает развитие нарушений коагуляционного потенциала крови и показателей фибринолиза не зависимо от фазы эстрального цикла. Дробное ТГЧ-облучение на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в той же временной экспозиции на фоне острого иммобилизационного стресса оказывает только частичное восстановление показателей коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза у крыс-самок в фазах Dioestrus и Oestrus эстрального цикла.

Показано, что наиболее эффективным в восстановлении нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови у крыс-самок в фазах Dioestrus и Oestrus эстрального цикла является превентивный непрерывный режим ТГЧ - облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут.

Предварительное непрерывное 15-минутное воздействие ЭМИ ТГЧ на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц ограничивает развитие острой и хронической стресс-реакции за счет уменьшения выделения глюкокортикоидов, в частности кортикостерона, корой надпочечников. Данный факт служит доказательством антистрессорного эффекта ЭМИ данного диапазона частот.

Практическая значимость

Доказано отсутствие изменений в коагуляционной и фибринолитической активности крови интактных крыс-самцов под влиянием ЭМИ ТГЧ на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц, что подтверждает безопасность ТГЧ-воздействия на указанных частотах на здоровых животных.

Получены новые данные о характере воздействия ТГЧ-волн на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на нарушенные коагуляционные и фибринолитические свойства крови белых крыс, показаны половые особенности в реакциях коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза в зависимости от времени и режима ТГЧ-облучения.

Доказан более выраженный нормализующий эффект дробного и непрерывного предварительного ТГЧ-облучений на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в восстановлении нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови экспериментальных животных.

Полученные данные являются экспериментальным обоснованием возможности применения различных режимов ТГЧ-облучения в клинической практике для нормализации нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови у пациентов с учетом половых различий.

Работа является фрагментом отраслевой научно-исследовательской программы № 9: «Этиопатогенез, диагностика и лечение заболеваний крови» на тему: «Исследование влияния на сложные биологические системы электромагнитных колебаний на частотах молекулярных спектров излучения и поглощения веществ, участвующих в метаболических процессах» (договор № 005/037/002 от 25 сентября 2001 года с МЗ РФ).

Основные положения, выносимые на защиту

1. Острый и хронический иммобилизационный стресс у белых крыс обоего пола сопровождается нарушениями коагуляционных и фибринолитических свойств крови. При остром иммобилизационном стрессе наблюдаются гиперкоагуляционные изменения в процессе свертывания крови и угнетение фибринолитической активности крови. При хроническом иммобилизационном стрессе обнаружены развитие коагулопатии потребления и значительная активация фибринолитического процесса, характерные для диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови.

2. Непрерывное облучение ЭМИ ТГЧ - диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 30 минут не оказывает влияния на коагуляционное звено системы гемостаза и фибринолитическую активность крови интактных крыс - самцов.

3. Влияние ЭМИ ТГЧ - диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на коагуляционное звено системы гемостаза и фибринолиз белых крыс-самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, зависит от времени и режима облучения. При непрерывном облучении стрессированных животных наиболее эффективным в восстановлении нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови является 30-минутный режим воздействия. Превентивное облучение в непрерывном режиме до действия стрессора предупреждает развитие нарушений в исследуемых показателях свертывания крови и фибринолиза при 15-минутном облучении. При дробном режиме облучения стрессированных животных происходит полное восстановление показателей системы коагуляционного гемостаза и фибринолиза при 15-минутном ТГЧ - воздействии. Предварительное непрерывное ТГЧ - облучение в течение 30 минут крыс-самцов, находящихся в состоянии хронического иммобилизационного стресса, предотвращает развитие нарушений в коагуляционном звене системы гемостаза и фибринолизе.

4. При сравнении влияний непрерывного и дробного режимов ТГЧ-облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на коагуляционные и фибринолитические свойства крови белых крыс-самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, обнаружено, что дробный режим облучения в течение 15 минут более эффективен в восстановлении нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови животных, нежели в том же временном пределе непрерывное ТГЧ - облучение.

5. Сравнительный анализ влияний предварительного и последующего терагерцового облучений на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на нарушенные показатели коагуляционной и фибринолитической активности крови белых крыс-самцов показал, что предварительное непрерывное облучение животных в течение 15 минут более эффективно предупреждает постстрессовые нарушения в системе гемостаза и фибринолиза по сравнению с аналогичным временным режимом на фоне развившегося острого иммобилизационного стресса.

6. Влияние ЭМИ ТГЧ - диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на коагуляционные и фибринолитические свойства крови белых крыс-самок, находящихся в одной из двух фаз эстрального цикла Dioestrus и Oestrus, в состоянии острого иммобилизационного стресса зависит от режима облучения: предварительное непрерывное облучение перед развившимся острым иммобилизационным стрессом в течение 15 минут полностью предупреждает нарушения в коагуляционном звене системы гемостаза и фибринолизе; дробное ТГЧ-облучение в течение 15 минут на фоне острого иммобилизационного стресса вызывает частичное восстановление коагуляционной и фибринолитической активности крови облученных крыс-самок.

7. Ограничение развития острой и хронической стресс-реакции у крыс-самцов за счет уменьшения выделения глюкокортикоидов, в частности, кортикостерона, корой надпочечников обусловлено воздействием предварительного непрерывного 15-минутного ЭМИ терагерцового диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц.

Внедрение

Полученные результаты используются в процессе преподавания на кафедре нормальной физиологии ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ Росздрава».

Апробация диссертации

Основные положения работы доложены на второй международной конференции «Патофизиология и современная медицина» (Москва, 2004); на 65 - юбилейной научно-практической конференции студентов и молодых ученых СГМУ «Молодые ученые - здравоохранению региона» (Саратов, 2004); на 2-й Всероссийской конференции с международным участием «Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии» (Москва, 2005); на 66-й научно-практической конференции студентов и молодых специалистов СГМУ «Молодые ученые - здравоохранению региона» (Саратов, 2005); на 1-м съезде физиологов СНГ (Сочи, 2005); на международной конференции «Гемореология в микро- и макроциркуляции» (Ярославль, 2005); на Всероссийской конференции «Тромбозы, геморрагии, ДВС-синдром» (Ярославль, 2005); на 2-й Всероссийской конференции с международным участием «Микроциркуляция в клинической практике» (Москва, 2006); на межрегиональной научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежь и наука: итоги и перспективы» (Саратов, 2006); на 7-й Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» (Москва, 2006); на 3-й Всероссийской конференции с международным участием «Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии» (Москва, 2007); на 14-м Российском симпозиуме с международным участием «Миллиметровые волны в медицине и биологии» (Москва, 2007); на 65-й юбилейной научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины» (Волгоград, 2007); на межрегиональной конференции, посвященной 150-летию первого ректора Императорского Саратовского университета В.И. Разумовского «Аспирантские чтения» (Саратов, 2007).

По результатам диссертационного исследования опубликовано 27 работ, в том числе в 8 реферируемых журналах; выдан 1 патент на изобретение.

Получен диплом на IV конкурсе научно-практических работ молодых ученых «Диагностика, профилактика и терапия гемокоагуляционных и гемореологических нарушений» за актуальность, оригинальность, научную новизну и практическую значимость выполненного исследования (Москва, 2007).

Объем и структура диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследования, 2 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, включающего 223 отечественных и 102 зарубежных источника. Текст диссертации изложен на 212 страницах, содержит 37 таблиц, 15 рисунков.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объекты исследования

Исследованы образцы плазмы крови 260 беспородных крыс-самцов и 120 беспородных крыс-самок массой 180-220 г. Нарушения в системах гемостаза и фибринолиза моделировали иммобилизационным стрессом [Антонов А.М., Беликина Н.В., Георгиева С.А. и др., 1964]: острый стресс - жесткая фиксация крыс на спине в течение 3 часов, хронический - в течение 5 дней по 3 часа ежедневно.

Исследования проводились в следующих группах животных:

? Самцы: 1 группа интактные животные (n=15) - группа контроля; 2 группа - животные в состоянии острого иммобилизационного стресса (n=15); 3 группа - интактные животные, подвергнутые ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 30 минут (n=15); 4 группа - животные, подвергнутые ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на фоне острого иммобилизационного стресса в течение 5, 15 и 30 минут (n=45); 5 группа - животные, подвергнутые предварительному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота до действия стрессора в течение 5, 15 и 30 минут (n=45); 6 группа - животные, подвергнутые дробному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота, на фоне развившегося острого иммобилизационного стресса в течение 5, 15 и 30 минут (n=45); 7 группа - животные в состоянии хронического иммобилизационного стресса (n=15); 8 группа - животные в состоянии хронического иммобилизационного стресса, подвергнутые предварительному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 30 минут (n=15); 9 группа - интактные животные, у которых определялась в крови концентрация кортикостерона (n=10); 10 группа - животные в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса, у которых в крови определялась концентрация кортикостерона (n=20); 11 группа - остро и хронически стрессированные животные, подвергнутые предварительному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц, у которых в крови исследовали концентрацию кортикостерона (n=20).

? Самки: 1 группа - интактные самки в фазе Dioestrus и Oestrus эстрального цикла (n=30); 2 группа - самки в фазе Dioestrus и Oestrus, подвергнутые острому иммобилизационному стрессу (n=30); 3 группа - самки в фазе Dioestrus и Oestrus в состоянии острого иммобилизационного стресса, подвергнутые предварительному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут (n=30); 4 группа - самки в фазе Dioestrus и Oestrus эстрального цикла в состоянии острого иммобилизационного стресса, подвергнутые дробному ТГЧ - облучению на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут (n=30).

Облучение экспериментальных животных проводилось электромагнитными волнами на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на предварительно выбритый участок кожи площадью 3 см над областью мечевидного отростка грудины. Мощность излучения генератора составляла 0,7мВт, а плотность мощности, падающей на участок кожи, равнялась 0,2 мВт/см2. Продолжительность однократного облучения составляла 5, 15 и 30 минут.

Для облучения животных использовался медицинский аппарат “КВЧ-NO”, разработанный в МТА КВЧ (г. Москва) совместно с ФГУП «НПП-Исток» (г.Фрязино) и ОАО ЦНИИИА (г.Саратов).

Все животные при проведении экспериментов находились в одинаковых условиях. Для устранения влияния сезонной и циркадной зависимости на систему гемостаза эксперименты с животными осуществлялись в осенне-зимний период в первой половине дня.

Забор крови у экспериментальных животных для исследования состояния коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза осуществляли путем пункции сердца одноразовым шприцем в пластиковые пробирки. В качестве стабилизатора крови использовался 3,8%-ный раствор цитрата натрия в соотношении 9:1.

Эксперименты на животных проводились в соответствии с требованиями Женевской конвенции «International Guiding principles for Biomedical Research Involving Animals» (Geneva, 1990).

Методы исследования

Состояние коагуляционного звена системы гемостаза исследовали с помощью серии тестов, выполненных на гемокоагулометре CGL 2110 «Solar» (Республика Беларусь, г. Минск) с использованием реактивов фирмы НПО “РЕНАМ” (г. Москва, Россия).

Основными исследованными показателями, характеризующими коагуляционное звено системы гемостаза у экспериментальных животных, являлись: активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ); протромбиновое время; международное нормализованное отношение (МНО); тромбиновое время; концентрация фибриногена; активность фактора XIII в плазме крови (Баркаган З.С., Момот А.П., 1999).

Антикоагулянтные свойства крови у экспериментальных животных исследовали путем определения активности естественного антикоагулянта антитромбина III и системы протеина С (Баркаган З.С., Момот А.П., 1999).

Состояние фибринолитической активности крови у экспериментальных животных оценивали путем определения Хагеман-зависимого фибринолиза; индуцированного стрептокиназой эуглобулинового фибринолиза; вычисления индекса резерва плазминогена (Баркаган З.С., Момот А.П., 1999); концентрации ранних продуктов деградации фибриногена и растворимых фибрин-мономерных комплексов РФМК-тестом (Елыкомов В.А., Момот А.П., 1987) и тестом склеивания стафилококков (Момот А.П., Лычев В.Г., 1988).

Определение концентрации кортикостерона в сыворотке крови у экспериментальных животных производили утром в одно и то же время методом конкурентного иммуноферментного анализа с применением моноклональных антител (Шаляпина В.Г., Нарбаев Б.Н., 1999).

Статистическая обработка полученных данных проводилась при помощи непараметрического метода U - критерия теста Mann-Whitney (пакет программ Statistica 6.0.).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Изменения коагуляционных и фибринолитических свойств крови у белых крыс, находящихся в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса, и интактных животных под влиянием терагерцового облучения

У крыс-самцов и крыс-самок в фазе Dioestrus эстрального цикла, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, выявлены гиперкоагуляционные изменения в системе гемостаза, снижение антикоагулянтных свойств крови и угнетение фибринолиза. У крыс-самок в фазе Oestrus, подвергшихся острому иммобилизационному стрессу показатели, характеризующие коагуляционную, антикоагулянтную и фибринолитическую активность крови, выражены значительнее, чем у стрессированных самок в фазе Dioestrus. У крыс-самцов в условиях хронического стресса выявлены развитие коагулопатии потребления и активация фибринолитического процесса, обнаружено значительное количество ранних продуктов деградации фибриногена и растворимых фибрин-мономерных комплексов, характерных для внутрисосудистого тромбообразования.

Воздействие ТГЧ-облучения на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в непрерывном режиме в течение 30 минут на интактных животных не вызывает изменений в прокоагулянтной, антикоагулянтной и фибринолитической активности крови крыс- самцов, о чем свидетельствует отсутствие статистически достоверных отличий между группами интактных и облученными животными.

2. Коагуляционные и фибринолитические свойства крови у крыс-самцов, находящихся в состоянии острого стресса, и их изменения при непрерывном режиме облучения терагерцовыми волнами на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц

Воздействие непрерывного ТГЧ-облучения на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 5 минут на животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, не вызывает изменений в свертывании крови и фибринолизе. Об этом свидетельствует отсутствие статистически достоверных различий показателей коагуляционного потенциала, антикоагулянтной и фибринолитической активности крови облученных животных по сравнению с данными группы животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса.

Анализ результатов исследования фибринолитической активности крови и её коагуляционных свойств у животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса и подвергшихся воздействию ТГЧ-облучения на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут, показал частичное восстановление показателей антикоагулянтного (рис.1) фибринолитического потенциалов крови и течения всех фаз коагуляционного каскада. Однако при этом отмечалась нормализация протромбинового и тромбинового времени, эуглобулинового фибринолиза, индуцированного стрептокиназой, индекса резерва плазминогена, так как отсутствовало статистически достоверное различие в этих показателях по сравнению с данными группы контрольных животных.

При непрерывном 30-минутном облучении животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, ТГЧ-электромагнитным полем на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц наблюдалось полное восстановление измененных показателей гемокоагуляции, антикоагулянтной активности крови (рис.1) и фибринолиза, что подтверждалось отсутствием статистически достоверных их различий по сравнению с данными группы контроля.

Антитромбин III Протеин С

Рис. 1 Изменения антикоагулянтной активности крови у крыс-самцов под воздействием непрерывного 15 - и 30-минутного облучения ТГЧ - волнами на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц на фоне острого стресса

Примечание: *- статистически достоверно, по сравнению с группой контроля; # - статистически достоверно по сравнению с группой животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса.

1 гр. - интактные животные; 2 гр.- животные в состоянии иммобилизационного стресса;

3 гр. - животные, облученные в течение 15 минут на фоне иммобилизационного стресса;

4 гр. - животные, облученные в течение 30 минут на фоне иммобилизационного стресса.

3. Влияние предварительного непрерывного терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на коагуляционные и фибринолитические свойства крови крыс-самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса

Предшествующее стрессу ТГЧ-облучение животных в течение 5 минут на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц приводит к менее выраженному нарушению функциональной активности коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза, чем у животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса без предварительного непрерывного ТГЧ-облучения. Это выражается в статистически достоверном различии таких показателей коагуляционного каскада, как АЧТВ, тромбиновое время, Хагеман-зависимый эуглобулиновый фибринолиз, индекс резерва плазминогена. При этом не выявлено статистически значимых отличий в остальных показателях коагуляционного каскада, антикоагулянтной (рис. 2) и фибринолитической активности крови у животных, подвергнутых предварительному ТГЧ-облучению, по сравнению с группой стрессированных животных.

Антитромбин III Протеин С

Рис. 2 Изменения антикоагулянтной активности крови у крыс-самцов под воздействием непрерывного предварительного 5-минутного облучения ТГЧ - волнами на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц до действия стрессора

Примечание: *- статистически достоверно по сравнению с группой контроля; 1 гр. - интактные животные;

2 гр. - животные в состоянии иммобилизационного стресса; 3 гр. - животные, облученные в течение 5 минут на фоне иммобилизационного стресса.

Предшествующее острому иммобилизационному стрессу у крыс-самцов воздействие ТГЧ-облучения на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут полностью предотвращает развитие нарушений в системе коагуляционного звена гемостаза и фибринолитической активности крови животных, так как все показатели, характеризующие коагуляционный каскад, антикоагулянтную активность, фибринолитический потенциал крови у облученных животных статистически достоверно не отличались от показателей группы интактных животных.

Предварительное ТГЧ-облучение на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 30 минут также полностью предотвращает развитие гиперкоагуляционных изменений при остром иммобилизационном стрессе, что подтверждается отсутствием статистически достоверных отличий между группами интактных животных и животных, подвергнутых ТГЧ-облучению на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 30 минут.

Сравнительный анализ предварительного и последующего режимов ТГЧ-облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц, показал, что они неоднозначны. При 5-минутной временной экспозиции электромагнитных волн более эффективным является предварительное ТГЧ-облучение. Воздействие 15-минутного ТГЧ-облучения на фоне развившегося острого иммобилизационного стресса приводит к частичному восстановлению нарушенной функциональной активности системы гемокоагуляции и фибринолитической активности крови, а предварительное ТГЧ-облучение полностью предотвращает развитие нарушений в системе коагуляционного гемостаза и фибринолиза.

Следовательно, предварительное ТГЧ-облучение на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 15-минут обладает более выраженным эффектом на внутрисосудистый компонент микроциркуляции по сравнению с таким же временным облучением на фоне развившегося острого иммобилизационного стресса.

Воздействие 30-минутной экспозиции электромагнитных волн ТГЧ- диапазона на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц на животных с развившимся иммобилизационным стрессом приводит к полной нормализации показателей функциональной активности системы свертывания крови и фибринолиза, а предшествующее стрессу- полностью предотвращает развитие патологических изменений в механизмах гемокоагуляции и фибринолитической активности крови. Эффективность влияния обоих режимов ТГЧ-облучения на процессы гемокоагуляции и фибринолиза у экспериментальных животных одинакова, поскольку отсутствует статистически значимая разница в их показателях между группами облученных животных.

4. Воздействие дробного режима терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота на коагуляционные и фибринолитические свойства крови крыс-самцов, находящихся в состоянии острого стресса

Облучение животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, ТГЧ-волнами в дробном режиме в течение 5 минут не вызывало изменений исследуемых показателей коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза. Об этом свидетельствует отсутствие статистически достоверных различий показателей прокоагулянтной, антикоагулянтной и фибринолитической активности крови облученных животных по сравнению с данными группы животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса.

При облучении животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, ТГЧ - волнами в дробном режиме в течение 15 и 30 минут не наблюдалось статистически достоверных различий всех изучаемых показателей системы свертывания крови и фибринолиза по сравнению с группой интактных животных, то есть происходило полное восстановление нарушенных прокоагулянтных, антикоагулянтных (рис. 3) и фибринолитических свойств крови.

Рис. 3 Изменения антикоагулянтной активности крови у крыс-самцов под воздействием дробного 15 - и 30-минутного облучения ТГЧ - волнами на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц на фоне острого иммобилизационного стресса

Сравнительный анализ дробного и непрерывного режимов ТГЧ-облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц, показал, что они неоднозначны. Так, при 5-минутном непрерывном режиме облучения животных на фоне стрессорного воздействия не наблюдалось восстанавливающего эффекта в отношении показателей, характеризующих коагуляционное звено системы гемостаза и фибринолиз. Дробный режим ТГЧ-облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 5 минут также не продемонстрировал нормализующего влияния на показатели системы свертывания крови и фибринолиза.

При 15-минутном ТГЧ-воздействии в непрерывном режиме наблюдалась частичная положительная динамика в отношении нарушенных показателей гемокоагуляции и фибринолитической активности крови. Дробный режим облучения в том же временном интервале показал полное восстановление нарушенных показателей коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза, вызванных действием стрессорного фактора.

При облучении животных в течение 30 минут дробным режимом ТГЧ-волнами на частотах МСИП оксида азота на фоне действия стрессорного агента, выявлено полное восстановление нарушенных показателей фибринолитической активности крови и гемокоагуляции. Аналогичные результаты наблюдались и при непрерывном ТГЧ-излучении на фоне стресса в той же временной экспозиции.

5. Влияние терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на нарушенные коагуляционные и фибринолитические свойства крови крыс-самцов, вызванных хроническим стрессом

При ежедневном 30-минутном облучении животных, находящихся в состоянии хронического иммобилизационного стресса, ТГЧ-электромагнитным полем на частотах МСИП оксида азота наблюдалось полное восстановление измененных показателей системы свертывания крови, в том числе ее антикоагулянтной активности (рис.4) и фибринолиза. Это подтверждается отсутствием статистически достоверных различий исследованных показателей гемокоагуляции и фибринолиза по сравнению с данными группы контроля.

Рис. 4 Изменения антикоагулянтных свойств крови у крыс-самцов под воздействием непрерывного предварительного 30-минутного облучения ТГЧ - волнами на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц при хроническом стрессе

Примечание: *- статистически достоверно по сравнению с группой контроля; 1 гр. - интактные животные; 2 гр. - животные в состоянии иммобилизационного стресса; 3 гр. - животные, предварительно облученные в течение 30 минут до действия стрессора.

6. Антистрессорное действие терагерцового излучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц

Для оценки антистрессорного действия терагерцового излучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц были проведены серии экспериментов, в которых оценивалась динамика концентрации гормона коры надпочечников - кортикостерона в условиях острого и хронического стресса до и после воздействия указанными электромагнитными волнами.

В результате проведения экспериментов обнаружено, что концентрация кортикостерона у интактных животных составила 41,3 нмоль/л. У крыс, находящихся в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса, повышалась функциональная активность коры надпочечников. Это сопровождалось статистически достоверным по сравнению с группой контроля увеличением концентрации кортикостерона в сыворотке крови. Так, в условиях острого стресса она возрастала практически в 12 раз (до 493,5 нмоль/л), в условиях хронического стресса - в 7 раз (до 287,5 нмоль/л) (табл. 1).

Воздействие ТГЧ-излучения на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота в течение 15 минут вызывало снижение повышенной функциональной активности коры надпочечников, что выражалось в уменьшении уровня кортикостерона в сыворотке крови у животных, при остром стрессе - в 3,7 раз (до 132,3 нмоль/л), а при хроническом - в 1,8 раза (до 153,0 нмоль/л).

Таблица 1

Влияние 15-минутного непрерывного предварительного электромагнитного излучения терагерцового диапазона МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на концентрацию кортикостерона крови у крыс-самцов

Показатели

Интактные животные

(n = 10)

Животные, находящиеся в состоянии

Предварительное облучение в течение

15 минут на фоне

острого стресса

(n = 10)

хронического

стресса

(n = 10)

острого стресса

(n=10)

хронического стресса

(n=10)

Кортикостерон, нмоль/л

41,3

(35,0; 48,0)

493,5

(320; 680,0)

P1 =0,005

287,5

(45,0; 600,0)

P1 =0,021

P2 =0,173

132,3

(45,0; 210,0)

P1=0,045

Р2=0,011

153,0

(35,0; 240,0)

P1=1,730

P3=0,325

Примечание: в каждом случае приведены средняя величина (медиана), нижний и верхний квартили (25%; 75%) из соответствующего числа измерений;

P1 - по сравнению с группой интактных животных;

P2 - по сравнению с группой животных, подвергнутых острому стрессу;

P3 - по сравнению с группой животных, подвергнутых хроническому стрессу.

Таким образом, предварительное 15-минутное воздействие электромагнитным излучением терагерцового диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц лимитирует развитие стрессорных реакций, обусловленных, повышенной секрецией глюкокортикоидов корой надпочечников, вызывающих гиперкоагуляцию крови, и тем самым предотвращает развитие изменений в коагуляционном звене системы гемостаза и фибринолизе.

7. Коагуляционные и фибринолитические свойства крови у крыс-самок, находящихся в состоянии острого стресса, и их динамика при непрерывном предварительном режиме облучения терагерцовыми волнами на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц

При предварительном непрерывном режиме ТГЧ-облучения в течение 15 минут отмечалось отсутствие постстрессовых изменений во всех изучаемых показателях коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза у крыс- самок в фазе Dioestrus, так как разница в их величине по сравнению с данными группы интактных животных статистически недостоверна.

Воздействие предварительного непрерывного ТГЧ-излучения на указанных частотах в течение 15 минут на самок в фазе Oestrus в состоянии острого иммобилизационного стресса также вызывало полное отсутствие постстрессовых сдвигов в исследуемых показателях гемостаза. Об этом свидетельствовало отсутствие статистически достоверных различий в показателях коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза (табл. 2) крови по сравнению с данными группы контрольных животных.

Таблица 2

Изменение фибринолитической активности крови у крыс-самок в фазе Dioestrus под воздействием непрерывного предварительного 15-минутного облучения ТГЧ - волнами на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц до действия стрессора

Показатели

Самки в фазе Dioestrus

Интактные самки

(n = 15)

Острый

иммобилизационный стресс

(n = 15)

Животные,

облученные

в течение

15 минут

до действия стрессора

(n = 15)

XIIа - калликреин-зависимый фибринолиз, мин

15,0

(11,0; 20,2)

20,1

(12,0; 25,7)

P1=0,01

14,0

(10,1; 19,2)

P1=0,355

P2=0,01

Индуцированный стрептокиназой эуглобулиновый фибринолиз, с

125,0

(90,0; 150,0)

145,0

(111,0; 155,5)

P1=0,01

127,0

(100,0;140,0)

P1=0,819

P2=0,01

Индекс резерва плазминогена, %

68,2

(55,0; 75,2)

55,7

(50,0; 71,2)

P1=0,010

65,5

(54,2; 77,0)

P1=0,067

P2=0,013

8. Изменения коагуляционных и фибринолитических свойств крови у крыс-самок, находящихся в состоянии острого стресса, при дробном режиме облучения терагерцовыми волнами на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц

При дробном режиме облучения в течение 15 минут крыс-самок в фазе Dioestrus эстрального цикла, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, наблюдается частичное восстановление показателей, характеризующих коагуляционную активность крови и фибринолиз. Так, тромбиновое время, концентрация фибриногена, активность антитромбина III и протеина С, индуцированный стрептокиназой эуглобулиновый фибринолиз и индекс резерва плазминогена статистически достоверно отличались от группы контрольных животных. В то время такие показатели, как АЧТВ, протромбиновое время, МНО, активность XIII фактора, Хагеман-зависимый фибринолиз и концентрация растворимых фибрин-мономерных комплексов, соответствовали данным группы контрольных животных.

При облучении крыс-самок в фазе Oestrus, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, ТГЧ - волнами в дробном режиме в течение 15 минут наблюдались статистически достоверные различия в показателях, характеризующих коагуляционную активность крови (табл. 3) - активированном частичном тромбопластиновом времени, концентрации фибриногена; фибринолитическую активность крови- Хагеман-зависимом эуглобулиновом фибринолизе и индексе резерва плазминогена, по сравнению с группой контрольных животных, то есть происходило частичное восстановление нарушенных показателей коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолитической активности крови. В то же время не наблюдалось статистически достоверных различий в таких показателях, как протромбиновое время, МНО, тромбиновое время, активность XIII фактора, активность антитромбина III и протеина С, индуцированного стрептокиназой эуглобулинового фибринолиза и концентрации растворимых фибрин-мономерных комплексов по сравнению с контрольными животными.

...

Подобные документы

  • Оценка транскрипционной активности генов синтаз оксида азота в сетчатке крыс разного возраста, оценка возможной связи развития ретинопатии с изменением генерации NO. Изменение генерации оксида азота при старении и развитии связанных с ним заболеваний.

    курсовая работа [980,8 K], добавлен 27.06.2013

  • Медиаторы широкого спектра гомеостатических функций. Применение ингибиторов. Иммунные, острые и хронические воспалительные реакции. Критическое падение давления в условиях геморрагического шока. Патогенетическая роль индукции. Реактивные соединения азота.

    реферат [28,3 K], добавлен 20.03.2009

  • Общая характеристика нарушений функций или строения клеток крови — эритроцитов, лейкоцитов или тромбоцитов, патологических изменений их числа, а также изменений свойств плазмы крови. Виды и проявления анемии, талассемии, диатеза, тромбоцитопатии.

    презентация [5,2 M], добавлен 26.06.2015

  • Общая характеристика физико-химических свойств белков. Основные источники и биологическая роль оксида азота (NO). Особенности переваривания жиров в желудочно-кишечном тракте. Пути выведения холестерина из организма, а также анализ их возможных нарушений.

    курсовая работа [950,7 K], добавлен 11.09.2010

  • Общие функции крови: транспортная, гомеостатическая и регуляторная. Общее количество крови по отношению к массе тела у новорожденных и взрослых людей. Понятие гематокрита; физико-химические свойства крови. Белковые фракции плазмы крови и их значение.

    презентация [3,6 M], добавлен 08.01.2014

  • Рассмотрение изменений количества эритроцитов, тромбоцитов, скорости оседания крови при различных состояниях организма. Изучение изменений крови на примере острой пневмонии. Сравнительный анализ показателей заболеваемости болезнями органов дыхания детей.

    дипломная работа [144,5 K], добавлен 25.07.2015

  • Изучение физико-химических свойств крови, определяющих ее текучесть, способность к обратимой деформации под действием внешних сил. Гемореологические нарушения и венозные тромбозы. Причина "неньютоновского поведения" крови. Основные детерминанты вязкости.

    реферат [29,8 K], добавлен 10.09.2009

  • Физико-химические свойства крови, ее форменные элементы: эритроциты, ретикулоциты, гемоглобин. Лейкоциты или белые кровяные тельца. Тромбоцитарные и плазменные факторы свертывания. Противосвертывающая система крови. Группы крови человека по системе АВ0.

    презентация [279,7 K], добавлен 05.03.2015

  • Использование крови с лечебными целями. Первое переливание крови от человека человеку. Показания к переливанию крови, ее компонентов. Типология групп крови. Диагностика ВИЧ-инфекции. Сравнение количества переливаний крови в г. Находка и других городах.

    курсовая работа [3,4 M], добавлен 26.10.2015

  • Состав плазмы крови, сравнение с составом цитоплазмы. Физиологические регуляторы эритропоэза, виды гемолиза. Функции эритроцитов и эндокринные влияния на эритропоэз. Белки в плазме крови человека. Определение электролитного состава плазмы крови.

    реферат [1,4 M], добавлен 05.06.2010

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.