Спектр психотропного действия новых производных гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот, имеющих сходные ароматические и гетероциклические заместители

Размещено на http://www.allbest.ru

Размещено на http://www.allbest.ru

Введение

Актуальность проблемы обусловлена тенденцией к нарастанию частоты разного рода психических нарушений в условиях современного общества с высоким темпом жизни и обилием стрессовых ситуаций, которые, как известно, могут провоцировать и усугублять течение психических расстройств. Область применения фармакологических средств для коррекции психических функций чрезвычайно широка: помимо собственно психиатрии препараты с психотропной активностью используются специалистами различных отраслей медицины, включены в стандарты терапии многих соматических заболеваний. На российском и зарубежном фармацевтических рынках данный класс лекарственных средств представлен огромным количеством препаратов различных производителей. Тем не менее, даже на современном уровне развития фармакологии и фармацевтической промышленности остается высокой потребность в разработке новых психотропных средств, поскольку многие из имеющихся препаратов обладают недостаточной эффективностью, низкой избирательностью действия и большим количеством побочных эффектов. Поскольку главной научной основой для направленного поиска психотропных средств является представление о том, что эффекты всех препаратов данного класса реализуется за счет взаимодействия с нейромедиаторными системами головного мозга, поиск новых психотропных средств в ряду производных гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот можно считать весьма перспективным, что и послужило основанием к проведению данного исследования.

Цель исследования сравнительное изучение спектра психотропного действия новых производных гамма-аминомасляной (ГАМК), глутаминовой кислот (ГК), имеющих одинаковые заместители по углероду в бета положении и изучение возможных механизмов действия.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Провести скрининг в ряду новых ароматических и гетероциклических производных ГАМК и глутаминовой кислоты соединений, обладающих психотропной активностью.

2. Определить острую токсичность наиболее активных веществ и провести изучение зависимости их психотропного действия от дозы.

3. Изучить нейропротекторное действие наиболее активных веществ на различных экспериментальных моделях судорог, острого и хронического стресса с использованием стандартных психофармакологических тестов, отражающих функциональное состояние ЦНС.

4. Изучить возможный нейрохимический механизм психотропного действия наиболее активных веществ с использованием агонистов и антагонистов основных медиаторных систем.

5. Изучить влияние наиболее активных веществ на обмен моноаминов и нейроактивных аминокислот в структурах мозга.

Научная новизна исследования:

Впервые проведено сравнительное исследование спектра психотропного действия новых производных ГАМК и глутаминовой кислоты и выявлены вещества с высоким антидепрессивным, анксиолитическим, ноотропным эффектом, перспективные для дальнейшего доклинического изучения.

Впервые получены данные о церебропротекторном действии новых производных глутаминовой кислоты при экспериментальном судорожном и стрессорном воздействии.

Впервые определены возможные механизмы нейрохимического действия нового производного глутаминовой кислоты соединения РГПУ-135, оказывающего антидепрессивное, анксиолитическое, активирующее и неропротекторное действие. Изучено его влияние на обмен моноаминов и нейроактивных кислот в структурах мозга.

Научно-практическая ценность работы и реализация результатов исследования.

Тема диссертации является составной частью плана научно-исследовательской работы кафедры фармакологии и биофармации факультета усовершенствования врачей Волгоградского государственного медицинского университета и утверждена на заседании Ученого совета (Протокол №6 от 14 ноября 2007 года).

Полученные результаты исследования нейропсихотропной активности новых производных гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот указывают на перспективность дальнейшего поиска веществ с психотропным действием в ряду структурных аналогов данных нейроактивных аминокислот, имеющих ароматические и гетероциклические заместители.

Выделенное новое производное ГК соединение РГПУ-135 с выраженным антидепрессивным, анксиолитическим, нейропротекторным и активирующим действим является перспекивным для дальнейшего углубленного изучения.

Результаты диссертационного исследования используются в учебном процессе на кафедре фармакологии и биофармации ФУВ и на кафедре фармакологии ВолГМУ Полученные данные используются химиками-синтетиками Российского государственного педагогического университета им. А.М. Герцена для проведения дальнейшего целенаправленного поиска в ряду новых производных ГАМК и ГК новых веществ с психотропным действием, а также в научно-исследовательской работе кафедры фармакологии и биофармации ФУВ ВолГМУ и лаборатории психофармакологии НИИ фармакологии ВолГМУ.

Положения, выносимые на защиту:

1. Новые структурные аналоги ГАМК и ГК, имеющие одинаковые заместители в бета-положении существенно отличаются по спектру психотропного действия.

2. Соединение РГПУ-135 обладает выраженной антидепрессантной активностью, не уступающей действию мелипрамина и значительно превосходящей эффекты коаксила и флуоксетина.

3. Соединения РГПУ-135, РГПУ-160 и РГПУ-202 обладают анксиолитической активностью сопоставимой между собой. РГПУ-135 и РГПУ-202 при сравнении с препаратами позитивного контроля не уступали диазепаму и статистически значимо превосходили афобазол.

4. Соединение РГПУ-135 как при однократном, так и при курсовом лечебно-профилактическом энтеральном введении проявляет выраженную нейропротекторную активность в условиях действия различных экстремальных факторов: хемоиндуцированных генерализованных судорог, острого эмоционально-болевого стресса и хронического, вызванного путем депривации парадоксальной фазы сна.

5. Психотропная активность соединения РГПУ-135 вероятно связана со стимулирующим действием на дофаминергическую и серотонинергическую нейропередачу и, в меньшей мере, стимулирующим влиянием на центральную адренергическую нейропередачу.

Апробация работы.

Материалы диссертации докладывались и обсуждались на следующих научно-практических конференциях: 62-ой, 65-ой юбилейной и 66-ой открытых итоговых конференциях студентов и молодых ученых ВолГМУ, 2004, 2007, 2008 гг.; ХII, XIII Региональных конференциях молодых исследователей Волгоградской области, «Экспериментальные аспекты медицины», ноябрь 2007, ноябрь 2008 г, ; Симпозиуме: Результаты фундаментальных и прикладных исследований для создания новых лекарственных средств, Москва, 9 -11 июня 2008 г.

1. Материалы и методы исследования

Исследование выполнено на 510 крысах-самцах линии Вистар массой 180-220 г и 274 мышах-самцах линии BALB/C массой 20-25 г.

В настоящем исследовании изучена психотропная активность 7 новых производных нейромедиаторных аминокислот - ГАМК и глутаминовой, соединений с лабораторными шифрами: РГПУ-135, РГПУ-136, РГПУ-146, РГПУ-160, РГПУ-202, РГПУ-204 и РГПУ-205, а также фенибут, толибут и баклофен. Все вещества синтезированы на кафедре органической химии Российского государственного педагогического университета им. А.Н. Герцена (Санкт-Петербург, Россия).

Скрининг осуществлен с применением доз, составляющих 1/10 от молекулярной массы (мг/кг): РГПУ-135 - 25,95 мг/кг, РГПУ-136 - 21,8 мг/кг, РГПУ-146- 29,4 мг/кг, РГПУ-160 - 30,8 мг/кг, РГПУ-202 - 27,35 мг/кг, РГПУ-204 - 29,8 мг/кг РГПУ-205 - 31,2 мг/кг. В качестве препаратов позитивного контроля использовались: фенибут и фенотропил -25 мг/кг (синтезированы на кафедре органической химии Российского государственного педагогического университета им. А.Н. Герцена (Санкт-Петербург, Россия)), мелипрамин - 15 мг/кг (Egis Pharmaceuticals, Венгрия), флуоксетин - 20 мг/кг (ЗАО-Здоровье, Россия), коаксил - 12,5 мг/кг (Лаборатория Сервье, Франция), афобазол - 10 мг/кг («Мастерфарм», Россия), диазепам - 1 мг/кг (Simplex pharma Pvt. Ltd.). Исследуемые вещества, препараты сравнения, а также 2% крахмальная слизь контрольным группам животных вводились внутрижелудочно за 45 минут до проведения экспериментов.

Для изучения нейропсихотропной активности соединений использовались следующие психофармакологические тесты: тест «открытое поле» (ОП) (Хаунина Р.А., Лапин И.П. 1976 г., Воронина Т.А. 1982; Гельман В.Я., Кременевская С.И., 1990); тест «приподнятый крестообразный лабиринт» (ПКЛ) (Pellow S. et al., 1985); тест «условная реакция пассивного избегания» (УРПИ) (Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон Д.П., 1991; Воронина Т.А., Островская Р.У., 2000), «тест экстраполяционного избавления» (ТЭИ) (Бондаренко Н.А., 1992.), «вертикальный экран-сетка» (Калуев А.В., 2002; Nagatani T. et al., 1987); «принудительное плавание с грузом» (Суркова В.В., Тюренков И.Н., 1979; Воронина Т.А., Островская Р.У., 2000); «методика конфликтной ситуации» (вариант Vogel) (Воронина Т.А., Середенин С.Б., 2000); «модель пролонгирования снотворного действия барбитуратов» (Воронина Т.А., Неробокова Л.Н., 2000); тест термического раздражения хвоста путем погружения в воду температурой 58оС (Судаков С.К. и др., 1995); тест раздражения лап электрическим током до вокализации (Гузеватых Л.С., Валуйских Д.В., Воронина Т.А., 2005); тест подвешивания мышей за хвост (ПМХ) (Steru L. et al., 1985) и методика принудительного плавания по Порсолту (Porsolt R.D. et al., 1977).

Изучение нейропротекторного действия соединений проводилось с использованием следующих моделей нейропсихопатологии:

- модели хемоиндуцированного эпилептогенеза вызванного введением пикротоксина (5 мг/кг) и коразола (90 мг/кг), (Воронина Т.А., Неробокова Т.Н., 2000).

- модели острого эмоционально-болевого стресса, вызываемого путем подвешивания животных за дорсальную шейную кожную складку длительностью 24 часа (Островский О.В., Дудченко Г.П., 1985);

- модели хронического стресса, вызванного пятикратной 24-х часовой депривацией парадоксальной фазы сна. Животные на 24 часа лишались полноценного сна с перерывом 24 часа, цикл повторяли 5 раз, общая продолжительность стрессирования составила 10 суток. В перерывах между помещениями животных в стрессовые условия, крысы находились в индивидуальных клетках со свободным доступом к воде и пище (Воронина Т.А. и др., 1990; Jouvet et al. 1964).

Стресспротекторное действие соединений оценивалось по влиянию на психоневрологический статус животных и по «стрессорной триаде» - гипертрофии надпочечников, инволюции тимуса и селезенки (в мг/100 гр. веса животного) и степени изъязвления слизистой желудка (по шкале Перцова С.С., 1995). Кроме перечисленных тестов был проведен анализ влияния соединений на резистентность эритроцитов методом кислотного гемолиза.

- противогипоксическое действие веществ изучалось на моделях острой генерализованной гипоксии: нормобарической гипоксии с гиперкапнией и гемической гипоксии, вызванной нитритной интоксикацией (нитрит натрия 250 мг/кг подкожно) (Воронина Т.А., Островская Р.У., 2000);

Нейрофармакологический анализ возможных механизмов действия соединения РГПУ-135 проведен в соответствии с требованиями "Руководства по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ" - Фармакологический государственный комитет, МЗ РФ, Москва, 2005".

Нейрохимический анализ влияния вещества РГПУ-135 на содержание моноаминов и их метаболитов определялось методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с электрохимической детекцией (ВЭЖХ/ЭД) на хроматографе LC-304T (BAS, West Lafayette, США) с инжектором Rheodyne 7125 c петлёй на 20 мкл для нанесения образцов (И.И.Мирошниченко, 1988).

Статистическая обработка результатов исследования проводилась с использованием непараметрического U-критерия Манна-Уитни, рангового однофакторного анализа Крускала-Уоллиса, критерия Дана для множественных сравнений, двухфакторного дисперсионного анализа с повторениями, теста Тьюки, критерия Хи-квадрат, пробит-анализ выживаемости. Обработка данных производилась с помощью пакетов программ Microsoft Excel XP, STATISTICA 6.0, BioStat 2008 Professional 5.1.3.1. Статистически значимыми расценивались эффекты при p<0,05.

2. Результаты и их обсуждение

Данные о направленности и выраженности психотропного действия новых производных ГАМК и ГК в суммированном виде представлены в таблице 1 и на рисунке 1, они свидетельствуют о различных спектрах психотропного действия исследуемых веществ.

Таблица 1. Анализ результатов скринингового изучения нейропсихотропных свойств новых производных ГАМК и ГК

Обозначения: + - изменения показателя не имеют статистической значимости.

++ - изменение показателя статистически значимое, р<0,05.

+++ - изменение показателя статистически значимое, р<0,01.

- - изменение показателя отсутствуют.

(^) - увеличение показателя.

(v) - уменьшение показателя.

Ноотр - ноотропные свойства; Анкс - анксиолитические свойства; Актив - психостимулирующие свойства; Седат - седативные свойства; Актив физ раб - стимулирует физическую работоспособность; Сниж физ раб- снижает физическую работоспособность; Миорел -миорелаксирующее действие; АДД - антидепрессивное действие.

Рисунок 1. Сравнительный спектр психотропного действия производных ГАМК и глутаминовой кислоты, имеющих фенильный (а), толильный (б) и парахлорфенильный (в) радикалы в бета положении

Таким образом, из представленных данных наибольший интерес представляют соединения РГПУ-135 и РГПУ-202, являющиеся новыми производными глутаминовой кислоты. Первое оказывает психоактивирующее действие с преимущественно локомоторным компонентом, поскольку статистически значимо увеличивает количество пересеченных квадратов в тесте ОП и количество переходов между рукавами в тесте ПКЛ. Соединение РГПУ-135 уменьшало продолжительность иммобилизации и увеличивало количество прыжков у животных в тесте ТЭИ, статистически значимо снижало латентный период иммобилизации в тесте ПМХ и тесте неизбегаемого принудительного плавания по Порсольту. Помимо этого в последнем тесте указанное вещество статистически значимо уменьшало длительность иммобилизации и увеличивало количество прыжков и продолжительность активного плавания, что можно трактовать, как антидепрессивное действие. Указанное вещество обладает анксиолитическими свойствами, поскольку достоверно снижало латентный период первого наказуемого взятия воды из поилки и повышало количество наказуемых попыток утолить жажду в тесте конфликтной ситуации по Вогель и увеличивало количество выходов в открытые рукава ПКЛ и количество заходов в центр ОП.

Второе соединение РГПУ-202 обладает анксиоседативными свойствами, поскольку статистически значимо снижало двигательную и ориентировочно-исследовательскую активность, а также число актов кратковременного груминга у крыс в тесте ОП, при этом достоверно увеличивало продолжительность пребывания животных в открытых рукавах ПКЛ, снижало латентный период первого наказуемого взятия воды из поилки и повышало количество наказуемых попыток утолить жажду в тесте конфликтной ситуации по Вогель. Кроме того, указанное соединение проявляет ноотропные свойства, что выражалось в статистически значимом увеличении латентного периода первого захода в тёмный отсек и уменьшении количества животных в группе, зашедших в него при воспроизведении навыка на 7 и 14 сутки после обучения в тесте УРПИ, а также проявляет антидепрессивные свойства, так как статистически значимо уменьшало продолжительность иммобилизации у животных в тесте ТЭИ, увеличивало латентный период иммобилизации, количество прыжков и снижало длительность иммобилизации животных в тесте принудительного плавания по Порсольту.

Изучение острой токсичности.

При энтеральном пути введения соединений РГПУ-135 и РГПУ-202 не выявлено случаев острой (суточной) и отдаленной (в течение 7 дней) летальности в дозах до 3000 мг/кг включительно. Дальнейшее увеличение испытуемой дозы не представлялось возможным, из-за плохой растворимости веществ в воде и согласно существующим нормативным требованиям по ограничению объема жидкости, вводимого в желудок.

ЛД50 веществ РГПУ-135 и РГПУ-202 при внутрибрюшинном введении составил 802,4892,64 и 760 81 мг/кг соответственно. Разница ЛД50 при двух путях введения, вероятно, обусловлена медленным или неполным всасыванием веществ при энтеральном введении.

По результатам проведенных исследований можно заключить, что вещества РГПУ-135 и РГПУ-202 относятся к классу малотоксичных (Саноцкий И.В., Уланова И.П.,1975).

Изучение зависимости доза-эффект соединения РГПУ-135 проводилось в дозах 13, 26, 52 и 80 мг/кг, а вещества РГПУ-202 в дозах 13,27,54 и 75 мг/кг с использованием стандартных психофармакологических тестов: ОП, ПКЛ, тест конфликтной ситуации в модификации Вогель и тест принудительного плавания по Порсольту, в которых указанные вещества проявили наиболее выраженную активность.

У соединения РГПУ-135 во всех дозах отмечалось однонаправленное действие (рис. 2, 3, 4, 5), но с различной степенью выраженности (психостимулирующее, анксиолитическое и антидепрессивное), при этом в низкой дозе (13 мг/кг) преобладало активирующее и антидепрессивное действие, в средних (26 и 52 мг/кг) психоактивирующий эффект становился умеренным, антидепрессивное действие сохранялось, добавлялись анксиолитические свойства, выраженность последних 2-х эффектов уменьшалась по мере дальнейшего увеличения дозы. В высокой дозе оставался лишь психоактивирующий эффект.

Таким образом, изучение зависимости доза-эффект для вещества РГПУ-135 показало, что наиболее перспективной для дальнейшего изучения является доза 26 мг/кг, в которой вещество обладает наиболее оригинальным спектром фармакологической активности: сочетание выраженного антидепрессивного действия, анксиолитической активности и умеренного активирующего эффекта.

Рисунок 2. Влияние РГПУ-135 и РГПУ-202 в различных дозах на спонтанное поведение животных в тесте «открытое поле»

Обозначения:* - p<0,05 - достоверность различий по сравнению с контрольной группой животных (ранговый однофакторный анализ Крускала-Уоллиса, критерий Дана для множественных сравнений).

а) число пересеченных квадратов

б) ОИА - сумма стоек и заглядываний в отверстия

В скобках указаны дозы для РГПУ-202

Рисунок 3. Влияние РГПУ-135 и РГПУ-202 в различных дозах на эмоциогенное поведение животных в тесте «приподнятого крестообразного лабиринта»

Обозначения: как на рис. 2.

Рисунок 4. Влияние РГПУ-135 и РГПУ-202 в различных дозах на психоэмоциональный статус животных в тесте «конфликтной ситуации по Vogel».

Обозначения: как на рис. 1.

Рисунок 5. Влияние РГПУ-135 и РГПУ-202 в различных дозах на выраженность поведенческой депрессии у животных в тесте «неизбегаемого, принудительного плавания по Порсольту»

Обозначения: как на рис. 2.

У соединения РГПУ-202 (рис. 2, 3, 4, 5) средних дозах (27 и 54 мг/кг) отмечалось анксиоседативное действие, а в высокой дозе (75 мг/кг) к анксиолитическому добавлялось. Во всех дозах отмечались антидепрессивные свойства.

Таким образом, у производного ГК с фенильным заместителем (РГПУ-135) преобладало антидепрессивное и психостимулирующее действие, а у производного с толильным радикалом (РГПУ-202) - анксиолитическое и антидепрессивное.

Оба вещества оказывали наиболее выраженное психотропное действие в дозе 1/30 от ЛД50.

Сравнительное изучение психотропного действия соединений РГПУ-135, РГПУ-202 и препаратов позитивного контроля.

При 14-дневном введении вещества РГПУ-135, РГПУ-202 и препаратов позитивного контроля, у первого соединения отмечалось выраженное антидепрессивное действие, не уступающее мелипрамину, и значительно превосходящее эффекты коаксила и флуоксетина; по анксиолитической активности оно превосходило коаксил и афобазол, а по активирующему действию было сопоставимо с мелипрамином (рис. 6,7).

Рисунок 6. Влияние курсового введения новых производных ГК и препаратов позитивного контроля на на эмоциогенное поведение животных в тесте конфликтной ситуации по Vogel

Обозначения:* - p<0,05, ** - p<0,01 - достоверность различий по сравнению с контрольной группой животных (ранговый однофакторный анализ Крускала-Уоллиса, критерий Дана для множественных сравнений, непараметрический U- критерий Мана-Уитни).

Рисунок 7. Влияние курсового введения новых производных ГК и препаратов позитивного контроля на выраженность поведенческой депрессии у животных в тесте неизбегаемого принудительного плавания по Порсольту

Второе вещество - РГПУ-202 обладало выраженной анксиолитической активностью, которая сопоставима с активностью диазепама и превосходит активность афобазола; оказывало седативное действие, менее выраженное, чем у диазепама, а также проявляло антидепрессивные свойства, сопоставимые по выраженности с аналогичным эффектом коаксила и флуоксетина. (рис 6, 7).

Нейропротекция является важной составляющей фармакологического действия многих психотропных препаратов. Нами изучено нейропротекторное действие новых производных глутаминовой кислот на модели хемоиндуцированного судорожного повреждения мозга и при остром и хроническом стрессорном воздействии.

Не оказывая противосудорожного действия, соединение РГПУ-135 выражено предотвращало постсудорожные изменения спонтанного поведения и мнестических функций у животных, что проявлялось в статистически значимом увеличении двигательной активности и ориентировочно-исследовательской активности у животных, подвергавшихся генерализованным судорогам и снижение количества животных с амнезией рефлекса пассивного избегания (УРПИ). РГПУ-202 не оказывал достоверного влияния на показатели поведения животных в тестах ОП и УРПИ. Таким образом, представленные данные позволяют считать, что соединение РГПУ-135 проявляет нейропротекторное действие при судорожном повреждении мозга (табл. 2).

нейропротекция глутаминовый психотропный

Таблица 2. Влияние исследуемых соединений на постсудорожные изменения поведения и мнестических функций

Обозначения: ДА в ОП - двигательная активность в тесте «открытое поле» ОИА в ОП - ориентировочно-исследовательская активность в тесте «открытое поле» амнезия в УРПИ - количество животных, посетивших темный отсек в тесте УРПИ # - p<0,05 - достоверность различий по сравнению с группой контроль-интакт (ранговый однофакторный анализ Крускала-Уоллиса, критерий Дана для множественных сравнений, непараметрический U- критерий Мана-Уитни). * - p<0,05 - достоверность различий по сравнению с группой контроль-судороги (то же).

При моделировании острого и хронического стресса соединение РГПУ-135 оказывает выраженное нейропротективное действие сопоставимое по выраженности с фенибутом и несколько уступающее фенотропилу, которое проявлялось в уменьшении выраженности постстрессорных психоневрологических и морфосоматических нарушений: улучшении когнитивных функций в тестах УРПИ и ТЭИ; увеличении скорости ориентировочных реакций и устранении тревожности в ПКЛ; препятствии инволюции лимфоидных органов - тимуса и селезенки в сравнении с животными контрольной группы. Помимо перечисленного РГПУ-135 способствовало стабилизации мембран эритроцитов в условиях стресс-обусловленной активации ПОЛ, что может являться одним из механизмов его нейропротективного действия в условиях острого эмоционально-болевого стресса (табл.3).

Таблица 3. Влияние соединений на когнитивные и мнестические функции стрессированных животных в тестах УРПИ и ТЭИ

Обозначения: % - % животных посетивших темный отсек УРПИ, не решивших экстраполяционную задачу.

* - p<0,05 - достоверность различий по сравнению с контрольной группой животных (ранговый однофакторный анализ Крускала-Уоллиса, критерий Дана для множественных сравнений, критерий Хи-квадрат).

Соединение РГПУ-202 противодействовало растормаживающему влиянию острого стресса на двигательную и ориентировочно-исследовательскую активность, гипертрофии надпочечников при хроническом стрессе, на остальные стрессиндуцированные нарушения показателей психоневрологического и морфосоматического статуса соединение не влияло. По полученным данным можно сделать заключение, что РГПУ-202 осуществляет пассивное нейропротекторное действие только в условиях острого стресса.

На модели гемической гипоксии вещество РГПУ-135 проявляло умеренные противогипоксические свойства.

Исходя из изложенного нами для дальнейшего углубленного изучения было выбрано соединение РГПУ-135, с которым был выполнен анализ возможных нейрохимических механизмов психотропного действия с использованием нейрофармакологических и нейрохимических методов. Данное вещество, вероятно, оказывает стимулирующее действие на дофаминергическую систему, поскольку проявляло синергическое взаимодействие с апоморфином (агонистом дофаминовых рецепторов), снижая латентный период (ЛП) стереотипных движений, увеличивая интенсивность стереотипии и достоверно снижая выраженность каталепсии, вызванной галоперидолом (блокатором дофаминовых рецепторов). Стимулирующее действие на серотонинергическую нейропередачу, проявлялось в достоверном увеличении интенсивности гиперкинеза, вызванного введением 5-окситриптофана (предшественником серотонина). Совокупность стимулирующего действия на дофаминергическую и серотонинергическую нейропередачу и стимулирует центральную адренергическую нейропередачу, что проявлялось в статистически значимом усилении гипотермического эффекта клофелина (агониста центральных пресинаптических б-адренорецепторов).

Выявлено отчетливое влияние РГПУ-135 на обмен дофамина во фронтальной коре и гиппокампе головного мозга крыс, т.е. в структурах, задействованных в формировании эмоционального поведения. Кроме того, данное вещество статистически значимо изменяет обмен дофамина, главным образом в стриатуме (табл. 4, 5).

Таблица 4. Эффекты соединений РГПУ-135 на содержание моноаминов и их метаболитов в структурах мозга крыс (% к контролю)

Таблица 5. Влияние соединения РГПУ-135 на содержание нейротрансмиттерных аминокислот во фронтальной коре крыс (% к контролю)

Обозначения: НА-норадреналин, ДА-дофамин, ДОФУК-3,4- диоксифенилуксусной кислоты, ГВК-гомованилиновая кислота,5-ОИУК-5-оксииндолуксусная кислота.

Аsp-аспартат, Glu-глутамат, Gly-глицин, Tau-таурин, GABA-ГАМК.

Заключение

ВЫВОДЫ.

1. Новые производные ГАМК и ГК, имеющие в бета-положении ароматические и гетероциклические заместители имеют различный спектр психотропного действия: антидепрессивное (соединения РГПУ-135, РГПУ-146, РГПУ-202), анксиолитическое (соединения РГПУ-135, РГПУ-160 и РГПУ-202), активирующее (соединение РГПУ-135), седативное (соединение РГПУ-202), ноотропное (РГПУ-160, РГПУ-202) действие, а также повышают физическую работоспособность (РГПУ-136) у животных.

2. Соединения РГПУ-135 и, в меньшей мере, РГПУ-202 и РГПУ-146 оказывают выраженное антидепрессивное действие. Соединение РГПУ-135 статистически значимо превосходит по активности коаксил и флуоксетин и не уступает мелипрамину. Соединение РГПУ-202 проявляет антидепрессивные свойства, сопоставимые по выраженности с аналогичным эффектом коаксила и флуоксетина, но уступает мелипрамину и соединению РГПУ-135.

3. Соединения РГПУ-202, РГПУ-135 и РГПУ-160 оказывают анксиолитическое действие, не уступающее по выраженности действия диазепаму и превосходящее эффект афобазола.

4. В условиях острого эмоционально-болевого стресса и хронического, вызванного путем депривации парадоксальной фазы сна, а также генерализованного судорожного воздействия, соединение РГПУ-135 как при однократном профилактическом, так и при курсовом лечебно-профилактическом пероральном введении проявляет выраженную нейропротекторную активность, уменьшая выраженность психоневрологических нарушений. По выраженности нейропротекторного эффекта соединение РГПУ-135 сопоставим с препаратом сравнения фенибутом и несколько уступает фенотропилу.

5. Новое производное глутаминовой кислоты с лабораторным шифром РГПУ-135 по данным нейрохимического и нейрофармакологического анализа оказывает стимулирующее влияние на дофамин- и серотонинергическую нейропередачу, что вероятно объясняет наличие у него антидепрессантной и анксиолитической активности; усиливает адренергическую нейротрансмиссию, что может объяснять наличие у него активирующего эффекта.

6. Соединение РГПУ-135, оказывающее антидепрессивное, анксиолитическое, психоактивирующее и нейропротекторное действие относится к классу малотоксичных веществ, т.е. имеет большую терапевтическую широту и является перспективным для дальнейшего углубленного доклинического изучения.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

1. Полученные данные указывают на перспективность дальнейшей разработки соединения РГПУ-135 в качестве антидепрессанта с выраженной анксиолитической и нейропротекторной активностью, а также активирующим действием.

2. Полученные данные могут являться полезными для химиков, осуществляющих целенаправленный синтез веществ с определенным спектром психотропной и нейротропной активности.

Литература

1. Епишина В.В., Багметов М.Н., Бородкина Л.Е., Воронков А.В., Воловик О.В. Изучение влияния новых производных ГАМК на когнитивные функции и двигательную активность животных в условиях острого стресса. // Актуальные проблемы эксперим. и клин. медицины: материалы 62-ой открытой итоговой конференции студентов и молодых ученых / ВолГМУ - Волгоград, 2004. - С. 97-98.

2. Меркушенкова О.В., Епишина В.В. Экспериментальное изучение психотропных свойств новых производных глутаминовой кислоты - соединений РГПУ-135 и РГПУ-202 // Актуальные проблемы эксперим. и клин. медицины: материалы 65-ой юбилейной открытой научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием / ВолГМУ. - Волгоград, 2007. - С. 150-151.

3. Епишина В.В., Меркушенкова О.В. Сравнительное экспериментальное изучение психотропных свойств новых производных глютаминовой кислоты - соединений РГПУ-135 и РГПУ-202 // Бюллетень Волгоградского Научного Центра РАМН и Администрации Волгоградской области - Волгоград, 2007. - №2. - С.11-13.

4. Меркушенкова О.В., Епишина В.В., Тюренков И.Н., Остроглядов Е.С. Изучение влияния новых производных глутаминовой кислоты на сон у животных, вызванный введением тиопентала натрия. // Матер. науч. межд. конф. «Фундаментальные и прикладные исследования в медицине», Китай (Пекин). - / Фундаментальные исследования. - 2007. - №12. - С.523-524.

5. Меркушенкова О.В., Епишина В.В., Тюренков И.Н. Изучение влияния нового гетероциклического производного ГАМК на физическую работоспособность, мышечный тонус и координацию движений у животных. // Матер. науч. межд. конф. «Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии», Объединенные Арабские Эмираты (Дубаи). - / Фундаментальные исследования. - 2007. - №12 (часть 2). - С.290-291.

6. Меркушенкова О.В., Епишина В.В.. Изучение ноотропной активности нового производного глутаминовой кислоты. // ХII Регион. конф. молодых исследователей Волгоградской области, направление «Актуальные проблемы экспериментальной медицины»: Тезисы докладов / Волгоградский государственный медицинский университет. Изд-во ВолГМУ: Волгоград, 2008. - С. 26-27.

7. Меркушенкова О.В., Епишина В.В. Экспериментальное сравнение анксиолитической активности нового производного ГАМК соединения РГПУ-160 и диазепама. // Материалы межрегиональной научно-практической конф. студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежь и наука: итоги и перспективы»- Изд-во СГМУ. - Саратов, 2007. - С.97-98.

8. Тюренков И.Н., Меркушенкова О.В., Епишина В.В., Берестовицкая В.М., Васильева О.С. Анксиолитические свойства нового производного глутаминовой кислоты // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. трудов. - Пятигорск, 2008. - Вып.63. С.506-508.

9. Меркушенкова О.В., Епишина В.В., Тюренков И.Н. Изучение анксиолитических свойств нового соединения РГПУ-206 // Человек и лекарство: тезисы докладов XV Российского нац. конгресса, - Москва, 2008. - С.666-667.

10. Меркушенкова О.В., Епишина В.В. Влияние нового производного глутаминовой кислоты на эмоциональный статус животных. // Актуальные проблемы эксперим. и клин. медицины: материалы 66-ой открытой научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием /Изд-во ВолГМУ. - Волгоград, 2008. - С. 159-160.

11. Тюренков И.Н., Епишина В.В., Багметов М.Н., Меркушенкова О.В., Берестовицкая В.М., Васильева О.С. Изучение фармакологических свойств нового вещества с антидепрессантным и психостимулирующим действием // Результаты фундаментальных и прикладных исследований для создания новых лекарственных средств. Материалы симпозиума. Москва, 9-11 июня 2008 г. - М.: Фирма «Слово», 2008. - С.210-211

12. Тюренков И.Н., Меркушенкова О.В., Багметова В.В. Психофармакологические свойства новых производных ГАМК с гетероциклическим заместителем в в-положении // Вестник ВолГМУ - 2008, №4, с.83-86.

Размещено на Allbest.ru